Orientador: Jose Pedrazzoli Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-24T21:48:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Brandao_ClodomirGarcia_M.pdf: 4209082 bytes, checksum: 8e96be5381245e8bb8c9f6f4f60c8fa6 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O desenvolvimento de fibrose é um ponto fundamental na formação da cirrose hepática e sua compreensão é essencial para o entendimento da fisiopatologia da cirrose e da conseqüente hipertensão portal. Assim, o desenvolvimento de um modelo experimental adequado de fibrose hepática é útil para o entendimento das enfermidades que podem evoluir para a cirrose hepática. A colchicina tem sido usada em pacientes com cirrose hepática mas efeitos não são totalmente conhecidos. Este estudo teve como objetivo desenvolvimento da fibrose hepática pela administração de tetracloreto de carbono (CCI4) por via intragástrica e o de avaliar o efeito da administração de colchicina neste modelo. Para este estudo foram utilizados 37 coelhos machos da raça New Zealand .(2,73 :t 0,05 Kg), os quais receberam água e ração ad libitum ao longo go período de experimentação. Estes animais foram divididos em 5 grupos. Catorze dias após o começo do tratamento com fenobarbita,1 os animais começaram a receber semanalmente o CCI4 (dose inicial de 20 mg diluído em-óleo I de milho a 10 %) por via intragástrica. A dose foi ajustada de acordo com controles bioquímicos indicativos de lesão hepática (aspartato aminotransferase [AST] e alanina aminotransferase [AL T], visando-se manter tais níveis plasmáticos entre 400 e 800 UII). Amostras de sangue dos animais foram coletadas 24 h após cada administração de CCI4, para dosagem de aminotransferases (AST e AL T), bilirrubinas (total e indireta), gama glutamil transpeptidase (y-GT), proteínas e albumina. Além dos controles bioquímicos, os animais foram pesados semanalmente. Para avaliar os efeitos do tratamento com fenobarbital e CCI4 sobre o fluxo sangüíneo hepático, foram determinadas as velocidades de depuração do verde de indocianina (ICG) antes e após o final do tratamento (aproximadamente 8 mg/kg em solução salina). A colchicina foi administrada diariamente em 2 grupos de animais (a partir da 11 a semana de tratamento com CCI4 e em outro, desde o início do tratamento com CCI4). Para este trabalho foram feitos 2 grupos controles, onde um dos grupos recebeu doses diárias de fenobarbital durante todo o experimento (controle fenobarbital) e o outro grupo apenas foi tratado com ração e água ad libitum. ' Ao final do período de estudo os animais foram sedados e sacrificados com' uma injeção de ar i. v. e foram retirados 3 fragmentos de cada lobo hepático parR análise histológica. Um número maior de animais que não recebeu colchicina desenvolveu cirrose, comparado com o grupo que recebeu a droga (8/10 vs. 0/10, p<, 0.01), tendo a fibrose sido menor nos animais tratados com colchicina (p<O. 01). Coelhos com 16 - semanas de tratamento com colchicina tiver~m, no final do experimento, ICG, y-GT, bilirrubina e ganho de peso semelhantes aos dos grupos cc 1trole, ao contrário dos animais que não receberam. A baixa letalidade e o elevado número de animais que desenvolveram cirrose hepática (8/10) leva a concluir que este tipo de modelo é eficaz. o peso corporal dos animais não serve como parâmetro para o ajuste da dose de tetracloreto de carbono, pois não houve alteração do mesmo durante o tratamento com CCI4. - Para o controle do desenvolvimento da lesão hepática, apenas a determinação das aminotransferases é suficiente / Abstract: The fibroses development is a fundamental point in the formation of the hepatic cirrhosis, and its comprehension is essential for the understandíng of ~the physiopatology of the cirrhosis and the consequent portal hypertension. The development of an adapted experimental model of hepatic fibroses is useful for the study of the illnesses that may develop the hepatic cirrhosis. The colchicine has been used in patients wíth hepaticcirrhosis, but its effects are not totally known. The aim of this study was to evaluate the colchicine effects in the hepatic cirrhosis chemically deveioped and to evaiuate if the Proctr Chatamra model is suitable to apply in rabbits. Thirty seven male New Zealand rabbtís were used (2.73 :t 0.05 Kg), Group A (n= 10), Group B (n= 10), Group C (n=10) and 7 controls animais. Group A was gíven only carbon tetrachroride (CCI4) and phenobarbitone (FB), Group B received the same treatment as Group A with the addition of colchicine (100 Ilg/daily/five days a week 16 weeks) and Group C received the as Group B ,but had the colchicine treatment for a longer period of time. They were given phenrr¿A dissolved in drinking water (approximately 50 mg/day/animal) and a week j,,-. treatment (10% solution in com oil; 20 mg/animallw,eek) concomítant with PB.The CCI4 dose was adjusted 'weekly in órder to obtain serun AST and AL T levels between 400 U/I and 800 U/I. The indocianine green (lCG) pharmacokinetics were determined after injecting the ICG (8mg/Kg, i.v.) and collecting plasma samples at suitable time points for the ICG quantifcation. At the end of the experiment, animais were sacrificed, and 3 fragments of each liver sent to histology examination. A higher proportion of animais which did not receive colchicine developed cirrhosis compared to those which received the drug (8/10 vs. 0/10, p.0.01), the líver flbrosis was also reduced (p.0.01). Rabbits that had been through the 16 week treatment had at the end of experiment, ICG, y-GT, bilirrubin and weight gain similar to controls. The serum enzymes and the elimination rate of ICG (before and after 16 weeks of treatment) in the CCI4 group were: AL T: 62.6 :t 170.87 UII; AST: 39,40 :t 0.3661 mllmin/kg, respectively. The low mortality and the quantity of the animais wich developed liver cirrhosis conduce to conclude with that model is suitable. The body wight is not suitable to regulate the CCI4 doses. Only the aminotransferases measurement is necessary for control of the liver development. The colchicine reduces the development of liver fibrosis and cirrhosis in a . experimental model of chronic toxic liver damage, supporting its potential therapy of liver díseases / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Pedro Duarte Novaes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-25T05:38:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barbosa_SimonedeCassiaPortela_M.pdf: 1067591 bytes, checksum: ed07c3496d667e7d824c82f661bfea72 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A freqüência de fibroblastos ciliados foi estudada em tecidos conjuntivos, que diferem entre si pela origem e pela atividade metabólica. Utilizou-se 7 camundongos machos, pesando em média 36g, e colhidas amostras dos seguintes tecidos: gengiva, ligamento periodontal de incisivo e de molar, todos de origem ectomesenquimal e derme de origem mesodérmica. Foram contados 600 fibroblastos por tecido de cada animal, no aumento de 16.000x ao microscópio eletrônico de transmissão. Todas as células com cHios foram fotografadas e não foi encontrada nenhuma particularidade em relação a sua localização, porém os cilios examinados apresentaram um padrão 9+0 de microtúbulos o que sugere que sua função não esteja relacionada com a motilidade. Os resultados estatísticos não indicaram diferença entre a frequência de fibroblastos ciliados quando se comparou ligamento periodontal de incisivos e de molares ( p.< 0,05 ) contudo esta frequência no ligamento se apresentou maior quando comparada com a gengiva e a derme. A diferença estatística foi detectada na comparação entre gengiva e derme, sendo significativamente maior na gengiva. (p. <0,05 ). Embora a função desses cHios permaneça desconhecida, nosso estudo indicou que a freqüência de fibroblastos ciliados poderia estar relacionada à atividade metabólica do tecido que é maior no ligamento periodontal de incisivos e de molares e menor na derme, ficando a gengiva em posição intermediária / Abstract: The frequency of ciliated fibroblasts was determined in connective tissues of different embryological origin and metabolic activity. Seven male mice, weighting 36g, were used. Samples of gingiva, molar and incisor periodontal ligament and skin were fixed in glutaraldehyde, and embedded in araldite. Six hundred fibroblasts per tissue from each animal were counted at a magnification of 16.000x of the transt;nission electron microscope and every ciliated cell was photographed. The cilia showed a 9+0 microtubule pattem which indicates that they are not related to cell motility. There was no statistical difference in the freguency of ciliated fibroblasts of periodontal ligament when incisors and molars, were compared. However this frequency was higher (p.<0,05) in comparison with the one of dermis and gingiva. Statistical difference I 'was detected when gingiva and dermis were compared, being significantly higher in the gingiva (p.<0,05). Although a sensorial function has been suggested the role of this organelle in fibroblasts is unknown. Their frequency, however, could be related to the metabolic activity of the tissues, which is higher in periodontal ligament fibroblasts, lower in dermal ones, and with the gingival fibroblasts at an intermediate position / Mestrado / Histologia / Mestre em Biologia e Patologia Buco-Dental

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-03-18T21:01:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 332250.pdf: 1653346 bytes, checksum: f3fd5e334b6ef49f6768d6fec1f3a5ea (MD5) Previous issue date: 2014 / A celulose bacteriana (CB) é um polímero produzido por diversas bactérias, entre elas a bactérias do gênero Gluconacetobacter. Este polímero apresenta-se como uma rede de nanofibras com propriedades físico-químicas peculiares, o que o possibilita a ser utilizado como biomaterial em diversas áreas. Este biomaterial pode ter o seu espectro de aplicação ainda mais ampliado quando produzido com a incorporação de frações de extratos naturais. A Aloe vera (Aloe barbadensis Miller) é uma planta que apresenta propriedades terapêuticas e medicinais utilizadas há milhares de anos. Ela possui polissacarídeos em sua composição que atuam fortemente na regeneração e reparo de tecidos lesionados. O objetivo deste trabalho foi avaliar o comportamento das células de fibroblasto e queratinócito quando cultivadas na superfície mais porosa de membranas de CB pura e membranas de CB com incorporação de frações de Aloe vera (CB-Aloe), na perspectiva de se desenvolver futuramente um biomaterial que atue como substituto de pele humana. Por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) mostrou-se que a incorporação de Aloe vera nas membranas CB não alterou a estrutura da rede nanofibras de CB pura. A análise por espectroscopia de infravermelho por refletância total atenuada (FTIR-ATR) identificou diferenças referentes aos grupos amino existentes nas frações de Aloe vera, bem como a presença de anéis piranosídicos, tais como de ß-D-manose e de ß-D-glicose. Foi possível identificar que células epiteliais quando cultivadas sobre a superfície porosa das membranas de CB com incorporação de duas frações específicas de Aloe vera (CB-G e CB-T) apresentaram atividade metabólica e proliferação celular mais expressiva do que as demais membranas estudadas. A biossíntese de colágeno por fibroblastos foi significantemente aumentada nas membranas de CB-Aloe quando comparada com a CB pura. A análise morfológica por MEV de células cultivadas sobre as membranas modificadas (CB-Aloe) mostraram que células epiteliais aderiram em todas as membranas, mas só foi observada que células cultivadas em CB pura e em CB com a incorporação de uma fração específica de Aloe vera (CB-F), estavam espraiadas indicando um efeito positivo dessa fração de Aloe vera na adesão celular.<br> / Abstract : Bacterial cellulose (BC) is a polymer produced by various bacteria, including the bacterium of the Gluconacetobacter genre. It is synthesized as a network of nanofibers with particular physicochemical properties, which make it a suitable biomaterial for the use in a variety of fields. The range of application of this biomaterial can be further expanded by the incorporation of natural extracts with biological activities. Aloe vera (Aloe barbadensis Miller) is a plant with well-documented medicinal and therapeutic properties, particularly active in regeneration and repair of injured tissues, mainly due to its particular polysaccharide composition. The objective of this study was to evaluate the behavior of keratinocyte and fibroblast cells when grown on the porous surface of pure BC membranes or on BC membranes incorporated with Aloe vera fractions (BC-Aloe), in view of the development of a biomaterial that could be used as human skin substitute. Scanning Electron Microscopy (SEM) analysis showed that the incorporation of Aloe vera into the BC nonofibers did not alter the original structure of the fiber network. Attenuated total reflectance Fourier transform infrared spectroscopy (ATR-FTIR) analysis identified differences in amino groups present in the membranes with or without Aloe vera, as well as the presence of pyranoside rings, such as ß-D-mannose and ß-D-glucose specifically in the BC-Aloe membranes. Metabolic activity and cell proliferation were more expressive when epithelial cells were cultured over the porous surface of BC membranes incorporated with two specific Aloe vera fractions (BC-T and BC-G). Biosynthesis of collagen was increased in fibroblasts cultivated on BC-Aloe membranes when compared to those cultivated on pure BC membranes. Morphological SEM analysis of cells cultivated over the modified membranes showed that epithelial cells adhered to all membranes, but spreading was only observed for cells grown on pure BC or BC incorporated with one specific Aloe vera fraction (BC-F), indicating a positive effect of this Aloe vera fraction on the cellular adhesion of the biomaterial.