Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2015-11-12T07:22:27Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4596389 bytes, checksum: eabf0bcde1fb91d59ece91b6c3ffe783 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-12T07:22:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4596389 bytes, checksum: eabf0bcde1fb91d59ece91b6c3ffe783 (MD5) Previous issue date: 2014-07-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O câncer é uma doença crônica que atinge milhares de pessoas ao redor do mundo, sendo responsável por elevadas taxas de morbidade e mortalidade. No Brasil, em 2012, foram registrados 321 mil novos casos de câncer e 190 mil óbitos em decorrência desta patologia. Por se tratar de uma doença que acomete a população mundial, o câncer produz impactos na saúde pública e na economia, pois o tumor atinge uma parcela da população economicamente ativa, podendo ser de rápido desenvolvimento e de altas taxas de metástase e de complicações físicas e psicológicas. O aumento da incidência de câncer no mundo e de suas repercussões sociais, econômicas e na saúde pública instiga a comunidade científica de vários países, inclusive do Brasil, a desenvolver pesquisas com o propósito de investigar quais compostos naturais seriam potencialmente considerados drogas terapêuticas no combate e prevenção ao câncer. Os flavonoides são compostos orgânicos, extraídos de plantas, conhecidos pelas suas propriedades farmacológicas, dentre elas, a atividade anticarcinogênica. A família da Olea europaea L. conhecida como oliveiras, possui aplicação medicinal na região onde é cultivada. Neste trabalho foi avaliada a atividade citotóxica de três flavonoides (morina, naringina, rutina) e do extrato da folha de oliveira contra às linhagens leucêmicas: U937, THP-1 e linhagens de tumores sólidos: B16F10, SK-MEL-5, H460 via ensaio colorimétrico MTT e pelo índice da lactase desidrogenase (LDH) liberada pela célula opôs 48 horas de incubação. Estes ensaios mostraram que o composto morina e o extrato de oliveira reduziram a viabilidade celular de maneira concentração dependente nas linhagens tumorais. A análise por microscopia de fluorescência mostrou que o flavonoide morina e o extrato de oliveira foram os únicos efetivos em induzir morte por apoptose de maneira tempo e concentração dependentes nas linhagens U937, THP-1, SK-MEL-5, B16F10 e H460. O mecanismo de morte celular por apoptose foi confirmado por análise do potencial de membrana mitocondrial e por caspases. Sendo assim, investigação das propriedades anticarcinogênicas e terapêuticas dos compostos morina, e do extrato de folha de oliveira como inibidores de proliferação celular e promotor de apoptose de células tumorais, bem como, interferências no metabolismo da celular sugerem a utilização destes compostos como fármaco na prevenção e tratamento do câncer. / Cancer is a chronic disease that affects thousands of people around the world, being aggressive and lethal, which justifies its high prevalence and can provide high rates of morbidity and mortality. In Brazil, in 2012, there were 321.000 new cancer cases and 190.000 deaths due to this disease. Because it is a disease that affects the world's population, produces cancer impacts on public health and the global economy, because the tumor reaches a portion of the economically active population, being of rapid development and high rates of metastasis and physical complications and psychological. The increased incidence of cancer in the world and its social, economic and public health encourages the scientific community in several countries, including Brazil, to develop research in order to investigate natural compounds which would be considered potentially therapeutic drugs to combat cancer. Flavonóids are organic compounds extracted from plants, known for their pharmacological properties, among them the anticarcinogenic activity. The family of Olea europaea L. known as olive, has medical applications in the region where it is grown. In this study, we evaluated the cytotoxic activity of three flavonoids (morin, naringin, rutin) and extract of olive leaf front of leukemic lines: U937, THP-1 and strains of solid tumors: B16F10, SK-MEL-5, H460 via MTT colorimetric assay and the index of lactase dehydrogenase (LDH) released by the cell objected 48 hours of incubation. These tests showed that the compound morin and olive extract decreased the cell viability of concentration- dependent manner in tumor cell lines. Analysis by fluorescence microscopy showed that the flavonoid extract of olive and morin were the only effective in inducing apoptotic death of time and concentration dependent manner the lines U937, THP-1 and SK-MEL-5. The mechanism of cell death by apoptosis was confirmed by analysis of mitochondrial membrane potential and caspases. Thus, research and therapeutic anticarcinogenic properties of the compounds morin, and olive leaf extract as inhibitors of cell proliferation and a promoter of tumor cell apoptosis, as well as interference in cellular metabolism suggest the use of these compounds as a medicine for the prevention and cancer treatment.

