Orientador: Daniela Alonso Bocchini Martins / Banca: Ariela Veloso de Paula / Banca: Rubens Monti / Banca: Sandra Helena da Cruz / Banca: Roberta da Silva Bussamara Rodrigues / Resumo: Os fungos endofíticos são micro-organismos que vivem nos espaços intercelulares das plantas e são reconhecidos por seu potencial na produção de importantes produtos de interesse biotecnológico, tal como as enzimas. Estas vem sendo amplamente utilizadas nos setor industrial pois catalisam reações com maior especificidade que as formas convencionais de reações químicas, fazendo assim dos fungos endofíticos uma alternativa promissora na produção desses biocatalisadores. Desta forma, este trabalho teve como objetivo a prospecção de enzimas de interesse biotecnológico como lipase, esterase, epóxido-hidrolase, nitrilase, acilase, protease e amidase em fungos endofíticos e a avaliação da sua aplicação biotecnológica, com enfoque na utilização do extrato bruto contendo lipase em processos de biorremediação e transesterificação. Setenta e cinco fungos endofíticos foram submetidos à prospecção de atividade biocatalítica, onde 66 apresentaram atividade lipases/ esterases, 16 epóxido hidrolase, 24 acilases, 50 proteases, 10 nitrilase e 64 amidase. Foram encontrados fungos com satisfatória atividade biocatalítica frente a diferentes metodologias e substratos, mostrando a grande versatilidade dos endófitos na produção de enzimas. O fungo Mycosphaerella coacervata foi selecionado para avaliação da atividade e caracterização parcial da lipase extracelular em extrato bruto. O micro-organismo apresentou produção máxima da enzima quando cultivado por 48 horas a 28oC (486 U/L), e se manteve estável até 6 meses estocada a - 2oC. O extrato bruto contendo a enzima apresentou atividade máxima a 37oC em pH 8,0. A estabilidade térmica foi observada na faixa de 30 a 60oC (atividade residual acima de 80%) e sua estabilidade ao pH entre 6,0 e 9,0.(atividade residual superior a 80%). A enzima se manteve estável (atividade residual acima de 90%) na presença de acetona, metanol... / Abstract: The endophytic fungi are microorganisms that live in the intercellular spaces of plants and are known for their potential for the production of important products of biotechnological interest, such as enzymes. These have been widely used in industry because they catalyze reactions with greater specificity than conventional forms of chemical reactions, thereby making the endophytic fungus a promising alternative to produce these biocatalysts. Thus, this study aimed to prospect for enzymes of biotechnological interest as lipase, esterase, epoxide hydrolase, nitrilase, acylase, amidase and protease in endophytic fungi and evaluate their biotechnological applications, focusing on the use of the crude extract containing lipase in the transesterification process and bioremediation. Seventy five endophytic fungi were submitted to prospecting biocatalytic activity, where 66 showed lipase / esterase activity, 16 epoxide hydrolase, 24 acylases, 50 proteases, 10 nitrilase and 64 amidase. Fungi with satisfactory biocatalytic activity against different methodologies and substrates were found, showing the versatility of endophytes in the production of enzymes. The fungi Mycosphaerella coacervata was selected to evaluate the activity and partial characterization of extracellular lipase crude extract. The microorganism showed maximum enzyme production when grown for 48 hours at 28°C (486 U / L), and remained stable up to 6 months stored at -2°C. The crude extract containing the enzyme showed maximum activity at 37°C at pH 8.0. The thermal stability was observed in the range of 30 to 60°C (residual activity above 80%) and its stability at the pH between 6.0 and 9.0 (residual activity exceeding 80%). The enzyme was stable (residual activity above 90%) in the presence of acetone, methanol, ethanol, isopropanol and hexane at concentrations of 20 and 50%. Good stability was observed also in relation to different... / Doutor

