Orientador: Katia Denise Saraiva Bresciani / Banca: Carlos Noriyuki Kaneto / Banca: Alessandro Francisco Talamini do Amarante / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de Cryptosporidium spp. em crianças e seus respectivos cães e gatos de estimação residentes no Município de Andradina, SP, por meio do Teste de Imunoadsorção Enzimática (ELISA). Durante o período de janeiro a agosto de 2009, foram analisadas 188 amostras fecais de crianças, bem como de seus respectivos cães e gatos de estimação para pesquisa de Cryptosporidium spp. O teste quiquadrado (χ2) foi utilizado para verificar a associação entre as variáveis: sexo, idade, raça e consistência fecal, com nível de significância de 5%. Pelo ELISA foi detectado Cryptosporidium spp. em em amostras fecais de 2,1% (4/188) das crianças com idade inferior a sete anos. Entre os animais examinados, 6,8% (9/132) dos cães e 5,4% (3/56) felinos apresentaram amostras positivas para este coccídeo. Tanto nas crianças como nos animais não houve influencia do sexo e da idade na detecção do Cryptosporidium spp. sendo que nestes últimos a raça também não influenciou (P> 0,05). Neste trabalho foi evidenciada uma baixa ocorrência deste parasito nas crianças, assim só será possível determinar com precisão a relação entre a infecção das crianças com dos animais, com a posterior caracterização molecular deste protozoário. / Abstract: The objective this study was to evaluate the occurrence of Cryptosporidium spp. in children and their dogs and pet cats in the city of Andradina, SP. through Test-linked immunosorbent assay (ELISA), during the period from January to August 2009, we analyzed 188 fecal samples from children, as well as their dogs and pet cats for detection of Cryptosporidium spp. The chi-square test (χ2) was used to verify the association between gender, age, race and fecal consistency, with a significance level of 5%. Using ELISA was detected Cryptosporidium spp. in stool samples in 2.1% (4/188) of children under the age of seven years. Among the animals examined, 6.8% (9/132) of dogs and 5.4% (3/56) cats had positive samples for this coccidium. Both children and animals there was no influence of sex and age on the detection of Cryptosporidium spp. being that in these last race did not influence (P> 0.05). This study demonstrated a low occurrence of this parasite in children, so only you can accurately determine the relationship between the infection of children with the animal with the molecular characterization of this parasite. / Mestre

Orientadora: Rosangela Zacarias Machado / Banca: Ana Patrícia Yatsuda Natsui / Banca: Carlos Wilson Gomes Lopes / Banca: Aramis Augusto Pinto / Banca: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Resumo: A neosporose é uma doença causada pelo protozoário Neospora caninum, e causa um grande impacto econômico na pecuária mundial. Sabe-se que muitos mamíferos são considerados hospedeiros intermediários, e que recentemente, foi confirmado o papel das aves no ciclo de vida de N. caninum como hospedeiros intermediários. O presente trabalho teve como finalidade estudar o ciclo evolutivo e patogenia de N. caninum em cães alimentados com ovos embrionados de Gallus gallus domesticus previamente inoculados com taquizoítas. Realizou-se diariamente o exame de fezes dos animais, pela técnica de flutuação, constatando a presença de oocistos nas fezes a partir de 7 dia apósinfecção. Anticorpos anti- N. caninum foram pesquisados semanalmente nos cães pela RIFI, sendo observados anticorpos a partir dos 14dai. Semanalmente um cão foi eutanasiado e durante a necropsia observou-se em todos os cinco animais, aumento dos linfonodos mesentéricos e das tonsilas, presença de muco no duodeno e jejuno e hepatoesplenomegalia, com hiperplasia de polpa branca do baço. Pelo exame histopatológico detectou-se reatividade dos linfonodos, lesões no fígado, coração, pulmão, baço e rim. Pelas técnicas de imunoistoquímica, imunofluorescência indireta dos tecidos e no Real-time PCR, observou-se a presença do parasito. Os resultados obtidos apontam que, os ovos embrionados infectados pelo parasito mostraram eficiência como modelo experimental para infectar cães, que eliminaram oocistos nas fezes, mesmo não apresentando sinais clínicos da neosporose. Ademais, os cães infectados apresentaram prematura soroconversão pela prévia administração de bicarbonato de sódio e o uso das técnicas citadas tornou possível a detecção do parasito nos tecidos analisados. / Abstract: Neosporosis is a protozoan disease caused by Neospora caninum and affects the reproductive system in cattle worldwide. Infection by the parasite has been widely described in mammals, and recently the role of birds in its lifecycle was confirmed as intermediate hosts. This work aimed to study the life cycle of N. caninum and the pathogeny in dogs that were fed with embryonated eggs inoculated with tachyzoites. The tested dogs were followed up for oocyst shedding, by flotation technique, and it was detected at 7 days after infection. Antibodies anti- N. caninum were detected at 14dai. Once a week, one dog was euthanized and at the necropsy alterations was observed on the mesenteric lymph nodes and tonsils, presence of mucus at duodenum and jejunum portions, and hepatosplenomegaly. At the histopathological examination lymph nodes alterations were noticed ranging from moderate to intense. In addition, there were alterations in liver, heart, lung, spleen and kidney. The parasite was detected by immunochemistry and indirect immunofluorescense tests as well as by Real-time PCR. The results herein presented suggest that inoculated embryonated eggs showed to be an efficient model to infect dogs, because of shedding oocysts, and no clinical alterations. Moreover, the infected dogs presented earlier seroconvertion because of sodium bicarbonate solution administration and the parasite detection in the analyzed tissues was successful by the techniques used. / Doutor

Orientador: Alexandre Lima de Andrade / Banca: Adriana Morales / Banca: Flávia de Rezende Eugênio / Resumo: Objetivo: Este trabalho teve por objetivos: avaliar a eficácia da técnica da dacriocistorrinostomia e sua evolução clínica posoperatória, bem como a microbiota conjuntival, a longo prazo. Métodos: Foram incluídos 12 cães de diferentes raças, sexo e idade, sendo 23 olhos operados. Observaram-se os sinais clínicos de: blefarospasmo, secreção e hiperemia conjuntival, ceratite ulcerativa e o teste de Jones aos sete, quinze, trinta, sessenta, cento e vinte e duzentos e quarenta dias de posoperatório. Também foi avaliada a microbiota conjuntival e nasal no momento do ato cirúrgico e conjuntival aos sessenta, cento e vinte e duzentos e quarenta dias de posoperatório. As amostras foram colhidas com auxilio de swabs e transportadas ao laboratório em meio de transporte. Foi investigada a presença de bactérias anaeróbicas, aeróbicas e fungos. Resultados: O blefarospasmo foi observado em 27,3% (n=3) sob a forma severa no olho direito; o mesmo ocorreu com a ceratite ulcerativa, a secreção conjuntival e a hiperemia ocular que se apresentaram de forma semelhante, sendo severa nos momentos iniciais da avaliação e regredindo nos momentos subsequentes. O teste de Jones foi positivo em apenas um olho direito antes do tratamento cirúrgico, e ao término das avaliações apresentou positividade de 63,3% (n=7) e 58,3% (n=7) nos olhos direito e esquerdo, respectivamente. Observou-se predomínio de bactérias Gram-positivas (66,7%, n=8) na microbiota nasal antes da instituição do tratamento cirúrgico. A microbiota conjuntival, no mesmo momento, era constituída em 66,5% (n=8) por bactérias Gram-negativas e, ao longo da evolução clínica, houve um equilíbrio entre ambos os tipos de bactérias. Ao final da observação clínica ocorreu uma modificação com predomínio de bactérias Gram-positivas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objective: This study aimed to evaluate the efficacy of the technique of dacryocystohrinostomy and postoperative clinical course, as well as the conjunctival microbiota in the long-term. Methods: Were included twelve dogs of different breeds, sex and age, and 23 yes were operated. Clinical signs such as: blepharospasm, secretion and conjunctival hyperemia, ulcerative keratitis and Jones test were evaluated at seven, fifteen, thirty, sixty, a hundred twenty and two hundred and forty days of postoperative. Were analyzed the nasal and conjunctival microbiota at the time of surgery and the conjunctival microbota at sixty, a hundred twenty and two hundred and forty days postoperative. The samples were collected with the aid of swabs and taken to the laboratory in a bacterial transport medium. It was investigate the presence of anaerobic and aerobic bacteria and fungi. Results: The blepharospasm was observed in 27,3% (n=3) under severe form in the right eye; the same happened with ulcerative keratitis, conjunctival secretion and ocular hyperemia, that had similarly been severe in the early stages of evaluation and regressing in subsequent moments. The Jones test was positive in only one right eye before surgery, and at the end of the evaluation was positive in 63,3% (n=7) and 58,3 (n=7) in the left and right eyes, respectively. There was a predominance of Gram positive (66,7%, n=8) in the nasal microbiota before setting surgical treatment. The conjunctival microbiota, at the same time, it was establish in 66,5% (n=8) by Gram negative and, along the clinical course, there was a balance between both types of bacteria. At the end of a clinical observation there was a change with a predominance of Gram positive (85%, n=9). Conclusion: The dacryocystohrinostomy was able to promote the formation... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Resumo: A diabetes mellitus (DM) é uma das endocrinopatias mais comuns em cães, sendo o tratamento um desafio. As fibras dietéticas têm sido relatadas como benéficas no auxílio do controle glicêmico de cães diabéticos, mas nenhum trabalho faz referência aos efeitos de diferentes fontes de amido sobre a resposta glicêmica nesses animais. Neste trabalho, objetivou-se estudar os efeitos de duas diferentes fontes de amido (arroz e sorgo) em dietas com teor moderado de fibra sobre o controle glicêmico de cães com DM naturalmente adquirido em dois esquemas de manejo alimentar e insulinoterapia. Foram produzidas duas rações extrusadas, uma com arroz, amido de resposta glicêmica rápida, e outra com sorgo e lentilha, amidos de respostas glicêmicas lentas. Estas foram oferecidas a 10 cães com DM naturalmente adquirido, tratados com insulinoterapia, em dois locais experimentais (cinco cães em cada local). No primeiro local, os cães receberam alimento e insulina a cada 12 horas (manejo 1), e no segundo local, receberam insulina a cada 12 horas e alimento três vezes ao dia (manejo 2). Todos os cães receberam as duas dietas por um período de 60 dias, em um delineamento do tipo "cross-over". Foi avaliado nos animais a curva glicêmica pós-prandial de oito (manejo 2) ou 12 horas (manejo 1). No manejo 1, a glicemia média, mínima (p<0,05), máxima e área abaixo da curva de glicose (p<0,1) foram significantemente mais baixas mediante consumo da ração sorgo. No manejo 2, não houve efeito de dieta em nenhum dos parâmetros avaliados. / Abstract: Diabetes mellitus (DM) is one of the most common endocrinopathies in dogs and its treatment is still challenging. Dietetic fibers are considered benefic for the glycemic control of diabetic dogs, but there are no studies with starch sources of different glycemic responses on treatment of these dogs. The aim of this study was to evaluate the effects of diets with starch sources presenting different glycemic responses, associated with moderate fiber content used on two different nutritional managements on the control of diabetes in dogs. Two extruded diets were manufactured, one with rice, a high glycemic response starch source, and one with sorghum, a low glycemic response starch source. Ten dogs with DM treated with insulin therapy were fed with each diet for two months in a crossover design. In the first local, five dogs received insulin and food every 12 hours (management 1), and in the second local, five dogs received insulin every 12 hours, but were fed three times a day (management 2). Variables assessed were glycemic curve for 8 hours (management 1) or 12 hours (management 2), CBC, biochemical profile, and urinalysis. In management 1, dogs fed the sorghum based diet showed lower mean and minimum blood glucose (p<0.05), and lower maximum blood glucose and area under the glucose curve (p<0.1) than dogs fed rice based diet. The area under the glucose increment was higher when dogs consumed sorghum diet. In management 2, there was no effect of diet in the variables assessed in diabetic dogs. / Orientador: Aulus Cavalieri Carciofi / Coorientadora: Silvia Ricci Lucas / Banca: Francisco de Assis Ferreira / Banca: Ricardo Duarte Silva / Banca: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Banca: Ricardo Souza Vasconcellos / Doutor

Orientadora: Mirela Tinucci Costa / Banca: Renée Laufer Amorim / Banca: Carlos Roberto Daleck / Banca: Felipe Augusto Ruiz Sueiro / Banca: Noeme Sousa Rocha / Resumo: Tendo em vista a expressão da proteína associada à resistência a múltiplas drogas (MRP1), da enzima glutationa-S-transferase pi (GSTpi) e da proteína p53 com o desenvolvimento da resistência a múltiplas drogas (RMD) nas células neoplásicas, objetivou-se neste estudo avaliar a expressão desses três marcadores, pela imunoistoquímica, em 68 espécimes de neoplasias caninas, incluindo tumores venéreos transmissíveis (TVTC), mastocitomas, carcinomas mamários e de glândula hepatóides e linfomas. Os espécimes foram subdivididos em: TVT, Tumor venéreo transmissível (n=9); TVTR, TVTs resistentes à quimioterapia (n=5); MASTI, mastocitomas cutâneos grau I (n=8); MASTIII, mastocitomas cutâneos grau III (n=8); CARM, carcinomas mamários (n=14); CARH, carcinomas de glândulas hepatóides (n=8); LINFB, linfomas de células B (n=9); LINFT, linfomas de células T (n=7). Resultados mostraram que as expressões da MRP1, GSTpi e p53 foram observadas em 38 (55%), 43 (62,3%) e 50 (72,4%) espécimes, respectivamente. Em 27 (39,1%) espécimes houve coexpressão dos três marcadores. A expressão da MRP1, GSTpi e p53 isoladas ou associadas pôde ser observada em todos os grupos experimentais, exceto o grupo TVTC que não expressou a MRP1. A localização da marcação nas células tumorais foi citoplasmática para MRP1 e nuclear e/ou citoplasmática para a GSTpi e p53. Não foi observada diferença na expressão dos marcadores de resistência a quimioterapia em relação à resistência a quimioterapia (TVT e TVTR), gradação histológica (MASTI e III) e imunofenótipo (LINFB e T). Há relação direta entre o aumento da expressão da MRP1 e da GSTpi nos linfomas T. / Abstract: Multidrug resistance in tumors involves the expression of multidrug resistance protein-1 MRP1, enzyme glutathione-S-transferase pi (GSTpi), and p53 protein. Therefore, this study aimed at evaluating the expression of these three markers, by immunohistochemistry, in neoplasic cells. Sixty-eight canine tumor samples, including transmissible venereal tumor (TVTC), cutaneous mast cell tumor, mammary carcinoma, hepatoid gland carcinoma, and lymphoma were studied. Samples were assigned into one of the following subgroups: TVT, transmissible venereal tumor (n=9); TVTR, chemoresistant TVT (n=5), MASTI, grade-I cutaneous mast cell tumor (n=8); MASTIII, grade-III cutaneous mast cell tumor (n=8); CARM, mammary carcinoma (n=14); CARH, hepatoid gland carcinoma (n=8); LINFB, B-cell lymphoma (n=9); LINFT, T-cell lymphoma (n=7). We observed that 38 (55%), 43 (62.3%), and 50 (72.4%) samples expressed MRP1, GSTpi, and p53, respectively. Co-expression of the three markers was present in 27 (39.1%) samples. Expression of MRP1, GSTpi, and p53 alone or associated could be observed in all experimental groups, except for TVT group which did not express MRP1. Staining in the tumor cells was cytoplasmatic to MRP1, and both nuclear and cytoplasmatic to GSTpi and p53. No significant difference in the expression of the markers could be observed with relation to chemoresistance (TVT and TVTR), histological grade (MASTI and MASTIII) and immunophenotype (LINFB and LINFT). A direct relation was present between the raise of the expression of MRP1 and GSTpi in T cells lymphoma. / Doutor