Η τεχνική FUE είναι μια ελάχιστα επεμβατική μέθοδος μεταμόσχευσης μαλλιών η οποία χρησιμοποιείται από πολλούς ιατρούς τα τελευταία 10 χρόνια. Ο σκοπός της εργασίας αυτής είναι η εφαρμογή μεθόδων μαθηματικής μοντελοποίησης με ώστε να περιγράψει τα κυριότερα τμήματα της μεταμόσχευσης μαλλιών, ποσοτικοποιώντας πολύ σημαντικά θέματα όπως το τραύμα της δότριας ζώνης,το πρόβλημα της ασφαλούς και με ακρίβεια εξαγωγής των τριχοθυλακιων,την άριστη κατανομή και την λεπτομερή εκτίμηση και επίτευξη της πυκνότητας της λήπτριας περιοχής. Για τους προαναφερθέντες λόγους, ψηφιακές μικροφωτογραφίες από την δότρια και λήπτρια περιοχή αναλύθηκαν με επεξεργασία εικόνας, η οποία βασίστηκε σε ειδικούς μαθηματικούς αλγορίθμους που αναπτύχθηκαν κατά τη διάρκεια αυτής της μελέτης. Τέλος ένα ολοκληρωμένο πλάνο θεραπείας προτείνεται από τον συγγραφέα για περιπτώσεις μεταμόσχευσης μαλλιών που αντιμετωπίζονται με την τεχνική FUE. / The FUE technique is a minimally invasive hair transplantation method, which has been used by many Doctors over the last 10 years. The aim of this study is mathematical principles to be applied in order to describe the major steps of the hair transplantation, quantitating very important issues like the trauma in the donor area, the problem of safe and accurate extraction of the follicular units, the optimal distribution and the precise estimation and achievement of the recipient area density. For the fore mentioned reasons digital micropictures from donor and recipient area were analyzed by using image processing which was based on special mathematical algorithms which were developed during this study. Finally an integrated treatment planning program is proposed by the Author for hair transplantation cases which are treated by using FUE technique.

La première ovulation induite par effet mâle chez la brebis anovulatoire en anoestrus saisonnier est souvent accompagnée d’un développement de cycles courts qui peuvent être contrecarrés par un traitement progestatif préalable. Nos travaux ont montré que la réponse au mâle est plus rapide en fin d’anoestrus en raison d’une sélection à J0 de follicules dont le stade de développement est plus avancé. En parallèle, ils apportent de nouvelles connaissances sur le mécanisme d’action par lequel la progestérone parvient à supprimer les cycles courts induits par effet mâle, en modulant certaines caractéristiques de la dynamique de croissance folliculaire et en améliorant l’activité stéroïdogénique des follicules préovulatoires. Cependant, d’autres études sont nécessaires pour étudier l’impact de ces effets sur la qualité ovocytaire et la fertilité de ces premières ovulations induites par effet mâle sur un plus grand nombre d’animaux. / The first ovulation induced by male effect in anestrous ewes during the non-breeding season usually result in the development of short cycles that can be avoided by progesterone priming. Our results show that ewes ovulate earlier in June due to selection at J0 of follicles in a more advanced stage of development. However, these observations seem to be unrelated to the luteal outcome after male effect. In parallel, we demonstrate the positive effect of progesterone on the completion of follicular growth and the improvement of the ability of these follicles to respond properly to LH surge and to synthesis ovarian steroids. However, further studies are required to understand whether these changes have functional consequences on the quality of oocytes induced by the male effect and in fertility after male effect on a large number of animals.

Inhibin A and B participate to regulation of gametogenesis. We investigated their applicability as a marker of gametogenesis of men fertility disorders. We monitored the levels of inhibins during the treatment. We interested in their paracrine activity, relationship in sera, follicular fluid and seminal plasma depending on cause of fertility failure. We studied the levels of inhibin B in serum and seminal plasma from 355 men treated for fertility failure, in the context of their andrological and immunological findings (quality of spermiogrammes and acrosome area). We monitored concentration of levels of inhibin A and B in serum and follicular fluids depending on cause of fertility failure, on course and treatment outcome. We took blood samples in the time of the oocytes collection, of the embryotransfer and early pregnancy. The follicular fluids were obtained during the oocytes collection. The levels of both of inhibins were measured by ELISA in all medium (serum, follicular fluid, seminal plasma). We confirm, that inhibin B is useful marker of spermatogenesis in men, but is necessary to examine patient in complex with determination of immunology profile or quality of acrosome. Seminal plasma is, in some indicated cases, more suitable diagnostics material. Similarly inhibin B in women seems to be...

Made available in DSpace on 2016-08-15T20:31:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CarlaMFR_DISSERT.pdf: 8952326 bytes, checksum: aa0d56e13b65d722f12ebb158cf3f48d (MD5) Previous issue date: 2014-07-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This study aimed to determine the rate of ovarian follicles degeneration and search for the presence of parasite DNA by PCR in ovarian tissue from goats experimentally infected with Trypanosoma vivax. Six goats, females, adults were infected with 1.25 x105 trypomastigotes of T. vivax and four others formed the control group. After 60 days of infection, was collected from the ovaries and performed the pathological examination. Samples of ovaries were taken to perform the polymerase chain reaction (PCR). The parasitemia was observed from the third day post-infection (dpi) with peaks in the 7-14th dpi. Histological analysis showed that the group of infected goats, the average value of follicles was significantly lower (P <0.05) compared to the control group. As the stage of development in the control group, the number of primordial and primary follicles was significantly higher (p <0.05) than the secondary and tertiary. As for integrity, no significant difference in the average value of the follicles degenerate type I between control and infected. The number of follicles degenerate type II was significantly higher (p <0.05) in the infected group than in the control group, and most degenerate type II follicles were primordial and primary. The analysis of T. vivax in ovarian tissues by PCR specific for T. vivax (TviCatL-PCR) showed amplification of a DNA fragment of approximately 177 bp was observed in right and left ovaries of all the goats of the infected group. The result of PCR, however, was negative for all samples in the control group. The follicular degeneration associated with the presence of the parasite in the ovaries, as detected by PCR, suggesting the involvement of the parasite in the etiopathogenic mechanism of reproductive harm / Este estudo teve como objetivo a determinação da taxa de degeneração de folículos ovarianos e pesquisar por PCR a presença do DNA do parasita em tecido ovariano de cabras infectadas experimentalmente com Trypanosoma vivax. Seis cabras, fêmeas, adultas, foram infectadas com 1,25x105 tripomastigotas de T. vivax e outras quatro formaram o grupo controle. Após 60 dias de infecção, foi feita a coleta dos ovários e realizado o exame anatomopatológico. Amostras de ovários foram tomadas para a realização da reação em cadeia da polimerase (PCR). A parasitemia foi observada a partir do 3o dia pós-infecção (dpi) com picos nos 7-14os dpi. A análise histológica mostrou que no grupo de cabras infectadas, o valor médio de folículos, foi significativamente menor (P <0,05) quando comparado ao grupo controle. Quanto ao estágio de desenvolvimento, no grupo controle, o número de folículos primordiais e primários foi significativamente maior (p <0,05) do que o secundário e terciário. Quanto à integridade, não houve diferença significativa no valor médio dos folículos degenerados tipo I entre o controle e infectados. O número de folículos degenerados do tipo II foi significativamente maior (p <0,05) no grupo infectado que no grupo controle, e a maioria dos folículos degenerados tipo II eram primordiais e primários. A análise de T. vivax nos tecidos ovariano pelo PCR específico para T. vivax (TviCatL-PCR) mostrou a amplificação de um fragmento de DNA de aproximadamente 177 pb que foi observado nos ovários direito e esquerdo de todos as cabras do grupo infectado. O resultado do PCR, entretanto, foi negativo para todas as amostras do grupo controle. A degeneração folicular associada à presença do parasita nos ovários, detectada por PCR, sugerem a participação do parasita no mecanismo etiopatogênico de danos reprodutivos

Atualmente, o Brasil é o segundo maior exportador de carne bovina e o sexto exportador de leite no mundo. Visando melhorar a produtividade da bovinocultura, torna-se importante a aplicação de programas sanitários adequados e eficientes. As doenças virais são preocupações constantes em qualquer programa de sanidade, devido aos grandes prejuízos econômicos que causam e o seu diagnóstico correto depende de técnicas laboratoriais eficientes. O gênero Pestivirus, da família Flaviviridae, possui três espécies reconhecidas que podem infectar bovinos: o vírus da diarreia viral bovina tipo 1 (BVDV-1), o BVDV-2 e o vírus da doença da fronteira (BDV), além de uma espécie atípica proposta como BVDV-3. Causam principalmente distúrbios respiratórios, reprodutivos e digestivos em bovinos, levando a queda de índices de produção. Os objetivos do presente trabalho foram: descrever o uso de uma técnica modificada de detecção de agentes virais que possam estar presentes em insumos utilizados na reprodução assistida e descrever a caracterização patológica e análise filogenética de pestivírus detectados em um surto da doença, sendo os dados apresentados sob a forma de dois artigos. No primeiro, pools de líquidos foliculares colhidos durante a punção ovariana de vacas para coleta de oócitos para produção in vitro de embriões foram selecionados. As amostras foram analisadas para a detecção de BVDV, herpesvirus bovino tipo 1 (BoHV-1) e 5 (BoHV-5) por isolamento viral, RT-PCR e nested PCR, sendo utilizados dois protocolos de extração de DNA e RNA: um convencional e o outro com adição de etapas pré-extração de ácido nucleico, no intuito de reduzir possíveis inibidores de RT-PCR e PCR presentes nas amostras. A utilização da técnica de pré-extração permitiu detectar um maior número de amostras positivas. No segundo trabalho, foi descrito um surto de diarreia viral bovina em um rebanho que foi testado por imunohistoquímica, ELISA, isolamento viral, RT-PCR e sequenciamento de três regiões do genoma. Foram obtidas quatro amostras distintas de BVDV-3 e as principais alterações clinicas foram encontradas nos sistemas digestivo e respiratório, mas lesões de pele e opacidade de córnea também foram observadas. Os resultados encontrados nos trabalhos realizados reforçam a necessidade da verificação quanto à presença de patógenos em materiais biológicos utilizados na reprodução assistida utilizando técnicas sensíveis e que a doença causada por BVDV-3 em bovinos é indistinguível clinicamente das causadas por outros pestivírus, sugerindo que pestivírus atípicos podem estar subdiagnosticados nos rebanhos brasileiros. / Currently, Brazil is the second largest beef and the sixth milk exporter worldwide. To improve the livestock productivity, it becomes important the applying of appropriate and efficient health programs. Viral diseases are constant concerns on any health program due to major economic losses they cause and their correct diagnosis depends of the development of efficient diagnostic techniques. The genus Pestivirus of the family Flaviviridae, has three recognized species which can infect cattle: the bovine viral diarrhea virus type 1 (BVDV-1), BVDV-2 and border disease virus (BDV), and one atypical species putatively named as BVDV-3. These viruses mainly cause respiratory, digestive and reproductive disturbances in cattle, resulting in decrease of production rates. The goals of the present work were: describe the use of a modified procedure in detecting viral agents that may be present on byproducts utilized in assisted reproduction and describe the pathological and phylogenetic frame of pestivirus detected in an outbreak of disease. The data was presented in two papers. In the first study, pooled follicular fluid collected during oocyte retrieval for in vitro embryo production were selected. The samples were analyzed for BVDV, bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) and 5 (BoHV-5) by virus isolation, RT-PCR and nested PCR, using two extraction protocols for DNA and RNA: a conventional and the other with addition of pre-extraction of nucleic acid step, in order to reduce potential inhibitors of PCR and RT-PCR present in the samples. The use of the prenucleic acid procedure allowed detecting a greater number of positive samples. In the second paper, an outbreak of bovine viral diarrhea virus was described and has been tested by immunohistochemistry, ELISA, virus isolation, RT-PCR and sequencing of three regions of the genome. Four different BVDV-3 samples were obtained and major clinical disturbances were found in the digestive and respiratory systems, but skin lesions and corneal opacity were also observed. The results obtained in the works underscore the need in checking for pathogens in biologicals used in assisted reproduction utilizing sensitive techniques and shows that the disease caused by BVDV-3 in cattle is clinically undistinguishable from those caused by other pestiviruses, suggesting that atypical pestivirus may be underdiagnosed in the Brazilian herds.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 823319 bytes, checksum: 6c9c514b46a574b1afa5353a3e317c9b (MD5) Previous issue date: 2003-03-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objective of the present study was to evaluate the folliculogenesis in lactating mares and to compare the follicular dynamics and the FSH (follicle stimulating hormone) and LH (luteinizing hormone) profiles of lactating and non-lactating mares. In addition, the effects of season and body condition, as well as changes in the uterine echotexture and corpus luteum diameter, were also evaluated. Lactating mares (n=24) were selected at the day of parturition. Non-lactating cyclic mares (n=15) were randomized and selected in replicate for each lactating mare. The ovaries and uterus were evaluated daily by ultrasonography. Weight and body condition score were recorded at the day of parturition on the Lactating Group and at the day of randomization on the Non-lactating Group, and weekly, afterwards for both groups. The follicular emergence occurred before or very close to the day of parturition in lactating mares that ovulated in the foal heat . The future dominant follicle, at the day of emergence, had a size advantage in diameter when compared to the second largest follicle. Moreover, during the puerperium and the first interovulatory interval, the two largest follicles from the ovulatory wave had similar growth rates between the day of emergence and deviation. The growth rates of the two largest follicles were not affected by the season. The intervals from emergence of the dominant follicle to deviation and to ovulation were not different between the Lactating and Non-Lactating Groups. The emergence of the ovulatory wave occurred under elevated and/or increasing concentrations of FSH in both groups of mares. During the puerperium, the follicular emergence and deviation occurred earlier, when compared to the non-lactating cyclic mares. The mechanism of "follicular selection" (deviation) in lactating mares seems to be similar to non-lactating mares, due to the similarity of the follicular diameters and plasma concentrations of FSH and LH around the time of deviation. The maximum diameter of the dominant follicle and its diameter at Day -1 were larger in the Lactating than in the Non-Lactating Group. Using a mathematical method was possible to identify greater number of minor waves in the Lactating Group. The peak of endometrial echotexture score occurred earlier in lactating mares when compared to the non-lactating mares. The luteolysis, apparently, did not differ between the two groups of mares. Longer intervals from parturition to the first ovulation were associated with lower body condition score at 22 days postpartum, greater weight loss and occurrence of parturition in the Spring. Four distinct reproductive statuses were characterized in the Lactating Group: a) Continuous reproductive cyclicity after parturition; b) Prolonged interval from parturition to ovulation; c) Postpartum ovulation followed by anestrous; and d) Postpartum anestrous. Therefore, the present study shows that the folliculogenesis in postpartum mares is influenced by the parturition, but it is very similar to the folliculogenesis of non-lactating mares, mainly after the time of follicle selection. / A foliculogênese em éguas pós-parto foi estudada objetivando-se avaliar comparativamente a dinâmica folicular ovariana e os perfis endócrinos dos hormônios folículo estimulante (FSH) e luteinizante (LH) em éguas lactantes (pós-parto) e Não-Lactantes. Adicionalmente, o efeito da estação e da condição corporal, bem como mudanças na ecotextura uterina e diâmetro do corpo lúteo, foram avaliados. O Grupo Lactante foi composto por éguas (n = 24) que estavam gestantes e que no dia do parto foram introduzidas no experimento. O Grupo Não-Lactante foi constituído de éguas (n = 15) nãogestantes e cíclicas, após sorteio realizado no mesmo dia do parto de cada égua do Grupo Lactante. Exames ultra-sonográficos dos ovários e útero foram realizados diariamente. Peso e escore corporal foram avaliados no dia do parto, para o Grupo Lactante e no dia do sorteio; para o Grupo Não-Lactante e, posteriormente, a cada semana, para ambos os grupos. A emergência folicular ocorreu antes ou muito próximo ao parto nas éguas do Grupo Lactante, que ovularam durante o cio do potro . O futuro folículo dominante, no dia da sua emergência, apresentou vantagem em diâmetro em relação ao folículo subordinado. Adicionalmente, durante o puerpério e primeiro intervalo interovulatório pós-parto do Grupo Lactante, os dois maiores folículos da onda ovulatória apresentaram taxas de crescimento semelhantes entre a emergência e a divergência. As taxas de crescimento dos dois maiores folículos não foram afetadas pela estação. Não existiu diferença também nos intervalos da emergência do folículo dominante à divergência e à ovulação, entre éguas dos Grupos Lactante e Não-Lactante. A emergência da onda folicular ovulatória foi acompanhada de concentrações elevadas e, ou, crescentes de FSH nos Grupos Lactante e Não-Lactante. Devido à precocidade na emergência folicular durante o puerpério, a divergência folicular, neste mesmo período, ocorreu, também, precocemente, quando comparada a éguas do Grupo Não-Lactante. O mecanismo de seleção folicular (divergência folicular), no Grupo Lactante, demonstrou ser semelhante ao encontrado no Grupo Não-Lactante, devido à similaridade dos diâmetros foliculares e concentrações plasmáticas de FSH e LH ao redor do momento da divergência folicular. O máximo diâmetro do folículo dominante e o seu diâmetro no dia anterior à ovulação foram maiores no Grupo Lactante comparados ao Grupo Não-Lactante. Maior número de ondas foliculares menores foram identificadas, pelo método matemático, no Grupo Lactante, quando comparado ao Grupo Não-Lactante. O pico da ecotextura uterina ocorreu mais precocemente nas éguas do Grupo Lactante, em relação à ovulação, quando comparado ao Grupo Não-Lactante. A luteólise, aparentemente, não diferiu entre as éguas dos Grupos Lactante e Não-Lactante. Maiores intervalos do parto à primeira ovulação (Grupo Lactante), estiveram associados com menor condição corporal aos 22 dias pós-parto, maior perda de peso e ocorrência do parto na Primavera. Quatro situações reprodutivas distintas foram caracterizadas nas éguas do Grupo Lactante: a) Ciclicidade reprodutiva contínua após o parto; b) Intervalo prolongado do parto à ovulação; c) Ovulação pós-parto seguida de anestro; e d) Anestro pós-parto. O presente estudo demonstra, portanto, que a foliculogênese em éguas pós-parto sofre a influência direta do parto, mas que em muito se assemelha à foliculogênese de éguas não-lactantes, sobretudo a partir da ocorrência da seleção folicular.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-03-25. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:25:26Z : No. of bitstreams: 1 Publico-00235.pdf: 311178 bytes, checksum: 4bdcda98426ffee2492755dd8ae27d33 (MD5) / Verificar a relacao entre as concentracoes de substancias reativas ao acido tiobarbiturico, a atividade das enzimas glutationa peroxidase e catalase com a ocorrencia de gravidez, com o estimulo hormonal administrado e com a presenca ou nao de um fator de infertilidade feminino. Metodo: Foi realizado um estudo prospectivo caso controle com o liquido folicular de 146 pacientes que foram submetidas ao programa de Reproducao Assistida da UNIFESP. Como criterios de inclusao foram considerados apenas as pacientes que realizaram o protocolo de fertilizacao in vitro (FIV) atraves de injecao intracitoplasmatica de espermatozoide (ICSI). Os grupos experimentais foram subdivididos de acordo com a presenca ou nao de gestacao, com hormonio administrado durante o estimulo (FSH ou FSH e hMG) e com a presenca ou nao de pelo menos um fator de infertilidade feminina. As aliquotas dos liquidos foliculares foram coletadas apos a retirada dos oocitos e analisadas por espectrofotometro para mensurar as concentracoes de substancias reativas ao acido tiobarbiturico (TBARS) . um marcador de peroxidacao lipidica, e das enzimas catalase e glutationa peroxidase presentes em cada amostra. Um modelo de regressao logistica foi construido utilizando numero de embrioes de alta qualidade no terceiro dia de cultivo transferidos, presenca de pelo menos um fator de infertilidade feminino e a atividade da glutationa peroxidase, maximizando a preditibilidade da ocorrencia de gravidez. Resultados: No grupo de mulheres nao gravidas foi observada uma maior atividade da enzima glutationa peroxidase (p=0,04). Nos outros grupos nao foi observada diferenca estatistica entre nenhum dos parametros avaliados. Na regressao logistica, o melhor modelo preditivo para gravidez incluiu os valores de fator de infertilidade, classificacao embrionaria no terceiro dia de cultivo e a atividade de glutationa peroxidase (73,68%, p=0.00001). O valor de odds-ratio para a atividade de glutationa peroxidase foi 0,98, indicando que valores crescentes de atividade glutationa levaram a diminuicao da chance de ocorrencia de gravidez. Conclusao: Nas condicoes deste estudo, (i) mulheres com ƒÀ-hCG negativo possuem uma maior atividade da glutationa peroxidase, (ii) diferentes estimulos ovarianos nao provocam alteracao nas concentracoes de TBARS e na atividade das enzimas antioxidantes e (iii) a presenca de pelo menos um fator de infertilidade feminino nao altera a concentracao de TBARS e a atividade da enzimas antioxidantes. / Objective: to verify the relation between thiobarbituric acid reactive substances concentrations, glutathione peroxidase and catalase activities, and occurrence of pregnancy, hormonal stimulation protocol utilized, and presence or not of a female infertility factor. Method: a prospective case-control study was carried with follicular fluid from 146 patients submitted to the Assisted Reproduction program at the Sao Paulo Federal University. Only patients submitted to in vitro fertilization (FIV) through intracytoplasmic sperm injection (ICSI) were included. The experimental groups were subdivided according to presence or absence of pregnancy, hormonal stimulation protocol used (FSH or FSH and hMG) and presence or absence of at least one female infertility factor. An aliquot of follicular fluid was collected after retrieval of the oocyte for analysis of thiobarbituric acid reactive substances concentrations, and glutathione peroxidase and catalase activities. All these analyses were carried out using a spectrophotometer. Groups were compared using Student’s T-test. A logistic regression model were calculated using embryo quality on day 3, presence or not of a female infertility factor, thiobarbituric acid reactive substances levels, and glutathione peroxidase (GPX) and catalase activities as independent variables, occurrence of pregnancy as a binary dependent variable. Results: Patients who did not achieve pregnancy presented higher glutathione peroxidase activity levels, when compared with patients who achieved pregnancy (p=0,04). In the other groups, no differences were observed. Logistic regression produced a model which best predicted pregnancy including presence of female infertility factor, embryo quality on day 3 and GPX activity (73.7% total predictive value, p=0.00001). Odds-ratio for GPX activity was 0.98, indicating that increasing values of GPX activity decreased the odds of occurrence of pregnancy. Conclusion: Based on our results, we may conclude that (i) higher GPX activity is associated to negative outcomes in ICSI cycles, (ii) different ovarian stimulation protocols does not alter concentrations of TBARS and activity of antioxidant enzymes, and (iii) the presence of at least one female infertility factor does not alter TBARS levels or antioxidant activity. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objectives of the present study was to determine the concentration of angiotensin II (AngII) in follicular fluid, to characterize the expression of renin-angiotensin system (RAS) genes in follicular cells and to verify the role of AngII in the follicular wave, using an in vivo model with intrafollicular injection and in vitro model with granulosa cells culture. AngII concentration in follicular fluid increased on dominant follicle during and after deviation. Saralasin inhibited follicular growth in all treated cows (4/4), suggesting that AngII is essential for follicular growth in 7-8mm follicles. However, intrafollicular injection of AngII affected neither follicular growth nor the pattern of follicular dynamics, which were similar to control cows. These results imply that bovine ovarian follicles contain sufficient AngII for follicle development. In another experiment, saralasin inhibitory effect was overcome by systemic FSH supplementation, suggesting that AngII is essential to follicular growth during FSH-low dependence stages. The injection of AngII or angiotensin receptor type 2 (AGTR2) agonist in second largest follicle prevented the expected atresia of subordinate follicle and the treated follicle grew at the same rate as the dominant during 24h. To understand why a single intrafollicular injection of AngII antagonist induces follicular atresia, dominant follicle was injected with saralasin or saline and the cows were ovariectomized 24h later. The inhibition of AngII action decreased estradiol concentration in follicular fluid and abundance of mRNA encoding aromatase (CYP19), 3!-hydroxysteroid dehydrogenase (3!HSD), LH receptor, SerpinE2 and cyclinD2 in granulosa cells. On granulosa cell culture, AngII increased CYP19 expression just in the presence of FSH. Taken together, these results show that AngII is essential for follicular growth, and plays important role in regulating genes involved in granulosa cell proliferation (cyclinD2) and differentiation (LHr, aromatase, 3!HSD), which are necessary for development of the dominant follicle. In conclusion, these data suggest that AngII signaling is involved in follicle growth and dominance in cattle. / Os objetivos do presente trabalho foram determinar a concentração de angiotensina II (AngII) no fluido folicular, caracterizar a expressão dos genes do sistema renina-angiotensina (RAS) nas células foliculares e verificar o papel da AngII na onda folicular, utilizando um modelo in vivo de injeção intrafolicular e in vitro de cultivo de células da granulosa. A concentração de AngII no fluido folicular aumentou no folículo de maior diâmetro, durante e após a divergência folicular. A administração intrafolicular de saralasina, um bloqueador competitivo dos receptores de AngII, inibiu o crescimento folicular em todas as vacas injetadas (4/4), demonstrando que a AngII é essencial para o crescimento de folículos de 7-8mm de diâmetro. Contudo, a injeção de AngII não afetou o crescimento folicular, sugerindo que os folículos contém AngII suficiente para o seu desenvolvimento. Em um outro experimento, a administração sistêmica de FSH reverteu o efeito inibitório da saralasina, sugerindo que a AngII é indispensável para o desenvolvimento folicular após o período de dependência ao FSH. A injeção, no segundo maior folículo, de AngII ou CGP42122 (agonista AGTR2) preveniu a regressão esperada do folículo subordinado, demonstrando que a AngII desempenha um papel fundamental na seleção do folículo dominante. Para determinar o mecanismo de atresia induzido por saralasina, o folículo dominante de cada vaca foi injetado com saralasina ou solução salina e os animais foram ovariectomizados após 24 horas. A inibição de AngII diminuiu a concentração de estradiol no fluido folicular e a abundância de mRNA que codifica para os genes aromatase (CYP19), 3! HSD, LHr, Serpin E2 e ciclina D2 nas células da granulosa. Além disso, em cultivo primário de células da granulosa, a AngII, somente na presença do FSH, induziu um aumento na expressão de aromatase. Em resumo, os resultados demonstram que a sinalização da AngII é essencial para o crescimento folicular, regulando genes envolvidos com a proliferação (ciclina D2) e diferenciação (LHr, aromatase, 3!HSD) das células da granulosa os quais são necessários para o desenvolvimento do folículo dominante. Em conclusão, os resultados sugerem que a AngII está envolvida no desenvolvimento e dominância folicular em bovinos.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-06-30Bitstream added on 2014-06-13T20:46:12Z : No. of bitstreams: 1 gioso_mm_dr_botfmvz.pdf: 475750 bytes, checksum: 62611c7cad05a1587e0b6368d179605c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Vários produtos à base de GnRH são efetivos em protocolos de Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF). Entretanto, o Acetato de Fertirelina é um análogo deste hormônio cujas informações sobre sua ação na dinâmica folicular dos bovinos são poucas, principalmente nas condições brasileiras. Este trabalho teve como objetivo comparar a eficiência de duas doses de Acetato de Fertirelina para sincronização da emergência da onda de desenvolvimento folicular e ovulação, em vacas leiteiras submetidas ao protocolo Ovsynch. Utilizaram-se 77 vacas, a partir dos 60 dias pós-parto e escore corporal entre 2,5-4,0. Os animais apresentavam população folicular e corpo lúteo (CL) característico (Classe 1) ou ausência de CL, porém presença de pelo menos um folículo com diâmetro >10mm (Classe 2). As fêmeas foram distribuídas aleatoriamente em quatro tratamentos. Em conclusão, as concentrações séricas de progesterona e estradiol, taxas de sincronização, ovulação e prenhez demonstraram que o Acetato de Fertirelina foi eficiente em provocar a emergência da onda folicular e induzir a ovulação, nas doses de 50 ou 100mg, sugerindo que doses de 50mg de Fertirelina podem ser indicadas sem comprometimento nos resultados finais do programa. / Many similar products to GnRH are effective in protocols of fixed timed artificial insemination (FTAI). However, Fertirelin Acetate is an analog of this hormone whose information about action in the bovine follicular dynamics is inconsistent, mainly in brazilian conditions. Therefore, the objective of this work was to compare the efficiency of two doses of Fertirelin used for synchronization of follicular wave emergence and ovulation, in dairy cows submitted to Ovsynch protocol. Seventy seven lactating dairy cows, on over of 60 days postpartum and body score of 2.5 to 4.0. The animals presenting a reasonable number of follicles either a presence of CL (group 1) or without CL but at last =10 mm follicles (group 2). The females were randomly distributed in four treatments. The pregnancy rates were also similar (P>0.05) with mean of 28.37%. In conclusion, Progesterone and Estradiol concentrations, follicular wave synchronization, induction of ovulation and pregnant rates demonstrate that Fertirelin was efficient in inducing a new follicular wave emergency, as well as the induction of the ovulation at the end of the protocol, using the dose of either 50mg or 100 mg, suggesting that 50mg of Fertirelin can be useful without compromising the final results.

Orientador: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Banca: Tânia Vasconcelos Cavalcante / Banca: José Wanderley Cattelan / Banca: Lia de Alencar Coelho / Banca: Cintia Lúcia Maniscalco / Resumo: O uso repetido da laparoscopia para aspiração folicular (LAF) associado ou não à estimulação hormonal foi avaliado. Para tanto foram utilizadas 40 fêmeas caprinas sem-raça-definida, divididas aleatoriamente em 4 grupos com 10 animais cada, sendo: Grupo 1 - adultas estimuladas com 80 mg de FSHp e 300 UI de eCG; Grupo 2 - adultas não estimuladas (controle); Grupo 3 - prépúberes estimuladas com metade das doses preconizadas para o G1 e Grupo 4 - pré-púberes não estimuladas. Cada fêmea foi submetida a seis sessões de colheita com intervalo de uma semana entre as intervenções. A estimulação hormonal foi feita em dose única, 36 horas antes do ato operatório. A técnica consistiu do uso de duas punções para a introdução do endoscópio e da pinça de manipulação atraumática. Após a visualização dos ovários, os folículos visíveis na sua superfície foram puncionados com auxílio de agulha de aspiração acoplada a um sistema de vácuo. Os oócitos encontrados foram classificados de acordo com a qualidade, submetidos à maturação in vitro por 27 horas, e posteriormente fixados e corados para avaliação do estádio de maturação. A técnica utilizada, embora tenha apresentado redução da qualidade dos oócitos, não interferiu na taxa de maturação ao longo das seis intervenções. A resposta ovariana diminuiu com o uso repetido da estimulação com FSH exógeno. Não houve comprometimento da condição corporal e da fertilidade dos animais. A avaliação das funções hepática e renal e da analgesia, indica que o protocolo anestésico utilizado é seguro e eficiente para este tipo de procedimento cirúrgico. Diante dos resultados obtidos pode-se concluir que a técnica de laparoscopia para aspiração folicular é adequada para a obtenção de oócitos de fêmeas caprinas pré-púberes e adultas. / Abstract: The repeated use of the laparoscopy to follicular aspiration (LFA) associated or not the hormonal stimulation was evaluated. Forty crossbred goat females were used, divided randomly in 4 groups with 10 animals each, being: Group 1 - adult stimulated with 80 mg of FSHp and 300 UI of eCG; Group 2 - adult not stimulated (control); Group 3 - pre-pubertal stimulated with half of the dose praised for the G1 and Group 4 - prepubertal not stimulated. Each female was submitted the six sessions of harvest with interval of one week between the interventions. The hormonal stimulation was made in only dose, 36 hours before the surgery. The technique consisted of the use of two punctions for the introduction of the endoscopy and the clamp atraumatic manipulation. After the visualization of the ovaries, the visible follicles in its surface were punched with aid of needle of aspiration connected to a vacuum system. The recovery oocytes were classified in accordance with the quality, submitted to in vitro maturation for 27 hours, and later fixed and stained for evaluation of maturation state. The used technique does not interfered in the maturation rate although oocytes quality has reduced. However the ovulatory response diminished with the repeated use of exogenous FSH stimulation. Damage was not observed in corporal condition nor fertility. The evaluation of the hepatic function, renal and pain analysis, showed that the anaesthetic protocol used is safe and efficient for this type of surgery. In conclusion, the technique of laparoscopy to follicular aspiration is adjusted for the attainment of oocytes in goat females adult and prepubertal. / Doutor