Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2014. / Submitted by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2014-10-16T17:52:23Z No. of bitstreams: 1 2014_RafaelaSalgadoFontenele.pdf: 2451245 bytes, checksum: d7204757e42ab3fbfadafd3651c181fd (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2014-10-16T17:53:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_RafaelaSalgadoFontenele.pdf: 2451245 bytes, checksum: d7204757e42ab3fbfadafd3651c181fd (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-16T17:53:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_RafaelaSalgadoFontenele.pdf: 2451245 bytes, checksum: d7204757e42ab3fbfadafd3651c181fd (MD5) / O câncer de próstata é a segunda neoplasia mais frequente em homens no mundo e também no Brasil. Os fatores de risco mais consolidados para o seu desenvolvimento são a idade avançada, histórico familiar e fatores ambientais. Um dos fatores ambientais mais estudados é a inflamação, que pode ser desencadeada por agentes infecciosos, hábitos alimentares, mudanças hormonais, alterações fisiológicas como refluxo de urina ou traumas físicos. Entretanto, em alguns casos, amostras histopatológicas da próstata podem apresentar infiltrado inflamatório sem motivo aparente. Neste contexto, a proposta foi avaliar o papel dos mediadores inflamatórios presentes no microambiente inflamatório tumoral e a sua relação com a dinâmica celular do câncer de próstata. Para simular o microambiente inflamatório tumoral, foi utilizado meio condicionado de células mononucleares de sangue periférico humano, estimuladas ou não com moduladores inflamatórios, nas linhagens celulares de câncer de próstata DU145 e LNCaP. Das citocinas avaliadas, foi detectada a secreção de IL-1β e IL-6. A secreção de IL-1β indica que há formação do inflamassoma e ativação de caspase1. Observou-se aumento da expressão do receptor NLRP3 nas linhagens celulares DU145 e LNCaP e também aumento ou diminuição na clivagem de PARP1 dependendo do estímulo inflamatório. Esses dados juntamente com a observação de fragmentação de DNA, indicam que pode estar ocorrendo morte celular por piroptose. O estímulo inflamatório também levou à modulação da expressão de PPAR-γ nas linhagens tumorais, no entanto essa modulação parece não estar correlacionada a nenhum dos outros eventos observados. Quanto às propriedades tumorais, observou-se após estímulos inflamatórios um aumento na população de células tronco tumorais na linhagem DU145 e aumento de células CD44+/CD24+ na linhagem LNCaP, o que indica um maior potencial metastático nessas células. Foi observado também, uma redução da taxa de proliferação celular apenas na linhagem LNCaP e não foram identificadas mudanças significativas na dinâmica do ciclo celular em ambas as linhagens estudadas. Com base nestes resultados podemos sugerir que o microambiente inflamatório exerce um papel regulatório nas linhagens tumorais de próstata DU145 e LNCaP. Esse processo parece estar relacionado à ativação do inflamassoma e consequente secreção IL-1β aumentando a população de células tronco tumorais, o que está diretamente relacionado com o agravo da doença. Desta forma nossos dados sugerem que os processos inflamatórios no câncer da próstata podem levar a eventos de impacto negativo para os portadores da doença, favorecendo fenótipos associados à metástase. Por outro lado, nossos resultados também mostram um provável horizonte a ser explorado no tratamento do câncer de próstata com o uso de agentes anti-inflamatórios adjuvantes aos tratamentos tradicionais. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Prostate cancer is the second leading cause of cancer in men worldwide and also in Brazil. The most well known risk factors for the development of this cancer are advanced age, family history and environmental factors. Inflammation is one of the most studied environmental factors and can be triggered by infections, dietary factors, hormonal changes and others environmental factors such as physical trauma or urine reflux. However, in some cases, histopathological prostate cancer samples can exhibit immune infiltrate without any apparent reason. In this context, our proposal was to evaluate the role of inflammatory mediators observed in the inflammatory tumor microenvironment and its relationship with the prostate cancer cell dynamics. To simulate the inflammatory tumor microenvironment, conditioned medium of human peripheral blood mononuclear cells stimulated or not with inflammatory modulators was used. From the cytokines evaluated, the secretion of IL-1β and IL-6 was detected. The secretion of IL-1β indicates inflammasome assemble and caspase1 activation. We observed increased expression of NLRP3 receptor in DU145 and LNCaP cells and also increase or decrease in PARP1 cleavage depending on the inflammatory stimuli. These data plus the DNA fragmentation detected, indicates that cell death may be occurring by pyroptosis. The inflammatory stimuli also led to modulation of PPAR-γ expression in the prostate cancer cell lines, however this modulation does not appears to be correlated with any of the others analyzed properties. Regarding the tumor properties, after inflammatory stimuli it was observed a population increase of cancer stem cells from DU145 and CD44+/CD24+ phenotype increase in LNCaP cells, which indicates an amplified metastatic potential in these cells. It was also observed in LNCaP, a reduction in cell proliferation rates and no significant changes were identified in the cell cycle dynamics from both cell lines studied. Based on these results we can suggest that the inflammatory microenvironment plays a regulatory role in prostate cancer cell lines. This process seems to be related to the inflammasome activation and consequent IL-1β secretion leading to increased cancer stem cells population, which is directly related to a poor prognostic for this disease. Thus our data indicated that inflammatory processes in prostate cancer might lead to adverse events with negative disease impact for patients, favoring phenotypes associated with metastasis. Furthermore, indirectly our results also suggest that the use of anti-inflammatory drugs as adjuvants to traditional treatments for prostate cancer may improve the patient’s prognostic.