Orientador: Filipe Pereira Giardini Bonfim / Banca: Nathalia de Souza Parreiras / Banca: Jordany de Oliveira Gomes / Resumo: O manejo cultural de plantas medicinais é fator que influencia fortemente na síntese de metabólitos secundários, sendo a adubação fundamental para alcançar boa produtividade e teores satisfatórios de compostos bioativos. Dessa forma, o objetivo do estudo foi avaliar a produção de capítulos florais, compostos fenólicos totais, flavonoides totais, bem como o crescimento de calêndula (Calendula officinalis L.) submetida a tempos de incorporação de torta de mamona em diferentes épocas de cultivo. O trabalho foi divido em dois capítulos, no primeiro avaliou-se a massa fresca e seca dos capítulos florais, número de capítulos florais, teor de compostos fenólicos e de flavonoides de capítulos florais em três tempos de incorporação de torta mamona (28 e 14 dias antes do transplantio e no dia do transplantio) associados a quatro épocas de cultivo. A análise dos dados revelou que a produção de material vegetal foi influenciada tanto pelo tempo de incorporação da torta de mamona quanto pela época de cultivo, apresentando interação entre os fatores. Na época de cultivo 1 médias inferiores foram verificadas com a incorporação 0 DAT. Menores médias foram encontradas também com incorporação 28 DAT na época de cultivo 3. Nas épocas de cultivo 2 e 4 não houve diferença estatística entre os tempos de incorporação, entretanto a época de cultivo 2 apresentou valores inferiores de produção de material vegetal quando comparada às demais épocas. Deste modo, não é indicado o cultivo em condições clim... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The cultural management of medicinal plants is a factor that strongly influences the synthesis of secondary metabolites, with the fertilization being fundamental to achieve good productivity and satisfactory levels of bioactive compounds. Thus, the objective of the study was to evaluate the production of floral chapters, total phenolic compounds, total flavonoids, as well as the growth of calendula (Calendula officinalis L.) submitted to times of incorporation of castor bean cake at different growing seasons. The work was divided in two chapters, in the first one was evaluated the fresh and dry mass of the floral chapters, number of floral chapters, content of phenolic compounds and flavonoids of floral chapters in three times of incorporation of castor bean cake (28 and 14 days before transplanting and on the day of transplanting) associated with four growing seasons. The data analysis has revealed that the production of plant material was influenced both by the incorporation timeof the castor bean cake and the growing season, showing interaction between the factors. At the time of cultivation 1 lower means were verified with the 0 DAT incorporation. Minor means were also found with 28 DAT incorporation at the time of cultivation 3. In the growing seasons 2 and 4 there was no statistical difference between the incorporation times, however the crop season 2 presented lower values of plant material compared to the other. Thus, cultivation is not indicated in climatic conditions similar to those of the growing season 2 (high rainfall and high temperatures) due to the low productivity of inflorescences. The amount of phenolic compounds did not present significant differences depending on the treatments. Lower mean values in the flavonoid amount were observed with the incorporation of 28 days before the transplanting in the growing season 4. In Chapter 2, the influence of three incorporation ... / Mestre

Orientador: Marinônio Lopes Cornélio / Banca: Hamilton Cabral / Banca: Marcelo Andrés Fossey / Resumo: Os flavonóides são uma grande classe de polifenóis ocorrendo de forma natural amplamente distribuídos nas plantas, essas moléculas exibem algumas atividades farmacológicas importantes como anti-inflamatória, antioxidante, anticancerígena e antibacteriana. A interação entre os flavonóides Rutina (Ru) e Guaijaverina (Gua) e a Albumina do Soro Humano (HSA) em pH 7,0 fisiológico foi investigado usando a técnica de espectroscopia de fluorescência de estado estacionário, cálculo ab initio e de modelagem molecular. A partir da supressão de fluorescência da HSA pelos flavonóides, a constante de supressão de Stern-Volmer ( SVK ) e sua forma modificada ( aK ) foram calculadas em 298, 303 e 308 K, como também os parâmetros termodinâmicos correspondentes H, G e S, para cada flavonóide. A análise do equilíbrio de ligação foi utilizada para determinar os valores do número de sítios de ligação ( n ) e a constante de ligação ( bK ) para a Rutina e a Guaijaverina em 298, 303 e 308 K. A distância média entre o doador (HSA-214Trp ) e o aceitador (Ru e Gua) foi estimada de acordo com a teoria de transferência de energia ressonante fluorescente. A otimização geométrica dos flavonóides Rutina e Guaijaverina foi realizada nos seus estados fundamentais usando o funcional DFT/B3LYP ab initio com um conjunto de bases 6-31G(d,p) utilizado nos cálculos. O cálculo de modelagem molecular indica que os flavonóides se localizam no sítio I da HSA, dentro do bolso hidrofóbico do subdomínio IIA. Os resultados teóricos obtidos pela modelagem molecular corroboram com os dados de espectroscopia de fluorescência / Abstract: Flavonoids are a large class of naturally occurring polyphenols widely distributed in plants, these molecules exhibit some important pharmacological activities like anti-inflammatory, antioxidant, anticancer, and antibacterial. The interaction between Rutina and Guaijaverin flavonoids and Human Serum Albumin (HSA) at physiological pH 7.0 was investigated by using the technique of fluorescence spectroscopy, ab initio and molecular modeling calculation. From the fluorescence quenching of the HSA by flavonoids, the Stern-Volmer quenching constant ( SVK ) and its modified form ( aK ) were calculated at 298, 303 and K308, as well as the corresponding thermodynamic parameters H, G and S, for each flavonoid. Analysis of binding equilibria was utilized to determine the number of binding sites ( n ) and binding constants ( bK ) values for Rutin and Guaijaverin at 298, 303 and K308 . The average distance between donor (HSA-214Trp ) e acceptor (Ru and Gua) was estimated according to the theory of fluorescence resonance energy transfer. The geometry optimization of Rutin and Guaijaverin flavonoids was performed in its ground state by using ab initio DFT/B3LYP functional with a 6-31G(d,p) basis set applied in calculations. Molecular modeling calculation indicated that the flavonoids are located in site I of HSA, within the hydrophobic pocket of the subdomain IIA. The theoretical results obtained by molecular modeling are corroborated by the fluorescence spectroscopy data / Mestre

Resumo: Avaliou-se o efeito do extrato de própolis na redução da verminose e sobre os parâmetros hematológicos e bioquímicos de 18 cordeiros Ile de France (nove machos não-castrados e nove fêmeas) dos 5 aos 15 kg de peso corporal, no desmame. Os animais foram distribuídos em três tratamentos, constituídos por dietas isoprotéicas e isoenergéticas, com adição ao concentrado de 0, 15 e 30 mg de extrato de própolis a 11%/kg de peso corporal . O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado em esquema de parcela subdividida no tempo. Observou -se que a contagem de ovos por grama de fezes foi influenciada pelos diferentes tratament os. Nos cordeiros estudados, a ad ição de 30 mg de extrato de própolis foi mais efetiva em reduzir o número de ovos tipo Stron gylida por grama de fezes, do que a de 15 mg e a que não continha o extrato, indicando uma possível redução na ovoposição dos endoparasitos. As contagens globais de hemácias, neutrófilos bastonetes e monócitos, taxa de hemoglobina e o percentual de hematócrito apresentaram efeito para interação entre os tratamentos e as datas de observação. Não houve diferenças para as contagens de leucócitos, neutrófilos segmentados e linfócitos, já os eosinófilos variaram dentro do período de coleta. Em relação aos parâmetros bioquímicos analisados, o extrato de própolis não afetou as concentrações séricas de uréia, creatinina, albumina, bilirrubina direta e indireta, e plasmática de glicose. Já os níveis séricos d e colesterol, proteínas totais e bilirrubina total diferiram entre os tratamentos. Com base nos resultados, concluí-se que a adição de extrato de própolis às rações dos cordeiros não provocou alterações importantes nos parâmetros hematológicos e bioquímicos, que indicassem reações adversas à sua administração, além de ser uma possível alternativa no controle da verminose em cordeiros. / Abstract: The effect of the propolis extract was evaluated in the reduction of the nematodes and on the hematological and bioch emical parameters of 18 lambs Ile of France (nine no-castrated males and nine females) of the 5 to the 15 kg of corporal weight, in it weans them. The animals were distributed in three treatments, constituted by protein and energy concentration diets, with addition to the concentrate of 0, 15 and 30 mg of propolis extract to 11%/kg of corporal weight. The experimental delineation was entirely occurred in portion outline subdivided in the time. It was observed that the counting of eggs for gram of feces was influenced by the different treatments. In the studied lambs, the addition of 30 mg of extract of propolis was more effective in reducing the number of eggs type Strongylida for gram of feces, than the one of 15 mg and the one that didn't contain the extra ct, indicating a possible reduction in the eggs of the endoparasites. The global countings of the red cells, neutrophiles and monocytes, hemoglobin tax and the percentile of hematocrits presented effect for interaction among the treatments and the dates fo r observation. There were not differences for the leucocytes countings, segmented neutrophiles and lymphocytes, whereas the eosinophiles varied inside of the collection period. In relation to the analyzed biochemical parameters, the extract of propolis did n't affect the serum urea, creatinine, albumin, direct and indirect, and plasmatic bilirubin concentration of glucose. The serum levels of cholesterol, total proteins and total bilirubin differed among the treatments. On base in the results, I was ended th at the addition of extract of propolis to the rations of the lambs didn't provoke important alterations in the hematological and biochemical parameters, that they indicated adverse reactions to his/her administration, besides being a possible alternative in the control of the nematodes in lambs. / Orientador: Americo Garcia da Silva Sobrinho / Coorientador: Áureo Evangelista Santana / Banca: Adjair Antonio do Nascimento / Banca: Lucimar Pontara Peres de Moura / Mestre

Orientador: Lúcia Regina Ribeiro / Coorientador: Mário Sérgio Mantovani / Banca: Maria Izabel Camargo Mathias / Banca: Edson Luis Maistro / Banca: Veronica Elisa Pimenta Vicentini / Banca: Denise Crispim Tavares / Resumo: Há um interesse crescente na investigação de substâncias de origem natural como os flavonóides, devido ao grande número de evidências dos benefícios que eles proporcionam para a saúde, principalmente reduzindo o desenvolvimento de doenças crônicas. Nesse contexto, a rutina é um flavonóide que tem sido bem caracterizado na literatura por apresentar uma variedade de atividades farmacológicas incluindo propriedades antiinflamatória, antialérgica, antimutagênica, imunomoduladora e hepatoprotetora. Estes efeitos protetores atribuídos a rutina estão relacionados, em grande parte, à sua propriedade antioxidante direta, no entanto, as vias moleculares e os mecanismos de ação desses processos são pouco conhecidos. Dessa forma, o objetivo do presente trabalho foi investigar os efeitos citotóxicos, genotóxicos e protetores do flavonóide rutina em concentrações fisiológicas relevantes in vtiro. Para isso, foram utilizadas quatro linhagens de células tumorais: HTC (hepatoma de Rattus norvegicus); HepG2 (hepatoma humano); HT-29 (adenocarcinoma de cólon humano) e 786-O (carcinoma renal humano). Os resultados obtidos com as células HTC mostraram que a concentração de 810 uM de rutina não foi citóxica, apresentou efeito genotóxico e não alterou a expressão dos genes GSTa2 e p38, relacionados ao metabolismo de drogas e controle do ciclo celular, respectivamente. Além disso, a análise dos espectros de Ressonância Magnética Nuclear (RMN H1) dos metábolitos das células expostas a concentração genotóxica da rutina (810uM), revelou menores níveis de fosfocolina, glicerofosfocolina, creatina, lactato, acetato e glutationa. A análise dos resultados das linhagens HepG2 e HT-29 revelou que 100 μM de rutina foi citotóxica e reduziu a expressão e a atividade das principais enzimas antioxidantes endógenas: superóxido dismutase... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: There is growing interest in the investigation of naturally occurring substances such as flavonoids, due to the large volume of evidence of the benefits they provide for health, mainly by reducing the development of chronic diseases. In this context, rutin is a flavonoid that has been well characterized in the literature by presenting a variety of pharmacological activities including antiinflammatory, antiallergic, antimutagenic, immunomodulating and hepatoprotective. These protective effects attributed to rutin are related in large part to their direct antioxidant properties, however, the molecular pathways and mechanisms of action of these processes are poorly understood. Thus, the objective of this study was to investigate the cytotoxic, genotoxic and protective flavonoid rutin in the relevant physiological concentrations in vtiro. Therefore, it was using four different strains: HTC (Rattus norvegicus hepatocellular); HepG2 (Human carcinoma), HT-29 (human colon adenocarcinoma) and 786- O (human kidney carcinoma). The results obtained with HTC cells showed that the concentration of 810 UM genotoxic effect of rutin showed no changes in gene expression GSTa2 and p38, related to drug metabolism and cell cycle control, respectively. In addition, NMR analysis of cells exposed to the genotoxic concentration rutin (810 UM) revealed lower levels of phosphocholine, glicerphosphocholine, creatine, lactate, acetate and glutathione. The results of the lines HepG2 and HT-29 revealed that 100 UM of rutin was cytotoxic and reduced the expression and activity of the major endogenous antioxidant enzymes: superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx) and glutathione reductase (Gr). On the other hand, 10 UM of rutin did not alter the viability and kinetics of cell proliferation, significantly increased the... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Ian Castro-Gamboa / Banca: Luiz Alberto Beraldo de Moraes / Banca: Jairo Kenupp Bastos / Banca: Daniel Rinaldo / Banca: Emerson Ferreira Queiroz / Resumo: A abordagem reducionista na busca por substâncias bioativas em produtos naturais nem sempre é capaz de compreender em sua totalidade a dinâmica envolvida nas respostas farmacológicas de matrizes complexas como extratos vegetais. Inserido neste paradigma, este trabalho visou ao desenvolvimento de métodos e abordagens racionais que permitissem o entendimento das relações moleculares em produtos naturais bioativos. Para tanto, espécies vegetais da família Chrysobalanaceae com potencial citotóxico, depositadas na extratoteca do NuBBE, foram os objetos de estudo na aplicação de metodologias para a determinação de sua composição metabólica e para a avaliação do potencial citotóxico. Os extratos hidroalcoólicos de Couepia grandiflora, Hirtella hebeclada, Licania hoehnei, Licania kunthiana, Licania huminis e Parinari excelsa foram analisados por CG-EM, CLAE-DAD-EM/EM e CLAE-autoEM/EM para a identificação in situ de sua composição metabólica, através de comparação dos dados espectrais a uma base de dados contendo valores de massas de alta resolução e espectros de UV de todos os metabólitos secundários já