Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-12-01T15:25:09Z No. of bitstreams: 1 Hugo Bolsoni Zago.pdf: 898683 bytes, checksum: a6a8ab8ddd71419162e9faad7a47b971 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-01T15:25:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Hugo Bolsoni Zago.pdf: 898683 bytes, checksum: a6a8ab8ddd71419162e9faad7a47b971 (MD5) Previous issue date: 2008-02-04 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The diamondback moth (DBM), Plutella xylostella (L.) is a key pest of cabbage in the Agreste area of Pernambuco state. Despite of being a key pest, the DBM is attacked by several natural enemies including the egg parasitoid, Trichogramma. In addition, formulated insecticides with different strains of Bacillus thuringiensis Berliner are widely used to control the larval stages. Thus, this research aimed to search for a local species or population of Trichogramma; to study its biological characteristics and parasitism on DBM eggs; to investigated the oviposition site preference of DBM and its parasitism by Trichogramma on cabbage plants at pre- and post-head formation in the field and; to investigate the susceptibility of 10 Brazilian populations of DBM relative to the commercial formulations of B. thuringiensis var. kurstaki (Dipel®WP) (Btk) and B. thuringiensis var. aizawai (Xentari®WG). Trichogramma survey was conducted in areas with organic-growing vegetables, Chã-Grande County, PE. The collected species wasTrichogramma pretiosum Riley. The biological characteristics and parasitism were similar for this population parasitizing DBM eggs and eggs of the laboratory standard host, Anagasta kuehniella (Zeller). In the field, the parasitism of DBM eggs by T. pretiosum was associated with the moth oviposition site preference and exhibited a positive relationship with egg availability; but, the eggparasitism rate was density independent across both plant ages. The oviposition of DBM on cabbage plants at pre-head formation and its parasitism was equally distributed across the plant leaves. At this plant age, the basal part of the leaf and the upper leaf surface were the preferred places for oviposition and parasitism. Plants at post-head formation stage had higher oviposition and parasitism on the central leaf wrapping the head and in the upper leaf surface. The susceptibility of DBM to the insecticides Btk and Bta resulted in significant levels of resistance. The resistance ratio was 180 and 999 times to the recommended rates of Bta and Btk, respectively. Furthermore, variation of larvae and adults regarding walking and oviposition behavior were observed among the populations using treated and untreated cabbage leaf discswith Bta and Btk. / traça-das-crucíferas, Plutella xylostella (L.) é praga-chave do repolho no Agreste de Pernambuco. Apesar da condição de praga-chave, ela possui vários inimigos naturais incluindo o parasitóide de ovos Trichogramma. Além de que seu controle é feito com inseticidas à base de Bacillus thuringiensis Berliner. Deste modo, esta pesquisa teve como objetivos realizar a coleta de uma população Trichogramma spp. associado a cultivo orgânico de brássicas no Agreste de Pernambuco; estudar a biologia e o parasitismo da espécie coletada, no hospedeiro P. xylostella, comparado ao hospedeiro de criação Anagasta kuehniella (Zeller) (Lep.: Pyralidae); investigar a distribuição da oviposição de P. xylostella e seu parasitismo por Trichogramma em repolho antes e após formação da cabeça e; investigar a susceptibilidade de populações de P. xylostella as formulações comerciais de B. thuringiensis var. kurstaki (Dipel® WP) (Btk) e B. thuringiensis var. aizawai (Xentari® WG) (Bta). Foram realizadas coletas de Trichogramma em cultivo orgânico nomunicípio de Chã-Grande, PE. A coleta resultou na espécie Trichogramma pretiosum Riley (Hym.: Trichogrammatidae). As características biológicas e o parasitismo desta população em ovos de P. xylostella e no hospedeiro alternativo, Anagasta kuehniella (Zeller), foram similares. O parasitismo de ovos de P. xylostella por T. pretiosum, em campo, foi associado ao local de maioroviposição da praga e mostrou-se positivamente correlacionado com a quantidade de ovos depositados pela praga em diferentes estruturas da planta, porém com taxas de parasitismo independentes da densidade. A oviposição de P. xylostella e seu parasitismo por T. pretiosum em plantas de repolho antes da formação da cabeça foram igualmente distribuídas entre as folhas. A parte basal e a epiderme superior das folhas foram às localidades preferidas para oviposição e parasitismo, respectivamente. Plantas após a formação de cabeça tiveram maior oviposição e parasitismo na folha central envolvendo a cabeça e na epiderme superior desta folha. Com relação à susceptibilidade de P. xylostella aos inseticidas Dipel e Xentari, foram constatados consideráveis níveis de resistência. A razão de resistência de até 180 e 999 vezes a concentração recomendada de Dipel e Xentari, bem como foram observadas variações no comportamento de caminhamento das larvas e preferência de oviposicão em discos foliares tratados e não tratadoscom Dipel e Xentari entre as populações estudadas. Assim, neste estudo foi identificado populações da traça-das-crucíferas com significativos níveis de resistência a formulações comercias de B. thuringiensis.

Made available in DSpace on 2016-12-23T14:37:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Luiz Flavio Viana Silveira.pdf: 245277 bytes, checksum: 26301d89e5bb37d0ef6f45525b380723 (MD5) Previous issue date: 2008-12-18 / A cultura do mamão tem grande importância econômica para o Brasil, sendo o maior produtor mundial, com área colhida de 36.650 hectares e 24% da produção mundial, e, para o Espírito Santo, segundo maior produtor, com 39,7% do total nacional, e responsável por 74% na exportação. O ataque de pragas nessa cultura pode reduzir consideravelmente a produção e a qualidade do produto colhido, sendo que, uma das principais pragas é o ácaro rajado Tetranychus urticae Koch (1836). O uso do controle químico de forma descontrolada leva a sérias conseqüências como a presença de resíduos em frutos acima do permitido e surgimento de populações resistentes. Faz-se necessário o uso de alternativas de manejo do ácaro, como o controle biológico, que vem sendo utilizado como ferramenta no manejo de diversas pragas de importância agrícola no mundo. Por isso, o objetivo deste trabalho foi selecionar isolados de Bacillus thuringiensis Berliner (1911) (Bt) que sejam patogênicos para o ácaro rajado na cultura do mamão. Foram avaliados 120 isolados de B. thuringiensis Berliner (1911) quanto à patogenicidade em T. urticae Koch (1836). Cada isolado, contendo 3 x 108 esporos viáveis/mL de água destilada autoclavada, constituiu em um tratamento com 8 repetições, em arenas de folhas de feijão-de-porco Canavalia ensiformes com 4,5 cm de diâmetro. Cada repetição continha 10 fêmeas adultas do ácaro e após 5 dias da transferência, a mortalidade foi quantificada e posteriormente corrigida pela fórmula de Abbott (1925). Os resultados foram submetidos ao teste de Scott Knott, ao nível de 5%. Os testes em condições de laboratório mostraram que há ação tóxica de Bacillus thuringiensis em Tetranychus urticae.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-03-24T12:07:34Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Tássia Tuane Moreira dos Santos - 2017.pdf: 1707301 bytes, checksum: 711b52250570075b4b92d21dd0f3edc0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-03-24T12:08:10Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Tássia Tuane Moreira dos Santos - 2017.pdf: 1707301 bytes, checksum: 711b52250570075b4b92d21dd0f3edc0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-24T12:08:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Tássia Tuane Moreira dos Santos - 2017.pdf: 1707301 bytes, checksum: 711b52250570075b4b92d21dd0f3edc0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The main damage of whitefly Bemisia tabaci biotype B on beans is virus transmission such as Bean golden mosaic virus (BGMV) and Cowpea mild mottle virus (CpMMV). Different insecticides mechanisms of action, use of selective molecules and alternative methods of control are important techniques for management of this insect. Therefore, this study was conducted to test the efficiency of chemical insecticides on mortality of whiteflies adults and CpMMV transmission on BGMV-resistant transgenic common bean; and to verify the combination of chemical insecticides in sublethal doses with the entomopathogeni fungus Isaria javanica on control of B. tabaci nymhps in commom bean. In first part of the study two experiments were conducted with seed treatments, one with foliar application and another with the combination with seed treatment and foliar application. Experiments were conducted in screenhouse. In first experiment with seeds treatment thiametoxam FS at 300, 500, 700 mL and imidacloprid+thiodicarb FS at 500, 600 e 800 mL were tested. In second experiment were used higher doses of thiametoxam FS (500, 700 e 900 mL) and imidacloprid+thiodicarb FS (600, 800 e 1.000 mL). In foliar application were evaluated the insecticides thiamethoxam+cyantraniliprole WG and flupyradifurone SL at 500 e 750 mL ha-1, thiamethoxam + lambda-cyhalothrin SC and thiamethoxam WG both at 300 mL ha-1. In combination of seed treatment and foliar application the treatments were plants treated only with seed treatment or with ST following 1, 2, 3 or 4 