Orientador: Telma Teixeira Franco / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-27T08:22:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ribeiro_AnaPauladosSantos_M.pdf: 2171899 bytes, checksum: 7cac906a30aa8e097dcc2c5be3d20c69 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Enzimas quitinolíticas, como as quitinases, presentes nos reinos animal, vegetal e fúngico, constituem um importante grupo de enzimas associadas com o metabolismo e degradação de substratos insolúveis como a quitina. Neste trabalho foi realizado um estudo para a verificação da influência da fonte de carbono livre (glicose e lactose) e das condições de cultivo (agitação e pH) na produção de quitinase da linhagem de Trichoderma sp. T 6. As fermentações foram realizadas a 27°C, retirando-se amostras a cada 12 horas ao longo de 72 horas de fermentação para determinação da atividade quitinolítica, proteolítica, açúcares redutores e pH. Foi avaliado o efeito das três variáveis sobre a produção de quitinase por Trichoderma sp. T6. As melhores condições encontradas para o meio contendo glicose, foram agitação de 200 rprn, pH 6,0,0,3% de glicose atingindo uma média de produção de enzima de 1,92 U/rnL. Para os meios de cultura contendo lactose, a máxima produção de quitinase se deu nos ensaios 5,6 e 7 (0,5% lactose) com 0,76,0,75 e 0,85 U/rnL, respectivamente. Foi observada formação de proteases desde o início da fermentação nos ensaios contendo lactose. A hidrólise enzimática com o caldo bruto do ensaio de máxima produção quitinolítica foi acompanhada por 8 horas produzindo dois oligossacarídeos predominantes, o mono e o di-acetilquitobiose / Abstract: Chitynolytics enzymes, as chitinases, constitute an important group of enzymes related with metabolism and degradation of insoluble substract as chitin present in animal, plants and fungi. In this work studies of carbon source (glucose and lactose) and cultivation conditions (agitation and pH) to produce chitinase by Trichoderma sp. T6 were carried out. The effect of carbon source, agitation and pH upon chitinase production by Trichockrma sp. T6 was investigated. Fermentations were performed at 27°C, and samples were withdraw every 12 hours during 72 hours of fermentation in order to assay both chitinolytic and proteolytic activity, as well as reducing sugar and pH. The optimal conditions for chitinase production found in glucose medium were 200 rpm (agitation), 6,0 (pH) and 0,3% (glucose) achieving an average value of 1,92 V/roL. Liquid culture medium with lactose showed maximum production of chitinase at 5th, 6th and 7th experiments (0,5% lactose) with 0,76, 0,75 and 0,85 V/roL, respectively. lt was observed that proteases were formed at beginning of fermentation in the experiments using lactose. Chitin hydrolysis by the raw broth of maximum chitinolytic activity was followed for 8 hours and the two predominant oligosaccharides, were mono and di-acetylchitobiose, respectively / Mestrado / Desenvolvimento de Processos Químicos / Mestre em Engenharia Química

Orientadores : Korandin Metze, Rachel Lewinsohn / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T20:34:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Morandin_RosanaCelestina_D.pdf: 7816307 bytes, checksum: 98964942084f290c6dcfbb012ce6e491 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: A síndrome da caquexia tumoral é um distúrbio sistêmico muito grave que envolve alterações fisicas e metabólicas, podendo estar presente em até 80% dos portadores de tumor. Muitos órgãos e tecidos não acometidos diretamente pelo tumor podem apresentar alterações graves na síndrome. Os tecidos mais intensamente atingidos são o muscular esquelético e o adiposo. Embora haja uma vasta literatura sobre o assunto, estudos clínicos e experimentais sobre os vasos pré-existentes no hospedeiro são muito raros. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar as possíveis alterações morfológicas e enzimáticas da aorta de ratos portadores uma neoplasia induzida pelo metil-colantreno (Sarcoma), nos estágios mais avançados da doença. Exames bioquímicos e hematológicos foram realizados para avaliar o perfil clínico dos animais. As constantes cinéticas da SSAO (Constante de Michaelis - Km e Velocidade Máxima - Vmax) foram calculadas utilizando-se a benzilamina como substrato. As análises morfológicas das aortas foram feitas através de medidas morfométricas e de estudos de ultraestrutura. Espessura da camada média, densidade de núcleos, diâmetro interno menor, área luminar e número de lâminas elásticas foram quantificadas. Os ratos portadores da neoplasia apresentaram sinais de um desgaste fisico generalizado, com baixo peso, anemia, hipoalbuminemia, hipoglicemia, distúrbios eletrolíticos e acidose metabólica. A V max da SSAO mostrou uma queda estatisticamente significativa de 35%, sem que houvesse diferença detectável no Km. A medida de espessura da camada média da aorta mostrou-se significativamente menor (Controle=50,04 :I:: 2,54 e Sarcoma=38,37:1:: 4,26 Jlm, p<O,Ol). O exame da ultraestrutura do vaso revelou atrof1a das células de músculo liso, com uma considerável redução do tamanho celular, uma cromatina nuclear mais densa e irregularidades nos limites citoplasmáticos. Os resultados deste estudo permitiram concluir que as alterações morfológicas. e o comportamento da SSAO nas aortas dos animais com a neoplasia são semelhantes às alterações descritas em aortas de ratos senis / Abstract: Cancer cachexia is a systemic disorder composed by physical wasting features and metabolic disturbance. Although skeletal muscle and fat tissue are the most affected structures, atrophy of heart, spleen, liver and kidney has also been described. Clinical and experimental data about alterations due to cachexia of the pre-existing host vessels are rare. The purpose of this study was to evaluate possible morphological and enzymatic alterations in the aorta of rats bearing a methylcholanthrene-induced sarcoma (MCA) in advanced stage. Hematological and biochemical parameters were analysed in order to evaluate animal conditions. Lumen cross-sectional area, media thickness, lesser inside lumen diameter, elastic laminae number and nuclear density were the morphometric parameters measured in the aorta. Ultrathin sections were examined by transmission electron microscopy. Semicarbazide-sensitive amine oxidase (SSAO) kinectics was determined by the deamination [14C] Benzylamine in homogenates ofrat aorta. Tumor bearing rats presented signs of general physical wasting with weight loss, anemia, hypoalbuminemia, hypoglycemia, electrolyte disturbance and metabolic acidosis. The SSAO VIDBX was 35 % lower in MCA aorta rats (p<O,05) but the Km was not different between the groups. Morphometry showed significant decrease of the thickness of the media (Control=50,04 :I: 2,54 and MCA=38,37 :I: 4,26 f.1m, p<O,Ol). Electron microscopy showed atrophy of smooth muscle cells, with a considerable reduction of cells size, a more dense nuclear chromatin and irregularities in cytoplasmatic outlines. In conclusion, the biochemical and morphological alterations found in the aorta of tumor bearing rats are very similar to those described for aging rats / Doutorado / Anatomia Patologica / Doutor em Ciências Médicas

Orientadores: Hilary Castle de Menezes, Javier Telis Romero / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-27T23:00:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_PatriciaMariaOnofreColombo_D.pdf: 23527217 bytes, checksum: 8fbc5fcc7f4500814379551702da80cb (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: O objetivo deste trabalho foi analisar a cinética dos parâmetros de qualidade do suco de laranja concentrado congelado padrão e dos diferentes tratamentos: tratado enzimaticamente por 1O, 20 e 35 minutos com enzima pectinolítica, e homogeneizado. Com a utilização dos tratamentos alternativos, produziu-se suco em diferentes concentrações (65,66,67,68,69,70, 71e 72°Brix) e armazenou-se em cinco temperaturas (-15, -10, -5, Oe 5°C) durante o período de um ano. Verificou-se redução significativa da viscosidade do suco de laranja tratado concentrado congelado, sendo que a porcentagem variou com o tratamento aplicado e com o tempo no caso do enzimático. Foi constatado estatisticamente através do coeficiente de correlação que o modelo reológico que melhor se adaptou aos dados do suco padrão e do tratado e foi o de Herschel - Bulkley. A energia de ativação da viscosidade aumentou com a elevação da concentração. A degradação do ácido ascórbico para os diferentes tempos de tratamento enzimático e para o tratado por homogeneização foi similar quando comparados entre si. Constatou-se que os dados obtidos seguiram uma reação de primeira ordem. A energia de ativação da vitamina C sofreu um decréscimo com a elevação da concentração. Os tratamentos alternativos possibilitaram alcançar concentrações maiores, sem provocarem problemas de bombeamento na linha de processo e o suco manteve suas qualidades sensoriais. / Abstract: The objective of this work was to compare the behavior of standard concentrated frozen orange juice with that of two different treatments: that treated enzymatically for 10, 20 and 35 minutes with a pectinolytic enzyme, and a homogenized sample. With the use of the alternative treatments, juice was produced at different concentrations (65, 66, 67, 68, 69, 70, 71and 72°Brix) and stored at five temperatures (-15, -10, -5, Oand 5°C) for one year. A significant reduction in the viscosity of the frozen concentrated orange juice non standard was verified, and the percentage varied according to the process applied and the time, in the case of the enzyme treatment. Using the correlation coefficient that the model that better it adapted to the data it. was Herschel - Bulkley. The activation energy of the viscosity increased with the elevation of the concentration. The degradation of the ascorbic acid for the different times of enzymatic treatment and for the homogeneization it was similar when compared to each other. It was verified that the obtained data followed a reaction of first order. The activation energy of the vitamin C suffered a decrease with the elevation of the concentration. The alternative treatments facilitated to reach high concentrations, without pumping problems in the process line and the juice maintained its sensorial qualities. / Doutorado / Doutor em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Nelson Horacio Pezoa Garcia / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-28T00:47:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Soares_MarinaldadaSilva_M.pdf: 21644495 bytes, checksum: 0334bb558b7b61f8494c0d042773d479 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A fermentação das sementes de cacau é uma atividade indispensável para o desenvolvimento dos precursores do aroma de chocolate. Durante essa etapa a polpa que envolve as sementes é metabolizada por microrganismos, produzindo, principalmente, etanol e ácido acético, que são absorvidos pelos cotilédones causando a morte da semente e promovendo alterações físico-químicas importantes na constituição do sabor. Entre essas, pode-se ressaltar a formação de aminoácidos e açúcares redutores livres, oxidação de antocianinas, e complexação de aminoácidos com compostos fenólicos formando quinonas, contribuindo assim para a redução do amargor e adstringência das amêndoas. Diante da necessidade do melhoramento do sabor do cacau, este trabalho visa a utilização da enzima polifenoloxidase (PPO) provinda da polpa de pinha (Annonna squamosa L.), que atua na fase primária da fermentação e da enzima protease, na forma comercial, denominada "Protezyn Flavour", a fim de reduzir a concentração de compostos responsáveis pelo amargor e adstringência e aumentando a disponibilidade de aminoácidos livres para as reações de desenvolvimento de sabor. As enzimas foram adicionadas após 48 horas e 96 horas do processo fermentativo, tempos em que as condições de pH e temperatura se tornaram mais favoráveis. A enzima protease foi adicionada nas concentrações de 0,5% e 0,75% em relação ao teor de proteína presente na semente,. A polpa de pinha madura rica em PPO foi adicionada nas concentrações de 5,0% e 7,5% em relação à massa total de sementes de cacau com polpa mucilaginosa. Foram realizadas oito fermentações de sementes de cacau em duplicata: três com adição de polpa de pinha madura, três com adição da enzima protease e duas sem aplicação de enzima, sendo que em uma destas adicionou-se água na mesma proporção das soluções com enzima protease. As fermentações foram realizadas todas simultaneamente em caixas de isopor com capacidade aproximadamente de 6 litros e com orifícios, no fundo, de 0,5cm de diâmetro, espaçados a cada 2,5cm para o escoamento do mel e em uma sala climatizada com temperatura média de 33°C e umidade relativa ao redor de 65%, condições similares àquelas das regiões onde se cultiva e fermenta o cacau. Os nibs foram secados e moídos para depois serem desengordurados. Foram realizadas análises no pó de cacau desengordurado para a quantificação de fenóis totais, taninos, antocianidinas, flavan-3-ois e aminoácidos livres. Os experimentos tratados com PPO tiveram redução de 18,64 e 20,07% de fenóis totais. Houve aumento na concentração de aminoácidos livres na faixa de 43,8-79,74%. A torração foi efetuada sobre os nibs com granulometria entre 3-6 mm, em lotes de 250 g, em forno elétrico rotativo à temperatura de 150°C na camisa do aparelho. Foram utilizados três tempos de torração para cada experimento: 36, 38 e 40 minutos. Os nibs torrados foram refinados (liquor) para a formulação da mistura para realização dos testes sensoriais. Os tratamentos com adição de 0,5% da enzima comercial "Protezyn flavour" e adição de 5,0% de polpa de pinha, após 96 horas de fermentação, foram considerados os melhores, de acordo com os resultados analíticos. / Abstract: The fermentation of cocoa beans is an indispensable activity for the development of the precursors of chocolate flavor. During this stage the pulp that surrounds the beans is metabolized by microrganisms, producing, mainly, ethanol and acetic acid which are absorbed by the cotyledons resulting in the death of the seed, with several physical-chemical changes that will have important an influence on the flavor. Among these the synthesis of amino acids and tree reducing sugars, anthocyanin oxidation and of amino acid complexation with fenolics compounds, giving rise to quinones. Ali of these contribute to the reduction of the bittemess and astringency of the beans. In order to improve of the cocoa flavor, this work deals with the use of the enzyme polyphenoloxidase (PPo) extracted trom ripe custard apple (Annona squamosa L.) pulp, which acts in the primary phase of fermentation, and of the commercial enzyme protease, known as " Protezyn Flavour ", with the aim of reducing the concentration of compounds responsible for the bittemess and astringency, and of increasing the availability of free amino acids for the reactions of flavor development. The enzymes were added after 48 hours and 96 hours of the fermentation processoThe enzyme protease was added in the concentrations of 0.5% and 0.75% of the bean protein content. The ripe custrad apple pulp, rich in the enzyme PPO, was added in the concentrations of 5.0% and 7.5% of the total weight of wet beans. Eight fermentations were carried out: three with the addition of ripe custard apple pulp, three with the addition of the enzyme protease and two with no enzyme application, and in one of these fermentations water was added in the same proportion as the solutions with the enzyme protease. The fermentations were carried out simultaneously in fiberglass boxes with a capacity for 6 liters, with holes in the botton, spaced at 2.5cm for the drainage of exsudates. The boxes were placed in an acclimatized room with a meam temperature of 33°C and reiative humidity of 65%, conditions similar in those of the areas where cocoa is cultivated and fermented. The nibs were dried and ground and then defatted. Analyses were carried out on the defatted cocoa powder for the quantification of total phenols, tannins, anthocyanidins, flavan-3-ols and free amino acids. The experiments with PPO showed a reduction of form 18.64 and 20.07% in total phenols. There was na increase in the concentration of free amino acids in the range from 43.80 -79.74%. Roasting was effected on nibs in the range of size from 3 to 6 mm, in portions of 250 g, in a rotative electric oven at a temperature of 150°C. For each experiment three different times of roasting were applied: 36, 38 and 40 minutes. The roasted cocoa nibs were ground and refined for the formulation of the mixture used in the sensory tests. According to the analyses the best results were obtained with the treatments with the addition of 0.5% of the enzyme protease and 5.0% of the ripe custard apple pulp, allowing for 96 hours of fermentation. / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientador : Maricilda Palandi de Mello / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T02:01:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_Marcelade_D.pdf: 7604801 bytes, checksum: 0b23f9a3d92f5bcf70fdc90d708e3c03 (MD5) Previous issue date: 2001 / Doutorado / Genetica Humana e Medica / Doutor em Genetica e Biologia Molecular

Orientador : Hiroshi Aoyama / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T05:29:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cavagis_AlexandreDonizetiMartins_M.pdf: 4418052 bytes, checksum: 75d7494a0289b525b36b334f41a92428 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: O objetivo central do presente trabalho foi avaliar a estabilidade conformacional da fosfatase ácida de sementes quiescentes de soja. Através de estudos de desnaturação térmica, verificou-se uma temperatura de transição (TM) de 65 oC que mostra uma resistência incomum frente à temperatura. Observaram-se efeitos da concanavalina A (lectina) e de molibdato (inibidor) no perfil de desnaturação enzimática com alterações na TM. A desnaturação enzimática por dodecilsulfato de sódio (SDS) foi muito pouco significativa em presença do fosfoenolpiruvato (PEP) como substrato. Essa insensibilidade ao agente desnaturante pode ser explicada pela alta afinidade apresentada pela fosfatase em relação ao substrato em questão. A desnaturação térmica da enzima em presença do PEP revelou que este substrato produz uma mudança significativa no perfil de desnaturação, induzindo uma diminuição na temperatura de transição (TM) que representa um efeito antagônico àquele observado na desnaturação por SDS. A análise de aminoácidos revelou informações valiosas que explicam propriedades como o pI relativamente baixo (5,0), e o número expressivo de resíduos ácidos pode estar relacionado à estabilidade conformacional da enzima. Os estudos sistemáticos da desnaturação reversível por uréia e cloreto de guanidínio (GuaCl) foram realizados utilizando-se a fluorescência como técnica de monitoramento. O cálculo da Estabilidade Conformacional (deltaG H2O) foi feito tomando-se os deslocamento nos comprimentos de onda de máxima emissão de fluorescência como parâmetro e o valor obtido foi de 2,48 kcal/mol -1. Os cálculos de centro de massa foram tomados em função da concentração do agente desnaturante em ambos os casos. A análise de carboidratos, realizada por HPLC revelou a presença de manose, glicosamina e galactosamina e a remoção da fração de carboidratos não foi possível mesmo após tratamento com 300 mU das endoglicosidases endo-H, endo-F e endo-F1 / Abstract: The central aim of the present work was to evaluate the conformational stability of an isoform of soybean seeds acid phosphatase. Through thermal denaturation studies, the transition temperature (TM) value determined (65 oC), indicated an unusual resistance of the enzyme under high temperatures. Effects of strongly binding compounds such as concanavalin A (lectin) and molybdate (inhibitor) on the denaturation profile and transition temperature values were also observed. Enzymatic denaturation by sodium dodecyl sulfate (SDS) was insignificant in presence of phosphoenolpyruvate (PEP) which might be explained by the high affinity of the enzyme for this substrate. Thermal denaturation studies in presence of PEP showed both a significant change on the denaturation profile and a reduction on the transition temperature value. Aminoacid analysis contributed to important informations that are in accordance with some properties of the enzyme such as the relatively low isoelectric point (pI): 5.0. Furthermore, the expressive number of acid residues seems to be related to the conformational stability of the polypeptidic chain. Systematic studies of reversible denaturation by urea and guanidinium chloride (GuaCl) were carried out using fluorescence as a monitoring technique. Conformational Stability calculations were made based on the wavelengths corresponding to the maximum fluorescence emission as a parameter and the value obtained was 2.48 kcal.mol-1. Calculations of the centre of mass were made as a function of the denaturating agent concentration in both cases. Carbohydrate analysis was carried out by using High Performance Liquid Chromatography (HPLC) revealed mannose, glucosamine and galactosamine as main carbohydrates in the glycoconjugated structure. Carbohydrate removal was not possible even after treatment with 300 mU/mL of the endo-beta-N-acetylglucosaminidases-H, F and F1 / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Maria Isabel Rodrigues / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-02T04:55:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kabke_KeliCristinePeter_M.pdf: 13298041 bytes, checksum: f332f7210a1a5ae51622b1114e8e481d (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Baseando-se no crescente aumento da busca por produtos que substituam aqueles que, direta ou indiretamente, estão relacionados a problemas como obesidade, diabetes e cariogenicidade é que tem-se verificado a importância da inulinase. Esta enzima apresenta perspectivas promissoras para a indústria de alimentos, em função do processo de obtenção da frutose, resultando, então, em uma alternativa segura de adoçante substituto da sacarose. É também de grande importância o estudo da substituição da inulina por fontes de carbono alternativas, como sacarose e meios complexos industriais, pois toma assim a produção da enzima bem mais viável comercialmente. Este trabalho teve como objetivo a otimização da produção de inulinase em meio industrial através de quatro linhagens de Kluyveromyces marxianus (NRRL Y-610, NRRL Y-1196, NRRL 7571 e NCYC 587). A fermentação foi realizada em erlenrneyers aletados em shaker PSYCROTHERM (New Brunswick Scientific,N. 1.), com rotação de 150rpm. Os experimentos foram conduzidos através de planejamento experimental e análise de superficie de resposta, onde estudou-se o efeito do pH, da temperatura e das concentrações de melaço de cana, água de maceração de milho e extrato de levedura sobre a atividade da enzima. Foi realizado um total de dez planejamentos fatoriais (quatro ftacionários e seis completos) e dois estudos univariáveis de temperatura, através dos quais obteve-se atividades enzimáticas máximas de 91,05, 84,98, 1500 e 2660 D/rnL para as linhagensNRRL Y-61O,NRRL Y-1196, NCYC 587 e NRRL 7571, respectivamente. Com o objetivo de diminuir ainda mais o custo de produção, fez-se a otimização do meio substituindo o extrato de levedura por Prodex lac@,onde atingiu-se para a linhagemNCYC 587 uma atividade de 1450 D/rnL e para a NRRL 7571 de 2500 D/rnL. / Abstract: ln the basis of a continuous searching for new products which would substitute, direct or indirectly, those related to diabetes and obesity, as well as to cariogenicity, the interest and importance of inulinase has increased. This enzyme has interesting prospects in the food industry, considering its ability for fTuctoseproduction. It is also interesting the possibility of the inulin replacement by sucrose on other complex medium, in the process of the enzyme production, in order to reduce production costs. The main goal of this work is the optimization of inulinase production, using low cost industrial medium, by four strains of Kluyveromyces marxianus. Ali the fermentations were carried out on shaken flasks, at 150rpm, according to factorial experimental designs and response surface analysis. The following effects were studied: pH, temperature, and concentration of sugar cane, molasses, com step liquor and yeast extract. The response studied was enzyme activity. As a whole, ten factorial designs were carried out (four factorials and six fuIl ones) and two univariable studies for the temperature, leading to a maximum activities of91,05, 84,98, 1500 e 2660 U/rnL for the strains NRRL Y-610, NRRL Y-1196, NCYC 587 e NRRL 7571, respectively. With the aim of decrease the culture medium costs, yeast extract was replaced by a yeast autolisate, leading to an activity of 1450 U/rnL for the strainNCYC 587 and 2500U/rnLfor the strain NRRL 7571. / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos

Orientador: Lucia Regina Durrant / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-02T22:06:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pavarina_ErikaCristina_D.pdf: 37450116 bytes, checksum: e77122db8b0fffd43e33fb0f9365a346 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A maior fração que compõe a biomassa lignocelulósica é a celulose, representando o material orgânico renovável mais abundante e viável, que através de conversão biológica, química ou fisiológica, leva a formação de produtos de interesse econômico. A degradação biológica do materiallignocelulósico constitui uma das etapas mais importantes do ciclo do carbono. Muitos microrganismos possuem a habilidade de degradar o material lignocelulósico em diferentes graus, metabolizando os compostos intermediários de baixo peso molecular. Os microrganismos celulolíticos possuem um papel importante na degradação da celulose, uma vez que as hifas destes fungos penetram na madeira, liberam enzimas e degradam o material lignocelulósico. A maioria dos microrganismos conhecidos em degradar a celulose eficientemente, produzem um conjunto de enzimas com diferentes especificidades, atuando juntas em sinergismo. A capacidade de produção de enzimas ligninolíticas sob condição microaeróbica pode conferir ao microrganismo vantagem seletiva para sua sobrevivência em meio natural, proporcionando a este uma maior versatilidade em relação aos estritamente aeróbios ou anaeróbios. A fim de verificar a capacidade dos fungos em degradar materiallignocelulósico sob diferentes condições microaeróbica, foram testados 7 microrganismos, selecionando-se 3 linhagens: linhagem H2 (basidiomiceto); Geotrichum terrestre (levedura) e Fusarium oxysporum (fungo imperfeito). As linhagens apresentaram maiores produções das enzimas lignocelulolíticas após crescimento em meio complemento (adição de tween 80, Mn02, e ausência de cisteína) quando comparados os resultados obtidos após cultivo em meio nutriente. De acordo com os resultados obtidos durante o desenvolvimento deste trabalho verificou-se que o tween 80 tem influência na secreção enzimática, pois houve aumento na produção das enzimas pelas linhagens. Com relação aos produtos de fermentação obtidos pode-se observar que algumas linhagens apresentaram melhor produção quando tween 80 foi adicionado ao meio, como por exemplo a linhagem G. terrestre que apresentou maior produção de ácido cítrico, ácido tartárico, ácido lático e ácido acético, e pela linhagem H2 com maior produção de etanol. De uma forma geral todos os microrganismos testados foram capazes de degradar e fermentar o material lignocelulósico nas diferentes concentrações de substratos (1%-20%) e produzir as enzimas celulolíticas e ligninolíticas sob condições de baixa oxigenação. Este resultado é importante, uma vez que a degradação da lignina é conhecida como um processo oxidativo e a possibilidade de sua degradação ocorrer em ambientes microaeróbicos implica em novas oportunidades de aplicações biotecnológicas. / Abstract: Cellulose accounts for the major part of lignocellulose found in nature, and consequently, its degradation is essential for the operation of the global carbon cycle. Lignocellulose, such as wood, is mainly composed of a mixture of cellulose (40%), hemicellulose (20-30%), and lignin (15-30%). An association of enzymes acting in a concerted fashion degrades cellulose. This cellulase enzyme system consists of three major components, which are referred to as endoglucanase (carboximethylcellulase), exoglucanase (avicelase), and cellobiase (beta-glucosidase). These enzymatic components act synergistically in the hydrolysis of crystalline cellulose. The process by which the microorganisms degrade lignin is oxidative, involving enzymes such as lignin peroxidase, manganese peroxidase, and laccase. Cellulolytic microorganisms are found among various taxonomic groups. They include fungi and bacteria, aerobes and anaerobes, mesophiles and thermophiles and occupy a variety of habitats. Only a few groups of microorganisms are capable of degrading the complex lignin polymers and the white-rot fungi, which cause the greatest degree of mineralization, best exemplify them. Most of the lignocelluloses in nature are oxidized to carbon dioxide by aerobic microorganisms, but a substantial amount is degraded in anaerobic environments such as soil and mud that contain plant material. To verify the microbial capacity to degrade lignocellulosic material under microaerophilic conditions, seven strains were studied and three were selected: Geotríchum terrestre, Fusarium oxysporum and H2 strain (basidiomycete). The results obtained with strains H2, F. oxysporum and G. terrestre suggest that they prefer lower oxygen concentratioris for growth and enzyme production. Lignocellulolytic activities were detected in ali strains but varied with the carbon source used. The highest levels of these activities were produced by strains after growth in the complement media (addition of Tween 80, MnO2, without cystein), when compared with the result obtained after growth in nutrient media. The results obtained in this study showed that Tween 80 influences the enzymatic activity, due to better enzyme production. Ethanol and other non-gaseous fermentation products were detected following HPLC analysis. Strain H2 showed a greater production of ethanol and G. terrestre of citrate, tartarate, lactate and acetate. Since they produce enzymes necessary for the breakdown of lignocellulosic materiais and utilize most of the degradation products for growth, these strains show great potential for novel biotechnological applications. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Orientadores: Valdemiro Carlos Sgarbieri, Vera Lucia Signoreli Baldini / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-03T05:38:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rosa_LeonidiaLeite_M.pdf: 14450406 bytes, checksum: 66a23140212638978355d8ec62b59f35 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The abstract is available with the full electronic document / Mestrado / Mestre em Ciência da Nutrição

Orientador: Lucia Regina Durrant / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-03T18:24:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Reyes_LucianaFrias_M.pdf: 7919926 bytes, checksum: 4f5a782fdd9947f504bc1d077739b1f1 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Este trabalho tem como objetivo o estudo do crescimento e da ação degradativa de linhagens fúngicas no polímero sintético Polietileno Tereftalato (PET). Para tal, foram crescidos nove fungos basidiomicetos, entre eles Pleurotus sajor caJu, Pleurotus tailandia, Pleurotus sp (P.001 ), Phanerochaete chrysosporium, Agaricus campestris, Pleurotus sp (P1), Pleurotus sp (PSC 94/03), Flu e H2, em meio de cultura líquido de sais por períodos de 30, 60, 90 e 120 dias, e em meio de cultivo contendo farelo de trigo por 30, 60 e 90 dias de crescimento, a 30°C. Após incubação, foram avaliados crescimento qualitativo das linhagens, a diminuição de massa polimérica, a produção de enzimas ligninolíticas, e de biosurfactantes e determinadas medidas de viscosidade do PET. Todas as linhagens promoveram perda de massa do PET, destacando-se Phanerochaete chrysosporium (6,72%) com 90 dias de incubação, P.001 (5,79%) com 30 dias e P. sajorcaju (4,82%) e PSC 94/03 (4,13%) com 120 dias de cultivo. Com relação à produção enzimática, verificou-se que a Manganês Peroxidase apresentou os maiores valores de atividade, destacando-se Agaricus campestris (8,16 UI/Lmin) no período de cultivo de 120 dias em meio líquido, e PSC 94/03 (1900,77 UI/Lmin) com 90 dias de incubação em meio contendo farelo de trigo. As melhores produções de biosurfactantes, em meio líquido, foram obtidas com a linhagem H2 emulsão óleo/água (0,17) e Pleurotus 001 emulsão água/óleo (1,8 cm) com 120 dias de cultivo, e nos ensaios em meio contendo farelo e trigo com a linhagem Flu emulsão óleo/água (0,245) em 30 dias e PSC 94/03 emulsão água/óleo (2,25 cm) com 60 dias de crescimento. As amostras de PET apresentaram diminuição da ESTUDO DA DEGRADAÇÃO DE PET POR FUNGOS BASIDIOMICETOS LIGNINOLíncos viscosidade intrínseca, destacando-se Pleurotus sp (P.001) e Pleurotus sp (P1), indicando ocorrência de alterações estruturais do polímero causadas pelo crescimento dos microrganismos estudados neste substrato / Abstract: The goal of this work was to determine the ability of ine fungal strains to grow and degradae Polyethylene Terephtalate (PET). The basidiomycete fungi (Pleurotus sajor caju, Pleurotus tailandia, Pleurotus 001, Phanerochaete chrysosporium, Agaricus campestris, Pleurotus sp (P1), Pleurotus sp (PSC 94/03), and the strains Flu e H2) were cultivated at 30°C either in a mineralliquid medium for 30, 60, 90 and 120 days or in a wheatbran: water solid medium for 30, 60 and 90 days, both containing PET pellets. Following the incubation periods, the qualitative growth of the fungi, the loss of polymeric mass, the production of ligninolytic enzymes and the production of biosurfactants, as well as the viscosity of the PET, were investigated. P. chrysosporium showed the greatest loss of polymeric mass (6,72% in 90 days), followed by P.001 (5,79% in 30 days). P. sajor caju and PSC 94/03 caused 4,82% and 4,13% loss of polymeric mass, respectively, after 120 days of incubation. Strain H2 showed only 0,08% of degradation after 90 days of incubation. Ali the strains produced at least one of the enzymes under both culture conditions. A. campestris presented the highest levels of manganese-peroxidase activities in120 ddays of incubation in liquid medium, and PSC 94/03 after 90 days of incubation in solid medium. The best production of biosurfactant activities was observed following growth of Pleurotus tailandia (oil/water) and of Pleurotus sp (P.001) (water/oil emulsion), both in liquidmedium for 120 days. Following growth in solid medium best oil-in-water emulsion was produced by the strain Flu after 30 days and PSC 94/03 produced the best water-in-oil emulsion after 60 days of growth. Ali PET samples showed reduction oh the intrinsic viscosity when compared with the controls. The fungal strain P.001 and P1 presented lowest values for viscosity indicating the occurence of strutural modification in the PET caused by these microorganisms / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos