Orientador: Miguel Luiz Menezes Freitas / Resumo: Dipteryx alata is considered endemic species of the Brazilian Cerrado. Currently the species needs attention by the increased fragmentation of the occurrence area. It stands out for presenting resistant wood and the high production of fruits. The aim of the study was to estimate genetic parameters from the morphometric fruits, seeds and seedlings, to provide information of genetic variability within and between species provenances for future breeding programs and conservation. The fruits were collected in three natural populations, as Campo Grande - MS, Ituiutaba - MG and Paulo de Faria - SP, in October 2014. The seedlings were prepared in the nursery Fazenda de Ensino, Pesquisa e Extensão (FEPE/UNESP). For morphometric analysis of fruits and seeds were measured (mm) thickness (mm) Length (mm) Mass (g). In the seedlings were evaluated the total height (cm) Stem diameter (mm). We used the design complete block design (RBD) with one plant per plot. There were statistically significant differences among provenances and progenies for the characters of fruits, seeds and seedlings, indicating the presence of genetic variation. The results of the average heritability coefficient of individual variation and accuracy, indicated that for the fruits, seeds and seedlings there is presence of genetic variability. In the analysis of all the seedlings can be seen that there were significant differences in the effect of origin and not significant for the effect of progeny. Results indicate t... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Orientador: Valdir Augusto Neves / Banca: José Paschoal Batistuti / Banca: Osvaldo de Freitas / Resumo: O baru (Dipteryx alata Vog.), fruta nativa do Cerrado brasileiro, apresenta uma amêndoa com alto teor de proteínas, entretanto, informações sobre suas propriedades são ainda escassas. O objetivo do trabalho foi caracterizar algumas das propriedades físico-químicas da proteína dessa semente. Percentuais de 74,13; 81,56 e 76,50 de proteínas foram solubilizadas frente às diferentes proporções massa:volume 1:10, 1:30 e 1:50, respectivamente. Em relação aos tempos 30, 60 e 90 minutos de extração solubilizaram-se 78,59, 80,45 e 73,74% das proteínas totais, respectivamente. Frente às modificações de pH e concentração de NaCl, verificouse um comportamento típico da predominância de globulinas, caracterizado por máxima solubilidade em pHs 2,0 (87,9%) e acima de 8,0 (89,87%) e mínima solubilidade (8,5%) em pH 4,5, em água, e aumento junto ao ponto isoelétrico associado a crescente concentração salina no meio extrator. O fracionamento pelo critério de solubilidade em diferentes sistemas revelou teores de 13,97% de albuminas; 61,74% de globulinas, 0,48% de prolaminas, 3,25% de glutelinas e 4,61% de proteínas insolúveis. A digestibilidade in vitro, determinada pela sequência enzimática pepsina-pancreatina, mostrou 85,59% e 90,54% de hidrólise em relação à caseína para a farinha desengordurada e a globulina total da amêndoa, respectivamente. A proteólise da globulina majoritária obtida em Sephadex G-200, pelas enzimas tripisina, quimotripsina e pepsina, separadamente, mostrou percentuais de hidrólise, em relação à caseína, de 62,38, 17,92 e 71,38, respectivamente, após 120 minutos de incubação, sendo o progresso das proteólises acompanhados em SDS-PAGE. O perfil cromatográfico em colunas de filtração em gel mostrou a existência de uma forma protéica majoritária na fração globulina total que, em coluna de troca-iônica de DEAE-celulose, foi eluída... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Baru (Dipteryx alata Vog.), a fruit native to the Brazilian Cerrado, has a seed with a high protein content, however, informations about its properties remain scarce. The aim of this study was to characterize some of the physicochemical properties of this seed protein. Protein percentage of 74.13, 81.56 and 76.50 were solubilized using the mass:volume ratios 1:10, 1:30 and 1:50, respectively. During the extraction times 30, 60 and 90 minutes were solubilized 78.59, 80.45 and 73.74% of total proteins, respectively. Changes in pH and salt concentration reveled a typical behavior of gobulin predominance, characterized by greater solubility at pH 2.0 (87.9%) and above 8.0 (89.87%) and lower solubility (8.5%) at pH 4.5 in water, and solubility improvement near the isoelectric pH by increasing salt concentration in the extractant. Fractionation according to protein solubility in different solvents showed 13.97, 61.74, 0.48, 3.25 and 4.61 percent of albumin, globulin, prolamin, glutelin and insoluble protein, respectively. The in vitro digestibility determined by pepsin-pancreatin enzimatic sequence showed 85.59% and 90.54% of hydrolysis, in relation to casein, for the defatted flour and total globulin from baru seed, respectively. After 120 minutes of incubation, proteolysis of the major globulin obtained from Sephadex G-200 by tripsin, chymotrypsin and pepsin, separately, showed hydrolysis porcentages, in relation to casein, of 62.38, 17.92 and 71.38, respectively, and the progress of these proteolysis was monitored by SDS-PAGE. The chromatographic profile in gel filtration columns reveled the existence of one major protein form in total globulin, which was eluted off the DEAE-celulose ionexchange column at 0.12 M NaCl concentration. The molecular weight (MW) of globulin was estimated at 405-436 kDa and its electrophoretic profile showed three main bands of MW 62-64, 66 and 73-76 kDa, and... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

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Entretanto, para um melhor entendimento, são necessários mais estudos em locais diferentes daqueles de cultivo comercial. As condições edafoclimáticas do Sul do Rio Grande do Sul, apresentam algumas especificidades edafoclimáticas em relação às regiões tropicais de cultivo tradicional. Para que o produtor possa diversificar a sua produção com o maracujá, são necessários estudos que possam adequar os genótipos já existentes no mercado para um novo local. Portanto, objetivou-se avaliar aspectos produtivos, a qualidade físico-química e os compostos bioativos do suco, da farinha da casca e das folhas dos genótipos de maracujazeiros comerciais cultivados em Pelotas, RS. A tese compreende três artigos e foram desenvolvidos na UFPel/FAEM, entre os anos de 2013 e 2015. O Artigo 1 foi intitulado de produção e qualidade de frutos de maracujazeiros em condições de clima temperado. Foram avaliados os genótipos: Passiflora edulis ‘Catarina’; Passiflora edulis ‘BRS Sol do Cerrado’ e, Passiflora edulis ‘BRS Rubi do Cerrado’. Todos os genótipos avaliados demonstram potencial para produção na região de Pelotas, RS. A qualidade físico-química dos frutos dos genótipos estão dentro dos parâmetros aceitáveis. O Artigo 2 foi intitulado de compostos bioativos das folhas, casca e frutos de genótipos de maracujazeiros. Foram avaliados os genótipos: ‘Catarina Roxo’ (Epagri); ‘Catarina’ (Epagri); ‘Urussanga’ (Epagri); ‘BRS Gigante Amarelo’; ‘BRS Rubi do Cerrado’; ‘BRS Sol do Cerrado’. Para as avaliações das folhas, o genótipo ‘BRS Gigante Amarelo’ não foi avaliado. Houve diferença entre os genótipos para todos os compostos bioativos avaliados. Pode-se concluir que os genótipos de maracujazeiros avaliados no presente estudo, apresentam potencial como fonte de compostos bioativos. O Artigo 3 foi intitulado de produção e qualidade de frutos do maracujazeirodoce seleção ‘Urussanga’ em condições de clima temperado. O genótipo caracterizado foi a seleção Urussanga selecionado pela Epagri, oriundo de seleções de maracujá-doce (Passiflora alata Curtis.). De uma maneira geral o maracujá-doce seleção Urussanga, demonstra potencial produtivo e frutos de qualidade físicoquímica adequados quando cultivados em condições de clima temperado. Contudo, com base nos resultados obtidos e discutidos nesta tese, pode-se concluir que a produção, a qualidade e os compostos bioativos dos genótipos de maracujazeiros avaliados podem ser explorados comercialmente por produtores que desejam diversificar a produção em região não-tradicional de cultivo. Conclui-se que a presente tese cumpriu com a justificativa inicial, que portanto , comprova a existência do potencial para a produção de maracujá em condições de clima temperado. / The fruticulture is an important activity in Brazil and is very adapted to family farming and the proposed diversification of small areas of production. The passion fruit (Passifloras) are plants that play an important role for many family farmers due to high demand of manpower and considerable income for small farms. In Brazil, the cultivated species featured include the yellow passion fruit (Passiflora edulis Sims.), the purple passion fruit (Passiflora edulis Sims.) and sweet passion fruit (Passiflora alata Curtis.). With edaphoclimatic adaptability cultural diversity of Brazil, it is possible the yellow passion fruit production in all regions of the country. However, for a better understanding, it is necessary to further studies in different locations from those of commercial cultivation. Soil and climatic conditions of southern Rio Grande do Sul (State of Brazil), has some specific soil and climate in relation to the tropical regions of traditional cultivation. So, to that the growers can diversify their production with passion fruit, it is necessary studies to adapt the genotypes already on the market, for a new location. Therefore, this work aimed to evaluate productive aspects, the physicochemical quality and bioactive compounds from juice, flour from the peel and leaves of the genotypes of commercial passionfruit grown in Pelotas, Brazil. The thesis comprises three articles and were developed in UFPel/FAEM, between the years 2013 and 2015. The Article 1 was titled production and fruit quality of passion fruit in temperate conditions. Were evaluated genotypes: Passiflora edulis ‘Catarina’; Passiflora edulis ‘BRS Sol do Cerrado’ e, Passiflora edulis ‘BRS Rubi do Cerrado’. All genotypes showed potential for production in the region of Pelotas, RS. The physicochemical quality of the fruits of genotypes are within acceptable parameters.The Article 2 was titled bioactive compounds from leaves, peel and juice of genotypes of passion fruit. Were evaluated genotypes: ‘Catarina Roxo’ (Epagri); ‘Catarina’ (Epagri); ‘Urussanga’ (Epagri); ‘BRS Gigante Amarelo’; ‘BRS Rubi do Cerrado’; ‘BRS Sol do Cerrado’. For evaluations of leaves ‘BRS Gigante Amarelo’ genotype was not evaluated. There were differences among genotypes for all bioactive compounds evaluated. It can be concluded that the genotypes of passion fruit evaluated in this study, have potential as a source of bioactive compounds. The Article 3 was entitled production and fruit quality of sweet passion fruit selection ‘Urussanga’ in temperate climate. The genotype characterized was selection Urussanga selected by Epagri, derived from sweet passion fruit (Passiflora alata Curtis.). Overall the sweet passion fruit selection Urussanga, shows productive potential and fruit physicochemical quality adequate when grown in temperate conditions. However, based on the results obtained and discussed in this thesis, it can be concluded that the production, quality and bioactive compounds of genotypes evaluated passionfruit can be commercially exploited by producers who wish to diversify production in non-traditional area of cultivation. It is concluded that this thesis comply with the initial justification, which therefore proves the existence of potential for passion fruit production in temperate climate conditions.

O presente trabalho visou a avaliação do potencial antifúngico de extratos brutos das diferentes partes do vegetal (folha, caule e raiz) de espécies de Piperaceae, os quais foram submetidos ao ensaio de bioautografia frente aos fungos Cladosporium cladosporioides e Cladosporium sphaerospermum. Após a triagem biológica, os extratos brutos das espécies Piper mollicomum, Piper marginatum, Peperomia alata e Peperomia glabella foram selecionados para etapas posteriores de fracionamento e purificação, utilizando-se técnicas cromatográficas. O estudo fitoquímico biomonitorado das espécies selecionadas identificou como metabólitos ativos dois cromenos e uma di-hidrochalcona; duas flavanonas e três fenilpropanóides, sendo um de estrutura inédita, denominado marginatumol; dois policetídeos inéditos, alatanona A e alatanona B; quatro acilresorcinóis e quatro secolignanas, incluindo a peperomina G inédita. Todos os metabólitos isolados apresentaram potencial atividade antifúngica, sendo os policetídeos alatanona A e alatanona B os mais ativos, com atividade superior às substâncias controle (nistatina e miconazol). Assim, os dados obtidos neste estudo permitiram descrever diferentes classes de produtos naturais a partir de uma coleção de extratos de espécies de Piperaceae, com potencial para estudos de relações estrutura-atividade. / The present study was addressed to evaluate the antifungal activity of crude extracts from Piperaceae species in which different parts of the plant (leaves, stems and roots) were assessed by means of bioautography against Cladosporium cladosporioides and Cladosporium sphaerospermum. After antifungal assay, the extratcs from Piper mollicomum, Piper marginatum, Peperomia alata and Peperomia glabella displayed higher growth inhibitory potency and thus were selected for further fractionation and purification using chromatographic techniques. Such dereplication using the bioautographic assay yielded two chromenes and one dihydrochalcone; two flavanones and three phenylpropanoids, including the novel compound marginatumol; two new polyketides, alatanone A and alatanone B; four acylresorcinols and four secolignans, including the novel peperomin G, respectively. The bioautography indicated potential antifungal activity for all isolated metabolites and compounds alatanone A and alatanone B were found the most active in comparison to positive controls (nystatin and miconazole). The bioprospecting approach was proven to be very effective when the isolation of bioactive compounds from a collection of crude extracts is concerned, although not necessarily unraveling the major biosynthetic pathways in each plant species.

Passiflora alata Curtis e P. nitida Kunth, espécies brasileiras, foram submetidas ao estudo farmacognóstico comparativo. P. alata tem sido utilizada há tempos na medicina tradicional e em preparações farmacêuticas. No estudo farmacobotânico, as folhas das duas espécies apresentaram semelhança na forma, no tamanho e na ausência de indumento. Diferem quanto ao número de glândulas peciolares. P. alata apresenta geralmente dois pares de glândulas e P. nitida, um par. Anatomicamente, as duas espécies mostraram características comuns ao gênero Passiflora: mesofilo dorsiventral; drusas no mesofilo, na nervura mediana, na região cortical, medular e floemática do caule; feixes vasculares colaterais. Embora as duas espécies apresentem nervura mediana biconvexa, a de P. alata evidencia as carenas pronunciadamente salientes, principalmente na face abaxial. Outro aspecto diferencial observa-se na forma do caule: em P. alata é quadrangular e, em P. nitida, arredondada. A seqüência de tecidos assemelha-se, com exceção do maior desenvolvimento de colênquima nas arestas de P. alata. A triagem fitoquímica evidenciou a presença de flavonóides nas duas espécies e a ausência de alcalóides em ambas, tanto na droga vegetal quanto nos extratos. Formação de espuma persistente foi observada com a droga vegetal preparada com P. alata. A hemólise foi observada com a droga e o extrato desta espécie. Os flavonóides foram quantificados como 0,42% ± 0,01 em P. alata e 0,10% ± 0,01 em P. nitida. No ensaio da atividade antioxidante, a EC50 de P. alata foi de 1061,2 ± 8,5 µg/mL e a de nitida 128,0 ± 0,9 µg/mL, no ensaio do DPPH, e de 1076 ± 85 µµmol de Trolox/g de extrato e de 1985 ± 104 µmol de Trolox/g de extrato no ensaio de ORAC, respectivamente. No ensaio de atividade antiúlcera aguda P. alata exibiu, na área total de lesão (ATL), proteção contra as lesões gástricas de 100%, P. nitida de 84% e lansoprazol, o controle positivo, de 76%. Quanto à área relativa de lesão (ARL), alata exibiu proteção contra as lesões de 99,45%; P. nitida, de 82,27% lansoprazol, de 81,44%, no ensaio de lesão gástrica induzida por etanol/HCI com 300 mmol/L de HCI e extratos na dose de 400 mg/kg. As doses de 100,200 e 400 mg/kg dos extratos foram testadas nas mesmas condições com 150 mmol/L de HCI. P. alata apresentou, na ATL, 100% de proteção contra as lesões gástricas nas três concentrações e lansoprazol, de 75%. Na ARL, P. alata exibiu 100% de proteção lansoprazol, de 76,92%. P. nitida apresentou, na ATL, proteção contra as lesões gástricas de 25%, 74% e 94% nas três concentrações, respectivamente e, lansoprazol, de 80%. Na ARL, P. nitida exibiu 27,40%, 74,00% e 91,78% de proteção, respectivamente e lansoprazol, de 78,08%. Baseando-se neste estudo possível distinguir as duas espécies através de características morfoanatômicas das folhas e dos caules e, através do perfil cromatográfico. Ambas as espécies apresentaram atividade antiúlcera promissora. / Passiflora alata Curtis and P. nitida Kunth, Brazilian species, were selected for the comparative pharmacognostic study. P. alata has been used for a long time folk medicine and pharmaceutical preparations. In the pharmacobotanic study, leaves from both species showed similarities in shape, size and in the absence indumenta. They differ by the number of petiolar glands. P. alata presents generally two pairs of glands and P. nitida, one pair. Anatomically, both species showed common characteristics to the Passiflora genera: dorsiventral mesophyll; druses the mesophyll, midrib, cortex, medulla and phloem; collateral vascular bundles. Both species\' midrib presented a biconvex shape, but P. alata\'s was prominently shaped, notably in the abaxial surface. Another differential aspect was observed the stem shape: P. alata was quadrangular and P. nitida was rounded. The tissues sequence presented similarity, with exception to larger collenchyma development in P. alata\'s edges. The phytochemical screening showed presence of flavonoids and absence of alkaloids in both species, in the crude drug and extracts. Formation persistent foam was observed with the crude drug of P. alata. Hemolisis was observed with the crude drug and extract of this species. Flavonoids were quantified as 0.42% ± 0.01 in P. alata and 0.10% ± 0.01 in P. nitida. In the antioxidant activity assay, the EC50 of P. alata was 1061.2 ± 8.5 µg/mL and of P. nitida , 128.0 ± 0.9 µg/mL, in the DPPH assay, and 1076 ± 85 µmol Trolox/g extract and 1985 ± 104 µmol Trolox/g extract in the ORAC assay, respectively. In the antiulcer activity assay P. alata showed, in total lesion area (TLA), protection against gastric lesions 100%, P. nitida 84% and lansoprazole, the positive control, 76%. In relative lesion area (RLA), P. alata showed protection against lesions of 99.45%, P. nitida82.27% and lansoprazole 81.44%, in the HCl/ethanol-induced gastric lesion assay, with HCI 300 mmol/L and extracts at doses of 400 mg/kg. Doses of 100, 200 e 400 mg/kg extracts were tested in the same conditions with HCl 150 mmol/L. P. alata showed, TLA, protection against gastric lesions of 100% in the three concentrations and lansoprazole 75%. In RLA, P. alata showed 100% of protection and lansoprazole 76.92%. P. nitida showed, in TLA, protection against gastric lesions of 25%,74% and 94% in the three concentrations, respectively and lansoprazole 80%. In RLA, nitida showed 27.40%, 74.00% and 91.78% of protection, respectively and lansoprazole 78.08%. Based upon this study it is possible to distinguish both species by leaf and stem morphoanatomic characters and by chromatographic profile. Both species presented promising antiulcer activity.

As frutíferas nativas do Brasil são subexploradas comercialmente, sendo que os programas de melhoramento genético são bastante incipientes, devido a muitas limitações associadas à fisiologia e biologia dessas espécies, embora apresentem potencial econômico tanto para o consumo in natura como para o processamento industrial. No Brasil, o maracujá-doce (Passiflora alata) está conquistando novos clientes e mercados, e tem atingido preços até três vezes maiores do que os do maracujá-azedo, amplamente cultivado no país. Os frutos do maracujá-doce são muito apreciados, embora apenas a seleção empírica tenha sido praticada. Evidentemente, seria muito vantajoso obter uma variedade geneticamente superior em termos de qualidade e produção de frutos. Nesse sentido, nosso grupo de pesquisa tem focado esforços visando a caracterizar geneticamente uma população segregante de maracujá-doce. Aqui, foram avaliados 30 genótipos desta população, previamente selecionados como superiores. Estes foram plantados sob três condições experimentais: Anhumas (2014/2015 e 2015/2016) e Piracicaba (2015/2016). Foi utilizado o delineamento em blocos casualizados, sendo que as análises genético-estatísticas tiveram por base a abordagem de modelos mistos para a predição dos valores genéticos (BLUPS). Foram estimados parâmetros genéticos e fenotípicos, herdabilidade, correlações genéticas e resposta esperada à seleção relativamente a peso (PF), comprimento (CF) diâmetro (DF) do fruto, espessura (EC) e peso (PC) da casca, peso (PP) e rendimento de polpa (RP), teor de sólidos solúveis totais (SST) e Produtividade. Os resultados mostraram haver altas correlações genéticas entre os principais atributos do fruto, assim como valores elevados de herdabilidade (desde 0,45 para PF a 0,94 para EC), valores que favorecem a prática de seleção. Em seguida, foi aplicado índice multiplicativo para fins de seleção e seis genótipos foram indicados como superiores, quais sejam: 49, 21, 107, 125, 140 e 122. Nossos resultados devem auxiliar outros estudos e iniciativas de seleção de genótipos mais produtivos, evidenciando a grande utilidade de ferramentas estatísticas modernas para se obter maior resposta à seleção. Em paralelo, foi estudada a resposta do maracujá-doce à infecção causada por Xanthomonas axonopodis. Dois genes, previamente identificados como superexpressos no maracujá-azedo, e que codificam as enzimas lipoxigenase-2 e (+)-neomentol desidrogenase foram aqui analisados via qPCR. No maracujá-doce observou-se maior expressão da (+)-neomentol desidrogenase, enzima associada à resposta de hipersensibilidade. Os sintomas da doença sugerem que a resposta de hipersensibilidade é particular no maracujá-doce, já que ocorre a queda precoce das folhas, evitando a disseminação sistêmica da bactéria. / Brazilian native fruit species are under-exploited commercially, and breeding programs are quite incipient due to many limitations associated with the physiology and biology of these species, although having economic potential both for in natura consumption as well as for industrial processing. In Brazil, the sweet passion fruit (Passiflora alata) is conquering new customers and markets, and has riched up to triple the sour passion fruit prices, widely grown in the country. The fruits of the sweet passion fruit are much appreciated, although only empirical selections have been practiced. Evidently, it would be very beneficial to obtain a genetically superior variety in terms of fruit quality and production. In this scenario, our research group has focused efforts to genetically characterize a segregating population of sweet passion fruit. Here, we evaluated 30 genotypes previously selected from this population by field-cultivating them under three experimental conditions: Anhumas (2014/2015 and 2015/2016) and Piracicaba (2015/2016). A randomized block design was used, and the genetic-statistical analyzes were based on a mixed-effects model approach in order to predict the genetic values (BLUPS). We estimated genetic and phenotypic parameters, as heritability, genetic correlations and expected response to selection for weight (WF), length (LF) diameter (DF) of the fruit, thickness (TS) and weight (WS) of the shell, weight (WP) and pulp yield (PY), total soluble solids (SS) and fruit yield. We found high genetic correlations between the main fruit attributes, as well as high values of heritability (from 0.45 for WF up to 0.94 for TS), values that may favor selection practices. Then, we applied a multiplicative selection index and six superior genotypes were selected, which are: 49, 21, 107, 125, 140 and 122. Our results may assist other studies and initiatives of selection of more productive genotypes, showing the great usefulness of modern statistical tools to obtain greater responses to selection. In parallel, we studied the response of sweet passion fruit to infection caused by Xanthomonas axonopodis. Two genes, previously identified as overexpressed in sour passion fruit, and that encode the enzymes lipoxygenase-2 and (+)-neomentol dehydrogenase were herein analyzed via qPCR. In the sweet passion fruit an increased expression of (+)- neomentol dehydrogenase, an enzyme associated with hypersensitivity response, was observed. The disease symptoms suggest that the response of hypersensitivity is particular in sweet passion fruit, since it provokes the premature fall of the leaves, thereby preventing the systemic bacterial dissemination.

O interesse mundial por produtos derivados de plantas medicinais cresceu vertiginosamente nos últimos anos. Produtos derivados de plantas medicinais são misturas multicomponentes e sua eficácia pode estar associada a mais de um composto tornando o seu controle da qualidade tarefa árdua. Apesar de grandes investimentos em pesquisa terem sido feitos para a comprovação da eficácia e segurança dos medicamentos derivados de plantas medicinais, poucos são os trabalhos científicos que dizem respeito à manutenção da qualidade desses produtos. Extratos secos de plantas medicinais possuem efeito farmacológico devido à presença de substâncias ativas que estão sujeitas a reações de degradação. A velocidade dessas reações pode ser prevista através do estudo de estabilidade que envolve o armazenamento dos extratos em diversas condições (diferentes temperatura e umidade relativa do ar). Por esse motivo, o objetivo dessa tese foi o estudo da influência do processo de obtenção, das condições de armazenamento e das propriedades físico-químicas sobre a estabilidade de extratos secos padronizados de plantas medicinais. Visando o entendimento dos fatores que afetam a estabilidade de produtos naturais, os extratos foram caracterizados em relação à composição (presença de açúcares redutores, proteínas, lipídeos, carboidratos de alta e baixa massa molecular, acidez titulável), análise térmica, determinação de isotermas de adsorção (ou absorção), espectroscopia de Infravermelho e difração de raios-X. Após caracterização, os extratos secos foram armazenados em câmara climática visando avaliar a variação das propriedades físicas e químicas em função do período e condições de armazenamento. Para um entendimento mais amplo dos fatores que proporcionam maiores influências na estabilidade de produtos derivados de plantas medicinais, extratos secos foram obtidos a partir de três plantas medicinais amplamente utilizadas na medicina popular brasileira: Bauhinia forficata (hipoglicemiante), Maytenus ilicifolia (anti-úlcera gástrica) e Passiflora alata (sedativo e ansiolítico). Os extratos secos foram obtidos a partir de dois distintos processos de secagem o spray-drying (secagem por nebulização) e o processo leito de jorro. Os resultados obtidos indicam que todos os extratos secos analisados apresentaram algum tipo de alteração dos padrões de qualidade inicialmente observados. O que não foi possível mostrar é o quanto essas perdas poderiam influenciar na atividade biológica desses produtos. Por se tratar de uma mistura multicomponente é pouco provável que se estabeleçam técnicas que possam assegurar que todos esses componentes sejam mantidos durante todo o período de armazenamento. Porém, fenômenos importantes para a atividade farmacológica como a cristalização das substâncias, (demonstrada através dos espectros de raios-X), ou a degradação de marcadores (CLAE e espectrofotometria) puderam ser monitorados e previstos. / Nowadays, the global interest for herbal drugs has increased significantly. Herbal