relatados para a família Chrysobalanaceae. O uso de ferramentas de análise multivariada, como a deconvolução empírica proposta pelo software AMDIS e a extração espectral desenvolvidas pelos algoritmos RAMSY e MCR-ALS, assistiram à desreplicação ao extrair os espectros dos compostos, mesmo em baixa resolução cromatográfica. A desreplicação das espécies de Chrysobalanaceae permitiu a detecção in situ de metabólitos primários (aminoácidos, ácidos e açúcares) e secundários (flavonoides-O-glicosilados e polímeros de proantocianidinas). Adicionalmente ao estudo de determinação metabólica das matrizes vegetais, realizaram-se ensaios de atividade citotóxica. Resultados preliminares da bioatividade ante diferentes linhagens de Saccharomyces cereviceae, obtidos... / Abstract: The reductionist approach for the search of bioactive compounds in natural products is not always being able to understand the complete dynamics involved in the pharmacological responses of complex matrices such as plant extracts. Based on this paradigm, this study aimed to develop rational methods approaches to runderstand the molecular relationships present in bioactive natural products. Chrysobalanaceae plant species with cytotoxic potential, deposited NuBBE's bank of extracts, were the objects of study in the application of methodologies for defining the metabolic composition and evaluate their cytotoxic potential. Couepia grandiflora, Hirtella hebeclada, Licania hoehnei, Licania kunthiana, Licania huminis and Parinari excelsa ethanol extracts were analyzed by GC-MS, HPLC-DAD-MS/MS and HPLC-autoMS/MS for in situ metabolic identification based on spectral comparison with a high resolution mass spectra and UV spectral database developed using previously reported data for Chrysobalanaceae. The use of multivariate analysis tools, the empirical deconvolution software AMDIS and the spectral extraction algorithms RAMSY and MCR-ALS assisted the dereplication by extracting spectral data for "pure" compounds even at low chromatographic resolution. The dereplication of Chrysobalanaceae species allowed the in situ detection of primary metabolites (amino acids, and sugars) and secondary (O-glycosylated-flavonoids and proanthocyanidins polymers). In addition to the metabolic determination of Chrysobalanaceae extracts, were performed cytotoxicity bioassays. Preliminary results of cytotoxicity against Saccharomyces cereviceae, carried out during the construction of the bank of extracts, indicated cytotoxic potential, especially for Hirtella hebeclada and Parinari excelsa. However, the cytotoxic assay against different tumor cell lines showed that the extracts were not active, which may be related to which may be... / Doutor

A espécie Litchi chinensis Sonn., popularmente conhecida como lichieira, é originária da China e tem aplicações medicinais em muitos países, em especial pela medicina tradicional chinesa. O objetivo deste trabalho foi avaliar química e biologicamente o extrato de folhas e frações desta espécie. Foi preparado o extrato hidroetanólico das folhas e, a partir da partição líquido-líquido, foram obtidas as frações hexânica, acetato de etila, butanólica e aquosa. Foi utilizada a técnica de espectrometria de massas ESI-IT-MSn para traçar o perfil do extrato e das frações. Procedeu-se à quantificação dos teores de fenóis totais, de flavonoides totais, do poder sequestrante do radical DPPH e do poder redutor do extrato de folhas e frações. Além disso, foram avaliadas também as seguintes atividades biológicas in vitro: antimicrobiana para bactérias e fungos (ensaio da difusão em ágar e concentração inibitória mínima), leishmanicida e citotoxicidade. O extrato de folhas e frações apresentaram compostos fenólicos como principais constituintes químicos, tais como flavonoides (agliconas e heterosídeos) e taninos condensados. Os resultados da determinação dos fenólicos totais e flavonoides demonstraram que existe uma maior concentração destes compostos na fração acetato de etila em relação ao extrato de folhas e às outras frações e a avaliação do poder sequestrante de radicais DPPH e do poder redutor demonstra que esta fração também apresentou maior atividade antioxidante in vitro em comparação ao extrato de folhas e às outras frações. Assim, evidencia-se a possível correlação entre estes compostos e a atividade antioxidante. O extrato de folhas de L. chinensis e frações testados neste trabalho apresentaram atividade antimicrobiana contra as seguintes bactérias gram-positivas: Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Micrococcus luteus, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus e frente à bactéria gram-negativa Proteus mirabilis. O extrato de folhas de L. chinensis e frações não apresentaram atividade contra L. amazonensis até a concentração testada de 40 µg/mL, nem tampouco apresentaram toxicidade aos macrófagos murinos até a concentração testada (160 µg/mL). A fração acetato de etila (FrAcOEt) do extrato de folhas apresentou os melhores resultados quanto ao teor de fenóis totais, flavonoides totais, a melhor atividade antioxidante e os menores valores de concentração inibitória mínima, evidenciando assim a viabilidade desta fração do extrato de folhas como fonte potencial de compostos bioativos. / The species Litchi chinensis Sonn., popularly known as litchi, originated in China and has medicinal applications in many countries, particularly in traditional chinese medicine. The aim of this study was to evaluate leaf extract and fractions of this species both chemically and biologically. The hydroethanolic leaf extract was prepared, and from the liquid-liquid partition, the fractions hexane, ethyl acetate, butanol and aqueous acetate were obtained. The technique of mass spectrometry ESI -IT-MSn was used to determine the profile the extract and fractions. The quantification of total phenolic content, total flavonoid, the scavenging power of DPPH radical and the reducing power of leaf extracts and fractions was carried out. In addition, the following in vitro biological activities were also evaluated: antimicrobial for bacteria and fungi (agar diffusion method and minimum inhibitory concentration), leishmanicidal and cytotoxicity. The leaf extract and fractions showed phenolic compounds as major chemical constituents, such as flavonoids (aglycones and glycosides) and condensed tannins. The results of the determination of total phenolics and flavonoids have shown that there is a higher concentration of these compounds in the ethyl acetate fraction compared to the leaf extract and other fractions and evaluation of scavenging power of DPPH radical and reducing power demonstrates that this fraction also showed higher antioxidant activity in vitro compared to the leaf extract and other fractions. Thus, there is evidence of a possible correlation between these compounds and antioxidant activity. The leaf extract of L. chinensis and fractions tested in this work had the following antimicrobial activity against gram-positive bacteria: Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Micrococcus luteus, Enterococcus faecalis, and Staphylococcus aureus and against the gram-negative bacteria Proteus mirabilis. The leaf extract of L. chinensis and fractions showed no activity against L. amazonensis tested up to a concentration of 40 mg/mL, nor were toxic to murine macrophages in the concentration tested (160 mg/mL). The ethyl acetate fraction (FrAcOEt) of leaf extracts showed the best results on the content of total phenolics, total flavonoids, the best antioxidant activity and the lowest values of minimum inhibitory concentration, thus demonstrating the viability of this fraction of the leaf extract as a potential source of bioactive compounds.

As plantas medicinais correspondem às mais antigas estratégias empregadas pelo homem no tratamento de enfermidades de todos os tipos. Devido à grande diversidade vegetal com potencial terapêutico, ao histórico e à cultura do povo brasileiro, plantas com potencial antioxidante, antidiabético, antimicrobiano e leishmanicida têm sido alvo de estudo por uma gama de pesquisadores. Com base nessas informações, a espécie vegetal Eugenia florida DC. é uma candidata promissora para tais estudos. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivos identificar e/ou determinar os compostos químicos presentes no extrato hidroetanólico 70% (v/v) e nos macerados em metanol, acetato de etila, acetona e hexano das folhas da espécie em questão, bem como a avaliação das atividades antirradicalar, antimicrobiana, leishmanicida e antidiabética destes extratos. Inicialmente, fez-se uma triagem fitoquímica preliminar, por meio de cromatografia em camada delgada nos extratos secos, que permitiram a detecção de compostos como flavonoides, taninos, ácidos fenólicos, saponinas e triterpenos. Posteriormente, os extratos foram analisados em espectrômetro de massas, no modo negativo, o que possibilitou a identificação de alguns constituintes químicos da classe dos fenóis, dos terpenoides e das saponinas, baseando-se na massa molecular e nos padrões de fragmentação de algumas das moléculas. As análises químicas quantitativas demonstraram que os extratos hidroetanólico (EB) e o macerado em acetato de etila (M-EtOAc) foram os que apresentaram os maiores teores de compostos fenólicos, enquanto que EB e o macerado em metanol (M-MeOH) foram os que demonstraram conter a maior quantidade de flavonoides e taninos. Na determinação da atividade antirradicalar, o valor de CE50 para EB apresentou-se bem próximo ao obtido com o padrão de quercetina, indicando uma excelente atividade. Os macerados apresentaram atividade antirradicalar bem menor. Nas análises de atividade antimicrobiana, o M-MeOH foi o que se mostrou mais ativo contra as leveduras testadas, mas todos eles foram pouco efetivos para as bactérias usadas. Nenhum dos extratos foi efetivo para inibir o crescimento das formas promastigotas de Leishmania amazonensis utilizadas no teste. Na avaliação dos parâmetros bioquímicos de ratos diabéticos tratados com EB, observaram-se diminuições significativas nos níveis séricos de glicose, frutosamina e triglicerídeos, bem como o aumento dos níveis de colesterol HDL. A administração do EB não apresentou efeitos sobre a função renal, na atividade de AST e ALT e nos demais parâmetros do perfil lipídico. Porém, ocorreu melhora nos danos hepáticos e renais nos animais diabéticos tratados, através da redução do malondialdeído (MDA). Dessa forma, concluiu-se que a espécie E. florida DC. apresenta um potencial biológico interessante, devido, principalmente, aos seus metabólitos secundários bioativos, que demonstraram promissora atividade sobre os parâmetros bioquímicos em modelos de ratos diabéticos. / The medicinal plants correspond to the earliest strategies employed by man in the treatment of diseases of all types. Due to the great plant diversity with therapeutic potential, the history and culture of the Brazilian people, plants with potential antioxidant, antidiabetic, antimicrobial and leishmanicidal have been the study by a range of researchers. Based on this information, the plant species Eugenia florida DC. is a promising candidate for such studies. Thus, this study aimed to identify and/or determine the chemical compounds present in hydroethanolic extract 70% (v/v) and macerated in methanol, ethyl acetate, acetone and hexane of species leaves in question, and evaluating the antiradical, antimicrobial, antidiabetic and leishmanicidal activities. Initially, there was a preliminary phytochemical screening by means of thin layer chromatography in dry extracts, which allowed the detection of compounds such as flavonoids, tannins, phenolic acids, terpenoids and saponins. Subsequently, the extracts were analyzed in a mass spectrometer in negative mode, which allowed the identification of some chemical constituents of phenolics, terpenoids and saponins, based on the molecular weight and fragmentation mechanisms of some of the molecules. Quantitative chemical analysis showed that hydroethanolic extracts (EB) and macerated in ethyl acetate (M-EtOAc) were those with the highest levels of phenolic compounds, while EB and macerated in methanol (M-MeOH) were the demonstrated that contain the greater amount of flavonoids and tannins. In determining the antiradical activity, the EC50 value for EB presented very close to that obtained with standard quercetin, indicating an excellent activity. The macerated showed much lower antiradical activity. In the analysis of antimicrobial activity, the M-MeOH was more active against the yeast tested, but they were ineffective for bacteria used. None of the extracts was effective to inhibit the growth of promastigotes of Leishmania amazonensis used in the test. In evaluating the biochemical parameters of diabetic rats treated with EB, there were significant decreases in serum glucose, fructosamine and triglyceride levels and increasing HDL cholesterol levels. EB's administration has had no effect on renal function, in AST and ALT activity and other parameters of lipid profile. However, there was an upgrade in liver and kidney damage in diabetic animals treated through reduction of malondialdehyde (MDA). Thus, it was concluded that the species E. florida DC. presents an interesting biological potential, mainly due to its bioactive secondary metabolites, which have demonstrated promising activity on biochemical parameters in models of diabetic rats. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

A exposição da gestante a diversos fatores ambientais pode interferir drasticamente na programação metabólica do feto, podendo aumentar o risco de desenvolvimento de doenças na vida adulta, em casos como da exposição ao estresse ou restrição calórica. Por outro lado, pode resultar em uma modulação positiva, gerando uma criança mais preparada contra os possíveis insultos sofridos durante a vida, como ocorre através da prática de exercício físico durante a gestação. Considerando que a suplementação com antioxidantes tem demonstrado impedir a sinalização celular e o estabelecimento de adaptações metabólicas quando aliado ao exercício físico, nesse estudo nós avaliamos parâmetros de metabolismo energético e homeostase redox no encéfalo da prole submetida ao exercício físico materno, aliado ou não à suplementação com naringenina. Ratas Wistar adultas foram divididas em quatro grupos: (1) sedentário, (2) sedentário suplementado com naringenina, (3) exercício de natação, e (4) exercício de natação suplementado com naringenina. Os grupos 3 e 4 praticaram natação 30 minutos ao dia, 5 dias por semana, durante 4 semanas (incluindo uma semana de adaptação antes do acasalamento), enquanto os grupos 1 e 2 foram apenas submersos na água. A suplementação com naringenina foi realizada uma vez ao dia, na dose de 50 mg/kg, durante toda a prenhez, imediatamente antes do exercício físico. A prole foi eutanasiada aos 7 dias de vida, quando cerebelo, córtex parietal e hipocampo foram dissecados para as análises bioquímicas. Nossos resultados demonstraram que tanto a suplementação com naringenina quanto a prática de exercício materno causaram um aumento nas defesas antioxidantes da prole, e também um aumento na atividade da cadeia transportadora de elétrons, uma indicação de biogênese mitocondrial. A suplementação com naringenina inibiu a atividade das desidrogenases do ciclo do ácido cítrico, provavelmente interferindo no sítio de ligação do NAD+. Quando os tratamentos foram aliados, demonstrou-se a abolição dos efeitos isolados em vários parâmetros, avaliados no encéfalo dos filhotes. Também verificamos que a estrutura cerebral mais suscetível aos efeitos da naringenina e do exercício materno é o cerebelo. Concluímos que as intervenções utilizadas, suplementação com naringenina e exercício gestacional, causaram relevantes modulações metabólicas no encéfalo da prole, sugerindo cautela nas intervenções durante a gestação. / Pregnant woman's exposure to various environmental factors dramatically interferes in the fetus metabolic programming, increasing the risk for diseases in adulthood, in cases such as exposure to stress or calorie restriction. On the other hand, a positive modulation also is possible, able to prevent future insults, as occurs through physical exercise during pregnancy. Whereas antioxidant supplementation has been shown to prevent the adaptive signaling pathways when combined with exercise, in this study we evaluated some parameters of energy metabolism and redox homeostasis in the brain of the offspring submitted to maternal exercise, ally or not to naringenin supplementation. Female adult Wistar rats were divided into four groups: (1) sedentary, (2) sedentary supplemented with naringenin, (3) swimming exercise, and (4) swimming exercise supplemented with naringenin. Groups 3 and 4 practiced swimming for 30 minutes a day, 5 days a week for 4 weeks (including one week of adaptation prior to mating); while groups 1 and 2 were just submerged in the water. Supplementation with naringenin was performed daily immediately before exercise, at a dose of 50 mg/kg, throughout pregnancy. The offspring was euthanized at 7 days of life when cerebellum, hippocampus, and parietal cortex were dissected for biochemical analysis. Our results demonstrated that both strategies, naringenin supplementation and maternal exercise training, increased the antioxidant defenses in offspring’s brain, as well as the electron transport chain activity, an indication of mitochondrial biogenesis. Naringenin supplementation inhibited the activity of citric acid cycle’s dehydrogenases, probably by interfering with the NAD+ binding site. When the treatments were allies, it proved to abolish the separate effects on various parameters evaluated in puppies. It was also found that the brain structure more susceptible to the effects of naringenin and maternal exercise is the cerebellum. We concluded that the interventions used, naringenin supplementation and gestational exercise, bring substantial metabolic modulations in the offspring’s brain, suggesting caution in interventions during pregnancy.

Orientador: Cristiane Duque / Banca: Ana Cláudia Okamoto / Banca: João Eduardo Gomes Filho / Banca: Thaís Marchini de Oliveira / Banca: Vivien Thiemy Sakai / Resumo: O tratamento endodôntico de dentes permanentes jovens representa um grande desafio clínico devido a presença de paredes dentinárias finas, divergentes ou paralelas e ápice aberto, o que dificulta a desinfecção e a execução dos procedimentos convencionais. Terapias de regeneração endodôntica envolvem o uso de materiais capazes de promover uma desinfecção eficaz sem causar citotoxicidade, além de induzir a diferenciação de células-tronco ou bioestimular células remanescentes do tecido pulpar mesmo após a injúria. Nesse contexto, os flavonoides, polifenóis presentes em frutas e vegetais, poderiam ser agentes interessantes para o tratamento endodôntico de dentes imaturos devido a sua amplitude terapêutica. Dessa forma, o objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito antimicrobiano, citotóxico e indutor de mineralização de flavonoides com finalidade de aplicação endodôntica. Este trabalho de tese foi dividido em três capítulos. O capítulo 1 avaliou a toxicidade dos flavonoides taxifolina, crisina, pinocembrina e galangina sobre fibroblastos pelo ensaio de MTT, a atividade antimicrobiana pela determinação da concentração inibitória e bactericida mínima, e a ação antibiofilme do flavonoide com melhor efeito antimicrobiano, por meio de ensaios em placas de poliestireno e em dentina radicular bovina por meio da análise por microscopia confocal. Os resultados mostraram que o flavonoide taxifolina não foi tóxico para os fibroblastos em nenhuma das concentrações analisadas, enquanto... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The endodontic treatment of young permanent teeth represents a great clinical challenge due to the presence of thin, divergent or parallel dentin walls and the open apex that makes it difficult to disinfect and perform conventional en dodontic procedures. Endodontic regeneration therapies involve the use of materials capable of promoting effective disinfection without causing cytotoxicity, in addition to inducing differentiation of stem cells or biostimulating remaining pulp tissue cell s even after injury. In this context, the flavonoids, polyphenols present in fruits and vegetables, could be interesting agents for the endodontic treatment of immature teeth due to the wide therapeutic use. Thus, the objective of the present study was to evaluate the antimicrobial, cytotoxic effects and capacity of mineralization induction of flavonoids for endodontic application. This thesis was divided into three chapters. The chapter 1 evaluated the toxicity of taxifolin, chrysin, pinocembrin and galang in flavonoids on fibroblasts by the MTT method, antimicrobial activity by determining the minimum inhibitory and bactericidal concentrations and analyzed the antibiofilm action of the flavonoid with the best antimicrobial effect, by means of the biofilm as says in polystyrene plates and in bovine root dentin and confocal microscopy analysis. The results showed that the flavonoid taxifolin was not toxic on fibrobla sts in any tested concentration, while chrysin, pinocembrin and galangin flav... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor