Submitted by Fabíola Silva (fabiola.silva@famerp.br) on 2017-02-14T12:02:30Z No. of bitstreams: 1 lidianemiottobarretta_dissert.pdf: 1992056 bytes, checksum: ac02b0ad50d5f0c3528b7470603f6213 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-14T12:02:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lidianemiottobarretta_dissert.pdf: 1992056 bytes, checksum: ac02b0ad50d5f0c3528b7470603f6213 (MD5) Previous issue date: 2014-10-31 / Introduction: Hematopoietic Stem Cell Transplantation is a long, complex, and high-cost process, which demands an appropriate hospital infrastructure and a qualified multidisciplinary team. The major cause of morbidity and mortality in transplanted patients is infection. The insertion of a semi-implantable, long-term central venous indwelling catheter poses a risk of complications, such as obstruction, fracture or breakage, migration, infection, and death. Objectives: The aims of the present study were to characterize the patients undergoing hematopoietic stem cell transplantation and to identify complications related to the central venous catheter and to describe the associated complications between the variables (sex, age, diagnosis, kind of transplantation, type of catheter, site of catheter insertion, and the length of time with the catheter. Methods: This was a retrospective, quantitative study conducted at a teaching hospital in inland of São Paulo State. Transplanted patients’ names were retrieved from the medical records and from the nursing forms. Files were reviewed retrospectively. The study involved the analysis of 188 patients’ files from 2007 to 2011. Association between variables was compared using the Chi-square test and the univariate analysis. Continuous variables were compared using Student’s t-test. Independent variables were analyzed using the Mann-Whitney test, Anova and the Kruskal-Wallis test. P = 0.05 was considered statistically significant. We used the correspondence analysis and multivariate technique to analyze the categorical variables. Results: Most patients were married man with age ranging from 40 to 60 years. They worked in general services and came from the cities of São Paulo and Mato Grosso States. They were patients from the Unified Health System (SUS) diagnosed with Hodgkin's lymphoma, multiple myeloma and non-Hodgkin lymphoma undergoing autologous transplantation. The major complications were constipation, diarrhea, urinary tract infection, respiratory infection and graft versus host disease. However, most patients survived the transplant and were discharged. The Hickman catheter was the most used catheter, with a mean length of time with the catheter of 47.6 days. The fever/bacteremia complication was more incident in young males with non-Hodgkin lymphoma and autologous transplantation, who remained with the catheter for a long period in the subclavian vein. Conclusion: Characterizing the patients’ profile, identifying the diagnosis, complications of treatment, the current situation of the post transplanted patients, provide grants to nursing professionals in search of a safer practice with actions related to prevention. Complications of catheter and its relation to age, gender, medical diagnosis, type of transplant, catheter model, mean residence time and insertion site should be analyzed considering the conditioning protocol, which directly affects the occurrence of complications and injury Related catheter. / Introdução: O transplante de células tronco hematopoéticas é um processo longo, complexo, de alto custo, que exige infraestrutura hospitalar apropriada e equipe multiprofissional qualificada. As maiores causas de morbidade e mortalidade de pacientes transplantados são as infecções. Faz parte do transplante a inserção de um cateter venoso central semi-implantável de longa permanência, com risco de complicações como obstrução, fratura ou ruptura, migração, infecção e morte. Objetivos: Caracterizar os pacientes submetidos ao transplante de células tronco hematopoéticas; identificar as intercorrências associadas ao cateter venoso central e descrever a relação de correspondência entre as complicações e as variáveis: sexo, idade, diagnóstico médico, tipo de transplante, modelo de cateter, local de inserção e tempo de permanência com o cateter. Método: Estudo retrospectivo, quantitativo, realizado em um hospital de ensino do interior do estado de São Paulo, por meio do prontuário e planilhas de enfermagem de 188 pacientes transplantados entre 2007 e 2011. Foram realizados testes estatísticos de associação (qui-quadrado), de comparação univariada, teste T, para amostras independentes, Mann-Whitney, ANOVA e Kruskal-Wallis, todos ao nível de significância 0,05 e análise de correspondência e técnica multivariada para as variáveis categóricas. Resultados: A maioria dos pacientes era do sexo masculino, idade 40 a 60 anos, casada, trabalhavam na área de serviços gerais, procedentes de cidades do estado de São Paulo e Mato Grosso, atendidos pelo SUS, com diagnóstico de linfoma de Hodgkin, mieloma múltiplo e linfoma não Hodgkin, submetidos ao transplante autólogo. As complicações foram: constipação, diarreia, infecção urinária, infecção respiratória e doença do enxerto contra o hospedeiro, entretanto, a maioria sobreviveu ao transplante e teve alta hospitalar. O Hickman foi o cateter mais utilizado, com permanência média de 47,6 dias. A complicação febre/bacteremia mais incidente em jovens, sexo masculino, com Linfoma não Hodgkin e transplante autólogo, que permaneceram com o cateter por longo período, em veia subclávia. Conclusão: Caracterizar o perfil, identificar o diagnóstico, as complicações decorrentes do tratamento, a situação atual do paciente pós transplante, oferece subsídios aos profissionais de enfermagem na busca de uma prática mais segura. As complicações do cateter e suas relações com idade, sexo, diagnóstico médico, modalidade de transplante, modelo de cateter, tempo médio de permanência e local de inserção, devem ser analisadas considerando o protocolo de condicionamento, que interfere diretamente na ocorrência e agravo das complicações relacionadas ao cateter.

Há evidências de que a ciclosporina, imunossupressor utilizado nos transplantes de células- tronco hematopoéticas, impregna nos cateteres de silicone quando os mesmos são utilizados para a sua infusão; podendo a coleta de amostras para dosagem sérica do medicamento por essa via resultar em níveis falsamente elevados. Apesar de já existirem dados comprovando a possibilidade de se coletar as amostras da via do cateter venoso central não utilizada para a infusão, há escassez de estudos e também controvérsias quanto ao melhor momento para realizar o procedimento, assim como divergências quanto ao volume de sangue ideal a ser descartado. Esse ensaio clínico controlado randomizado teve como objetivo verificar o efeito do tempo transcorrido entre a interrupção da infusão de ciclosporina e a coleta das amostras na dosagem sérica do medicamento, em relação à via utilizada para a coleta e ao volume de descarte. Os sujeitos foram aleatorizados em dois grupos. No grupo A, a coleta das amostras em acesso venoso periférico, via do cateter utilizada para a infusão da ciclosporina e via não utilizada para infusão foi realizada imediatamente após a interrupção da infusão do medicamento, sendo que na última a coleta foi realizada após descarte de 5 mL e de 10 mL de sangue. No grupo B os mesmos procedimentos foram realizados, porém cinco minutos depois da interrupção. Participaram 32 sujeitos adultos, a maioria do sexo masculino (68,75%), portadores de leucemia (59,37%), com doadores aparentados (84,37%) e histocompatibilidade total (90,62%). A coleta realizada previamente ao início da infusão da ciclosporina atestou ausência desta no sangue e impregnada nos cateteres. As demais foram realizadas nos 32 sujeitos depois de 24 horas do início da infusão; em 12 do grupo A e 16 do grupo B sete dias depois; e em nove do grupo A e 13 do B 14 dias após iniciado o uso do medicamento. O principal motivo que levou à interrupção da coleta foi a transição da ciclosporina para via oral (71,87%). Inicialmente, nas análises intra sujeitos, a diferença entre a dosagem sérica obtida na via do cateter utilizada para a infusão da ciclosporina e as outras vias foi significativa (p < 0,001), enquanto entre o acesso venoso periférico e via não utilizada para a infusão, independente do volume de descarte, não houve diferença (p > 0,05). Quando realizadas as comparações entre os grupos, não foram observadas diferenças (p > 0,05) quanto à influência do tempo transcorrido entre a interrupção da infusão e a coleta das amostras de sangue, independente da via de coleta utilizada e do volume descartado. Conclui-se que a via do cateter não utilizada para infusão da ciclosporina é segura para ser utilizada na coleta das amostras para dosagem sérica desse medicamento; e o procedimento pode ser realizado imediatamente após a interrupção da infusão, desde que empregada a técnica adequada com descarte de 5 mL de sangue. Assim evita-se que o sujeito, já fragilizado e submetido a um tratamento complexo, seja exposto a mais um procedimento doloroso e associado ao estresse que é punção venosa periférica / There is evidence that cyclosporine, an immunosuppressant used in hematopoietic stem cell transplantation, impregnate in silicone catheters when they are used for its infusion; and the sample collection for serum levels of medication through this line may result in falsely elevated levels. Although there are data demonstrating the possibility to collect samples through the line of the central venous catheter not used for the infusion, there are few studies and also controversies regarding the best time to perform the procedure, as well as disagreement about the optimal volume of blood to be discarded. This randomized controlled trial aimed to verify the effect of time elapsed between discontinuation of the infusion and serum sample collection in relation to the line used for collection and volume of discard. The subjects were randomized into two groups. In group A, samples collected from a peripheral venous access, through catheter line used for cyclosporine infusion and catheter line not used for cyclosporine infusion was performed immediately after discontinuation of the drug infusion, and the last collection was performed after discarding 5ml and 10ml of blood. In group B, the same procedures were done, but five minutes after the interruption. The participants were 32 adults, most males (68,75%), with leukemia (59,37%), with related donors (84,37%), and total histocompatibility (90,62%). The collection performed prior to the start of cyclosporine infusion attested absence of cyclosporine in blood and presence of it in catheters. The others were performed in 32 subjects after 24 hours prior the start of infusion; in 12 of group A and 16 of group B after seven days; and in 9 of group A and 13 of B fourteen days after starting the medication. The main reason that led to discontinuation of the collection was the switch of cyclosporine to oral administration (71,87%). Initially, in the intra-subject analysis, the difference between the serum levels obtained in the line used for cyclosporine infusion of and other lines was significant (p < 0,001), while there was no difference between the peripheral venous access and the line not used for infusion, independently of the volume of discard (p > 0,05). When performed comparisons between groups, no differences were observed (p > 0,05) in the influence of time elapsed between discontinuation of the infusion and collection of blood samples, regardless the line used for collection and volume of discard. It is concluded that the catheter line not used for infusion of cyclosporine seems to be safe for use in serum samples collection of this medication; and the procedure can be performed immediately after discontinuation of the infusion, since used the technique with adequate discard of 5ml of blood. This avoids that the subject, already weakened and subordinated to a complex treatment, be exposed to a painful and stressful procedure such as peripheral venipuncture

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:25:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Cristiane Effting - Ciencias Saude.pdf: 411669 bytes, checksum: 16d94233a45ca7b200c1360cdad9a9d4 (MD5) Previous issue date: 2012-04-13 / Busulfan is an alkylating agent, used for conditioning patients undergoing hematopoietic stem cell transplantation (HSCT). It presents narrow therapeutic range and high variability in pharmacokinetics among patients and doses in the same patient. High plasma concentrations (> 1000 ng mL-1) have been related to toxicity, such as sinusoidal obstruction syndrome, whereas low levels (< 600 ng mL-1) have been associated with primary disease relapse or graft rejection. To avoid problems related to this treatment, therapeutic drug monitoring with dose adjustment has been proposed. Among the methods described, highperformance liquid chromatography (HPLC) is often used. This study aimed at optimizing and validating a technique to dose busulfan by HPLC coupled with photodiode array detector (PDA) and applying it to patientes undergoing HSCT in Goiás. We included eight patients in the group for therapeutic monitoring (MG) and eight in the control group (CG), i.e., with no intervention. Patients in the MG received the test dose (TD) 14 days before the treatment; after determining busulfan pharmacokinetic profile for each patient, the dose was adjusted to the therapeutic objective of 900 ng mL-1. The conditions for chromatography run were: HPLC/PDA, column ACE® C18 (150 mm x 4 mm); mobile phase methanol/water/acetonitrile (65:20:15, v/v/v); eluent flow rate of 1 mL min-1; internal standard 1,6-bis-(methanesulfonyloxy)hexane; UV detection &#955; = 276 nm; derivatization with sodium diethylcarbamate; liquid-liquid extraction with ethyl acetate after precipitation with acetonitrile. We included eight patients in the group for therapeutic monitoring (MG) and eight in the control group (CG). Results obtained: linearity, analyzed through the calibration curve, of 200 5000 ng mL-1; precision, in terms of repeatability (intra-run), of 1.25%-11.25%, and intermediary (inter-run), of 2.17%-10.71%; accuracy of 89.61%-102.18%; recovery of 89%. Half of the patients required dose increase and the mean dose administered was 1.02±0.19 mg kg-1. High variability was observed in assessed pharmacokinetic parameters: 38% variation in Css ____ between TD and conditioning regimen; half-life increased by 11%; ClT/F decreased by 30%, suggesting accumulation of busulfan when the drug is administered in a multiple dose regimen. Although lower than reported in the literature, this variation may be associated with toxicity or failure in treatment, justifying patient monitoring and enhancing validity of previous pharmacokinetic evaluation using TD regimen. Compared to the CG, this variation did not present impact on toxicity, mortality, and survival rates. Other studies with intervention during monitoring and a higher number of patients may present positive impact on the results of HSCT. / O bussulfano é um agente alquilante utilizado em regimes de condicionamento para ablação medular em pacientes submetidos a transplante de células-tronco hematopoiéticas (TCTH). Apresenta estreita faixa terapêutica e grande variabilidade farmacocinética entre pacientes e entre doses no mesmo paciente. Em altas concentrações plasmáticas (> 1000 ng mL-1), associa-se a toxicidade, como síndrome de obstrução sinusoidal, e em baixas (< 600 ng mL-1), a recaída da doença de base ou rejeição do enxerto. Para evitar problemas relacionados ao tratamento, tem sido proposta sua monitoração terapêutica com ajuste da dose. Entre as metodologias descritas, a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) é frequentemente utilizada. Este estudo objetivou otimizar e validar técnica de dosagem de bussulfano em CLAE acoplada a detector de arranjo de diodos (DAD) e aplicá-la a pacientes submetidos a TCTH em Goiás. Foram incluídos oito pacientes no grupo para monitoração terapêutica (GM) e oito no grupo controle (GC), ou seja, sem intervenção. Os pacientes do GM receberam a dose teste (DT) 14 dias antes do tratamento; após determinação do perfil farmacocinético do fármaco para cada paciente, a dose foi ajustada para o objetivo terapêutico de 900 ng mL-1. As condições cromatográficas foram: CLAE/DAD, coluna ACE® C18 (150 mm x 4 mm); fase móvel metanol/água/acetonitrila (65:20:15, v/v/v); fluxo de 1 mL min-1; padrão interno 1,6-bis-(metanosulfoniloxi)hexano; detecção UV &#955; = 276 nm; derivatização com dietilditiocarbamato de sódio; extração líquida-líquida com acetato de etila após precipitação com acetonitrila. Os resultados incluíram: linearidade, analisada pela curva de calibração, de 200 5000 ng mL-1; precisão, em termos de repetibilidade (intracorrida), de 1,25%-11,25% e intermediária (intercorrida), de 2,17%-10,71%; exatidão de 89,61%-102,18%; recuperação de 89%. Metade dos pacientes necessitou de aumento da dose e a média da dose administrada foi de 1,02±0,19 mg kg-1. Observou-se alta variabilidade nos parâmetros farmacocinéticos avaliados: variação de 38% da Css ____ entre DT e condicionamento; meia-vida aumentada em 11%; ClT/F reduzido em 30%, sugerindo acúmulo do fármaco quando administrado em esquema de dose múltipla. Embora menor do que a relatada na literatura, essa variação pode estar associada a toxicidade ou falha do tratamento, justificando a monitoração e acentuando a validade da avaliação farmacocinética prévia usando o esquema de DT. Comparada com o GC, essa variação não apresentou impacto sobre toxicidade, mortalidade e sobrevida. Outros trabalhos com intervenções durante a monitoração e maior número de pacientes podem apresentar impacto positivo nos desfechos do TCTH.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2014-09-25T17:34:38Z No. of bitstreams: 2 Dissertação_Lucianna G. N. Lemes.pdf: 2661301 bytes, checksum: c0238e41dfbe2adbd10e5ddcff7a139e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-09-26T11:31:18Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação_Lucianna G. N. Lemes.pdf: 2661301 bytes, checksum: c0238e41dfbe2adbd10e5ddcff7a139e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-26T11:31:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação_Lucianna G. N. Lemes.pdf: 2661301 bytes, checksum: c0238e41dfbe2adbd10e5ddcff7a139e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-12-20 / The calicivirus (norovirus and sapovirus) are important etiologic agents of acute gastroenteritis. Recent studies show that in immunocompromised patients such as those undergoing allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (HSCT), norovirus infection can lead to worsening of symptoms and be confused with clinical symptoms of graft versus host disease (GVHD). However, calicivirus screening is not performed, routinely, as part of the patients’ follow-up laboratory exams. The main objective of this study was to evaluate the occurrence of norovirus (NoV) and sapovirus (SaV) in patients who underwent HSCT, and to conduct the molecular characterization of the samples positive for these viruses. Fecal samples were collected weekly, and serum samples were obtained every two weeks of ten patients who underwent HSCT, for a minimum period of five months and a maximum of one year. The secretor status was determined by an enzyme immunoassay and the detection of calicivirus was performed by RT-PCR using primers specific for a partial region of the gene encoding the NoV genogroup I and II (GI and GII) and SaV capsid protein. The genomic sequencing was performed for positive samples. The results showed that from ten patients participating in the study, eight had diarrhea. Among these, six (60%) had positive samples for NoV, and all of them had a secretor phenotype. The duration of NoV excretion in feces ranged from five to 143 days. Viral RNA was also detected in serum specimens, ranging from 29 to 36 days in the five patients infected with NoV. Three of the six patients had acute intestinal GVHD. Through genomic sequencing and phylogenetic analysis all NoV-positive samples were characterized as genotype GI.3, and because they had a high nucleotide identity, they were all characterized as a single haplotype. The data highlight the urgent need of the inclusion of calicivirus screening in the routine testing performed before transplantation and during follow-up of these patients. This is the first report of the occurrence of NoV in patients undergoing HSCT in Brazil. / Os calicivírus (norovírus e sapovírus) são importantes agentes etiológicos da gastroenterite aguda. Estudos recentes mostram que em pacientes imunocomprometidos, como os submetidos a transplante alogênico de células progenitoras hematopoiéticas (TACPH), a infecção por norovírus pode levar ao agravamento dos sintomas e ser confundida com quadro clínico da doença do enxerto contra o hospedeiro (DECH). Entretanto, a triagem para calicivírus não é realizada, rotineiramente, como parte dos exames laboratoriais de acompanhamento destes pacientes. O principal objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de norovírus (NoV) e sapovírus (SaV) em pacientes que foram submetidos ao TACPH e proceder à caracterização molecular das amostras positivas para estes vírus. Foram obtidas amostras de fezes, coletadas semanalmente, e de soro, a cada quinze dias, de dez pacientes que realizaram o TACPH, por um período mínimo de cinco meses e máximo de um ano. O fenótipo secretor dos pacientes foi determinado utilizando um teste imunoenzimático e a pesquisa de calicivírus foi realizada pela RT-PCR, utilizando-se iniciadores específicos para uma região parcial do gene codificante para a proteína dos capsídeos dos NoV do genogrupo I e II (GI e GII) e dos SaV. Os amplicons das amostras positivas foram submetidos ao sequenciamento genômico e análise filogenética. Os resultados obtidos revelaram que de dez pacientes participantes do estudo, oito apresentaram diarreia e vômito. Dentre esses, seis (60%) apresentaram amostras positivas para NoV, sendo que todos foram identificados como secretores. O período de excreção de NoV nas fezes variou de cinco a 143 dias. Foi também detectado RNA viral nas amostras de soro, variando de 29 a 36 dias, em cinco pacientes infectados por NoV. Três, dos seis pacientes, apresentaram DECH aguda intestinal. Através do sequenciamento genômico e análise filogenética, todas as amostras positivas para NoV, de todos os pacientes, foram caracterizadas como genótipo GI.3 dos NoV, e como foi comprovada elevada identidade nucleotídica entre elas, foram caracterizadas como um único haplótipo. Os dados obtidos ressaltam a urgente necessidade da inclusão da pesquisa de calicivírus na rotina de exames realizados antes do transplante, bem como durante o acompanhamento destes pacientes. Este é o primeiro relato da ocorrência de NoV em pacientes submetidos ao TACPH no Brasil.

Objetivos. Avaliar o papel do transplante de células hematopoiéticas (TCH) e da interleucina 6 (IL – 6) sobre vários parâmetros de estresse oxidativo em pacientes com Adrenoleucodistrofia ligada ao cromossomo X (X-ALD). Métodos. A concentração de malondialdeído (MDA), o conteúdo de carbolinas e sulfidrilas e a concentração de ácido hexacosanóico (C26:0) foram quantificados no plasma de pacientes X-ALD antes e após serem submetidos ao TCH. E, a concentração de MDA, a formação de carbonilas e a concentração de IL-6 foram quantificados em plasma e o conteúdo de glutationa reduzida (GSH) foi quantificado em eritrócitos de pacientes X-ALD com fenótipos cerebral infantil (cALD) ou assintomáticos no momento diagnóstico. Resultados. Observamos um aumento significativo na concentração de MDA em plasma de pacientes X-ALD antes e após o TCH em comparação ao grupo controle e uma redução significativa nesses valores após o transplante em comparação aos anteriores ao procedimento. Verificamos uma redução significativa no conteúdo de sulfidrilas no plasma de pacientes X-ALD antes do TCH em comparação ao grupo controle e um aumento significativo desses níveis após o TCH. Não observamos diferenças significativas no conteúdo de carbonilas no plasma de X-ALD antes e após o TCH, em comparação aos controles, apesar de observarmos uma redução significativa nesta determinação nos pacientes após o transplante em relação a antes do TCH. Os pacientes X-ALD apresentam níveis plasmáticos de C26:0 significativamente aumentados antes do TCH em comparação aos controles e, após o TCH, as concentrações de C26:0 foram reduzidas. Observamos uma correlação negativa significativa entre a medida do conteúdo de sulfidrilas e os níveis plasmáticos de C26:0 de indivíduos X-ALD antes do TCH. Também evidenciamos elevados níveis de MDA e da formação de carbonilas no plasma de pacientes cALD e assintomáticos em comparação ao grupo controle. Ainda, observamos redução significativa do conteúdo de GSH nos dois grupos testados comparados aos controles. A quantificação de IL-6 foi significativamente maior nos pacientes cALD, o que não foi observado nos pacientes assintomáticos, apesar destes mostrarem uma tendência de aumento da concentração de IL-6. Conclusões. Os resultados obtidos a partir do plasma de pacientes X-ALD antes e após o TCH demonstram que esta terapia, quando bem indicada e bem sucedida, tem alta efetividade em reduzir a concentração plasmática de C26:0 e é eficaz em reduzir a peroxidação lipídica e o dano oxidativo às proteínas nos pacientes X-ALD. Ainda, é possível relacionar o acúmulo de C26:0 e o dano oxidativo na patogênese da X-ALD. Nossos dados permitem sugerir que a lipoperoxidação e o dano oxidativo às proteínas possam de alguma forma estar envolvidos na fisiopatologia da X-ALD. Além disso, podemos presumir que, nos pacientes X-ALD assintomáticos estudados, o dano oxidativo e os aspectos inflamatórios desempenham papéis importantes na evolução e nas futuras manifestações do fenótipo neuronal. Também podemos supor que a administração de antioxidantes deve ser considerada como uma terapia adjuvante potencial para os pacientes assintomáticos e sintomáticos afetados pela X-ALD, inclusive para aqueles submetidos ao TCH. / Objective. We aimed to evaluate the role of hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) and interleukin 6 (IL – 6) on various parameters of oxidative stress in X-linked adrenoleukodystrophy (X-ALD) patients. Methods. Malondialdehyde (MDA), sulfhydryl, carbonyl and hexacosanoic acid (C26:0) levels were measured in plasma from X-ALD patients before and after HSCT. And, MDA, carbonyl and IL-6 levels were measured in plasma and reduced glutathione (GSH) content was measured in erythrocytes from X-ALD patients with different phenotype (asymptomatic and childhood cerebral (CCER patients) at diagnosis moment. Results. We observed increased levels of MDA in plasma from X-ALD before and after HSCT compared to control group, but there was a significant reduction in MDA values after transplantation compared to levels found before the procedure. We verified a significant decrease in sulfhydryl content in plasma of X-ALD patients before HSCT compared with the control group and we also verified a significant increase in the levels of sulfhydryl content after HSCT. No significant differences were observed in carbonyl content in plasma of X-ALD before and after HSCT, compared to controls. However, we observed a significant reduction of plasma carbonyl content from X-ALD patients after HSCT compared to before HSCT. X-ALD patients presented a significant increase of C26:0 plasma level before HSCT when compared to controls and an important reduction of C26:0 plasma concentration in X-ALD patients after HSCT when compared to before HSCT C26:0 levels. We observed an inverse significant correlation between sulfhydryl content and plasma C26:0 levels of X-ALD individuals before HSCT. We also evidenced high levels of MDA and carbonyl formation in plasma from CCER and asymptomatic patients compared to controls. Still, we observed a significant decrease of GSH content in both groups tested compared to controls. The quantification of IL-6 is significantly higher in CCER patients, which is not observed in asymptomatic patients, despite these patients show a tendency of increased concentration of IL-6. Conclusions. The results obtained from plasma of X-ALD patients before and after HSCT demonstrate that this therapy, when well indicated and successful, has high effectiveness in reducing C26:0 plasma and is effective in reducing lipid peroxidation and oxidative damage to proteins in X-ALD patients. Still, it is possible to relate the accumulation of C26:0 and oxidative damage in the pathogenesis of X-ALD. Our data also suggest that lipid peroxidation and protein damage may somehow be involved in the pathophysiology of X-ALD. Moreover, we can assume that in our asymptomatic X-ALD patients, oxidative damage and inflammatory issues seem to play an important role in the evolution and future manifestations of neuronal phenotype. We can also assume that the administration of antioxidants should be considered as a potential adjuvant therapy for asymptomatic and symptomatic patients affected by X-ALD, including those that are submitted to HSCT.

Purpose: This study seeks to determine the incidence of vancomycin-resistant enterococci (VRE) infection in high-risk neutropenic fever patients colonized with VRE and to determine patient characteristics associated with VRE infection. Methods: We conducted a retrospective, single-center, unmatched case-control study. Fifty-three VRE-colonized, high-risk patients with neutropenic fever were identified between January 2006 and February 2009. The two most common diagnoses/conditions included acute myeloid leukemia and hematopoietic stem cell transplantation. Data collected included days of neutropenia, days of fever, demographic data, culture results, and antimicrobial therapy. Results: Twenty of the 53 patients (38%) with VRE colonization developed a VRE infection. The most common VRE infections were bacteremias (26%). The presence of neutropenia lasting longer than 7 days was associated with the development of VRE infection in this high-risk population colonized with VRE. The timeframe to develop VRE infection varied from 1 day to 2 weeks. Conclusion: For patients colonized with VRE, approximately 38% of high-risk neutropenic patients developed a VRE infection. This is the first study to specifically evaluate the incidence of VRE infections in febrile neutropenic patients colonized with VRE. Future research into the use and efficacy of empiric VRE coverage is needed.

Bakgrund:Oral mukosit (OM) är en toxisk biverkan efter högdos cytostatikabehandling (HDC) och hematopoietisk stemcellstransplantation (HSCT). OM orsakar kliniska komplikationer samt negativa följder för patienten, som längre sjukhusvistelse, oral smärta, viktförlust och parenteral nutrition (PN).Syfte:Att undersöka om det föreligger skillnad i viktförändring och nutritionsstatus hos patienter som använder munsköljmedlet, Caphosol ® i tillägg till standardbehandling i jämförelse med standardbehandling vid behandling med HDC och HSCT.Metod:En randomiserad kontrollerad öppen studie där patienter &gt; 16 år (n=40), behandlades med HDC, inför HSCT på Akademiska universitetssjukhuset, Uppsala. Patienterna randomiserades, 1:1, till oral standardbehandling och munsköljmedlet Caphosol® (EXP n=20) eller oral standardbehandling (KTR n=20). OM, oral smärta, viktförlust och dagar av PN registrerades och analyserades från baseline till 21 dagar efter avslutad HDC.Resultat:Caphosol ® hade ingen signifikant betydelse för viktförändringar mellan EXP- och KTR-grupperna. OM-smärta debuterade senare i EXP än i KTR-gruppen. KTR gruppen använde mer PN jämfört med EXP-gruppen.Konklusion:Caphosol ® hade obetydlig inverkan på förekomst, duration och svårighetsgrad av OM under HCT vid HSCT och därmed liten effekt på nutrition och vikt. Det förelåg ingen fördel att addera Caphosol ® till oral standardbehandling. / Background:Oral mucositis (OM) is a result of cytotoxic effects of high dose chemotherapy (HDCT) administered before hematopoietic stem cell transplantation (HSCT). It is a source of negative consequences for the patient, such as longer hospitalization, oral pain, weight loss, and use of parenteral nutrition (PN).Objective:To investigate whether there is differences in weight changes and nutritional status in patients receiving mouth rinse, Caphosol®, in addition to standard oral care (OC) compared to standard OC for HDCT and HSCT.Method:A randomized, controlled open study with patients &gt; 16 years, treated with HDCT before HSCT at Akademiska University Hospital, Uppsala, Sweden. Patients randomized 1:1 to standard OC and Caphosol® (EXP, n=20) or standard OC (CTR n = 20). Oral pain, weight loss and days of PN was recorded and analysed from baseline to day 21 post HDCT.Result:Caphosol ® had no significant impact on weight changes between EXP and CTR groups. OM-pain peaked later in the EXP group than in CTR. No significance in weight change between settings. CTR group had higher use of PN compared to EXP.Conclusion:Caphosol® had little effect on frequency, duration and severity of OM and thereby little effect on nutrition and weight. There was no advantage to add Caphosol ® to standard OC.

L’infection primaire au VZV et la réactivation du VZV latent sont fréquemment observées à la suite d’une GMO ou d’une GSCO, ce qui cause de sérieuses complications chez le patient. Pour prévenir ces infections, une prophylaxie antivirale est administrée systématiquement chez tous les greffés de MO ou de SCO, alors qu’il n’existe aucun consensus sur la durée optimale d’une telle prophylaxie. Pour résoudre ce problème, notre objectif est de développer et valider une méthode ELISpot-VZV-IFN- qui permettra de suivre la reconstitution de l’immunité à médiation cellulaire anti-VZV chez les receveurs de GMO ou de GSCO et ainsi déterminer le moment opportun pour réduire ou interrompe la prophylaxie chez les receveurs de greffes de CSH. Dans un premier temps, des valeurs-seuil de la réponse à médiation cellulaire anti-VZV chez la population pédiatrique saine ont dû être générées. À la lumière de nos résultats, un enfant avec un résultat ELISpot-VZV-IFN- > 190.0 SFU/106 PBMC devrait être protégé contre une possible infection à VZV. Pour valider cette étude, une étude prospective de la reconstitution immunitaire anti-VZV a été effectuée chez 9 enfants greffés de MO ou de SCO. Nos résultats préliminaires ont montré qu’il n’y avait eu aucune reconstitution significative de l’immunité à médiation cellulaire anti-VZV dans les 18 premiers mois post-transplantation chez 8 de ces 9 enfants. Les résultats de ces expériences vont fournir d’importantes informations quant à la reconstitution de l’immunité anti-VZV à la suite d’une GMO ou d’une GSCO et pourraient permettre l’amélioration des soins apportés aux receveurs de GMO ou de GSCO. / Primary infection with VZV and reactivation of latent VZV are commonly observed following BMT and UCBT, leading to serious complications in patients. As a result, antiviral prophylaxis is systematically administered to BMT and UCBT recipients, yet there is no consensus that defines its optimal duration. To resolve this problem, our objective was to develop and validate a VZV-IFN--ELISpot with which reconstitution of VZV immunity can be followed in BMT and UCBT recipients, providing clinicians a practical tool to gauge the need for and adjust antiviral prophylaxis in individual HSCT recipients. First of all, threshold values for anti-VZV immunity in healthy pediatric subjects were generated. Based on our results, a child exhibiting > 190.0 VZV-specific SFU /106 PBMC should be protected against a possible VZV infection. To validate these results, a prospective study on the recovery of VZV-specific T cell immunity was performed on 9 children following BMT or UCBT. Preliminary results demonstrated that there was no significant recovery of VZV-specific T cell immunity in the first 18 months post-transplantation in 8 of 9 cases. Results of these experiments will yield important new information regarding reconstitution of anti-VZV immunity following BMT and UCBT and could lead to improvements in clinical management of BMT and UCBT recipients.

Le busulfan (Bu) est un composé clé de la phase de conditionnement chez les enfants subissant une transplantation des cellules souches hématopoïétiques (TCSH). Les différences inter-individuelles de la pharmacocinétique (PK) du Bu pourraient affecter son efficacité et sa toxicité. Le Bu est principalement métabolisé par la glutathion-S-transférase (GST). Nous avons étudié la relation des génotypes GSTA1, GSTM1 et GSTP1 avec la PK de la première dose de Bu et la relation avec les résultats de la TCSH chez 69 enfants recevant un régime de conditionnement myéloablatif. Le génotype GSTM1 nul a corrélé avec une exposition élevée du Bu et une faible clairance (CL) chez les patients âgés de 4 ans (p ≤ 0,04). Dans le respect du rôle fonctionnel suggéré d’haplotype GSTA1 *A2, il a été associé à des niveaux plus faibles de médicaments et des niveaux élevés de CL (p ≤ 0,03). L’effet Gène-dose a également été observé (p = ≤ 0,007). L’haplotype de GSTA1 était associé avec les résultats de la TCSH. Les porteurs de deux copies d’haplotype *A2 avaient une meilleure survie sans événement (p = 0,03). En revanche, les individus homozygotes pour haplotypes * B et *B1 ont un risque plus élevé d’atteindre la maladie veino-occlusive (MVO) (p = 0,009). Les individus porteurs de GSTM1 nul âgés de 4 ans possèdent un risque plus fréquent d’avoir la maladie du greffon contre l'hôte (GvHD) (p = 0,03). En conclusion, nous avons montré que les variantes génétiques de GST influencent la PK du BU et les résultats de la TCSH chez les enfants. Pour l'ajustement de la posologie, un modèle avec l'inclusion des facteurs génétiques et non génétiques devrait être évalué et validé dans une étude prospective. / Busulfan (Bu) is a key compound of conditioning regimen in children undergoing hematopoietic stem cell transplantation (HSCT). Inter-individual differences in Bu pharmacokinetics might affect Bu efficacy and toxicity. Since Bu is mainly metabolized by glutathione S-transferase (GST), we investigated the relationship between GSTA1, GSTM1 and GSTP1 genotypes with first-dose Bu pharmacokinetics (PK), and relationship with HSCT outcomes in 69 children receiving myeloablative conditioning regimen. GSTM1 null genotype correlated with higher Bu exposure and lower clearance in patients older than 4 years (p≤0.04). In accordance with the suggested functional role GSTA1*A2 haplotype was associated with lower drug levels and higher drug clearance (p≤0.03). Gene-dosage effect was also observed (p=≤0.007). GSTA1 haplotypes were associated with HSCT outcomes Patients with two copies of haplotype *A2 had better event free survival (p=0.03). In contrast, homozygous individuals for haplotypes *B and *B1 had higher occurrence of veno-occlusive disease (p=0.009). GSTM1 null individuals older than 4 years had more frequently graft versus host disease (p=0.03). In conclusion, we showed that GST gene variants influence Bu PK and outcomes of HSCT in children. A model for the dosage adjustment with the inclusion of genetic and non-genetic factors should be evaluated in a future prospective validation cohort.

Introdução: Células-troco mesenquimais (CTM) vêm mostrando seus benefícios na doença do enxerto-versus-hospedeiro (DECH), observada no transplante de células tronco hematopoéticas (TCTH), existem três questões em aberto: (1) Expansão de CTM em meio de cultura suplementado com soro fetal bovino (SFB), pelo o risco de xenorreação; (2) Otimização de condições de cultura para a obtenção, em tempo hábil, de um numero que permita de 4 a 6 infusões de 2x106cells/kg do receptor; (3) Obter células do doador de medula óssea, evitando assim a utilização de um terceiro doador. Objetivos: Este estudo foi desenhado para comparar o lisado de plaquetas (LP) e o SFB na expansão de CTM, a densidade de plaqueamento das células e os dias entre cada passagem, e para investigar se as células nucleadas totais obtidas da bolsa e filtro do TCTH, podem ser utilizadas para expansão de CTM para utilização clínica. Métodos: Células residuais foram removidas do filtro e da bolsa utilizados para o TCTH, plaqueadas e depois da primeira passagem foram cultivadas em diferentes concentrações com SFB ou LP e observado o número de dias que levaram para chegar a 80% de confluência. Em seguida, as culturas com as mesmas densidades de plaqueamento foram suplementadas com LP ou SFB e depois de sete dias contou-se o número de células para analisar o quanto elas cresceram nesse período. Resultados: A proliferação de CTM, na presença de LP e SFB foi em média 11,88 e 2,5 vezes, respectivamente, num período de 7 dias. A concentração mais elevada de células usando LP demorou menos tempo para atingir a confluência, em comparação com os três inferiores. Este estudo sugere que o LP é a melhor escolha como suplemento para expandir CTM, e permite a proliferação de um número suficiente de CTM de doadores para uso clínico. / Introduction: Mesenchymal stromal cells (MSC) have shown their benefits in graft-versus-host disease (GVHD), with three unsettled matters:(1) MSCs expansion in medium with Fetal Calf Serum (FCS) and its risk of xenoreaction; (2) The number of cells indicated for therapy is 2x106cells/Kg with the need to optimize expansion, number and time wise; and (3) the utilization of third party donors. Aims: This study was designed to compare the platelet lysate (LP) and FCS on the expansion of MSC, the optimal cell plating density and days between each pass, and to investigate if donor total nucleated cells (TNC) obtained from the washouts of hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) explants can be expanded to be used at clinical grade. Methods: TNC were removed, plated and after the first passage were cultivated in different concentrations with FCS or PL and the number of days reach 80% of confluence was observed. Next, cultures with the same plating density were fed either with PL or FCS and after seven days counted to analyze how much they have grown in that period. Results: The proliferation of mesenchymal stromal cells in the presence of PL and SFB was averaged 11.88 and 2.5 times, respectively, in a period of 7 days. The highest concentration of plating cells using PL, took less time to reach confluence as compared with the three lower ones. This study suggests that the PL is the best choice as a supplement to expand MSC, and allows the proliferation of a sufficient number of donors MSC at P2 for clinical use.