Submitted by FABIANA DA SILVA FRANÇA (fabiana21franca@gmail.com) on 2017-11-09T15:00:32Z No. of bitstreams: 2 arquivototal.pdf: 1702586 bytes, checksum: 5715389a3db42245325c62c222830c1c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-09T15:00:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivototal.pdf: 1702586 bytes, checksum: 5715389a3db42245325c62c222830c1c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-11-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Cancer is one of the biggest public health problems in the world, being the second cause of death worldwide. The search for new compounds that selectively promote cancer cells death is becoming a constant, as a strategy in the treatment of the disease. Lectins are a class of glycoproteins that recognize and bind specifically to carbohydrate clusters expressed on the plasma membrane. Carbon nanotubes have been gaining considerable attention because they are promising nanocarriers, enabling the conjugation of several molecules on their surface, improving drug delivery and specific cell recognition. In the present work, the cytotoxic activity of Concanavalin A and CFL lectins on chronic monocytic (K562) and acute monocytic (THP-1) promyelocytic leukemia cells was investigated. To evaluate cell viabillity, the MTT salt reduction was used, which show the metabolic ability of the cell to convert that salt to crystals. It was observed that lectins reduces the viability of the two tested cells lines. However, this cytotoxic effect was observed only after 72 hours of treatment. The lectins were also cytotoxic to non-cancerous HUVEC endothelial cells, but this response may have been due to the fact that these cells have several glycoconjugates expressed in their membrane. Using the trypam blue dye, which marks only cells with broken membranes, then unviable cells, it was also observed that the lectin-nanotube conjugate had no significant activity compare to that demonstrated by the lectin alone, suggesting that the nanotubes do not seem to improve the effect of the lectins. Investigating which way of death these lectins were activating by flow cytometer assays, it was observed that the cells demonstrate positive labeling for propidium iodide, indicating that the treatment of 72 hours caused damage to the cell membrane. However, using the tetramethylrhodamine methyl ester probe, it was seen that treatment with the lectins caused mitochondrial depolarization on K562 and THP-1 cells, a factor related to apoptosis. In addition, CFL lectin caused cell cycle arrest of THP-1 cells, promoting accumulation of cells in the G0/G1 phase. Thus, it was concluded that Concanavalin A and CFL lectins demonstrate a cytotoxic effect on leukemic cells, possibly through the induction of cell death by apoptosis in cells, due to the depolarization of the mitochondrial membrane, possibly blocking the expression of cyclins and CDKs, promoting cell cycle arrest in THP-1 cells. In K562, treatment with CFL for 72 hours may be activating some extrinsic pathway of apoptosis by membrane receptor, leading to depolarization of the mitochondria and consequently releasing apoptogenic factors, but without promoting cell cycle arrest. In this way, the lectins studied demonstrate an interesting antileukemic potential. / O câncer representa um dos maiores problemas de saúde pública mundial, sendo a segunda causa de morte em todo o mundo. A busca por novos compostos que promovam a morte seletiva de células cancerígenas vem se tornando constante, como uma estratégia no tratamento da doença. As lectinas constituem uma classe de glicoproteínas que reconhecem e se ligam especificamente à grupamentos de carboidratos expressos na membrana plasmática. Os nanotubos de carbono vêm ganhando bastante atenção por serem nanocarreadores promissores, possibilitando a conjugação de diversas moléculas em sua superfície e aumentando a eficácia no transporte e a especificidade no reconhecimento celular. No presente trabalho, foi investigada a atividade citotóxica das lectinas Concanavalina A e CFL sobre linhagens de células de leucemia promielocítica crônica (K562) e monocítica aguda (THP-1). Para avaliar a viabilidade celular, foi utilizando o ensaio de redução do sal de MTT, o qual avalia a capacidade metabólica da célula converter esse sal em cristais, foi observado um efeito citotóxico das lectinas nas duas linhagens testadas. Entretanto, só foi observada diminuição da viabilidade apenas após 72 horas de tratamento com as lectinas. As lectinas também foram citotóxicos às células endoteliais HUVEC, não cancerígenas, porém essa resposta pode ter se dado pelo fato de essas células apresentarem diversos glicoconjugados na sua membrana. Foi também observado, por meio do teste de incorporação do corante azul de tripam, o qual marca apenas em células com membrana rompida, que o conjugado lectina-nanotubo não apresentou atividade diferente da demonstrada pela lectina sozinha frente as linhagens celulares, sugerindo que os nanotubos parecem não melhorar o efeito das lectinas estudadas. Investigando qual a via de morte ativada pelas lectinas por meio de ensaios de citometia de fluxo, foi observado que as células marcaram positivamente para o iodeto de propídeo, indicando que o tratamento de 72 horas causou danos à membrana celular. Entretanto, utilizando a sonda tetrametilrodamina metil-éster, foi visto que o tratamento com as lectinas causou a despolarização da membrana mitocondrial das células K562 e THP-1, fator relacionado à apoptose. Além disso, a lectina CFL causou a parada do ciclo celular de células THP-1, promovendo um acúmulo de células na fase G0/G1. Dessa forma, concluiu-se que as lectinas Concanavalina A e CFL demonstram efeito citotóxico às células leucêmicas, possivelmente pela indução da morte celular por apoptose nas células, devido a despolarização da membrana mitocondrial, possivelmente bloqueando a expressão de ciclinas e CDKs, promovendo parada no ciclo celular de células THP-1. Já em células K562, o tratamento com a CFL por 72 horas pode estar ativando alguma via extrínseca de apoptose por receptor de membrana, levando a despolarização da mitocôndria e consequentemente liberando fatores apoptogênicos, mas sem promover parada no ciclo celular. Desta forma, as lectinas estudadas demonstram um interessante potencial antileucêmico.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:10:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AlineMGCO_DISSERT.pdf: 3644884 bytes, checksum: e2e3e578d2fb797531853d76567fdc2b (MD5) Previous issue date: 2011-03-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Resistance of Plasmodium falciparum to the usual antimalarials, as well as their adverse effects and high cost, has led to the search of new drugs against malaria. Several of these have been developed from medicinal plants based on ethnopharmacology, including the most widely used antimalarials today: quinine and artemisinin. In the present study schizonticide activity of extracts and fractions of a number of medicinal plants from the Caatinga and Amazon biomes were assessed based on ethnopharmacological and chemosystematic information. These included Ximenia americana, Maytenus rigida, Sideroxylon obtusifolium, Stryphnodendro coriaceum, Bowdichia virgiliodes, Schinopis brasiliensis and Picrolemma sprucei, the last, an Amazon species. Antimalarial tests of blood schizonticides were conducted in Swiss mice infected with P. berghei and in vitro against P. falciparum. In vitro cytotoxicity studies were carried out using HeLa, CHO, 3T3, Raw and HEPG2 cell lines. Except for X. americana, all species exhibited in vivo or in vitro antimalarial activity, inhibiting parasitic growth by up to 79%. Extracts exhibited moderate toxicity with dosedependent kinetics. In this sense, ethnopharmacological and chemosystematic approaches were shown to be useful and promising tools in the search of new drugs. These findings represent a significant contribution to scientific knowledge of the antimalarial potential of Brazilian flora, thereby opening perspectives for the development of new antimalarials / A resist?ncia do Plasmodium falciparum aos antimal?ricos usuais, bem como os seus efeitos adversos e custo elevado, tornam necess?ria a busca de novos medicamentos contra a mal?ria. Diversos f?rmacos foram descobertos a partir de plantas medicinais com base na etnofarmacologia, inclusive os antimal?ricos mais usados atualmente; quinina e artemisinina. Neste trabalho foi avaliada a atividade esquizonticida de extratos e fra??es de algumas plantas medicinais dos Biomas da Caatinga e Amaz?nico a partir de um referencial etnofarmacol?gico e de quimiossistem?tica. S?o elas: Ximenia americana, Maytenus rigida, Sideroxylon obtusifolium, Stryphnodendro coriaceum, Bowdichia virgiliodes, Schinopis brasiliensis e Picrolemma sprucei, sendo esta ?ltima, uma esp?cie amaz?nica. Os testes antimal?ricos de esquizonticidas sangu?neos foram feitos em camundongos Swiss infectados com P. berghei e in vitro contra o P. falciparum. Estudos de citotoxicidade in vitro foram realizados utilizando as linhagens celulares HeLa, CHO, 3T3, Raw e HEPG2. A excess?o da X. americana, todas as esp?cies apresentaram atividade antimal?rica in vivo ou in vitro, inibindo o crescimento do parasito em at? 79%. Os extratos exibiram toxicidade moderada com cin?tica de atividade dose-dependente. Nesse contexto, a abordagem etnofarmacol?gica associada ao perfil quimiossistem?tico, se mostram ferramentas ?teis e promissoras na busca de novos f?rmacos, permitindo contribuir significativamente para o conhecimento cient?fico do potencial antimal?rico da flora brasileira e deste modo, abrir perspectivas para o desenvolvimento de novos antimal?ricos

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-04-14Bitstream added on 2014-06-13T20:19:00Z : No. of bitstreams: 1 gomes_jpm_me_arafcf.pdf: 701791 bytes, checksum: cd29e183b510cd091b271dae4deccba3 (MD5) / O presente trabalho avaliou a citotoxicidade in vitro de produtos naturais (terpenos, iridóides e derivados fenólicos) em linhagens celulares de adenocarcinoma murino de mama (LM3) e de pulmão (LP07), buscando uma possível correlação entre estrutura molecular e atividade antitumoral. A ordem de citotoxicidade na linhagem LM3 foi tingenona> pristimerina> plumericina> cromeno> paclitaxel> escandenina> acetato de bauerenila> ácido p-cumárico> ácido clorogênico. Na linhagem LP07, a exceção é a inversão de posição entre os ácidos clorogênico e p-cumárico e escandenina e paclitaxel. Pristimerina, tingenona, plumericina e o cromeno foram mais ativos que o controle positivo, taxol. Os nor-triterpenos pentacíclicos quinonametídeos tingenona (IC50=0,002 μmol/mL em LP07 e 0,003 μmol/mL em LM3) e pristimerina (IC50=0,005 μmol/mL em LP07 e LM3) apresentaram a maior citotoxicidade nas linhagens tumorais. A avaliação da relação estrutura e atividade indicaram os anéis A e B essenciais para o efeito citotóxico, devido à cetona ,ß-insaturada. A interação de pristimerina e tingenona com N-acetilcisteína foi confirmada por métodos espectrofotométricos e biológicos, constituindo um provável mecanismo de ação das substâncias. A atividade mutagênica das moléculas mais promissoras, pristimerina, tingenona e plumericina foi avaliada in vitro na presença e ausência de ativação metabólica (S9) e não demonstraram mutagenicidade (RM<2). / This study evaluates the in vitro cytotoxicity of natural products such as terpenes, iridoids, and phenolic derivatives in the cell lines of adenocarcinoma murine of the breast (LM3) and lung (LP07). The study attempted to identify possible correlations between the molecular structure of these natural products and anticancer activity. The sequence for cytotoxic activity in the LM3 line was tingenone> pristimerin> plumericine> cromene> paclitaxel> scandenin> bauerenyl acetate> p-coumaric acid> chlorogenic acid. This sequence was similar to the LP07 cell line, however the exception was the inverse order between clorogenic and p-coumaric acid and between scandenine and taxol. Pristimerine, tingenone, plumericine and cromene were more potent than taxol, the positive control substance in this study in all cell lines. The quinone-methide triterpene tingenone (IC50=0,002 μmol/mL in LP07 and 0,003 μmol/mL in LM3) and pristimerin (IC50=0,005 μmol/mL in LP07 and LM3) showed the largest level of cytotoxicity in the cell lines. The structure-activity relationship suggests that rings A and B containing an , ßunsaturated carbonyl group are essential for the observed cytotoxic activity. The interaction between pristimerin and tingenone with N-acetilcysteine was proved by byological and spectrophotometric methods, estabilishing a likely action mechanism to these compounds. The in vitro mutagenic activity was evaluated for the most promising compounds: pristimerine, tingenone and plumericine, and they did not show mutagenic potential (RM<2).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-04-17Bitstream added on 2014-06-13T19:38:21Z : No. of bitstreams: 1 chaves_cal_me_arafo.pdf: 1976512 bytes, checksum: 337945ed5713a7c6624f79a6e9161818 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito citotóxico dos monômeros isobutil metacrilato (IBMA) e 1,6 – Hexanediol dimetacrilato (1,6 – HDMA), do plastificante di-n-butil ftalato (DBP), e dos produtos de degradação ácido metacrílico (AM) e ácido benzóico (AB) sobre células L929. Esses compostos foram testados em faixas de concentrações liberadas, em um período de 30 dias, por materiais reembasadores rígidos, previamente quantificadas em estudos anteriores. O efeito citotóxico foi verificado por meio dos testes de MTT e 3H-timidina, após as células terem sido expostas às substâncias testadas nas concentrações estabelecidas. A classificação da citotoxicidade foi baseada na viabilidade celular em relação ao controle (células expostas ao meio sem as substâncias testadas). A atividade de síntese de DNA foi inibida por todos os compostos. Os resultados do presente estudo demonstraram que o teste de 3H-timidina foi mais sensível que o teste de MTT e que os compostos avaliados mostraram diferentes níveis de citotoxicidade in vitro. A atividade da desidrogenase mitocondrial diminuiu nas células tratadas com os monômeros, o plastificante e o produto de degradação AM; porém, para o AB, a maioria das concentrações testadas não apresentou efeito citotóxico. / The aim of this study was to evaluate the cytotoxic effect of the monomers 1,6 – hexanediol dimethacrylate (1,6 - HDMA) and isobutyl methacrylate (IBMA), the plasticizer di-n-butyl phthalate (DBP), and the degradation by-products methacrylic acid (MA) and benzoic acid (BA) on L929 cells. These compounds were tested in the range of concentrations released in 30 days from hard chairside reline resins that were quantified in previous investigations. Cytotoxic effects were assessed by using MTT and 3H - thymidine assays after the cells had been exposed to the test compounds at the given concentrations. Cytotoxicity was rated based on cell viability relative to controls (cells exposed to medium without test substances). The results presented in this study demonstrated that the 3H-thymidine assay was more sensitive than the MTT assay, and all compounds tested showed varying degrees of cytotoxic effect in vitro. DNA synthesis activity was inhibited by all compounds. Mitochondrial dehydrogenase activity decreased in cells treated with monomers, plasticizer and MA by-product, whereas no cytotoxic effect was observed on contact with BA at the majority of concentrations tested.

Orientador: Beatriz Maria Machado de Medeiros / Banca: Alexandrina Sartori / Banca: Cleni Mara Marchocchi Machado / Banca: Leonilda Maria Barbosa dos Santos / Banca: Phileno Pinge Filho / Resumo: As três espécies patogênicas do gênero Yersinia, Y. pestis, Y. enterocolitica e Y. pseudotuberculosis, compartilham um tropismo pelos tecidos linfóides e um plasmídeo de 70-kb que é essencial para a virulência. O plasmídeo codifica um sistema de secreção do tipo III e proteínas efetoras chamadas Yops (Yersinia outer proteins). Este sistema de secreção é responsável por translocar as Yops para dentro das células do hospedeiro, onde elas interagem com alvos específicos e alteram as funções destas células. As Yops são capazes de modular a resposta imune do hospedeiro, permitindo à bactéria se replicar extracelularmente nos tecidos e órgãos linfóides. Embora haja muita informação sobre os mecanismos usados pela Yersinia para evadir do sistema imune inato de defesa, pouco se sabe sobre como ela afeta a resposta imune adaptativa in vivo. O objetivo deste trabalho foi analisar a influência das Yops E, H e M, translocadas pela Y. pseudotuberculosis, na colonização e persistência da bactéria no baço e fígado dos animais infectados, nas quantidades de LT-CD4 e LT-CD8 durante a infecção e na produção das principais citocinas Th1 e Th2 por estas subpopulações de linfócitos. Além disso, foi verificado o papel destas Yops sobre a ativação do fator nuclear κB (NF-κB) e sobre a atividade citotóxica dos LT-CD8. Para isso, camundongos BALB/c fêmeas foram infectados intravenosamente com a amostra selvagem de Y. pseudotuberculosis (WT), ou com amostras mutantes incapazes de secretar as Yops E, H e M (YopE-, YopH- e YopM-), ou ainda com a amostra curada do plasmídeo de virulência (YpIII). No 5°, 7°, 14° e 21° dia pós-infecção (pi), os animais foram sacrificados e as células esplênicas foram obtidas de camundongos infectados e de camundongos não infectados (grupo controle). Os níveis de colonização no baço e no fígado foram determinados por... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The three pathogenic species of the genus Yersinia, Y. pestis, Y. enterocolitica and Y. pseudotuberculosis, share a tropism for lymphoid tissues and a 70-kb plasmid essential for virulence. The plasmid encodes a type III secretion system and effector proteins called Yops (Yersinia outer proteins). This secretion system is responsible for translocating the Yops into the host cells, where they interact with specific host targets and alter the functions of these cells. Yops are able to modulate the host immune defenses allowing the bacteria to replicate extracellularly in lymphoid tissues and organs. Although there is ample information on the mechanisms used by Yersinia to evade the innate immune system, very little is known about how it affects the adaptive immune response in vivo. The aim of this research was to analyze the influence of translocated Yops E, H and M of Y. pseudotuberculosis on the colonization and persistence of the bacterium in the spleen and liver of infected animals, on the quantities of CD4 and CD8 T cells during the infection and on the production of the main Th1 and Th2 cytokines by these lymphocyte subpopulations. In addition, it was verified the role of these same Yops on the activation of nuclear factor κB (NF- κB) and on the CD8 T cells cytotoxic activity. To this end, female BALB/c mice were infected intravenously with the wild type Y. pseudotuberculosis (WT), or with the mutant strains unable to secrete the Yops E, H and M (YopE-, YopH- and YopM-) or with the plasmid-cured strain (YpIII). On the 5th, 7th, 14th and 21st days post-infection (pi), the animals were sacrificed and the spleen cells were isolated from infected and uninfected mice (control group). The levels of colonization in the spleen and liver were determined by counting the number of colony-forming units. Both the phenotypic analysis of lymphocytes and the intracellular... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Resumo: Objetivo: O presente trabalho, dividido em três estudos, teve como objetivo geral identificar e quantificar a liberação de componentes e avaliar a citotoxicidade e a biocompatibilidade de cimentos de ionômero de vidro (CIVs). Método: Para o estudo 1, extratos dos CIVs Vitrebond (VB), Fuji Lining LC (FL), Vitremer (VM), Fuji II LC (FII), Ketac Fil Plus (KF) e Ketac Molar Easymix (KM) foram obtidos pela imersão de corpos-de-prova em meio de cultura celular (DMEM). Esses extratos (n=9 por grupo) foram analisados por eletrodo específico quanto à presença de flúor e por espectrometria de absorção atômica quanto à presença de alumínio e zinco. HEMA e iodobenzeno foram identificados por CG/EM (n=6). Para o estudo 2, células MDPC-23 foram colocadas em contato com os extratos dos CIVs por 24 horas. Em seguida, foram avaliadas a atividade da desidrogenase succínica (SDH) (n=8), a produção de proteína total (PT) (n=8), a atividade da fosfatase alcalina (FAL) (n=8) e a morfologia celular (n=2). Para o estudo 3, tubos de polietileno (n=24 por grupo) foram preenchidos com os CIVs e implantados no tecido subcutâneo de 42 ratos. Como grupo controle foi utilizada a guta-percha. Após 7 ou 15 dias de pós-operatório, metade dos espécimes de cada grupo e período (n=6) foi preparada para análise histológica, e os demais (n=6) para análise da expressão de genes que codificam para IL-1β e TNF-α. Resultados: Os extratos de todos os CIVs apresentaram uma concentração de flúor significativamente maior do que o meio de cultura DMEM (controle), tendo o VB liberado maior quantidade, estatisticamente significante, do que os demais CIVs. O VB foi, também, o único material que liberou quantidades relativamente altas de alumínio e de zinco. O HEMA foi identificado nos extratos de todos os CIVs modificados por resina (VB, FL, VM e FII), e o iodobenzeno... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objective: The aim of this work, divided into three studies, was to identify and quantify released components, and to investigate the cytotoxicity and biocompatibility of glass-ionomer cements (GICs). Materials and Methods: For the first study, extracts were obtained by immersion of round-shaped samples of the GICs, Vitrebond (VB), Fuji Lining LC (FL), Vitremer (VM), Fuji II LC (FII), Ketac Fil Plus (KF) and Ketac Molar Easymix (KM) in culture medium (DMEM). The extracts (n=9 per group) were analyzed by an ion-selective electrode and atomic absorption to determine fluoride, and aluminum and zinc, respectively. HEMA and iodine benzene were identified into the extracts by GC/MS (n=6). In the second study, MDPC-23 cells were maintained in contact with the extracts of the GICs for 24 hours. Then, succinic dehydrogenase (SDH) activity (n=8), total protein (TP) synthesis (n=8), alkaline phosphatase (ALP) activity (n=8) and cell morphology (n=2) were evaluated. For the third study, polyethylene tubes were filled with the GICs (24 from each material) and implanted into the subcutaneous tissue of 42 rats. Gutapercha was used as control group. After a post-operative period of 7 or 15 days half of the specimens from each group and period (n=6) were prepared for histological analysis, and the other part (n=6) for analysis of the expression of genes that encode for IL-1β and TNF-α. Results: The extracts of all GICs showed a significantly higher amount of fluoride than the culture medium (DMEM - control group), and VB was the material that released the highest amount of fluoride compared to the other GICs. VB was the only material that released relatively high amounts of aluminum and zinc. HEMA was identified in the extracts of all the resin modified GICs (VB, FL, VM and FII), and iodine benzene only in VB. Percentages of SDH activity related to the control group... (Complete abstract click electronic access below)

Resumo: A proposta do presente estudo foi avaliar, por meio do teste quantitativo de incorporação de 3H-timidina, o efeito do tratamento térmico em microondas sobre a citotoxicidade de três resinas termopolimerizáveis indicadas para confecção de bases de próteses, em função do tempo de armazenamento em água, e de três resinas autopolimerizáveis indicadas para reembasamento. A hipótese de que o tratamento térmico em microondas poderia diminuir a citotoxicidade de resinas acrílicas foi avaliada. Os materiais testados foram Lucitone 550 (a mufla foi imersa em água à temperatura de 730C permanecendo por 90 minutos, em seguida, à temperatura foi elevada para 1000C e a mufla mantida por mais 30 minutos), QC 20 (a mufla foi imersa em água em ebulição, o aquecimento foi mantido e a mufla permaneceu no recipiente por um período de 20 minutos contados a partir do momento em que a água atingiu novamente à temperatura de ebulição e Acron MC (a mufla foi levada ao forno de microondas durante 3 minutos à potência de 500 W) e os reembasadores Tokuyama Rebase II, Kooliner e New Truliner. Foram confeccionados, em condições assépticas, corpos-de-prova de cada resina em forma de discos medindo 10 mm de diâmetro e 1 mm de espessura. As amostras das resinas termopolimerizáveis foram armazenadas em água destilada por 0, 24 ou 48 horas a 37ºC. Para avaliar o efeito do tratamento térmico em microondas, os corpos-de-prova de todas as resinas foram divididos em dois grupos: 1) sem tratamento térmico e 2) com tratamento térmico em microondas, com as amostras imersas em água, irradiadas durante 3 minutos à 500 W. Os extratos das resinas foram preparados colocando-se três corpos-de-prova de cada grupo experimental, após terem recebido o tratamento térmico, em tubos de ensaio com 9 ml de meio de cultura Eagle e incubados a 37ºC por 24 horas. Um tubo de ensaio, contendo apenas 9 ml de meio... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of the current study was to evaluate the effect of microwave post-polymerization heat-treatments and water storage time on the cytotoxicity of denture base and reline acrylic resins. The hypothesis that post-polymerization treatment could decrease the cytotoxicity of acrylic base resins was tested in this study. The materials tested were Lucitone 550 (water-bath at a temperature of 73ºC for 90 minutes, followed by 30 minutes of heating at 100ºC), QC 20 (boil water, insert flask, return to boil, boil for 20 minutes) and Acron MC (microwave-polymerized, irradiated for 3 minutes at 500 W) and the hard chair-side reline resin Tokuyama Rebase II, Kooliner and New Truliner. Sample disks of the denture base resins were fabricated under aseptic conditions in mold 10 mm in diameter by 1 mm thick. The samples of the denture base acrylic resins were stored in distilled water for 0, 24 and 48 hours at 37ºC. To assess the biologic effect of the heat-treatment on the denture resins, samples fabricated were further divided into two groups: 1) samples without heat-treatment; and 2) sample were treated in microwave, immersed in water, irradiated for 3 minutes at 500 W. Eluates of the materials were prepared by placing three disks into a sterile glass vial with 9 ml of Eagle's medium supplemented with antibiotics and fetal bovine serum. These were incubated for 24 hours at 37ºC. Medium without disks was also incubated and diluted as above to serve as the control. L929 mouse fibroblasts (1 x 104 cell/ml) were cultivated in Eagle's medium supplemented with antibiotics and fetal bovine serum in 96 well culture plates and incubated for 24 hours at 37ºC in an air atmosphere containing 5% CO2. After 24 hours of incubation, the culture medium was replaced by 50 ml of eluate and 50 ml of fresh medium were added to each well of the 96-well culture plate and incubated for more... (Complete abstract, click electronic address below) / Orientador: Eunice Teresinha Giampaolo / Coorientadora: Iracilde Zeppone Carlos / Banca: Ana Cláudia Pavarina / Banca: Carlos Eduardo Vergani / Banca: Ricardo Faria Ribeiro / Banca: Wellington Cardoso Bonachela / Doutor

Orientadora: Daniela Micheline dos Santos / Coorientador: Marcelo Coelho Goiato / Banca: Marcela Fillié Haddad / Banca: Sandra Helena Penha de Oliveira / Resumo: A prótese bucomaxilofacial implantorretida pode ser suportada por pele ou por mucosa. Subprodutos dos materiais utilizados na confecção destas próteses podem atuar como irritantes ou causadores de reações alérgicas a tais tecidos. A proposta do presente estudo foi avaliar a citotoxicidade de primers e adesivo utilizados na confecção de próteses maxilofaciais retidas por implantes, por meio da análise da proliferação celular e da produção de citocinas pró-inflamatórias e de proteínas de matriz extracelular por queratinócitos humanos. Foram confeccionadas 28 amostras de resina e silicone, em forma de discos (10 x 1 mm), unidas ou não pela aplicação de primer e/ou adesivo. Estas amostras foram distribuídas em 7 grupos: Resina (R), Silicone (S), Resina + Silastic Medhical Adhesive Type A + Silicone (RAS), Resina + DC 1205 primer + Silicone (RDCpS), Resina + Sofreliner primer + Silicone (RSpS), Resina + DC 1205 primer + Silastic Medhical Adhesive Type A + Silicone (RDCpAS) e Resina + Sofreliner primer + Silastic Medhical Adhesive Type A + Silicone (RSpAS). Os extratos dos materiais testados foram preparados colocando-se quatro amostras de cada grupo experimental em tubos de ensaio contendo 9 mL de meio de cultura DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's) e incubados a 37°C por 24 horas. Após o período de incubação, a citotoxicidade dos extratos foi avaliada pelo ensaio de MTT em cultura de queratinócitos humanos (HaCaT). Foi avaliada, também, a produção das citocinas IL-1, IL-6 e TNF-α e a quimiocina MIP-1α por meio do ensaio ELISA (Ensaio Imunoabsorbente de Ligação Enzimática). Também foi avaliada a expressão de RNAm para MMP-9, TGF-β e COL-IV por meio da técnica de RT-PCR em tempo real (Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real). Os dados obtidos foram submetidos à Análise de Variância (ANOVA), seguido... / Abstract: The implant-retained maxillofacial prosthesis can be supported by skin and mucosa. The sub-products produced by the materials used to fabricate these prostheses may act as an irritant factor and cause allergy in these tissues. The aim of this study was to evaluate the cytotoxic effect of primers and adhesive used to bond the acrylic resin and the facial silicone during implant-retained maxillofacial prosthesis fabrication, through the analysis of the cell proliferation, and the production of proinflammatory cytokines and extracellular matrix proteins by keratinocytes. A total of 28 round shape samples (10 x 1 mm) made of resin and silicone bonded or not with primer and adhesive was fabricated. Samples were divided into 7 groups: Resin (R), Silicone (S), Resin + Silastic Medical Adhesive Type A + Silicone (RAS), Resin + DC 1205 primer + Silicone (RDCpS), Resin + Sofreliner primer + Silicone (RSpS), Resin + DC 1205 primer + Silastic Medical Adhesive Type A + Silicone (RDCpAS), and Resin + Sofreliner primer + Silastic Medical Adhesive Type A + Silicone (RSpAS). Extracts of tested materials were prepared setting four samples of each experimental group in Falcon tube with 9mL of medium (Bulbecco's Modified Eagle's) and incubated at 37°C for 24 hours. After incubation period, the extract cytotoxicity was evaluated by an assay of cell survival/proliferation (MTT test) in cultures of human keratinocytes (HaCaT). The levels of IL-1, IL-6 and TNF-α and the chemokine MIP-1α were evaluated by ELISA (Enzyme-Linked Immunoabsorbent Assay). The mRNA expression for MMP-9, TGF-β and collagen type IV were analyzed by the RT-PCR (Real time polymerase chain reaction). Data were submitted to the analysis of variance with Bonferroni post-tests (p<0.05). The results showed increased cell proliferation for the RAS group. The RDCpS group showed the highest... / Mestre

Orientador: Maria Aparecida Marin Morales / Banca: Carmem Silvia Fontanetti Christofoletti / Banca: Mateus Mondin / Resumo: Os agrotóxicos constituem uma importante estratégia da agricultura, para a obtenção de uma produtividade economicamente viável, pois são substâncias utilizadas no combate de organismos indesejáveis. Os inseticidas são agentes que têm ação de combater insetos, tanto na fase adulta como larval. O fipronil é um composto do grupo fenil-pirazol, toxicologicamente classificado como altamente tóxico, amplamente utilizado em campos agrícolas do estado de São Paulo, bem como nas residências, para combater insetos pragas. A ação deste inseticida se dá pela sua ligação ao canal de cloro, promovendo o bloqueio da ativação da condução dos estímulos nervosos, pelo ácido gama-aminobutírico (GABA), uma substância que controla o fluxo de íons cloro, através da membrana da célula nervosa. Em pequenas concentrações, apresenta uma eficiente ação nos organismos alvos. Esta característica também pode causar problemas ao meio ambiente, muitas vezes, longe até dos lugares onde foi aplicado. O fipronil, em temperaturas moderadas, é estável no ambiente por cerca de um ano. Estudos mostram que esse inseticida pode ser degradado em diversos metabólitos, que são ainda mais tóxicos que ele. Quanto a sua persistência no ambiente, o fipronil apresenta variações decorrentes da sua formulação, mas os seus metabólicos podem ser mais persistentes que o próprio inseticida. Resíduos de fipronil podem ser bioacumulado no tecido adiposo, indicando uma potencialidade de transferência via cadeia trófica. No presente trabalho, foram avaliadas as potencilidades tóxicas, citotóxicas, genotóxicas e mutagênicas do inseticida fipronil, por meio de bioensaios com Allium cepa, cujas sementes foram expostas à germinação em fipronil. / Abstract: The pesticides are an important strategy for agriculture, to obtain productivity economically viable, because they are substances used to eliminate pest organisms. Insecticides are agents which have action to combat insects, in both the adult and larval stage. The fipronil is a group composed of phenyl-pyrazole, toxicologically classified as highly toxic, and it is widely used in agricultural fields in Sao Paulo State, as well as in homes, to combat insect pests. This insecticide acts through its connection to the channel chlorine, promoting blockade in the activation of the conduct of nervous stimuli, the gamma-aminobutyric acid (GABA), a substance that controls the flow of chloride ions through the cell membrane of nerve. In small concentrations, presents an efficient action in the organism targets. This feature can also cause problems to the environment, often far to the places where it is applied. In moderate temperatures, the fipronil is stable in the environment for about a year. Studies show that this insecticide can be degraded in various metabolites, which are even more toxic than the fipronil. Relative to its persistence in the environment, the fipronil presents variations resulting from its formula, but their metabolites may be more persistent than the insecticide. Residues of fipronil can be bioacumulated in adipose tissue, indicating a potential of transference by the food chain. In the present research, it had been evaluated the toxic, cytotoxic, genotoxic and mutagenic potentials of the fipronil insecticide through bioassays with Allium cepa, whose seeds were exposed to germination in this insecticide. The results indicate that the insecticide presented no toxic and cytotoxic effects for the A. cepa species, when we compared the data resulting from the tests performed with the insecticide and with the negative control. / Mestre

Orientador: Christiane Pienna Soares / Banca: Luisa Lina Villa / Banca: Luis Octávio Regasini / Resumo: O câncer cervical é um problema de saúde pública mundial, especialmente nos países em desenvolvimento representando 12% de todos os tipos de neoplasias malignas que acometem as mulheres, configurando a segunda neoplasia ginecológica mais freqüente no mundo. Estudos epidemiológicos e moleculares demonstram a forte associação entre a etiologia do câncer cervical associado à infecção pelo HPV, especialmente para os tipos de alto risco oncogênico (HP-V16 e HPV-18). A cancerologia experimental, utilizando cultura de células, é de grande valia para se estudar os diversos aspectos relacionados aos processos neoplásicos cervicais. Alguns fármacos usados na quimioterapia são oriundas de espécies vegetais ou derivadas de um protótipo natural. Os produtos naturais têm contribuído intensamente para o desenvolvimento da terapêutica moderna. A quimioprevenção envolve o uso de substâncias naturais ou sintéticas para reduzir o risco de desenvolvimento de câncer. Por esta razão, o presente estudo foi inserido no Projeto de Bioprospecção BIOTA-FAPESP para a avaliação de dois compostos isolados da planta Pterogyne nitens, uma planta com conhecida atividade citotóxica, antioxidante e antifúngica que está distribuída do sudeste ao sul do Brasil, principalmente na Mata Atlântica e no Cerrado. No presente estudo, o potencial inflamatório, antitumoral e quimiopreventor de pteroginina e pteroginidina foram estudados em cultura de células normais e tumorais de câncer cervical (HeLa, SiHa e C33A), queratinócito normal de pele (HaCaT), corioncarcinoma (JEG-3), hepatocarcinoma murino (Hepa1c1c7) e hepatocarcinoma murino mutado (TAOc1BPrc1). Portanto foram realizados ensaios de citotoxicidade por MTT, de determinação de citocinas: IL1-β, IL-4, IL-6, TNF-α e IFN-γ por ELISA, da atividade antitumoral... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Cervical cancer is a public health problem worldwide, mainly in developing countries, representing 12% of all types of malignancies that affect women, and the second common gynecologic malignancy in the world. Molecular and epidemiological research showed a strong association between infection, with HPV, especially high-risk HPV, and the etiology and progression of cervical cancer. Cell culture based on experimental oncology is valuable for study of various features of neoplasic processes. Several drugs used in chemotherapy were isolated from plants species or derived from a natural prototype. Natural products have contributed to the development of modern therapeutics. Chemoprevention involves the use of natural or synthetic substances to reduce the risk of developing cancer. Thus, this study, Bioprospecting Project BIOTA-FAPESP was aimed at assessing two compounds from Pterogyne nitens, a plant with known antiinflammatory and antioxidant activities, is distributed from southeast to southern Brazil, mainly in the Forest Atlantic and Cerrado biomes. The anti-inflammatory, antitumor and quimiopreventor potentials of the compounds pterogynine and pterogynidine was studied in normal and tumor cell lines: cervical cancer (HeLa, SiHa and C33A), normal skin keratinocytes (HaCaT), chorioncarcionoma (JEG-3), murine hepatocellular carcinoma (Hepa 1c1c7) and mutated murine hepatocellular carcinoma (TAOc1BPrc1). These compounds were assesmet for of cytotoxicity (MTT), determination of inflammatory cytokines IL1-β, IL-4, IL-6, TNF-α and IFN-γ (ELISA), antitumor activity with sHLA-G molecule (ELISA) and chemoprevention with quinone reductase (QR). The results showed that both tested compounds exhibited high concentration-dependent cytotoxicity to the three cervical carcinoma cell... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre