Orientador: Rejane Maira Goes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-14T18:19:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinto_MariaEtelvina_D.pdf: 7979906 bytes, checksum: 0558bfd8fbc931f0f8dfcc8ad0957763 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: O gerbilo da Mongólia (Meriones unguiculatus) tem sido utilizado de maneira crescente em estudos sobre o sistema genital masculino. Alguns aspectos da espermatogênese e o ciclo do epitélio seminífero dessa espécie são conhecidos, mas investigações sobre o desenvolvimento pós-natal do testículo e diferenciação das suas principais populações celulares são incipientes. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar os eventos envolvidos com a diferenciação das células germinativas e de Leydig durante o desenvolvimento pós-natal, estabelecer o período de maturação testicular, e descrever a dinâmica das populações de células de Leydig do nascimento à senilidade. Foram utilizados gerbilos machos com 1-6 dias, 1-8 semanas, 3 e 18 meses de idade. Os diferentes tipos celulares foram identificados com base em microscopia de luz de alta resolução, microscopia eletrônica de transmissão e imunocitoquímica para marcadores específicos da linhagem germinativa (VASA) e das células de Leydig adultas (enzimas 3ß-hidroxiesteróide desidrogenase - 3ß-HSD e 11ß-hidroxiesteróide esteróide desidrogenase 1- 11ß-HSD1). Reações imunocitoquímicas para o receptor de andrógeno (AR), para o marcador de células em proliferação (PCNA) e técnica para marcação de células apoptóticas (TUNEL), bem como análises estereológicas dos componentes testiculares e determinação dos níveis séricos de testosterona e estrógeno também foram efetuadas. O processo de migração dos gonócitos para a membrana basal no gerbilo se estende até a segunda semana pós-natal, sendo seguido da sua rápida diferenciação em proespermatogonias. Diferentemente de outros roedores, os eventos relativos à maturação dos gonócitos e sua diferenciação em células da linhagem espermatogonial é mais longo, ocorrem assincronicamente entre os cordões seminíferos e estão associados à perda de sensibilidade ao andrógeno. O desenvolvimento da população de células de Leydig adultas (CLA) envolve quatro estágios progressivos de maturação: as células de Leydig adultas progenitoras, as recém-formadas, as imaturas e as maduras, as quais surgiram, respectivamente com duas, quatro, cinco e seis semanas de idade. As células de Leydig adultas maduras exibem núcleo excêntrico e irregular e um canalículo citoplasmático perinuclear. Também apresentam heterogeneidade funcional em relação à expressão do AR e da enzima 11ß-HSD1. As mudanças que ocorrem no insterstício testicular do gerbilo durante o desenvolvimento pós-natal são muito similares às encontradas em outros roedores, no entanto, o número de células de Leydig fetais permanece constante até a senilidade. Adicionalmente, o surgimento e aumento da população de células de Leydig adultas ocorrem mais tardiamente em relação a outros roedores. A análise histológica indicou que a maturidade testicular no gerbilo ocorre por volta da décima segunda semana de idade. Os níveis séricos de testosterona aumentaram expressivamente a partir da sexta semana de idade, enquanto os de estrógeno permaneceram constantes até a décima segunda semana de idade. Nos animais senis houve uma queda acentuada de ambos os hormônios. O comprometimento da síntese de esteróides nesse último período decorre do prejuízo funcional das CLA. O presente estudo fornece um panorama abrangente do desenvolvimento testicular do gerbilo da Mongólia, ampliando o conhecimento sobre a biologia reprodutiva dessa espécie e proporcionado os fundamentos para o desenvolvimento de estudos experimentais. / Abstract: The Mongolian gerbil (Meriones unguiculatus) has been increasingly used with studies on the male genital system. Some aspects of spermatogenesis and the seminiferous epithelium cycle of this species are known, but investigations about the postnatal development of testis and differentiation of the main cell populations are incipient. The objective of this study was to evaluate the events involved in differentiation of germ cells and Leydig cells during postnatal development, establish the period of testicular maturation, and describe the dynamics of Leydig cells population from birth to senility. Male gerbils were used with 1-6 days, 1-8 weeks, 3 and 18 months of age. The different cell types were identified based on light microscopy, high-resolution transmission electron microscopy and immunocytochemistry for specific markers of germ line (VASA) and adult Leydig cells (enzyme 3 ß-hydroxysteroid dehydrogenase - 3 ß-HSD and 11 ß- hydroxysteroid steroid dehydrogenase 1 - 11 ß-HSD1). Reactions observed for the androgen receptor (AR), for cell proliferation marker (PCNA), technique for marking apoptotic cells (TUNEL), stereological analysis of testicular components and determination of serum levels of testosterone and estrogen were also made. The process of gonocytes migration to the basement membrane in the gerbil extends to the second postnatal week, being followed by their rapid differentiation to proespermatogonia. Unlike other rodents, the events on the gonocytes maturation and differentiation into espermatogonial cell lineage are longer, occur asynchronously between the seminiferous cords and are associated with loss of sensitivity to androgen. The development of the adult Leydig cells (ALC) population involves four progressive stages of maturation: the adult Leydig cell progenitor, newly formed, immature and mature, which appeared respectively with two, four, five and six weeks of age. Mature ALC exhibit irregular and eccentric nuclei and a perinuclear cytoplasmic canaliculus. Also present functional heterogeneity in expression of AR and the enzyme 11 ß-HSD1. The changes occurring in gerbil testicular insterstitium during postnatal development are very similar to those found in other rodents, however, the number of fetal Leydig cells remains constant until senility. Additionally, the emergence and increase of ALC population occur later in relation to other rodents. Histological analysis indicated that the testicular maturity in the gerbil occurs around the twelfth week of age. Serum levels of testosterone significantly increased from the sixth week of age, while the estrogen remained constant until the twelfth week of age. In senile animals there were a sharp fall of both hormones. The impairment of the steroid synthesis in this last period comes from the functional injury of the CLA. This study provides a comprehensive overview of the testicular development of the Mongolian gerbil, expanding knowledge about the reproductive biology of this species and providing the foundation for the development of experimental studies. / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Sebastião Roberto Taboga / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-22T21:03:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fochi_RicardoAlexandre_D.pdf: 82352124 bytes, checksum: 0b04a033b507e3af74ad263a5b3faa8a (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: A próstata, glândula do sistema genital que tem origem embrionária a partir do seio urogenital, não é exclusiva do sistema reprodutor masculino, sendo também encontrada em fêmeas de vários mamíferos, incluindo humanos e roedores. No macho ela pode apresentar-se altamente desenvolvida em razão da maior quantidade do hormônio testosterona, e, apesar de pouco desenvolvida em fêmeas, devido à baixa quantidade desse mesmo tipo hormonal, é uma glândula funcional. Em fêmeas adultas de gerbilos, a próstata possui uma localização parauretral, exibindo íntimo contato com a parede proximal e medial da uretra, a qual é homóloga a próstata ventral de roedores machos. Embora se conheça a influência da progesterona na fisiologia do sistema reprodutor feminino e masculino, poucos estudos exploram a sua influência, especificamente, sobre a glândula prostática. Desta forma, este trabalho avaliou os aspectos morfofuncionais da glândula prostática masculina e feminina, resultantes da influência da progesterona, e de suas interações com o estradiol e a testosterona. Para isso, gerbilos machos e fêmeas foram castrados cirurgicamente no início do período puberal, aos 45 dias de idade. Ao completarem 90 dias de idade, os gerbilos receberam doses subcutâneas de progesterona ou desse somado a estradiol e testosterona, durante 14 dias. Nos animais castrados de ambos os sexos a próstata mostrou uma morfologia regredida, com uma redução significativa na sua capacidade de secreção, da quantidade de células receptoras de androgênio (AR) e receptoras de estrógeno ? (ER?), porém sem alterar a marcação para receptor de estrógeno ? (ER?). Dessa forma, a castração cirúrgica foi bastante importante, uma vez que permitiu mimetizar de forma satisfatória um ambiente prostático com baixos níveis hormonais. Nos dois sexos, a administração de progesterona isoladamente conseguiu reverter alguns desses efeitos, com uma melhora considerável no padrão secretório da glândula, porém estruturalmente essas mudanças ocorreram de forma moderada. Nesses animais, foi observado um aumento expressivo dos ERs ? e ?, além da presença de células receptoras de progesterona (PR). Em relação aos ARs foi evidenciado que a progesterona pode apresentar características indutoras ou inibitórias dependendo da sua concentração. O tratamento, simultâneo com a progesterona, de estradiol e testosterona desencadeou uma reestruturação glandular mais intensa nos machos e fêmeas, resultando em hipertrofia e hiperplasia do epitélio e do estroma glandular, recuperação do padrão de secreção e amplitude alveolar. Essas características, no entanto, foram acompanhadas pelo surgimento de lesões prostáticas como neoplasias intraepiteliais e o surgimento de debris celulares. A interação da progesterona com o estradiol também regulou positivamente os AR, ER? e ER?, porém não apresentou qualquer efeito sobre os PRs quando comparado aos animais tratados somente com progesterona. Em adição, nesses animais houve um aumento acentuado da proliferação celular, o qual foi contrabalanceado pelo aumento também do índice de morte celular. Nos animais tratados com progesterona e testosterona, a próstata também se desenvolveu e mostrou um aumento das células AR-positivas e do índice apoptótico, havendo, entretanto uma redução dos ER?, ER? e PR. Dessa forma, é razoável concluir que a próstata feminina e masculina comporta-se de forma bastante semelhante frente à ação dos hormônios progesterona, estradiol e testosterona. Ademais, embora a progesterona apresente efeitos estruturais razoáveis na glândula prostática, a sua interação com o estrógeno e a testosterona é capaz de promover uma intensificação desses efeitos, sem recriar, porém um ambiente homeostático semelhante aos dos animais intactos. A progesterona também mostrou ser um fator regulador em potencial da atividade proliferativa e apoptótica prostática, opondo-se aos efeitos da testosterona e do estradiol. Outro fator importante é a descoberta de que a progesterona pode induzir ou inibir a presença de células AR-positivas na glândula, e que esse dualismo funcional é resultado do efeito dose-dependente desse hormônio sobre a próstata / Abstract: The prostate is a gland of reproductive system that arises from the urogenital sinus, being located around the urethra below the bladder. The existence of this gland is not exclusive of the male reproductive system, being found in females of various species, including rodents and humans. In the male, it can be highly developed due to the increased amount of the testosterone, and although poorly developed in females, due to the low quantity of this hormone, it is a functional gland. The prostate of female gerbils has a paraurethral location, showing a closer contact with the proximal and medial urethra wall, being homologous to the ventral prostate of male rats. This study evaluates the morphofunctional aspects of the prostate gland in males and females, regarding the influence of progesterone, and their interactions with estradiol and testosterone. For this, male and female gerbils were surgically castrated in early pubertal period, at 45 days of age. At 90 days of age, the gerbils received subcutaneous doses of progesterone alone or associated to testosterone or estradiol during 14 days. In castrated animals of both sexes, prostate showed a regressed morphology, with a significant reduction in its secretion capacity, the amount of androgen receptor cells (AR) and estrogen receptor ? (ER?), but without changing the labeling for estrogen receptor ? (ER?). Thereby, surgical castration was very important, since it allowed mimetize a prostatic environment with low hormone levels. In both sexes, the administration of progesterone alone could reverse some of these effects with a considerable secretion improvement, but structurally these changes occurred in a moderate way. In these animals, we observed a significant increase of ER ? and ?, besides the presence of progesterone receptor (PR) cells. Regarding ARs, it was shown that progesterone can have inductor or inhibitory characteristics depending on its concentration. The treatment with progesterone plus estradiol and progesterone plus testosterone triggered a more intense prostate restructuration in male and female, resulting however in a hypertrophy and hyperplasia of the glandular epithelium and stroma, besides recovery of the alveoli amplitude and pattern of cellular secretion. These characteristics, however, were followed by the development of prostatic lesions like intraepithelial neoplasia and cellular desquamation. The progesterone and estradiol interaction also upregulated the AR, ER? and ER?, however had no effect on the PRs when compared to the animals treated with progesterone alone. In addition, in these animals there was a marked increase in cellular proliferation, which was counterbalanced by increased cell death. In animals of either sex treated with progesterone and testosterone, the prostate also became developed and showed an increase of AR-positive cells and apoptotic index, although there was a reduction of ER?, ER? and PR. Thus, it is reasonable to conclude that the female and male prostate behaves similarly after the progesterone, estradiol and testosterone administration. Moreover, although the progesterone has reasonable structural effects on the prostate gland, its interaction with estrogen and testosterone can intensificate these effects, but do not recover a homeostatic environment similar to that of intact animals. The progesterone also proved to be a potential regulatory factor of the proliferative and apoptotic activity, opposing the effects of testosterone and estradiol. Another important finding is that progesterone can induce or inhibit the presence of ARpositive cells in the gland, and this functional dualism is the result of dose-dependent effect of this hormone on the prostate / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Sebastião Roberto Taboga, Fernanda Cristina Alcântara dos Santos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-23T11:48:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Shinohara_FilipeZardini_M.pdf: 6449198 bytes, checksum: a8c73825ded0555e83a4ee262c264de8 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital quando liberada / Abstract: The abstract is available with the full electronic document when available / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Sebastião Roberto Taboga, Fernanda Cristina Alcântara Santos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-20T07:20:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_DiegoAugustoLopesda_M.pdf: 2979999 bytes, checksum: 9599710cd18bf699e32f5e46a65eb134 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A próstata feminina é uma glândula funcionalmente ativa encontrada em diversas espécies de mamíferos, incluindo humanos e roedores. Em fêmeas adultas de gerbilos, a próstata apresenta localização parauretral, exibindo íntimo contato com a parede da uretra média e distal. Esta glândula é homóloga a próstata ventral de roedores machos, sendo formada por um conjunto de glândulas e ductos inseridos em um estroma fibromuscular. O estudo da morfofisiologia prostática nas fases do ciclo estral tem demonstrado que a próstata feminina é influenciada pelas oscilações nos níveis séricos de estradiol e progesterona. Assim, tornam-se necessários estudos que avaliem o efeito da exposição ao estradiol em longo prazo, com o objetivo de observar como este esteróide atua no desenvolvimento de lesões prostáticas. Além disso, de igual importância é avaliar a interação dos estrógenos com outros esteróides circulantes, a fim de se avaliar quais associações hormonais são necessárias para manter o equilíbrio homeostático da próstata feminina do gerbilo. A partir do proposto, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da administração prolongada de estradiol, e de estradiol + testosterona, sobre a próstata de fêmeas ovariectomizadas. Para isso, as fêmeas adultas foram submetidas à intervenção cirúrgica para remoção dos ovários e, após 10 dias de recuperação, foram submetidas à administração de estradiol, e de estradiol + testosterona. Após trinta dias de tratamento, os animais foram sacrificados e as glândulas prostáticas submetidas a análises morfológicas, morfométrico-estereológicas e sorológicas. Alterações morfológicas e fisiológicas foram observadas em todos os grupos experimentais. A restrição hormonal resultante da ovariectomia causou grande regressão glandular e diminuição da atividade secretora, aspectos revertidos pela exposição dos animais ao estrógeno isolado e conjugado à testosterona. Entretanto, esses hormônios não foram capazes de reestabelecer a histoarquitetura normal do tecido. Foram observadas, inclusive, algumas lesões presentes principalmente nos grupos tratados, tais como inflamações e neoplasias intraepiteliais. A imunorreação para o ER-? foi reduzida nos núcleos do estroma prostático após castração e foi recuperado com os tratamentos. Já a localização de ER-? no núcleo das células epiteliais mostrou-se muito semelhante em todos os grupos. Sugere-se, ainda, uma atuação do estradiol na regulação dos níveis séricos de prosgesterona e testosterona. Sendo assim, conclui-se que a histoarquitetura normal da glândula nas fêmeas está relacionada ao equilíbrio entre os hormônios ovarianos e que, dentre eles, o estradiol e a testosterona desepenham papel importante na homeostasia prostática desses animais / Abstract: The female prostate is a functional gland found in several mammal species, including humans and rodents. In adult female gerbils, the prostate shows paraurethral localization, exhibiting intimate contact with medial and distal urethra wall. This gland is homologous to ventral prostate in male rodents, composed by a group of acini and ducts inserted into a fibromuscular stroma. Prostate morphophysiology estudies during estrous cycle have shown that female prostate is influenced by estradiol and progesterone serum levels oscillations. Thus, studies which evaluate the effect of long-term exposure to estradiol become necessary, in order to observe the way this steroid acts by on prostate lesions development. Furthermore, it is also important to evaluate hormonal interaction among estradiol and other serum steroids with the aim of evaluating which hormonal associations are necessary to maintain the homeostatic balance of gerbil female prostate. Hence, this study role was to evaluate the effect of estradiol and estradiol plus testosterone long-term exposure on the prostate of ovariectomized females. To make it possible, adult females underwent to surgical intervention to remove both ovaries and, after 10 days recovering, they received estradiol or estradiol plus testosterone doses. After 30 days of treatment, the animals were euthanized and de prostate glands were submitted to morphological, morphometric-estereological and serological analysis. Morphological and physiological alterations were observed in all experimental groups. Hormonal deprivation caused by castration brought glandular atrophy and decreased secretory activity. These aspects were reverted by animals exposure to isolated estrogen and estrogen plus testosterone conjugation. However, these hormones were not able to reestablish the tissue normal histoarchitecture. Some lesions were even observed mainly in tratment groups, like inflammations and intraepithelial neoplasias. The imunoreaction for ER-? decreased in prostate stroma nuclei after castration and was restablished with treatments. On the other hand, the epithelium ER-? expression was similar in all groups. It also seems that there is a role played by estradiol in testosterone and progesterone serum levels regulation. In conclusion, normal histoarchitecture of gerbil female prostate is related to ovarian hormones balance and estradiol and testosterone play an important role in prostatic homeostasis in these animals / Mestrado / Histologia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Sebastião Roberto Taboga / Resumo: A próstata é uma glândula componente do sistema genital dos mamíferos e sua principal função prostática é secretar um fluido levemente alcalino (pH 7,29) que contribui para a formação do líquido seminal. As fêmeas em certas espécies, como o roedor gerbilo da Mongólia (Meriones unguiculatus), apresentam próstata cuja morfologia se assemelha à porção ventral do complexo prostático masculino e à próstata feminina em humanos. Nas últimas décadas tem sido relatado um constante aumento da exposição a substâncias capazes de interferir na ação hormonal, conhecidas como disruptores endócrinos. O bisfenol A (BPA) pertence a uma das categorias de disruptores endócrinos presentes no meio ambiente. Estudos demonstram que a exposição a esse composto interfere negativamente na morfofisiologia prostática, favorecendo o estabelecimento de lesões pré-malignas e malignas. Além do BPA, uma das constantes problemáticas dos dias atuais é a exposição ambiental a hormônios exógenos como o estradiol (E2). Desta forma, a administração de fármacos com estrutura semelhante a hormônios esteroides pode exercer efeitos sobre a glândula, uma vez que os mesmos se ligam a seus receptores hormonais afetando a homeostasia prostática. O presente estudo teve como objetivo verificar as alterações morfofuncionais na próstata de fêmeas de gerbilo da Mongólia após tratamento perinatal com dose diária ambiental, ou seja, dose ambiental segura de BPA (50 µg/kg) e doses de 17-β estradiol (35 µg/kg), 3 vezes por semana p... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Orientador: Rejane Maira Góes / Texto em português e inglês / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-24T19:26:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Negrin_AnaCarolina_M.pdf: 3573186 bytes, checksum: 84ff9397d827717b776f6497a21bc510 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Desreguladores endócrinos (DE), como o di-n-butil ftalato (DBP), podem alterar o panorama dos hormônios esteroides ou sua ação, comprometendo o desenvolvimento testicular e a capacidade reprodutiva na vida adulta. Estudos toxicológicos mostram que ratos adultos, quando expostos a altas doses de ftalatos durante a fase de diferenciação sexual, exibem diversas anomalias reprodutivas, como agenesia do epidídimo e redução na produção diária de espermatozoides. Dados mostram que exposições a 2mg/kg/dia de DBP durante a gestação e a lactação são suficientes para prejudicar o desenvolvimento das células germinativas. Além disso, há relatos de que DE contrinuem para o aumento da adipogênese por causar alterações na sinalização celular de adipócitos. É conhecido que a obesidade masculina pode afetar a qualidade do sêmen e aumenta as taxas de infertilidade. Considerando que os ftalatos podem se acumular no tecido adiposo, ficamos interessados em avaliar os efeitos da exposição prolongada a baixas doses de DBP a as possíveis interferências do excesso de lipídeos na dieta para a função testicular e os parâmetros espermáticos de gerbilos adultos. Gerbilos fêmeas adultas, alimentadas com dieta balanceada (4% de lipídeos) ou hiperlipídica (20% de lipídeos) por oito semanas, foram acasaladas com machos normais. A prole masculina foi dividida em grupos controle (C), di-n-butil ftalato (Ph), dieta hiperlipídica (HF) e hieta hiperlipídica mais di-n-butil ftalato (HFPh). DBP (5 mg/kg/dia) foi administrado na água de beber às mães durante a gravidez e lactação e aos filhotes do desmame até a idade adulta (14 semanas). A resposta do testículo foi avaliada por meio de análises microscópicas e esterológicas, da sensibilidade de suas principais populações celulares a andrógenos e estrógenos, e da produção espermática. Também foram examinados os efeitos sobre a reserva espermática, o tempo de trânsito dos espermatozoides pelo epidídimo e a motilidade espermática. Isoladamente, baixas doses de DBP resultaram em obesidade e dislipidemia nos animais adultos. Nenhuma alteração foi observada na estrutura testicular, mas a síntese de estrógeno pelo testículo foi reduzida, resultando em tendência a diminuição na eficiência espermática. A redução no estrógeno intratesticular, após exposição ao DBP, foi acompanhada de um aumento de ~70% na expressão de ER? nos testículos, que pode ser uma resposta adaptativa aos baixos níveis deste hormônio. A ingestão crônica de dieta hiperlipídica não induziu os gerbilos adultos à obesidade, mas causou uma leve queda na eficiência espermática. Esta redução não está relacionada a alterações na estrutura testicular ou na sua capacidade esteroidogênica, mas podem estar ligadas ao comprometimento da sinalização testicular, já que foi verificada uma redução no conteúdo de AR. A exposição combinada à dieta hiperlipídica e a baixas doses de DBP atuaram sinérgica e negativamente na síntese de testosterona intratesticular, prejudicando a eficiência espermática e aumentando o tempo de trânsito dos espermatozoides pelo epidídimo. A motilidade espermática não sofreu alteração frente as exposições isoladas ou combinadas. Este estudo demonstrou que o ambiente nutricional pode interferir na resposta dos testículos frente aos ftalatos e proporciona novas informações para o entendimento das consequências da exposição aos DE para a redução na reverva espermática e fertlidade humana / Abstract: Endocrine disrupting chemicals (EDC), as di-n-butyl phthalate (DBP), can alter the scenary of steroid hormones or their action, impairing the testicular development and reproductive capacity in adulthood. Toxicological studies show that adult rats, when exposed to high doses of phthalates during sexual differentiation, exhibit several reproductive anomalies, such as agenesis of the epididymis and reduction in daily sperm production. Data show that exposures to 2mg/kg/day of DBP during gestation and lactation periods are enough to impair the development of the male germ cells. Furthermore, there are reports that EDC contribute to the increase of the adipogenesis by altering cell signaling of adipocytes and lipid metabolism. It is known that the male obesity can affect semen quality and increases infertility rates. Whereas that phthalates can accumulate in adipose tissue, we were interested in evaluating the effects of prolonged exposure to low doses of DBP and possible interferences of excess dietary fat for testicular function and spermatic parameters of adult gerbils. Adult female gerbils, fed high-fat (20% fat) or balanced diet (4% fat) for eight weeks, were mated with normal males. The male offspring was divided into control (C), di-n-butyl phthalate (Ph), high-fat diet (HF) and high-fat diet plus di-n-butyl phthalate (HFPh) groups. DBP (5 mg/kg/day) was administered in drinking water to pregnant and breastfeeding mothers and to offspring from weaning up to adulthood (14-week-old). Testis response was evaluated by means of microscopic and stereological analyses, sensitivity of its major cell populations to androgens and estrogens, steroidogenic capacity and spermatic efficiency. We also examined the effects on sperm reserves, sperm transit time through the epididymis and sperm motility. Alone, low doses of DBP resulted in obesity and dislipidemy at adulthood. No histological change was observed in testicular structure of these animals, but there was reduction in intratesticular estrogen synthtesis, resulting in a tendency to decrease in sperm production. The decrease in intratesticular estrogen after lifetime DBP exposure was accompanied by a ~70% increment in ER? content in the testis, that might be an adaptative response to low estrogen levels. Chronic intake of high-fat diet did not induce obesity in aldult gerbils, but led to a slight decrease in spermatic efficiency. This decrease was not associated with changes in testicular structure or steroidogenic capacity, because serum or intratesticular testosterone and estrogen concentrations were not altered, but it can be linked to an unbalanced in androgen receptor signaling, since it was observed a decrease in AR content. The combined exposure to high-fat diet and to low doses of DBP acted synergical and negatively on intratesticular testosterone synthesis, impairing the spermatic efficiency and increasing the sperm transit time. The sperm motility was not changed in isolated or combined exposures. This study demonstrated that fat nutritional environment may adversely affect the response of testes to phthalates, and provide new informations for understanding the consequences of exposures to ECD in decreasing human sperm counts and fertility / Mestrado / Biologia Celular / Mestra em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Rejane Maira Góes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-23T14:41:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jesus_MarianaMarcielode_M.pdf: 3839823 bytes, checksum: 5cdcc794169929d299d222355a85e2d1 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The abstract is available with the full electronic document / Mestrado / Biologia Celular / Mestra em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Sebastião Roberto Taboga / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-09T15:30:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souza_CristianiZanetoniIsraelde_D.pdf: 8114014 bytes, checksum: 02df40337836deefc11fdc588dbdccb0 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O câncer de próstata atualmente é o tumor mais comum em homens com mais de 50 anos de idade. Entre os fatores de risco que contribuem para o aumento dessa doença destaca-se o envelhecimento, período em que ocorrem acentuados desequiliorios hormonais. Há muitas dificuldades na obtenção de material humano para estudos do desenvolvimento de tumores prostáticos, pois esta questão esbarra na ética médica. Vários grupos de pesquisa vêm tentando desenvolver, caracterizar e validar modelos roedores para análise do câncer de próstata. Modelos autóctones, nos quais são estudadas as lesões prostáticas espontâneas, têm desempenhado papel relevante nas pesquisas dessa neoplasia. Além disso, inúmeras investigações têm sido feitas sobre a indução experimental de tumores na próstata de roedores de laboratório: ratos, camundongos e cobaias. Em uma primeira etapa deste trabalho, foram realizadas análises morfológicas (estruturais e ultra-estruturais), quantitativas e funcionais dos componentes celulares dos compartimentos epitelial e estromal do lobo ventral da próstata do gerbilo" velho (Meliones unguiculatus). A morfologia prostática nesses animais revelou que em uma mesma glândula puderam ser observadas regiões funcionais com epitélio secretor normal e outras áreas com alterações histopatológicas atípicas. Nesses, o declínio de testosterona esteve associado a alterações proliferativas na glândula, levando ao entendimento da importância desse andrógeno na homeostase e funcionalidade prostática. Devido a essas constatações, em uma segunda etapa, foi feita a indução experimental de tumores na próstata do gerbilo adulto, após tratamento conjugado de N-metil-N-rutrosouréia com propionato de testosterona. Depois de estabelecidos os tumores, as próstatas foram processadas para estudos rustológico, imunocitoquímico e ultra-estrutural. Os resultados mostraram que em gerbilos o surgimento de lesões prostáticas ocorreu em períodos experimentais de até 9 meses e que tanto o cancerígeno como a testosterona, associados ou não, foram indutores de neoplasias. Sugere-se que as células atípicas possam apresentar potencial invasivo pela observação da ruptura da membrana basal pelos métodos de imunocitoquímica para laminina e análise ultra-estrutural. Detectou-se também no gerbilo a expressão da proteína citoplasmática Alfa-Metilacil-CoARacemase (PS04S) em células prostáticas neoplásicas, bem como é observado no câncer prostático do homem. Assim, este trabalho é pioneiro na demonstração da expressão de P504S em roedores. A partir dos resultados apresentados constatou-se que o gerbilo é um modelo animal para estudos de carcinogênese química prostática, que somados aos dados da literatura, levarão ao melhor entendimento da biologia de lesões da próstata / Abstract: The prostate cancer is the most common tumor that attacks men from the 50's decade. Among the risk factors that contribute to this disease's increase stand out the aging process, when hormonal unbalances happen frequendy. Developmental studies of prostatic tumors have been complicated because of difficult in obtaining human material, once this question lies on medical ethics. Researchers group have had tried to develop, characterize and validate some rodent models to analyze the prostate cancer. Autoctone models used to study spontaneous prostatic lesions have performed important role to these kind of neoplasia. ln addition, lots of innstigations have been done about experimental induction of prostatic tumors in rats, mice and guinea pig. ln a first phase of the present work, it was realized in the ventral lobe of old gerbil's prostate veriones unguiculatllm) structural and ultra-structural morphological, quantitative and functional analyzes of the cellular compounds of epithelial and stromal compartments. The prostatic features of theses animaIs revealed that in a same gland could be noted functional regions containing normal secretof)' epithelium and regions completely altered, showing histopathological lesions. A testosterone concentration decrease associated to these prolifera tive sites confmns the importam role of this androgen to the prostatic homeostasis. Because of these data, in the second phase of this. work, it was done a prostatic tumors experimental induction in the adult gerbil, after conjugate treatment of N-metil-N-nitrosourea with testosterone propionate. Once the tumors were established, prostate fragments were processed for histological, immunocytocl)emical and ultra-structural studies. The results showed that in gerbils, the emergence of prostatic lesions happened in experimental periods of until 9 months and both the carcinogen and testosterone, associated or not, was able to induce these adenocarcinomas. The invase potencial of anomalus cells could be proved by ultra-structural analyz~s and by the immunocytochemical test for laminima, noted in the basal membrane disruption. On the other hand, it was observed that gerbil is one of the pioneers in expression of the citoplasmatic protein Alfa-lvletilacilCoARacemase (P504S), which is found in the neoplastic cells, likely in prostatic human cancer. Concluding, this study is pioneer in the demonstration of the P504S expression in rodents. Based on these presented data, it was verified that gerbil is a good experimental model to chemical carcinogenesis research of the prostate, which taken together with previous literature will give a better and profounder understanding of prostatic lesions / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

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However, little scientific evidence shows the effects of exposure in the reproductive system. Therefore, the aim of this study was to evaluate whether the intrauterine exposure to aluminum chloride (AlCl3) may alter the male and female ventral prostate of neonatal and adult gerbil. Two groups where formed: control and AlCl3. The pregnant females received daily doses of AlCl3 (100 mg/Kg/day) or from the dilution vehicle, from 17th to 24th gestational day. Following the birth, males and females were separated and euthanized with 1 (PN1) and 90-days-old (PN90). The ventral prostates of male and females of the experimental groups were removed and collected, and later, structural, cytochemical and immunohistochemical analysis were conducted. Furthermore, the branching pattern of the prostate in one day-old animals was described by three dimensional reconstruction. Here, we demonstrate that the Al decreases the body weight of PN1 males and females, and also reduce the anogenital distance (AGD) of PN1 females. Moreover, Al changed the prostate developmental patterns of PN1 animals, causing an increase in proliferative status and decreasing androgen receptor (AR) immunomarking. These data suggests that the aluminum-promoted changes were permanent, since these differences in AR immunomarking were also observed either in adult females or males. Therefore, we reveal that the Al acts as an endocrine-disrupting chemical, changing the antiandrogenic activity of prostate epithelial and stromal cells. / desenvolvimento prostático, desde a etapa pré-natal até a puberdade, é controlado por ações hormonais de forma que sensíveis intervenções ambientais durante estes períodos podem predispor a glândula a desenvolver lesões durante a vida senil. Com o avanço da industrialização, tem sido cada vez maior a exposição aos elementos ativos no meio ambiente. Entre esses elementos, temos o alumínio (Al), sendo o primeiro metal e o terceiro elemento químico em massa mais abundante na crosta terrestre. Independente da forma complexada que pode vir a ser encontrado, ele apresenta um efeito tóxico significativo no ser humano que podendo causar alterações no crescimento e no desenvolvimento de sistemas distintos, quando ingerido em altas doses. Porém, poucas evidências científicas demonstram os efeitos da exposição no sistema reprodutor. Assim, o objetivo desta pesquisa foi avaliar se a exposição intrauterina ao cloreto de alumínio (AlCl3) pode alterar a próstata ventral masculina e feminina de gerbilos neonatos e adultos. Foram formados dois grupos: controle e AlCl3. As fêmeas grávidas receberam doses diárias de AlCl3 (100 mg/Kg/dia) ou do veículo de diluição (solução salina 0,9%), do dia 17 a 24 de gestação. Após nascimento, os machos e fêmeas foram separados e eutanaziados com um dia (PN1) e noventa dias (PN90) de idade. As próstatas ventrais dos machos e fêmeas dos grupos experimentais foram removidas e coletadas, e posteriormente, foram realizadas análises estruturais, citoquímicas e imunohistoquímicas. Além disso, o padrão de ramificação da próstata nos animais de um dia de idade foi descrito mediante reconstrução tridimensional (3D). Os resultados demonstraram que a exposição ao Al diminuiu o peso corpóreo das fêmeas e machos PN1, e reduziu a distância anogenital das fêmeas PN1. Além disso, o Al alterou o padrão de desenvolvimento prostático de machos e fêmeas PN1, tornando estas glândulas mais proliferativas e com reduzida imunomarcação para AR. As alterações promovidas pela exposição ao Al parecem ser permanentes, visto que modificações na expressão de receptores hormonais e altos índices de proliferação celular também são observados nas fêmeas e machos adultos. Estes dados indicam que o Al agiu como um desregulador endócrino sobre a próstata, exercendo atividade antiandrogênica sobre as células epiteliais e estromais prostáticas.

Le β-carotène (Bc) est un caroténoïde connu pour son activité pro vitaminique A. La consommation de fruits et légumes riches en Bc est donc particulièrement encouragée, principalement dans les pays en développement. Cependant, au cours d'un repas, la biodisponibilité du Bc est influencée par la présence des macro et microconstituants des aliments. L'objectif général de ce travail a été d'étudier les interactions alimentaires pouvant survenir au cours des différentes étapes du processus d'absorption du Bc. La bioaccessibilité du Bc, évaluée à l'aide d'un modèle de digestion in vitro, a révélé que la quantité de Bc micellarisé des aliments de base (patate douce orange (PDO) et banane plantain) des pays du Sud se retrouve augmentée dans certaines préparations tratitionnelles. De plus, dans une simple association de deux aliments, nos résultats ont montré que la naringine de jus d'agrumes diminuait la bioaccessibilité du Bc de la PDO car ce flavanone se micellarise et entre en compétition avec le Bc. L'effet de flavanones sur l'absorption intestinale du Bc a ensuite été étudié à l'aide d'un modèle cellulaire de type Caco-2. L'ensemble des glycosides de flavanones testés, mais principalement l'hespéridine (Hes), ont augmenté l'absorption du Bc. L'expérimentation in vivo chez la gerbille n'a quant à elle pas montré d'effet de l'Hes sur la bioefficacité du Bc de la PDO. Par contre, nos données suggèrent que l'Hes, dans le cas d'un régime carencé en caroténoïdes et vitamine A, pourrait stimuler l'activité de la β,β-carotène mono-oxygénase par un mécanisme impliquant le facteur de transcription PPARγ. / Β-carotene (Bc) is a carotenoid mainly known for its provitaminic A activity. Therefore, the consumption of fruits and vegetables rich in Bc are promoted, especially in developing countries. However, during a meal, the Bc bioavailability was modulated by other macro or micronutrients from food. The main objective of this study was to evaluate food interaction occurring during the different steps of Bc absorption. The Bc bioaccessibility, evaluated through an in vitro digestion, showed that the micellarization of Bc staple foods from South countries (orange fleshed sweet potato (OFSP) and plantain) increases in some traditional food preparations. Moreover, we observed that the Bc bioaccessibility from OFSP decreases in the presence of Citrus juice because of the naringin which competes for incorporation into mixed micelles. Effects of flavanones were then assessed on intestinal Bc uptake using Caco-2 cells. Among flavanone glycosides tested, mainly hesperidin (Hes), increased Bc uptake. In vivo experimentation with gerbil did not shown any effect of Hes on the bioefficacity of Bc from OFSP. By contrast, our data suggest that under a low Bc or vitamin A free diet, Hes might enhance BCMO1 activity through its action as agonist of PPARγ.