Orientador: Maria Helena de Melo Lima / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Enfermagem / Made available in DSpace on 2018-08-23T13:59:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Banhesse_VanessaFerrazSuzuki_M.pdf: 2526761 bytes, checksum: 40666dc2d8f53b2d7f50666126a76702 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: A cicatrização de feridas em pele é um processo biológico complexo e dinâmico, que envolve eventos como inflamação, proliferação, e remodelamento. Estudos recentes mostraram que estatinas, por meio de efeitos pleiotrópicos independentes da ação hipolipemiante, são novas opções terapêuticas para tratamento de diferentes patologias por suas ações anti-inflamatórias, antioxidantes, sobre vasodilatação, neoangiogênese e na redução da disfunção endotelial. O objetivo deste estudo foi investigar a ação da atorvastatina no reparo tecidual em lesões agudas em animais saudáveis. Os animais foram distribuídos em quatro grupos: placebo (P); atorvastatina tópica (AT); atorvastatina oral (AO); atorvastatina tópica e oral (ATO). Sob anestesia, a lesão na região dorsal foi confeccionada com punch de 8mm. As lesões foram fotografadas nos dias 0, 1, 3, 7, 10 e 14 pós-lesão e amostras destas extraídas nos dias 1, 3, 7 e 14, para análise da expressão de proteínas PI3K, Akt, GSK-3, eNOS, VEGF, TGF-?, ERK, IL- 10, IL-1?, IL-6 e TNF-?. Na avaliação macroscópica, houve melhora significativa quanto à redução das áreas das lesões nos grupos AT, AO e ATO em relação ao placebo. Na avaliação da expressão de proteínas, no 1o dia houve aumento da expressão PI3K, Akt, GSK-3, eNOS e IL-10 nos grupos AT e AO, em relação ao placebo. No 3o dia, houve aumento da expressão das proteínas PI3K, Akt, GSK-3 e IL-10 e no 7o dia, houve aumento da expressão da PI3K, Akt, GSK-3, IL-10, eNOS, VEGF e ERK em todos os grupos tratados com atorvastatina, em relação ao placebo. No 1o, 3o e 7o, houve redução na expressão das citocinas IL-6 e TNF-? em todos os tratados em relação ao placebo. Concluímos que atorvastatina acelera o reparo tecidual em modelo de lesões agudas em ratos e modula a expressão das proteínas nas vias de crescimento celular e citocinas / Abstract: Wound healing in skin is a complex and dynamic biological process, involving events such as inflammation, proliferation, and remodeling. Recent studies have shown that statins, through pleiotropic effects independent of its lipid lowering action, are new therapeutic options for the treatment of different diseases for their anti-inflammatory and antioxidant actions, on vasodilation and neoangiogenesis and reduction of endothelial dysfunction. The aim of this study was to investigate the effect of atorvastatin in tissue repair after acute injury in healthy animals. The animals were divided into four groups: placebo (P); topical atorvastatin (AT); oral atorvastatin (AO); topical and oral atorvastatin (ATO). Under anesthesia, a lesion in the dorsal region in the animal was made with 8mm punch. The lesions were photographed on days 0, 1, 3, 7, 10 and 14 post-injury and the samples drawn on days 1, 3, 7 and 14 for protein expression analysis of PI3K, Akt, GSK-3, eNOS VEGF, TGF-?, ERK, IL-10, IL-1?, IL-6 and TNF-?. At macroscopic examination, there was significant improvement in the reduction of the lesion areas in groups AT, AO and ATO relative to placebo. Evaluating the expression of proteins on day 1, there was an increased expression of PI3K, Akt, GSK-3, eNOS and IL-10 in AT and AO groups, when compared to placebo. At day 3, there was increased expression of PI3K, Akt, GSK-3 and IL-10 and in the day 7, there was increased expression of PI3K, Akt, GSK-3, IL-10, eNOS, VEGF and ERK in all atorvastatin-treated groups versus placebo. In the days 1, 3 and 7, there was a reduction in the expression of IL-6 and TNF-? in all atorvastatin-treated versus placebo. We conclude that atorvastatin accelerates tissue repair in a model of acute lesions in rats and modulates expressions of proteins in cell growth pathways and cytokines / Mestrado / Enfermagem e Trabalho / Mestra em Ciências da Saúde

Orientador: João Ernesto de Carvalho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-23T19:48:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jorge_MichellePedroza_D.pdf: 2283955 bytes, checksum: b072f9c1a059aa4151ca9a31726c9e7a (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: A cicatrização é um processo fisiológico dinâmico e complexo que visa a restauração da função e da continuidade anatômica dos tecidos. A espécie Arrabidea chica (Humb. & Bonpl.) Verlot, encontrada em quase todo o Brasil e que faz parte da relação nacional de plantas medicinais de interesse ao SUS (Renisus), é popularmente utilizada para auxiliar a cicatrização de feridas. Tomando por base resultados de estudos farmacológicos anteriores, a presente tese teve por objetivo aperfeiçoar a qualidade e a estabilidade do extrato bruto de A. chica (EB) através da microencapsulação pelo processo de atomização, dando origem ao extrato bruto microencapsulado (EBM). Os estudos de estabilidade comparativa do EB e EBM, avaliados por análises fitoquímicas e farmacológicas, demonstraram que o processo de microencapsulamento foi capaz de evitar a degradação química das três antocianidinas empregadas como marcadores químicos e de manter a atividade antiulcerogênica após 180 dias. Estudos subsequentes de mecanismo de ação protetora gástrica demonstraram o efeito do EB (dose 125 mg/Kg) sobre a produção de muco e secreção ácida, comprovados em modelos de dosagem de muco e ligadura de piloro em ratos. A análise dos possíveis mecanismos de ação antissecretora do EB sugere uma ação antagonista sobre os receptores de gastrina e de acetilcolina agindo, possivelmente, sobre a via dos segundos mensageiros. A fim de elucidar a atividade angiogênica do EB, foram realizados estudos em membrana corioalantóide (CAM) de ovos e tegumento do dorso de camundongos cujos resultados indicaram ação pró-angiogênica. Além disso, avaliou-se a ação cicatrizante em modelo de úlcera dérmica em ratos portadores de diabetes induzida por estreptozotocina (60 mg/Kg). A redução da área ulcerada nos animais diabéticos tratados com EB e EBM por via tópica (85% e 86%, respectivamente) foi comparável àquela observada nos animais pertencentes ao grupo controle positivo do experimento, alantoína (85%). Finalmente, a avaliação de segurança do EB na dose de 300 mg/Kg foi realizada através do teste de toxicidade oral, em roedores, em doses repetidas, durante 28 dias ao final dos quais não foram evidenciados quaisquer sinais clínicos, anátomo-patológicos, hematológicos ou bioquímicos de toxicidade. Os resultados deste trabalho permitiram a definição de parâmetros de eficácia, segurança e reprodutibilidade, fornecendo subsídios para o desenvolvimento de um novo medicamento fitoterápico a partir do extrato bruto de Arrabidea chica para o tratamento de úlceras cutâneas e gástricas, derivadas ou não das complicações da diabetes / Abstract: Wound healing is a dynamic and complex physiological process that aims restoring function and anatomical continuity of tissues. The species Arrabidea chica (Humb. & Bonpl.) Verlot, found throughout Brazil and part of the national list of medicinal plants of interest to the SUS (Renisus), is popularly used to wound healing. Based on previous pharmacological studies, this thesis aimed to improve the quality and stability of A. chica crude extract (EB) through microencapsulation by atomization process affording microencapsulated crude extract (EBM). Stability study comparing EB and EBM phytochemical and pharmacological aspects showed that the microencapsulation process was able to avoid chemical decomposition of three anthocyanidins used as chemical markers as well as to keep the antiulcer activity. Further mechanism of action studies have demonstrated that the protective gastric effect of EB (dose 125 mg / kg) involves modulation of mucus and gastric acid production, evidenced by mucus dosage and pylorous ligation models in rats. Moreover, antisecretory mechanisms of action of EB could be related to an antagonistic action on gastrin and acetylcholine receptors probably acting on second messengers. In order to evidence angiogenic activity of EB, studies have been conducted on chorioallantoic membrane (CAM) of eggs and dorsum integument of mice showing that EB has pro-angiogenic effects. Furthermore, the wound healing effect of EB and EBM have been evaluated on dermal ulcer model in streptozotocin-induced diabetic rats affording that topical administration of EB or EBM had reduced the ulcerated area in 85 % and 86 %, respectively, in diabetic animals treated during 10 days been comparable to positive control group (allantoin, 85 % of reduction). Finally, safety assessment of EB at dose of 300 mg/kg has been performed using the 28-day repeated dose oral toxicity assay in rodents, presenting no clinical, pathological, biochemical or hematological toxicity signs. The results of this project stabilished some efficacy, safety and reproducibility parameters providing subsidies for the development of a new herbal medicine from Arrabidea chica crude extract for skin and gastric ulcers treatment, whether not derived from diabetes complications / Doutorado / Clinica Medica / Doutora em Clínica Médica

Orientador: Aparecida Machado de Moraes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-19T14:06:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pimentel_CamilaBianco_M.pdf: 2170672 bytes, checksum: 382d051a461d1bf38d120f7595ee3e8d (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: A criocirurgia é uma técnica terapêutica muito eficaz no tratamento de diversas lesões cutâneas benignas e malignas. O principal mecanismo de ação desta técnica está relacionado aos seus efeitos vasculares no tecido tratado. Após o procedimento criocirúrgico ocorre a formação de um tecido de granulação exuberante no local da aplicação, provavelmente por estímulo angiogênico do criógeno e da resposta inflamatória, particularmente nas células endoteliais. Objetivos: avaliar e comparar os efeitos angiogênicos da criocirurgia, por método histopatológico (hematoxilina-eosina), na pele normal e previamente submetida a injúria experimental de ratos, utilizando-se o nitrogênio líquido como criógeno de escolha. Métodos: Foram realizadas duas feridas experimentais no dorso de 20 ratos, machos, linhagem Lewis, adultos jovens, com peso entre 180 e 220gramas, utilizando-se punch de 5mm, distantes 2 cm uma da outra. Após 3 dias, foi realizada criocirurgia com nitrogênio líquido em uma delas, utilizando-se a técnica do spray aberto por 15 segundos. Os animais foram divididos de forma aleatória em dois grupos de dez animais. Após 7 dias (grupo I) e 14 dias (grupo II), as amostras foram coletadas e encaminhadas para análise histológica, para avaliação da celularidade (angiogênese) local nos diferentes momentos e situações. Resultados: Foi possível comprovar que a criocirurgia, apesar de promover morte celular logo após sua aplicação e um processo inflamatório local acentuado, induz em um segundo momento, uma rápida proliferação celular e a manutenção desta taxa de celularidade, quando comparada ao mesmo fenômeno na cicatrização tecidual sem este procedimento. Conclusão: Estes achados, juntamente com o conhecimento de que existe uma relação direta entre as células mononucleares e neovascularização, e que há o desenvolvimento de um rico sistema de novos vasos em injúria causada pelo frio, sugerem que a criocirurgia, apesar de levar a uma cicatrização completa em um tempo mais prolongado, possuí estímulo angiogênico / Abstract: Cryosurgery is a very efficient therapeutic technique to treat benign and malignant cutaneous diseases. The primary active mechanism of cryosurgery is related to vascular effects in treated tissue. After a cryosurgical procedure, exuberant granulation tissue is formed at the injection site, probably as a result of angiogenic stimulation of the cryogen and inflammatory response, particularly in endothelial cells. The objective of this study is to evaluate the angiogenic effects of freezing, as part of the phenomenon of healing rat skin subjected to previous injury. Methods: 20 young adult Lewis strain male rats were used, weighing between 180 and 220 grams. Each rat received two wounds that were administered 2 cm apart using a 5mm punch. After 3 days, cryosurgery with liquid nitrogen for 15 seconds, using the open spray technique, was done in one of them. These rats were divided randomly into two groups of 10 animals, group I (GI) and group II (GII). After 7 days (GI) and 14 days (GII), samples were collected cut and stained to realize histopathological examination, to assess the local angiogenesis in differents moments and situations. Results: It was possible to demonstrate that cryosurgery, in spite of promoting cell death and accentuated local inflammation soon after its application, induces a more rapid cell proliferation in the affected tissue and maintenance of this rate in a second phase, than in tissue healing without this procedure. Conclusion: These findings, together with the knowledge that there is a direct relationship between mononuclear cells and neovascularization (the development of a rich system of new vessels in injury caused by cold), suggest that cryosurgery possesses angiogenic stimulus, even if taking longer for complete healing to occur / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:13:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2932_1.pdf: 2515183 bytes, checksum: 4e817df048fb4e781b0ad54a6aa787c7 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O óleo de Linum usitatissimum L. (linhaça) é rico em ácidos graxos poliinsaturados (AGPI) como os ácidos graxos essenciais (linolênico (ω-3), linoléico (ω-6)) e ácido graxo monoinsaturado (AGMI) oléico (ω-9). Considerando a importância dos AGPI e AGMI na manutenção da integridade da pele e processos inflamatórios, este teve como objetivo avaliar a toxicidade dérmica e reparação tecidual de uma formulação semi-sólida do óleo de linhaça (FSSOL) em roedores e coelhos. Para a avaliação da toxicidade foram utilizamos a FSSOL (1%, 5%, 10% ou 50%) ou óleo de linhaça, em diferentes modelos experimentais, a partir dos protocolos 402 em camundongo Swiss (n=6); 404 em coelhos albinos (n=4); 405 em coelhos albinos (n=4) e 406 em guinea pig (n=6), publicados pela Organization for Economic Co-operation and Development (OECD), bem como outros aspectos preconizados pelo Guia para a realização de estudos de toxicidade pré-clínica de fitoterápicos da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA). A FSSOL em diferentes concentrações (1%, 5% ou 10%) ou óleo de linhaça foram avaliados em modelos experimentais de ferida exicional (durante 14 dias) e incisional (durante 10 dias) em ratos Wistar (n=6) e comparado com grupos controles negativo (vaselina) e positivo (Dersani®). Através dos modelos de feridas, exicisional e incisional, foram avaliados respectivamente, a contração / reepitelização da ferida e resistência à tração mecânica. Os resultados obtidos revelam que nas diferentes concentrações testadas, a FSSOL não apresenta toxicidade (dérmica ou ocular) ou sensibilização dérmica, nos modelos animais utilizados. No que se refere à reparação tecidual, os grupos tratados com as FSSOL (1% ou 5%) apresentaram processo de reepitelização já bem visualizado a partir do 6º dia de tratamento, enquanto os grupos controle (negativo e positivo) só foi verificado a partir do 7º dia de tratamento. No 14º dia os grupos tratados com a FSSOL (1% ou 5%) e controle positivo apresentaram 100% (06 animais) de reepitelização contra 33,33% (02 animais) apresentado pelo grupo controle negativo. Na avaliação da resistência à tração mecânica não observamos diferença estatisticamente significante entre os grupos tratados com a FSSOL (1%, 5% ou 10%) e controles (negativo e positivo). Nossos resultados demonstram que, a administração tópica da FSSOL (1% ou 5%) em feridas experimentais excisionais, possibilitou a reepitelização em 100% dos animais e não causou danos a pele íntegra durante os ensaios de segurança em roedores e coelhos

Orientador: Mary Ann Foglio / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-22T06:18:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sousa_IlzaMariadeOliveira_M.pdf: 5880390 bytes, checksum: fd97f693a17c7170d7e33dfda63ca607 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Arrabidaea chica (Humb. & Bonpl.) Verlot, popularmente conhecida como crajiru, espécie presente na lista de plantas medicinais de interesse ao SUS (Renisus) para o uso popular em enfermidades da pele. Estudos desenvolvidos no CPQBA-Unicamp comprovaram que o extrato bruto de A. chica possui ação cicatrizante induzindo a proliferação de fibroblastos in vitro, estimulando a síntese de colágeno in vivo e in vitro. Este estudo estabeleceu parâmetros para permitir a produção de um medicamento à base de A. chica em escala semi piloto, além de determinar condições adequadas de armazenamento, secagem e embalagem do produto final. Entre os compostos sensíveis à luz e à temperatura destaca-se a carajurina, que é responsável pela cor vermelha do extrato. A fim de aumentar a tempo de prateleira do produto microencapsulado por spray drying, utilizaram-se três materiais de parede: goma arábica (GA), goma de cajueiro (CG), e a mistura de goma arábica / maltodextrina (GM) na proporção de 1/1. Os diferentes materiais de parede apresentaram rendimentos de 82; 79 e 89,9% e teor de carajurina de 1,92%, 1 62% e 1,99%, respectivamente. Atividade antioxidante medida pelo método ORAC apresentou valores 1066,9, 1363,8 e 1026,2 uM TE / g. Os estudos de estabilidade foram realizados com extrato livre e microencapsulado armazenados em diferentes embalagens e condições. O produto armazenado a 40 ° C e 75% UR embalado em frascos de polietileno de alta densidade e saches cor de alumínio revestido de plástico diminuiu o teor de carajiruna em 10% em 20 dias de avaliação, enquanto que a embalagem de vidro foi mais estável nessas condições, diminuindo10% do conteúdo de carajiruna após 29 dias de teste. A maior meia-vida do produto microencapsulado foi de 160 dias, armazenado em saches e mantidos a 10 ° C. Todas as formulações semissólidas, avaliadas em modelos experimentais de cicatrização in vivo, foram capazes de reduzir entre 70 a 80% da área cutânea ulcerada em 10 dias de tratamento, contra 37% de redução do grupo controle no mesmo período. A estimulação da produção de colágeno para a formulação gel de Natrosol® contendo o extrato bruto livre foi de 0,093 ?g.mL-1, quando comparada com outras formulações de controle (0,019 ?g.mL-1) e bases (0,028 ?g.mL-1) / Abstract: Arrabidaea chica (Humb. & Bonpl.) Verlot specie, popularly known as Crajiru, included in the National List of interest to SUS (Renisus) is reported to have healing properties for skin ailments. Studies conducted in CPQBA-UNICAMP showed that the crude extract of this plant species induced fibroblast proliferation in vitro, stimulating collagen synthesis in vivo and in vitro. This study established parameters to enable the production of an herbal medicine in semi pilot scale. The drying, storage and packaging conditions were evaluated to determine the best suited to the product. Among the compounds sensitive to light and temperature is carajurin, responsible for the extract's red color. In order to increase product's shelf half-life microencapsulation by spray drying using three different wall materials, arabic gum (GA), cashew gum (CG) and the mixture of arabic gum / maltodextrin (GM) the ratio of 1/1 were evaluated. The different wall materials provided 82.0, 79.0 and 89.9% yields respectively, with carajurin content of 1.92%, 1 62%, and 1.99%. Antioxidant activity measured by the ORAC method gave 1066.9, 1363.8 and 1026.2 ?M TE / g values. Stability studies were conducted with spray dried EB stored in different containers and conditions. The product stored at 40 ° C and 75% RH packed in high density polyethylene and sachets plastic coated aluminum color decreased 10% carajirun content throughout the 20 days period of evaluation. Whereas the glass container was more stable under these conditions, leading to10% decreases in carajirun content throughout 29 days. The greatest half-life of 160 days was verified when the product was stored in sachets at 10 ° C. The semi-solid formulations for topical use containing EB proposed in this study with Carbopol ¿ gel, Natrosol ¿ gel Cream A / O (free and microencapsulated), Cream O / A (free and microencapsulated), evaluated in experimental models of wound healing in vivo reduced 80-70% the ulcerated skin area after 10 days of treatment, whereas the control group decreased by 37%. Collagen concentration observed for the animals treated with Natrosol ¿ gel 2,5% A. chica was 0.093 ?g.mL-1, while animals treated with saline had collagen production of 0.019 ?g.mL-1 and Natrosol ¿ base gel concentration showed 0.028?g.mL-1 / Mestrado / Fármacos, Medicamentos e Insumos para Saúde / Mestra em Biociências e Tecnologia de Produtos Bioativos

Orientadores: Patrícia da Silva Melo, Priscyla Daniely Marcato Gaspari / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-22T07:03:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DePaula_LarissaBarbosa_M.pdf: 38500312 bytes, checksum: 3a0fd9c71b979fe937cf40664c0df057 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Queimaduras representam um problema de saúde pública, gerando um gasto anual de cerca de R$ 55 milhões ao Sistema Único de Saúde (SUS). Os produtos destinados ao tratamento de queimaduras são em sua grande maioria importados, tornando relevantes estudos que visem ao desenvolvimento de materiais com características adequadas ao tratamento e produzidos a partir de matérias-primas de baixo custo e fácil obtenção. O objetivo deste trabalho foi avaliar os possíveis efeitos tóxicos e o potencial de cicatrização de S-Nitrosoglutationa (GSNO) encapsulado em nanopartículas poliméricas (alginato-quitosana e poli (?-caprolactona) (PCL) recobertas por quitosana) e de nanopartículas de prata (AgNPs). O GSNO foi sintetizado através de reação de S-Nitrosação direta de glutationa e caracterizado por espectrofotometria. As nanopartículas de alginato-quitosana (AG/CS) contendo GSNO foram preparadas através do método de gelificação iônica. As nanopartículas de PCL recobertas por quitosana (PCL/CS) e contendo GSNO foram preparadas através do método de dupla emulsão (água/óleo/água) e evaporação do solvente. Ambas as nanopartículas foram caracterizadas por espectroscopia de correlação de fótons (ECF) e microscopia eletrônica de varredura (MEV). As AgNPs foram produzidas extracelularmente por método biotecnológico utilizando-se o fungo Fusarium oxysporum e caracterizadas por ECF e microscopia eletrônica de transmissão (MET). A toxicidade in vitro das nanopartículas foi avaliada através de ensaios de citotoxicidade utilizando-se cultura de células de linhagens pré-estabelecidas e o potencial de cicatrização foi avaliado através de indução de queimadura térmica em ratos Wistar machos, os quais foram posteriormente eutanaziados para avaliação da toxicidade in vivo das nanopartículas. As AG/CS contendo GSNO apresentaram diâmetro médio de 321,0 ± 12,2 nm e potencial Zeta de +37,6 ± 0,6 mV. As PCL/CS contendo GSNO apresentaram-se esféricas, com diâmetro médio de 448,6 ± 35,38 nm e potencial Zeta de +23,11 ± 4,75 mV. As AgNPs apresentaram-se esféricas e altamente estáveis, com diâmetro médio de 7,3 ± 3,0 nm e potencial Zeta de -31,1 ± 2,09 mV. As nanopartículas apresentaram-se pouco tóxicas in vitro e in vivo. O tratamento das lesões com as nanopartículas reduziu a área lesionada em praticamente 100% após 35 dias, diminuindo o tempo necessário para a diferenciação de fibroblastos em miofibroblastos, e revertendo o processo inflamatório mais rapidamente. Nossos resultados indicam que os sistemas nanoparticulados estudados podem fornecer uma nova e eficaz direção terapêutica para o tratamento de queimaduras / Abstract: Burn injuries represent a public health problem, generating an annual cost of about R$ 55 million to the Brazilian Unified Health System. The products for the treatment of burns are mostly imported, so studies aimed at developing materials with appropriate characteristics to the treatment and produced from cheap raw materials and easily obtained are relevant. The aim of this study was to evaluate the possible toxic effects and healing potential of S-Nitrosoglutathione (GSNO) encapsulated in polymeric nanoparticles (alginate-chitosan and chitosan-coated poly (?-caprolactone) (PCL)) and silver nanoparticles (AgNPs). GSNO was synthesized by direct S-Nitrosation reaction of glutathione (GSH) and characterized by spectroscopic analysis. Alginate-chitosan nanoparticles (AG/CS) loaded with GSNO were prepared through ionic gelation method. Chitosan-coated PCL nanoparticles (PCL/CS) loaded with GSNO were prepared by the double emulsion method (water/oil/water) and solvent evaporation. Both of the nanoparticles were characterized by dynamic light scattering (DLS) and scanning electron microscopy (SEM). AgNPs were produced extracellularly by a biotechnological method using the fungus Fusarium oxysporum and characterized by DLS and transmission electron microscopy (TEM). The in vitro toxicity of the nanoparticles was assessed through cytotoxic assays using cell culture of predetermined strains and healing potential was evaluated through thermal burn induced in male Wistar rats, which were subsequently euthanized for evaluation of the in vivo toxicity of the nanoparticles. AG/CS loaded with GSNO had an average diameter of 321.0 ± 12.2 nm and Zeta potential of +37.6 ± 0.6 mV. PCL/CS loaded with GSNO were spherical, with an average diameter of 448.6 ± 35.38 nm and Zeta potential of +23.11 ± 4.75 mV. AgNPs were spherical and highly stable, with an average diameter of 7.3 ± 3.0 nm and Zeta potential of -31.1 ± 2.09 mV. The nanoparticles were slightly toxic in vitro and in vivo. The treatment of the burns with the nanoparticles reduced the burned area in almost 100% after 35 days, decreasing the required time for fibroblasts differentiation into myofibroblasts, and reversing the inflammatory process faster. Our results showed that the studied nanoparticulated systems may provide a novel and effective therapeutic direction for the treatment of burn injuries / Mestrado / Bioquimica / Mestra em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Maria Helena de Melo Lima / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-18T12:31:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Abreu_LeliaLelisFerreirade_M.pdf: 1849560 bytes, checksum: 9c5325441f392ba7c93983dadee0636c (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Amputações e úlceras no pé de pacientes diabéticos, além de comprometer a qualidade de vida, são também um problema de saúde pública. A insulina tem sido usada topicamente para tratar feridas diabéticas e mostrou acelerar o processo de cicatrização tecidual. Um estudo recente demonstrou que o fenofibrato está associado à um menor número de amputações de membros inferiores em pacientes com diabetes do tipo 2, provavelmente através de mecanismos não lipídicos. O objetivo deste estudo foi investigar a associação e os efeitos do fenofibrato sistêmico em relação à insulina tópica na cicatrização de feridas de ratos diabéticos induzidos por estreptozotocina. O diabetes foi induzido em ratos utilizando estreptozotocina. Depois de quatro dias, foi realizada uma lesão no dorso dos animais diabéticos e estas lesões foram tratadas com insulina ou fenofibrato ou insulina mais fenofibrato ou placebo como controle. Nos dias 3 e 9 os animais foram sacrificados e as lesões foram extraídas. Portanto, os resultados deste estudo indicam que o tratamento sistêmico com fenofibrato por via oral em doses terapêuticas não acelera a taxa de cicatrização de feridas em ratos diabéticos, porém existe uma maior ativação do IR, ERK-1 na fase inflamatória; e do IR e GSK-3 na fase proliferativa, além da melhora da expressão de TGF-ß e TNF-'alfa'. O tratamento combinado do fenofibrato com o creme enriquecido de insulina apresentou uma aceleração da taxa de cicatrização, promovendo a ativação da via da PI3-K, além do aumento da expressão de citocinas (TNF-'alfa' e SDF1-'alfa') e fatores de crescimento (VEGF e TGF-ß) na fase inflamatória; e melhora de TGF-ß e TNF-'alfa' durante a fase proliferativa. Neste sentido, podemos concluir que o uso do creme enriquecido de insulina mostrou-se mais eficaz na aceleração da cicatrização quando utilizada sozinha, pois houve um aumento do infiltrado inflamatório, da maturação das fibras de colágeno e da angiogênese na derme, bem como a ativação da sinalização de insulina e melhora da expressão de SDF- 1'alfa', VEGF, TGF-ß e TNF-'alfa' tanto na fase inflamatória quanto na proliferativa / Abstract: Amputations and foot ulcerations in patients with diabetes impairs their quality of life and is also a problematic public health issue. Insulin has been topically used to treat diabetic wounds and has shown acceleration of the healing process. A previous study of fenofibrate was associated with fewer lower-limb amputations in patients with type 2 diabetes, probably through non-lipid mechanism. The aim of this study was to investigate the association and the effect of systemic fenofibrate in relation to topical insulin on wound healing in streptozotocin-diabetic rats. Diabetes was induced in rats using streptozotocin. After 4 days, diabetic animals were wounded and the wounds were treated with insulin or fenofibrate or insulin plus fenofibrate or a placebo as the control. At days 3 and 9 animals were sacrificed and wounds were excised. Therefore, the results of this study indicate that systemic treatment with oral fenofibrate in therapeutic dose does not accelerate the rate of wound healing in diabetic rats, however there is a greater activation of IR, ERK-1 in the inflammatory phase, and IR and GSK-3 in the proliferative phase, besides the improvement of the expression of TGF-ß and TNF- 'alfa'. The combination of fenofibrate with insulin enriched cream showed an increased rate of wound healing by promoting the activation of the PI3-K, as well as increased expression of cytokines (TNF-'alfa' and SDF1-'alfa') and growth factors (VEGF and TGF-ß) in the inflammatory phase, and enhanced TGF-ß and TNF-'alfa' during the proliferative phase. We can conclude that the use of the insulin enriched cream was more effective in accelerating the healing when used alone, demonstrated by an increased inflammatory infiltrate, the maturation of collagen fibers in the dermis and angiogenesis, as well as activation of insulin signaling and the enhanced expression of SDF-1?, VEGF, TGF-ß and TNF-'alfa' in both the proliferative and inflammatory phases / Mestrado / Enfermagem e Trabalho / Mestre em Enfermagem

Orientadores: Alba Regina Monteiro Souza Brito, Everardo Magalhães Carneiro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T15:44:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paula_AnaClaudiaBensuaskide_D.pdf: 11340456 bytes, checksum: b5246f89983fbde44c817f7181e3eda4 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: É conhecido que a desnutrição protéica pode afetar o metabolismo de humanos, roedores e outros animais. É aceito que úlceras pépticas são causadas por um desequilíbrio entre fatores agressivos e fatores protetores da mucosa gástrica. Então, o objetivo primário deste trabalho foi verificar a correlação entre a desnutrição protéica e a formação de úlceras gástricas em ratos alimentados com baixo (6%) e regular (17%). Croton cajucara Benth (Euphorbiaceae) é uma planta usada na medicina tradicional da Amazônia no tratamento das doenças do trato gastrointestinal. Assim, nós também investigamos a ação anti-ulcerogênica de C. cajucara no tratamento de úlceras gástricas em ratos controles e desnutridos. É observado que animais desnutridos apresentam. um menor número de lesões gástricas quando comparado aos animais normais submetidos ao processo de úlcera gástrica induzida por etanol e indometacina. Isto se deve ao fato dos animais desnutridos produzirem uma maior quantidade de muco aderido a parede gástrica e de prostaglandina E2 (pGEz), quando comparado aos animais normais mesmo na ausência de droga anti-ulcerogênica. Na indução de úlcera pôr ligadura de piloro, os animais desnutridos tratados com o controle negativo 12% tween 80, mostraram um aumento significativo no volume do suco gástrico quando comparado aos animais normais. Após a administração (via intra-duodenal) do óleo essencial de sacaca, houve uma redução significativa na concentração de íons Ir do conteúdo gástrico de ambos os grupos animais. O volume do suco gástrico esteve aumentado no grupo de animais normais, entretanto em ratos desnutridos o volume do suco gástrico manteve-se constante após o tratamento com sacaca, porém permanecendo com seus valores altos. Em experimentos crônicos, onde os animais foram tratados por 14 dias com o veículo, com a droga padrão (cimetidina) e com o óleo essencial de Croton cajucara, verificou-se que os animais desnutridos apresentaram sérias lesões na mucosa gástrica quando comparado às lesões gástricas dos animais normais. Em ambos os casos (ulceração aguda e crônica), o óleo essencial de sacaca revelou-se eficiente em impedir e em cicatrizar estas lesões gástricas em ambos os grupos animais. Observou-se desta forma, que o efeito anti-ulcergênico do óleo essencial de C. cajucara se deve ao aumento de PGE2 e muco aderido à parede gástrica conferindo a citoproteção do estômago. Aliado a isto, houve um aumento do fator de crescimento epidermal da mucosa gástrica, dos níveis de somatostatina e de corticosterona; e baixos níveis de gastrina, que favoreceram a cicatrização da mucosa gástrica de ambos os grupos animais. Todos estes fatores parecem agir conjuntamente no sentido de produzir um efeito anti-ulcerogênico do óleo essencial cicatrizando a mucosa gástrica de animais normais e desnutridos. Os resultados deste trabalho confirmaram o efeito cicatrizante do óleo essencial de C. cajucara obtido previamente com ratos normais. Adicionalmente, foi possível concluir que os animais com desnutrição protéica mostraram uma melhor prevenção da mucosa gástrica frente aos agentes ulcerogênicos, devido às alterações fisiológicas encontradas em seus organismos / Abstract: It is known that the protein malnutrition can affect metabolism rates in humans, rodents and other animals. It is generally accepted that peptic ulcers are caused by a failure in the balance between gastric aggressive factors and mucosal defensive factors. Thus, the primary aim of this work was to verify the correlation between protein malnutrition and the gastric ulcer formation in rats fed diets with low (6%) or regular (17%) content of proteins. Croton cajucara Benth (Euphorbiaceae) is a specie widely used in Amazonian folk medicine for the treatment of a wide range of gastrointestinal symptoms. Thus, we also investigated the anti-ulcerogenic action of C. cajucara in the treatment of gastric ulcers in control and protein undernourished rats. It was observed that undernourished animals presented lower number of gastric injuries when compared with control animals in ethanol- and indomethacin-induced acute gastric ulcer. This may have occurred because undernourished animals produced greater amount of mucus and prostaglandin E2 (PGE2) when compared with the values obtained in control animals, even in the absence of the anti-ulcerogenic drugs. Besides, in placebo treated (12% Tween 80) undernourished rats submitted to pylorus ligature, a significant increase in gastric juice volume was observed when compared with control animals. After administration of essential oil from C. cajucara by intra-duodenal route, there was a significant reduction in the total acid content of both animal groups. The gastric juice volume was increased in the control group; however in undernourished rats, the gastric juice volume was higher before and remained high after treatment. In chronic experiments, where the animals were treated for 14 days with vehicle, standard drug (cimetidine) and with Croton cajucara essential oil, undernourished animals showed serious injuries in the gastric mucosa when compared with the gastric lesions of control animals. In acute and chronic ulceration, the essential oil was efficient in both animal groups to prevent and to heal these kinds of injuries. It was observed that C. cajucara essential oil caused citoprotection of the gastric mucosa of control and undernourished rats due to the increase of PGE2 release and gastric mucus content. It was also detected an increase of epidermal growth factor more pronounced in the gastric mucosa of control rats than malnourished rats that probably helped the healing of the gastric lesions. An increase in somatostatin and corticosterone levels and the decrease in gastrin levels were observed in both groups, control and undernourished animals.However, the latter showed high levels of somatostatin and corticosterone hormones and low gastrin levels when compared to control rats. All these factors appear to contribute with the anti-ulcerogenic effect of the essential oil preventing and healing the gastric mucosal damage of both control and undernourished animals. The results of this work confirmed healing effects previously obtained with C. cajucara essential oil in control rats. Additionally, it was possible to demonstrate that undernourished animals showed a resistance of the gastric mucosa against to ulcerogenic agents due to physiological changes found in their organisms / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Edson Rosa Pimentel / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-26T20:21:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_MarcosdosSantosde_D.pdf: 2549790 bytes, checksum: f7c5cf41c1fe21e8441475d830717187 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Vários estudos indicam que a acupuntura (AC) tem efeito anti-inflamatório (AI) sistêmico e mecanotransdutor local. Estes efeitos podem potencialmente acelerar o processo de cicatrização. Portanto, o objetivo deste estudo foi analisar o efeito de diferentes protocolos de AC nas características bioquímicas, organizacionais e ultraestruturais de tendões de ratos durante o processo de cicatrização. Ratos Wistar machos com 60 dias de idade foram divididos nos seguintes grupos: grupo não tenotomizado ou normal (N), grupo tenotomizado (T), tenotomizado e submetido à AC no ponto E-36 (E36), tenotomizado e submetido à AC no B-57 (B57), tenotomizado e submetido à AC manual no ponto E-36 e B-57 (EB) e tenotomizado e submetido à eletroacupuntura (EA) nos dois pontos citados. Os animais foram submetidos à eutanásia nos dias 7, 14 e 21 após a lesão. Em seguida, os tendões calcâneos foram coletados, processados e analisados para quantificação de proteínas não colagênicas através do método de Bradford. Para a análise organizacional, foi utilizada a quantificação da birrefringência das fibras de colágeno através da microscopia de polarização. Na analise ultraestrutural foram mensurados os diâmetros das fibrilas de colágeno e em seguida foram construídos histogramas de distribuição destes diâmetros assim como foi calculado o diâmetro da massa-média - MAD - das fibrilas de colágeno. Os resultados mostraram que o uso associado dos pontos E-36 e B-57 aumenta tanto a birrefringência das fibras de colágeno nos dias 14 e 21 após a lesão quanto o MAD nos três períodos analisados. A reorganização das fibrilas de colágeno também aumentou no dia 21 após a lesão com a aplicação dos dois pontos citados. No entanto, a aplicação da EA não promoveu aumento da birrefringência ou da reorganização das fibrilas assim como diminuiu o MAD no dia 21 após a lesão. Desta forma, concluímos que o uso da AC manual nos pontos E-36 e B-57 tem efeito no restabelecimento das propriedades estruturais e ultraestruturais do colágeno de tendões durante o processo de cicatrização. Estes resultados sugerem o fortalecimento da estrutura tendínea com consequente aumento da resistência a re-ruptura e o potencial uso da AC em protocolos de reabilitação / Abstract: Several studies indicate that acupuncture (AC) has both local mechanotransductor and systemic anti-inflammatory (AI) effects. These effects could potentially accelerate the healing process. Therefore, the aim of this study was to analyze the effect of different protocols of AC on the biochemical, organizational and ultrastructural aspects of rat tendons during the healing process. Male Wistar rats at 60 days of age were divided into the following groups: not tenotomized or normal group (N), tenotomized group (T), tenotomized and submitted to AC at ST-36 point (ST36), tenotomized and submitted to AC at BL-57 point (BL57), tenotomized and submitted to manual AC at ST-36 and BL-57 points (SB) and tenotomized and submitted to electroacupuncture (EA) on the two points mentioned. The animals were euthanized on 7th, 14th and 21th days after injury. Thereafter, the Achilles tendons were collected, processed and analyzed to quantify non-collagenic proteins using the method of Bradford. For organizational analysis, it was quantified the collagen fibers birefringence by polarizing microscopy. In the ultrastructural analysis were measured the diameters of collagen fibrils and then histograms of distribution of these diameters were built as well as mass-average diameter - MAD - of collagen fibrils was calculated. The results showed that the associated use of ST-36 and BL-57 points increases both the birefringence of collagen fibers at 14th and 21th days and the MAD at the three periods analyzed. The reorganization of collagen fibrils also increased at 21th day with the application of the two points mentioned. However, the application of EA did not increase the birefringence or the reorganization of fibrils as well as decreased the MAD of fibrils at 21th after injury. Thus, we conclude that the use of manual AC at ST-36 and BL-57 points is effective in restoring the structural and ultrastructural properties of the collagen of tendons during the healing process. These results suggest strengthening the tendon structure with consequent increased resistance to re-rupture and the potential use of AC in rehabilitation protocols / Doutorado / Anatomia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Ângela Maria Moraes, Mara Elga Medeiros Braga / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Química / Made available in DSpace on 2018-08-27T00:41:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bueno_CeciliaZorzi_D.pdf: 3611429 bytes, checksum: 9eeaf42b72e5b1a4778cab231780d7c6 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: As lesões de pele representam um grande desafio para os profissionais da saúde, sendo que os curativos mais modernos disponíveis atualmente são, em sua maioria, importados e de alto custo. Existe, assim, a necessidade de criar recursos mais acessíveis à população, os quais utilizem matérias-primas renováveis e sejam produzidos por meio de tecnologias simples e de baixo custo. A quitosana e o alginato são biopolímeros biocompatíveis, apresentam propriedades cicatrizantes e são abundantes na natureza, características estas que os tornam atrativos para a confecção de curativos de lesões de pele. A inclusão de agentes antimicrobianos, como polihexametileno biguanida (PHMB), aos curativos produzidos a partir destes biopolímeros pode levar a um melhor desempenho dos mesmos. Neste trabalho de tese, membranas densas e porosas de quitosana-alginato foram obtidas na presença de diferentes quantidades do tensoativo Pluronic F68. Os resultados obtidos mostraram que a inclusão de até 10% (m/m) de tensoativo provoca o aumento da porosidade (de 0,46 para 0,84), da espessura (de 0,08 para 0,50 mm), da rugosidade (de 1,27 para 21,20 µm), da capacidade de absorção de fluidos (de 14,22 para 21,27 g/g para NaCl a 0,9%) e de vapor d¿água (de 15,5 para 36,5%) e a diminuição da resistência à tração (de 31,1 para 1,1 MPa) e do alongamento na ruptura (de 4,0 para 2,0%) das membranas. Os materiais obtidos não se mostraram citotóxicos a fibroblastos de camundongos. O agente antimicrobiano PHMB foi incorporado às membranas por três diferentes métodos: adição à mistura polimérica, adsorção a partir de solução aquosa e impregnação mediada por CO2 supercrítico. A incorporação de PHMB por adição à mistura polimérica foi considerada como a mais satisfatória, pois não provocou alterações no aspecto e morfologia das membranas e resultou em altas eficiências de incorporação, variando entre 72 e 86 %. Observou-se também adequado controle da cinética de liberação, sendo que grande parte do antimicrobiano incorporado não foi liberada em tampão fosfato-salino (PBS), indicando alta afinidade entre o PHMB e a matriz de quitosana-alginato. As membranas apresentaram atividade antimicrobiana adequada, o que sugere que possam ser empregadas como barreira contra microrganismos comumente presentes em lesões de pele, tais como Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa / Abstract: Skin lesions represent a great challenge for health professionals, since most of the existing modern wound dressings are imported and expensive. Therefore, there is a need to create more accessible products to the public, made from renewable raw materials and processed through simple and low cost technologies. Chitosan and alginate are biocompatible biopolymers that have healing properties and are abundant in nature, which are attractive characteristics to the production of wound dressings. The incorporation of antimicrobial agents, such as polyhexamethylene biguanide (PHMB), to these dressings can lead to a better performance. In this work, dense and porous chitosan-alginate membranes were obtained in the presence of different proportions of the surfactant Pluronic F68. It was noticed that inclusion of up to 10% (w/w) Pluronic F68 caused an increase in porosity (from 0.46 to 0.84), thickness (from 0.08 to 0.50 mm), roughness (from 1.27 to 21.20 µm), fluids absorption capacity (from 14.22 to 21.27 g/g for 0.9% NaCl) and water vapor absorption capacity (from 15.5 to 36.5%) and a decrease in tensile strength (from 31.1 to 1.1 MPa) and elongation at break (from 4.0 to 2.0%) of the membranes. The obtained materials were not toxic to mouse fibroblasts. The antimicrobial agent PHMB was incorporated to the membranes through three different methods: addition to the polymeric mixture, adsorption in aqueous solution and via supercritical fluid. The addition to the polymeric mixture was considered the most promising incorporation method, since it had high yields (between 72 and 86 %) and did not cause changes in the membranes aspect and morphology. Release kinetic studies in PBS showed that most of the PHMB loaded remained in the membranes, indicating high affinity between PHMB and the polymeric matrix. The obtained membranes showed adequate antimicrobial activity, having potential applicability as barriers against microorganims commonly found in skin wounds, such as Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa / Doutorado / Engenharia Química / Doutora em Engenharia Quimica