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Separação imunomagnética associada a bacteriófago para diagnóstico de Salmonella enterica em carne de frango / Immunomagnectic Separation Assay associated with Bacteriophage for Salmonella enterica diagnosis in poultry meatCorrêa, Isadora Mainieri de Oliveira [UNESP] 27 August 2015 (has links) (PDF)
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000858305.pdf: 630893 bytes, checksum: e53c41b93a6a9b4cede596f30d685272 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Utilizou-se o método de Separação Imunomagnética associada a Bacteriófago para detectar os seguintes sorovares: Salmonella Heidelberg, Salmonella Enteritidis e Salmonella Typhimurium, em amostras de sobrecoxas de frango contaminadas artificialmente. Para certificarmo-nos da eficiência do método, comparamos esta técnica com os testes de diagnóstico usuais para este patógeno: a análise bacteriológica padrão, que inclui a etapa de pré-enriquecimento, enriquecimento seletivo, realização de testes bioquímicos de triagem e sorologia, e a reação em cadeia da polimerase (PCR). Na avaliação da capacidade dos testes na detecção de Salmonella em carne de frango, submetemos amostras de sobrecoxas de frango à contaminação artificial com 5, 10 e 100 UFC/25mL de bactéria, para cada um dos sorovares listados anteriormente, totalizando 270 análises, divididas em 90 testes para cada um dos três sorovares, e assim comparamos os resultados obtidos com a análise bacteriológica, PCR e o teste de Separação Imunomagnética associada a Bacteriófago. Ao aferirmos os resultados constatamos que a Separação Imunomagnética associada a Bacteriófago é equiparável ao método bacteriológico recomendado pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) e com a técnica de PCR, pois 99,6% das amostras foram positivas ao realizarmos o teste de Separação Imunomagnética associado a Bacteriófago e apenas uma amostra de Salmonella Enteritidis foi negativa neste ensaio, na concentração de 5 UFC/25mL. Já no método bacteriológico verificamos 95,5% de positividade, com nove amostras negativas para S. Heidelberg, duas negativas para S. Enteritidis e duas no ensaio com S. Typhimurium. Na técnica de PCR obtivemos 98,5% de positivos, com uma amostra negativa para S. Enteritidis na concentração de 5 UFC/25mL e três negativas para S. Typhimurium. O tempo despendido para a realização de cada teste foi aferido e constatamos... / We used the Immunomagnectic Separarion Assay associated with Bacteriophage to detect the following serovars: Salmonella Enteritidis, Salmonella Heidelberg and Salmonella Typhimurium, in poultry drumstick samples artificially contaminated. We compared the efficiency of this technique to the usual diagnostic tests for Salmonella in food samples: the standard bacteriological analysis, which includes the step of pre-enrichment and selective enrichment, biochemical and serological screening tests, and polymerase chain reaction (PCR). To evaluate the tests capability of Salmonella detection poultry meat samples were submitted to artificial contamination with 5, 10 and 100 CFU/25mL of bacteria, for each of the serovars listed above, totaling 270 analyzes divided into 90 tests for each of the three serovars, and so compare the results obtained with the bacteriological analysis, PCR and Immunomagnetic Separation Bacteriophage assay. We found that the Immunomagnetic Separation Bacteriophage assay was comparable to bacteriological method recommended by the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply (MAPA) and the PCR technique, because 99.6% of the samples were positive to accomplish Immunomagnetic Separation Bacteriophage assay and only a sample of Salmonella Enteritidis was negative in this test, in the concentration of 5 CFU/25mL. The bacteriological method check 95.5% positivity, with nine samples negative for S. Heidelberg, two negative for S. Enteritidis and two in the test with S. Typhimurium. In PCR 98.5% positives samples were obtained, with one S. Enteritidis negative sample in the concentration of 5 CFU/25ml and three negative samples for S. Typhimurium. The time for performing each test was measured and the Immunomagnetic Separation Bacteriophage assay was the most rapid test for Salmonella diagnosis, since 20 hours, the conventional bacteriological took 88h and PCR 44h approximately. In this study we confirm the effectiveness of the ... / FAPESP: 2013/04365-3
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Seleção e caracterização de peptídeos recombinantes do Mycobacterium leprae ligantes à IgG por meio da tecnologia de phage display / Seleção e caracterização de peptídeos recombinantes do Mycobacterium leprae ligantes à IgG por meio da tecnologia de phage displayLima, Mayara Ingrid Sousa January 2011 (has links)
Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-07-30T21:26:19Z
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Mayara Ingrid Sousa Lima Seleção e caracterização de peptideos....pdf: 1915651 bytes, checksum: 4954d0969cc99ed5643d45ee27772173 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-30T21:26:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Mayara Ingrid Sousa Lima Seleção e caracterização de peptideos....pdf: 1915651 bytes, checksum: 4954d0969cc99ed5643d45ee27772173 (MD5)
Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia,Brasil / A hanseníase é uma doença infecciosa crônica, causada pelo Mycobacterium leprae, que apresenta manifestações clínicas variadas. Essas variações refletem em diferenças que vão de uma forte resposta imune celular com controle do crescimento do bacilo, no pólo tuberculóide, a uma anergia em resposta celular, no pólo virchoviano. A caracterização do perfil antigênico do M. leprae frente a esse quadro de múltiplos aspectos clínicos representa uma ferramenta fundamental para o desenvolvimento de novas plataformas para um diagnóstico diferencial mais sensível e/ou desenvolvimento de unidades vacinais. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi selecionar e caracterizar peptídeos miméticos de antígenos do M. leprae reativos contra IgGs totais purificadas de pacientes com hanseníase. Para a seleção foi utilizada a tecnologia de phage display, usando bibliotecas randômicas de peptídeos expressos em fagos filamentosos. Foi realizada uma seleção com IgGs de pacientes Tuberculóides e outra com IgGs de pacientes Virchovianos. A validação dos peptídeos foi realizada utilizando o imunoensaio ELISA, o teste de redução de colônias e análise de bioinformática. Após a pré-validação e sequenciamento foram encontradas 17 mimotopos para o pólo Vichorviano e 12 no pólo Tuberculóide. Foram validados 4 peptídeos, sendo 2 do pólo Tuberculóide (T03, T04) e 2 do pólo Virchoviano (V06 e V13). Os peptídeos TALFPWL (T03) e YSTTLSY (T04) foram imunorreativos em soros de pacientes paucibacilares, bem como em pacientes Virchovianos, além de terem alinhado com proteínas de membrana do M. leprae com potencial antigênico. O peptídeo V06 apresentou especificidade de 100% e sensibilidade de 94,74%, o que se complementa com os dados do teste de redução da pIII, o qual obteve uma taxa de redução de 82% em soros Virchovianos. O peptídeo V13 também foi reativo e apresentou similaridades com chaperonas e proteínas de membrana. Este estudo aponta perspectivas para a identificação de novos antígenos, propiciando a descoberta de novos alvos biológicos com potencial diagnóstico e/ou terapêutico. / Leprosy is a chronic infectious disease caused by Mycobacterium leprae, which has varied clinical manifestations. These variations reflect differences that spans from a strong cellular mediated immunity and bacili growth control the tuberculoid pole to a poor T cell immunity at the lepromatous pole. The antigenic profile characterization in both clinical forms represents a fundamental tool for the development of new platforms for a differential diagnosis more sensitive and/or development of vaccine units. Thus, the objective was to select and characterize mimetics peptides antigens of M. leprae reactive against total IgG purified from leprosy patients. The phage display technology was used for selection using random peptides libraries expressed on filamentous phages. A selection was performed with IgGs from tuberculoid patients and other IgGs of lepromatous patients. Peptides validation was performed using the ELISA immunoassay, the plaque reduction test and bioinformatics analysis. After the pre-validation and sequencing were found 17 valid sequences for the lepromatous pole and 12 tuberculoid pole. Four peptides were validated, two of tuberculoid pole (T03, T04) and two lepromatous pole (V06 and V13). The peptides TALFPWL (T03) and YSTTLSY (T04) were imunoreatives in sera from paucibacillary patients and in lepromatous patients. They had alignment with membrane proteins of M. leprae antigenic potential. The V06 peptide showed 100% specificity and 94.74% sensitivity, which is supplemented with the plaque reduction test, who obtained a reduction rate of 82% in lepromatous sera. The V13 peptide was also reactive and showed similarities with chaperones and membrane proteins. This study presents insights for new antigens identification, leading to discovery of new biological targets with potential diagnostic or therapeutic
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Fatores de risco para infec??o de s?tio cir?rgico em pacientes submetidos ? cirurgia de perfura??o esof?gicaBreigeiron, Ricardo 06 September 2005 (has links)
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Previous issue date: 2005-09-06 / Introdu??o: As perfura??es esof?gicas possuem grande potencial de morbi-mortalidade. O progn?stico de tais les?es est? na depend?ncia de manejo diagn?stico e terap?utico r?pido e preciso. As complica??es infecciosas de s?tio cir?rgico est?o entre as mais comuns ap?s tratamento cir?rgico das les?es esof?gicas. Conhecer os aspectos epidemiol?gicos dessas les?es dentro de uma institui??o, assim como reconhecer os fatores de risco para complica??es, s?o fundamentais no sentido da diminui??o das mesmas. Objetivos: Identificar fatores de risco significativos para infec??o de s?tio cir?rgico (ISC) ap?s cirurgia por perfura??o esof?gica. M?todo: Estudo de coorte hist?rico, com amostra de 81 pacientes submetidos ? cirurgia para corre??o de perfura??o esof?gica n?o espont?nea, tendo como desfecho infec??es de s?tio cir?rgico (abscesso, mediastinite, empiema e infec??o de ferida operat?ria), no HPS-Porto Alegre. O presente estudo foi realizado no per?odo de junho/1994 a junho/2004. Os dados foram retirados de prontu?rios. As vari?veis preditoras foram a idade, mecanismo de les?o, localiza??o da les?o, tempo de evolu??o, les?es associadas em outras cavidades, les?es associadas na mesma cavidade, gradua??o da les?o, dura??o do procedimento, ISS, RTS e TRISS. As vari?veis foram submetidas ? an?lise bivariada e, ap?s, regress?o log?stica m?ltipla. Resultados: A m?dia de idade foi de 42,6 anos. O sexo masculino predominou com 56 indiv?duos, o que correspondeu a 69%. Em 44% dos pacientes o intervalo de tempo entre o momento da perfura??o e a cirurgia foi at? 6 horas , 15% acima de 6 at? 12 horas, 11% de 12 at? 24 horas e 30% acima de 24 horas. Les?es associadas em outras cavidades ocorreram, do n?mero total de pacientes, 17% no t?rax, 5% no abdome, 5% em extremidades, 4% em coluna e medula e 2% na face. Quanto ? gradua??o da les?o, les?es grau I ocorreram em 8 casos ( 10% ), grau II em 64 casos ( 79% ) e grau III em 9 casos ( 11%). O RTS apresentou uma m?dia de 7,62, com desvio padr?o de 0,58. O ISS teve m?dia de 7,99 e desvio padr?o de 6,54. A m?dia de tempo cir?rgico foi de 117,2 minutos. O TRISS, demonstrado numericamente como probabilidade de ?bito, apresentou m?dia de 2,59 e desvio padr?o de 6,0. O tempo m?dio de interna??o foi de 15,7 dias. Infec??es de s?tio cir?rgico ocorreram em 33 pacientes (41%). Em an?lise bivariada as vari?veis com signific?ncia, P < 0,02, foram a idade ≥ 50 anos, tempo de evolu??o > 24 horas, les?o grau III, tempo de cirurgia > 120 minutos, les?o associada em outra cavidade e ISS ≥ 15. Na an?lise por regress?o log?stica m?ltipla as vari?veis com signific?ncia estat?stica foram: idade 50 anos, tempo de evolu??o > 24 horas, les?o em outra cavidade e ISS ≥ 15. Ocorreram 15 ?bitos, correspondendo a 19%. Conclus?es: Os fatores de risco para infec??o de s?tio cir?rgico, ap?s cirurgia por perfura??o esof?gica, que demonstraram signific?ncia, foram: Idade ≥ 50 anos, tempo de evolu??o > 24 horas, les?o associada em outra cavidade e ISS ≥ 15
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Avalia??o do Vampiricida Gel 1% no controle seletivo direto de col?nias de Desmodus rotundus / Evaluation of 1-percent Vampiricid Gel in direct selective control of Desmodus rotundus coloniesPompei, J?lio C?sar Augusto 15 December 2009 (has links)
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2009 - Julio Cesar Augusto Pompei.pdf: 279592 bytes, checksum: d5618460bc231e06151836a53b7af00a (MD5)
Previous issue date: 2009-12-15 / The National Program on Control of Herbivore Rabies (PNCRH) concentrates its actions on population control of the disease s main transmitter, the vampire bat of the Desmodus rotundus species, and favors the use of direct and indirect selective methods. This study sought to evaluate the effectiveness of the VAMPIRICID GEL? for direct selective control of D. rotundus colonies. Six daytime shelters were selected; in each one a count was taken of the live individuals at the time and then again ten days after treatment. Two shelters per treatment Group were addressed. The Vampiricid Gel was applied on the back of vampire bats in 5-percent (Group 1) and of 10-percent (Group 2) samples of the population. For control (Group 3), 10 percent of the D. rotundus bat population was treated with liquid Vaseline. An evaluation was also made of the aggressions by vampire bats on 3,690 bovines and 133 equids on the 22 properties located within a 3-km radius of the shelters. Fisher s Exact and χ2 tests were used with a 1-percent significance level. Under natural conditions, treatment of Groups 1, 2, and 3 reduced by 97.57 percent, 99.30 percent, and 3.6 percent, respectively, the D. rotundus population, and by 92.79 percent, 94.36 percent, and 4.76 percent, respectively, the number of animals attacked, ten days after treatment. Results have shown that the 1-percent VAMPIRICID GEL ? was effective in significantly reducing the bat population and the number of animals attacked in Groups 1 and 2, as compared with Group 3. There was no significant different between Groups 1 and 2 as regards both reduction of the D. rotundus population and the number of animals attacked. Although the use of 1-percent VAMPIRICID GEL ? on 5 percent or 10 percent of the vampire bat population has yielded similar results in the D. rotundus populations in the shelters and thus on attacked bovines and equids, its use on 5 percent of the populations was more effective, given the lower operating cost, and can thus be indicated for direct selective control of D. rotundus. / O Programa Nacional de Controle da Raiva dos Herb?voros (PNCRH) concentra suas a??es no controle populacional de seu principal transmissor, o morcego hemat?fago da esp?cie Desmodus rotundus preconizando a utiliza??o de m?todos seletivos diretos e indiretos. O presente estudo teve como objetivo avaliar a efici?ncia do VAMPIRICID GEL? no controle seletivo direto de col?nias de D. rotundus. Foram selecionados seis abrigos diurnos e em cada um foi realizada a contagem do n?mero de indiv?duos vivos no momento e dez dias ap?s os tratamentos. Utilizaram-se dois abrigos por grupo de tratamento. O gel vampiricida foi aplicado no dorso dos morcegos hemat?fagos em amostras de 5% (grupo 1) e de 10% (grupo 2) da popula??o. Para controle (grupo 3) 10% da popula??o de morcegos D. rotundus foi tratada com vaselina l?quida. Avaliou-se tamb?m a redu??o de agress?es por morcegos hemat?fagos em 3690 bovinos e 133 eq??deos existentes nas 22 propriedades localizadas num raio de 3 km de dist?ncia dos abrigos. Os testes do χ2 e Fisher Exato foram utilizados com n?vel de signific?ncia de 1%. Em condi??es naturais, os tratamentos nos grupos 1, 2 e 3 reduziram em 97,57, 99,30 e 3,6% a popula??o de D. rotundus e em 92,79, 94,36 e 4,76% o n?mero de animais agredidos, respectivamente, 10 dias ap?s os tratamentos. Os resultados obtidos demonstraram que o produto VAMPIRICID GEL ? 1% foi capaz de reduzir significativamente a popula??o de morcegos e o n?mero de animais agredidos nos grupos 1 e 2 quando comparados ao grupo 3. Entre os Grupos 1 e 2 n?o houve diferen?a significativa tanto na redu??o da popula??o de D. rotundus quanto na redu??o do n?mero de animais agredidos. Embora o uso do VAMPIRICID GEL ? 1% em 5% ou 10% da popula??o de morcegos hemat?fagos tenha produzido resultados similares na redu??o da popula??o de D. rotundus nos abrigos, e conseq?entemente do n?mero de bovinos e eq??deos agredidos, o seu uso em 5% da popula??o foi mais eficiente, devido ao menor custo operacional, podendo ser indicado para o controle seletivo direto de D. rotundus.
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Investiga??o da a??o dos receptores purin?rgicos P2Y2 e P2Y12 na prolifera??o de c?lulas de carcinoma escamoso e adenocarcinoma de es?fagoZaparte, Aline 27 April 2018 (has links)
Submitted by PPG Medicina e Ci?ncias da Sa?de (medicina-pg@pucrs.br) on 2018-09-05T18:11:52Z
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ALINE_ZAPARTE.pdf: 2153343 bytes, checksum: 3c21541f64c5540c0571cbd6752b2141 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-11T11:21:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1
ALINE_ZAPARTE.pdf: 2153343 bytes, checksum: 3c21541f64c5540c0571cbd6752b2141 (MD5)
Previous issue date: 2018-04-27 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Esophageal cancer, in general, is diagnosed at an advanced stage, which leads to
impairment in the therapies employed, resulting in a high mortality rate. It is classified into two subtypes: adenocarcinoma and squamous cell carcinoma; both differ in histology, etiology and epidemiology. Purinergic signaling uses nucleotides and nucleosides in the extracellular medium as signaling molecules, and has been linked to different types of carcinomas. These molecules bind to G-protein coupled adenosine receptors, characterized as P1 (A1, A2A, A2B and A3), to P2X ionotropic receptors (P2X1-P2X7), and to P2Y receptors (P2Y 1, 2, 4, 6, 11, 12, 13 14), coupled to G protein. Given the evidence described in the literature and the lack of data correlating purinergic signaling with esophageal cancer, we analyzed the role of P2Y2 (P2Y2R) and P2Y12 (P2Y12R) receptors in the processes of proliferation, colony formation capacity, migration, adhesion, enzymatic activity of the ectonucleotidases and signaling pathways after the nucleotide stimulation. For this, we used the Kyse- 30 and Kyse-450 cells, representative of squamous cell carcinoma, and the OE-33
line, representative of adenocarcinoma. Also, we verified the expression of P2Y2R in
biopsies of patients with squamous cell carcinoma and adenocarcinoma, compared
to non-neoplastic tissues. We observed that the biopsy specimens express the P2Y2
receptor, but at different labeling intensities. The cell lines expressing P2Y2 and
P2Y12R, have different responses to the stimulus with the nucleotides ADP, ATP and
UTP, but the blockade of these receptors leads to a decrease in proliferation,
polyclonal population formation, adhesion and migration. Regarding the pathways
related to the action of P2Y2R, we verified the activation of ERK1 / 2 and Akt at
different times after the stimulation with ATP and UTP. The data presented in this
study demonstrate that the modulation of purinergic receptors P2Y2 and P2Y12 may
become a promising tool for achieving efficacy in the treatment of esophageal cancer. / O c?ncer de es?fago, em geral, ? diagnosticado em est?gio avan?ado, o que leva a um preju?zo nas terapias empregadas, resultando em uma alta taxa de mortalidade. ? dividido em dois subtipos: adenocarcinoma e carcinoma de c?lulas escamosas; os dois subtipos diferem quanto a histologia, etiologia e epidemiologia. A sinaliza??o purin?rgica utiliza nucleot?deos e nucleos?deos no meio extracelular como mol?culas sinalizadoras e j? foi relacionada com diferentes tipos de carcinomas. Essas mol?culas ligam-se a receptores para adenosina acoplados a prote?na G, caracterizados como P1 (A1, A2A, A2B e A3), a receptores ionotr?picos P2X (P2X1- P2X7), e ainda a receptores P2Y (P2Y1, 2, 4, 6, 11, 12,13 14), acoplados a prote?na G. Diante
das evid?ncias descritas na literatura e a falta de dados correlacionando a sinaliza??o purin?rgica com c?ncer de es?fago, analisamos o papel dos receptores P2Y2 (P2Y2R) e P2Y12 (P2Y12R) nos processos de prolifera??o, capacidade de forma??o de col?nias, migra??o, ades?o e atividade enzim?tica das
ectonucleotidases e vias de sinaliza??o envolvidas, ap?s o est?mulo com nucleot?deos. Para isso, utilizamos as c?lulas Kyse-30 e Kyse-450, representativas de carcinoma de c?lulas escamosas, e a linhagem OE-33, representativa de adenocarcinoma. Tamb?m, verificamos a express?o do P2Y2R em bi?psias de
pacientes com carcinoma de c?lulas escamosas e adenocarcinoma, comparadas com tecidos n?o neopl?sicos. Observamos que as amostras de bi?psia expressam o receptor P2Y2, por?m em diferentes intensidades de marca??o. As linhagens celulares expressam P2Y2 e P2Y12R, possuem diferentes respostas frente ao est?mulo com os nucleot?deos ADP, ATP e UTP, por?m o bloqueio desses receptores leva ?
diminui??o da prolifera??o, forma??o de popula??o policlonal, ades?o e migra??o. Quanto ?s vias relacionadas ? a??o do P2Y2R, verificamos a ativa??o de ERK1/2 e Akt em diferentes tempos ap?s o est?mulo com ATP e UTP. Os dados apresentados neste estudo demonstram que a modula??o de receptores purin?rgicos P2Y2 e P2Y12, pode tornar-se uma ferramenta promissora para alcan?ar efic?cia no
tratamento do c?ncer de es?fago.
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Separação imunomagnética associada a bacteriófago para diagnóstico de Salmonella enterica em carne de frango /Corrêa, Isadora Mainieri de Oliveira. January 2015 (has links)
Orientador: Raphael Lucio Andreatti Filho / Banca: Adriano Sakai Okamoto / Banca: Julio Lopes Sequeira / Banca: Maristela Lovato / Banca: Guilherme Augusto Marietto Gonçalves / Resumo: Utilizou-se o método de Separação Imunomagnética associada a Bacteriófago para detectar os seguintes sorovares: Salmonella Heidelberg, Salmonella Enteritidis e Salmonella Typhimurium, em amostras de sobrecoxas de frango contaminadas artificialmente. Para certificarmo-nos da eficiência do método, comparamos esta técnica com os testes de diagnóstico usuais para este patógeno: a análise bacteriológica padrão, que inclui a etapa de pré-enriquecimento, enriquecimento seletivo, realização de testes bioquímicos de triagem e sorologia, e a reação em cadeia da polimerase (PCR). Na avaliação da capacidade dos testes na detecção de Salmonella em carne de frango, submetemos amostras de sobrecoxas de frango à contaminação artificial com 5, 10 e 100 UFC/25mL de bactéria, para cada um dos sorovares listados anteriormente, totalizando 270 análises, divididas em 90 testes para cada um dos três sorovares, e assim comparamos os resultados obtidos com a análise bacteriológica, PCR e o teste de Separação Imunomagnética associada a Bacteriófago. Ao aferirmos os resultados constatamos que a Separação Imunomagnética associada a Bacteriófago é equiparável ao método bacteriológico recomendado pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) e com a técnica de PCR, pois 99,6% das amostras foram positivas ao realizarmos o teste de Separação Imunomagnética associado a Bacteriófago e apenas uma amostra de Salmonella Enteritidis foi negativa neste ensaio, na concentração de 5 UFC/25mL. Já no método bacteriológico verificamos 95,5% de positividade, com nove amostras negativas para S. Heidelberg, duas negativas para S. Enteritidis e duas no ensaio com S. Typhimurium. Na técnica de PCR obtivemos 98,5% de positivos, com uma amostra negativa para S. Enteritidis na concentração de 5 UFC/25mL e três negativas para S. Typhimurium. O tempo despendido para a realização de cada teste foi aferido e constatamos... / Abstract: We used the Immunomagnectic Separarion Assay associated with Bacteriophage to detect the following serovars: Salmonella Enteritidis, Salmonella Heidelberg and Salmonella Typhimurium, in poultry drumstick samples artificially contaminated. We compared the efficiency of this technique to the usual diagnostic tests for Salmonella in food samples: the standard bacteriological analysis, which includes the step of pre-enrichment and selective enrichment, biochemical and serological screening tests, and polymerase chain reaction (PCR). To evaluate the tests capability of Salmonella detection poultry meat samples were submitted to artificial contamination with 5, 10 and 100 CFU/25mL of bacteria, for each of the serovars listed above, totaling 270 analyzes divided into 90 tests for each of the three serovars, and so compare the results obtained with the bacteriological analysis, PCR and Immunomagnetic Separation Bacteriophage assay. We found that the Immunomagnetic Separation Bacteriophage assay was comparable to bacteriological method recommended by the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply (MAPA) and the PCR technique, because 99.6% of the samples were positive to accomplish Immunomagnetic Separation Bacteriophage assay and only a sample of Salmonella Enteritidis was negative in this test, in the concentration of 5 CFU/25mL. The bacteriological method check 95.5% positivity, with nine samples negative for S. Heidelberg, two negative for S. Enteritidis and two in the test with S. Typhimurium. In PCR 98.5% positives samples were obtained, with one S. Enteritidis negative sample in the concentration of 5 CFU/25ml and three negative samples for S. Typhimurium. The time for performing each test was measured and the Immunomagnetic Separation Bacteriophage assay was the most rapid test for Salmonella diagnosis, since 20 hours, the conventional bacteriological took 88h and PCR 44h approximately. In this study we confirm the effectiveness of the ... / Doutor
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Adapta??es morfol?gicas do trato digest?rio do peixe neotropical Steindachnerina notonota (Characiformes, Curimatidae) ao h?bito alimentar detrit?voro / Morphological adaptations of the digestory tract of neotropical fish Steindachnerina notonota (Characiformes, Curimatidae) to the detritivore feeding habitSilva, Lenilda Teixeira da 21 June 2016 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-03-21T18:23:16Z
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Previous issue date: 2016-06-21 / A Detritivoria ? comum em peixes dulc?colas, sobretudo na regi?o neotropical, e para muitas esp?cies s?o escassas as informa??es sobre o trato digest?rio, como ? o caso da esp?cie Steindachnerina notonota, na qual, tem import?ncia ecol?gica como elo da cadeia alimentar, servindo de alimento para os peixes carn?voros, e atuando na depura??o dos ecossistemas aqu?ticos sujeitos ? polui??o org?nica. O objetivo do presente estudo consiste em analisar as adapta??es morfol?gicas do trato digest?rio, desta esp?cie end?mica da caatinga, regi?o do semi?rido brasileiro. Assim, foram utilizados 10 esp?cimes adultos (machos e f?meas), necropsiados, para an?lises macrosc?picas e microsc?picas do trato digest?rio. Todas as estruturas foram observadas no estereomicrosc?pio. Os ?rg?os foram fixados em formol 10% e submetidos ? colora??o de Hematoxilina e Eosina, e PAS - ?cido Peri?dico Schiff (rastros branquiais, ?rg?o epibranquial, es?fago, est?mago, intestino m?dio e intestino posterior) e analisados em microscopia de luz. Os rastros branquiais tamb?m foram fixados em paraformalde?do 10% para an?lise em microscopia eletr?nica de varredura. Os esp?cimes analisados possu?am comprimento total entre 6,4 a 13 cm, comprimento padr?o entre 4,8 a 10,3 cm, e peso de 3,23 a 35,92 g. As adapta??es estruturais no trato digest?rio foram: boca do tipo terminal; o particular complexo bucofar?ngeo; aus?ncia de dentes e da l?ngua; tem tr?s tipos de formatos de rastros branquiais com c?lulas mucosas e bot?es gustativos; possui o ?rg?o epibranquial com suas peculiaridades; um est?mago mec?nico com musculatura muito desenvolvida na regi?o pil?rica; e um intestino muito longo e enovelado, que tem internamente uma exclusiva prega helicoidal. Os aspectos morfol?gicos do trato digest?rio de S. notonota t?m rela??o ao h?bito alimentar especializado detrit?voro-ili?fago. / Detritivory is the common freshwater fishes, especially in the Neotropical region, and for many species are scarce information about the digestory tract, as is the case of the species Steindachnerina notonota, in which, it has ecological importance as links in the food chain, serving of feed for carnivorous fishes, and acting in the depuration of aquatic ecosystems subject to organic pollution. The objective of present study consists of analyzing the morphological adaptations of the digestory tract, of this endemic species of the caatinga, Brazilian semiarid region. Thus, 10 adult specimens were used (males and females), necropsied for macroscopic and microscopic analysis of the digestory tract. All structures were observed in the stereomicroscope. The organs were fixed in 10% formalin and submitted to hematoxylin and eosin staining, and PAS - periodic acid Schiff (gill rakers, epibranchial organ, esophagus, stomach, midgut and hindgut) and analyzed by light microscopy. The gill rakers were also fixed in 10% paraformaldehyde for analysis by scanning electron microscopy. The specimens analyzed had total length between 6,4 to 13 cm, standard length between 4,8 to 10,3 cm, and weight of 3,23 to 35,92 g. The structural adaptations in the digestory tract were: mouth of the terminal type; the particular complex bucopharyngeal; absent from tooth and tongue; it has three types of formats of gill rakers with mucous cells and taste buds; possess the epibranchial organ with its peculiarities; a mechanical stomach with highly developed musculature in the pylorus; and a very long and coiled intestine, which internally has exclusive helical fold. The morphological aspects of digestory tract of S. notonota are related to detritivore-ilyophago specialized feeding habit.
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Papel dos receptores P1 e da cafe?na na prolifera??o de carcinoma de c?lulas escamosas de es?fagoAbreu, Bianca Regina Ribas de 06 August 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-08-06 / Esophageal cancer is the eighth most common cancer worldwide. The prognosis for this cancer is poor, generally, the overall survival rate is 10-15% with about five years of survival. Adenosine is present in different tissues of various organisms and plays an extremely important role in the purinergic system. Adenosine is produced directly or indirectly by ATP and its target P1 receptors which are G-protein coupled (A1, A2A, A2B and A3). Caffeine is a non-selective adenosine antagonist and has low affinity for A3 great affinity for A1, A2A and A2B. The objective of this study was to investigate the role of P1 purinergic receptors and the action of caffeine on the proliferation of squamous cell carcinoma of the esophagus, using the human lineage of squamous cell esophageal OE21. First we demonstrated that P1 receptors are expressed in the cell line by means of qRT-PCR and still A2A receptor expression was significantly reduced when these cells were treated with caffeine (100 μM). In addition to the caffeine treatment also decreases cell proliferation (1, 5 e 10 mM) and this effect was most likely a type of non-apoptotic cell death. Similarly, adenosine decreases cell viability (1, 5 and 10 mM) and proliferation (5 mM) via apoptosis and dipyridamole (10 μM) affect cell viability and did not alter the type of death caused. These results demonstrate the in vitro investigation of adenosine and caffeine in esophageal cancer receptors and this is a first step to understanding of purinergic signaling in esophageal cancer. / O c?ncer de es?fago ? o oitavo c?ncer mais comum no mundo. O progn?stico para esse tipo de c?ncer ? ruim, geralmente, a taxa de sobreviv?ncia global ? de 10-15% com cerca de cinco anos de sobrevida. A adenosina est? presente em diferentes tecidos de v?rios organismos e tem um papel extremamente importante no sistema purin?rgico. Ela ? produzida direta ou indiretamente atrav?s do ATP e tem como alvo receptores purin?rgicos P1 que s?o acoplados ? prote?na G (A1, A2A, A2B e A3). A cafe?na ? um antagonista n?o seletivo de adenosina e tem baixa afinidade pelos receptores A3 e grande afinidade pelos receptores A1, A2A e A2B. O objetivo deste trabalho foi investigar o papel dos receptores purin?rgicos P1 e a a??o da cafe?na e da adenosina na prolifera??o de carcinoma de c?lulas escamosas de es?fago, utilizando a linhagem humana de carcinoma de c?lulas escamosas de es?fago OE21. Primeiro demonstramos que os receptores P1 est?o expressos na linhagem celular atrav?s de qRT-PCR, e que a express?o do receptor A2A foi significativamente reduzida (p<0,05) quando essas c?lulas foram tratadas com cafe?na (100 μM). Em adi??o o tratamento com a cafe?na tamb?m diminui significativamente a viabilidade (1, 5 e 10 mM) das c?lulas e este efeito foi provavelmente um tipo de morte celular n?o-apopt?tica. De modo semelhante, a adenosina diminui a viabilidade celular (1, 5 e 10 mM) e a prolifera??o (5 mM) atrav?s de apoptose, e o dipiridamol (10 μM) afetou a viabilidade celular e n?o alterou o tipo de morte causada. Estes resultados demonstram, atrav?s de investiga??o in vitro, a a??o dos receptores P1 adenosina e da cafe?na no c?ncer de es?fago e este ? um primeiro passo para entender de sinaliza??o purin?rgica no c?ncer de es?fago.
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O fator inibidor da migra??o de macr?fago (MIF) ? necess?rio para a libera??o de citocinas durante a infec??o pelo v?rus sincicial respirat?rio em macr?fagosSouza, Gabriela Fabiano de 19 March 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-03-19 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / Respiratory syncytial virus (RSV) is the major cause of infection in children up to five years of age. Reinfection is very common among patients, causing symptoms such as cold or allergy. However, in children, immunosuppressed patients and elderly infection is exacerbated leading to hospitalization and in some case, even death. The number of hospitalizations each year is alarming, even more so because up to now there is still no vaccine for RSV. Tissue damage in the lung caused by RSV leads to an immune response, where infected cells signal activation of signaling pathways, production of reactive oxygen species (ROS), and massive production of inflammatory mediators. Among this production is the macrophage migration inhibitory factor (MIF), which is a pro-inflammatory cytokine, which has been shown to play an important role in the immune response. Knowing this importance, we evaluated MIF expression macrophages from BALB/c mice. The cells were infected with different concentrations of RSV and analyzed by western blot, real-time PCR and Cytometric Bead Array (CBA). After confirmation of MIF expression by the infection, different inhibitors of signaling pathways and ROS were used to evaluate its importance for the expression of MIF. From the results obtained, we showed the dependence of ROS, 5-lipoxygenase (5-LOX), COX, PI3K and partially of P38 MAPK, for MIF expression, besides the need for viral activity. MIF was shown to be important for the release of cytokines such as TNF?, MCP-1 and IL-10. Based on this information MIF may play an important role in the exacerbation of infection, so it was extremely important to explore mechanisms involved in the expression of MIF in relation to RSV. / O V?rus sincicial respirat?rio (VSR) ? a maior causa de infec??o em crian?as at? os cinco anos de idade. A reinfec??o ? muito comum entre os pacientes, causando sintomas como de uma gripe ou alergia, no entanto, em crian?as, pacientes imunossuprimidos e idosos a infec??o ? muito mais exacerbada, o que acaba levando a necessidade de interna??o, podendo levar o paciente a ?bito. O n?mero de interna??es a cada ano ? alarmante, ainda mais que at? os dias atuais ainda n?o se tem uma vacina para o VSR. O dano tecidual no pulm?o, causado por VSR leva a uma resposta imune, onde c?lulas infectadas sinalizam para que ocorra a ativa??o de vias de sinaliza??o, produ??o de esp?cies reativas de oxig?nio (EROs) e tamb?m uma produ??o massiva de mediadores inflamat?rios. Dentre essa produ??o, est? o fator inibidor de migra??o de macr?fagos (MIF), que ? uma citocina pr?-inflamat?ria, que tem demonstrado um importante papel na resposta imune. Sabendo dessa import?ncia, avaliamos a express?o de MIF em macr?fagos de camundongos BALB/c. As c?lulas foram infectadas com diferentes concentra??es de VSR e analisadas por western blot, PCR em tempo real e Cytometric Bead Array (CBA). Ap?s a confirma??o da express?o de MIF pela infec??o, foram utilizados diferentes inibidores de vias de sinaliza??o e de EROs, para que fosse poss?vel avaliar sua import?ncia para a express?o de MIF. A partir dos resultados obtidos mostramos a depend?ncia de EROS, 5-lipoxigenase (5-LOX), COX, PI3K e parcialmente de P38 MAPK, para a express?o de MIF, al?m da necessidade de atividade viral. MIF se mostrou importante para a libera??o de citocinas como TNF ?, MCP-1 e IL-10. Baseado nessas informa??es MIF pode desempenhar um papel importante na exacerba??o da infec??o, sendo assim, foi de extrema import?ncia explorar mecanismos envolvidos na express?o de MIF em rela??o ao VSR.
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Doen?a de Chagas: caracteriza??o de formas cl?nicas e estratifica??o do risco de morte no Oeste do Estado do Rio Grande do NorteAndrade, Cl?ber de Mesquita 12 March 2015 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-04-08T22:35:39Z
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CleberDeMesquitaAndrade_TESE.pdf: 1956935 bytes, checksum: b2ca1cf3e0006c3f5cc5877261077f97 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-04-11T20:25:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2015-03-12 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / O perfil cl?nico com classifica??o das formas cl?nicas e a gravidade da doen?a de
Chagas foram avaliados em indiv?duos sororreativos para o Trypanosoma cruzi
procedentes da mesorregi?o Oeste Potiguar. Neste estudo transversal foram
inclu?dos 186 indiv?duos adultos, entre 23 a 78 anos de idade. Todos os
indiv?duos foram submetidos ? avalia??o cl?nica, aplicado um question?rio cl?nicoepidemiol?gico
e realizados eletrocardiograma de repouso, ecocardiograma
transtor?cico, radiografia simples de t?rax e contrastadas de es?fago e c?lon. O
Holter foi realizado em 98 pacientes e aplicado escores de risco de acidente
vascular encef?lico isqu?mico e morte. A forma cl?nica indeterminada foi
detectada em 51,6% (96/186) dos pacientes, a card?aca em 32,2% (60/186), a
digestiva em 8,1% (15/186) e a cardiodigestiva em 8,1% (15/186). Dos pacientes
com a forma cl?nica digestiva, 7,0% (13/186) apresentaram diferentes grupos de
megaes?fago (I a IV) e 12,9% (24/186) apresentaram megac?lon de grau 1 a 3.
Destes, 29,2% (7/24) com ambos os ?rg?os afetados. As altera??es
eletrocardiogr?ficas foram observadas em 48,9% (91/186) dos pacientes e a
arritmia ventricular complexa presente em 41,8% (41/98). Desses pacientes,
10,2% (19/186) apresentaram cardiomegalia, o aneurisma apical foi diagnosticado
em 10,8% (20/186) e, as altera??es da contratilidade mioc?rdica segmentar do
ventr?culo esquerdo em 33,9% (63/186). Em 7,5% (14/186) dos pacientes foi
detectada insufici?ncia card?aca com classes funcionais que variam de I a IV. A
classifica??o da insufici?ncia card?aca por est?dios demonstrou que 36,4%
(24/66), 30,3% (20/66), 15,2% (10/66), 13,6% (9/66) e 4,5% (3/66) dos pacientes
apresentaram est?gios A, B1, B2, C e D, respectivamente. O escore de
estratifica??o de risco de acidente vascular encef?lico isqu?mico identificou 80,6%
(150/186) dos pacientes em baixo risco, 15,6% (29/186) em moderado e 3,8%
(7/186) em alto risco. O escore de risco de morte foi aplicado em 84 pacientes e
69,0% (58/84) mostraram baixo risco, 25,0% (21/84) intermedi?rio e 6,0% (5/84)
alto risco. Os resultados demonstraram a exist?ncia das principais formas cl?nicas
da doen?a de Chagas em diferentes est?gios de evolu??o, inclusive o registro da
forma digestiva isolada; observou-se que um quarto dos pacientes com a forma
indeterminada deveria ser considerado cardiopatas subcl?nicos ou pelo menos,
pacientes de maior potencial evolutivo para outras formas cl?nicas ou fase pr?-
cl?nica, e confirmou-se a exist?ncia de correla??o positiva entre o escore de risco de morte e seus principais determinantes, insufici?ncia card?aca, morte s?bita e
acidente vascular encef?lico isqu?mico, oferecendo mais um elemento para a
tomada de condutas frente ao chag?sico cardiopata.
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