medicinal products are a complex mixture of substances and their efficacy might be associated with one or more compounds. For this reason, the quality control of herbal products is a challenging task. In spite of a great increase in researches concerning the pharmacological and toxicological aspects of herbal drugs, there is a lack of scientific works related to the quality maintenance of these products. Among all the herbal medicinal products the standardized dried extracts are gaining more interest as a way of controlling dosage and increasing safety of the phytopharmaceuticals. Herbal dried extracts are effective due to the presence of active substances, and these substances may degrade. The rate of degradation can be measured through stability testing what is done through the storage of the product in different storage conditions (temperature and relative humidity). For this reason, the aim of this thesis was the study of the influence of the obtainment process, storage conditions and physical and chemical properties in the standardized dried extracts stability. For the understanding of the factors which affects the stability of the natural products, the extracts were characterized in relation to their composition (reducing sugars, proteins, lipids, low and high molecular weight carbohydrates, and titrable acidity), the calorimetric profile, determination of sorption isotherms, near infrared spectroscopy and X-ray diffraction analysis. Furthermore, the dried extracts were stored in a climatic chamber for the evaluation of the physical and chemical properties variations in relation to the time and storage conditions. Herbal dried extracts obtained from three plant species commonly used in Brazil were used in this study: Bauhinia forficata (hypoglycemiant), Maytenus ilicifolia (antiulcerogenic) and Passiflora alata (sedative and anxiolytic). The dried extracts were produced trough two different drying processes the spray drying and the spouted bed drying. In conclusion, the results obtained showed that all the studied extracts presented some deviation of the initial standards owing to its great sensibility to the environmental conditions. However, it was not possible to show how this lost would affect the effectiveness of these products. Moreover, for being such a complex mixture of components it is almost impossible the establishment of techniques that will assure that all this components will remain unchanged during the storage period. Nevertheless, some important factors for the pharmacological activity of substances as the crystallization (X-ray diffraction) or the degradation of the chemical markers (high performance liquid chromatography and spectrophotometry) can be evaluate and previewed

Passiflora alata Curtis e P. nitida Kunth, espécies brasileiras, foram submetidas ao estudo farmacognóstico comparativo. P. alata tem sido utilizada há tempos na medicina tradicional e em preparações farmacêuticas. No estudo farmacobotânico, as folhas das duas espécies apresentaram semelhança na forma, no tamanho e na ausência de indumento. Diferem quanto ao número de glândulas peciolares. P. alata apresenta geralmente dois pares de glândulas e P. nitida, um par. Anatomicamente, as duas espécies mostraram características comuns ao gênero Passiflora: mesofilo dorsiventral; drusas no mesofilo, na nervura mediana, na região cortical, medular e floemática do caule; feixes vasculares colaterais. Embora as duas espécies apresentem nervura mediana biconvexa, a de P. alata evidencia as carenas pronunciadamente salientes, principalmente na face abaxial. Outro aspecto diferencial observa-se na forma do caule: em P. alata é quadrangular e, em P. nitida, arredondada. A seqüência de tecidos assemelha-se, com exceção do maior desenvolvimento de colênquima nas arestas de P. alata. A triagem fitoquímica evidenciou a presença de flavonóides nas duas espécies e a ausência de alcalóides em ambas, tanto na droga vegetal quanto nos extratos. Formação de espuma persistente foi observada com a droga vegetal preparada com P. alata. A hemólise foi observada com a droga e o extrato desta espécie. Os flavonóides foram quantificados como 0,42% ± 0,01 em P. alata e 0,10% ± 0,01 em P. nitida. No ensaio da atividade antioxidante, a EC50 de P. alata foi de 1061,2 ± 8,5 µg/mL e a de nitida 128,0 ± 0,9 µg/mL, no ensaio do DPPH, e de 1076 ± 85 µµmol de Trolox/g de extrato e de 1985 ± 104 µmol de Trolox/g de extrato no ensaio de ORAC, respectivamente. No ensaio de atividade antiúlcera aguda P. alata exibiu, na área total de lesão (ATL), proteção contra as lesões gástricas de 100%, P. nitida de 84% e lansoprazol, o controle positivo, de 76%. Quanto à área relativa de lesão (ARL), alata exibiu proteção contra as lesões de 99,45%; P. nitida, de 82,27% lansoprazol, de 81,44%, no ensaio de lesão gástrica induzida por etanol/HCI com 300 mmol/L de HCI e extratos na dose de 400 mg/kg. As doses de 100,200 e 400 mg/kg dos extratos foram testadas nas mesmas condições com 150 mmol/L de HCI. P. alata apresentou, na ATL, 100% de proteção contra as lesões gástricas nas três concentrações e lansoprazol, de 75%. Na ARL, P. alata exibiu 100% de proteção lansoprazol, de 76,92%. P. nitida apresentou, na ATL, proteção contra as lesões gástricas de 25%, 74% e 94% nas três concentrações, respectivamente e, lansoprazol, de 80%. Na ARL, P. nitida exibiu 27,40%, 74,00% e 91,78% de proteção, respectivamente e lansoprazol, de 78,08%. Baseando-se neste estudo possível distinguir as duas espécies através de características morfoanatômicas das folhas e dos caules e, através do perfil cromatográfico. Ambas as espécies apresentaram atividade antiúlcera promissora. / Passiflora alata Curtis and P. nitida Kunth, Brazilian species, were selected for the comparative pharmacognostic study. P. alata has been used for a long time folk medicine and pharmaceutical preparations. In the pharmacobotanic study, leaves from both species showed similarities in shape, size and in the absence indumenta. They differ by the number of petiolar glands. P. alata presents generally two pairs of glands and P. nitida, one pair. Anatomically, both species showed common characteristics to the Passiflora genera: dorsiventral mesophyll; druses the mesophyll, midrib, cortex, medulla and phloem; collateral vascular bundles. Both species\' midrib presented a biconvex shape, but P. alata\'s was prominently shaped, notably in the abaxial surface. Another differential aspect was observed the stem shape: P. alata was quadrangular and P. nitida was rounded. The tissues sequence presented similarity, with exception to larger collenchyma development in P. alata\'s edges. The phytochemical screening showed presence of flavonoids and absence of alkaloids in both species, in the crude drug and extracts. Formation persistent foam was observed with the crude drug of P. alata. Hemolisis was observed with the crude drug and extract of this species. Flavonoids were quantified as 0.42% ± 0.01 in P. alata and 0.10% ± 0.01 in P. nitida. In the antioxidant activity assay, the EC50 of P. alata was 1061.2 ± 8.5 µg/mL and of P. nitida , 128.0 ± 0.9 µg/mL, in the DPPH assay, and 1076 ± 85 µmol Trolox/g extract and 1985 ± 104 µmol Trolox/g extract in the ORAC assay, respectively. In the antiulcer activity assay P. alata showed, in total lesion area (TLA), protection against gastric lesions 100%, P. nitida 84% and lansoprazole, the positive control, 76%. In relative lesion area (RLA), P. alata showed protection against lesions of 99.45%, P. nitida82.27% and lansoprazole 81.44%, in the HCl/ethanol-induced gastric lesion assay, with HCI 300 mmol/L and extracts at doses of 400 mg/kg. Doses of 100, 200 e 400 mg/kg extracts were tested in the same conditions with HCl 150 mmol/L. P. alata showed, TLA, protection against gastric lesions of 100% in the three concentrations and lansoprazole 75%. In RLA, P. alata showed 100% of protection and lansoprazole 76.92%. P. nitida showed, in TLA, protection against gastric lesions of 25%,74% and 94% in the three concentrations, respectively and lansoprazole 80%. In RLA, nitida showed 27.40%, 74.00% and 91.78% of protection, respectively and lansoprazole 78.08%. Based upon this study it is possible to distinguish both species by leaf and stem morphoanatomic characters and by chromatographic profile. Both species presented promising antiulcer activity.

O interesse mundial por produtos derivados de plantas medicinais cresceu vertiginosamente nos últimos anos. Produtos derivados de plantas medicinais são misturas multicomponentes e sua eficácia pode estar associada a mais de um composto tornando o seu controle da qualidade tarefa árdua. Apesar de grandes investimentos em pesquisa terem sido feitos para a comprovação da eficácia e segurança dos medicamentos derivados de plantas medicinais, poucos são os trabalhos científicos que dizem respeito à manutenção da qualidade desses produtos. Extratos secos de plantas medicinais possuem efeito farmacológico devido à presença de substâncias ativas que estão sujeitas a reações de degradação. A velocidade dessas reações pode ser prevista através do estudo de estabilidade que envolve o armazenamento dos extratos em diversas condições (diferentes temperatura e umidade relativa do ar). Por esse motivo, o objetivo dessa tese foi o estudo da influência do processo de obtenção, das condições de armazenamento e das propriedades físico-químicas sobre a estabilidade de extratos secos padronizados de plantas medicinais. Visando o entendimento dos fatores que afetam a estabilidade de produtos naturais, os extratos foram caracterizados em relação à composição (presença de açúcares redutores, proteínas, lipídeos, carboidratos de alta e baixa massa molecular, acidez titulável), análise térmica, determinação de isotermas de adsorção (ou absorção), espectroscopia de Infravermelho e difração de raios-X. Após caracterização, os extratos secos foram armazenados em câmara climática visando avaliar a variação das propriedades físicas e químicas em função do período e condições de armazenamento. Para um entendimento mais amplo dos fatores que proporcionam maiores influências na estabilidade de produtos derivados de plantas medicinais, extratos secos foram obtidos a partir de três plantas medicinais amplamente utilizadas na medicina popular brasileira: Bauhinia forficata (hipoglicemiante), Maytenus ilicifolia (anti-úlcera gástrica) e Passiflora alata (sedativo e ansiolítico). Os extratos secos foram obtidos a partir de dois distintos processos de secagem o spray-drying (secagem por nebulização) e o processo leito de jorro. Os resultados obtidos indicam que todos os extratos secos analisados apresentaram algum tipo de alteração dos padrões de qualidade inicialmente observados. O que não foi possível mostrar é o quanto essas perdas poderiam influenciar na atividade biológica desses produtos. Por se tratar de uma mistura multicomponente é pouco provável que se estabeleçam técnicas que possam assegurar que todos esses componentes sejam mantidos durante todo o período de armazenamento. Porém, fenômenos importantes para a atividade farmacológica como a cristalização das substâncias, (demonstrada através dos espectros de raios-X), ou a degradação de marcadores (CLAE e espectrofotometria) puderam ser monitorados e previstos. / Nowadays, the global interest for herbal drugs has increased significantly. Herbal medicinal products are a complex mixture of substances and their efficacy might be associated with one or more compounds. For this reason, the quality control of herbal products is a challenging task. In spite of a great increase in researches concerning the pharmacological and toxicological aspects of herbal drugs, there is a lack of scientific works related to the quality maintenance of these products. Among all the herbal medicinal products the standardized dried extracts are gaining more interest as a way of controlling dosage and increasing safety of the phytopharmaceuticals. Herbal dried extracts are effective due to the presence of active substances, and these substances may degrade. The rate of degradation can be measured through stability testing what is done through the storage of the product in different storage conditions (temperature and relative humidity). For this reason, the aim of this thesis was the study of the influence of the obtainment process, storage conditions and physical and chemical properties in the standardized dried extracts stability. For the understanding of the factors which affects the stability of the natural products, the extracts were characterized in relation to their composition (reducing sugars, proteins, lipids, low and high molecular weight carbohydrates, and titrable acidity), the calorimetric profile, determination of sorption isotherms, near infrared spectroscopy and X-ray diffraction analysis. Furthermore, the dried extracts were stored in a climatic chamber for the evaluation of the physical and chemical properties variations in relation to the time and storage conditions. Herbal dried extracts obtained from three plant species commonly used in Brazil were used in this study: Bauhinia forficata (hypoglycemiant), Maytenus ilicifolia (antiulcerogenic) and Passiflora alata (sedative and anxiolytic). The dried extracts were produced trough two different drying processes the spray drying and the spouted bed drying. In conclusion, the results obtained showed that all the studied extracts presented some deviation of the initial standards owing to its great sensibility to the environmental conditions. However, it was not possible to show how this lost would affect the effectiveness of these products. Moreover, for being such a complex mixture of components it is almost impossible the establishment of techniques that will assure that all this components will remain unchanged during the storage period. Nevertheless, some important factors for the pharmacological activity of substances as the crystallization (X-ray diffraction) or the degradation of the chemical markers (high performance liquid chromatography and spectrophotometry) can be evaluate and previewed

O presente trabalho visou a avaliação do potencial antifúngico de extratos brutos das diferentes partes do vegetal (folha, caule e raiz) de espécies de Piperaceae, os quais foram submetidos ao ensaio de bioautografia frente aos fungos Cladosporium cladosporioides e Cladosporium sphaerospermum. Após a triagem biológica, os extratos brutos das espécies Piper mollicomum, Piper marginatum, Peperomia alata e Peperomia glabella foram selecionados para etapas posteriores de fracionamento e purificação, utilizando-se técnicas cromatográficas. O estudo fitoquímico biomonitorado das espécies selecionadas identificou como metabólitos ativos dois cromenos e uma di-hidrochalcona; duas flavanonas e três fenilpropanóides, sendo um de estrutura inédita, denominado marginatumol; dois policetídeos inéditos, alatanona A e alatanona B; quatro acilresorcinóis e quatro secolignanas, incluindo a peperomina G inédita. Todos os metabólitos isolados apresentaram potencial atividade antifúngica, sendo os policetídeos alatanona A e alatanona B os mais ativos, com atividade superior às substâncias controle (nistatina e miconazol). Assim, os dados obtidos neste estudo permitiram descrever diferentes classes de produtos naturais a partir de uma coleção de extratos de espécies de Piperaceae, com potencial para estudos de relações estrutura-atividade. / The present study was addressed to evaluate the antifungal activity of crude extracts from Piperaceae species in which different parts of the plant (leaves, stems and roots) were assessed by means of bioautography against Cladosporium cladosporioides and Cladosporium sphaerospermum. After antifungal assay, the extratcs from Piper mollicomum, Piper marginatum, Peperomia alata and Peperomia glabella displayed higher growth inhibitory potency and thus were selected for further fractionation and purification using chromatographic techniques. Such dereplication using the bioautographic assay yielded two chromenes and one dihydrochalcone; two flavanones and three phenylpropanoids, including the novel compound marginatumol; two new polyketides, alatanone A and alatanone B; four acylresorcinols and four secolignans, including the novel peperomin G, respectively. The bioautography indicated potential antifungal activity for all isolated metabolites and compounds alatanone A and alatanone B were found the most active in comparison to positive controls (nystatin and miconazole). The bioprospecting approach was proven to be very effective when the isolation of bioactive compounds from a collection of crude extracts is concerned, although not necessarily unraveling the major biosynthetic pathways in each plant species.