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-09-17T15:48:44Z No. of bitstreams: 1 2013_NathaliaMoraesVasconcelos.pdf: 2898585 bytes, checksum: 64ad702001f98b5d13e5eafab2c73121 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-09-23T13:05:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_NathaliaMoraesVasconcelos.pdf: 2898585 bytes, checksum: 64ad702001f98b5d13e5eafab2c73121 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-09-23T13:05:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_NathaliaMoraesVasconcelos.pdf: 2898585 bytes, checksum: 64ad702001f98b5d13e5eafab2c73121 (MD5) / O câncer de mama é o tipo de câncer mais prevalente entre as mulheres em todo o mundo e o responsável pelo maior índice de morte feminina por câncer. Em modelos experimentais, a inflamação crônica foi descrita como indutora, porém alguns dados não são reproduzidos na clínica. Os inflamassomas, complexos multiprotéicos de sinalização intracelular atuantes na imunidade inata e adaptativa, vem sendo associados a funções celulares contrastantes dependendo do tipo de célula cancerígena analisada, o que também é verdade para os receptores do tipo Toll. Porém, a relação do inflamassoma NLRP3 e o câncer de mama é pouco conhecida. Considerando ainda a presença dos receptores NLRs e TLRs nas células não hematopoiéticas e, logo, a possibilidade de modulação do microambiente inflamatório pela própria célula tumoral, propôs-se analisar a presença e função do receptor NLRP3 e seu inflamassoma em células tumorais da mama in vitro. Foi observado que os componentes NLRP3 e ASC estão presentes em MCF7, porém há baixa expressão de ASC em MDA-MB-231. Ainda, houve ativação de caspase-1, indicando ativação do complexo, e diminuição das quantidades de proteínas NLRP3 e ASC na presença de Nigericina. A utilização de LPS e Nigericina induziu elevada morte celular em ambas as linhagens, com características como fragmentação nuclear, rompimento da membrana plasmática e PARP1 não clivado, eventos típicos da piroptose, a morte celular induzida pela ativação dos inflamassomas. Apenas a MDA-MB-231 secretou TNFα após as estimulações, e nenhuma das células secretou IL1β e IL6. Além disso, a utilização dos estímulos alterou os padrões de ciclo celular e diminuiu a taxa de proliferação em ambas as linhagens, mas não alterou o fenótipo CD24/CD44 de forma geral. O uso de sobrenadantes de monócitos estimulados para o inflamassoma NLRP3 na cultura das células de câncer de mama demonstrou efeitos fenotípicos semelhantes ao uso dos agonistas, indicando um direcionamento tumoricida dos monócitos ativados, atuando por meio de seus fatores secretados. Estes resultados sugerem que o inflamassoma NLRP3 não só está presente em células tumorais da mama, mas que sua ativação possui um efeito tumoricida, quando ocorre na própria célula tumoral ou por fatores secretados de monócitos. Essa via pode representar um novo aspecto de modulação, o qual pode ser explorado para o desenvolvimento de novas terapias contra o câncer de mama. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Breast cancer is the most prevalent type of cancer among women worldwide and the one responsible for their major cause of cancer death. In experimental models for this cancer, chronic inflammation is particularly described as an inducer; however there is some inconsistency in the clinic. The inflammasomes, intracellular multiprotein signaling complexes related to adaptative and innate immunity, are associated with contrasting roles regarding cancer immunity, depending on the cancer analyzed, which is also true for Toll-like Receptors. However, the relationship between the NLRP3 inflammasome and breast cancer is not completely understood. Considering the non-hematopoietic presence of TLRs and NLRs and, therefore, the possible generation of an inflammatory microenvironment by the tumor cells itself, we proposed to study the presence and function of the NLRP3 receptor and its inflammasome in breast tumor cells in vitro. We observed that the components NRLP3 and ASC are present in MCF7 cell line, but ASC is in low amounts in MDA-MB-231. Our data suggest caspase-1 activation, indicating activation of the complex, and diminished protein amounts of NLRP3 and ASC in the presence of Nigericin. When we used LPS and Nigericin, there was cell death induction in both cell lines, with nuclear fragmentation, plasma membrane rupture and non-cleaved PARP1, typical features of pyroptosis, the inflammasome mediated cell death. Only the MDA-MB-231 cell line secreted TNFα after stimulation, and neither of cells secreted IL1β nor IL6. Also, in the presence of the stimulus, there was alteration in the cell cycle pattern and decrease in the proliferation index of both cell lines, but not in the phenotype CD24/CD44 globally. The use of supernatants from NLRP3 stimulated monocytes in the culture of breast cancer cells induced similar phenotypic events to the presence of the agonists, which indicate an antitumoral activity of the activated monocytes, functioning through its secreted factors. Ours results suggest that the NLRP3 inflammasome is not only present in breast cancer cells, but its activation has a tumoricidal effect when occurring in the cancer cell or through secreted factors from monocytes. This pathway may represent a new modulation aspect, which may be further studied for the development of therapies against breast cancer.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Nutrição, 2010. / Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2011-05-13T18:42:24Z No. of bitstreams: 1 2010_Cibele F. Neves.pdf: 1075439 bytes, checksum: a9cd63ddd67f28d1055d022661025be7 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(tempestade_b@hotmail.com) on 2011-05-16T18:59:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_Cibele F. Neves.pdf: 1075439 bytes, checksum: a9cd63ddd67f28d1055d022661025be7 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-05-16T18:59:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_Cibele F. Neves.pdf: 1075439 bytes, checksum: a9cd63ddd67f28d1055d022661025be7 (MD5) / Introdução A incidência global de obesidade tem aumentado nos últimos anos e atualmente alcançou proporções epidêmicas, atingindo cerca de 400 milhões de obesos no mundo. O excesso de tecido adiposo tem sido associado ao desenvolvimento de estresse oxidativo, inflamação e retenção de ferro nos tecidos, condições que aumentam a propensão ao desenvolvimento das comorbidades associadas à obesidade. Objetivo Avaliar os biomarcadores do processo inflamatório, estado corporal de ferro e estresse oxidativo de indivíduos obesos submetidos à gastroplastia redutora com derivação intestinal em Y-de-Roux (GRDIYR), no pré e pós-operatório em um Programa de Cirurgia da Obesidade. Métodos Foram investigados em 35 indivíduos obesos, variáveis antropométricas, de consumo alimentar e bioquímicas no período pré-operatório e 6 meses após cirúrgia da obesidade. As variáveis bioquímicas incluiram níveis plasmáticos de indicadores de estresse oxidativo: malondialdeído (MDA), proteína carbonilada (PC) e a capacidade antioxidante total - poder antioxidante redutor de ferro (PARF); inflamação: interleucina-6 (IL-6), e proteína C-reativa (PCR); estado corporal de ferro: ferro, ferritina, hemoglobina e índice de saturação de transferrina (IST), bem como variações nos níveis plasmáticos de glicose, insulina, zinco, colesterol total e frações. Resultados Seis meses após a cirurgia houve uma redução significativa (p<0,01) nos valores médios de IMC [39,9 (35,1 – 52,1) / 29,7 (25,1 – 41,9) kg/m2], consumo energético [1.667 (755 – 3.459) / 957,4±245,6 kcal) e nos níveis plasmáticos de: MDA (0,220±0,066 / 0,099±0,045 nmol/mg proteína); PC (0,42±0,1/ 0,27±0,08 nmol/mg de proteína); PCR [5,8 (0,25 – 47,3) / 0,7 (0,1 – 14,0) mg/dL]; PARF [1092,2±200,7 / 1006,3±194,9 mmol/L); e ferritina (84 (5 – 495) / 53,1 (3 – 352,8) ng/mL]. Não houve variação significativa nos níveis plasmáticos de: IL-6 [2,3 (0,1 – 33,3) / 2,2 (0,6 – 26,9) pg/mL); ferro (79,9±34,8 / 76,1±33,3 mg/dL); e IST (25,9±11,9 / 25,0±12,6 %). No período pré-operatório foi observada uma tendência de correlação positiva entre IMC e MG em relação a IL-6 sérica (r =0,339 e 0,355, p=0,067 e 0,05; respectivamente), e correlação negativa entre IMC e PC em relação a FRAP (r = -0,332 e -0,358; p=0,068 e 0,048; respectivamente). Enquanto, no período pós-operatório houve correlação positiva entre ferro sérico e IST comparados a MDA (r=0,452 e 0,401; p=0,014 e 0,031). Conclusão Os resultados sugerem que a obesidade grau III está relacionada a um aumento de estresse oxidativo e do estado inflamatório. O excesso peso e tecido adiposo parecem estar correlacionados ao aumento da resposta inflamatória na obesidade. A perda de peso induzida pela cirurgia restritiva e disabsortiva, GRDIYR, é capaz de melhorar o perfil lipídico, o estado inflamatório e consequentemente o estado oxidativo de indivíduos obesos. ____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Background The global incidence of obesity has increased in recent years and now has reached epidemic proportions, affecting approximately 400 million people in the world. Excess body fat mass has been associated with the development of oxidative stress, inflammation and iron retention in tissues, conditions that increase the propensity for the development of comorbidities associated with obesity. Objective To evaluate biomarkers of inflammatory process, iron status and oxidative stress in obese subjects in an Obesity Surgery Program that underwent Roux-en-Y gastric bypass (RYGBP), before and after surgery. Methods Anthropometry, food intake and biochemistry indicators were analyzed before and 6 months after the surgery in 35 obese subjects. Biochemistry indicators included oxidative stress markers in the plasma: malondialdehyde (MDA), carbonyl protein groups (CP) and total radical antioxidant parameter - Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP); inflammation: interleukin-6 (IL-6) and C-reactive protein (CRP); iron status: iron, ferritin, hemoglobin and transferrin saturation; as well as glucose, insulin, zinc, cholesterol (total and fractions) plasma levels. Results Six months after the surgery, there was a significant (p<0,01) reduction in the mean values of BMI [39,9 (35,1 – 52,1) / 29,7(25,1 – 41,9) kg/m2], food intake [1.667,9 (755,9 – 3.459) / 957,4±245,6 kcal) and in the plasma levels of MDA (0,220±0,066 / 0,099±0,045 nmol/mg protein), CP (0,42±0,1/ 0,27±0,08 nmol/mg de protein), CRP [5,8 (0,25 – 47,3) / 0,7 (0,1 – 14,0) mg/dL], FRAP [1092,2±200,7 / 1006,3±194,9 mmol/L) and ferritin [84(5 – 495) / 53,1(3 – 352,8) ng/mL]. There was not a significant variation in the plasma levels of IL-6 [2,3 (0,1 – 33,3) / 2,2(0,6 – 26,9) pg/mL], iron (79,9±34,8 / 76,1±33,3 mg/dL), and transferrin saturation (25,9±11,9 / 25,0±12,6 %). In the presurgery period there was a trend of positive correlation between BMI and body fat mass to serum IL-6 (r =0.339 and 0.355, p=0.067 and 0.05, respectively), and negative correlation between BMI and PC to FRAP (r = -0.332 and -0.358, p=0.068 and 0.048, respectively). While in the postsurgery period occurred a positive correlation between serum iron and transferrin saturation to MDA (r = 0.452 and 0.401, p= 0.014 and 0.031). Conclusion The results suggest that morbid obesity is related to increased oxidative stress and inflammatory status. Excess weight and fatty tissue seem to be correlated to increased inflammatory response in obesity. Weight loss induced by restrictive and malabsorptive surgery, RYGBP, is able to improve the lipid profile, inflammatory status and, consequently, the oxidative status of obese subjects.

A neuroinflamação tem sido demonstrada como um fator presente em diversas doenças neurodegenerativas, como a doença de Alzheimer e doença de Parkinson. O lipopolissacarídeo (LPS) é uma molécula constituinte da membrana de bactérias gram-negativas e, após a ligação desta molécula ao receptor TLR4 ocorre a ativação de diversas vias de sinalização as quais aumentam a produção e secreção de moléculas pró-inflamatórias. Devido a sua alta imunoatividade o LPS tem sido utilizado em modelos de inflamação in vivo e in vitro. O LPS também parece ser capaz de modular, através de uma inflamação sistêmica, a resposta da leptina. A leptina é um hormônio peptídico secretado principalmente pelo tecido adiposo, esta adipocina tem sua ação mediada pela ligação ao receptor ObR, o qual quando ativado pode induzir a ativação de diversas vias de sinalização, levando, por exemplo a produção de SOCS3, que age como um fator de regulação negativo da sinalização pelo ObR. A função mais conhecida e estudada da leptina é na regulação do controle alimentar, onde após a ingestão de alimentos a leptina age no hipotálamo sinalizando a sensação saciedade. Entretanto, já há evidências da presença de seu receptor em outras áreas cerebrais, como no hipocampo, onde esta adipocina pode ter um papel na regulação da memória e aprendizagem. Além disso, também tem sido implicada como neuroprotetora em doenças neurodegenerativas, como as doenças de Alzheimer e Parkinson, sendo a leptina capaz de melhorar tanto aspectos moleculares quanto comportamentais destas patologias. A leptina tem se mostrado importante na regulação da resposta imune, podendo servir como uma molécula de sinalização de uma inflamação sistêmica para o cérebro. A neuroinflamação tem sido implicada como um dos fatores que podem levar a resistência à leptina no hipotálamo. Tendo este hormônio ações distintas entre os tecidos, nós investigamos como a neuroinflamação induzida por injeção ICV de LPS poderia modular a resposta à leptina no hipocampo. Além disso, foram avaliados parâmetros inflamatórios centrais e periféricos e também a resposta astrocítica à neuroinflamação pela dosagem de proteínas características desse tipo celular, todos os parâmetros foram analisados após 48 horas da indução do modelo. Nosso estudo não encontrou diferença no imunoconteúdo da leptina no hipocampo, porém houve um aumento no conteúdo proteico do receptor ObR neste tecido nos ratos tratados e não ocorreu alteração significativa nos níveis intracelulares de SOCS3. Nós encontramos uma diminuição nos níveis séricos de leptina e da proteína S100B nos ratos do grupo LPS. A expressão proteica das citocinas pró-inflamatórias IL-1β e TNF-α foram alterados no hipocampo após a injeção ICV de LPS, tendo um aumento nos níveis intracelulares de IL-1 β e uma diminuição de TNF-α. A proteína glial fibrilar ácida (GFAP) teve um aumento em seu imunoconteúdo no hipocampo dos ratos tratados, em contrapartida os níveis de S100B intracelulares não foram alterados significativamente. Os níveis séricos de TNF-α tiveram um aumento em resposta à neuroinflamação induzida, além disso, os ratos que receberam injeção ICV de LPS mostraram uma maior perda de peso em relação aos ratos que receberam apenas veículo. Nossos dados mostram que a neuroinflamação é capaz de modular a resposta hipocampal e periférica de leptina, colaborando assim para uma melhor compreensão do papel da sinalização por leptina na neuroinflamação e possivelmente nas doenças neurodegenerativas. / Neuroinflammation has been established as a factor present in various neurodegenerative diseases such as Alzheimer's and Parkinson's disease. LPS is a constituent molecule of the membrane of gram-negative bacteria and, after binding of this molecule in the TLR4 occurs activation of several signaling pathways which increase the production and secretion of pro-inflammatory molecules, due to their high immunoactivity LPS has been used in models of inflammation in vivo and in vitro. LPS also seems to be able to modulate, through a systemic inflammation, the response of leptin. Leptin is a peptide hormone secreted mainly by the adipose tissue, that adipokine has its action mediated by binding to the ObRb receptor which when activated can induce activation of several signaling pathways, leading to, for example, production of SOCS3 which acts as a negative feedback on ObRb. The most studied and known function of leptin is in the regulation of food control, where after the food intake leptin signaling in the hypothalamus acts feeling of hunger. However, there is evidence of the presence of its receptor in other brain regions such as hippocampus, where this may adipokine play a role in the regulation of memory and learning. Furthermore, as has also been implicated as neuroprotective in neurodegenerative diseases such as Alzheimer’s and Parkinson’s diseases, and leptin can improve both molecular and behavioral aspects of these diseases. Leptin has been shown to be important in regulating the immune response, may serve as a signaling molecule to a systemic inflammation of the brain. The neuroinflammation has been implicated as a factor that can lead to leptin resistance in the hypothalamus. As this hormone have distinct actions between tissues, we investigated as a neuroinflammation induced by ICV injection of LPS could modulate the response to leptin in the hippocampus. In addition, we assessed the central and peripheral inflammatory parameters, and also the astrocytic response to neuroinflammation by measuring protein characteristics of this cell type, all parameters were analyzed after 48 hours of induction model. Our study found no difference in leptin immunocontent in the hippocampus, but there was an increase in the protein content of the ObR receptor in this tissue in the treated rats and no significant change in intracellular levels of SOCS3. We found a decrease in serum leptin and S100B protein in rats of LPS group. Protein expression of pro-inflammatory cytokines IL-1β and TNF-α were changed in the hippocampus after ICV injection of LPS, with an increase in intracellular levels of IL-1 β and TNF-α decreased. GFAP had an increase in their immunocontent in hippocampus of rats treated, in contrast to the intracellular S100B levels were not significantly altered. The TNF-α serum levels were increased in response to induced neuroinflammation, in addition, rats receiving ICV injection of LPS showed greater weight loss compared to rats receiving vehicle only. Our data demonstrate that neuroinflammation is capable of modulating hippocampal and peripheral leptin response, thus contributing to a better understanding of the role of leptin signaling in the neuroinflammation and possibly in the neurodegenerative diseases.

Submitted by Marcelo Andrade Silva (marcelo.andradesilva@ufpe.br) on 2015-03-09T13:30:47Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação Sanderssonilo dos Santos - Cópia.pdf: 1266069 bytes, checksum: 3ba4bb364db702d896562c99ea6b3c14 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-09T13:30:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação Sanderssonilo dos Santos - Cópia.pdf: 1266069 bytes, checksum: 3ba4bb364db702d896562c99ea6b3c14 (MD5) Previous issue date: 2013 / CNPq / A inflamação é um processo complexo e dinâmico iniciado pelo corpo em resposta a uma lesão tecidual ou infecção que culmina na liberação sequencial de mediadores que conduzem à vasodilatação, aumento da permeabilidade vascular, formação de edema e a ativação de fibras de dor. O processo inflamatório está presente em várias patologias, como a artrite e a osteoartrite. Segundo dados do Ministério da Saúde, cerca de 80% dos brasileiros com idade acima de 70 anos são portadores de uma destas doenças, sendo imprescindível a utilização de anti-inflamatórios para combater o processo de inflamação. Contudo, esta utilização pode levar a efeitos secundários como ulceração gástrica e hemorragia, despertando a necessidades de novas drogas capazes de inibir o processo inflamatório sem apresentar os riscos advindos da sua administração. Diante desta problemática, diversos estudos apontam as tiazolidinas como portadoras de significativas atividades biológicas. Pois, estudos comprovam o potencial anti-inflamatório e analgésico de derivados tiazolidínicos com reduzidos efeitos gastrointestinais. Nesse contexto, propomos a obtenção de novos derivados tiazolidínicos, sua elucidação estrutural e determinação da atividade anti-inflamatória através dos testes de peritonite induzida por carragenina, contorções abdominais induzidas por ácido acético e determinação dos níveis de NO. Os compostos tiveram suas estruturas devidamente comprovadas por RMN-1H, RMN-13C e IV. Todos os derivados foram sintetizados de acordo com uma via plena e convergente, através de reações de N-alquilação, condensação e posterior adição de Michael. Seis compostos foram avaliados in vivo e comparados com fármacos padrões. Os compostos GQ-246, GQ-252 e GQ-273 foram os mais ativos da série, apresentando um percentual de inibição da migração celular de 80,7%, 81,8% e 77,4% respectivamente, em teste de peritonite induzida por carragenina. Estes resultados comprovam mais uma vez a potencial atividade anti-inflamatória das tiazolidinadionas e nos remete a necessidade realização de testes capazes de avaliar a toxicidade destas moléculas.

Orientador: Sergio Marangoni / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T03:14:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_MaristelaFreitas_D.pdf: 2808897 bytes, checksum: 76995e83de7c8efb20af2307e7a092b9 (MD5) Previous issue date: 1995 / Doutorado / Genetica / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Lourenço Bozzo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piraciacaba / Made available in DSpace on 2018-07-21T20:13:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bozzo_RicardodeOliveira_M.pdf: 5946295 bytes, checksum: a06ba57aa14f5358b8cdc21ddea8845d (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A ação de uma droga antiinflamatória não-esteróide (diclofenaco sódico) foi avaliada, em diferentes perfodos de tempo, após uma incido cirúrgica na pele de ratos machos, adultos jovens, pesando mais ou menos 250 gramas cada. Os grupos experimentais receberam, 1 hora antes da incido cirúrgica, uma injeção intraperitoneal de diclofenaco sódico (Voltaren). Um grupo recebeu 2 mg/Kg de peso da droga (G2); o outro recebeu 4 mgJKg de peso da droga (G4). O grupo controle (GC) .recebeu 2 mgJKg de peso de PBS, também por injeção intraperitoneal. Uma hora após estas administrações, foi feita uma incido cirúrgica de aproximadamente 1 cm de extensao, na pele do dorso dos 72 ratos. Cada grupo de 6 ratos (2 do GC, 2 do G2 e 2 do G4) era sacrificado após um determinado perfodo de tempo ,3,6,12,24,48,72,96,120 e 168 horas após a incid,o). Os efeitos da droga na evolução do processo innamatório e da reparação foram avaliados através dos aspectos morfológicos (macro e microcóspicos). As observações macroscópicas e a nfvel de microscopia óptica mostraram que o diclofenaco sódico modifica as respostas teciduais, provocando um re tardo na evolução do processo innamatório e na cura da ledo. Estas alterações são mais evidentes a partir das 72 horas, e de maneira mais marcante no grupo G4 que nos demais. o bloqueio da biossfntese de prostaglandinas pelo diclofenaco sódico modificou a expressão macro e microscópica da ledo nos diferentes perfodos de tempo, possivelmente pela intensificaç:lo na formaç:lo de leucotrienos. Apesar da ação antiinftamat6ria do Voltaren, outros mediadores qufmicos da inftamação além das prostaglandinas, mantiveram a evolução do processo. As possfveis interações das diferentes substancias liberadas na área lesada, do momento zero até 168 horas, determinaram as alterações observadas nesta pesquisa / Abstract: Not informed. / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências

Orientador: Eduardo Dias de Andrade / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-22T04:49:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arruda_AnaMariaSoaresde_D.pdf: 3153753 bytes, checksum: 979fe0671f2a6ad1366613fe933fb33c (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: o deflazacort é um antiinflamatório esteróide, que tem sido empregado em clínica médica, com a vantagem de apresentar uma menor incidência de alguns dos efeitos colaterais associados aos glicocorticóides (hiperglicemia, osteoporose). Não há dados, na literatura, a respeito de seu efeito antinociceptivo em modelos experimentais. Em vista disto, propusemo-nos estabelecer, em animais de laboratório, alguns parâmetros para a avaliação do seu efeito antinociceptivo. O deflazacort (0,075 a 2,4mg/kg, ip), foi administrado 60 minutos antes do estímulo nocivo, e seus efeitos comparados com um controle (solução salina 0,9%) ou com doses crescentes de dexametasona (1,0 a 4,Omg/kg, ip) ou indometacina 2,Omg/kg, se. Foram empregados dois modelos para se avaliar a dor (teste de contorções abdominais induzi das pelo ácido acético e teste da formalina), em camundongos, e outro método experimental para a avaliação da migração de leucócitos PMN à cavidade peritoneal, nesta mesma espécie animal. Resultados: o deflazacort diminuiu o número de contorções a partir da dose de O, 15mg/kg, enquanto que a dexametasona apresentou este efeito a partir da dose 2,Omg/kg, ambos de modo dose dependente (salina: 32,1 :t 0,96 contorções; deflazacort 0,15mg/kg: 18,8 :t 3,39 contorções; indometacina 2,Omg/kg: 13,3 :t 3,32 contorções, p<0,05). No teste da formalina, o deflazacort diminuiu o tempo total da segunda fase a partir fia dose 1,2 mg/kg, enquanto que a dexametasona foi eficaz a partir da dose de 2,Omg/kg, ambos não apresentando efeito dose dependente (salina: 246,5 :t 18,90 s; deflazacort 1,2mg/kg: 120,1 :t 21,95 s; dex}l.ffietasona 2,Omg/kg: 134,9 :t 39,38 s; indometacina 2,Omg/kg: 153,0 :t 19,21 s, p<0,05). Na migração leucocitária, p deflazacort inibiu a migração de PMN a partir da dose de 0,3mg/kg, enquanto que a dexametasona apresentou o mesmo efeito em dose igual ou superior a 3,Omg/kg (salina: 0,59 :t 0,06 xl06 PMN/rnL; deflazacort 0,3mg/kg: 0,31 :t 0,04 xl06 PMN/rnL; dexametasona 3,Omg/kg: 0,21 :t 0,04 xl06 PMN/rnL, p<0,05). Estes resultados apontam para um potente efeito antinociceptivo do deflazacort nos modelos testados, além de uma significante inibição da migração de leucócitos PMN / Abstract: The aim of this work is to stablish parameters for experimental assay to deflazacort, a glucocorticoid wich have few side effects on bone and glycemia. Two nociceptives and one of PMN accmnulation experimental models were done in order to evaluate the antinociceptive and antiinflammatory effects of deflazacort, when compared with dexamethasone and indometacin. SWISS male mice were treated with crescent doses of deflazacort (Calcort@, 0.075mg!kg to 2.4mg!kg), or dexamethasone (Decadron@, 1.0 to 4.0mg!kg), or saline 0.9% or indometacin 2.0mg!kg, 60 minutes before the nocive challenge. Acetic ~id writhing test showed that slow doses of deflazacort inhibit the acetic acidinduced stretching and writhing movements. lu fact, deflazacort were more potent that dexamethasone in this test (saline: 32.1 :t 0.96 movements in 15 ,minutes; deflazacort O, 15mg!kg: 18.8 :t 2.86 moviments; dexamethasone 2.0mg!kg: 22.2 :t 3.53 movements; indometacin 2.0mg!kg: 1~3.3 :t 3.32 movements, p<0.05). Deflazacort also were more potent in inhibit the late phase ofFormalin test (saline: 246.5 :!: 18.90 s; deflazacort 1.2mg!kg: 120.1 :!: 21.95 s; dexamethasone 2.0mg!kg: 134.9 :!: 39.38 s; indometacÍn 2.0mg!kg: 153.0 :!: 19.21 s, p<0.05). lu the model of leukocyte PMN migration, treatment with deflazacort, doses equal to or higher than 0.3mg!kg inhibited the PMN accumulation, while dexamethasone showed the same effect with doses equal to or higher than 3.0mg!kg (saline: 0.59 :t 0.06 xl06 PMN/mL; detlazacort O.3mg!kg: 0.31 :t 0.04 xl06 PMN/mL; dexamethasone 3.0mg!kg: 0.21 :!: 0.04 xl06 PMN/mL, p<0.05). These results point to a potent antinociceptive effect of detlazacort, when compared to dexamethasone, in the tested experimental models / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Ciências

Orientador : João Ernesto de Carvalho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T11:09:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_MariaCarolinaBayeuxLemede_M.pdf: 5511599 bytes, checksum: 181a8bcdc8c0af38ab319eb4d7acf1ce (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Cordia curassavica DC. (Boraginaceae) conhecida popularmente como "erva baleeira" é utilizada popularmente no tratamento de diversos processos inflamatórios. Alguns autores sugerem que a tração artemetina é a tração responsável pela atividade antiinflamatória. No entanto, resultados contraditórios sugeriram uma reavaliação dos efeitos antiinflamatórios dos extratos e da fração rica em artemetina de Cordia curassavica, e ainda identificar a tração ativa responsável pela ação farmacológica. Para a avaliação da atividade antiinflamatória, foram utilizados modelos de edema de pata induzido por vários agentes flogísticos como a carragenina, histamina, bradicinina e fosfolipase da Naja-Naja; edema de orelha induzido por óleo de cróton e peritonite induzida por carragenina. Para a avaliação da atividade antinociceptiva foram utilizados o teste de algesia induzida por calor (placa quente) e o teste das contorções abdominais induzidas por ácido acético. A metodologia da atividade antiproliferativa em células tumorais humanas foi utilizada para monitoramento do processo de purificação do extrato bruto diclometânico. Inicialmente foram obtidos os extrato brutos éter de petróleo (EBP), etanólico (EBE) e diclorometânico (EBD), que foram avaliados no modelo de pata induzido por carragenina. O EBP não inibiu o edema e o EBE reduziu em 44% após 4 horas do agente flogístico. Como o EBD inibiu o edema induzido por carragenina em 59% após 4 horas da administração do agente flogístico e também por extrair quantidades menores de substâncias, facilitando fracionamentos posteriores, foi escolhido para dar continuidade a este trabalho. No modelo de edema de pata induzido por histamina o EBD de C. curassavica não inibiu o edema, ao passo que nos modelos de edema de pata induzido por bradicinina o EBD de C. r:Jlasumo curassavica reduziu o edema induzido por bradicinina em 60 % e 66% nas doses de 300 e 1000 mglkg após 60 minutos da aplicação do agente, respectivamente. O EBD de C. curassavica reduziu o edema induzido pela fosfalipase Az do veneno da Naja Naja em 37 % e 45% nas doses de 300 e 1000 mglkg respectivamente, após 60 minutos da aplicação do agente. No modelo de dermatite provocada pela aplicação de óleo de cróton, o EBD de C. curassavica também inibiu a formação de edema em 54% na dose de 1000 mglkg e na peritonite induzida por carragenina diminuiu a migração leucocitária em 70%. Em ratos adrenalectomizados o EBD manteve a atividade antiedematogênica, inibindo o edema em 45% após 4 horas da administração da carragenina, confirmando que sua atividade independe da liberação de corticóides endógenos. No modelo de nocicepção químico, o EBD de C. curassavica inibiu o número de contorções abdominais induzidas pelo ácido acético em 54% (dose de 300 mglkg) e 65% (dose de 1000 mglkg). Já no teste da placa quente o EBD de C. curassavica não aumentou o tempo de reação dos animais ao estímulo térmico, sugerindo que a ação analgésica do EBD é por bloqueio da reação inflamatória. Na avaliação da atividade antiproliferativa em cultura de células tumorais humanas, a F3, F4 e a fração F6 apresentou efeito citostático e citocida de modo semelhante à indometacina. Os resultados obtidos permitem concluir que a C. curassavica possui princípios ativos com atividade antiinflamatória provavelmente relacionada com a inibição da síntese e/ou atividade dos prostanóides. A artemetina, encontrada nessa espécie, não é o princípio ativo responsável pelos efeitos observados / Abstract: The Cordia curassavica (Boraginaceae), lmown popularly as "erva baleeira", is used in foIk medicine for treatment of several inflammatory processes and as healing agent. The scope of this work was to evaluate the antiedematogenic activity; the antinociceptive activity, and antiproliferative of crude as extracts from Cordia curassavica well as the artemetin enriched fraction. The petroleum ether, dichloromethane, etanol crude extracts and artemetin fraction were evaluated on paw edema model induced by carrageenin. The crude dich1oromethane showed significant antiedematogenic activity, but artemetin enriched fraction extract did not show activity. The petroleum ether crude extract did not produce significant paw edema reduction. Therefore the dich1oromethane crude extract was chosen to continue with this study. The antinociceptive activity was demonstraded enployed hot plate and acetic acid-induced abdominal constriction writing model. The dich1omethane extract also showed antinociceptive activity by inhibition of acetic acid-induced writhing in mice. Nevertheless in hot plate model this extract did not reveal activity, suggesting a straight relationship of analgesic activity with inflammatory process inhibition . The dich1oromethane crude extract showed antiedematogenic activity in experimental models with paw edema induced by, bradykinin and naja naja, as well ear edema induced by croton oil. This extract inhibited too edema formation by carragenin induced in adrenalectomizated rats, rejecting the anti-inflamatory activity by exc1usively endogens corticoids. The antiproliferative activity was examinated in human cell culture. The fraction F4 e F6 showed antiproliferative activity related to concentration, showing citotoxicity in the highest concentration tested. Based on these results, we suggest that the anti-inflamatory activity the extracts is due that interference in produced prostanoides / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Orientador : Sergio Marangoni / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T11:36:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Camara_PaulaRubyadeSouza_M.pdf: 3153329 bytes, checksum: fb99d8d7c48803cbe26b33c704d1c14c (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: o fracionamento do veneno total de Crotalus durissus terrificus (C.d.terrificus), Crotalus duríssus collilineatus (C.d.collilíneatus) e Crotalus durissus cascavella (C.d.cascavella) em coluna Superdex G-75 mostrou a presença de quatro picos principais. O pico reconhecido como crotoxina nas três espécies crotálicas foi purificado em HPLC de fase reversa, e mostrou a presença das isoformas de crotapotinas (CA) e fosfolipase A2 (PLA2), que variam quantitativamente entre os três venenos. A eletroforese também foi compatível quanto as regiões de massa molecular esperadas para a frações (Crtx, PLA2 e CA) dos três venenos, mostrando que há alta homogeneidade molecular entre as mesmas. O extravasamento plasmático evocado pela (CA; 1j../g/sítio) e (P_ ; O,5j../g/sítio) de C.d.terrificus, C.d.collílineatus e C.d.cascavells foi avaliado na microvasculatura de pele dorsal de ratos através do acúmulo local da mistura de albumina bovina marcada com 125 e azul de Evans, previamente administrada pela via endovenosa (e.v.). A injeção intradérmica (Ld.) das CA e PLA2 dos três venenos crotálicos induziu aumento na permeabilidade microvascular de maneira significativa para as PLA2s, mas não para as Caso tratamento prévio (30 min) com o antagonista de receptores de histamina e 5-HT (ciproheptadina; 2mg/Kg) inibiu significativamente o extravasamento plasmático evocado pelas PLA2 dos três venenos testados (0,5 j../g/sítio). O antagonista seletivo de receptores NK1 de taquicininas, SR140333 (1nmol/sítio), inibiu significativamente o extravasamento plasmático evocado pelas PLA2S. Em ratos neonatos tratados com capsaicina (50mg/Kg; s.c.), o extravasamento plasmático induzido pelas três PLA2S crotálicas foi significativamente inibido. Em resumo, nossos resultados fornecem evidências que PLA2S de C.d.terrlficus, C.d.coIlilineatus e C.d.cascavella podem atuar como substâncias neurogênicas próinflamatórios, enquanto que as CAs não têm papel semelhante / Abstract: The fractionament of the crude poison of Crotalus durissus terrificus (C.d.terrificus) , Crotalus durissus collilíneatus (C.d.coJlílíneatus) and Crotalus. durissus cascaveiJa (C.d.cascaveJ/a) in calumn Supherdex G-75 showed the presence of faur main picks. The pick recognized as crotoxina in the three species crotalics was purified in reverse phase HPLC , and showed the presence of the crotapotins (CA) and fosfolipase Az (PLAz) isoforms, that vary Quantitativamente amang the three poisans. The eletrofaresis was also compatible as the areas af molecular mass expected for the fractions (Crtx, PLA2 and CA) af the three poisans, showing that there is discharge malecular hamogeneity among them. Plasma extravasation evoked by the (CA; 1(Jg/site) and (PLA2; O,5jJg/site) af C.d.terrificus, C.d.colfilíneatus and C.d.cascavella was evaluated in the mierovasculature af rats dorsal skin through the local accumulation of the mixture of bovine albumin marked with 1125 and Evans bJue previously administered by the endovenosa road (e.v.). The intradermic injection (Ld.) of CA and PLA2 of the three erotalics poisons indueed an inerease in the mierovaseular permeability in a sígnificant way for PLA2S, but not for Caso Previous treatment (30 min) with histamine and 5HT receptor antagonist (ciproheptadina; 2mg/Kg; i.p.) inhibited the plasma extravasation signmcantJy evoked by PLA2 from the three venons tested (0,5 (Jglsíte). The takicinin NK1 receptor selective antagonist, SR140333 (1 nmol/site), inhibited the plasma extravasation significantly evoked by PLAzs. In neonatal capsaiein treated rats (50mglKg; s.e.), the plasma extravasation induced by three crotalics PLA2S was significantly inhibited. In summary, our results supply evidences that PLA2S trom C.d.terrificus, C.d.co/lilíneatus and C.d.cascaveJ/a can aet as proinflammatory neurogenics substances, while CAs don't have similar role / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia