Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-26Bitstream added on 2014-06-13T19:28:39Z : No. of bitstreams: 1 decio_p_me_rcla.pdf: 704842 bytes, checksum: 9aea07830af973bc206d3936315067ba (MD5) / As glândulas pós-faríngeas estão presentes em todas as formigas e em algumas vespas solitárias. Localizam-se dorso-lateralmente na transição entre a faringe e o esôfago e sua morfologia é variável entre os diferentes grupos de Formicidae, podendo apresentarse na forma lobulada ou digitada. As funções atribuídas a essas glândulas são passíveis de discussão. São consideradas por diferentes autores como cecos gástricos, divertículo do trato digestório, como produtoras de feromônios ou de hidrocarbonetos cuticulares. Novas evidências tem dado suporte a função dessas glândulas na ingestão e retenção de lipídios. Com isto em vista, o presente trabalho teve como objetivo identificar as proteínas expressas nas glândulas pós-faríngeas de Atta sexdens rubropilosa buscando ampliar o conhecimento sobre uma possível função destas glândulas no metabolismo de lipídios por meio da comparação das proteínas diferencialmente expressas nas glândulas de formigas em três estágios alimentares: rainhas que não receberam nenhum tipo de tratamento alimentar e rainhas que receberam óleo de soja como suplementação lipídica, analisadas 4 e 120 horas após o tratamento. A utilização da abordagem proteômica envolveu técnicas de eletroforese bidimensional, estratégia shotgun e espectrometria de massas. Para a análise dos resultados obtidos foram usadas diferentes ferramentas de bioinformática para a identificação das proteínas e esclarecimento de suas funções. O algoritmo utilizado para pesquisa nos bancos de dados foi o MASCOT Ion Search versão 2.0 e os bancos de dados foram o Protein Data Bank, SwissProt e o GenBank. Foram identificadas 33 proteínas a partir do extrato de glândulas pós-faríngeas de rainhas Atta sexdens rubropilosa, envolvidas em diversas funções como metabolismo de lipídios, energético e de esteróides, bem como com os mecanismos de defesa, regulação metabólica, transdução de sinal e... / The post-pharyngeal glands are present in all ants and some solitary wasps. These glands are located laterally in the back of the head, between the pharynx and esophagus, and their morphology varies among different groups of Formicidae. They may present themselves as lobulated or typed. The functions assigned to these glands are open to discussion, and are considered by different authors as gastric caeca, diverticulum of the digestive tract or as producer of pheromones or cuticular hydrocarbons. New evidence has supported the function of these glands to be in the intake and retention of lipids. The present study aimed to identify the proteins present in the post-pharyngeal glands of Atta sexdens rubropilosa seeking to expand knowledge about a possible function of these glands in the metabolism of lipids by comparing the differentially expressed proteins in the glands of ants food in three stages: queens who did not receive any treatment, and queens who received soybean oil as lipid supplementation analyzed 4h and 120h after treatment. Using the proteomic approach involving two-dimensional electrophoresis techniques, strategy and shotgun mass spectrometry. To analyze the obtained results various bioinformatics tools were used for protein identification and clarification of their duties. The algorithm used to search the databases was the MASCOT Ion Search version 2.0 and the databases were the Protein Data Bank, GenBank and SwissProt. In the end, 38 identified proteins were extracted of the post-pharyngeal glands of Atta sexdens rubropilosa queens, involved in several functions such as metabolism of lipid, energy and steroids, as well as defense mechanisms, metabolic regulation, signal transduction, cytoskeleton restoration and membrane protein. The expression of proteins related to lipid... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2016-08-12T18:48:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-27. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-12T18:51:00Z : No. of bitstreams: 1 000849826_20170730.pdf: 873601 bytes, checksum: aba6ada5ec0fbb61f3b3604c66aafb07 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-08-07T14:09:12Z: 000849826_20170730.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-08-07T14:10:16Z : No. of bitstreams: 1 000849826.pdf: 4209967 bytes, checksum: fe80c7e6b5372db8ddddd264003573c2 (MD5) / A clonagem de oxidoesqualeno ciclase das folhas de M. ilicifolia já foi estudada por nosso grupo, bem como os estudos de expressão em S. cerevisiae geneticamente modificada para melhor produção da friedelina. Para o desenvolvimento do trabalho, optou-se por realizar a expressão do gene de friedelina sintase de Kalanchoe daigremontiana obtido comercialmente, cuja sequência foi otimizada de acordo com o codon usage de S. cerevisiae. A partir das mutações sítio-dirigidas, duas mutações no gene sintético foram confirmadas. A primeira mutação do resíduo de leucina para valina na posição 483 do gene sintético levou à produção da friedelina e dos triterpenos -amirina e taraxerol enquanto a segunda mutação do resíduo de leucina para treonina na mesma posição deste gene produziu unicamente a -amirina. Após a padronização e análises das mutações no gene sintético, as mesmas mutações foram realizadas no gene da friedelina sintase de Maytenus ilicifolia. A mutação por valina levou à produção de -amirina e friedelina e, igualmente ao gene sintético, a mutação por treonina levou à formação apenas da -amirina. De acordo com a mutação gerada, os compostos produzidos pela levedura foram analisados por cromatografia gasosa acoplada a detector de massas e observou-se que algumas mutações levavam a uma alteração da especificidade do produto formado pela enzima. Esses estudos sugerem que a relação da estrutura proteica-função da enzima produtora da friedelina possa estar associada ao ajuste da cavidade ativa da enzima e, quando um resíduo de aminoácido do sítio ativo é substituído por resíduos menores, a ampliação da cavidade proporciona a estabilização prévia do carbocátion em um triterpeno com menor número de rearranjos, como a -amirina. Desta forma, estes dados contribuem com o entendimento da especificidade desta enzima, são os primeiros a... / The cloning of oxidosqualene cyclase from Maytenus ilicifolia leaves and expression in Saccharomyces cerevisiae has been studied by our group to generate friedelin. The main objective of this project was to carry out the expression of friedelin synthase gene using commercially Kalanchoe daigremontiana, whose sequence has been optimized according to the codon usage of S. cerevisiae. In such studies, two mutations in the synthetic gene were confirmed. The first mutation of valine for leucine residue at position 483 synthetic gene led to the production of friedelin, β-amyrin and tararexol, while the second mutation of leucine to threonine residue, at the same position, produced exclusively β-amyrin. The same mutations were performed using the gene of friedelin synthase of Maytenus ilicifolia. The compound identities were confirmed by gas chromatography and mass spectrometry. The results suggested that the ratio of protein production-enzyme function, involved in the production of friedelin, may be associated with the active cavity of the enzyme setting, when an amino acid residue of the active site is replaced for smaller, expanding the cavity to provide the prior stabilization of the carbocation in the biosynthetic pathway of triterpenes to produce β-amyrin. Thus, these data contribute to understand the specificity of such enzyme. Furthemore, this studie was the first one to show the importance of each amino acid in the active site of the enzyme to produce a pentacyclic triterpene with the highest number of rearrangements and was the basis for future studies of enzyme engeenering to increase productivity of such compounds.

A utilização de plantas na cura dos mais diversos males é tradicionalmente conhecida e utilizada há centenas de anos pela humanidade. As células vegetais produzem uma grande variedade de compostos químicos entre o metabolismo primário e secundário. Os produtos do metabolismo secundário são de especial interesse, pois são responsáveis por diversas ações biológicas. Informações etnobotânicas indicam que mais de 800 plantas são usadas como remédios tradicionais para o tratamento da diabetes. Muitas espécies pertencentes ao gênero Salacia têm sido descritas com atividade antidiabética, entre elas Salacia impressifolia. É uma espécie pertencente à família Celastraceae, conhecida popularmente no Brasil como miraruíra. Este trabalho visou desvendar a composição química desta espécie, utilizando para isso extratos obtidos a partir da casca e do caule. Em seguida, realizou-se análise química dos extratos por espectrometria de massas de alta resolução (EMAR). Nestes foram identificados 32 compostos, os quais haviam sido previamente descritos na literatura para o mesmo gênero. Entre eles destacam-se o kotalanol, salacinol e o mangiferina, com ação hipoglicemiante previamente descrita por outros autores. Para análise in vivo do potencial hipoglicemiante, realizou-se ensaio com o extrato hidroalcoólico do caule da planta em ratos com diabetes induzida por estreptozotocina. O extrato apresentou ação semelhante ao fármaco controle glibenclamida. Também foi avaliado o perfil lipídico (triglicerídeos, colesterol total e HDL) e as enzimas hepáticas TGO e TGP, onde pode-se observar aumento de HDL. / Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2015-05-06T18:00:22Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Manuela Merlin Laikowski.pdf: 192460 bytes, checksum: 1080985338e2e2e103da02a2651657ed (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-06T18:00:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Manuela Merlin Laikowski.pdf: 192460 bytes, checksum: 1080985338e2e2e103da02a2651657ed (MD5) / The use of plants in various ailments healing is traditionally known and used for centuries by mankind. Plant cells produce a large variety of chemical compounds between the primary and secondary metabolism. The secondary metabolism products are of special interest, as they are responsible for several biological activities. Ethnobotanic information indicates that more than 800 plants are used as traditional remedies in the treatment of diabetes. Many species of Salacia genus have been described with antidiabetic activity, including Salacia impressifolia. This specie belongs to Celastraceae family, popularly known as miraruíra in Brazil. This work aimed to develop the chemical composition of this specie through stem and stem bark extracts. Chemical analysis of the extracts was carried out by high resolution mass spectrometry (HRMS). In these extracts, 32 compounds were identified, previously described for the same genus. Among them, were identified kotalanol, salacinol and mangiferina, with hypoglycemic action previously described by others authors. For in vivo analysis of hypoglycemic activity, it was performed the hydroalcoholic stem extract in streptozotocin induced diabetics rats. The extract presented similar action to control drug glibenclamide. It was also assessed the lipid profile (triglycerides, total cholesterol and HDL) and liver enzymes AST and ALT, and it was observed an increase in HDL level.

Submitted by Geraldo Gabriel Perez null (gebrirez@aluno.ibb.unesp.br) on 2017-04-07T04:11:49Z No. of bitstreams: 1 dissertação Geraldo Gabriel Perez.pdf: 983267 bytes, checksum: b440496b36100b5a777e73882f997b12 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-17T13:47:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 perez_gg_me_bot.pdf: 983267 bytes, checksum: b440496b36100b5a777e73882f997b12 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-17T13:47:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 perez_gg_me_bot.pdf: 983267 bytes, checksum: b440496b36100b5a777e73882f997b12 (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Atualmente cerca de 3% da população mundial está infectado pelo vírus da hepatite C (VHC), onde sua maior consequência é a cirrose hepática. Para o diagnóstico da cirrose hepática utiliza-se a biopsia hepática percutânea, um método invasivo de grande complexidade considerado padrão ouro. Para avaliação do estágio da cirrose utiliza-se a classificação Child-Pugh. Um outro exame experimental para classificação funcional hepática é o 13C-Aminopyrine Breath Test (13C-ABT), o qual é não invasivo. Os protocolos atuais de 13C-ABT utilizam duas horas de coleta de sopro, e não diferem o gênero dos pacientes. O objetivo do estudo foi otimizar os protocolos de aplicação do 13C-ABT para avaliação dos estágios da cirrose hepática causada pelo VHC, verificando diferença entre gênero. Foram estudados os turnovers 13C nos dos sopros dos 68 pacientes durante o 13C-ABT, divididos em 8 grupos conforme o comprometimento da função hepática e gênero. Os resultados mostraram que o 13C-ABT pode ser aplicado com apenas uma coleta do sopro em uma hora e que existe diferença entre os gêneros. / Currently, about 3% of the world's population is infected with hepatitis C virus (HCV), and its major consequence is liver cirrhosis. Percutaneous hepatic biopsy, an invasive method of great complexity considered gold standard, is used for the diagnosis of hepatic cirrhosis. Child-Pugh classification is used to assess the stage of cirrhosis. Another experimental test for liver function classification is 13C-Aminopyrine Breath Test (13C-ABT), which is non-invasive. Current 13C-ABT protocols use two hours of breath collection, and do not differ in gender from patients. The aim of this study was to optimize the application protocols of 13C-ABT to evaluate the stages of hepatic cirrhosis caused by HCV, verifying gender differences. 13C turnovers were studied in the breath of 68 patients during 13C-ABT, divided into 8 groups according to impairment of hepatic function and gender. The results showed that 13C-ABT can be applied with only one breath collection in one hour and that there is difference between the genders.

Orientador: Humberto Márcio Santos Milagre / Banca: Eduardo Maffud Cilli / Banca: José Augusto Rosário Rodrigues / Resumo: A técnica de ionização MALDI (Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization) foi uma das responsáveis por revolucionar a Espectrometria de Massas, tornando possível sua aplicação a moléculas termolábeis e de alta massa molecular, como as proteínas. Apesar de seu grande desenvolvimento, esta técnica ainda apresenta algumas limitações como a seleção da matriz utilizada e o método de preparo de amostras. Estes fatores são determinantes na reprodutibilidade da análise e na faixa de aplicação de m/z. Neste trabalho, inicialmente analisou-se diferentes linhagens de cianobactérias por MALDI-TOF-MS, com a finalidade de se buscar por novos analitos para os quais fosse possível o monitoramento utilizando-se as matrizes iônicas. Posteriormente avaliou-se as características destas matrizes, a metodologia de preparo de amostras, a composição do analito e a intensidade do laser da fonte de MALDI, com o objetivo de selecionar as melhores metodologias de análise. Após esta etapa, as matrizes iônicas e metodologias selecionadas foram aplicadas na detecção e quantificação de cianotoxinas e na análise de fármacos por MALDI-MS. Neste estudo obteve-se como resultados: a diferenciação de linhagens de cianobactérias através dos fingerprints obtidos por MALDI-TOF-MS que também permitiram a detecção de importantes metabólitos; a detecção da homoanatoxina-a, uma cianotoxina de baixa massa molecular, diretamente de células de cianobactérias; o desenvolvimento de um método quantitativo de análise de microcistinas com ótima precisão; e o desenvolvimento de uma metodologia inédita para a detecção dos componentes ativos de medicamentos, ampliando, portanto, o leque de aplicações da técnica de MALDI. / Abstract: The Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization technique was one of the ionization sources responsible for revolutionizing Mass Spectrometry, making possible its application to labile and high molecular weight molecules, such as proteins. Despite its great development, this technique still has some limitations like the selection of the matrix and the sample preparation method. These factors determine the reproducibility of analysis and the m/z application range. Initially, in this work, we analyzed different cyanobacteria strains by MALDI-TOF-MS, in order to check for new analytes to be monitored using ionic matrices. Subsequently, the characteristics of these matrices, the sample preparation method, the composition of the analyte and laser intensity of the MALDI source were evaluated aiming to select the best methodologies of analysis. After this step, the selected ionic matrices and methodologies have been applied in the detection and quantification of cianotoxins and analysis of pharmaceutical drugs by MALDI-MS. In this study we obtained as results: the differentiation of strains of cyanobacteria through the fingerprints obtained by MALDI-TOF-MS which allowed the detection of important metabolites; the detection of homoanatoxin-a, a low molecular weight cyanotoxin, directly from cyanobacteria cells; the development of a quantitative method for the analysis of microcystins with great precision; and the development of a new methodology for the detection of active compounds of medicines, increasing, therefore, the application range of MALDI technique. / Mestre

Orientador: Eduardo Tené Pérez González / Banca: Hans Viertler / Banca: Ricardo Maurício Xavier Leão / O Programa de Pós Graduação em Ciência e Tecnologia dos Materiais, PosMat, tem caráter institucional e integra as atividades de pesquisa em materiais de diversos campi / Resumo: O desenvolvimento de novos fármacos mais eficientes, menos tóxicos e com menores efeitos colaterais, tem se mostrado um tema de grande importância e interesse científico. Neste contexto o presente trabalho apresenta a síntese de N-alquilsulfonamidas análogos do PABA, com potencial propriedades farmacológicas interessantes como efeito ou atividade bloqueadora sobre canais iônicos de potássio dependentes de voltagem. Além disso, algumas dessas sulfonamidas sintetizadas apresentam N-(aminoalquil)-lactamas como cadeia lateral. Estes grupos lactânicos que têm sido descritos como inibidores de tryptase humana, um mediador importante na asma, e atividade como inibidores de protease do HIV-1. As análises físico-químicas foram realizadas por diferentes técnicas espectroscópicas (RMN de 1H e 13C, FT-IR) e espectrométricas (EI-MS e ESI-MS). As estruturasde todos os compostos foram confirmadas sem ambiguidade. Foi realizado um estudo por espectrometria de massas de alta resolução para todos os produtos. Esse estudo permitiu observar a formação do íon sulfoxilato e propor mecanismos para explicar este e outros fragmentos experimentais. As moléculas sintetizadas estão sob investigação para determinar sua atividade inibitória de canais de potássio. Algumas moléculas mostraram bons resultados / Abstract: The development of new drugs more efficient, less toxic and with fewer side effects has been a subject of great importance and scientific interest. Un this context the present work shows the sythesis of new sulfonated compounds analogues of PABA, with potential interesting pharmacological properties, as the effect or blocking activity on ion channels of voltage gated potassium. In addition, some of these sufonamides, have N-(aminoalkyl) lactams as side chain. These lactamic groups have been described as inhibitors of human tryptase, an important mediator in asthma, and activity as HIV-1 protease inhibitors. The physical-chemical analyses have been carried out by different spectrocopic (1H and 13C NMR, FT-IR) and spectrometric techniques (EI-MS and ESI-MS). The structures of all compounds were unambiguously confirmed. A study for High Resolution Mass Spectrometry was peformed for all products. This study allowed to observe the formation of sulfoxylates ions and to propouse mechanisms to explain this and other experimental fragments. The synthesized molecules are under current investigation of its inhibiting channels and some molecules showed good results / Mestre

Orientador: Lourdes Campaner dos Santos / Co-orientador: Adilson Paulo Sinhorin / Banca: Juliana Rodrigues / Banca: Daniel Rinaldo / Banca: Leandro Carbo / Banca: Cássia Regina Primila Cardoso / Resumo: Caesalpinia ferrea Mart. pertence à familia Fabaceae ( Caesalpinioideae ) , cresce em todo o terr itório brasileiro, sendo largamente distribuída nas regiões norte e nordeste, conhecida vulgarmente como pau - ferro ou jucá. N este trabalho , foi realizado o estudo fitoquímico, a determinação quantitativa de metabólitos secundários, a avaliação das atividad es mutagênica e an tirradicalar e a determinação dos teores de fenóis totais do extrato etanólico das cascas do caule de C . ferrea . Análises por HPLC - ESI - IT - MS ( High Performance Liquid Chromatography - Electrospray Ionization - Ion Trap - Mass Spectrometry ) e FIA - ESI - IT - MS n ( Flow Injection Analysis - Electrospray Ionization - Ion Trap - Mass Spectrometry ), modo negativo , permitiram identificar vinte substâncias pela análise dos padrões de fragmentações e comparação com dados da literatura ( ácido gálico e der ivad o s , ácido elágico e derivados , galotaninos, elagitaninos, catequina e uma procianidina ) . No estudo fitoquímico, foram utilizadas técnicas cromatográficas usuais, como Cromatografia em Coluna Clássica (sílica gel e s ephadex LH - 20 ), MPLC ( Medium Pressure Liquid Chromatrography ) e HPLC , que forneceram um éster de ftalato, um açúcar, ácido gálico, dois derivados do ácido quínico e um derivado glicosilado do ácido elágico, que foram identificados por métodos espectroscópicos ( Ultra vi oleta e Ressonância Magné tica Nuclear) e espectrométricos ( Espectrometria de Massas ). Um método analítico foi desenvolvido utilizando a técnica de HPLC - PDA ( High Performance Liquid Chromatography - Photodiode Array Detector ) que permitiu a quantificação d e seis substâncias ( ácido gálico, ácido galoil quínico, galato de etila, dilactona do ácido valoneico, ácido elágico e ácido 3 - O - metilelágico - 4 ' - O - β - D - arabinopiranosídeo ) no extrato. Nesta... / Abstract: Caesalpinia ferrea Mart. belongs to the family Fabaceae (Caesalpin ioideae) grows throughout the Brazilian territory, being widely distributed in the northern and northeastern regions, known commonly as pau - ferro or jucá . In t his research describes the phytochemical study, and the determination of the quantitative seconda ry metabolites, the mutagenic evaluation and antiradical activities and the total phenol levels determination of the ethanolic extract from the C . ferrea Martius stem bark. The analyses by the HPLC - ESI - IT - MS (High Performance Liquid Chromatography - Electr ospray Ionization - Ion trap - Mass Spectometry) and FIA - ESI - IT - MS n (Flow Injection Analysis - Electrospray Ionization - Ion Trap - Mass Spectometry), negative mode, it allowed to identify twenty substances by the standard analyses of the fragmentation a nd comparison with the data that are in the literature (gallic acid and derived, ellagic acid and derivatives, gallotannins, ellagitannis, cathechin and proantocyanidin). In the phytochemical study, it was used common chromatographic technical, like the Cl assical Column Chromatography (silica gel and sephadex LH - 20), MPLC (Medium Pressure Liquid Chromatrography) and HPLC , that provided a phthalate ester, a sugar, a gallic acid, two quinic acid derived and a glycosylated ellagic acid derivative , that were id entified by spectroscopic (Ultraviolet and Nuclear Magnetic Ressonance) and spectrometric (Mass s pectrometry ). An analytical method was developed using th e HPLC - PDA (High Performance Liquid Chromatography - Photodiode Array Detector) , which permitted quant ification of six substances (gallic acid, gal l o y l quinic acid, ethyl gallate, valoneic acid dilactone, ellagic acid and 3 - O - metilel la gic acid - 4 ' - O - β - D - arabinopyranoside) in the extract. In this quantification, ellagic acid (57.64 ± 1.22 μg.mL - 1 ) and... / Doutor

Orientador: Ian Castro-Gamboa / Banca: Isabele Rodrigues Nascimento / Banca: Flávia Talarico Saia / Resumo: A cada ano vem crescendo a busca por novas fontes de produtos naturais, na qual os micr o - organismos recebem uma grande atenção, sendo eles de extrema importância na descoberta de compostos bioativos e promissores a novos fármacos. Esse trabalho teve como foco o estudo de fungos filamentosos da rizo sfera de Senna spectabilis . F oram testadas suas viabilid ad es e a pós esse processo, dez fungos foram escolhidos para esse trabalho e submetidos a os testes biológicos como citotóxico, anti colinesterásico e antifúngico e t ambém foram obtidos seus perfis cromatográficos e químicos por CLAE - DAD e RMN, além da identificação filogenética. A pós esses resultados iniciais, dois fungos foram escolhidos para desenvolver o método de desreplicação, sendo eles Fusarium solani e F . oxysporum . Esses fungos apresentaram atividade antifúngica contra C. cladosporioides e C. sphaerospermun e também apresentaram atividade anticolinesterásica, além disso, F. oxysporum apresentou também atividade antitumoral contra câncer do colorretal. Através das téc n icas CG - EM, CLAE - EM, CLAE - EM/EM e RMN foram propostas estruturas moleculares interessantes para substâncias produzidas por e sses micro - organismos, sendo que para o extrato de Fusarium solani foram identificados 1 2 metabólitos: ácido fumárico, ácido málico, tirosol, ácido p - hidroxibenzóico, ácido azelaico, ácido fusárico, ( - ) - ácido jasmônico/ácido (+) - 7 - iso - jasmônico, 10 - hidroxicaptotecina, C - 16 - esfinganina, xestoaminol C, armilarina/armilaripina e beauvericina e para o extrato d o fungo Fusarium oxysporum foram observados 14 metabólitos: ácido succínico, ácido p - hidroxibenzóico, ácido hexadecanó i co, ácido octadecanóico, ácido fusárico e três de seus derivados, integracídeo C, fusagerina C/D, C - 16 - esfinganina, xextoaminol C, armila rina/armilaripina e beauver i cina . Além desses... / Abstract: T he search for new sources of natural products has been increasing to the rational exploration of microorganisms as great sources for the discovery of bioactives and promising compounds as well as new drugs. This work focused on the study of filamentous fungi, isolated from Senna spectabilis's rhizosphere from which were tested its viabilities. Thereon, ten fungi were chosen for this work and were s ubmitted to biological tests, such as cytotoxic, anticholinesterase and antifungal. In addition, their chemical profiles were obtained for HPLC and NMR, besides phylogenetic identification. Finally, tw o fungi were chosen to develop dereplication method, being them Fusarium solani and F . oxysporum. Th ese fungi howed anticholinesterase activity and antifungal activity aga in st C. cladosporioides and C. sphaerospermun . Additionally, F. oxysporum showed antitumor activity against colorectal cancer. Through the GC - MS, HPLC - MS, HPLC - MS/MS and NMR, we were able to obtained interesting molecular chem o types for these microorganisms; for F. solani we identified 12 metabolites, fumaric acid, malic acid, tyrosol, p - hydroxybenzoic acid, azelaic acid, fusaric acid, (+) - 7 - iso - jasmonic acid/( - ) - jasmonic acid, 10 - hydroxycamptotecin, C16 - sphinganine, xestoaminol C, armillarin/armillaripin and beauvericin and for F. oxysporum was observed 14 metabolites, succinic acid, p - hydroxybenzoic acid, hexadecanoic acid, octadecanoic acid, fusaric acid and its three derivatives, integracide C, fusagerin C/D, C - 16 - sphinganine, xestoaminol C, armillarin/armillaripin and beauvericin . Besides these compounds, others 5 metabolites common to both species ( solani and ox y sporum ) couldn't be structurally characterized thorough LC - MS/MS, but they were accounted in several Fusarium species. / Mestre

Orientador: Vanderlan da Silva Bolzani / Co-orientador: Dulce Helena Siqueira Silva / Banca: Nivaldo Boralle / Banca: Alessandra Regina Pepe Anbrozin / Resumo: O gênero Calycophyllum pertence à família Rubiaceae, conhecida pela diversidade de metabólitos secu ndários, e pela variedade de atividades biológicas : antifúngica, bactericida, antiviral e inseticida . A espécie vegetal Calycophyllum spruceanum Benth (Rubiaceae) é muito utilizada pelas populações da América do Sul no combate a doenças dermatológicas, est omacais, diabetes, parasitoses, câncer, entre outras, despertando o interesse pela investigação química deste táxon . A presente pesquisa objetivo u o estudo bio - guiado d os extratos obtidos das folhas, galhos e de cascas do caule de C. spruceanum visando à i dentificação das substâncias bioativas isoladas, incluindo as inativas. A meta é identificar n a s subst âncias isolad a s a quelas com propriedades cosméticas associadas ao uso popular desta espécie, conhecida na região A mazônica por esta propriedade . D iferente s extratos foram preparados e analisados por C romatografia L íquida de A lta E ficiência (CLAE) e E spectros copia de Ressonância Magnética Nuclear (RMN 1 H), acompanhad o s por ensaios biológicos (ensaio de capacidade redutora d os radicais DPPH ̇ e ABTS ̇ + ) para determinação de atividade antioxidante . O direcionamento do estudo foi feito em função dos ensaios antioxidantes aplicados aos extratos, conduzindo o estudo experimental para o extrato hidroetanólico de folhas ao foco do estudo, por ter ap resentado a maior atividade antioxidante. Por meio de métodos espectroscópicos e espectrométrico s (CLAE - DAD, CLAE - EM, CLAE - EM/EM ; RMN de 1 H e 13 C; TOCSY 1D; HMBC; EM - IES ) deste extrato e respectivas frações, pode - se identificar algumas substâncias anti oxid antes potencialmente ativas, sendo estas: ácido 3,5 - di - O - E - cafeoilquínico ; duas séries homólogas de proantocianidinas (tipo - B) co m grau de polimerização de 1 a 4, e proantocianidinas monoglicosiladas... / Abstract: The Caly cophyllum genus belongs to the Rubiaceae 's family, known for its high diversity of secondary metabolites, which have a wide range of biological activities (antifungal, antibacterial, antiviral and pesticide). It is widely used by the people of South Americ a against skin diseases, stomach, diabetes, parasites, cancer, among others . It is therefore essential t o study the chemical composition of these species used in folk medicine, aiming to validate the traditional use, with scientific data and thus contribut ing to the search for new bioproducts . This research aim ed the bio - guided fractionation of the extracts from the leaves, branches and stem bark extracts of Calycophyllum spruceanum Benth (Rubiaceae), to identify the secondary metabolites in the extracts a nd fractions, including bioactive ones, for further evaluation of the cosmetic potential of this species, commonly known in the Amazon region. Different extracts were prepared and analyzed by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and Nuclear Magnet ic R esonance spectroscopy ( 1 H NMR), and screened by biological assays (assay of reducing capability of ABTS ̇ + and DPPH ̇ radical s ) to determine the antioxidant activity. The chemical investigation was carried out based on the antioxidant activity of the extracts . T he experimental study focused on the hydroethanolic extract of leaves, that presented the higher antioxidant activity, which would support the traditional uses of this specie as cosmetic. By means spectroscopic and spectrometric analysi s (HPLC - DAD, HPLC - MS, HPLC - MS/MS; 1 H NMR and 13 C; TOCSY 1D; HMBC, ESI - MS) of this extract and its fractions, some co mpounds were identified : the 3,5 - di - O - E - caffeoylquinic acid ; two homologous series of proanthocyanidins (B - type) with a de gree of polymerization from 1 to 4 and monoglico syl proanthocyanidins (B - type O - glycosylated) with degr... / Mestre

Orientador: Mario Sergio Palma / Banca: Zila Luz Paulino Simões / Banca: Norberto Peporine Lopes / Resumo: As abelhas têm sido utilizadas como modelos robustos e influentes para o estudo de memória e aprendizagem, contribuindo para o melhor entendimento das bases da cognição. Nesse contexto, diferentes metabólitos foram caracterizados por desempenharem funções distintas no processo de aprendizagem e formação de memória em insetos. Considerando que pouco se sabe sobre os metabólitos em relação ao desenvolvimento das habilidades cognitivas em A. mellifera, ou mesmo em relação aos comportamentos reflexos (condicionados e/ou não condicionados), o presente estudo teve como objetivo a análise metabolômica do cérebro de abelhas submetidas ao ensaio comportamental de reflexo de extensão de probóscide (REP). Para isto, foi padronizada a técnica de análise metabolômica com o uso do sistema LC-ESI- MS e MSn, construindo-se inicialmente uma biblioteca de compostos característicos de cérebro de abelhas (neurotransmissores, aminoácidos livres, poliaminas, nucleotídeos, nucleosídeos, ácidos orgânicos, etc). Nesta primeira abordagem, dentre os 112 compostos da biblioteca, 48 foram identificados e quantificados; alguns destes compostos foram únicos para o grupo controle (cadaverina, espermina, glicose, uracila e n-acetil-L-glutamato 5-semialdeido), enquanto que outros foram únicos para o grupo REP (fenilalanina, betaína, espermidina, serina e creatina). Dentre os compostos identificados em ambos os grupos, apenas 5 compostos apresentaram diferenças quantitativas estatisticamente significantes (arginina, asparagina, guanosina monofosfato, putrescina e 4-guanitinobutanoato). Visando o estudo dos perfis metabólicos regionais (em cada região do cérebro), foi também padronizado o protocolo experimental utilizando-se a estratégia MALDI Spectral Imaging e o desenvolvimento de um método semi-quantitativo de metabólitos ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico) / Abstract: The honeybee Apis mellifera has long served as an invertebrate model organism for learning and memory research, contributing to a better understanding of cognition bases. In this context, different metabolites (especially neurotransmitters) were characterized by play distinct roles in learning process and in memory formation in insects. Whereas little is known about the metabolites in relation to the development of cognitive skills in A. mellifera, the present study aims to perform a metabolomic analysis of the honeybee brains submitted to the behavioral test of proboscis extension reflex (PER). For this, has been standardized a metabolomic analysis technique through the use of LC-ESI-MS and MSn system. Initially a low molecular weight compounds library was created, containing characteristic compounds of bee brain (neurotransmitters, free amino acids, polyamines, nucleotides, nucleosides, organic acids, etc.). In this first approach, from the library of 112 compounds, 48 compounds were identified and quantified; some of these compounds were only identified in the control group (cadaverine, spermine, glucose, uracil and N-acetyl-L-glutamate 5- semialdehyde), while others were only identified in PER group (phenylalanine, betaine, spermidine, serine and creatine). Among the compounds identified in both groups, only five compounds showed statistically significant differences in quantitative results (arginine, asparagine, guanosine monophosphate, putrescine and 4-guanidinebutanoate). In order to study the metabolic profiles by regions (within each brain region) it was also standardized an experimental protocol using a novel semi-quantitative method of MALDI Spectral Imaging strategy. This strategy allowed the study and the mapping of the spatial distribution of metabolites identified in honeybee brain sections, as well as a better understanding ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre