S.aureus resistente à meticilina(SARM) é um problema em centros de fibrose cística(FC). Foi desenvolvido um multiplex PCR(mPCR) para detecção do SARM em secreção respiratória de 106 pacientes com FC. Foram usados 3 pares de primers para amplificar os genes: mecA, coa, 16S rRNA. O mPCR detectou até 0,25pg de DNA de SARM e identificou 70/106(66,0%) pacientes com S.aureus e 28/106(26,4%) com SARM. O mPCR mostrou especificidade, sensibilidade, valores preditivos positivo e negativo de 87,8%, 84,4%, 50% e 97,5%, considerando a cultura como padrão-ouro. Os resultados discordantes foram testados com outros primers, confirmando os obtidos pelo mPCR em 82/84. O mPCR mostrou-se método rápido e confiável para detecção de SARM / Methicillin-resistant S.aureus(MRSA) is a significant concern in cystic fibrosis(CF) centers. A multiplex PCR(MPCR) was developed to detect MRSA in respiratory secretion of 106 CF patients. Three pairs of primers were used for amplification of genes: mecA, coa, 16S rRNA. MPCR detected 0.25pg of MRSA DNA and identified 70/106(66.0%) of patients with S.aureus and 28/106(26.4%) with MRSA. MPCR showed specificity, sensitivity, positive and negative predicted values at 87.8%, 84.4%, 50% and 97.5%, considering culture as the gold standard. Discrepant results were retested using different primers, and confirmed MPCR results in 82/84. The developed MPCR was found to be a rapid and reliable method for MRSA detection

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-10-17T14:55:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_TreinamentoDesportivoIncidencia.pdf: 717645 bytes, checksum: 3233ead18cd9caeeeeb50ada702f35dc (MD5) / Approved for entry into archive by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2017-11-01T14:45:18Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_TreinamentoDesportivoIncidencia.pdf: 717645 bytes, checksum: 3233ead18cd9caeeeeb50ada702f35dc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-01T14:45:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_TreinamentoDesportivoIncidencia.pdf: 717645 bytes, checksum: 3233ead18cd9caeeeeb50ada702f35dc (MD5) Previous issue date: 2005-06-27 / O estresse fisiológico determinado pelo exercício físico pode aumentar a suscetibilidade de atletas a infecções respiratórias agudas (IRA). O presente trabalho analisa o impacto do treinamento desportivo e competições sobre a incidência e duração de IRA em atletas de natação do clube Associação dos Docentes da Escola Superior de Educação Física do Pará (ADESEF-PA), Belém, Pará, no período de janeiro a junho do ano de 2004. Para isso, dezoito atletas de natação de ambos os sexos, das categorias infantil (13 e 14 anos), juvenil (15 e 16 anos) e júnior (17 e 18 anos) foram acompanhados durante um período de treinamento de 24 semanas visando às disputas do campeonato brasileiro de natação das referidas categorias. A partir do macrociclo foram obtidos os dados a respeito do volume de treinamento e o número de competições disputadas. Através de uma ficha clínico-epidemiológica, levantando a ocorrência de sinais e sintomas sugestivos de gripe e resfriado, registrou-se o número e a duração dos episódios de IRA. Os resultados deste estudo revelaram uma ocorrência freqüente de IRA no grupo de atletas estudado e ausência de imunidade prévia por vacina anti-Influenza. A incidência (61,1%) e a duração média total (9,5 dias) dos episódios de IRA não diferiu entre os sexos, categorias e períodos do treinamento desportivo. Identificou-se ainda uma importante proporção de recorrência dos episódios de IRA nos atletas acompanhados. As infecções respiratórias apresentaram um perfil clínico compatível com a gripe, sugerindo que o vírus Influenza parece constituir o principal agente etiológico das infecções respiratórias apresentadas pelos atletas estudados. A partir dos resultados obtidos no estudo, concluiu-se que tanto a incidência quanto a duração dos episódios de IRA não foram influenciadas pelo volume de treinamento e número de competições aos quais os atletas foram expostos. / The physiologic stress exercise-induced can to raise the susceptibility of athletes to acute respiratory infections. This work evaluate the impact of training and matches competitions on incidence and duration of acute respiratory infections in swimmers of the “Associação dos Docentes da Escola Superior de Educação Física do Pará" team, Belém, Pará, of january to june of 2004. Follow up eighteen swimmers of both sex, including infantile (13 and 14 years), juvenile (15 and 16 years) and junior (17 and 18 years) categories during 24 weeks of training season to aim at the matches of swimming Brazilian championship in this categories. The volume training and number matched competitions were registered. Using a clinic and epidemiologic questionary to survey the occurrence of signs and symptoms suggesting of flu and cold, we registered the number and time of respiratory infection episodes. The incidence (61,1%) and durations (9,5 days) of acute respiratory infections don’t were differ between sex, categories ands seasons of training. Identify frequently searching of the respiratory infections episodes in the followed up athletes. A clinic profile of respiratory infections, like flu, was observed, suggesting that Influenza virus appear to constitute the major etiologic agent of the respiratory infections presented by studied athletes. The results of study we conclude that incidence and durations of acute respiratory infections don’t were altered by volume training and number of competitions.

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2013-04-16T20:00:48Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_CaracterizacaoMolecularCepas.pdf: 978407 bytes, checksum: abc230b0a9261c1fd0c377d2f4c3770a (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2013-04-18T14:36:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_CaracterizacaoMolecularCepas.pdf: 978407 bytes, checksum: abc230b0a9261c1fd0c377d2f4c3770a (MD5) / Made available in DSpace on 2013-04-18T14:36:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_CaracterizacaoMolecularCepas.pdf: 978407 bytes, checksum: abc230b0a9261c1fd0c377d2f4c3770a (MD5) Previous issue date: 2006-06 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As doenças do trato respiratório são as principais queixas nos serviços de atendimento médico, sendo as infecções respiratórias agudas (IRA) as manifestações mais comuns, principalmente em crianças menores de cinco anos de idade. Em países em desenvolvimento as IRA constituem um sério problema de saúde pública. Em todo mundo estima-se que ocorram cerca de dois milhões de mortes devido as IRA a cada ano. Dentre os agentes causais das mesmas, destaca-se o Vírus Respiratório Sincicial (VRS), especialmente por causar doença grave em crianças menores de dois anos. Com o objetivo de gerar dados sobre a epidemiologia molecular deste vírus, foram analisadas amostras colhidas de pacientes com IRA no período de 2000 a 2006 na cidade de Belém, Pará. Foram utilizados testes de imunofluorescência indireta (IFI) para caracterização antigênica dos vírus isolados e RT-PCR para os genes codificadores das proteínas G e F, que foram em seguida parcialmente seqüenciados. Dentro do período estudado, 153 amostras positivas para VRS foram detectadas. A faixa etária de 0-4 anos foi a que concentrou maior número de casos (n=138; 90,19%). Em relação ao perfil sazonal, o pico de atividade do VRS ocorreu nos primeiros seis meses do ano, estando associado principalmente ao período de troca da estação chuvosa para um período de menor pluviosidade. Houve co-circulação dos subgrupos A e B nos anos de 2001 e 2003. Em 2000, 2005 e 2006 somente o subgrupo A circulou. Entretanto no ano de 2004 foi registrada a ocorrência somente do subgrupo B. Dentro do período estudado, genótipos distintos da proteína G do subgrupo A (GA2 e GA5) e do subgrupo B (SAB1 e SAB3) foram detectados, indicando o primeiro relato da circulação do genótipo SAB1 na América do Sul. Em 2004, um cluster diferenciado dos demais genótipos circulantes foi encontrado, sendo este denominado BRB1. A análise do gene codificador da proteína F permitiu a identificação de mutações na sequência nucleotídica resultando em trocas na cadeia aminoacídica da mesma. Este estudo representa o primeiro relato sobre dados da epidemiologia molecular do Vírus Respiratório Sincicial na região Norte do Brasil. / The diseases of respiratory tract are the main complaints in the services of medical consultations, acute respiratory infections (ARI) are the most common manifestations, mainly in children under five years old. In developing countries ARI represent a serious problem of public health. Every year, ARI are responsible by about 2 million deaths all over the world. Among the infectious agents the Respiratory Syncytial virus (RSV) is the most important pathogen in infants and young children because of severe bronchiolitis and pneumonia that it may cause. With the objective to generate data on the molecular epidemiology of this virus, patients' clinical samples with ARI were analyzed during the period 2000 - 2006 in the city of Belém, Pará. Test of Indirect immunofluorescence (TIF) was used for antigenic characterization of isolated viruses and the RT-PCR for the genes encoders of the proteins G and F, that were partially sequenced. In the total period, 153 positive samples of RSV were analyzed. The age group 0-4 years showed the larger number of cases (90,19%). In relation to the seasonal profile, the pick of activity of RSV happened in the first six months of the year, being associated mainly to the period of change of the rainy season to a less rainy period. There was a co-circulation of the subgroups A and B in the years of 2001 and 2003. In 2000, 2005 and 2006 just the subgroup A was detected. However in the year of 2004 was only registered the occurrence of subgroup B. Inside the studied period, were detected different genotypes from the protein G of the subgroup A (GA2 and GA5) and of the subgroup B (SAB1 and SAB3) , indicating the first report about circulation of the genotype SAB1 in South America. In 2004, was found a differentiated cluster of the other circulating genotypes, being denominated BRB1. The analysis from gene encoder of the protein F allowed identification of mutations in the nucleotidic sequence that resulted in changes in the aminoacídica chain. This study represents the first report about the molecular epidemiology of the Respiratory Syncytial Virus in the North region of Brazil.

Made available in DSpace on 2016-01-26T12:51:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lucianogarcialourencao_dissert.pdf: 833601 bytes, checksum: 00a7823458263c5ee5f67007f775ba5b (MD5) Previous issue date: 2006-10-26 / Respiratory infections account for more than 25% of the whole medical, pediatric, outpatient and hospital services. Around 90% of those infections are related with viral agents. RSV is an important agent identified in those diseases. This study aimed at assessing the frequency of Respiratory Syncytial Virus (RSV) in children aged from 0 to 6 years with upper respiratory infection diseases (URID) from a nursery school, and to associate the clinical and epidemic data of mild degree of URID with the viral agent. The children had a daily follow-up in the period from July 2003 to July 2004, and viral investigation for RSV by means of Polimerase Chain Reaction (PCR), in the children's nasopharyngeal secretions that presented signs of breathing infection. A total of 259 events of URID in 173 children have occurred. A hundred twenty-two (70.5%) children were over 2 years in the beginning of the follow-up and 94 (54.3%) were male. The monthly number of episodes ranged from 0 to 53. RSV was diagnosed in 27 (10.5%) samples, and it was more frequent between the months of July to September. The signs observed in the children with RSV infection were coryza in 26 (96.3%) episodes, nasal obstruction in 19 (70.4%), coughs in 15 (55.6%), wheezing in 3 (11.1%) and sneeze and fever in 2 (7.4%) episodes. Antibiotics were administered in 16 (6.2%) episodes of breathing infection. One (3.7%) infection episode by RSV received treatment with antibiotic. One (0.4%) serious episode had developed for hospitalization. A high frequency of RSV was observed among the children from nursery school with mild breathing infections, mainly from the beginning of the autumn to the spring; the most frequent signs in the infections for RSV were cough, coryza and nasal obstruction; there was association between nasal obstruction and infections by RSV. / As infecções respiratórias são responsáveis por mais de 25% de todo o atendimento médico pediátrico, ambulatorial e hospitalar. Em torno de 90% dessas infecções estão relacionadas com agentes virais. O Vírus Sincicial Respiratório (VSR) é um importante agente identificado nessas afecções. Esse estudo objetivou estimar a freqüência do VSR em crianças com idade entre 0 e 6 anos com infecção das vias aéreas superiores (IVAS), procedentes de uma creche e associar os dados clínicos e epidemiológicos da IVAS de grau leve com o agente viral. Foi realizado seguimento diário das crianças no período de julho de 2003 a julho de 2004 e investigação virológica para VSR através de Polimerase Chain Reaction (PCR), em secreções nasofaríngeas das crianças que apresentaram sinais de infecção respiratória. Ocorreram 259 episódios de IVAS em 173 crianças. Cento e vinte e duas (70,5%) crianças tinham mais de 2 anos de idade no início do segmento e 94 (54,3%) eram do sexo masculino. O número mensal de episódios variou de 0 a 53. O VSR foi diagnosticado em 27 (10,5%) amostras e foi mais freqüente nos meses de julho a setembro. Os sinais observados nas crianças com infecção por VSR foram coriza em 26 (96,3%) episódios, obstrução nasal em 19 (70,4%), tosse em 15 (55,6%),chiado em 3 (11,1%) e espirro e febre em 2 (7,4%) episódios. O uso de antibióticos ocorreu em 16 (6,2%) episódios de infecção respiratória. Um (3,7%) episódio de infecção por VSR recebeu tratamento com antibiótico. Houve 1 (0,4%) episódio grave que evoluiu para internação. Observou-se uma alta freqüência de VSR entre as crianças com infecções respiratórias leves, principalmente do início do outono ao início da primavera; os sinais mais freqüentes nas infecções por VSR foram tosse, coriza e obstrução nasal; houve associação entre obstrução nasal e infecções por VSR.

S.aureus resistente à meticilina(SARM) é um problema em centros de fibrose cística(FC). Foi desenvolvido um multiplex PCR(mPCR) para detecção do SARM em secreção respiratória de 106 pacientes com FC. Foram usados 3 pares de primers para amplificar os genes: mecA, coa, 16S rRNA. O mPCR detectou até 0,25pg de DNA de SARM e identificou 70/106(66,0%) pacientes com S.aureus e 28/106(26,4%) com SARM. O mPCR mostrou especificidade, sensibilidade, valores preditivos positivo e negativo de 87,8%, 84,4%, 50% e 97,5%, considerando a cultura como padrão-ouro. Os resultados discordantes foram testados com outros primers, confirmando os obtidos pelo mPCR em 82/84. O mPCR mostrou-se método rápido e confiável para detecção de SARM / Methicillin-resistant S.aureus(MRSA) is a significant concern in cystic fibrosis(CF) centers. A multiplex PCR(MPCR) was developed to detect MRSA in respiratory secretion of 106 CF patients. Three pairs of primers were used for amplification of genes: mecA, coa, 16S rRNA. MPCR detected 0.25pg of MRSA DNA and identified 70/106(66.0%) of patients with S.aureus and 28/106(26.4%) with MRSA. MPCR showed specificity, sensitivity, positive and negative predicted values at 87.8%, 84.4%, 50% and 97.5%, considering culture as the gold standard. Discrepant results were retested using different primers, and confirmed MPCR results in 82/84. The developed MPCR was found to be a rapid and reliable method for MRSA detection

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2015-06-18T17:09:13Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_OcorrenciaMetapneumovirusHumano.pdf: 1563945 bytes, checksum: 4c4a96cb629a088e3e96b0500f3fdd85 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2015-06-22T12:54:08Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_OcorrenciaMetapneumovirusHumano.pdf: 1563945 bytes, checksum: 4c4a96cb629a088e3e96b0500f3fdd85 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-22T12:54:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_OcorrenciaMetapneumovirusHumano.pdf: 1563945 bytes, checksum: 4c4a96cb629a088e3e96b0500f3fdd85 (MD5) Previous issue date: 2012 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As doenças do trato respiratório são responsáveis por uma significativa taxa de absenteísmo laboral bem como por elevados índices de morbidade e morte, entre as quais as infecções respiratórias aguda (IRA) representam as maiores queixas nos serviços de atendimento médico-ambulatorial em todo o mundo. Os vírus são considerados os principais agentes etiológicos das IRA, atuando seja como patógeno principal ou predispondo às infecções bacterianas secundárias, entre eles encontra-se o Metapneumovirus Humano (HMPV). Este vírus foi identificado em 2001 apresentando-se como um importante agente causador de IRA adquirida na comunidade. É um vírus cosmopolita que causa doenças respiratórias semelhantes ao Vírus Respiratório Sincicial. No Brasil, são relativamente escassos os relatos da ocorrência do HMPV na população. O objetivo deste estudo é investigar a ocorrência de Metapneumovírus Humano (HMPV) em pacientes com diagnóstico clínico de infecção respiratória aguda (IRA) na Região Nordeste do Brasil. Entre o período de Junho de 2009 a Setembro de 2010, pacientes oriundos de atendimentos em unidades de atenção básica ou hospitalar de cinco estados da Região Nordeste, foram submetidos a coleta de espécimes para detecção a partir de técnicas de biologia molecular. Análises estatísticas foram utilizadas para escolha do tamanho amostral (545) e tratamento dos resultados obtidos. O estudo mostrou uma positividade de 4.7% para HMPV, sem a existência de uma faixa etária específica para a ocorrência da infecção. Ocorreu uma prevalência do sexo feminino entre os casos positivos, entretanto, sem significado estatístico. O pico de positividade para o vírus (n=16) mostrou existir no terceiro trimestre do ano em todos os Estados investigados. Neste estudo, foi possível descrever a ocorrência de HMPV na Região Nordeste, afetando pacientes portadores de infecção respiratória aguda, tanto acompanhados ambulatorialmente como hospitalizados, que preencheram critério clínico para Síndrome Respiratória Aguda Grave. / The respiratory tract illnesses are responsible by a significant rate of laborer absenteeism as well like by elevated indices of morbidity and death, between which the acute respiratory infections (ARI) represent the bigger complaints in the medical-ambulatory service in world. The viruses are considered the main etiologic agents of ARI, acting is like main pathogen or prepossess the secondary bacterial infections, among them finds the Human Metapneumovirus (HMPV). This virus was identified in 2001 presenting as an important causal agent of ARI acquired in the community. It is a cosmopolitan virus that causes similar respiratory illnesses to the Respiratory Syncytial Virus. In Brazil, reports are relatively scarce about the occurrence of the HMPV in the population. The objective of this study is to investigate the occurrence of Human Metapneumovírus (HMPV) in patients with clinical diagnosis of acute respiratory infection (ARI) in the Northeast Region of Brazil. Between the period of June 2009 to September 2010, patients from basic attention unit or hospital units services of five states of Northeast Region, were submitted the collection of specimens for detection from techniques of molecular biology. Statistical analyses were utilized for sample choice (545) and handling of the results obtained. The study showed a positivity of 4,7% for HMPV, without the existence of a specific age group for the occurrence of infection. A predominance of the female sex between the positive cases occurred, however, without statistical meaning. The peak of positivity for the virus (n=16) happen in the third quarter of the year in all States investigated. In this study, was possible describe the occurrence of HMPV in the Northeast Region, affecting patients with acute respiratory infection like accompanied in basic attention as hospitalized, that filled clinical criterion for Severe Acute Respiratory Syndrome.

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2015-06-18T18:42:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AnaliseEpidemiologicaCaracterizacao.pdf: 1457955 bytes, checksum: c55bbad106665e33b0b60f36f8673b9d (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2015-06-23T14:09:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AnaliseEpidemiologicaCaracterizacao.pdf: 1457955 bytes, checksum: c55bbad106665e33b0b60f36f8673b9d (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-23T14:09:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AnaliseEpidemiologicaCaracterizacao.pdf: 1457955 bytes, checksum: c55bbad106665e33b0b60f36f8673b9d (MD5) Previous issue date: 2012 / FAPESPA - Fundação Amazônia de Amparo a Estudos e Pesquisas / As doenças do trato respiratório são as principais queixas nos serviços de atendimento médico, sendo as infecções respiratórias agudas (IRA) as manifestações mais comuns, principalmente em crianças menores de cinco anos de idade. Em países em desenvolvimento, as IRA constituem um sério problema de saúde pública. Em todo mundo estima-se que ocorram cerca de 2 milhões de mortes devido as IRA a cada ano. Dentre os agentes causais de IRA, destaca-se o Metapneumovírus Humano (HMPV), especialmente por causar doença grave em crianças menores de 5 anos. Com o objetivo de gerar dados sobre a epidemiologia molecular deste vírus, foram analisadas amostras colhidas de pacientes com IRA no período de Janeiro de 2009 a Dezembro de 2011 oriundas da Região Norte (Pará, Amazonas, Acre, Amapá e Roraima). Foi utilizado a técnica de RT-PCR em Tempo Real (qRT-PCR) para a detecção do vírus através da amplificação do gene N e RT-PCR para o gene codificador da proteína F, que foi em seguida parcialmente sequenciado. Dentro do período de estudo, foram testadas 2966 amostras, das quais 129 positivas para HMPV. A faixa etária de 0-4 anos foi a que concentrou maior número de casos (n=84; 65,89%) em toda a região Norte. Na identificação viral, constatou-se a co-circulação dos subgrupos A2 e B2 durante os três anos do estudo. Os subgrupos A1 e B1 não circularam na região durante o período estudado. Este estudo representa o primeiro relato sobre dados da epidemiologia molecular do Metapneumovírus Humano na região Norte do Brasil. / Diseases of the respiratory tract are the main complaints in health care services, and acute respiratory infections (ARI) the most common manifestations, especially in children under five years of age. In developing countries the ARI are a serious public health problem. Throughout the world is estimated to occur in approximately 2 million deaths each year by ARI. Among the causative agents of ARI, we highlight the human metapneumovirus (HMPV), especially by causing severe illness in children under 5 years. Aiming to generate data on the molecular epidemiology of this virus, we analyzed samples taken from patients with ARI in the period January 2009 to December 2011 arising from the Northern Region (Pará, Amazonas, Acre, Amapá and Roraima). It was used the technique of real time PCR (qRT-PCR) to detect the virus by the N gene and RT-PCR for the gene encoding the F protein, which was then partially sequenced. Within the study period, were tested in 2966 samples, 129 of which were positive for HMPV. The age group of 0-4 years was the one that focused more cases (n = 84, 65.89%) across the North. The identification of viruses was found to co-circulation of subgroups A2 and B2 during the three years of the study. Subgroups A1 and B1 not circulated in the region during the study period. This study represents the first report of data on molecular epidemiology of Human Metapneumovirus in northern Brazil.

Introdução: As infecções respiratórias causam elevadas morbidade e mortalidade, sendo os vírus os principais agentes destas doenças. O monitoramento e vigilância de vírus respiratórios, desde os mais conhecidos até os emergentes, são importantes para a gestão em saúde, orientando tempo de profilaxia e minimizando o impacto de epidemias nas comunidades. Objetivos: Estudar a epidemiologia molecular do vírus sincicial respiratório (VSR) e descrever a epidemiologia dos seguintes vírus: influenza (IF), influenza A (H1N1), adenovírus (AdV) e parainfluenza (PIV) no Hospital de Clínicas de Porto Alegre. Para isso foram conduzidos três estudos: (1) caracterização das infecções respiratórias causadas por VSR, IF, AdV e PIV em crianças; (2) validação de uma técnica de reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) para detecção de VSR A/B e IF A/B e (3) caracterização de genótipos do VRS em crianças com infecções comunitárias e hospitalares. Métodos: No primeiro estudo foram levantadas as seguintes variáveis: casos de infecções respiratórias por VSR, AdV, PIV ou IF e H1N1; internações em enfermarias hospitalares e internações em unidades de terapia intensiva (UTI); infecções hospitalares e taxas de letalidade. As variáveis foram coletadas durante o atendimento de crianças (idade 0-12 anos) no HCPA entre 2007 e 2010. No segundo estudo, os alvos do ensaio de RT-PCR foram: o gene da proteína da matriz de IFA, o gene da hemaglutinina do IFB e o gene da nucleoproteína de RSVA/B. A especificidade do ensaio e seu limite de detecção foram determinados. Uma comparação entre RT-PCR e imunofluorescência indireta foi realizada. No terceiro estudo, 63 isolados de VSR (21 de origem nosocomial e 42 adquiridos na comunidade) foram sequenciados para estabelecer uma análise filogenética deste vírus. Resultados: Cada um dos vírus estudados apresentou um comportamento diferente. O VSR demonstrou ser o principal agente envolvido em infecções nosocomiais. Já os pacientes com AdV, bem como o VSR, apresentaram altas taxas de admissão em UTI em 2007 e 2010. O AdV e o H1N1 tiveram as maiores taxas de letalidade. O ensaio de RT-PCR mostrou-se específico e foi mais sensível do que a imunofluorescência, sendo capaz de detectar co-infecções. Os seguintes limites de detecção foram obtidos: 1 cópia/mL para a IFA, 10 cópias/mL para IFB, 5 cópias/mL para RSVA e 250 cópias/mL para RSVB. A investigação dos genótipos de VSR revelou que todos os isolados VSRA circulantes eram do mesmo grupo filogenético, o genótipo NA1 de origem japonesa. Por outro lado, os isolados VSRB foram distribuídos em grupos diferentes: BA4, POA1, POA2, POA3 e POA4. Este estudo foi o primeiro que descreveu a circulação do genótipo NA1 no Brasil, bem como quatro novos genótipos (POA1, POA2, POA3 e POA4). Conclusão: Os resultados obtidos no primeiro estudo demonstram o impacto das epidemias sazonais de vírus respiratórios. O segundo estudo corroborou relatos da literatura que técnicas moleculares, como RT-PCR, são adequadas para a detecção de vírus respiratórios. O terceiro estudo relatou genótipos emergentes de VSR. Estudos de vigilância como os descritos acima deveriam ser conduzidos periodicamente para acompanhar o padrão de comportamento dos vírus na população alvo. / Background: Respiratory tract infections of viral origin are a major cause of morbidity and mortality worldwide. Surveillance of well-known viruses and emerging threats is important for management, prophylaxis and to minimize impact on the community. Objective: To study the molecular epidemiology of respiratory syncytial virus (RSV) and describe the epidemiology of viruses: influenza (IF), influenza A (H1N1), adenovirus (AdV) and parainfluenza (PIV) at Hospital de Clinicas de Porto Alegre. Three studies were performed: (1) characterization of respiratory infections caused by RSV, IF, AdV and PIV in children, (2) validation of a technique of polymerase chain reaction in real-time (RT-PCR) to detect RSVA/B and IFA/B and (3) detection of genotypes of RSV in children with communityand hospital-acquired infection. Methods: In the first study, variables such as number of cases of viral (RSV, AdV, PIV or IF and H1N1) infection, hospitalizations in general wards and intensive care units (ICUs), nosocomial infections and lethality rates were collected. These variables obtained from each children (age 0-12 years) between 2007 and 2010. In the second study the assay RT-PCR was used to target the matrix gene of IFA, the hemagglutinin gene of IFB and the nucleoprotein gene of RSVA/B. The specificity of the assay and its limit of detection were determined. A comparison of RT-PCR and indirect immunofluorescence was performed. In the third study, 63 RSV isolates (21 nosocomial and 42 community-acquired) were submitted to sequencing to establish a phylogenetic analysis of this virus. Results: The different viruses presented a diversity of behaviors according to hospitalization, nosocomial outbreaks or lethality in children. RSV accounted for most nosocomial infections. Rates of ICU admission for AdV and RSV infection were highest in 2007 and 2010. During 2008–2009, H1N1 and AdV had the highest ICU admission rates. AdV and H1N1 had the highest lethality rates. The RT-PCR assay was more sensitive than immunofluorescence and it was able to detect viral co-infections. Futhermore, the limits of detection were 1 copy/μL for IFA, 10 copies/μL for IFB, 5 copies/μL for RSVA, and 250 copies/μL for RSVB. The genotyping study showed that hospital- and community-acquired RSVA isolates were from the same phylogenetic group (the same group of the NA1 Japanese isolates). Conversely, RSVB isolates were distributed across different groups: BA4, POA1, POA2, POA3 and POA4. This was the first study to describe circulation of the NA1 genotype in Brazil, as well as four RSVB genotypes: POA1, POA2, POA3 and POA4. Conclusion: The results obtained in the first study demonstrate the impact of seasonal epidemics of respiratory viruses. The second study confirmed that molecular techniques such as RT-PCR, are suitable for the detection of respiratory viruses. The third study reported emerging genotypes of RSV. Surveillance studies such as this should be performed periodically to monitor the behavior pattern of the virus in the target population.

As infecções respiratórias agudas são uma importante causa de morbidade e mortalidade infantil em todo o mundo. Algumas dessas infecções podem resultar em Síndrome Respiratória Aguda Grave (SRAG). Os vírus respiratórios são os principais responsáveis por esta doença. O monitoramento e a vigilância das SRAG e dos vírus respiratórios são importantes para a gestão em saúde minimizando o impacto destas infecções respiratórias. O presente estudo buscou analisar a sazonalidade e impacto clínico das infecções causadas por vírus respiratórios em crianças internadas em hospital pediátrico do Paraná. Foram incluídos no estudo 229 pacientes de 0 até 15 anos de idade, de janeiro de 2012 a dezembro de 2015, com diagnóstico clínico de SRAG e amostra respiratória coletada e enviada ao Laboratório Central do Estado do Paraná para diagnóstico do agente etiológico. A busca dos casos de SRAG foi realizada utilizando o prontuário eletrônico GSUS (Gestão da Assistência de Saúde do SUS), arquivos do setor de fisioterapia e informações do Núcleo de Controle de Infecções hospitalares do hospital do estudo. Dos pacientes incluídos na pesquisa, foi preenchido um formulário de coleta de dados e posteriormente estes foram analisados de acordo com os objetivos da pesquisa. As análises estatísticas foram efetuadas com o pacote estatístico GRAPHPAD PRISM e foi considerado um nível de significância de 5%. A maioria dos pacientes da amostra pertencia à faixa etária de 0 a 6 meses de idade, não houve sexo predominante. No presente estudo as amostras positivas para pelo menos um agente etiológico contabilizaram 76,41%, e o vírus mais prevalente foi o Vírus Sincicial respiratório (VSR). Quanto à sazonalidade da detecção viral, houve predominância no final de outono e início do inverno, mais acentuada para o VSR. Quando analisada as três temperaturas ambientais da região, a incidência de SRAG foi significativamente maior no quartil descendente da temperatura média para mínima. Não foi observada diferença significativa entre os grupos etiológicos pesquisados com relação ao tempo desde o início dos sintomas até a internação. Houve predominância de internamentos em Unidade de Terapia Intensiva. O tempo de internamento foi significativamente maior naqueles pacientes com doença de base e não alterou conforme os agentes etiológicos identificados ou presença de codetecção. Os pacientes que apresentaram padrão misto na radiografia de tórax tiveram um tempo de internamento significativamente maior do que aqueles que apresentaram o padrão infiltrado intersticial. O tempo total foi significativamente menor no grupo Metapneumovírus em relação aos grupos Bordetella pertussis, Influenza, Rinovírus e grupo dos pacientes sem agentes infecciosos detectados. O tempo de ventilação mecânica não apresentou diferenças significativas entre os grupos etiológicos nem com relação à presença ou não de codetecção. A maior parte dos pacientes recebeu alta hospitalar, mas ocorreram três óbitos devido a SRAG, todos em pacientes com alguma doença de base ou condições de risco. / Acute respiratory infections are the most important cause of children morbidity and mortality worldwide. Some of these infections can result in Severe Acute Respiratory Syndrome (SARS). Respiratory viruses are primarily responsible for SARS. The monitoring and surveillance of SARS and respiratory viruses are important for health management, minimizing the impact of these respiratory infections. The present study was about the seasonality and clinical impact of respiratory viruses in children admitted to a pediatric reference hospital. The study included 229 children from 0 to 15 years old, from January 2012 to December 2015, with clinical diagnosis of SARS and respiratory sample collected and sent to the Central Laboratory of the State of Paraná for etiological agent analysis. The search for SARS cases was performed using the GSUS (Health Care Management of SUS) electronic filesystem, records of the center of physiotherapy and information of the Hospital Infection Control Center of the studied hospital. Of the patients included in the research, data collection forms were filled out and later analyzed according to the research objectives. Statistical analyzis were performed with the statistical package GRAPHPAD PRISM and a significance level of 5% was considered. The majority of patients in the sample belonged to the age group 0-6 months of age, and there was no predominant sex. Regarding the risk factors for viral infection, the presence of comorbidity or underlying disease was the most prevalent factor. In the present study, the positive samples for at least one etiological agent accounted for 76.41%, and the most prevalent virus was Respiratory Syncytial Virus (RSV). As for the seasonality of viral detection, there was a predominance in the late fall and early winter, which was more pronounced for RSV. When the environmental temperatures of the region were analyzed, the incidence of SARS was significantly higher in the descending quartile of the average minimum temperature. No significant difference was observed between the studied etiological groups in relation to the time from the beginning of the symptoms until the hospitalization. There was a predominance of hospitalizations in the Intensive Care Unit. The hospitalization time was significantly higher in patients with underlying disease or comorbidities and did not change according to the identified etiological agents or the presence of codetection. Patients who presented a mixed pattern on chest radiography had a significantly longer hospitalization time than those who had the interstitial infiltrate pattern. The total time was significantly lower in the Metapneumovirus group than in the Bordetella pertussis, Influenza, Rhinovirus and group of patients without detected infectious agents. Most patients were discharged from hospital, but there were three deaths due to SARS, all in patients with some underlying disease or risk conditions.

As infecções respiratórias agudas são uma importante causa de morbidade e mortalidade infantil em todo o mundo. Algumas dessas infecções podem resultar em Síndrome Respiratória Aguda Grave (SRAG). Os vírus respiratórios são os principais responsáveis por esta doença. O monitoramento e a vigilância das SRAG e dos vírus respiratórios são importantes para a gestão em saúde minimizando o impacto destas infecções respiratórias. O presente estudo buscou analisar a sazonalidade e impacto clínico das infecções causadas por vírus respiratórios em crianças internadas em hospital pediátrico do Paraná. Foram incluídos no estudo 229 pacientes de 0 até 15 anos de idade, de janeiro de 2012 a dezembro de 2015, com diagnóstico clínico de SRAG e amostra respiratória coletada e enviada ao Laboratório Central do Estado do Paraná para diagnóstico do agente etiológico. A busca dos casos de SRAG foi realizada utilizando o prontuário eletrônico GSUS (Gestão da Assistência de Saúde do SUS), arquivos do setor de fisioterapia e informações do Núcleo de Controle de Infecções hospitalares do hospital do estudo. Dos pacientes incluídos na pesquisa, foi preenchido um formulário de coleta de dados e posteriormente estes foram analisados de acordo com os objetivos da pesquisa. As análises estatísticas foram efetuadas com o pacote estatístico GRAPHPAD PRISM e foi considerado um nível de significância de 5%. A maioria dos pacientes da amostra pertencia à faixa etária de 0 a 6 meses de idade, não houve sexo predominante. No presente estudo as amostras positivas para pelo menos um agente etiológico contabilizaram 76,41%, e o vírus mais prevalente foi o Vírus Sincicial respiratório (VSR). Quanto à sazonalidade da detecção viral, houve predominância no final de outono e início do inverno, mais acentuada para o VSR. Quando analisada as três temperaturas ambientais da região, a incidência de SRAG foi significativamente maior no quartil descendente da temperatura média para mínima. Não foi observada diferença significativa entre os grupos etiológicos pesquisados com relação ao tempo desde o início dos sintomas até a internação. Houve predominância de internamentos em Unidade de Terapia Intensiva. O tempo de internamento foi significativamente maior naqueles pacientes com doença de base e não alterou conforme os agentes etiológicos identificados ou presença de codetecção. Os pacientes que apresentaram padrão misto na radiografia de tórax tiveram um tempo de internamento significativamente maior do que aqueles que apresentaram o padrão infiltrado intersticial. O tempo total foi significativamente menor no grupo Metapneumovírus em relação aos grupos Bordetella pertussis, Influenza, Rinovírus e grupo dos pacientes sem agentes infecciosos detectados. O tempo de ventilação mecânica não apresentou diferenças significativas entre os grupos etiológicos nem com relação à presença ou não de codetecção. A maior parte dos pacientes recebeu alta hospitalar, mas ocorreram três óbitos devido a SRAG, todos em pacientes com alguma doença de base ou condições de risco. / Acute respiratory infections are the most important cause of children morbidity and mortality worldwide. Some of these infections can result in Severe Acute Respiratory Syndrome (SARS). Respiratory viruses are primarily responsible for SARS. The monitoring and surveillance of SARS and respiratory viruses are important for health management, minimizing the impact of these respiratory infections. The present study was about the seasonality and clinical impact of respiratory viruses in children admitted to a pediatric reference hospital. The study included 229 children from 0 to 15 years old, from January 2012 to December 2015, with clinical diagnosis of SARS and respiratory sample collected and sent to the Central Laboratory of the State of Paraná for etiological agent analysis. The search for SARS cases was performed using the GSUS (Health Care Management of SUS) electronic filesystem, records of the center of physiotherapy and information of the Hospital Infection Control Center of the studied hospital. Of the patients included in the research, data collection forms were filled out and later analyzed according to the research objectives. Statistical analyzis were performed with the statistical package GRAPHPAD PRISM and a significance level of 5% was considered. The majority of patients in the sample belonged to the age group 0-6 months of age, and there was no predominant sex. Regarding the risk factors for viral infection, the presence of comorbidity or underlying disease was the most prevalent factor. In the present study, the positive samples for at least one etiological agent accounted for 76.41%, and the most prevalent virus was Respiratory Syncytial Virus (RSV). As for the seasonality of viral detection, there was a predominance in the late fall and early winter, which was more pronounced for RSV. When the environmental temperatures of the region were analyzed, the incidence of SARS was significantly higher in the descending quartile of the average minimum temperature. No significant difference was observed between the studied etiological groups in relation to the time from the beginning of the symptoms until the hospitalization. There was a predominance of hospitalizations in the Intensive Care Unit. The hospitalization time was significantly higher in patients with underlying disease or comorbidities and did not change according to the identified etiological agents or the presence of codetection. Patients who presented a mixed pattern on chest radiography had a significantly longer hospitalization time than those who had the interstitial infiltrate pattern. The total time was significantly lower in the Metapneumovirus group than in the Bordetella pertussis, Influenza, Rhinovirus and group of patients without detected infectious agents. Most patients were discharged from hospital, but there were three deaths due to SARS, all in patients with some underlying disease or risk conditions.