Os recursos genéticos vegetais apresentam um valor real e potencial para a agricultura em razão da sua importância em programas de melhoramento e conservação. Este estudo teve como objetivo principal caracterizar a diversidade genética e química do germoplasma de gengibre do Departamento de Genética da ESALQ/USP, por meio de 18 descritores fenotípicos, 13 combinações de marcadores AFLP e análise da composição química do óleo essencial. O germoplasma foi formado por acessos procedentes de distintos estados brasileiros, além de algúns acessos introduzidos da Colômbia. Durante as coletas, foram entrevistados 34 agricultores de três estados: São Paulo (SP), Espírito Santo (ES) e Paraná (PR), constatando-se que esta espécie é cultivada principalmente por agricultores familiares cuja fonte principal de renda é a agricultura. Na análise da composição química, um total de 61 compostos foram identificados, sendo que os acessos apresentaram variabilidade química segundo a análise de variância. O óleo essencial foi rico em monoterpenos (82,35%), destacando-se geranial (20,41%) e neral (13,36%) como os compostos mais abundantes. Os compostos α-zingibereno, 1,8-cineol, linalol e β-felandreno, foram importantes na análise da diversidade química e, portanto, determinantes no agrupamento baseado no método de ligação completa (LC-VD) que classificou o germoplasma em dois grupos de acessos: cultivares e cultivares locais. Na caracterização agromorfológica, pouca variação foi observada para variáveis qualitativas, enquanto que para variáveis quantitativas houve moderada a baixa variabilidade, embora alguns acessos divergentes foram identificados. A análise de componentes principais explicou 82% da variação total nos primeiros três componentes, sendo que a distribuição dos acessos no gráfico de dispersão foi congruente com os agrupamentos formados pelo método de otimização de Tocher, destacando-se os acessos Gen-18, Gen-24, Gen-65 e Gen-42 como os mais divergentes do germoplasma fenotípicamente. Na caracterização molecular, 13 combinações de primers AFLP geraram, em média, 113,5 locos polimórficos, com uma proporção de 96,85% de polimorfísmo na coleção global. As estimativas de diversidade genética de Nei (Hj), índice de Shannon (I) e número efetivo de alelos (ne), foram superiores nos acessos colombianos (0,501; 0,396 e 1,508, respectivamente), em relação aos acessos brasileiros. A AMOVA mostrou que a maior parte da variação (63%) ocorreu entre os dois países e o índice FST=0,153 corroborou este resultado, indicando alta diferenciação genética entre eles. Os agrupamentos fornecidos pelo Structure e o dendrograma baseado no complemento do coeficiente de Jaccard, foram consistentes entre si e demonstraram que a maioria dos acessos brasileiros são altamente similares, sendo que não há influência da procedência geográfica no padrão dos agrupamentos químicos, fenotípicos e moleculares. A introdução de novos materiais genéticos no Brasil, certamente contribuirá para uma base genética mais ampla deste cultivo. / Plant genetic resources exhibit a true and potential value for agriculture due to their importance in breeding and conservation programs. This study aimed to characterize the genetic and chemistry diversity of ginger germplasm of Genetics Department of the ESALQ/USP, through 18 phenotypic descriptors, 13 AFLP markers combinations and chemical composition analysis of essential oil. The germplasm was combined by accessions coming from diferent Brazilian states, along with some accessions introduced from Colombia. During the collection, 34 farmers were interviewed in three states: São Paulo (SP), Espírito Santo (ES) and Paraná (PR). Ginger is mainly cultivated by small farmers whose main income source is agriculture. In the chemical composition analysis, a total of 61 compounds were identified. The accessions presented chemical variability according to the analysis of variance. The essential oil was rich in monoterpenes (82.35%), being the geranial (20.41%) and the neral (13.36%), both referred to as citral, the most abundant compounds. The α-zingiberene, 1,8-cineole, linalool and β-phellandrene compounds were relevant in the chemical diversity analysis of the accessions, while the dendrogram based on the complete linkage method (LC-VD) classified the germplasm into two groups: landraces and cultivars accessions. In the agro-morphologic characterization, qualitative traits showed little variation, while moderate to low variability was observed for quantitative traits, although some divergent accessions were identified. The principal component analysis explained 82% of the total variation in the first three components, wherein the accessions distribution on the scatter plot was consistent with the groups formed by the Tocher method, with the Gen-18, Gen -24, Gen-65 and Gen-42 accessions as the most divergent ones from the phenotypically germplasm. In the molecular characterization, 13 AFLP markers combinations generated an average of 113.5 polymorphic loci, with a ratio of 96.85% of polymorphism in the overall collection. Estimates of Nei genetic diversity (Hj), Shannon index (I) and alleles effective number (ne) were higher in Colombian accessions (0.501; 0.396 and 1.508, respectively). The AMOVA showed that most of the variation (63%) occurs between the two countries and the FST=0.153 index suportted this result, indicating high genetic differentiation between Brazilian and Colombian accessions. The groupings provided by Structure and the dendrogram based on Jaccard coefficient complement were consistent with each other and showed that Brazilian accessions are genetically similar. In general, there is no influence of the accesses geographic origin in the chemical, phenotypic and molecular grouping pattern. The introduction of new genetic materials in Brazil, will certainly contribute to a broader genetic basis of this species.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-06-28T11:53:19Z No. of bitstreams: 1 flaviadelgaudioguimaraes.pdf: 1142633 bytes, checksum: 991f1b922805b3633df3551118ec22e9 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-06-28T12:25:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 flaviadelgaudioguimaraes.pdf: 1142633 bytes, checksum: 991f1b922805b3633df3551118ec22e9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-28T12:25:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 flaviadelgaudioguimaraes.pdf: 1142633 bytes, checksum: 991f1b922805b3633df3551118ec22e9 (MD5) Previous issue date: 2013-07-29 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A crescente frequência de microrganismos resistentes nas instituições de saúde, têm evidenciado a necessidade pela busca de novas moléculas que possam permitir uma melhoria no tratamento de infecções por organismos patogênicos resistentes a profilaxias convencionais. As plantas aromáticas, bem como os respectivos óleos essenciais, são utilizadas há séculos como flavorizantes, na fabricação de cosméticos e perfumarias, e farmacologicamente com fins medicinais, o que tem estimulado a procura por substâncias biologicamente ativas e eficazes, especialmente contra microrganismos. Os óleos essenciais de plantas do gênero Cymbopogon e seus componentes são reconhecidos por apresentarem atividade antimicrobiana, antihelmíntica, antiparasitária, antiinflamatória, anticonvulsivante e antioxidante. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade biológica in vitro do óleo essencial da planta medicinal Cymbopogon winterianus Jowitt ex Bor, popularmente conhecida como citronela. Foram utilizados os métodos: teste de difusão em discos, concentração inibitória mínima e curva de crescimento bacteriano (método indireto) frente às cepas de referência da American Type Culture Collection (ATCC) - Enterococcus faecalis ATCC 29212, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Staphylococcus simulans ATCC 27851, Entrobacter cloacaceae ATCC 23355, Proteus mirabilis ATCC 15290 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Serratia marcescens ATCC 14756, Escherichia coli ATCC 35211 - e cepa de isolado clínico - Staphylococcus aureus 53581, além dos ensaios de citotoxicidade pelo método de redução do corante tretazólio (MTT), utilizando células da linhagem Vero. O óleo de citronela apresentou atividade antibacteriana contra as cepas Gram-positivas testadas enquanto que as cepas Gram-negativas utilizadas neste trabalho mostraram-se resistentes. No estudo da citotoxicidade os resultados indicaram que a viabilidade celular, manteve-se superior a 100%, demonstrando que este óleo não apresentou citotoxicidade sobre as células em estudo, nas concentrações avaliadas. / The increasing frequency of resistant microorganisms in healthcare institutions, has shown the need for searching new molecules that may allow an improvement in the treatment of infections caused by pathogens resistant to conventional prophylaxis. Aromatic plants and their essential oils have been used for centuries as a flavoring in the manufacture of cosmetics and perfume, and pharmacologically for medicinal purposes, which has stimulated the search for biologically active substances and effective, especially on microorganisms. The essential oils plants of the genus Cymbopogon and its constituents are known for having antimicrobial activities, anthelmintic, antiparasitic, anti-inflammatory, anticonvulsant and antioxidant. Therefore, the aim of this study was to evaluate in vitro the biological activity of the essential oil of Cymbopogon winterianus medicinal plant, popularly known as citronella. The methods used were: disk diffusion test, minimum inhibitory concentration and bacterial growth curve (indirect method) against reference strains from the American Type Culture Collection (ATCC) - Enterococcus faecalis ATCC 29212, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Staphylococcus simulans ATCC 27851, Entrobacter cloacaceae ATCC 23355, Proteus mirabilis ATCC 15290 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Serratia marcescens ATCC 14756, Escherichia coli ATCC 35211 - and strain from clinical isolate - Staphylococcus aureus 53581, apart from cytotoxicity assays by the method of tretazólio dye reduction (MTT), using Vero cell line. The citronella oil presented antibacterial activity against Gram-positive strains tested whereas Gram-negative strains used in this study were resistant. In the study of cytotoxicity results indicated that cell viability remained above 100%, indicating that this oil had no cytotoxicity of the cells under study at the concentrations evaluated.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-07-05T17:50:48Z No. of bitstreams: 1 maynadasilveiragomide.pdf: 1825099 bytes, checksum: b38d85ac825f80bd92aced8a24024f86 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-07-13T16:27:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 maynadasilveiragomide.pdf: 1825099 bytes, checksum: b38d85ac825f80bd92aced8a24024f86 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T16:27:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 maynadasilveiragomide.pdf: 1825099 bytes, checksum: b38d85ac825f80bd92aced8a24024f86 (MD5) Previous issue date: 2012-12-19 / Apesar de grandes avanços no campo do tratamento e controle da progressão do câncer, grandes lacunas ainda permanecem. Terpenóides encontrados nos óleos essenciais de plantas do gênero Lippia, já foram relatados como potenciais compostos anticancerígenos para alguns tipos de tumores. Desta forma, este estudo objetivou investigar a possível propriedade farmacológica como agente anticancerígeno sobre linhagens tumorais dos compostos presentes no óleo essencial de cinco espécies de Lippia. Os resultados mostraram, através de ensaio de MTT, efeito citotóxico nas linhagens de carcinoma de cólon de camundongo CT26.WT e de melanoma de pele humano MeWo, com IC50 e comprometimento da viabilidade celular acima de 50% sob ação dos óleos essenciais de L. alba quimiotipos geraniol e carvona, L.sidoides, L. salviifolia, L. rotundifolia e L. lacunosa. O ciclo celular foi bloqueado na fase G0/G1 após 24 h de tratamento da linhagem MeWo com os óleos de L. alba quimiotipos geraniol (50 μg/mL) e carvona (100 e 150 μg/mL) e L. rotundifolia (200 μg/mL). Além disso, os óleos de L. alba geraniol (200 μg/mL por 24 h) e L. lacunosa (10, 50, 100 e 200 μg/mL) provocaram morte celular de MeWo, caracterizada por elevada fragmentação de DNA, confirmada como apoptose para o óleo de L. alba geraniol por ensaio de TUNEL. Sobre a linhagem CT26.WT, o óleo de L. alba geraniol provocou parada de ciclo celular nas fases G0/G1 (10 μg/mL por 12 h; 10 e 200 μg/mL por 24 h) e G2/M (50 e 100 μg/mL por 12 e 24 h; 87 μg/mL por 72h). L. sidoides também provocou parada em G0/G1 com 100 μg/mL por 24 h e parada em G2/M com 100 e 150 μg/mL por 12 h e 150 μg/mL por 24 h. O óleo de L. salviifolia induziu apenas parada em G2/M na concentração de 150 μg/mL por 24 h, o de L. rotundifolia, parada em G0/G1 com 50, 100 e 200 μg/mL por 12 h e 50 μg/mL por 24 h. L. lacunosa (50 μg/mL com exposição de 72 h) provocou parada em G2/M. Os óleos de L. alba geraniol e L. lacunosa, no ensaio de 72h, provocaram aumento de DNA fragmentado, mas este não atingiu níveis tão elevados quanto aqueles observados para a linhagem MeWo. Tratamento de L. alba geraniol (200 μg/mL por 12 h) sobre MeWo e de L. alba geraniol, L. lacunosa. L. rotundifolia e L. sidoides (100 μg/mL por 12 h) sobre CT26.WT foram submetidos a análise de expressão diferencial de microRNAs através de real-time PCR com painel de 95 microRNAs relacionados a câncer. Os microRNAs de MeWo apresentaram-se down-regulados em relação ao controle negativo, que pode ter sido devido ao efeito apoptótico de L. alba geraniol sobre esta linhagem. Sobre CT26.WT, 26 microRNAs para os óleos de L. alba geraniol e L. lacunosa e 35 para L. rotundifolia e L. sidoides foram encontrados significativamente (p<0,05) desregulados em relação ao controle. Os óleos essenciais das espécies de Lippia testados, portanto, comprometeram a viabilidade celular das linhagens MeWo e CT26.WT, indicando que podem ser bons candidatos como fonte de biomoléculas anticâncer. / Despite the great progress in the treatment and progressive control of cancer, significant gaps still remain. Terpenoids which were found in the essential oils of several species from the genus Lippia were reported as potential anticancer compounds for some types of tumors. Consequently, this study aimed to investigate the possible pharmacological property as anticancer agent against tumor cell lines of compounds present in the essential oil of five Lippia species. The results showed, through the MTT assay, cytotoxic effect on mouse colon carcinoma cell lines CT26.WT and human skin melanoma MeWo with IC50 and effect on the cell viability above 50% under the use of essential oils of L. alba chemotypes geraniol and carvone, L.sidoides, L. salviifolia, L. rotundifolia and L. lacunosa. The cell cycle was arrested in G0/G1 phase after 24 h treatment of of MeWo with the oils of L. alba chemotypes geraniol (50 μg/ml) and carvone (100 and 150 μg/mL) and L. rotundifolia (200 μg/mL). Additionally, the oils of L. alba geraniol (200 μg/mL for 24 h) and L. lacunosa (10, 50, 100 and 200 μg/mL) resulted in cell death of MeWo, characterized by high DNA fragmentation, and it was confirmed as apoptosis for the L. alba geraniol oil by TUNEL assay. As far as the CT26.WT cell line is concerned, the oil of L. alba geraniol caused cell cycle arrest in G0/G1 (10 μg/ml for 12 h, 10 and 200 μg/ml for 24 h) and G2/M (50 to 100 μg/ml for 12 and 24 h; 87 μg/ml for 72 h) phases. The L. sidoides also caused an arrest in G0/G1 with 100 μg/ml during 24 h and an arrest in G2/M with 100 and 150 μg/ml for 12 h and 150 μg/ml for 24 h. The L. salviifolia oil only induced stops in G2/M at a concentration of 150 μg/ml for 24 h, the oil of L. rotundifolia only stops in G0/G1 with 50, 100 and 200 μg/ml for 12 h and 50 μg/ml for 24 h. L. lacunose (50 μg/ml with 72 h of exposure) caused an arrest in G2/M. The L. alba geraniol and L. Lacunosa oils, in the 72h assay, caused an increase in fragmented DNA, but this did not reach levels as high as those observed for the MeWo cell line. Treatment of L. alba geraniol (200 μg/ml for 12 h) on MeWo and L. alba geraniol, L. lacunosa, L. rotundifolia and L. sidoides (100 μg/ml for 12 hours) on CT26.WT were subjected to analysis of differential expression of microRNAs by real-time PCR with a panel of 95 cancer-related microRNAs. All MeWo microRNAs showed downregulation compared to the negative control, which may have been due to the apoptotic effect of L. alba geraniol against this cell line. About CT26.WT 26 microRNAs for L. alba geraniol and L. lacunosa oils and 35 for L. rotundifolia and L. sidoides were found significantly desregulated (p<0.05) compared to control. The essential oils of tested Lippia species thus affected cell viability of MeWo and CT26.WT cell lines, indicating they might be good candidates as source of new anticancer biomolecules.

Orientadores: Elaine Minatel, Marcos José Salvador / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-24T16:01:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DosSantos_FernandaRapucciMoraes_M.pdf: 2129374 bytes, checksum: 6dd904b58af615db751be55933a6f841 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Os anti-inflamatórios corticosteróides são os fármacos mais utilizados no tratamento da distrofia muscular de Duchenne. Porém, devido aos severos efeitos colaterais que apresentam, é fundamental a busca por terapias alternativas que minimizem a evolução da doença e melhorem a qualidade de vida dos pacientes distróficos e ao mesmo tempo apresentem menos efeitos colaterais do que os corticosteróides. Recentes estudos, em modelos experimentais, demonstram que os óleos essenciais extraídos de espécies do gênero Citrus apresentam potencial efeito benéfico sobre doenças associadas ao estresse oxidativo e/ou inflamação. Sendo assim, o presente trabalho teve por objetivo realizar o estudo químico do óleo essencial de Citrus aurantifolia obtido a partir de prensagem a frio da casca dos frutos, seguido de destilação a vapor, comercializado sob o nome de Lima destilada e avaliar seu potencial efeito anti-inflamatório e antioxidante sobre células musculares distróficas de camundongos mdx. O estudo consistiu em duas partes. Na primeira realizou-se a caracterização do perfil químico por CG-EM e a avaliação da atividade antioxidante in vitro do óleo essencial utilizando-se os ensaios de redução do radical DPPH e ORACFL. A segunda parte consistiu na administração do óleo essencial de C. aurantifolia in vitro sobre células musculares distróficas de camundongos mdx. Após o tratamento, avaliou-se a toxicidade do óleo essencial, e realizou-se a quantificação de H2O2 e de TNF-?, NF-?B e 4-HNE nas células musculares (Western Blotting). O óleo essencial de C. aurantifolia estudado apresentou como constituintes químicos majoritários o limoneno (42,6%), ?-terpineol (11,76%), cimeno (11,80%), ?-terpineno (4,63%) e terpinoleno (5,30%), com resultados coerentes com o esperado para esta espécie vegetal; apresentou-se ativo com capacidade antioxidante in vitro nos ensaios DPPH (forte resultado antioxidante na diluição 1:250 (v/v) em metanol) e ORACFL (950 µmol/TE g -1); demonstrou não ser tóxico, uma vez que a viabilidade celular, tanto nas células controle (C57BL/10) como nas células distróficas, se manteve acima de 90%; atenuou os efeitos deletérios que ocorrem nas células musculares distróficas, no que diz respeito à inflamação (reduziu o conteúdo de TNF-?) e estresse oxidativo (reduziu o conteúdo de 4-HNE e a produção de H2O2). Diante do exposto, acreditamos que o óleo essencial de Lima destilada possa ser potencialmente útil para o tratamento farmacológico da distrofia muscular. Entretanto, são necessários estudos futuros para se verificar qual é a dosagem e o tempo de tratamento adequados para se obter o melhor efeito deste óleo essencial / Abstract: Anti-inflammatory corticosteroids are the most commonly used drugs for the treatment of Duchenne muscular dystrophy. However, due to their severe side effects, it is essential to search for alternative therapies that minimize the evolution of the disease and improve the life quality of dystrophic patients while showing fewer side effects than corticosteroids. Recent studies in experimental models have shown that essential oils extracted from genus Citrus species have a potential beneficial effect on diseases associated with oxidative stress and/or inflammation. Thus, the aim of the present study is to perform the chemical study of the Citrus aurantifolia essential oil obtained from cold pressing the peel of the fruit, followed by steam distillation, marketed under the name Lima distilled and evaluate its potential antioxidant and anti-inflammatory effects on dystrophic muscle cells of mdx mice. The project consisted of two parts. The first was carried out to characterize the chemical profile by GC-EM and evaluation of in vitro antioxidant activity of the essential oil using trials reduction of DPPH radical and ORACFL. The second part consisted of the administration of the C. aurantifolia essential oil in vitro on dystrophic muscle cells from mdx mice. After treatment, the toxicity of essential oil was evaluated, the concentration of H2O2 was detected and TNF-?, NF-kB and 4-HNE levels in muscle cells were quantified (Western blotting). Essential Distilled Lime Oil studied showed important chemical constituents as major limonene (42.6%), ?-terpineol (11,76%), cymene (11,80%), ?-terpinene (4,63%) e terpinolene (5,30%), with results consistent with expectations for this plant species; it was active with an antioxidant capacity in vitro on the DPPH and ORACFL assays (950 µmol/TE g -1); was not toxic, the cell viability in both control cells (C57BL/10) and in dystrophic muscle cells was above 90%; it also attenuated the deleterious effects that occur in dystrophic muscle cells in relation to inflammation (reduced TNF-? content) and oxidative stress (reduced 4-HNE content and H2O2 production). Therefore, we believe that the Essential Distilled Lime Oil can be potentially useful for the pharmacological treatment of muscular dystrophy. However, future studies are needed to check what is the dosage and period of treatment suitable to achieve the best effect of this essential oil / Mestrado / Fármacos, Medicamentos e Insumos para Saúde / Mestra em Biociências e Tecnologia de Produtos Bioativos

Orientador: Ana Lúcia Tasca Gois Ruiz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-23T08:33:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DellaTorre_Adriana_M.pdf: 5760504 bytes, checksum: f3ad129dc63417ce4365252cefc87c39 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: A "carqueja", Baccharis trimera (Less.) DC. (Asteraceae), é uma espécie vegetal característica de regiões tropicais, muito utilizada na medicina popular como anti-inflamatória, no tratamento de problemas hepáticos e renais, bem como para disfunções estomacais e intestinais. Recentemente, estudos demonstraram potencial atividade esquistossomicida sobre vermes adultos de Schistosoma mansoni (linhagem BH) para o óleo essencial (OE). Assim, este projeto teve por objetivo avaliar as atividades antiproliferativa e mutagênica, além da composição química do OE de B. trimera cultivada no campo experimental do CPQBA/UNICAMP. Coletas mensais (Janeiro/2012 a Dezembro/2012) das partes aéreas de B. trimera foram realizadas para a preparação do OE. Além disso, na época de floração em Julho, foram coletadas amostras das partes aéreas de indivíduos machos e fêmeas de B. trimera, diferenciadas morfologicamente pelas inflorescências. Todos os OEs preparados por hidrodestilação foram analisados por cromatografia gasosa acoplada a detector de massas (CG/EM) e avaliados quanto à atividade antiproliferativa in vitro e quanto à mutagenicidade no modelo de indução de micronúcleos com bloqueio da citocinese, com e sem ativação metabólica. A análise por CG/EM indicou que os compostos majoritários dos OEs foram biciclogermacreno, E-cariofileno, germacreno D, ?-pineno, globulol, ?-mirceno e ?-cadineno. Também foi observada uma variação na proporção relativa dos compostos presentes nos OEs obtidos das plantas fêmeas em relação aos machos. No teste de atividade antiproliferativa, em linhagens tumorais e não-tumorais, observou-se um perfil de atividade citostática semelhante para todas as amostras, independente da época de coleta, com valores de GI50 maiores que 25 ?g/mL. No teste do micronúcleo (MN) sem ativação metabólica, os OEs coletados no inverno (Jul/2012) e primavera (Out/2012) induziram um aumento na frequência de MNs, em relação ao controle de células sem tratamento, nas concentrações de 25 e 12,5 ?g/mL, enquanto os OEs obtidos no verão (Jan/2012) e outono (Abr/2012) apresentaram indução de MNs, estatisticamente significativa, somente na concentração de 25 ?g/mL. Nos experimentos realizados com os OEs extraídos de partes aéreas dos indivíduos machos e fêmeas, verificou-se que as plantas fêmeas não apresentaram potencial mutagênico nas três concentrações testadas (6,25; 12,5 e 25 ?g/mL), enquanto o OE obtido a partir dos indivíduos machos induziu aumento na frequência de MNs nas mesmas concentrações. Esses resultados sugerem que os sesquiterpenos hidrocarbonetos que predominam no OE obtido das partes aéreas das plantas machos (54,07%) podem estar envolvidos na ação mutagênica. Por outro lado, no teste com ativação metabólica, verificou-se uma redução significativa na frequência de MNs induzida pelos OEs em relação ao teste sem ativação, sugerindo que a metabolização dos OEs resultou em compostos com menor potencial mutagênico. Finalmente, no teste preliminar de antimutagenicidade, evidenciou-se no pós-tratamento e no tratamento simultâneo do OE com o metilmetanosulfonato uma possível reversão ou redução da clastogenicidade causada por este indutor de MNs. Esses dados sugerem possíveis atividades antimutagênica e mutagênica do OE das partes aéreas de B. trimera, com diferença significativa no potencial indutor de MNs entre indivíduos machos e fêmeas e que essa atividade é reduzida na presença de enzimas metabólicas, sugerindo uma potencial segurança de uso in vivo / Abstract: "Carqueja", Baccharis trimera (Less.) DC. (Asteraceae) is a native species from tropical regions widely used in folk medicine as anti-inflammatory, to treat liver and kidney problems as well as stomach and intestinal disorders. Recent studies have demonstrated the potential of B. trimera essential oil (EO) as schistosomicidal on adult worms of Schistosoma mansoni (BH strain). Therefore, this project aimed the evaluation of chemical composition, antiproliferative and mutagenic activities of EO obtained from B. trimera aerial parts cultivated in CPQBA/UNICAMP experimental field. B. trimera aerial parts were collected monthly (January/2012 to December/2012) and immediately submitted to EO extraction by hydrodistillation. Moreover, samples of males and females of B. trimera aerial parts morphologically differentiated by inflorescences were collected during the flowering season (July/2012). All EOs were analyzed by gas chromatography coupled to mass detector (GC/MS). They were also evaluated for antiproliferative activity in vitro and mutagenicity in cytokinesisblock micronucleus assay (CBMN), with and without metabolic activation. GC/MS analysis indicated that EOs major compounds were bicyclogermacrene, E-caryophyllene, germacrene D, ?-pinene, globulol, ?-myrcene and ?-cadinene, besides a variation on relative proportion of compounds between EOs of female and male plants. Antiproliferative assay in tumor and nontumor cell lines showed a similar cytostatic activity profile for all samples, independent of the collection time, with GI50 values above 25 ?g/mL. In CBMN assay without metabolic activation, EOs collected in winter (Jul/2012) and spring (Oct/2012) induced at 25 and 12.5 ?g/mL an increase in micronuclei frequency in comparison to untreated control cells, whereas EOs obtained in summer (Jan/2012) and autumn (Apr/2012) showed statistically significant micronuclei induction only at 25 ?g/mL. CBMN assay performed with male and female aerial parts EOs demonstrated that female plants showed no mutagenic potential in three concentrations (6.25, 12.5 and 25 ?g/mL) whereas male aerial parts EO induced an increase in micronuclei frequency at the same concentrations. These results suggested that sesquiterpenes hydrocarbons predominately present in male aerial parts EO (54.07%) should be involved in mutagenic action. Moreover, there was a reduction in micronuclei frequency induced by EOs when CBMN assay was carried out with metabolic activation, which suggests that enzymatic metabolism of EOs resulted in compounds with low mutagenic potential. Finally, preliminary evaluation of antimutagenicity has evidenced that simultaneous and post treatments of EO with methylmetanesulfonate (MMS) could reverse and/or reduce clastogenicity caused by this inducer of MNs. These data suggest possible antimutagenic and mutagenic activities of aerial parts of B. trimera EO, with a significant difference in potential inducer of MNs between males and females plants. Moreover, mutagenic activity decreased in the presence of metabolic enzymes, suggesting a potential safe use in vivo / Mestrado / Fármacos, Medicamentos e Insumos para Saúde / Mestra em Biociências e Tecnologia de Produtos Bioativos

Submitted by Biblioteca da Faculdade de Farmácia (bff@ndc.uff.br) on 2017-03-23T18:09:27Z No. of bitstreams: 1 Lima, Barbara Gomes [Dissertação, 2012].pdf: 3884662 bytes, checksum: 0524ca3a870ee99db72a293200787c80 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-23T18:09:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima, Barbara Gomes [Dissertação, 2012].pdf: 3884662 bytes, checksum: 0524ca3a870ee99db72a293200787c80 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A espécie Eugenia sulcata, popularmente conhecida como “murtinha” pertence à família Myrtaceae, sendo rica em estruturas secretoras de óleo essencial. Neste trabalho, é descrita a análise da composição do óleo essencial de folhas e caules em que, o sesquiterpeno β- cariofileno apresenta-se como componente majoritário em ambos os óleos, 24,65% no óleo de folhas e 18,78% no óleo de caules. Além das substâncias já descritas para o óleo essencial de folhas da espécie, foram identificadas pela primeira vez as seguintes substâncias: α-cubebeno (1,15%), β-copaeno (0,54%), cis-muurola-3,5-dieno (0,61%), cis-muurola-4 (14),5-dieno (1,32%), γ-himachaleno (2,03%), epizonareno (0,89%), trans-calameneno (4,39%), trans-cadina-1,4-dieno (3,38%). A análise do óleo essencial de caules ainda não havia sido descrita. Também foram isolados e identificados pela primeira vez na espécie os ácidos triterpênicos ursólico e sumaresinólico do extrato hexânico de folhas. O óleo essencial de folhas foi avaliado quanto as atividades: antimicrobiana, anticolinesterásica, inseticida, hipotensora e anti-herpesvirus. O teste de susceptibilidade antimicrobiana utilizando cepas de Staphylococcus aureus ATCC 29213, apresentou um CMI de 500μg/mL. Na avaliação da atividade anticolinesterásica, o óleo essencial de folhas foi eficiente na inibição da enzima AChe exibindo um valor de IC50 de 4,66 μg/mL. A atividade inseticida foi avaliada frente aos fitófagos Oncopeltus fasciatus e Dysdercus peruvianus e percevejos hematófagos da espécie Rhodnius prolixus. Tanto nos fitófagos quanto nos percevejos hematófagos, o óleo essencial de folhas, na concentração 500μg/mL, exibiu uma taxa de mortalidade superior a 80%. Já na avaliação da atividade hipotensora, o óleo essencial de folhas mostrou-se um potente agente hipotensor sendo capaz de reduzir a pressão arterial sistólica e diastólica em 16% e 31% respectivamente. No teste de atividade antiviral frente ao vírus HSV, o óleo essencial de folhas na concentração de 250μg/mL, apresentou uma baixa citotoxicidade para as células Vero, utilizadas como sistema hospedeiro, (CC50 ˃ 1000), e ED50 de 114,41 μg/mL para HSV- 1 e de 197,09 μg/mL para HSV-2. É a primeira vez que são descritas para a espécie Eugenia sulcata as atividades inseticida, anticolinesterásica, hipotensora e antiviral. Como pode ser observada, a espécie possui um rico potencial biotecnológico que merece ser mais estudado / The species Eugenia sulcata is commonly known as "murtinha" and belongs to Myrtaceae’s family, it is rich in secretory structures of essential oil. This work describes the analysis of the essential oil composition from leaves and stems which the sesquiterpene β-caryophyllene was the major component in both essential oils, 24.65% and 18.78% in essential oil from leaves and stems respectivelly. Among the substances that have been already described for this spicies essential oil from leaves , were first identified the following substances: α-cubebeno (1.15%), β-copaene (0.54%), cis-muurola-3,5 - diene (0.61%), cis-muurola-4 (14) ,5-diene (1.32%), γ-himachalene (2.03%), epizonarene (0.89%), trans-calamenene (4.39%), trans-cadina-1 ,4-diene (3.38%). The analysis of the essential oil from stems had not been described yet. The triterpenes acids ursolic and sumaresinolic were also isolated and identified in the hexane extract from leaves for the first time in E. sulcata. The essential oil from leaves was evaluated for the following biological activities: antimicrobial, anticholinesterasic, insecticide, hypotensive and antiviral. The antimicrobial susceptibility testing against Staphylococcus aureus ATCC 29213 strain, showed a MIC of 500μg/mL. For the anticholinesterasic activity evaluation, the leaves essential oil was effective in inhibiting AChE enzyme and showed an IC50 value of 4.66 μg/mL. Insecticidal activity was evaluated in phytophagous species Oncopeltus fasciatus and Dysdercus peruvianus and also for the species of bedbugs Rhodnius prolixus. For all insects, the essential oil from leaves (500μg/mL), exhibited a mortality rate above 80%. The evaluation of the hypotensive activity of the essential oil from leaves showed a hypotensive effect and it was able to reduce both systolic and diastolic blood pressure without significantly changing the cardiac frequency in rats. The antiviral activity test of the essential oil from leaves at the concentration of 250μg/mL,against HSV showed a low cytotoxicity for the Vero cells used as host for the herpesvirus (CC50 ˃ 1000) and ED50 value of 114,41 μg/mL for HSV- 1 and 197,09 μg/mL forHSV-2. It is the first time that the species Eugenia sulcata is a target of a phytochemical and biological study. As can be seen, the species has a rich biotechnological potential that requires further studies

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:42:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Francine_ Novack_ Victoria.pdf: 1036234 bytes, checksum: 1fea71545d5ff3ff1e433c5ceaff9a37 (MD5) Previous issue date: 2010-02-26 / Java citronella (Cymbopogon nardus (L) Rendle) belongs to the genus Cymbopogon and the essential oil extracted from the plant is constituted mainly by the (+)-R-citronellal (3,7-dimethyl-6-octenal), formed by the secondary metabolism plants. Essential oils and plant extracts have a growing interest to industry and scientific research due to its antimicrobial activity, and as well as compounds organosselênios that are of great interest for scientific research because of its wide spectrum of biological activity. Thus, we performed a study of α-selenation of aldehydes and ketones, including the (+)-( R)-citronellal, as a major component of essential oil of citronella, using PEG/KF/Al2O3, as a recyclable medium. Derivatives of (+)- (R)-citronellal containing organoselenium were assessed for their potential antimicrobial, the antimicrobial activity was determined by the techniques of disk diffusion and minimum inhibitory concentration. The 2-phenylseleno citronellal and 2 phenylseleno citronellol provided yields of 71 and 73% respectively. The antimicrobial activity of 2- phenylseleno citronellal showed the best results, soon the addition of a organoselenium to (+)-R-citronellal increased the antimicrobial activity of (+)-R-citronellal against foodborne pathogenic bacteria Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus and Salmonella Typhimurium. / O capim citronela (Cymbopogon nardus(L) Rendle) pertence ao gênero Cymbopogon, o óleo essencial extraído da planta tem como principal constituinte o (+)-R-citronelal (3,7-dimetil-oct-6-enal), predominantemente formado pelo metabolismo secundário das plantas. Os óleos essenciais e os extratos das plantas possuem um interesse crescente para a indústria e para a pesquisa científica devido a sua atividade antimicrobiana, assim como os compostos organosselênios que são de grande interesse para a pesquisa científica devido ao seu grande espectro de atividade biológica. Desta forma, foi realizado um estudo da α-selenização de aldeídos e cetonas, incluindo o (+)-(R)-citronelal, principal componente do óleo essencial de citronela, utilizando PEG/KF/Al2O3, como meio reciclável. Os derivados do (+)-(R)-citronelal contendo organosselênio foram avaliados em relação aos seus potenciais antimicrobianos, determinados pelas técnicas de difusão do disco e concentração inibitória mínima. Os produtos 2-fenilselenocitronelal e 2-fenilselencitronelol apresentaram rendimentos de 71 e 73%, respectivamente. Nos ensaios de atividade antimicrobiana o produto 2-fenilselenocitronelal apresentou os melhores resultados, inclusive melhores que o (+)-R-citronelal. Logo, a adição de um grupamento de selênio ao composto (+)-R-citronelal aumentou sua atividade antimicrobiana contra Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus e Salmonella Typhimurium.

Depuis plusieurs siècles les racines de vétiver sont utilisées en Inde du sud afin de prévenir l'érosion du sol. Par la suite, la production de l’huile essentielle des racines de vétiver a permis d’alimenter l’industrie de la parfumerie. De nos jours, cette matière première sert principalement à la confection de parfums masculins, où elle apporte des notes boisées, terreuses, de pamplemousse et de rose. En dépit de son utilisation abondante, la nature des molécules responsables de son odeur est encore un sujet de controverses. Dans un premier temps, l’étude des constituants volatils a été entreprise, et certaines incohérences de la littérature ont été mises en évidence. Par la suite, l'analyse par GC × GC d'huiles de vétiver d'origines différentes a permis de mieux comprendre la variabilité de cette matière première. Elle a également facilité l’identification de substances odorantes d'impact, réalisée par GC-O sur l’huile essentielle et l’acétate de vétiveryle. La synthèse de plusieurs dérivés zizaane a également été développée pour confirmer certains des résultats de la caractérisation des odorants. Nous avons également développé une nouvelle procédure pour la synthèse à grande échelle de dérivés nor-zizaane à puissante odeur de vétiver. Lors de cette étude, nous avons développé une nouvelle réaction de décarbonylation utilisant le peroxyde d'hydrogène en milieu alcalin. Cette réaction a pu être appliquée sur différents aldéhydes aliphatiques, les meilleurs résultats étant obtenus avec des substrats α-disubstitués. Une bonne sélectivité a également pu être observée sur les aldehydes linéaires, qui conduisent généralement à l’acide dans de telles conditions. / Vetiver have been used from centuries in South India to prevent soil erosion and later on, the essential oil produced by distillation of this raw material has begun to been largely employed in perfume composition. This essential oil is now abundantly used in the confection of men perfumes for its pleasant fragrance of wood, earth, grapefruit and rose. However, paradoxically, the nature of its impact odorants still remains controversial. At first, we have realized the review of the volatile constituents identified in this material, and some discrepancies of the literature have been highlighted. Then, the analysis by GC × GC of vetiver oils from different origins has permitted to better understand the composition of these materials. Subsequently, the characterization of the impact odorants of Haitian vetiver essential oil and vetiveryl acetate has been performed by GC-O. To confirm some of the results of this investigation, several zizaane derivatives have been synthesized, and in the course of this study, we developed a new reaction of decarbonylation of aliphatic aldehydes using alkaline hydrogen peroxide. A new procedure for the large scale preparation of highly potent nor-zizaane odorants could then be developed. Moreover, when exploring the scope and limitations of this reaction, it appeared to be applicable on various aliphatic aldehydes. The best results were obtained with α-disubstituted substrates, and a surprisingly good selectivity of this reaction was noticed on linear aldehydes.

Este trabalho de Mestrado teve por objetivo avaliar a atividade antifúngica in vitro e em queijo Minas Padrão de duas formulações (A e B) de nanoemulsões encapsulando óleo essencial de orégano (Origanum vulgare) produzidas pelo método da temperatura de inversão de fases (método PIT). Cladosporium sp., Fusarium sp. e Penicillium sp. foram os fungos identificados nas amostras de queijo Minas Padrão deteriorados. Tais cepas foram utilizadas na avaliação da atividade antifúngica in vitro e em queijo Minas Padrão do óleo de orégano nanoemulsionado. Nos testes in vitro foram determinadas as concentrações mínimas inibitórias (CMI) do óleo essencial de orégano puro e nanoemulsionado sobre o Cladosporium sp., Fusarium sp. e Penicillium sp. Foram utilizadas fatias de queijo Minas Padrão para avaliar o efeito inibitório das nanoemulsões contendo óleo essencial de orégano. Por último foi avaliado o efeito inibitório das nanoemulsões durante o processo de maturação de queijos Minas Padrão. Determinaram-se valores de CMI para óleo essencial puro de 0,2; 0,3 µg/ml para Fusarium sp. e Penicillium sp., respectivamente. Enquanto para as duas formulações de nanoemulsão; os valores de CMI dependeram da quantidade de óleo essencial de orégano que estava contido nelas, obtendo-se valores de 0,26; 0,11 e 1,62 µg/ml para a formulação A de óleo de orégano nanoemulsionado sobre Cladosporium sp., Fusarium sp. e Penicillium sp., respectivamente, e CMIs de 0,32; 0,1 e 0,8 µg/ml para a formulação B de nanoemulsão sobre os mesmos gêneros de fungos. Os ensaios nas fatias de queijo evidenciaram que o efeito das CMIs, quando aplicadas na matriz alimentícia, foi nulo, permitindo o desenvolvimento normal dos fungos avaliados, da mesma forma se determinou a importância da atividade de água no crescimento fúngico. Já nos queijos em ambiente de maturação o efeito inibitório do óleo de orégano foi pouco satisfatório, o que indicou a importância do controle dos demais parâmetros ambientais no ambiente de maturação. Pode-se concluir que o óleo essencial de orégano nanoemulsionado apresentou efeito inibitório contra os gêneros de fungos avaliados. Quando controlados parâmetros ambientais como temperatura de armazenamento e atividade de água, seu efeito inibitório pode ser amplamente melhorado, apresentando-o como potencial alternativa na conservação dos alimentos. / This Master Thesis aimed to evaluate the in vitro antifungal activity and in Minas Padrão cheese of two formulations (A and B) of nanoemulsions encapsulating essential oil of oregano (Origanum vulgare) produced by the method of phase inversion temperature (PIT method). Cladosporium sp., Fusarium sp. and Penicillium sp. fungi were identified in deteriorated cheese samples. These strains were used in the evaluation of antifungal activity of oregano essential oil nanoemulsions, both in vitro and in cheese. Minimum inhibitory concentrations (MIC) of essential oil of pure oregano oil and nanoemulsions were determined. Cheese slices were used to evaluate the inhibitory effect of nanoemulsions containing essential oil of oregano. Finally the inhibitory effect of encapsulated oregano oil was tested during cheese ripening. MIC values determined for pure essential oil were 0.20 and 0.3 µg/ml for Fusarium sp. and Penicillium sp., respectively. As for the two nanoemulsion formulations, MIC values depended on the amount of essential oil of oregano which was contained therein, and the values for formulation A were 0.26, 0.11 and 1.62 µg/ml for Cladosporium sp., Fusarium sp. and Penicillium sp, respectively. For formulation B, the values of MIC were 0.32, 0.10 and 0.80 µg/ml. The tests on the cheese slices showed that the effect of MIC when applied in the food matrix was null, as the fungi growth was not avoided. As for the tests during cheese ripening, the inhibitory effect of oregano oil in nanoemulsions was unsatisfactory, which indicated the importance of controlling other environmental parameters in the maturation chamber. It can be concluded that the nanoemulsions of essential oil presented inhibitory effect against the genera of fungi evaluated. Controlled environmental parameters such as storage temperature and water activity, its inhibitory effect can be highly improved, and the nanoemulsions of oregano oil can be seen as a potential system for food preservation.

Made available in DSpace on 2016-01-26T18:56:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pedro Henrique Gorni.pdf: 662749 bytes, checksum: 0f08f6ee6071c3bbbd7c6e03f00a4753 (MD5) Previous issue date: 2015-08-07 / Salicylic acid (SA) is a phenolic compound found in plants and has multiple functions, including hormone action of stimulating plant growth and development and induction of plant defense responses under conditions of biotic and abiotic stresses. In this sense, research related to SA elicitor action on the synthesis of secondary metabolites in medicinal plants has been conducted in order to increase the economic value of these species. The objective of this study was to determine the effect of foliar application of SA on biomass production and the synthesis of secondary compounds in yarrow (Achillea millefolium L. - Asteraceae), a medicinal species commercially produced as feedstock for the world of phytomedications industry. The experiment was conducted in potted plants under greenhouse conditions. The application of SA was made at concentrations of (0, 0.25, 0.50 and 1.00 mM) at 20 days after transplanting the seedlings to pots. The effect of SA on the metabolism of yarrow plants was evaluated through biometric parameters of growth (leaf area, leaf number, biomass production and root, root / shoot ratio and leaf area / number of sheets ratio) and biochemical parameters (levels of phenolic compounds, essential oil, pigment content and antioxidant capacity). Exogenous application of SA in the concentration of 0.50 mM resulted in linear increases in biomass accumulation of root, total dry mass, root / shoot ratio and chlorophyll a content and chlorophyll a + b in yarrow plants. The shoot dry mass, leaf area, leaf number and leaf area / number of sheets ratio were not changed by the application of SA and the anthocyanin content, carotenoids and chlorophyll b. The positive effects on the secondary metabolism were evidenced by increases in the concentration of phenolic compounds and antioxidant activity in 0.50 and 1.00 mM concentrations. The content and essential oil yield were higher in plants treated with 0,50 mM. It concludes that the use of SA is advantageous in management technique for obtaining increases in total dry mass of yarrow plants due to greater dry mass of roots. The elicitor effect was obtained with the application of 0.50 mM of SA, resulting in greater economic value of the feedstock due to increased production of secondary compounds, such as phenolic compounds and essential oils, and a concomitant increase in antioxidant activity the plant extract. / O ácido salicílico (AS) é um composto fenólico presente em plantas e que possui múltiplas funções, dentre elas a ação hormonal de estímulo ao crescimento e desenvolvimento vegetal e a indução das respostas de defesa da planta sob condições de estresses bióticos e abióticos. Neste sentido, pesquisas relacionadas à ação elicitora do AS sobre a síntese de metabólitos secundários em plantas medicinais vem sendo conduzidas com a finalidade de se aumentar o valor econômico destas espécies. O objetivo deste estudo foi determinar o efeito da aplicação foliar de AS sobre a produção de biomassa e a síntese de compostos secundários em plantas de mil-folhas (Achillea millefolium L. Asteraceae), uma espécie medicinal produzida comercialmente como matéria prima para a indústria mundial de fitomedicamentos. O experimento foi conduzido em plantas envasadas sob condições de casa de vegetação. A aplicação do AS foi efetuada nas concentrações de 0; 0,25; 0,50 e 1,00 mM aos 20 dias após o transplante das mudas para os vasos. O efeito do AS sobre o metabolismo das plantas de mil-folhas foi avaliado através de parâmetros biométricos de crescimento (área foliar, número de folhas, produção de biomassa aérea e radicular, razão raiz / parte aérea e razão área foliar / número de folhas) e parâmetros bioquímicos (teores de compostos fenólicos, óleo essencial, teores de pigmentos e capacidade antioxidante). A aplicação exógena de AS na concentração de 0,50 mM resultou em aumentos lineares no acúmulo de massa seca de raiz, massa seca total, razão raiz / parte aérea e teores de clorofila a e clorofila a+b em plantas de mil-folhas. A massa seca da parte aérea, área foliar, número de folhas e razão área foliar / número de folhas não foram alteradas pela aplicação de AS, bem como os teores de antocianinas, carotenóides e clorofila b. Os efeitos positivos sobre o metabolismo secundário foram evidenciados pelos aumentos na concentração de compostos fenólicos totais e da atividade antioxidante nas concentrações 0,50 e 1,00 mM. O teor e rendimento de óleo essencial foram maiores em plantas tratadas com 0,50 mM. Concluiu-se que a utilização de AS constitui-se em técnica de manejo vantajosa para a obtenção de aumento na massa seca total das plantas de mil-folhas, devido à maior massa seca de raízes. O efeito elicitor foi obtido com a aplicação de 0,50 mM de AS, resultando em maior valor econômico da matéria prima, devido ao aumento na produção de compostos secundários, tais como fenóis totais e óleo essencial, além de um concomitante aumento na atividade antioxidante do extrato vegetal.