foliar applications with different insecticides at five-days intervals. On second stage, at laboratory the compatibility of spiromesifen and buprofezin with I. javanica was observed. Different insecticides concentrations (12.5; 25; 50 and 100 ppm) were added to conidia suspension. Germination of conidia, mycelial growth and conidial production were evaluated. On screenhouse were determined: 1) the sublethal (CL25) doses of insecticides spiromesifen and buprofezin to 2nd ínstar whitefly nymphs; 2) the bio-efficacy of different isolates of I. javanica to 2nd ínstar whitefly nymphs and 3) the effect of the combination between spiromesifen and buprofezin with I. javanica on control of 2nd ínstar whitefly nymphs. Nymphal mortality and sporulation on cadavers (2 and 3) were evaluated. As result was observed that thiametoxam + ciantraniliprole WG and flupiradifurone SL applied in foliar application resulted in higher mortality of whitefly adults. ST added 3 or 4 foliar application proportioned the highest mortality and reduction on CpMMV transmission. Insecticides are efficient on B. tabaci control; however, it does not avoid the virus transmission. The combinations of ST added 3 or 4 foliar application reduce the CpMMV on 50%. All I. javanica isolates caused nymphal mortalities. Spiromesifen and buprofezin were compatible with I. javanica. Additive and synergistic effects were observed. A management program of whitefly is important to reduction of CpMMV incidence on BGMV-resistant transgenic common bean. Besides, the combination of selective chemical insecticides and I. javanica on B. tabaci might increase the success of control. / O principal dano da mosca-branca Bemisia tabaci biótipo B na cultura do feijoeiro é a transmissão de vírus, como o Bean golden mosaic virus (BGMV) e o Cowpea mild mottle virus (CpMMV). A rotação de mecanismos de ação dos inseticidas, o uso de moléculas seletivas e de métodos de controle alternativos são técnicas importantes para o manejo deste inseto. Os objetivos do estudo foram testar a eficiência de inseticidas químicos na mortalidade de adultos de mosca-branca e na transmissão de CpMMV no feijoeiro geneticamente modificado resistente ao mosaico dourado (RMD) e a associação de inseticidas químicos em doses subletais com o fungo Isaria javanica no controle de ninfas de B. tabaci em feijoeiro-comum. Na primeira etapa do estudo em casa telada, dois experimentos foram realizados com tratamento de sementes, um com aplicação foliar e outro com a combinação de tratamento de sementes e aplicação foliar. No primeiro experimento com tratamento de sementes (TS) os inseticidas thiametoxam FS nas doses 300, 500, 700 mL e imidacloprid+thiodicarb FS nas doses 500, 600 e 800 mL foram testados. Já no segundo TS foram utilizados doses maiores de thiametoxam FS (500, 700 e 900 mL) e de imidacloprid+thiodicarb FS (600, 800 e 1000 mL). Em pulverização foram avaliados os inseticidas thiamethoxam+cyantraniliprole WG (500 e 750 mL ha-1), flupyradifurone SL (500 e 750 mL ha-1), thiamethoxam+lambda-cyhalothrin SC (300 mL ha-1) e thiamethoxam WG (300 mL ha-1). Na combinação de tratamento de sementes e aplicação foliar, as plantas foram tratadas apenas com TS ou com TS seguido de 1, 2, 3 ou 4 pulverizações com diferentes inseticidas a cada 5 dias. Na segunda etapa para verificar a compatibilidade dos inseticidas spiromesifen e buprofezin com o I. javanica, concentrações destes inseticidas (12,5; 25; 50 e 100 ppm) foram adicionadas à suspensão de conídios. Foram avaliados a germinação de conídios, crescimento micelial e produção de conídios. Em casa telada foram determinados: 1) a dose subletal (CL25) dos inseticidas spiromesifen e buprofezin a ninfas de mosca-branca; 2) a bio-eficácia de isolados de I. javanica à ninfas de mosca-branca; e 3) o efeito da combinação de spiromesifen e buprofezin e I. javanica no controle de ninfas de mosca-branca. A mortalidade das ninfas e a esporulação nos cadáveres (2 e 3) foram avaliadas. No primeiro estudo o tiametoxam+ciantraniliprole WG e flupiradifurona SL em pulverização foliar resultaram em maiores mortalidades de mosca-branca. Os inseticidas são eficientes no controle de mosca-branca. Apenas a combinação de TS mais 3 ou 4 pulverizações foliares reduzem a incidência de CpMMV. No segundo estudo, todos os isolados causaram morte de ninfas. Os inseticidas foram compatíveis com I. javanica. Efeitos aditivo e sinérgico foram observados entre I. javanica e spiromesifen e buprofezin no controle de ninfas de mosca-branca. Um programa de manejo de B. tabaci é importante para a redução de CpMMV no feijoeiro RMD. Além disso, a combinação de inseticidas sintéticos seletivos e o fungo I. javanica pode aumentar o sucesso do controle de ninfas de mosca-branca.

Os fungos entomopatogênicos dos gêneros Metarhizium, Beauveria e Isaria (Ordem Hypocreales), são comumente encontrados em solo onde sobrevivem de maneira saprofítica ou como endofíticos do sistema radicular das plantas. Informações sobre a composição destas espécies bem como sua diversidade, distribuição e associação com diferentes tipos de cultivos e vegetação nativa são escassas no Brasil. O presente estudo foi desenvolvido para comparar a abundância de fungos entomopatogênicos e a diversidade genética de isolados de Metarhizium spp. em amostras de solo de cultivos anuais, perenes e vegetação nativa, em cinco estados brasileiros que representam os biomas Amazônia, Cerrado, Caatinga, Mata Atlântica e Pampa, em duas estações (seca e úmida) nos anos de 2012 e 2013. O isolamento dos fungos foi realizado com meio seletivo e \"Insect bait\" utilizando Galleria mellonella e Tenebrio molitor. Nos estudos de diversidade genética de Metarhizium spp. foram utilizadas sequências de DNA da região MzIGS3. Representantes dos haplótipos revelados nesta análise tiveram a região 5\'-TEF sequenciada para identificação específica. Fungos entomopatogênicos foram isolados de 86% das 1.056 amostras de solo sendo Metarhizium o gênero predominante (66% das amostras de solo), seguido por Beauveria (41,9%) e Isaria (10,8%). Em geral, as maiores densidades de fungos entomopatogênicos foram obtidas nos biomas Amazônia e Cerrado e as menores densidades detectadas no bioma Caatinga. Metarhizium spp. foi detectado em maior número de amostras de solo em vegetação nativa e cultivos anual e perene do Cerrado. A frequência de Isaria spp. foi baixa nas amostras de solo, sendo detectado em maior número de amostras nos solos com cultivos anuais e vegetação nativa na Amazônia e Caatinga. Metarhizium spp. foi geralmente encontrado em um maior número de amostras coletadas na estação úmida em comparação com as coletas da estação seca, por outro lado Beauveria spp. foi superior na estação seca. A diversidade dos isolados de Metarhizium spp. provenientes de áreas de vegetação nativa foi maior do que dos isolados de cultivos anuais e perenes. Seis linhagens foram encontradas neste estudo; M. robertsii, M. anisopliae, M. pingshaense e três espécies indeterminadas. M. robertsii foi a linhagem predominante (65% dos isolados) sendo encontrado em áreas com vegetação nativa e cultivos anual e perene dos cinco biomas. Metarhizium sp. indet. 1 apresentou a maior diversidade haplotípica dentre as linhagens estudadas. Uma nova linhagem, não caracterizada taxonomicamente, Metarhizium sp. indet. 3, foi encontrada predominantemente na Caatinga. Somente na Amazônia foram encontradas todas as linhagens. O conhecimento da composição das populações de fungos entomopatogênicos nativos bem como sobre a filogenia, diversidade e distribuição dos haplótipos de Metarhizium spp. em solos brasileiros, gerado neste estudo, poderá servir como subsídio para o desenvolvimento de estratégias de conservação e maximização do controle biológico natural de pragas. / Entomopathogenic fungi of the genera Metarhizium, Beauveria and Isaria (order Hypocreales) are associated to the soil where they survive saprofitically or as endophytes of the plants root system. Information on the species composition and its diversity, distribution and association of these fungi with different types of crops and native vegetation are scarce in Brazil. The present study was carried out to compare the abundance of entomopathogenic fungi and the genetic diversity of Metarhizium spp. Isolated from soil samples from annual and perennial crops and native vegetation in five Brazilian states that represent the biomes Amazon, Cerrado, Caatinga, Atlantic Forest and Pampa, in two seasons (wet and dry) in the years 2012 and 2013. The isolation of fungi was performed with selective medium and \"Insect bait\" using Galleria mellonella and Tenebrio molitor. DNA sequences of the region MzIGS3 were used in genetic diversity studies of Metarhizium spp. Representatives haplotypes revealed in the diversity analysis had the 5\'-TEF region sequenced for species identification. Entomopathogenic fungi were isolated from 86% of 1,056 soil samples and Metarhizium was the predominant genus (66% of soil samples), followed by Beauveria (41.9%) and Isaria (10.8%). In general, the highest densities of entomopathogenic fungi were obtained in the Amazon and Cerrado biomes and the lowest densities were detected in the Caatinga biome. Metarhizium spp. was detected in a greater number of soil samples from native vegetation and annual and perennial crops of Cerrado. The frequency of Isaria spp. was low in soil samples being detected in a greater number of soils with annual crops and native vegetation in the Amazon and Caatinga. Metarhizium spp. was usually found in a greater number of samples collected during the wet season compared to the collections in the dry season. On the other hand, Beauveria spp. was higher in the dry season. The diversity of isolates of Metarhizium spp. from areas of native vegetation was greater than that obtained from annual and perennial crops. Six lineages were found in this study; M. robertsii, M. anisopliae, M. pingshaense and three indeterminate species. M. robertsii was the predominant (65% of isolates) found in areas with native vegetation and in the annual and perennial crops of the five biomes. Metarhizium sp. indet. 1 showed the greatest haplotype diversity among the strains studied. A new strain, not characterized taxonomically, Metarhizium sp. indet. 3, was found predominantly in the Caatinga. Only in the Amazon, all lineages were found. The knowledge on species composition of entomopathogenic fungi as well as about phylogeny, diversity and distribution of haplotypes of Metarhizium spp. in Brazilian soils, generated in this study, may be useful for the development of strategies for conservation and maximization of natural biological control of pests.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-24T16:26:34Z No. of bitstreams: 1 Jennifer Guimaraes.pdf: 774518 bytes, checksum: 992bf3a690cf42445cc397d5068f8f46 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-24T16:26:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jennifer Guimaraes.pdf: 774518 bytes, checksum: 992bf3a690cf42445cc397d5068f8f46 (MD5) Previous issue date: 2012-02-01 / Diatraea flavipennella (Box) is considered a major pest of economic importance to the culture of sugar cane in Northeast Brazil. Biological control with the fungus Metarhizium anisopliae (Metch.) Sorok., may be a viable alternative, as this pathogen is already used for other pests in this crop. This work aimed to evaluate the effects of this fungus at different concentrations, against the third instar larvae of D. flavipennella and to investigate the immune response, by analysing the types of hemocytes, and phenoloxidase, total protein and nitric oxide, tritation as well as the possible differences in the biochemical profile of hemocytes. It was observed the effect of M. anisopliae against larvae of D. flavipennella, sprayed at concentrations of 103, 104, 105 conidia/mL, which showed differences regarding to the larval period,which extended up to 72.0 days and 25.0 days in treatment the control, respectively The results for hemocytes revealed that the most common cells when sprayed at concentrations of 103, 105, 107 conidia/mL were prohemocytes, spherulocytes, plasma cells and granulocytes in relation to adipohemocytes and oenocytoids. The of nitric oxide titration was different between the control and the concentration 107 conidia/mL (24), while phenoloxidase activity was similar among treatments at 24h and was higher only at the concentration 107 conidia/mL after 60h. The total protein concentration in 107 conidia/ml (60h) was higher relatively to the control. In the biochemical profile of hemocytes there was an alteration in carbohydrates, lipids and total proteins contents at reating to the fungus. The results indicate that M. anisopliae may be used in Integrated Pest Management of D. flavipennella in northeastern sugar crops, because of the its pathogenicity and interfere with their development even when exposed to small concentrations. / Diatraea flavipennella (Box) é considerada uma das principais pragas de importância econômica para a cultura da cana-de-açúcar no nordeste brasileiro. O controle biológico com o fungo Metarhizium anisopliae (Metch.) Sorok., pode ser uma alternativa viável, considerando que esse entomopatógeno já é empregado para outras pragas nesta cultura. Este trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos deste fungo, em diferentes concentrações, sobre lagartas do terceiro ínstar de D. flavipennella e investigar sua resposta imune, através da análise quantitativa dos tipos de hemócitos, da produção de fenoloxidase, proteína total e óxido nítrico, e possíveis diferenças no perfil bioquímico dos hemócitos. Foi observado o efeito de M. anisopliae sobre lagartas de D. flavipennella, pulverizado nas concentrações de 103, 104, 105 conídios/mL, no qual apresentou diferenças com relação ao período larval, prolongando até 72,0 dias nos tratamentos e 25,0 dias na testemunha. Os resultados referentes aos hemócitos revelaram que as células mais freqüentes quando pulverizado nas concentrações de 103, 105, 107 conídios/mL foram prohemócitos, esferulócitos, plasmócitos e granulócitos, em relação aos adipohemócitos e oenocitóides. O nível de oxido nítrico apresentou diferença entre a testemunha e a concentração 107 conídios/mL (24h), enquanto a atividade de fenoloxidase foi semelhante entre os tratamentos em 24h e superior na concentração 107 conídios/mL em 60 h. A proteína total na concentração 107 conídios/mL (60h) foi maior diferindo da testemunha. No perfil bioquímico dos hemócitos, houve uma alteração em carboidratos, lipídeos e proteínas em reação ao fungo. Os resultados indicam que o fungo M. anisopliae pode ser utilizado no Manejo Integrado de D. flavipennella nos canaviais nordestinos, por apresentar patogenicidade e interferir no seu desenvolvimento mesmo quando expostas a pequenas concentrações.

Made available in DSpace on 2016-12-23T14:37:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leandro Pin Dalvi.pdf: 1271308 bytes, checksum: 029f08fb27575fe178e1d7fbfa5e6720 (MD5) Previous issue date: 2008-02-23 / A cafeicultura é a maior geradora de empregos e renda para as famílias do Espírito Santo. Dentre os problemas que esta atividade enfrenta, destaca-se a broca-do-café Hypothenemus hampei, uma praga que causa prejuízos em todos os estágios de maturação dos frutos, assim como no pós-colheita. O objetivo do presente trabalho foi coletar, caracterizar molecularmente e selecionar isolados do fungo entomopatogênico Beauveria bassiana com potencial para utilização em programas de manejo fitossanitário da broca-do-café. O trabalho foi realizado no Setor de Entomologia e Fitopatologia NUDEMAFI, localizado no Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal do Espírito Santo (CCA-UFES), e nos laboratórios de Entomologia e Biotecnologia da Embrapa-Soja localizados em Londrina, Paraná. As coletas resultaram em 28 isolados classificados como B. bassiana, tendo sido um dos isolados descartado dos testes por apresentar baixo crescimento. As amplificações utilizando 12 primers (iniciadores) deram origem a 82 bandas. O coeficiente de similaridade Dice variou de 93 a 51%. Foi evidente, salvo algumas exceções, que o local de coleta foi peça chave na formação de grupos muito relacionados. Ocorreu grande amplitude na virulência. Foram pré-selecionados os isolados CCA-UFES/Bb4, CCA-UFES/Bb11, CCA-UFES/Bb15, CCA-UFES/Bb18 que produziram mortalidade confirmada acima de 60%. Posteriormente, o isolado CCA-UFES/Bb15 apresentou melhor resposta, diferenciando-se do isolado utilizados como padrão - ESALQ-447 - cujos CL50 foram de 4,0 x 104 e 11,85 x 104 conídios/mL, respectivamente. Para todos os isolados selecionados, assim como para o padrão, o aumento na concentração representou aumento na mortalidade. A conidiogênese sobre os cadáveres da broca-do-café foi inversamente proporcional à virulência dos isolados, sendo ambas as características importantes para o sucesso de um programa de Manejo Integrado de Pragas (MIP). Os resultados obtidos são promissores, dando subsídio a novas pesquisas preferencialmente a campo / The coffee plantation is the largest source of jobs and familiar income of the State of Espírito Santo (Brazil). The coffee berry borer, Hypothenemus hampei, is widely considered one of the most important coffee pests because the losses in all stages of coffee grain as well as in post-harvest in this activity. The objective of this study was the collect, molecular characterization and the select of entomopathogenic fungus Beauveria bassiana strains, with potential use in integrated pest management in coffe plantations. The work was carried out at NUDEMAFI, located in the Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal do Espírito Santo, in municipality of Alegre, Brazil and the Biotechnology and Biological laboratories in the Embrapa Soja, in municipality of Londrina, State of Paraná, Brazil. A collection of 28 B. bassiana strains,isolated from different geographic regions were established. Only one Bassiana bassiana strain was discarded for low growth in laboratory. The amplifications using 12 "primers" (initiators) led to 82 bands. Dices coefficient ranged from 51 to. 93% with few exceptions Groups of B. bassiana strains related were forming due to the place colleted and high levels of virulence was observed. The Beauveria bassiana strains CCA-UFES/Bb4, CCA-UFES/Bb11, CCA-UFES/Bb15, CCA-UFES/Bb18 were pre-selected which showed confirmed mortality higher than 60Only The LC50, of the CCA-UFES/Bb15 strains was better response with significant difference between the standard, with 4.0 x 104 in 11.85 x 104 conidia / ml, respectively,. All isolates selected, as well as for the standard, the increase in the concentration resulted an increase of mortality of H. hampei. The conidiogenesis on coffee berry borers cadavers was inversely proportional to the virulence of the B. bassiana strains, and both this characteristics are important to the success of a program of Integrated Pest Management (IPM)

Os fungos entomopatogênicos dos gêneros Metarhizium, Beauveria e Isaria (Ordem Hypocreales), são comumente encontrados em solo onde sobrevivem de maneira saprofítica ou como endofíticos do sistema radicular das plantas. Informações sobre a composição destas espécies bem como sua diversidade, distribuição e associação com diferentes tipos de cultivos e vegetação nativa são escassas no Brasil. O presente estudo foi desenvolvido para comparar a abundância de fungos entomopatogênicos e a diversidade genética de isolados de Metarhizium spp. em amostras de solo de cultivos anuais, perenes e vegetação nativa, em cinco estados brasileiros que representam os biomas Amazônia, Cerrado, Caatinga, Mata Atlântica e Pampa, em duas estações (seca e úmida) nos anos de 2012 e 2013. O isolamento dos fungos foi realizado com meio seletivo e \"Insect bait\" utilizando Galleria mellonella e Tenebrio molitor. Nos estudos de diversidade genética de Metarhizium spp. foram utilizadas sequências de DNA da região MzIGS3. Representantes dos haplótipos revelados nesta análise tiveram a região 5\'-TEF sequenciada para identificação específica. Fungos entomopatogênicos foram isolados de 86% das 1.056 amostras de solo sendo Metarhizium o gênero predominante (66% das amostras de solo), seguido por Beauveria (41,9%) e Isaria (10,8%). Em geral, as maiores densidades de fungos entomopatogênicos foram obtidas nos biomas Amazônia e Cerrado e as menores densidades detectadas no bioma Caatinga. Metarhizium spp. foi detectado em maior número de amostras de solo em vegetação nativa e cultivos anual e perene do Cerrado. A frequência de Isaria spp. foi baixa nas amostras de solo, sendo detectado em maior número de amostras nos solos com cultivos anuais e vegetação nativa na Amazônia e Caatinga. Metarhizium spp. foi geralmente encontrado em um maior número de amostras coletadas na estação úmida em comparação com as coletas da estação seca, por outro lado Beauveria spp. foi superior na estação seca. A diversidade dos isolados de Metarhizium spp. provenientes de áreas de vegetação nativa foi maior do que dos isolados de cultivos anuais e perenes. Seis linhagens foram encontradas neste estudo; M. robertsii, M. anisopliae, M. pingshaense e três espécies indeterminadas. M. robertsii foi a linhagem predominante (65% dos isolados) sendo encontrado em áreas com vegetação nativa e cultivos anual e perene dos cinco biomas. Metarhizium sp. indet. 1 apresentou a maior diversidade haplotípica dentre as linhagens estudadas. Uma nova linhagem, não caracterizada taxonomicamente, Metarhizium sp. indet. 3, foi encontrada predominantemente na Caatinga. Somente na Amazônia foram encontradas todas as linhagens. O conhecimento da composição das populações de fungos entomopatogênicos nativos bem como sobre a filogenia, diversidade e distribuição dos haplótipos de Metarhizium spp. em solos brasileiros, gerado neste estudo, poderá servir como subsídio para o desenvolvimento de estratégias de conservação e maximização do controle biológico natural de pragas. / Entomopathogenic fungi of the genera Metarhizium, Beauveria and Isaria (order Hypocreales) are associated to the soil where they survive saprofitically or as endophytes of the plants root system. Information on the species composition and its diversity, distribution and association of these fungi with different types of crops and native vegetation are scarce in Brazil. The present study was carried out to compare the abundance of entomopathogenic fungi and the genetic diversity of Metarhizium spp. Isolated from soil samples from annual and perennial crops and native vegetation in five Brazilian states that represent the biomes Amazon, Cerrado, Caatinga, Atlantic Forest and Pampa, in two seasons (wet and dry) in the years 2012 and 2013. The isolation of fungi was performed with selective medium and \"Insect bait\" using Galleria mellonella and Tenebrio molitor. DNA sequences of the region MzIGS3 were used in genetic diversity studies of Metarhizium spp. Representatives haplotypes revealed in the diversity analysis had the 5\'-TEF region sequenced for species identification. Entomopathogenic fungi were isolated from 86% of 1,056 soil samples and Metarhizium was the predominant genus (66% of soil samples), followed by Beauveria (41.9%) and Isaria (10.8%). In general, the highest densities of entomopathogenic fungi were obtained in the Amazon and Cerrado biomes and the lowest densities were detected in the Caatinga biome. Metarhizium spp. was detected in a greater number of soil samples from native vegetation and annual and perennial crops of Cerrado. The frequency of Isaria spp. was low in soil samples being detected in a greater number of soils with annual crops and native vegetation in the Amazon and Caatinga. Metarhizium spp. was usually found in a greater number of samples collected during the wet season compared to the collections in the dry season. On the other hand, Beauveria spp. was higher in the dry season. The diversity of isolates of Metarhizium spp. from areas of native vegetation was greater than that obtained from annual and perennial crops. Six lineages were found in this study; M. robertsii, M. anisopliae, M. pingshaense and three indeterminate species. M. robertsii was the predominant (65% of isolates) found in areas with native vegetation and in the annual and perennial crops of the five biomes. Metarhizium sp. indet. 1 showed the greatest haplotype diversity among the strains studied. A new strain, not characterized taxonomically, Metarhizium sp. indet. 3, was found predominantly in the Caatinga. Only in the Amazon, all lineages were found. The knowledge on species composition of entomopathogenic fungi as well as about phylogeny, diversity and distribution of haplotypes of Metarhizium spp. in Brazilian soils, generated in this study, may be useful for the development of strategies for conservation and maximization of natural biological control of pests.