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-Graduação em Química. / Made available in DSpace on 2013-03-04T19:24:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 304765.pdf: 17583897 bytes, checksum: e816cecab247b1b9b6a1c01841f99e6d (MD5) / Este trabalho descreve a síntese de filmes poliméricos, sua modificação e a avaliação quanto à adesão de espécies celulares. Filmes de poliestireno (PS) e poli (metacrilato de metila) (PMMA) e mistura com 1:1 de composição preparados por casting foram avaliados quanto ao crescimento e proliferação de fibroblastos L-929. Estudos envolvendo modificação da superfície destes polímeros foram desenvolvidos, com resultados promissores decorrentes da utilização de plasma frio através de descarga de barreira dielétrica (DBD) para induzir a modificação da superfície, após planejamento fatorial das condições experimentais. Alterações nas propriedades da superfície com relação às amostras não tratadas foram acompanhadas por medidas de ângulo de contato, energia de superfície, histerese, microscopia eletrônica de varredura (SEM) e SEM com espectrometria de energia dispersiva, microscopia de força atômica (AFM) e espectrometria fotoeletrônica de raios-X. Após o tratamento, excelente aderência e proliferação de células foram observadas em todos os filmes com maior proliferação celular no filme PS/PMMA 1:1. Filmes finos de zeína obtidos por spin coating foram também tratados por plasma frio com DBD. Após o tratamento, uma pequena variação de molhabilidade foi detectada, além de aumento de rugosidade. A adsorção de albumina de soro bovino na superfície dos filmes foi também avaliada. Todos os filmes apresentaram excelente adesão das células L-929 após os dois tratamentos. Resultados preliminares para filmes finos nanoestruturados formados a partir de dois copolímeros em bloco de poliestireno e poli(ácido acrílico) são também descritos. Ambos os filmes, após análise por AFM, apresentaram superfícies mais rugosas e uma significativa melhora na adesão e proliferação das células L-929, o que os torna potenciais biomateriais para aplicação biomédica. / This work describes the synthesis of polymeric films, their surface modification and an evaluation of their ability to promote adhesion of cell species. Films formed with the casting technique from poly(styrene) (PS), poly (methyl methacrylate) (PMMA) and a 1:1 mixture of both were evaluated towards the growth and proliferation of L-929 fibroblasts. Studies involving the surface modification of the polymeric films were carried out, with promising results obtained from the use of cold plasma generated by a dielectric barrier discharge (DBD), following a factorial design for optimization of the operating parameters. Changes in the surface properties of the plasma-treated films were evaluated by means of contact angle, surface energy and hysteresis measurements, scanning electron microscopy (SEM) and energy-dispersive SEM, atomic force microscopy (AFM) and X-ray photoelectronic spectrometry. Substantial proliferation of cells was observed on the surface of all plasma-treated films, with a superior performance of the PS/PMMA 1:1 film. Thin films produced from zein using the spin coating technique were also submitted to DBD-cold plasma treatment. A minor variation in the wetability of the plasma-treated films was observed, in addition to increased rugosity. The effect of adsorption of bovine serum albumin on the polymeric film surface was also evaluated. Both surface-based treatments resulted in enhanced adhesion of L-929 cells on the polymeric films. Preliminary results for nanostructured thin films formed from two block copolymers of poly(styrene) and poly(acrylic acid) are also presented. AFM analysis of the surface of both plasma-treated films evidenced increased rugosity, which was accompanied by a substantial improvement in the adhesion and proliferation of L-929 cells, turning these polymeric films into promising biomaterials.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Odontologia. / Made available in DSpace on 2012-10-21T17:39:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 202857.pdf: 952008 bytes, checksum: 3939b6964c1743c4c50c155741cf4974 (MD5) / Os objetivos foram estabelecer um protocolo preliminar de cultivo primário de fibroblastos gengivais humanos e conseqüentemente, estabelecer uma linhagem celular; avaliar a viabilidade celular e os danos que os procedimentos precedentes poderiam causar na molécula de DNA. Uma biópsia de 20mm2 de mucosa ceratinizada foi fragmentada em 15 partes menores e divididas em 5 garrafas de cultura. A proliferação celular foi verificada através de microscópio invertido. Após subconfluência 70%, as células foram tripsinizadas. Foram usadas as células da 6a passagem. A viabilidade foi determinada através do teste de exclusão do azul de Trypan. Os possíveis danos nos DNA foram avaliados pelo Ensaio do Cometa. Uma das garrafas foi tratada com peróxido de hidrogênio. A viabilidade dos grupos-teste foi maior que 90%. Os DNAs dos grupos-teste não apresentaram danos significativos (p<0,01). Foi possível, estabelecer uma linhagem de fibroblastos viáveis e sem alterações significantes no seu DNA. Os achados permitem o uso destas células em futuras pesquisas.

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-18. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:46:37Z : No. of bitstreams: 1 000846277.pdf: 2026141 bytes, checksum: 0bb21e6aa2c7922e2a387ecf5fd901d7 (MD5) / The age as well as the presence of inflammation can influence the cellular metabolism, slowing the tissue healing process. Different therapies, such as the application of growth factors and low level laser therapy (LLLT) are capable of biostimulating cells by increasing their proliferation and metabolism. The aim of this study was to evaluate: the functions of gingival fibroblasts obtained from young and elderly individuals (Study 1); the response of these cells exposed to tumor necrosis factor alpha - TNF-α (Study 2); and the effect of LLLT or epidermal growth factor - EGF on the viability and metabolism of these connective cell type (Study 3). Primary culture of gingival fibroblasts of 6 patients (3 young - Y and 3 elderly - E) were collected and cultured in complete culture medium (DMEM). In the Study 1 fibroblasts were seeded in 96-well plates in complete DMEM containing 10% of fetal bovine serum (FBS) for 24, 48 or 72 hours and subjected to evaluation of cell viability (MTT, n=36), total protein production (TP, n=36) and collagen synthesis (SR, n=36). In the Study 2, after 24-hour cell seeding, the complete DMEM was replaced by DMEM without FBS supplemented or not with TNF-α (100 ng/mL) which was kept in contact with cells for additional 24 hours. Then, the production of reactive oxygen TNF-α species (ROS, n=36), nitric oxide (NO, n=36) and synthesis of CCL5 chemokine (ELISA, n=36) were assessed. In the Study 3 fibroblasts were seeded in 24-well plates for 24 hours, and then exposed to EGF (100 μM) or submitted to low power laser irradiation (LASERTable device, InGaAsP - 780 ± 3nm; 25mW). Cell viability (Alamar Blue®, n=12), cell migration (Wound Healing, n=12), collagen synthesis (SR, n=12), and synthesis of vascular endothelial growth factor - VEGF (ELISA, n=12) were assessed 72 hours after the treatments. The data were statistical...(Complete abstract electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-08-27T14:36:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-05Bitstream added on 2014-08-27T15:57:02Z : No. of bitstreams: 1 000749985.pdf: 1413898 bytes, checksum: 7421bc33cc6d75478dcb676de29021bd (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A quimiocina C-X-X motif ligand 12 (CXCL12) e seu receptor de quimiocina 4 (CXCR4) desenvolvem um papel crítico na inflamação das vias aéreas. No entanto, os efeitos da ativação da via CXCL12/CXCR4 sobre fibroblastos pulmonares ainda são desconhecidos. Neste estudo, investigamos o efeito da via CXCL12/CXCR4 sobre a quimiocina (C-C motif) ligante 3 (CCL3) e (C-X-C motif) ligante 2 (CXCL2) e sobre os mediadores lipídicos leucotrienos B4 (LTB4) e C4 (LTC4) por fibroblastos pulmonares e a sinalização intracelular envolvida neste processo. CXCL12 foi capaz de induzir a produção de CCL3, CXCL2, LTB4 e LTC4; a produção de CCL3 não é dependente da produção de CXCL2, mas a produção de CXCL2 é dependente da produção de CCL3. A produção de LTB4 pode ser parcialmente regulada por CXCL2 e CCL3 e a produção de LTC4 é dependente da produção de CCL3 e CXCL2. Fibroblastos pulmonares constitutivamente expressam CXCR4 e a estimulação com CXCL12 induz sua expressão. Análises de Western blot mostraram que CXCL12 aumenta a expressão proteica de CXCR4 e induz a fosforilação da S339 do CXCR4. A expressão gênica constitutiva e induzida de CXCR4 foram inibidas pelo anticorpo anti-CXCL2. No entanto, o anticorpo anti-CCL3 e o inibidor farmacológico MK886 foram capazes de diminuir a expressão gênica induzida de CXCR4. Os fibroblastos pulmonares foram pré-tratados com MK886, dexametasona (Dexa) e/ou loratadina (Lor). MK886 e Lor promoveram a diminuição da produção de LTC4 e LTB4, mas não a de CCL3 e CXCL2. Dexa diminuiu níveis de CCL3, CXCL2, LTB4 e LTC4, e quando associado com Lor esta diminuição foi mais eficaz. Identificamos... / C-X-X motif ligand 12 (CXCL12) and its specific receptor Chemokine receptor 4 (CXCR4) play a critical role in airway inflammation. However, the effects of CXCL12/CXCR4 axis on pulmonary fibroblast activation are unknown. In this study, we investigated the effect of CXCL12/CXCR4 axis on chemokine (C-C motif) ligand 3 (CCL3), chemokine (C-X-C motif) ligand 2 (CXCL2), leukotrienes B4 (LTB4) and C4 (LTC4) production by pulmonary fibroblasts and the intracellular signaling involved in the process. CXCL12 induced CCL3, CXCL2, LTB4 and LTC4 production, and CCL3 production is not dependent on CXCL2; but CXCL2 production is dependent on CCL3 production. LTB4 production can be partially down-regulated by CXCL2 and CCL3 production and LTC4 production is dependent on CCL3 and CXCL2 production. Pulmonary fibroblasts constitutively expressed CXCR4, and CXCL12 stimulation up-regulated its expression. Western blot analysis showed that CXCL12 increased protein expression of CXCR4 and induced phosphorylation at S339 of CXCR4. Constitutive CXCR4 expression was decreased by anti-CCL3 antibody or MK 886. Inducible CXCR4 was inhibited by anti-CXCL2 antibody. Indeed pulmonary fibroblasts were pretreated with MK886, dexamethasone (Dexa) and loratadine (Lor). MK886 and loratadine was able to reduced LTB4 and LTC4 production but not CCL3 and CXCL2. Dexa decreased CCL3, CXCL2, LTB4 and LTC4 production, and when associated with Lor this decrease was more effective. We found that PI-3K and JNK intracellular signaling play a role in CCL3 production; p38, MEK1/2, PI-3K and JNK are involved in CXCL2 production and p38 and MEK1/2 pathways are involved in LTB4 production by...

Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-19Bitstream added on 2015-01-26T13:30:22Z : No. of bitstreams: 1 000797541_20160819.pdf: 204494 bytes, checksum: 5159b054dd0286b6cb00db354c498376 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-08-19T10:11:52Z: 000797541_20160819.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-19T10:12:27Z : No. of bitstreams: 1 000797541.pdf: 2105106 bytes, checksum: 2d3aec491ee32b71519aa0aed2eda6b0 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / É sabido que a maior consequência causada pela radiação ultravioleta gerada pela luz solar é o fotoenvelhecimento e o desenvolvimento de cânceres cutâneos por meio da ação dos radicais livres gerados na pele. A utilização, pela população, de uma formulação, de uso tópico, que auxilie na prevenção do envelhecimento precoce e de doenças causadas pelos radicais livres à pele humana teria imenso impacto, pois promoveria benefícios estéticos, que influenciariam diretamente a saúde psicológica do usuário e preveniriam a fotocarcinogênese. Este fato se torna ainda mais importante em um país tropical como o Brasil, onde a incidência de radiação UV tem se tornado cada vez maior, assim como o desenvolvimento de cânceres de pele na população. Este trabalho teve como objetivo realizar ensaios que comprovem a eficácia e a segurança de um fitocosmético contendo extrato de goiaba (Psidium guajava L.), além de descrever respostas celulares promovidas pelo tratamento com este extrato. No que diz respeito à eficácia deste produto, foram explorados os efeitos quimioprotetores, que podem ser obtidos com o emprego deste extrato e os efeitos relacionados à melhoria do aspecto da pele envelhecida. Em relação à segurança, foram realizadas análises in vivo e utilizados métodos alternativos, visando a substituição do emprego de animais. De acordo com os estudos realizados, o extrato de Psidium guajava L. é citotóxico apenas em concentração bastante superior à concentração ativa, com uma margem de segurança satisfatória. Nas concentrações sugeridas para efeito cosmético, o extrato vegetal não é mutagênico e não causou irritação dérmica, ocular e, nem mesmo comedogenicidade, quando aplicado em coelhos. Além disso, o extrato de Psidium guajava L. revelou atividade inibidora sobre os efeitos deletérios do peróxido de hidrogênio em modelos experimentais in vitro e in vivo, é capaz de estimular a ... / It is known that the major consequence caused by the ultraviolet radiation generated by sunlight is photoaging and the development of skin cancers through the action of free radicals generated on the skin. The use by the population of a topical formulation aiming to prevent the premature skin aging and diseases caused by free radicals to human skin would be of great value. It also should provide aesthetic benefits that directly influence the psychological health of the user and would prevent photocarcinogenesis. This fact becomes even more important in a tropical country like Brazil, where the incidence of UV radiation has become increasingly larger, as well as the development of skin cancers in the population. This research aimed to performe assays to prove the efficacy and safety of a phytocosmetic containing guava (Psidium guajava L.) extract, and also, describe cellular responses observed with the treatment with this extract. With regard to the efficacy of this product, the chemoprotectors effects that can be obtained with the use of this extract and the improvement on the aged skin that could be obtained with the treatment with it were explored. In relation to the assessment of the safety of this phytocosmetic, in vivo and alternative methods to the use of animals were conducted. According to the results, the Psidium guajava L. extract is cytotoxic only at concentrations higher than the active concentration of this compound, exhibiting a satisfactory margin of safety. At the concentrations suggested for the cosmetic effect, the plant extract is not mutagenic and did not cause dermal, ocular, or even comedogenicity irritation when applied to rabbits. Moreover, the extract of this fruit was able to inhibit the deleterious effects of hydrogen peroxide in in vitro and in vivo experimental models, was able to induce the fibroblasts proliferation and collagen biosynthesis and is capable of reducing hyperpigmentation produced by overexposure...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002-03-01Bitstream added on 2014-06-13T18:07:24Z : No. of bitstreams: 1 silverio_kg_me_arafo.pdf: 1644294 bytes, checksum: 5d943591d5c51a3846c75163db9a2ebb (MD5) / O objetivo do presente estudo foi avaliar in vitro o efeito do condicionamento radicular com fator de crescimento de fibroblastos básico (b-FGF) sobre a morfologia e densidade de fibroblastos. Para tal, blocos de dentina com 4 mm2 de área de superfície foram obtidos de raízes de dentes humanos extraídos devido severo envolvimento periodontal, sendo instrumentados manualmente e autoclavados. Noventa amostras foram selecionadas aleatoriamente e distribuídas em 3 grupos segundo o tratamento de superfície prévio ao condicionamento com o b-FGF: sem tratamento - controle; 50 mg/mL de cloridrato de tetraciclina e EDTA a 24%. As 30 amostras de cada um destes 3 grupos foram distribuídas em 3 subgrupos quanto à dose de b-FGF: 0 æg/mL - controle; 50 æg/mL e 125 æg/mL. Após os tratamentos, as amostras foram incubadas a 37º C e 98% de umidade com 2mL de meio Eagle, sendo 1mL com fibroblastos de linhagem contínua (células McCoy) na concentração de 1 x 105 células/mL e 1mL meio sem células, por 24 h. Após as 24 h, as amostras foram submetidas a preparo de rotina para MEV e então, fotomicrografadas nos aumentos de 500X (densidade celular) e 1000X (morfologia celular). Em seguida, as fotomicrografias foram avaliadas por 3 examinadores treinados, calibrados, independentes e cegos, os quais verificaram morfologia e densidade celular segundo os escores propostos por Gamal et al. (1998) e Jenkins et al. (1988), respectivamente. A aplicação da Análise de Regressão pela Técnica da Árvore demonstrou haver diferenças estatisticamente significantes para a densidade celular (p<0,0001) entre os grupos EDTA, tetraciclina e controle, sendo que também houve diferenças entre as doses de 0/50 æg e 125 æg de b-FGF nas amostras condicionadas com EDTA (p<0,0001) e entre as doses de 0 e 50/125 æg de b-FGF nas amostras condicionadas com tetraciclina... . / The aim of this study was to evaluate in vitro the effect of the root surface conditioning with basic fibroblast growth factor (b-FGF) about morphology and density of fibroblasts. Dentin slices of with 4 mm2 of surface area were obtained from roots of teeth extracted due to severe periodontal involvment. These were scaled and sterilized. Ninety samples were randomly distributed into 3 groups according to treatment before application of b-FGF: non-treated - control; 50mg/mL of tetracycline HCl and EDTA 24%. The thirty samples of each group were distributed into 3 subgroups according to the concentration of b-FGF: 0 æg/mL - control; 50 æg/mL and 125 æg/mL. After treatments, the samples were incubated at 37ºC and 98% humidity with 1mL of Eagle Medium with 1 x 105 cells/mL of fibroblast from continuos lineage (McCoy Cells) plus 1mL this solution without cells during 24 hours. The samples were submitted to routine preparation for SEM and photographed at 500x (density celular) and 1000x (morphology celular). Three independent and blind examiners evaluated the fibroblast`s morphology and density, according to Gamam et al. (1998) and Jenkins et al. (1998), respectively. Classification and Regression Trees test results indicated significant differences on the density (p<0,0001) among EDTA, tetracycline and control groups with also differences between concentrations of 0/50æg and 125æg of b-FGF at the samples conditioning with EDTA (p<0,0001) and between concentrations of 0 and 50/125 æg of b-FGF at the samples conditioning with tetracycline(p<0,0001). The results of this test to morphology indicated significant differences between treatment or non-treatment with b-FGF, and that concentration of 125 æg demonstrated to be more favorable than the concentration of 50 æg. In conclusion, the treatment of root surfaces with b-FGF influenced the density... (Complete abstract, click electronic address below).

Orientador: Eliana Aparecida de Rezende Duek / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecânica / Made available in DSpace on 2018-08-20T13:28:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cherutti_Giselle_M.pdf: 10018129 bytes, checksum: f1dee789d5fd5395442f06833f2c1fa7 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Um dos desafios da Engenharia Tecidual é o de promover um melhor funcionamento de órgãos e tecidos danificados por doenças ou traumas. Com o objetivo de desenvolver um dispositivo bifásico para futura regeneração dérmica e aplicação na Engenharia Tecidual e Medicina Regenerativa, cultivou-se células fibroblásticas da linhagem VERO sobre uma matriz dérmica suína acelular associada a um polímero biorreabsorvível, poli (L-ácido láctico) (PLLA), com adição de um plastificante, o trietil citrato de sódio (TCS). Para a realização da pesquisa, membranas PLLA-TCS e PLLA puro foram preparadas e caracterizadas através de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), Ensaio Dinâmico Mecânico pelo Módulo de Tração, Espectroscopia na região do Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR), Ressonância Magnética Nuclear (RMN 13C e 1H), Ângulo de Contato e Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC). Os resultados mostraram que as membranas de PLLA- TCS, tornaram-se porosas e mais hidrofílicas em relação as membranas de PLLA puro, o que aumentou sua interação com as células fibroblásticas. Após a associação das membranas de PLLA-TCS à derme suína, as amostras foram analisadas por meio de Técnicas Histológicas e Microscopia Confocal para avaliar a presença de fibras colágenas e sua organização no arcabouço. Em seguida realizou-se cultura de células fibroblásticas sobre o dispositivo bifásico após 24 horas e 2 dias de cultivo para ensaios de Viabilidade Celular, e posteriormente Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Os resultados obtidos pelos ensaios mecânicos e biológicos comprovaram que o material apresentou interação suporte-célula, principalmente devido a sua porosidade e afinidade celular apresentada pela composição estrutural da matriz dérmica, sendo atóxico às células VERO. O material atuou como substrato celular, sendo que a proliferação das células VERO foi maior em comparação com a placa de cultivo (controle), havendo infiltração celular. Concluí-se assim, que o dispositivo estudado apresenta potencial para ser utilizado como um substituto dérmico para implantes em áreas de queimaduras extensas, por ser altamente poroso, promovendo assim, maior migração, adesão e crescimento celular ao mesmo tempo em que o dispositivo é degradado pelo organismo. A capacidade de deformação apresentada pelo futuro substituto dérmico também auxilia em sua implantação, por facilitar o procedimento cirúrgico, que muitas vezes necessita distender um pouco o material para o total recobrimento da lesão; ou as movimentações naturais da pele após o implante. Além disso, o dispositivo minimiza as chances de contração do enxerto, por ser constituído por um componente dérmico / Abstract: One of the challenges of the Tissue Engineering is to promote a better functioning of organs and tissues damaged by diseases or traumas. With target for developing a biphasic device for future regeneration and dermal application in Tissue Engineering and Regenerative Medicine, fibroblasts from VERO cell line were cultivated on a porcine acellular dermal matrix associated to a bioresorbable polymer (PLLA) with the addition of a plasticizer (TCS). For this present study, PLLA-TCS membranes and pure PLLA were prepared and analyzed by means of characterization tests such as Scanning Electron Microscopy (SEM), Dynamical Mechanical Analysis (DMA), Spectroscopy of the Fourier Transform Infrared, Nuclear Magnetic Ressonance (NMR 13C e 1H), Contact Angle and Differential Scanning Calorimetry (DSC). The results showed that the PLLA-TCS, became porous and more hydrophilic compared to pure PLLA, which increased its interaction with the fibroblast cells. After the association of the PLLA-TCS to the porcine dermal matrix, the samples were analyzed by Histological Techniques and Confocal Microscopy to evaluate the presence of collagen fibers and their organization within scaffold. Afterwards, a culture of fibroblasts cell on the biphasic device was performed after 2 days and 24 hours of cultivation the Cellular Viability test was done and posteriorly Scanning Electron Microscopy (SEM). The results of the biphasic device in relation to mechanical and biological tests showed the cell-support interaction, through the analysis of viability, cell morphology and structural organization of collagen fibers and polymer structure, are nontoxic to VERO cells. The material behaves as a cell substrate where proliferation of VERO cells and their infiltration was higher compared to the cell culture plate. It can therefore be concluded that the studied device has the potential to be used as a substitute for dermal implants in areas of extensive burns, for being highly porous, thus promoting increased migration, adhesion and cell growth while the device is degraded by the body. The device deformation capacity also helps in the substitute implantation for facilitating the surgical procedure which often need to stretch the material for coverage of the injury completely or natural movements of the skin after implantation. Furthermore, the device minimizes the chances of skin graft contraction as the gadget consists of a dermal component / Mestrado / Materiais e Processos de Fabricação / Mestre em Engenharia Mecânica