Resumo: Os polímeros vêm substituindo materiais como madeira, vidro e metal em variadas aplicações. Nos dias atuais, seu uso tem sido extensivamente alto em todo o mundo, tornando o volume de material descartado um grande problema. Acredita-se, portanto, que investigações sobre a capacidade microbiológica em degradar resíduos gerados pela atividade humana sejam de extrema importância. Um dos polímeros avaliados nesse trabalho, o poli (cloreto de vinila) (PVC) é o segundo termoplástico mais consumido no mundo. A poli (caprolactona) (PCL) é um poliéster sintético facilmente degradado por enzimas como lipases, esterases e despolimerases extracelulares de bactérias e fungos. Neste contexto, o presente estudo avaliou a eficiência de degradação de filmes poliméricos de PVC e PCL utilizando a linhagem Phanerochaete chrysosporium CCB 478 e um consórcio padrão de espécies fúngicas recomendado pela metodologia ISO 846-1978 - Testing of Plastics - Influence of fungi and bacteria. Os filmes foram individualmente mergulhados em suspensões de esporos, incubados em placas de Petri contendo meio completo (suplementado com glicose) e meio incompleto (sem glicose). As placas foram acondicionadas em câmaras úmidas por trinta dias a 28°C. A biodegradação dos filmes foi avaliada mediante análises de perda de massa, coloração, microscopia óptica e microscopia eletrônica de varredura (MEV). Não foi observado o crescimento de P. chrysosporium nos filmes havendo, porém, a presença de estirpes contaminantes, que foram isoladas e caracterizadas. Em amostras de PVC biotratadas a perda de massa foi insignificante. A degradação dos filmes de PCL pelo consórcio foi mais eficiente do que pelos micro-organismos isolados, nos dois meios testados. Com relação a estes meios, também foram encontradas diferenças estatísticas para tratamentos com o PCL. Dentre os fungos do consórcio... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Polymers have been replacing materials such as wood, glass and metal in different applications. Nowadays their use have extensively increased worldwide, making the volume of discharged material a great problem. Therefore, scientific investigations on the microbial ability to degrade plastic waste are considered extremely important. One of the recalcitrant polymers evaluated in this work, poly (vinyl chloride) (PVC) is considered the second most consumed thermoplastic in the world. Poly (caprolactone) (PCL), is a synthetic polyester easily degraded by enzymes such as lipases, esterases and extracellular depolimerases of bacteria and fungi. In this context, this study evaluated the capability of Phanerochaete chrysosporium, strain CCB 478, and a set of fungal species recommended by ISO 846-1978 (Testing of Plastics - Influence of fungi and bacteria), to degrade PVC and PCL films. The films were individually immersed in a spore suspension, and incubated in Petri dishes containing complete medium (supplemented with glucose) and incomplete medium (without glucose). The plates were kept in humidity chamber for thirty days at 28°C. The biodegradation of the films was investigated through the analyses of weight loss, color changes, optical microscopy and scanning electron microscopy (SEM). In our results, there was no growth of P. chrysosporium on the films, however interesting contaminates were isolated and characterized. Samples of the biotreated PVC presented no weight losses. The degradation of PCL films by the recommended fungal set was more efficient than the isolated microorganisms in both culture media. With respect to these media, statistical differences were also found for treatments with the PCL. Among all fungi tested, the ascomycete Chaetomium globosum was the only one able to colonize the surface of PVC films and degrade the PCL films significantly. Morphological changes resulting... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Derlene Attili de Angelis / Coorientador: Sandra Mara Martins-Franchetti / Banca: José Carlos Marconato / Banca: Regina Teresa Rosim Monteiro / Mestre

Orientador: Angela Regina Araujo / Banca: Jairo Kenupp Bastos / Banca: Andersson Barison / Resumo: O projeto proposto tem como objetivo principal a obtenção de substâncias bioativas a partir do estudo químico e biológico do extrato bruto produzido pelo fungo endofítico Saccharicola sp. isolado do caule da espécie vegetal Eugenia jambolana. O extrato bruto foi analisado por RMN de 1H e HPLC-DAD, objetivando a avaliação do perfil químico e assim, definir a metodologia de isolamento das substâncias. A seguir, o extrato bruto foi submetido a técnicas cromatográficas e espectrométricas para o isolamento e a determinação estrutural das substâncias isoladas, respectivamente. Uma das substâncias isoladas é inédita, com esqueleto também inédito na literatura e produzida em grande quantidade, a outra é conhecida como acido anofínico, pertencente a classe dos cromenos, com poucos trabalhos descritos e através de ESI-MS foram identificadas as substâncias ácido 4-hidróxi-3-prenilbenzóico, ácido 4-hidróxi-3-(3-metil-3-buten-1-il) benzóico, ácido 2,2-dimetil-2H cromeno-6-carboxílico além de outras três pertencentes a classe da substância inédita. / Abstract: The proposed project's main objective is to obtain bioactive substances from chemical and biological study of the crude extract produced by the endophytic fungus Saccharicola sp. isolated from the stem of the plant species Eugenia jambolana. The crude extract was analyzed by 1H NMR and HPLC-DAD, aiming at assessing the chemical profile and thus define the methodology for isolation of substances. Next, the crude extract was subjected to chromatographic and spectrometric techniques for the isolation and structural determination of individual substances, respectively. One of the isolated substance is unique, with skeleton also unprecedented in the literature, which was produced in large quantities, and another one known as anofinic acid belonging to the class of chromenes, with few studies in the literature, and by ESI-MS were identified substances 4-hydroxy-3-prenilbenzóico acid, 4-hydroxy-3-(3-methyl-3-buten-1-yl) benzoic acid, 2,2-dimethyl-2H-chromene-6-carboxylic acid plus three others belonging to the class of novel substance. / Mestre

Orientador: Wagner Bettiol / Resumo: A cultura do tomateiro é severamente atacada por diversas doenças, entre elas pode-se destacar a Murcha-de-Fusário. O objetivo do presente trabalho foi o de avaliar a eficiência de isolados de Fusarium oxysporum não patogênicos (Fnp) 233, 233/1, 245, 245/1, 141/3, 251, 251/2, 251/5, 257, originários da Universidade de Torino, Itália, no controle da Murcha-de-Fusário, causada por Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici raças 1 e 2 (Fol). Os isolados patogênicos CA4A (Fol - 1), C-21A (Fol - 2), TO11 (Fol - 2) e TO245 (Fol - 2), bem como os isolados não patogênicos, foram cultivados em meio de cultura BD (batata-dextrose) durante 10 dias à 25ºC, com agitação constante de 150rpm. Para se obter estruturas de resistência do fungo 500 ml de inóculo líquido de cada isolado de Fnp foram adicionados em 1000 g de talco e incubados durante 30 dias. Com o intuito de verificar a patogenicidade dos isolados CA4A, C-21A, TO11 e TO245, plântulas de tomateiro cv. Viradoro foram transplantadas para substrato infestado com inóculo líquido nas concentrações de Fol de 103, 104, 105 e 106 conídios mL-1. Após 35 dias do transplante, as mudas foram avaliadas quanto a severidade da doença (Notas variando entre 1 a 6, onde: 1 planta sadia e 6 planta morta), a altura e as massas secas do sistema radicular e da parte aérea das plantas. As concentrações de 106 e 105 conídios mL-1 dos isolados de Fol promoveram a maior severidade da doença, quando comparadas com a testemunha não inoculada. Após determinar a concentração do patógeno, verificou-se a atividade não patogênica dos isolados de Fnp em plantas de tomateiro onde, raízes foram imersas em uma suspensão de conídios dos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The tomato is severely is affected by several diseases, among them may be detached the Fusarium wilt. The objective this present research was to evaluate the efficacy of the nonpathogenic Fusarium oxysporum strains (Fnp) 233, 233/1, 245, 245/1, 141/3, 251, 251/2, 251/5, 257, from the University of Torino, Italy, on the control of Fusarium wilt, caused by Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (Fol) races 1 and 2. The pathogenic strains CA4A race 1, C-21A race 2, TO11 race 2 and TO245 race 2, as well the nonpathogenic strains were growing in liquid media PD (potato-dextrose) during 10 days at 25ºC, with constant agitation at 150 rpm. To obtain resistant structure of the fungi 500 mL of the liquid inoculum with each the Fnp strain were mixed in 1000 g of talc and incubated for 30 days. To evaluate the pathogenic activity of the strains: CA4A (Fol - 1), C-21A (Fol - 2), TO11 (Fol - 2) e TO245 (Fol - 2), tomato seedlings cv. Viradoro susceptible to race 2 of the pathogen were transplanted into the infested substrate with inoculum suspension in the concentrations of Fol 103, 104, 105 e 106 conidia mL-1. After 35 days of the seedlings transplantation were evaluated the disease severity (Notes between 1 and 6, where: 1 health plant e 6 died plant), the height plants and the weight dry material of the root system and aerial part of the plants. The concentrations 106 e 105 conidia mL-1 of the strains de Fol increased the higher severity, when compared with non inoculated plants. After determination the concentration of the pathogen, observed the nonpathogenic activity of the Fnp strains in tomato plants where, roots were dipped in a conidial suspension in the concentration of the 106 conidia mL-1. The plants were growing into pots for the 500 mL capacity of the substrate and after 35 days of the growing in greenhouse were realized the evaluations. The plant... (Complete abstract, click electronic address below). / Mestre

Orientador: Katia Cristina Kupper / Coorientador: Marco Aurélio Takita / Banca: Helia Harumi Sato / Banca: Eliana Gertrudes de Macedo Lemos / Resumo: O bolor verde e a podridão azeda destacam-se entre as doenças de pós-colheita em frutos cítricos, causados por Penicillium digitatum e Geotrichum citri-aurantii, diminuindo a qualidade e a quantidade dos frutos e, consequentemente, resultando em significativas perdas econômicas. Uma alternativa para controle destes fungos é através da toxinas killer produzidas por algumas espécies de levedura, capazes de matar fungos filamentosos. Saccharomyces cerevisiae produz toxinas killer proteicas que são letais para células sensíveis de levedura. Estas toxinas foram agrupadas em quatro tipos, K1, K2, K28 e Klus, codificado por elementos extra cromossomais associados a partículas virais na forma de dsRNA. Este trabalho tem como objetivo caracterizar a toxina killer de S. cerevisiae ACB-K1 e testar sua atividade antagônica em patógenos pós-colheita de citros. O isolado ACB-K1 apresentou atividade killer, sobre levedura sensível (S. cerevisae NCYC 1006) além do fitopatógeno P. digitatum, não apresentando porém inibição contra o patógeno G. citri-aurantii. A toxina apresentou máxima atividade em pH 4,1 a 22 °C, tanto para a levedura sensível quanto para o fitopatógeno P. digitatum. A toxina apresentou estabilidade em diferentes pH de 4,1 a 6,0, após a incubação de 24h a 22 °C sobre o fungo. O isolado ACB-K1 apresentou dsRNA, sendo detectadas duas formas (LA e M-dsRNA), sugerindo que a base genética para a produção da toxina é extra cromossomal, dado confirmado pela cura do fenótipo killer ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Green mold and sour rot are among post-harvest diseases in citrus fruits, caused by Penicillium digitatum and Geotrichum citri-aurantii, reducing a quality and quantity of fruits and, consequently, resulting in significant economic losses. An alternative for the control of fungi is using killer toxins produced by some species of yeasts, capable of killing filamentous fungi. Saccharomyces cerevisiae produces protein killer toxins that are lethal to yeast sensitive cells. These toxins were grouped into four types, K1, K2, K28 and Klus, encoded by extrachromosomal elements associated with viral particles in the form of dsRNA. This work aims to characterize a killer toxin of S. cerevisiae ACB-K1 and to test its antagonistic activity in post-harvest citrus pathogens. The isolate ACB-K1 showed activity killer on sensitive yeast (S. cerevisae NCYC 1006) besides the phytopathogenic P. digitatum, but did not present inhibition against the pathogen G. citri-aurantii. The killer toxin showed maximum activity at pH 4.1 at 22 ° C for both a sensitive yeast and the phytopathogenic P. digitatum. The toxin presented stability at pH range from 4.1 to 6.0, after a 24h incubation at 22 ° C on the fungus. The ACB-K1 isolate showed dsRNA and two forms were detected (LA and M-dsRNA), suggesting that a genetic basis for a toxin production is extrachromosomal, confirmed by curing the killer phenotype at 40 ° C. The fractions obtained by exclusion chromatography Sephadex G75 gel, de... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Luiz Carlos Forti / Coorientador: Maria Izabel Camargo-Mathias / Banca: Roberto da Silva Camargo / Banca: André Arnosti / Banca: Juliane Floriano Lopes Santos / Banca: Ivone Paschoal Garcia / Resumo: O controle biológico tem recebido atenção dos pesquisadores, principalmente devido aos movimentos, de preservação do ambiente. Têm sido amplamente aplicado em espécies consideradas importantes pragas agrícolas, porém não indicado para as formigas cortadeiras. Tais formigas apresentam um conjunto de estratégias físicas, químicas e comportamentais que as operárias realizam a fim de evitar a própria contaminação e da colônia. Entretanto alguns microorganismos conseguem causar mortalidade de alguns membros da colônia, como os fungos entomopatogênicos. Pretende-se fornecer conhecimentos básicos para desenvolvimento de novas estratégias de controle microbiano das formigas cortadeiras em um futuro próximo. Para tanto estudamos quatro fungos com grande potencial patogênico, Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana, Aspergillus flavus e Trichoderma asperellus. Primeiramente foram estudados a patogenicidade dos fungos (entomopatogeno e oportunista) em operarias isoladas da colônia. Estudou-se a susceptibilidade de larvas e adultos de formigas cortadeiras Atta sexdens rubropilosa a conídios de B. bassiana, por meio de técnicas histológicas e de microscopia. Finalmente encapsulados com conídios foram veiculados para o jardim de fungo simbionte visando o controle de mini colônias em laboratório. Propomos a elaboração de novas alternativas aos manejos existentes. / Abstract: Biological control has received attention of the researchers, mainly due to the movements, of preservation of the environment. They have been widely applied in species considered important agricultural pests, but not indicated for leaf cutting ants. These ants present a set of physical, chemical and behavioral strategies that the workers realize in order to avoid the own contamination and the colony. However, some microorganisms can cause mortality of some members of the colony, such as entomopathogenic fungi. It is intended to provide basic knowledge for the development of new strategies for microbial control of leaf-cutting ants in the near future. For this, we studied four fungi with great pathogenic potential, Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana, Aspergillus flavus and Trichoderma asperellus. First, the pathogenicity of fungi (entomopathogen and opportunist) was studied in workers isolated from the colony. The susceptibility of larvae and adults of leaf-cutting ants Atta sexdens rubropilosa to B. bassiana conidia was studied by means of histological and microscopy techniques. Finally encapsulated with conidia were conveyed to the symbiotic fungus garden aiming the control of mini colonies in the laboratory. We propose the elaboration of new alternatives to existing management. / Doutor

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, Programa de Pós-Graduação em Fitopatologia, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-05-13T16:33:42Z No. of bitstreams: 1 2016_SergioMiguelVélezZambrano_Parcial.pdf: 6771626 bytes, checksum: 2830fed5ee5c131a9b1916181d9c468e (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2016-05-20T12:47:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_SergioMiguelVélezZambrano_Parcial.pdf: 6771626 bytes, checksum: 2830fed5ee5c131a9b1916181d9c468e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-20T12:47:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_SergioMiguelVélezZambrano_Parcial.pdf: 6771626 bytes, checksum: 2830fed5ee5c131a9b1916181d9c468e (MD5) / Foi analisado um total de 80 exsicatas provenientes principalmente de Mato Grosso (Parques Estaduais Ricardo Franco e Serra Azul) e outras aréas de Cerrado do Distrito Federal. Descreveu-se um total de 42 fungos, sendo estes: 7 hifomicetos (Periconiella campo-grandensis, P. qualea-grandiflorae, Phaeoidiomyces sp., Parastenella sp., Trichomatomyces byrsonimae, Vesiculohyphomyces sp. e um provável gênero novo de hifomiceto; 3 celomicetos (Asterostomella dillenicola, Geastrumia polystigmatis, e um provável gênero novo); 32 ascomicetos teleomórficos (Asterina sp., A. banisteriae, A. diplocarpa, A. indecora, Irenopsis banisteriae, Johansonia sp., Lembosia sp. em Miconia sp., Lembosia sp. em Pouteria torta, L. dominguensis, Meliola sp. em Bahunia sp., M. alibertiae, M. desmodii – laxiflori, M. kernii, M. sorindeiae, M. stizolobii, M. voacangae, Micropeltis sp., Nematostigma sp., Pallawaniella orbiculata, Phaeodimeriella guarapaiensis, Phillipsiella sp., Phyllachora spp., P. astronii, P. maprouneae, P. puncta subs. dalbergiicola, P. qualeae, P. pouteriae, Rhynchomeliola lomatiae. Assim, foram estudadas 27 espécies conhecidas, 13 prováveis espécies novas e 2 prováveis gêneros novos. / A total of 80 herbarium specimens of fungi collected in the Distrito Federal, and Mato Grosso (State Parks: Ricardo Franco and Serra Azul), were studied. A total of 42 fungi were detected being 7 hyphomycetes (Periconiella campo-grandensis, P. qualea-grandiflorae, Phaeoidiomyces sp., Parastenella sp. , Trichomatomyces byrsonimae, Vesiculohyphomyces sp. and a probably new genus; 3 coelomycetes (Asterostomella dillenicola, Geastrumia polystigmatis, and a probably new genus); 32 ascomycete sexual morphs (Asterina banisteriae, A. diplocarpa, Asterina sp, A. indecora, Irenopsis banisteriae, Johansonia sp., Lembosia dominguensis, Lembosia spp. in Miconia sp., Lembosia sp. in Pouteria torta, Meliola alibertiae, M. desmodii -laxiflori, M. kernii, M. sorindeiae, Meliola sp. in Bauhinia sp., M. stizolobii, M. voacangae, Micropeltis spp., Nematostigma sp., Pallawaniella orbiculata, Phaeodimeriella guarapaiensis, Phillipsiella sp., Phyllachora astronii, P. maprouneae, P. puncta subs. dalbergiicola, P. qualeae, P. pouteriae, Phyllachora spp., Rhynchomeliola lomatiae. Thus, this study covered a total of 27 known fungal species, 13 provably new species, and 2 probably new genera.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-graduação em Agronomia, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-05-13T16:26:10Z No. of bitstreams: 1 2016_MarceloTavaresCastro_Parcial.pdf: 3623077 bytes, checksum: a0fd0f3b712241876bdf3cc0c4ab1cac (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2017-01-06T10:49:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_MarceloTavaresCastro_Parcial.pdf: 3623077 bytes, checksum: a0fd0f3b712241876bdf3cc0c4ab1cac (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-06T10:49:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_MarceloTavaresCastro_Parcial.pdf: 3623077 bytes, checksum: a0fd0f3b712241876bdf3cc0c4ab1cac (MD5) / O mogno (Swietenia macrophylla King) é uma espécie florestal extremamente apreciada pela qualidade de sua madeira, plasticidade silvicultural e beleza ornamental. O seu corte em áreas naturais foi tão abusivo que atualmente é uma espécie protegida e ameaçada de extinção. Apesar disso, o cultivo do mogno tem se estabelecido em diversas partes do mundo, inclusive no Brasil, tanto em plantios comerciais, quanto na arborização de diversas cidades. Porém, um dos principais entraves para o estabelecimento pleno de plantios maciços de mogno consiste no aparecimento de pragas, sobretudo da Hypsipyla grandella Zeller (Lepidoptera: Pyralidae), considerada a principal praga da espécie. Por conta disso, estudos a respeito da sanidade do mogno estão concentrados nesse inseto e outros organismos danosos praticamente não têm sido relatados e são, muitas vezes, subestimados. Com base nisso, esse trabalho teve como objetivo principal buscar agentes de biocontrole da H. grandella, e avaliar quais espécies de ácaros e fungos ocorrem em mogno nas condições do Distrito Federal. O trabalho está dividido em oito capítulos. No primeiro capítulo, frutos de mogno foram analisados quanto à predação por H. grandella, revelando que muitos dos frutos caídos coletados foram atacados e consumidos pelo inseto. No segundo capítulo, um método de criação da H. grandella com o uso de sementes de mogno foi estabelecido, de forma a fornecer insetos para bioensaios seletivos. No terceiro capítulo, um isolado do fungo entomopatogênico Beauveria bassiana (Bals.) Vuill foi caracterizado e testado quanto a sua patogenicidade em lagartas de H. grandella, com 70% de mortalidade. Já no quarto capítulo, estirpes de Bacillus thuringiensis Berliner foram testadas para averiguar a sua toxicidade em lagartas de H. grandella e determinar a CL50 das melhores estirpes e de toxinas Cry individuais. Os resultados indicaram haver sinergismo entre essas toxinas. No quinto capítulo, as melhores estirpes dos bioensaios foram utilizadas de forma sistêmica em mudas de mogno para averiguar o potencial endofítico da bactéria e o quanto ela pode causar mortalidade em lagartas através da aplicação no solo. Nesse capítulo, uma estirpe em especial (S1905) teve uma eficiência de 88% para o controle da H. grandella de forma sistêmica. No sexto capítulo são apresentadas duas novas ocorrências de ácaros plantícolas associados ao mogno no mundo (Aceria sp. e Eutetranychus banksi McGregor), com a apresentação de uma nova espécie de Eriophyidae. No sétimo capítulo foi verificada a ocorrência de fungos em sementes de mogno coletadas em Brasília e um fungo patogênico foi encontrado, Fusarium oxysporum Schlecht. Por fim, no oitavo capítulo, dois novos fungos foliares são descritos para o mogno, Phomopsis sp. e Phyllosticta swieteniae Garcia. Esse trabalho mostrou que o mogno, apesar de tão conhecido, é pouco estudado quanto a sua sanidade e que muitos organismos estão associados a essa espécie, podendo, muitos deles, serem específicos. Além disso, novas formas de controle são apresentadas para a H. grandella, sua principal praga, de forma a reduzir a pressão do uso de produtos químicos e incorporar o seu uso em programas de manejo integrado. / Mahogany (Swietenia macrophylla King) is a forest species appreciated by the quality of its woods, silvicultural plasticity and ornamental beauty. Your cut in natural areas was so abusive that currently is a protected and endangered species. Nevertheless, mahogany cultivation has been established in various parts of the world, including Brazil, both in commercial plantations, and the plantation of trees in several cities. However, a major obstacle to the full establishment of mahogany massive plantations is the appearance of pests, particularly the Hypsipyla grandella Zeller (Lepidoptera: Pyralidae), a major pest of the species. Because of this, studies about the sanity of mahogany are concentrated in this insect and other harmful organisms have hardly been reported and are often underestimated. Based on this, this work aimed to conduct studies regarding H. grandella, especially as its control using biocontrol agents and describe the main harmful organisms associated with the species in Distrito Federal, Brazil. This work is divided into eight chapters. In the first chapter, mahogany fruits were analyzed about the predation by H. grandella, revealing that many of the collected fallen fruits were attacked and eaten by the insect. In the second chapter, a method of creating H. grandella using mahogany seeds was established in order to provide insects for selective vioassays. In the third chapter, an isolate of the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana (Bals.) Vuill was characterized and tested about your pathogenicity in H. grandella caterpillars, with 70% of mortality. In the fourth chapter, strains of Bacillus thuringiensis Berliner were tested to determine their toxicity in H. grandella caterpillars and determine the LC50 of the best strains and the individual toxins Cry. The results showed synergism between these toxins. In the fifth chapter, the best strains of bioassays were used systemically in mahogany seedlings to determine the potential of endophytic bacteria and how it can cause mortality in caterpillars when applied in the soil. In this chapter, a strain in particular (S1905) had 88% of efficiency to control H. grandella systemically. The sixth chapter presents two new occurrences of plant inhabiting mites associated with mahogany worldwide (Aceria sp. and Eutetranychus banksi McGregor), with the presentation of a new Eriophyidae. In the seventh chapter, the occurrence of fungi in mahogany seeds collected in Brasilia was verified and a pathogenic fungus was found, Fusarium oxysporum Schlecht. Finally, in the eight chapter two new foliar fungi are described for mahogany, Phomopsis sp. and Phyllosticta swieteniae Garcia. This work has shown that mahogany, although as known, is little studied about your sanity and many organisms are associated with this species, and may many of them to be specific. Moreover, new forms of control are presented to H. grandella, a major pest of mahogany, in order to reduce the pressure of use of chemicals and incorporate their use in integrated pest management programs.

Submitted by LIVIA FREITAS (livia.freitas@ufba.br) on 2016-07-11T17:27:50Z No. of bitstreams: 1 Tese de Doutorado de Auristela.pdf: 1377549 bytes, checksum: b9feb4e0fa2f49f0d6e56de4665b6a83 (MD5) / Approved for entry into archive by LIVIA FREITAS (livia.freitas@ufba.br) on 2016-07-11T17:29:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese de Doutorado de Auristela.pdf: 1377549 bytes, checksum: b9feb4e0fa2f49f0d6e56de4665b6a83 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-11T17:29:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese de Doutorado de Auristela.pdf: 1377549 bytes, checksum: b9feb4e0fa2f49f0d6e56de4665b6a83 (MD5) / O objetivo desta pesquisa foi o de investigar e desenvolver uma metodologia para valoração de patentes, fundamentada em métodos e modelos retirados da literatura, inter-relacionada com técnicas, classificações, desenvolvimento científico e tecnológico no contexto socioeconômico brasileiro. Pressupõe-se que independentemente do modelo empregado, o cerne é uma base de dados fidedigna. Assim, a partir dela, é possível ter valorações com maior possibilidade de evidenciar a realidade socioeconômica e, consequentemente, com maior poder no processo de negociação. O proceder metodológico utilizado foi, primeiramente, a estruturação da mensuração do valor a partir de concepções teóricas existentes, após, foram definidas estratégias para utilização dos modelos encontrados na literatura, e, finalmente, a aplicação prática à patente de invenção, objeto deste estudo. Os resultados sugerem que a subjetividade não pode impactar a avaliação ao ponto de não se ter base plausível para a mensuração do valor da capacidade inventiva, à medida que, também, não pode cercear a criatividade, a inteligência e a inovação que tem transformado positivamente a vida em sociedade.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2015. / Submitted by Patrícia Nunes da Silva (patricia@bce.unb.br) on 2016-01-15T14:22:33Z No. of bitstreams: 1 2015_CarolinaDaSilvaCaniellesCaprara_Parcial.pdf: 17043 bytes, checksum: aa3a4af2c2797df0cbf341b8e65abd48 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2016-01-15T14:23:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_CarolinaDaSilvaCaniellesCaprara_Parcial.pdf: 17043 bytes, checksum: aa3a4af2c2797df0cbf341b8e65abd48 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-15T14:23:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_CarolinaDaSilvaCaniellesCaprara_Parcial.pdf: 17043 bytes, checksum: aa3a4af2c2797df0cbf341b8e65abd48 (MD5) / Proteases constituem um dos grupos de enzimas industriais mais importantes, com participação na indústria de detergentes, couro, alimentos e medicamentos. A indústria de detergentes é uma grande consumidora de enzimas hidrolíticas. Novas metodologias que possibilitem a purificação de biomoléculas são de grande interesse para a indústria pelas suas potenciais aplicações. O objetivo principal deste trabalho foi produzir, purificar e caracterizar proteases extracelulares de Penicillium restrictum cultivado sob fermentação submersa. A cepa de Penicillium restrictum isolada do solo do Cerrado foi capaz de produzir proteases extracelulares após 7 dias de cultivo a 28°C e 150 rpm em meio contendo farelo de trigo. Após os 7 dias de cultivo o filtrado do meio fermentado foi submetido ao processo de ultrafiltração em membrana de 100 kDa e a fração ultrafiltrada foi adicionada ao SMDFA em diferentes condições, sendo avaliada a purificação através de um planejamento fatorial 2³ com três repetições no ponto central. Os resultados mostraram que o SMDFA foi eficaz na partição das proteases presentes na fração < 100 kDa para a fase pobre em micelas, apresentando um coeficiente de partição (k) menor que 1 para todos os sistemas testados. O sistema 3 apresentou 80 de balanço de massas e 138,24% de rendimento. Baseado nos valores de k e nos valores do balanço de massa e do rendimento, o sistema contendo 10% Triton X114, 10% de caldo e separado a 31°C foi escolhido para dar continuidade ao processo de purificação da enzima de interesse. A fração pobre em micelas, foi ultrafiltrada em membrana de 30 kDa e o fator de purificação desta fração foi igual a 10,4. A purificação parcial de duas proteases extracelulares foi confirmada por SDS-PAGE seguido de zimograma. As bandas com atividade proteolítica revelaram pesos moleculares de aproximadamente 19,2 e 30,5 kDa. As proteases parcialmente purificadas apresentaram atividade máxima em pH 8,0 e a temperatura ótima foi estimada em 55°C. A enzima foi levemente inibida por PMSF e bastante inibida pelos íons metálicos Fe e Zn e o íon metálico Mg+2 induziu um aumento da atividade enzimática. As enzimas parcialmente purificadas foram aplicadas junto a detergentes comerciais apresentando potencial para possível aplicação na indústria de detergentes. / Proteases are one of the largest groups of industrial enzymes, participating in the detergent industry, leather, food and medicine. The detergent industry is a large consumer of hydrolytic enzymes. New methodologies for the purification of biomolecules are of great interest to the industry for its potential applications. The aim of this work was to produce and purify extracellular proteases from Penicillium restrictum under submerged fermentation. The strain of Penicillium restrictum isolated from cerrado soil was able to produce extracellular protease after 7 days of cultivation at 28°C and 150 rpm in medium with wheat bran. After 7 days of fermentation, broth culture was submitted to ultrafiltration process through a membrane of 100 kDa. Ultrafiltered fraction was added to SMDFA under different conditions, purification being evaluated through a factorial design 2³ with three replications at center point. The results showed that the SMDFA was effective in partitioning of proteases present in the fraction <100 kDa poor phase micelles, with a partition coefficient (k) less than 1 for all tested systems. The system 3 showed 80 mass balance and 138.24% yield. These results being the best mass balance and the best performance. Based on the k values in the mass balance and income values, the system containing 10% Triton X-114, 10% of broth and separated at 31°C was chosen to continue the process of purification of the enzyme of interest. Micelles poor fraction was ultrafiltered through a membrane of 30 kDa and the purification factor of this fraction was equal to 10.4. The partial purification of two extracellular proteases was confirmed by SDS-PAGE followed by zymography. The proteolytic activity showed bands with molecular weights of approximately 19.2 and 30.5 kDa. The partially purified protease showed maximum activity at pH 8.0 and the optimum temperature was estimated at 55 ° C. The enzyme was slightly inhibited by PMSF and quite inhibited by metal ions Fe and Zn and the metal ion Mg+2 induced an increased enzyme activity. Partially purified enzymes were applied to commercial detergent Ypê Premium® where the detergent has potential for possible application in the detergent industry aiding the detergent in removing proteinaceous stains.