Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-19T13:06:08Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 571786 bytes, checksum: f5c020f576d6a6a199f3dc5e28b90d0a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-19T13:06:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 571786 bytes, checksum: f5c020f576d6a6a199f3dc5e28b90d0a (MD5) Previous issue date: 2005-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente trabalho teve por objetivo verificar o efeito do nível de fibra em detergente neutro oriundo de forragens (FDNf) e a maturidade da fibra sobre o consumo, o desempenho, o comportamento ingestivo, a eficiência de utilização de energia metabolizável, os parâmetros ruminais, a cinética de transito e os efeitos sobre a repleção ruminal. Para isso, foram conduzidos quatro experimentos, sendo dois com cabras em lactação e dois com cabras não lactantes fistuladas no rúmen, utilizando duas forragens com maturidades distintas e cinco níveis de FDNf, em cada experimento. No primeiro experimento, foram distribuídas cinco cabras em um delineamento em quadrado latino 5 x 5, utilizando-se diferentes níveis de FDNf, como variável independente tendo como fonte de fibra o capim Tifton 85 (Cynodon spp) considerado de qualidade mediana, com 75,78% de FDN e 11,44% de PB. Os níveis estudados foram 19, 27, 35, 42 e 48 % de FDNf. Os consumos de matéria seca (MS), matéria orgânica (MO), proteína bruta (PB), extrato etéreo (EE), carboidratos não fibrosos (CNF), nutrientes digestíveis totais (NDT) e energia líquida (EL 3x ), foram afetados pelo aumento dos níveis de FDNF. O consumo de FDN não foi influenciado pelo aumento no nível de FDN, quando expresso em kg.dia -1 ou como porcentual do peso animal, mantendo este próximo a 1,2 % do PV. As variações nas concentrações de fibra das dietas não influenciaram os coeficientes de digestibilidade da MS, MO, FDN, PB e CNF. De maneira semelhante, as concentrações dos constituintes do leite, não foram alteradas ao se variar os níveis de fibra das dietas. Verificou-se efeito linear decrescente do nível de FDNf da dieta sobre a produção de leite, corrigida e não corrigida, expressa em kg.dia -1 . Não houve influência do teor de FDNf sobre o comportamento ingestivo dos animais em estudo. A melhor eficiência liquida de utilização da energia metabolizável consumida para produção de leite foi atingida com a dieta contendo 35% de FDNF. O segundo trabalho foi planejado da mesma forma que o primeiro, com exceção da fonte de fibra forrageira das dietas, que, neste caso, foi feno de capim-Tifton 85 (Cynodon spp) com maturidade avançada, com 86,24% de FDN e 6,47% de PB. As concentrações de FDNf utilizadas foram 20, 28, 35, 43 e 49 % de FDNf. Os consumos de matéria seca, de nutrientes e de energia líquida, foram reduzidos com a adição de fibra à ração; no entanto o consumo de FDN foi crescente indicando uma capacidade de acomodação daquele nutriente pelos animais. O nível de FDNf influenciou os coeficientes de digestibilidade da MS, MO, PB e CNF. Contudo a digestibilidade da FDN, não foi influenciada pelos tratamentos. Com a variação dos níveis de FDNf o nitrogênio consumido (g.dia –1 ) foi influenciado de maneira quadrática, porém o teor de nitrogênio retido não foi afetado pelos níveis experimentais. Foram observados efeitos quadráticos no nitrogênio excretado nas fezes e na urina, e efeito linear no nitrogênio excretado no leite. O nível de FDNf não influenciou os teores dos constituintes do leite. Verificou-se efeito quadrático do nível de FDNf da dieta sobre a produção de leite, corrigida para 4% e não corrigida, em kg.dia -1 , com maiores produções obtidas com o teor de 28% de FDNf nas rações. A eficiência de utilização da energia metabolizável não foi influenciada pelas variações dos níveis de FDNf. Houve influência do teor de FDNf sobre o comportamento ingestivo dos animais em estudo, afetando o tempo de ruminação, o tempo de mastigação e diminuindo o tempo em ócio dos animais. No terceiro experimento, cinco cabras não lactantes, fistuladas no rúmen, foram distribuídas em um delineamento experimental em quadrado latino 5x5. Neste experimento foram utilizadas as mesmas dietas formuladas para o experimento 1. Houve efeito quadrático dos tratamentos sobre o consumo de MS, MO, EE, PB, FDN, CNF, NDT e energia. O aumento dos níveis de FDNf das rações, reduziu linearmente os coeficientes de digestibilidade aparente da MS, MO, EE e CNF e afetou de maneira quadrática o coeficiente de digestibilidade da FDN. Os coeficientes de digestibilidades ruminais da MS, MO e da FDN aumentou linearmente com a variação dos níveis de FDNf. De forma contrária foi observado redução no coeficiente de digestibilidade intestinal da MS, MO, PB e da FDN. O aumento no teor de FDNf e os tempos de coleta influenciaram o pH ruminal, contudo a amônia ruminal afetada apenas pelos tempos de coleta. O conteúdo ruminal foi afetado de maneira quadrática (P<0,05) pelos níveis de FDNf. A adição de fibra resultou em alteração nos conteúdos de MS, MO, FDN, CNF e PB da massa ruminal. A semelhança do experimento três, e com dietas similares às utilizadas no experimento dois, foi conduzido um quarto experimento. Os consumos de MS, MO, PB e EL foram influenciados de maneira quadrática pelos níveis de FDNf da rações. O consumo de FDN, nas diversas formas em que este foi expresso, não foi influenciado pelos níveis de FDNf. Da mesma forma o consumo de NDT não foi influenciado pelos níveis de FDNf. As digestibilidades aparentes totais da MS, MO, CNF e EE foram afetadas de maneira linear decrescente pelos tratamentos. A digestibilidade da FDN foi influenciada de maneira quadrática pelo aumento dos níveis de FDNf. As digestibilidades ruminais da MS, MO, PB, EE e da FDN apresentou comportamento linear crescente com o aumento dos níveis de FDNf, e as digestibilidades intestinais das mesmas variáveis apresentou comportamento linear decrescente. O conteúdo de FDN ruminal foi afetado de forma linear com o aumento dos níveis de FDNf das dietas experimentais. O pH e a amônia ruminal foram avaliados pelo método de medidas repetidas no tempo, e foram influenciados pelos níveis de FDNf e pelo tempo de coleta. A taxa de passagem foi influenciada de maneira cúbica pelos níveis de FDNf. / This work had as objective verify the effect of neutral detergent fiber levels from the forage (NDFf) and the fiber maturity on the intake, the performance, the ingestive behavior, the efficiency of use of metabolizable energy, the ruminal parameters, the transit kinetics and the effects on the rumen fill. For this, were conduced four experiments, being two with lactating dairy goats and two with non-lactating dairy goats with fistulae in the rumen, using two forages with distinct maturities and five NDFf levels in each experiment. In the first, five dairy goats were distributed in a Latin square 5 x 5, being used different of NDFf levels as independent variable. The studied levels were 19, 27, 35, 42 and 48% of NDFf. The intake of dry matter (DM), organic matter (OM), crude protein (CO), ethereal extract (EE), nonfibrous carbohydrates (NFC), total digestible nutrients (TDN) and net energy (NEl), were affected in a decreasing linear way, for the increase of the NDFf levels. The intake of NDF was not influenced by the increased in the of NDF level, when expressed in kg.day -1 or as percent of the body weight (BW), maintaining this close one to 1,2% of BW. The variations in the concentrations of fiber of the diets didn't influence the digestibility coefficients of DM, OM, NDF, CP and NFC. In a similar way, the concentrations of constituents of the milk (fat, protein and lactose) were not altered if it varies the fiber levels of the diets. Decreasing linear effect of the NDFf level of the diet was verified about the production of milk, corrected and no corrected, in kg.day-1. There was not influence of the content of NDFf on the ingestive behavior of the animals in study. The better liquid efficiency of use of the metabolizable energy consumed for production of milk was reached with the diet containing 35% of NDFf. The second work was plotted of the same manner xiwith the exception of fiber source, which the case was the Tifton hay (Cynodon spp) with advanced maturity, with 86.24% NDF and 6.47% CP. The concentrations of used NDFf were 20, 28, 35, 43 and 49%. The intakes of dry matter (DM), of nutrients and of net energy (NEl 3x), were reduced with the addition fiber to the ration; however the intake of NDF was increased indicating the capacity of accommodation of that nutrient for the animals. The NDFf level influenced the digestibility coefficients of DM, organic matter, crude protein and nonfibrous carbohydrates. However the NDF digestibility was not influenced by the treatments. With the variation of the NDFf levels, the intake of nitrogen (g.day-1) was influenced in a quadratic manner, however the levels did not affect the nitrogen content. Quadratic effects were observed in the nitrogen excreted in the feces and in the urine, and linear effect in the nitrogen produced in the milk. The NDFf level didn't influence the milk constituents (fat, protein and lactose). Quadratic effect of the NDFf level of the diet was observed about the production of milk (corrected for 4% and no corrected), in kg.day -1 , with greater productions obtained with the content of 28% of NDFf in the rations. The efficiency of use of the ME was not influenced by the variations of the NDFf levels. There was influence of the content of NDFf on the ingestive behavior of the animals in study, increasing the time of rumination, the time of mastication and reducing the time in leisure of the animals. In the third experiment, Five non-lactating goats were used, with fistulae in the rumen. The animals were arranged in a Latin square 5x5, being used the NDFf levels, as independent variable. There was quadratic effect of the treatments on the consumption of dry matter (DM), organic matter (OM), crude protein (CP), ether extract (EE), neutral detergent fiber (NDF), nonstructural carbohydrates (NSC), total digestible nutrients (TDN) and net energy (NE3x). The increase of the levels of NDFf of the rations reduced linearly the apparent digestibility of DM, OM, EE and NSC and it affected in a quadratic manner the digestibility of NDF. The ruminal digestibility of DM, OM and NDF it increased linearly with the variation of the NDFf levels. In opposite, reduction was observed in the coefficient of digestibility intestinal of DM, OM, CP and NDF. The increase of contents of NDFf and the times of collection influenced the ruminal pH, however the ruminal ammonia just affected by the times of collection. The content ruminal was affected in a quadratic way by the NDFf levels. The fiber addition resulted in alteration in the contents of DM, OM, CP, NDF and NSC of the ruminal mass. Likeness the experiment three and towards similar diets used in the experiment two, was conduced each other experiment. The intakes of DM, OM, CP and NE were influenced xiiin a quadratic way by the NDFf levels of the rations. The NDFf levels did not influence the intake of NDF, in the several forms. In the same way the NDFf levels did not influence the intake of TDN. The total apparent digestibility of DM, OM, EE and NSC were affected in a decreasing linearly. The NDF digestibility was influenced in a quadratic way by the increase of the NDFf levels. The ruminal digestibly of DM, OM, CP, EE and of NDF increased with the increase of the NDFf levels, and the intestinal digestibility of the same variables presented decreasing linearly. The content of ruminal NDF was affected linearly with the increase of the levels of NDFf of the experimental diets. The ruminal pH and the ammonia were available for the method of repeated measures in the time, and they were influenced by the NDFf levels and for the time of collection. The passage rate was influenced in a cubic way by the NDFf levels.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-06-28T09:08:43Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 215770 bytes, checksum: 3af4e8e727cd178e153bf6a7f6d12cb8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-28T09:08:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 215770 bytes, checksum: 3af4e8e727cd178e153bf6a7f6d12cb8 (MD5) Previous issue date: 2000-02-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Conduziram-se dois experimentos no Departamento de Zootecnia da Universidade Federal de Viçosa, com o objetivo de avaliar o valor nutritivo de rações contendo silagem de milho (SM) e fenos de alfafa (FA) e de capim- coastcross (FCC), como fontes de volumosos. No primeiro experimento, avaliaram-se a produção e composição do leite, o consumo e a digestibilidade aparente de matéria seca (MS), matéria orgânica (MO), fibra em detergente neutro (FDN), proteína bruta (PB), nutrientes digestíveis totais (NDT), carboidratos totais (CT) e extrato etéreo (EE), o pH e a concentração de amônia ruminal e o custo das rações. Usaram-se dez vacas lactantes, HPC e mestiças, com peso médio de 540 kg, distribuídas em um delineamento em switch-back. Os animais foram alimentados ad libitum com cinco rações contendo FA (R1); FCC (R2); SM (R3); FA e SM (R4); e FCC e SM (R5), na proporção de 60% para o volumoso (base de matéria seca). Os consumos de MS, MO, FDN, PB, NDT, CT e EE não foram influenciados pelas rações. As digestibilidades aparentes de MS, PB e FDN foram maiores para as rações contendo silagem de milho. O pH e a concentração de amônia do líquido ruminal não foram influenciados pelas rações, porém observou-se resposta quadrática para o tempo de coletas. Os valores médios de pH e amônia foram de 7,13 e 13,17 mgN-NH3/100 mL, respectivamente. Registrou-se maior produção de leite para os animais que receberam silagem de milho e esta associada ao feno de alfafa. Por sua vez, a produção de leite corrigida foi menor para a última ração. Os teores de proteína bruta e gordura do leite não foram influenciados pelas rações, registrando-se valores médios de 3,45 e 3,95%, respectivamente. As rações contendo FCC e SM revelaram os mesmos custos por kg de leite produzido, e aquela com SM, maior margem bruta. No segundo experimento, avaliou-se o valor nutritivo do FA e FCC e da SM, fornecidos como alimentos exclusivos para ovinos. Usaram-se 15 animais, distribuídos em um delineamento em blocos casualizados. Os consumos de MS, MO e CT, em g/dia, não foram influenciados pelos volumosos usados. Os consumos de FDN e EE foram menores para os animais que receberam silagem de milho. Já os consumos de PB e NDT foram maiores para os animais alimentados com feno de alfafa. As digestibilidades aparentes da MS e PB foram maiores para os animais que receberam feno de alfafa. Por sua vez, o balanço de nitrogênio foi positivo apenas para os animais alimentados com fenos. / Two experiments were carried out at the Animal Science Department to evaluate the nutritive value of diets with corn silage (CS) and alfalfa and coastcross grass (CCG) hays, as roughage sources. In the first experiment, the milk composition and yield, the intake and apparent digestibility of dry matter (DM), organic matter (OM), neutral detergent fiber (NDF), crude protein (CP), total digestible nutrients (TDN), total carbohydrates (TC) and ether extract (EE), the pH and ruminal ammonia concentration and the diets cost were evaluated. Ten HPC and crossbred dairy cows, with average weight of 540 kg, were assigned to a switch-back design. The animals were ad libitum fed diets with AH (R1), CCH (R2), CS (R3); AH and CS (R4), and CCH and CS (R5) in 60% basis for the roughage (dry matter basis). Diets did not affect DM, OM, NDF, CP, TDN, TC and EE contents. The DM, CP and NDF apparent digestibilities were higher for diets with corn silage. Diets did not affect pH and the ruminal ammonia concentration, however quadratic answer was observed for collection time. The average pH and ruminal ammonia values were 7.13 and 13.17 mgN- NH3/100mL, respectively. Higher milk production for the animals that received corn silage based diet was recorded, and this roughage was associated to alfalfa hay. However, corrected milk production was lower for the last diet. The diets did not affect the crude protein and fat milk contents. The diets with CCH and CS showed the same cost per kg produced milk and that with CS shoed the higher gross margin. In the second experiment, the AH, CCH and CS nutritive values fed exclusively as feeds for sheep were evaluated. Fifteen animals were assigned to a randomized blocks design. The DM, OM and TC intakes, in g/day, were not affected by the used roughages. The NDF and EE intakes were lower for the animals fed corn silage based diets. The CP and TDN intakes were higher for the animals fed alfalfa hay based diets. The apparent DM and CP digestibilities were higher for the animals fed alfalfa hay based diet. The nitrogen balance was positive for the animal fed exclusively hays based diets. / Não foi encontrado o CPF do autor. Foi utilizado o número de RG.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-12-31 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / As leishmanioses constituem um importante problema de saúde pública no Brasil, em razão da incidência da doença associada à alta taxa de morbidade. Devido ao fato da Leishmania ser um parasita intracelular no hospedeiro vertebrado, estudos de moléculas do parasita, que atuam na interação do parasita com a célula do hospedeiro vertebrado, são de alta importância para uma melhor compreensão dos mecanismos de invasão e sobrevivência do parasita. Seguindo este racional, nesta tese foram identificados, purificados e caracterizados os proteofosfoglicanos secretados por formas promastigotas (pPPG) e amastigotas (aPPG) de L. (L.) amazonensis, respectivamente de meios de cultura e de macrófagos infectados com esses parasitas. A purificação dos PPGs foi realizada por combinações de cromatografias em DEAE-Sephadex, Octyl-Sepharose e Bio-Gel A- 0.5 e ultracentrifugações. Por "Western blotting" e radioimunoensaio em fase sólida utilizando diferentes anticorpos monoclonais (mAbs), observou-se que o pPPG apresenta alto peso molecular, contem cadeias fosfoglicanas e é reconhecido por mAbs anti-glicoesfingolipídeos (GSLs) ST-3 e ST-5, e mAb anti-lipofosfoglicano (LPG) VST-1. Em estudos imunohistoquímicos de cortes de lesão de hamsters infectados com L. (L.) amazonensis, observou-se a presença de material reativo com os mAbs ST-3, ST-4 e ST-5 na superfície do parasita e em torno do vacúolo parasitóforo. Após delipidação de cortes da lesão (processo em que são extraídos os glicolipídeos), a reatividade com os mAbs limitou-se a algumas regiões do vacúolo, sugerindo a possível localização dos aPPGs na célula infectada. O aPPG apresentou padrão de migração eletroforética similar ao pPPG, e foi reconhecido pelos mAbs ST-3, ST-4 e ST-5, mas não pelo mAb VST-1. A análise da composição monossacarídica dos PPGs de L. (L.) amazonensis por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa mostrou que o pPPG é composto por manose:galactose:glucose, na proporção molar de 1:1,2:1,7. Por outro lado, o aPPG apresenta em sua estrutura manose:galactose:glucose na proporção de 1:2:9. Em experimentos paralelos foram avaliados os níveis de produção de óxido nítrico e do fator de necrose tumoral por macrófagos peritoneais de camundongos BALB/c expostos a diferentes estímulos com antígenos parasitários de L. (L.) amazonensis. Observamos que LPG, pPPG e GSLs per se não estimularam os macrófagos na produção de NO. Por outro lado o aPPG per se mostrou-se capaz de estimular a produção de NO. LPGs e pPPGs foram capazes de estimular a produção de óxido nítrico quando incubados na presença de interferon gama. Por outro lado, GSLs e interferon gama não foram capazes de estimular a produção de NO em macrófagos. Nenhum dos antígenos de Leishmania utilizados estimulou a produção de fator de necrose tumoral. O perfil glicolipídico de amastigotas axênicos de L. (L.) amazonensis em comparação com o de amastigota isolado de lesão foi analisado por HPTLC, tendo sido verificadas diferenças significativas no padrão cromatográfico dos glicolipídeos. Os glicolipídeos de formas axênicas não são reconhecidos por mAbs anti-GSLs. A organização dos glico(esfingo)lipídeos e glicoinositolfosfolipídeos (GIPLs) de formas amastigotas e promastigotas de L. (L.) amazonensis foi analisada. Para isso, membranas resistentes ao detergente não-iônico Triton X-100 foram isoladas a 4ºC. Em formas amastigotas foi verificado que os GSLs, esfingomielina e esteróis estão predominantemente localizados em frações de membranas resistentes ao tratamento com Triton X-100. Em formas promastigotas foi verificado que inositol fosforilceramida, GIPLs e esteróis estão localizados preferencialmente nas membranas de baixa densidade insolúveis em detergente nãoiônico a 4ºC. Em um outro conjunto de experimentos foi analisado o efeito de inibidor de síntese de esfingolipídeo, Aureobadisina A (AbA), em formas promastigotas e amastigotas de L. (L.) amazonensis. Em formas promastigotas foi observado que a AbA inibe o crescimento dos parasitas, entretanto esse efeito é reversível. Em ensaios de infectividade in vivo observou-se que camundongos BALB/c infectados com parasitas tratados com AbA apresentavam um desenvolvimento tardio das lesões em relação aos infectados com parasitas sem tratamento. Por outro lado, em culturas axênicas de amastigotas isoladas de lesão foi observado que a AbA é tóxica aos parasitas. Após a adição da AbA em cultura de macrófagos infectados com formas amastigotas, verificou-se uma diminuição significativa da infecção de macrófagos. Todos estes resultados sugerem que os glicoconjugados de L. (L.) amazonensis analisados nesta tese podem atuar na interação entre o parasita e o hospedeiro, exercendo papéis importantes na sobrevivência e progressão da leishmaniose. / Leishmaniasis is an important public health problem in Brazil. Since Leishmania is an obligatory intracellular parasite in the host, studies of parasite antigens responsible for interaction with the host cell during the infection are important to understand the mechanism of parasite invasion and survival. Following this rationale, in this work it was purified and characterized proteophosphoglycans secreted by promastigote (pPPG) and amastigote (aPPG) forms in culture supernatant and into parasitophorus vacuole of infected macrophages, respectively. The PPGs were purified by combination of chromatography (DEAE-Sephadex, Octyl-Sepharose and Bio-Gel A-0.5) and ultracentrifugation. By Western blotting and solid phase radioimmunoassay using different monoclonal antibodies (mAbs), it was observed that pPPG presents high molecular weight, contains phosphoglycan chains and it is recognized by anti-glycosphingolipids (GSLs) mAbs ST-3, ST-5 and by anti-lipophosphoglycan (LPG) mAb VST-1. Immunohistological analysis of hamster footpad lesions infected with L. (L.) amazonensis using different mAbs showed a strong labeling on amastigote forms and inside/around macrophage parasitophorus vacuole. After delipidation of lesion sections with a mixture of isopropanol/hexane/water (condition in which GSLs are removed) it was observed that the mAbs reactivity localized inside the vacuole remained in infected tissue, thus indicating the possible localization of aPPGs secreted by L. (L.) amazonensis recognized by the mAbs. The aPPG showed similar electrophoretic migration of pPPG, and it was recognized by mAbs anti-GSLs ST-3, ST-4 and ST-5, but not by mAb VST-1. The analysis of monosaccharide compositon of PPGs, determined by gas chromatography - mass spectrometry, showed that pPPG is constituted of mannose:galactose:glucose at molar proportion of 1:1.2:1.7. On the other hand, aPPGs showed in their strucuture mannose:galactose:glucose at proportion of 1:2:9. In parallel assays, nitric oxide (NO) and tumor necrose factor (TNF-α) production by BALB/c macrophages exposed to different L. (L.) amazonensis antigen stimuli were also analyzed. The pPPG, LPG and GSLs by themselves were not able to induce nitric oxide production by macrophages. On the hand, aPPG per se was able to induce nitric oxide production. The LPG and pPPGs were able to synergize with INF-γ the production of NO. Furthermore, GSLs were not able to stimulate NO production in presence of INF-γ. None of the antigens did induce the pro-inflammatory cytokines TNF-α secretion. The glycolipid profile of axenic and lesion amastigotes of L. (L.) amazonensis was analyzed by HPTLC. The results showed a significative difference in glycolipid chromatographic profile among the parasites, and axenic amastigote glycolipids were not recognized by anti-GSL mAbs. The membrane organization of glyco(sphingo)lipids and glycoinositolphospholipids (GIPLs) of L. (L.) amazonensis amastigote and promastigote forms were studied after Triton X-100 extraction at 4ºC. In amastigote forms it was observed that GSLs, sterol and sphingomyelin are present in the Triton X-100 resistant membrane domains. In promastigote parasites it was observed that inositol phosphorylceramide, GIPLs, sterol and a small amount of phosphatidylethanolamine are localized in the low-density membranes insoluble in non-ionic detergent at 4ºC. In another set of experiments, it was analyzed the effect of Aureobasidin A (AbA) in L. (L.) amazonensis promastigote and amastigote forms. AbA inhibited completely promastigotes growth, however, it should be noted that this effect was reversible. Infectivity assays in BALB/c mice using promastigote forms treated with AbA showed a delay in lesion development. On the other hand, the effect of AbA in L. (L.) amazonensis amastigotes showed that this drug is toxic to amastigote forms. AbA effect was also analyzed during the infection of macrophages by amastigote forms of L. (L.) amazonensis. After adition of AbA in the culture, it was observed a significative reduction of phagocytic index. The present study shows that Leishmania glycoconjugates may be crucial in parasite-host cell interaction, playing important role in the parasite survival and in the disease progress. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-20Bitstream added on 2014-06-13T19:56:22Z : No. of bitstreams: 1 cezimbra_im_me_jabo.pdf: 403634 bytes, checksum: 681b906dd316ae6be3a89341b3d7a0cc (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os objetivos foram avaliar diferentes formas de dosagem de indicadores (infusão contínua 24h, e duas doses diária de indicador) e verificar sua precisão e acurácia para estimativa do fluxo duodenal de matéria seca (MS), consumo de concentrado, consumo de volumoso, produção fecal e digestibilidade aparente da MS em bovinos. No experimento 1, seis animais receberam os indicadores Cr-EDTA e YbCl3 através de uma bomba de infusão contínua, via fístula ruminal durante seis dias de adaptação nos dois períodos de 17 dias, enquanto os outros seis animais receberam os mesmos indicadores em duas dosagens diárias (8h e às 19h). No experimento 2, doze animais receberam os indicadores Cr-EDTA, YbCl3, LIPE®LÍQUIDO, FDNi e FDAi, em duas doses diárias que foram utilizados nas estimativas do fluxo duodenal de matéria seca (MS) pelo método de único e duplo indicador. Os indicadores TiO2 e LIPE®LÍQUIDO foram utilizados para estimativa do consumo de concentrado, produção fecal, digestibilidade aparente e os indicadores internos, FDNi e FDAi para estimar consumo de volumoso, produção fecal e digestibilidade. No experimento 1, o delineamento utilizado foi inteiramente casualisado em parcelas subdivididas com dois tratamentos em dois períodos. No experimento 2, o delineamento foi o de blocos em parcelas subdivididas. As médias foram comparadas pelo teste tukey a 5%. No experimento 1 não foram observadas diferenças entre as formas de fornecimento dos indicadores (P>0,05). No experimento 2, a FDNi estimou o fluxo de digesta no duodeno e a produção fecal e o consumo de volumoso. A estimativa do consumo de volumoso através do FDNi e FDAi foram semelhantes ao observado (P>0,05). O TiO2 e LIPE®LÍQUIDO foram acurados na estimativa do consumo de concentrado / The objectives of this study were to evaluate by two metabolism trials different ways to dose markers (by continuous infusion for 24 hours and by two doses of marker per day) and also to study the accuracy and reliability of differents markers to estimate duodenal flow of nutrients concentrate intake, roughage intake, fecal production and apparent digestibility of dry matter (DM) in cattle. Twelve crossbred heifers were used in both experiments with average body weight of 361.7kg ± 59 and approximately 24 months of age, cannulated in the rumen and duodenum. In experiment 1, six animals received the markers Cr-EDTA, YbCl3 by continuous infusion via ruminal fistula in two periods of 17 days, while the other six animals received the same markers in twice daily dosing (8 and 7hours). In experiment 2, animals received the twelve markers twice daily during the experimental periods. Markers Cr-EDTA, YbCl3, LIPE®LIQUID, iNDF and iADF were used in the estimation of duodenal flow of nutrients by the method of single and double markers. Markers TiO2 and LIPE®LIQUID were used to estimate concentrate intake, fecal output, digestibility of DM and internal markers, iNDF and iADF to estimate forage intake, digestibility and fecal production. In experiment 1, a split plot design was used with two treatments (supply), six replicates in two periods. In experiment 2, the experimental design was randomized blocks in split plots, where the markers were considered as treatments. In both experiments, the means were compared by Tukey test at 5%. In experiments 1, there were no differences between the ways to supply the marker (P>0.05). In experiment 2, the iNDF was the best variable to predict digest flow in the duodenum and fecal production. iNDF and iADF were not d significantly different when the average intake of roughage were compared with the observed. The TiO2 was not significantly different... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:30:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3430_1.pdf: 5795505 bytes, checksum: 9150fb45737f337821ddcd9910cb61c2 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / A validação de limpeza na produção farmacêutica é imprescindível para o cumprimento das Boas Práticas de Fabricação, conferindo qualidade e segurança aos medicamentos produzidos. Esta atividade é composta por diferentes passos: desenvolvimento e implantação dos procedimentos de limpeza, definição dos limites de aceitação de resíduos, validação do método analítico para determinação dos resíduos e aplicação de método de amostragem reprodutível e adequado à detecção e quantificação de traços dos resíduos pesquisados. Neste trabalho foi avaliada a limpeza dos equipamentos envolvidos na produção do medicamento LAFEPE Zidovudina (AZT) + Lamivudina (3TC), 300 mg + 150 mg comprimidos revestidos. A validação de limpeza verificou a remoção dos resíduos de ativos farmacêuticos AZT e 3TC, do agente de limpeza Extran® MA 02 Neutro e verificou a possível contaminação microbiológica residual após o procedimento de limpeza. Considerando que o ambiente pode contribuir para a contaminação microbiológica foi avaliada a qualidade do ar de duas áreas controladas da linha produtiva. Um método analítico para determinação simultânea de AZT e 3TC em HPLC-UV apresentou-se seletivo e linear numa faixa de 2,5 a 15 &#956;g/mL, apresentando como Limites de Detecção (LD) (AZT: 0,13 &#956;g/mL; 3TC: 0,15 &#956;g/mL) e Limites de Quantificação (LQ) (AZT: 0,20 &#956;g/mL; 3TC: 0,23 &#956;g/mL). O método de amostragem com swabs obteve uma recuperação adequada de AZT e 3TC em superfícies de aço 316L, respectivamente 82,04% e 83,32%. Na determinação do resíduo de detergente foi aplicada a amostragem dos equipamentos por água de rinsagem e utilizados os métodos analíticos de potenciometria e condutimetria, sendo conhecidas as respostas analíticas para uma curva de 2,0 a 20,0 &#956;g/mL de Extran® MA 02 Neutro em água purificada. A avaliação da contaminação microbiológica nas superfícies dos equipamentos foi determinada através de placas de contato RODAC® com meio de crescimento Tryptic Soy Agar acrescido de polissorbato 80 e lecitina de soja como agentes neutralizantes dos detergentes e desinfetantes para verificação do crescimento de bactérias heterotróficas. Para a determinação da qualidade do ar foram utilizadas placas de petri com os meios de crescimento Tryptic Soy Agar e Agar Sabouraud, também acrescidos de polissorbato 80 e lecitina de soja como agentes neutralizantes expostas no ambiente em condição de operação por 4 horas. Neste caso foi avaliado o crescimento de bactérias heterotróficas, fungos filamentosos e leveduriformes. O procedimento de limpeza e amostragem foi aplicado a 3 (três) lotes industriais consecutivos e os resultados obtidos atenderam às especificações de limites dos contaminantes AZT e 3TC, e contaminação microbiológica residual. Os resultados das análises de pH dos resíduos de detergente não apresentaram diferenças estatisticamente significativas entre as amostras coletadas e seus respectivos brancos analíticos (água purificada). Portanto, sugere-se a implementação de técnicas complentares como análise de Carbono Orgânico Total - TOC. Os resultados da avaliação da qualidade do ar confirmaram a permanência do status de limpeza do ambiente e dos equipamentos nele dispostos. Assim, o procedimento de limpeza, o método analítico e de amostragem foram considerados adequados e aplicáveis à validação de limpeza dos equipamentos de uma produção farmacêutica dedicada à produção de antirretrovirais

Orientador: Eneida de Paula / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-12T15:46:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paula_Eneidade_D.pdf: 7752367 bytes, checksum: 4ac3295742d441a15e315a3d1c9c2c3d (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Detergentes constituem uma das ferramentas mais importantes no estudo de membranas biológicas. A eficiência de um detergente em solubilizar biomembranas e suas proteínas depende de suas propriedades físico-químicas e a solubilização parcial pode resultar em membranas resistentes a detergentes (DRMs). A resistência a detergentes dessas frações membranares constituídas principalmente de colesterol, esfingolipídios e proteínas específicas foi analisada nesse trabalho, usando membranas de eritrócitos humanos. Embora não haja evidências experimentais suficientes pra afirmar que DRMs correspondam aos microdomínios naturais existentes em biomembranas, conhecidos como lipid rafts e que também são enriquecidos em colesterol e esfingolipídios, DRMs são bons modelos para o estudo daqueles. A obtenção de DRMs com uso do detergente octaetilenoglicol mono lauril éter (C12E8) a baixa temperatura (4oC) é descrita pela primeira vez. Os detergentes zwiteriônicos ASB-14, ASB-16 e CHAPS também foram testados, mas falharam no isolamento de DRMs com baixa densidade. DRMs obtidas com C12E8 e com Triton X-100 apresentaram um aumento da razão colesterol/proteína de pelo menos três vezes em relação à membrana original. A proteína flotilina-2, considerada um marcador de lipid rafts, foi detectada em DRMs isoladas com Triton X-100 e em DRMs com C12E8 isoladas a partir de células depletadas de colesterol. Proteínas do citoesqueleto também foram encontradas em DRMs, exceto quando as células foram previamente depletadas de colesterol. Resultados de ressonância paramagnética eletrônica com uso de marcadores de spin do tipo doxil-estearato revelaram maior grau de organização das cadeias acila dos lipídios de DRMs em relação à membrana original, independentemente do detergente utilizado. Nossos resultados também mostraram que DRMs de eritrócitos podem ser também obtidos na temperatura fisiológica (37°C) como mesmo conteúdo de colesterol presente em DRMs isoladas a 4°C. A necessidade do uso de carbonato de sódio no protocolo para obtenção de DRMs sugere fortemente a existência de uma associação eletrostática entre DRMs e o citoesqueleto eritrocitário. / Abstract: Detergents constitute an important tool for the study of cell membranes. The solubilization efficiency of a specific detergent depends upon its physicochemical properties so that detergent-resistant membranes (DRMs) can be obtained as a result of the partial solubilization of biological membranes. In this study DRMs which are structures enriched in cholesterol, sphingolipids and specific proteins, were isolated and characterized from human erythrocyte membranes. Although there are no evidences to support that DRMs correspond to the natural existing microdomains of natural membranes, known as lipid rafts which are also cholesterol and sphingolipid-enriched structures, DRMs are good models for the study of rafts. DRMs from erythrocytes obtained with 8 polyoxyethylene lauryl ether (C12E8) at low temperature (4oC) are described here for the first time. The zwitterionic detergents ASB-14, ASB-16 and CHAPS failed to isolate these low buoyant density fractions. Triton X-100 and C12E8 DRMs presented a cholesterol/protein mass ratio 3 times higher than in the whole membrane. Flotillin-2, a marker of lipid rafts, was confined within the DRM fractions obtained with Triton X-100 and it was partially associated with C12E8 DRMs when erythrocyte cells were previously cholesterol-depleted. Association of membrane-skeleton proteins with DRMs was also observed, except when DRMs were prepared from cholesterol-depleted cells. Results of electron paramagnetic resonance through the use of doxyl stearate spin labels revealed that DRMs are highly ordered structures in respect to the original membrane and that their acyl chain packing is not different if prepared with either Triton X-100 or C12E8. We have also found that DRMs from erythrocytes can be isolated at physiological temperature (37°C), presenting the same cholesterol content as in DRMs prepared at 4°C. The fact that we were only able to prepare DRMs when sodium carbonate was used stronglysuggests the existence of an electrostatic association between DRMs and the membrane-skeleton. / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

O desempenho animal pode ser melhorado pelo incremento na digestibilidade dos alimentos. Um dos elementos neste processo é a acurada caracterização da composição química. Objetivando avaliar quatro métodos para determinar o teor de lignina, foram estudadas cinco gramíneas: Brachiaria brizantha cv. Marandú, Brachiaria brizantha cv. Xaraés (MG-5), Panicum maximum cv. Mombaça, Pennisetum purpureum cv. Cameroon e Pennisetum purpureum cv. Napier. As frações fibrosas da parede celular (PC), fibra em detergente neutro (FDN) e fibra em detergente ácido (FDA) aumentaram conforme as plantas amadureceram, refletindo as mudanças na composição dos componentes da parede celular (celulose, hemicelulose e lignina). Os valores de PC foram superiores aos da FDN indicando solubilização da pectina e outros oligossacarídeos da parede celular na solução de detergente neutro. O método LDA apresentou os menores teores de lignina, evidenciando a solubilização de parte da lignina na solução de detergente ácido. Os resultados de LPer foram maiores que os de LDA, que pode ser devido à oxidação da celulose e pectina pelo permanganato de potássio. Os teores de LK foram maiores que os de LDA possivelmente por contaminação protéica, mas, menores que os de LPer. Os teores de LBA foram maiores que os outros três métodos. A digestibilidade acompanhou, de forma inversa, o estádio de maturidade das plantas. A digestibilidade in vitro apresentou forte correlação negativa com os teores de lignina para todos os métodos, menos para LPer. Encontrou-se um valor de relação de 2,23, entre os métodos LDA e LBA, que, ao ser aplicado, nos teores de LDA, resultou em reta similar ao da LBA. Chama a atenção como este valor de 2,23 é muito próximo ao 2,4 utilizado nas equações B2 e C das frações de carboidratos do \"Cornell Net Carbohydrate & Protein System\" e nas equações do National Research Counsil de 1996, para corrigir o teor de lignina. O método LBA é um método fácil e conveniente para determinar a concentração de lignina em forrageiras e uma boa opção para uso rotineiro nas análises de laboratório. / Animal performance can be improved by enhancing feed digestibility. One of the elements for this process is an accurate characterization of feedstuff chemical composition. With the objective of evaluating four methods used today for lignin determination, five grasses were used: Brachiaria brizantha cv. Marandú, Brachiaria brizantha cv. Xaraés (MG-5), Panicum maximum cv. Mombaça, Pennisetum purpureum cv. Cameroon e Pennisetum purpureum cv. Napier, All fibrous fractions, neutral detergent fiber (NDF), acid detergent fiber (ADF) and cell wall (CW), increased as the plants matured, reflecting the changes in the CW composition (cellulose, hemicellulose and lignin). The values obtained for CW were higher than those obtained for NDF, indicating solubilization of pectin and other cell wall oligosaccharides in the neutral detergent solution. The ADL method produced the lowest lignin values, reflecting lignin solubilization by the acid detergent solution. PerL results were higher than those of ADL, possibly due to hemicellulose and pectin oxidation by potassium permanganate. The values for KL were higher than those of ADL, possibly due to protein contamination, but were lower than PerL values. ABL values were the highest among all methods. Digestibility inversely followed plant maturity throughout the study. In vitro dry matter digestibility showed high negative correlation with lignin contents. A 2,23 ratio between ADL and ABL methods was found, which when applied to ADL values, resulted in a curve similar to ABL method curve. It is interesting to note that, this value of 2,23 is very close to the 2,4 used in carbohydrate fractions B2 and C of the \"Cornell Net Carbohydrate & Protein System\", for the correction of lignin content. The ABL method is easy and convenient for total lignin content determination in forages.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-13T13:20:40Z No. of bitstreams: 1 texto completo.PDF: 275745 bytes, checksum: 730205aa4a057fce53a407a291babbd6 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-13T13:20:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.PDF: 275745 bytes, checksum: 730205aa4a057fce53a407a291babbd6 (MD5) Previous issue date: 2001-10-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Avaliaram-se o consumo, a digestibilidade, o pH e concentração de amônia ruminais e a taxa de passagem em bovinos recebendo dietas contendo feno de capim-tifton 85 (FT) e silagem de milho (SM) em diferentes proporções. Utilizaram-se quatro animais, castrados, com peso médio de 523 kg, fistulados no rúmen, distribuídos em um quadrado latino 4 x 4, recebendo 60% de volumoso e 40% de concentrado, na base da matéria seca. O volumoso consistiu das seguintes proporções: 100 TIF:0 SM; 67 TIF:33 SM; 33TIF:67 SM; e 0 TIF:100 SM (%). Os consumos (kg/dia) de matéria seca (MS), matéria orgânica (MO), matéria orgânica digestível (MOD), proteína bruta (PB), fibra em detergente neutro (FDN), carboidratos totais (CHOT) e digeríveis (CHOD) não foram influenciados pelas diferentes proporções de feno de capim-tifton 85:silagem de milho nas dietas, registrando-se valores médios de 9,2; 8,7; 6,4; 1,1; 3,7; 7,3; e 5,4 kg/dia, respectivamente. O consumo de extrato etéreo (EE) aumentou linearmente com o incremento da silagem de milho nas dietas. As digestibilidades aparentes de MS, MO, PB, EE e CHO também não foram influenciadas pelas diferentes proporções de silagem de milho, registrando-se, respectivamente, valores médios de 71,8; 73,0; 69,5; 69,2; e 73,9%. Para a digestibilidade da FDN, observou-se efeito quadrático, estimando-se valor máximo de 65,2% para dietas contendo 30,98% de silagem de milho. Estimaram- se concentração máxima de amônia de 12,0 mg/100 mL e valor mínimo de pH de 5,98 às 2,44 e 6,82 horas após a alimentação, respectivamente. A taxa de passagem não foi influenciada pelas diferentes proporções de feno:silagem, no volumoso, registrando-se valor médio de 4,2%/hora. Conclui-se que as dietas se equivaleram nutricionalmente. / This work was carried out to assess the intake, digestibility, ruminal pH, ammonia content and rate of passage in steers fed rations containing Tifton 85 bermudagrass hay (T85H) and corn silage (CS) in different proportions of the roughage portion of the diet, which contained 60:40 roughage: concentrate proportions in dry matter basis. Four rumen fistulated steers with 523 kg live weight were used and a 4x4 latin square design was adopted. The roughage portion consisted of: 100 T85H: 0 CS; 67 T85H: 33 CS; 33:67 CS T85H and 0 T85H: 100 CS. The dry matter (DM), organic matter (OM), digestible organic matter (DOM), crude protein (CP), neutral detergent fiber (NDF), total carbohydrates (TC) and total digestible carbohydrates (TDC) intakes were not affected by different T85H:CS proportions and averaged 9.2, 8.7, 6.4, 1.1, 3.7, 7.3 and 5.4 kg/day, respectively. The extract ethereal (EE) intake increased with increasing corn silage proportion in diets. The DM, OM, CP, EE and TC apparent digestibilities were not affected by increasing percentage of corn silage on rations and averaged 71.8, 73.0, 69.5, 69.2 and 73,9%, respectively. The NDF digestibility decreased 0,1454 units to each unit of increasing on corn silage proportion in diets. The N-ammonia maximum content (12.0 mg/100 ml) and minimum value of pH (5.98) were estimated 2.44 and 6.82 hours after feeding, respectively. The rate of passage, which was not affected by changing T85H:CS proportions in the roughage, averaged 4.2 %/hour. It is concluded that the diets are nutritionally similar.

El presente proyecto se desarrolló con el objetivo de analizar la viabilidad de negocio en crear un detergente ecológico elaborado con insumos naturales, en donde se utiliza como principal materia prima la saqta, una raíz andina utilizada por los incas para el lavado de textiles. De esta manera, buscamos contribuir con la conservación del medio ambiente frente un escenario actual de degradación de los recursos naturales. Este modelo de negocio se dirige principalmente a personas interesadas en el cuidado del ambiente, basándonos en la situación actual del incremento de la cantidad de personas que tienden a adquirir productos eco amigables, que se reflejó en el concierge efectuado durante el desarrollo de la idea de negocio. Actualmente llegamos al público objetivo a través de redes sociales, ferias ecológicas y ventas directas, en donde por medio de anuncios en plataformas digitales, demostraciones en las ferias y flyers publicitarios buscamos que el cliente conozca la saqta y sus propiedades para poder incentivar la venta y crear recordación de marca en nuestros clientes. La conclusión a la que se llegó de este proyecto es que el modelo de negocio planteado tiene aceptación en el público objetivo y que, además, genera rentabilidad para los accionistas que se refleja en los estados de resultados. / The present project was developed with the objective of analyzing the business viability in creating an ecological detergent made with natural inputs, where saqta is used as the main raw material, an Andean root used by the Incas to wash textiles. In this way, we seek to contribute to the conservation of the environment against a current scenario of degradation of natural resources. This business model is mainly aimed at people interested in caring for the environment, based on the current situation of the increase in the number of people who tend to acquire eco-friendly products, which was reflected in the concierge made during the development of the idea of deal.   Currently we reach the target audience through social networks, ecological fairs and direct sales, where through advertisements on digital platforms, demonstrations at fairs and advertising flyers we seek that the client knows the saqta and its properties in order to encourage sales and create brand reminder in our customers. The conclusion that came from this project is that the proposed business model has acceptance in the target audience and generates profitability for shareholders that is reflected in the income statements. / Trabajo de investigación

Orientador: Ronivaldo Rodrigues da Silva / Resumo: Atualmente, a avicultura é um dos setores de grande impacto na economia brasileira. Nos últimos anos, tem sido observado um aumento na produção de frangos de corte, fazendo com que este segmento da indústria gere toneladas de queratina com o descarte de penas. Isso aponta para a necessidade de degradar este material que emerge como um problema ambiental. Neste cenário, as enzimas queratinolíticas têm despertado interesse biotecnológico devido a peculiar capacidade para a degradação de queratina e a possibilidade de aplicar o hidrolisado protéico para suplementação de ração animal e uso como biofertilizantes. Desta forma, neste trabalho, nós propomos prospectar queratinases pela bactéria Citrobacter diversus e o fungo Coriolopsis byrsina e, em seguida, investigar as características bioquímicas destas enzimas, a fim de propor aplicação na degradação de penas de frango. Em nossos resultados, a bactéria C. diversus foi capaz de degradar quase completamente as penas de frango (0,5%) em meio submerso após 36 h de fermentação. O estudo com o extrato enzimático mostrou máxima atividade caseinolítica a pH 9-10,5 e 50-55 ºC, e queratinolítica a pH 8,5-9,5 e 50 ºC. Em destaque, conforme a estabilidade em incubação por 1 h a 50ºC, foi detectado aproximadamente 50% e 100% da atividade queratinolítica e caseinolítica, respectivamente. Sob estabilidade a pH por 48 h a 4ºC, o extrato enzimático manteve maior atividade na faixa de pH 6-8. A atividade caseinolítica foi inibida por EDTA e PMSF,... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Currently, poultry is one of the sectors of great impact on the Brazilian economy. In recent years, there has been an increase in the production of broilers, causing this segment of the industry to generate tons of keratin with the disposal of feathers. This points to the need to degrade this material, which emerges as an environmental problem. In this scenario, keratinolytic enzymes have aroused biotechnological interest due to the peculiar capacity for the degradation of keratin and the possibility of applying protein hydrolyzate to supplement animal feed and use as biofertilizers. Thus, in this work we propose to prospect keratinases for the bacterium Citrobacter diversus and the fungus Coriolopsis byrsina and, next, to investigate the biochemical characteristics of these enzymes, in order to propose application in the degradation of chicken feathers. In our results, the bacterium C. diversus was able to degrade chicken feathers almost completely (0.5%) in submerged medium after 36 h. The study with the enzymatic extract showed maximum caseinolytic activity at pH 9-10.5 and 50-55 ºC, and keratinolytic activity at pH 8.5-9.5 and 50 ºC. Notably, after enzyme pre-incubation for 1 h at 50 ºC, approximately 50% and 100% of keratinolytic and caseinolytic activity were detected, respectively. Under pH stability for 48 h at 4ºC, the enzyme extract maintained greater activity in the pH 6-8 range. Caseinolytic activity was inhibited by EDTA and PMSF, and keratinolytic activity was i... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre