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Influência de diferentes protocolos de déficit nutricional e densidade de energia na biomodulação de células-tronco de dentes decíduos esfoliados humanos (SHED)

SILVA, Paula Corrêa Silveira da 18 December 2017 (has links)
Estas células, cultivadas em meio de cultura MEMα suplementado com soro fetal bovino (SFB) 10%, entre a 10ª e 15ª passagem, foram submetidas a déficit nutricional com SFB 1% a 1 hora ou 24 horas antes da irradiação (protocolos A ou B, respectivamente). O meio foi mantido com suplementação de SFB 1% durante a irradiação e ao longo do tempo experimental nos grupos de I a IV, enquanto que para os grupos de V a VIII, o meio foi trocado para MEMα suplementado com SFB 10%. As células foram irradiadas com laser vermelho (660 nm) nas seguintes dosimetrias: 2,5 J/cm2 (grupos I e V), 5,0 J/cm2 (grupos II e VI) e 7,5 J/cm2 (grupos III e VII). As células não irradiadas constituíram os controles negativo (grupo IV) e positivo (grupo VIII). A avaliação da citotoxicidade/integridada da membrana celular foi realizada pela quantificação da desidrogenase lática (LDH) no meio de cultura após a irradiação. A viabilidade celular foi avaliada pelo método MTT 24, 48 e 72 horas após a irradiação. Os dados foram submetidos ao teste ANOVA a 2 critérios seguido pelo teste de Tukey (P<0,05). Os níveis de LDH no meio de cultura em que as SHED eram mantidas foram semelhantes quando comparados os protocolos A e B para a mesma densidade de energia e mesma concentração de SFB no momento da irradiação. No protocolo A, as células estavam mais viáveis 24 horas após a irradiação independente da densidade de energia, já no protocolo B, não houve alteração na viabilidade celular nos grupos IV (controle negativo), V, VI, VII e VIII (controle positivo) ao longo do tempo. Portanto, a indução de estresse celular por meio da suplementação do meio de cultura com SFB 1%, uma hora antes da irradiação, foi mais favorável para a manutenção da viabilidade de SHED após a irradiação, sem alterar os níveis de LDH extracelular, em comparação com os resultados após déficit nutricional por 24 horas. / The purpose of the present study was to analyze in vitro the effects of different nutritional deficit conditions to induce the state of cellular stress, prior to irradiation with different dosimetries of Low Level Laser Therapy (LLLT), on the biomodulation of stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED). These cells, cultured in MEMα culture medium supplemented with 10% FBS, between the 10th and 15th passage, were subjected to nutritional deficit with 1% FBS one hour or 24 hours prior to irradiation (protocols A or B, respectively). In both protocols, cells were irradiated with red laser (660 nm) in the following dosimetries: 2.5 J/cm2 (groups I and V), 5.0 J/cm2 (groups II and VI) and 7.5 J/cm2 (groups III and VII). Non-irradiated cells constituted the negative (group IV) and positive (group VIII) controls. Evaluation of citotoxicity/integrity of cellular membrane was performed by the quantification of lactate dehydrogenase (LDH) in the culture medium after irradiation. Cell viability was assessed by MTT method 24, 48 and 72 hours after irradiation. Data were submitted to two-way ANOVA followed by Tukey test (P<0.05). The levels of LDH at the culture medium where SHED were grown were similar when compared protocols A and B for the same energy density and same concentration of FBS during irradiation. In protocol A, cells were more viable 24 hours after irradiation, irrespective of the energy density, while in protocol B, there was no alteration in cell viability in groups IV (negative control), V, VI, VII and VIII (positive control) over time. Therefore, the induction of cellular stress by culture medium supplementation with 1% FBS, one hour prior to irradiation, was more favorable for maintaining SHED viability after irradiation, with no alteration in the levels of extracellular LDH, in comparison with the results after 24-hour nutritional deficit.
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Fotobiomodulação do burst oxidativo e da atividade microbicida de monócitos humanos in vitro e análise da expressão gênica em macrófagos derivados destas células

CASTRO, Mayara Santos de 21 February 2018 (has links)
A fotobiomodulação (PBM) utiliza a luz nas porções do espectro visível e infravermelho para estimular a produção de trifosfato de adenosina (ATP), síntese de ácidos nucleicos, geração de espécies reativas de oxigênio (ROS) e proliferação celular, promovendo resultados teraupêuticos benéficos, como a aceleração do reparo tecidual, analgesia e ativação de células do sistema imune. Deste modo, a presente pesquisa visou elucidar os efeitos da PBM sobre monócitos humanos in vitro, a fim de possivelmente estimular o burst oxidativo e, consequentemente, potencializar a defesa imune celular contra micro-organismos, além de analisar a expressão gênica em nível de RNA mensageiro (mRNA) de CD68, CD80, CD163, CD204, IL-6, TNF-α, IL-10 e SOD1 em macrófagos derivados destas células. Neste contexto, culturas primárias de monócitos humanos foram irradiadas com o laser de diodo InGaAlP (660nm)/ GaAlAs (780nm) - Twin Flex® (MMO, São Carlos, SP, Brasil), operando com potência de 40mW, área de feixe de 0,04cm2, densidade de potência de 1W/cm2 e doses independentes de 200J/cm2, 400J/cm2 e 600J/cm2. Após isto, as células foram submetidas ao ensaio de quimioluminescência para avaliação do burst oxidativo e quantificação da produção de ROS intracelulares e extracelulares. Ensaio da atividade microbicida foi realizado contra o fungo Candida albicans. Como controles positivo e negativo, utilizou-se o forbol 12-miristato 13-acetato (PMA) e o diphenyleneiodonium (DPI), respectivamente. A viabilidade celular foi verificada por meio do reagente azul de Trypan. Adicionalmente, os monócitos humanos irradiados foram cultivados por 72 horas, a fim de observar a diferenciação destas células em macrófagos mediante estímulos relacionados a macrófagos ativados pela via clássica (M1) (LPS e Candida albicans) e a macrófagos ativados pela via alternativa (M2) (M-CSF). O RNA total foi extraído de cada grupo experimental e submetido à transcrição reversa e PCR em tempo real. GAPDH foi utilizado como controle endógeno e a expressão relativa de cada gene foi calculada utilizando o método 2-ΔCt. A produção de nitrito (NO2) também foi mensurada através da reação de Griess. Os resultados obtidos foram analisados por ANOVA e teste de Tukey ao nível de significância de 5%. Para dados com variâncias desiguais, utilizou-se o Kruskal-Wallis e pós-teste de Newman-Keuls. Desta forma, os monócitos irradiados apresentaram um aumento significativo na produção de ROS intracelulares e extracelulares comparativamente ao grupo controle (P < 0,001), sendo o comprimento de onda de 660nm e a dose de 400J/cm2, os parâmetros que mais se destacaram (P < 0,001). Como consequência deste perfil funcional elevado dos monócitos irradiados, a capacidade fungicida dos mesmos contra Candida albicans mostrou-se bastante aumentada (P < 0,001). Além disso, observou-se que a PBM (660nm; 400J/cm2) não causou danos à viabilidade celular dos monócitos nos dias subsequentes à irradiação laser. A análise da expressão gênica revelou que a PBM (660nm; 400J/cm2) aumentou significativamente a expressão da citocina pró-inflamatória TNF-α pelos monócitos irradiados (P = 0,0302), aproximando-os de uma resposta imune Th1. Complementarmente, um aumento significativo na produção de NO2 pelos monócitos irradiados também foi observado (P < 0,05). Portanto, a PBM, como empregada neste estudo, foi capaz de aumentar a geração de ROS e NO2, intensificar a atividade microbicida contra Candida albicans e aumentar a expressão de TNF-α, sugerindo uma modulação da PBM na indução de agentes pró-inflamatórios relacionados ao perfil funcional de M1. Vislumbramos em um futuro próximo, a reprodução desses resultados em monócitos humanos in vivo, colaborando no tratamento de candidoses orais, por exemplo. / Photobiomodulation (PBM) comprises the use of light within the visible and infrared spectrum to stimulate the production of adenosine triphosphate (ATP), nucleic acid synthesis, generation of reactive oxygen species (ROS) and cell proliferation, thus promoting beneficial therapeutical results, such as the acceleration of tissue repair, analgesia and activation of cells of the immune system. In that way, the present research aimed to elucidate the effects of PBM on human monocytes in vitro by possibly stimulating the oxidative burst of these cells and, consequently, enhancing the cellular immune defense against microorganisms, in addition to analyzing the gene expression at the messenger RNA (mRNA) level of CD68, CD80, CD163, CD204, IL-6, TNF-α, IL-10 and SOD1 in macrophages derived from these cells. Thus, primary cultures of human monocytes were irradiated with an InGaAlP (660nm)/ GaAlAs (780nm) - Twin Flex® diode laser (MMO, São Carlos, SP, Brazil), operating with power of 40mW, beam area of 0.04cm2, power density of 1W/cm2 and independent doses of 200J/cm2, 400J/cm2 e 600J/cm2. Cells were then submitted to the chemiluminescence assay for oxidative burst evaluation and quantification of intracellular and extracellular ROS production. A microbicidal activity assay was performed against the fungus Candida albicans. As positive and negative controls, phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and diphenyleneiodonium (DPI) were used, respectively. Cell viability was verified by Trypan blue reagent. Besides, irradiated human monocytes were cultured for 72 hours in order to observe the differentiation of these cells into macrophages by stimuli related to macrophages activated by the classical pathway (M1) (LPS and Candida albicans) and macrophages activated by the alternative pathway (M2) (M-CSF). Total RNA was extracted from each experimental group and submitted to reverse transcription and real-time PCR. GAPDH was used as endogenous control and the relative expression of each gene was calculated using the 2-ΔCt method. The production of nitrite (NO2) was also measured by the Griess reaction. The results obtained were analyzed by ANOVA and Tukey's test at a significance level of 5%. For data with unequal variances, Kruskal-Wallis and Newman-Keuls post-test were used. In that way, irradiated monocytes presented a significant increase in intracellular and extracellular ROS production compared to the control group (P < 0.001). The wavelength of 660nm and the dose of 400J/cm2 were the most relevant parameters (P < 0.001). As a consequence of this high functional profile of the irradiated monocytes, the fungicidal capacity of the monocytes against Candida albicans was shown to be greatly increased (P < 0.001). In addition, it was observed that PBM (660nm; 400J/cm2) did not cause damage to the cell viability of monocytes in the days following laser irradiation. Analysis of the gene expression revealed that PBM (660nm; 400J/cm2) significantly increased the expression of the proinflammatory cytokine TNF-α by the irradiated monocytes (P = 0.0302), bringing them closer to a Th1 immune response. Additionally, a significant increase in NO2 production by irradiated monocytes was also observed (P < 0.05). Therefore, PBM, as employed in this study, was able to increase ROS and NO2 generation, enhance microbicidal activity against Candida albicans and increase TNF-α expression, suggesting a modulation of PBM in the induction of related pro-inflammatory agents to the functional profile of M1. We envisage in a near future, the reproduction of these results in human monocytes in vivo, which would collaborate to the treatment of oral candidoses, for example. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
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Efeitos da radiação laser de baixa intensidade em células osteoblásticas humanas cultivadas sobre titânio / Effects of low-level laser radiation on human osteoblastic cells grown on titanium

Petri, Alice Dias 23 January 2009 (has links)
O sucesso do tratamento com implantes osseointegráveis dependente do processo de reparo da ferida e do potencial osteogênico das células. Com o objetivo de aumentar a formação óssea na superfície dos implantes, vários tratamentos têm sido propostos, entre eles, a terapia com laser de baixa intensidade. Neste contexto, o objetivo do presente estudo foi investigar o efeito do laser diodo de Arseneto-Gálio-Alumínio (AsGaAl) em culturas osteogênicas humanas crescidas sobre titânio. Após exposição das culturas, aos 3 e 7 dias, a uma dose de 3 J/cm2, foram avaliados os seguintes parâmetros: 1) proliferação celular aos 10 e 14 dias; 2) atividade de fosfatase alcalina (ALP) em 10, 14 e 17 dias; 3) formação de matriz mineralizada em 17 dias; 4) imunolocalização de proteínas não-colágenas e do antígeno nuclear Ki-67 por fluorescência indireta em 8, 10, 14 e 17 dias; 5) expressão de genes relacionados ao desenvolvimento do fenótipo osteoblástico aos 14 dias. Os resultados dos ensaios de proliferação celular mostraram que a radiação laser aumentou a proliferação de 10 para 14 dias, mas tanto a atividade de ALP como a formação de matriz mineralizada aparentemente não foram afetadas. A análise das culturas por epifluorescência mostrou que as culturas controle e irradiadas apresentaram comportamento distintos. Aos 14 dias, foi demonstrado que a exposição à radiação laser, na dose utilizada, promoveu aumento na expressão relativa dos genes ALP, OC, BSP, BMP-7 e OPG e redução dos níveis de expressão de Runx2 e osteopontina, mas não afetou a expressão gênica de COL I, RANK-L e ICAM. As culturas irradiadas apresentaram áreas sem células após 24 h da última irradiação, que posteriormente foram repovoadas por células mais proliferativas e menos diferenciadas. Em conclusão, os resultados indicam que a radiação do laser diodo de AsGaAl estimula a expressão do fenótipo osteoblástico de culturas osteogênicas humanas crescidas sobre titânio. / The success of treatment with osseointegrated implants depends on wound healing and the osteogenic potential of cells. Aimed at increasing bone formation onto implant surfaces, several treatments have been proposed and low-intensity laser therapy is one of them. Thus, the purpose of this study was to investigate the effect of the Gallium-Aluminum-Arsenic (GaAlAr) diode laser on human osteogenic cultures grown on titanium. After irradiation of osteogenic cultures with 3 J/cm2 of GaAlAr laser at the days 3 and 7, the following parameters were evaluated: 1) cell proliferation at 10 and 14 days; 2) alkaline phosphatase activity (ALP) at 10 days; 3) mineralized matrix formation at day 17, 4) non-collagenous bone proteins and nuclear antigen Ki-67 immunolocalization by indirect fluorescence at 8, 10, 14 and 17 days; and 5) Expressions of a panel of genes related to osteoblastic phenotype at day 14. Apparently cell proliferation, ALP activity and mineralized matrix formation were not significantly different between irradiated and control cultures in any period. Epifluorescence revealed that control and irradiated cultures had presented different behaviors. At 24 h after irradiation procedures, irradiated cultures displayed areas with no cells, which were repopulated later on by proliferative and apparently less-differentiated cells. Laser radiation increased relative gene expression of ALP, OC, BSP, BMP-7, and OPG; reduced the gene expression of Runx2 and OPN; and did not affect the expression of COL-1, RANK-L and ICAM. Altogether these results indicated that the GaAlAr laser stimulates the expression of osteoblastic phenotype of human osteogenic culture cells grown on titanium.
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Efeito antiinflamatório da terapia laser de baixa potência (660 nm) na pleurisia em ratos

Boschi, Emerson Soldateli January 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000399357-Texto+Completo-0.pdf: 1396496 bytes, checksum: 2fad2df47997209231d151979b59a483 (MD5) Previous issue date: 2008 / The purpose of this study was to investigate the potential effect of low level laser therapy (LLLT) on modulating the pro-inflammatory and antiinflammatory mediators of acute inflammation in rat pleurisy model. In the classic model of pleurisy there is little evidence of anti-inflammatory effects from LLLT and dosage characteristic, such as wavelength, total energy, number and pattern of treatment, with the necessity for more studies. A sample of 48 female Wistar rats were divided into control and experiential groups. An inflammation was induced by carrageenan (0. 2mL) injected into the pleural cavity. At 1, 2, and 3 h after induction the continuous wave (20 mW) diode laser of the InGaAlP (660nm) type was used in laser groups different doses and treatment patterns and with a total energy delivered of 0. 9, 2. 1 and 4. 2 joules. At 4 h after the exudate volume, total and differential leukocytes, protein concentration, nitric oxide (NO), interleukin (IL)-6, interleukin (IL)-10, tumor necrosis factor (TNF)-J and monocyte chemoattractant protein (MCP)-1 were measured from the aspirated liquid. Any treatment pattern and quantity of energy can reduce a significantly volume of the exudate (P<0,05). The final energy lower than 2. 1 joules reduces significantly (P<0,05) only NO, IL-6, MCP-1 and IL-10, while 2. 1 joules reduce significantly all variables independently of the treatment pattern. The neutrophil migration has significant correlation with the TNF-J concentration (r=0,551). The LLLT (660nm) induced an anti-inflammatory effect characterized by inhibition of both total and differential leukocyte influx, exudation, total protein, NO, IL-6, MCP-1, IL-10 and TNF-J, but keeping a highly dose-dependent outline. Under these conditions, laser with 2. 1 joules was more effective than 0. 9 joule and 4. 2 joules. / A proposta deste estudo foi investigar o efeito potencial da terapia laser de baixa intensidade na modulação de mediadores pró-inflamatórios e antiinflamatórios na fase aguda da inflamação no modelo de pleurisia em ratos. No modelo clássico de pleurisia temos poucas evidencias do efeito antiinflamatório do laser e das características de dosagem, como o comprimento de onda, energia total, números e formas de tratamento, necessitando ainda de mais estudos. A amostra de 48 ratas Wistar foram divididas em grupos controle e experimentais. A inflamação foi induzida por carragenina (0. 2 mL) injetada na cavidade pleural. Na 1ª, 2ª e 3ª hora após a indução o laser diodo de InGaAlP (660 nm) no modo contínuo (20 mW) foi usado nos grupos laser diferentes doses e formas de tratamento, com uma energia total de 0. 9, 2. 1 e 4. 2 joules. Após 4 horas o volume de exsudato, leucócitos totais e diferencial, concentração de proteínas, oxido nítrico (NO), interleucina (IL)-6, interleucina (IL)-10, fator de necrose tumoral (TNF)-J e proteína quimioatrativa de monócitos (MCP)-1 foram mensuradas no liquido pleural aspirado. Todas as formas de tratamento e quantidade de energia reduzem significativamente o volume do exsudato (P<0,05). A energia final abaixo de 2. 1 joules somente reduz significativamente (P<0,05) o NO, IL-6, MCP-1 e IL-10, enquanto que 2. 1 joules reduz significativamente todas as variáveis independente da forma de tratamento. A migração de neutrófilos tem uma correlação significativa com a concentração de TNF-J (r=0,551). A terapia laser de baixa intensidade (660 nm) induz um efeito antiinflamatório caracterizado pela inibição de ambos leucócitos totais e diferencial, exsudato, proteínas totais, NO, IL-6, MCP-1, IL-10 e TNF-J, mas mantendo um alto perfil dose-dependente. Nestas condições acima, o laser com 2. 1 joules foi mais efetivo que 0. 9 joule e 4. 2 joules.
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Efeito da fotobiomodulação na proliferação de células-tronco da polpa de dentes decíduos esfoliados cultivadas sobre filmes de ácido poliláctico

Macedo, Rômulo Augusto de Paiva 23 February 2018 (has links)
Submitted by Automação e Estatística (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-06-05T21:48:08Z No. of bitstreams: 1 RomuloAugustoDePaivaMacedo_DISSERT.pdf: 1406598 bytes, checksum: 872fd8fc67bafca4beb6d8332bade82f (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-06-11T20:24:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RomuloAugustoDePaivaMacedo_DISSERT.pdf: 1406598 bytes, checksum: 872fd8fc67bafca4beb6d8332bade82f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-11T20:24:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RomuloAugustoDePaivaMacedo_DISSERT.pdf: 1406598 bytes, checksum: 872fd8fc67bafca4beb6d8332bade82f (MD5) Previous issue date: 2018-02-23 / A fotobiomodulação (PBM) estimula a proliferação de diferentes tipos celulares, incluindo células-tronco. A células-tronco da polpa do dente decíduo esfoliado (SHEDs) apresentam um potencial de diferenciação maior do que as demais célulastronco mesenquimais, sendo o foco de diversas pesquisas na área da engenharia tecidual. Para que as células proliferarem e se diferenciem in vitro é necessário o desenvolvimento de um microambiente favorável, o qual pode ser fornecido por um biomaterial que mimetize a matriz extracelular natural, destacando-se para esta finalidade o ácido poliláctico (PLA) por suas propriedades de biocompatibilidade e biodegradabilidade, além do baixo custo. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da PBM em diferentes doses na proliferação e viabilidade de SHEDs cultivadas sobre arcabouços bidimensionais de PLA. As SHEDs foram cultivadas sobre os filmes e divididas em três grupos: (C) controle não irradiado; (L1) irradiadas com dose de 1 J/cm2; e (L4) irradiadas com dose de 4 J/cm2. As irradiações foram realizadas com laser diodo InGaAlP, com comprimento de onda de 660 nm e potência de 30 Mw, em dose única. A viabilidade e a proliferação celular foram avaliadas nos intervalos de 24, 48 e 72 horas após a irradiação, através do ensaio do Alamar Blue, enquanto a morfologia e a distribuição das células na superfície dos filmes foram avaliadas por MEV no intervalo de 72 horas. Os dados quantitativos foram submetidos a testes estatísticos não paramétricos. Os dados do ensaio do Alamar Blue mostraram que os grupos L1 e L4 exibiram uma maior proliferação celular em comparação ao grupo C, sendo as diferenças significativas entre L1 e C em 48 e 72 h (p<0,0001) e entre L4 e C em 24 (p<0,01), 48 (p<0,001) e 72 h (p<0,0001). O percentual de redução do Alamar blue mostrou-se significativamente maior em L4 em comparação com L1 em 24 e 72 h (p<0,05). A análise das amostras por MEV mostrou que nos grupos irradiados as células apresentavam uma distribuição mais homogênea ao longo da superfície dos filmes e uma maior densidade celular em comparação com o grupo C, sendo esta diferença ainda mais evidente no grupo L4. Conclui-se que a PBM nos parâmetros estudados, especialmente na dose de 4 J/cm2, estimula a proliferação de SHEDs em contato com filmes de PLA, constituindo assim uma ferramenta metodológica com potencial aplicação nas técnicas de engenharia tecidual / Photobiomodulation (PBM) stimulates the proliferation of different cell types, including stem cells. Stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHEDs) present a greater differentiation potential compared to other mesenchymal stem cells, being the focus of several studies in the field of tissue engineering. In order for cells to proliferate and differentiate in vitro it is necessary to develop a favorable microenvironment, which can be provided by a biomaterial that mimics the natural extracellular matrix, with polylactic acid (PLA) being distinguished for this purpose due to its properties of biocompatibility and biodegradability, as well as low cost. The aim of this study was to evaluate the effect of PBM in different doses on the proliferation and viability of SHEDs cultured on two-dimensional PLA scaffolds. SHEDs were cultured on the films and divided into three groups: (C) non-irradiated control; (L1) irradiated with a dose of 1 J/cm2; and (L4) irradiated with a dose of 4 J/cm2. The irradiations were performed with an InGaAlP diode laser, with wavelength of 660 nm and power of 30 Mw, in a single dose. Cell viability and proliferation were evaluated at 24, 48 and 72 h after irradiation by Alamar Blue assay, while cell morphology and distribution on the surface of the films were evaluated by SEM at 72 hours. The quantitative data were submitted to non-parametric statistical tests. Data from Alamar blue assay showed that groups L1 and L4 exhibited greater cell proliferation compared to group C, with significant differences between L1 and C at 48 and 72 h (p<0.0001) and between L4 and C in 24 (p<0.01), 48 (p<0.001) and 72 h (p<0.0001). The percentage of reduction of Alamar blue was significantly higher in L4 compared to L1 at 24 and 72 h (p<0.05). Analysis of the samples by SEM showed that in the irradiated groups the cells had a more homogeneous distribution along the surface of the films and a higher cell density compared to the group C, with this difference being even more evident in the group L4. We conclude that PBM in the studied parameters, especially with the dose of 4 J/cm2, stimulates the proliferation of SHEDs in contact with PLA films, thus constituting a methodological tool with potential application in tissue engineering techniques.
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A influência da luz laser de baixa energia na prevenção de mucosite oral em crianças e adolescentes com câncer

Cruz, Luciane Beitler da January 2005 (has links)
Objetivo: Este estudo teve como objetivo avaliar a influência do laser de baixa energia na prevenção ou redução de mucosite oral em crianças e adolescentes. Pacientes e Métodos: Este trabalho foi um ensaio clínico randomizado cego. Pacientes de três a 18 anos tratados com quimioterapia ou transplante de células progenitoras hematopoéticas entre maio de 2003 e fevereiro de 2005 foram incluídos no estudo. Nos pacientes do grupo intervenção foi aplicado laser na mucosa oral por cinco dias, a partir do primeiro dia da quimioterapia. As avaliações orais foram realizadas no primeiro dia, no oitavo e no 15º dia após o início do tratamento, utilizando-se a escala para avaliação do grau de mucosite oral recomendada pela Organização Mundial de Saúde de 1998. As avaliações foram realizadas pelo mesmo examinador, sem envolvimento na randomização. Resultados: Sessenta pacientes foram incluídos no estudo, 39 (65%) foram meninos, 35 (58%) tinham diagnóstico de leucemias e linfomas e 25 (42%) tinham diagnóstico de tumores sólidos. A média de idade foi 8,7 ± 4,3 anos. Vinte e nove pacientes foram randomizados para receber a intervenção e 31 para o grupo controle. Nenhum paciente teve evidência de mucosite oral na primeira avaliação. Na segunda avaliação, no dia oito, 20 pacientes (36%) desenvolveram mucosite, 13 deles eram do grupo que recebeu laser e sete do grupo controle. Na terceira avaliação, no dia 15, 24 (41%) pacientes desenvolveram mucosite oral, 13 deles foram do grupo laser e 11 do grupo controle. Não houve diferença estatisticamente significativa entre os grupos para o grau de mucosite oral no dia oito (P=0,234), nem no dia 15 (P=0,208). Conclusão: O uso do laser de baixa intensidade não mostrou evidências suficientes que possam justificar a sua recomendação como medida preventiva para mucosite oral em crianças e adolescentes submetidas à quimioterapia.
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Aplicação do laser de baixa intensidade no tratamento da mucosite oral induzida por quimioterapia e/ou radioterapia

Kuhn, Alessandra January 2007 (has links)
OBJETIVO: O estudo foi conduzido para determinar o quanto o Laser de Baixa Intensidade (LBI), em adição com um protocolo de higiene oral, pode reduzir a duração da mucosite oral (MO) induzida por quimioterapia e/ou radioterapia. PACIENTES E MÉTODOS: Um ensaio clínico randomizado placebo controlado foi desenvolvido utilizando o LBI ou controle (sham-treatment) em 2 centros de tratamento do câncer - a Unidade de Oncologia Pediátrica do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA) e a Unidade de Oncologia do Hospital São Vicente de Paulo de Passo Fundo (HSVP). Pacientes em tratamento quimioterápico e/ou radioterápico entre os meses de outubro de 2005 e maio de 2006 foram elegíveis tão logo desenvolvessem MO. Os pacientes receberam intervenção por 5 dias. O grupo LBI foi tratado com GaAlAs, comprimento de onda: 830nm (infravermelho), potência: 100mW, dose: 4J/cm2 e o grupo controle com o sham-treatment. O grau de MO foi avaliado clinicamente através da escala da World Health Organization - National Cancer Institute - Common Toxicity Criteria (WHO-NCI-CTC). RESULTADOS: Os resultados foram expostos de acordo com cada centro envolvido. UOP - HCPA: vinte e um pacientes desenvolveram MO no grupo pediátrico e foram submetidos à análise; 18 (86%) pacientes possuíam diagnóstico de leucemia ou linfoma e 3 (14%) de tumores sólidos. A média de idade foi de 8,2 (± 3,1) anos. Nove pacientes foram randomizados no grupo laser e doze no grupo sham-treatment. A MO foi mensurada quando os sintomas foram manifestados em cada paciente, sendo a duração e o grau de MO graduados diariamente até a completa cicatrização das lesões. No dia 7 após o diagnóstico da MO, 11% dos pacientes permaneciam com lesões no grupo laser e 75% no grupo sham-treatment (P=0,029). No grupo tratado com laser a média de duração da MO foi de 5,8 ± 2 dias e no grupo sham-treatment 8,9± 2,4 dias (P=0,004). UO-HSVP: trinta e quatro pacientes desenvolveram MO no grupo dos adultos e foram submetidos à análise; 22 (65%) dos pacientes possuíam diagnóstico de tumores sólidos e 12 (35%) de leucemia ou linfoma. A média de idade foi de 41 (± 20 anos). 18 pacientes foram randomizados no grupo laser e 16 no grupo sham-treatment. A MO foi mensurada quando os sintomas foram manifestados em cada paciente, sendo a duração e o grau de MO graduados diariamente até a completa cicatrização das lesões. No dia 7 após o diagnóstico da MO, 32% dos pacientes permaneciam com lesões no grupo laser e 94% no grupo sham-treatment (P=0,001). No grupo tratado com laser a média de duração da MO foi de 6,8 ± 2,2 dias e no grupo sham-treatment 11,5± 3,5 dias (P<0,001). CONCLUSÃO: Este estudo demonstrou evidências que a laserterapia em adição com um protocolo de higiene oral pode reduzir a duração da MO induzida por quimioterapia e radioterapia. Em decorrência destes achados, esta modalidade de tratamento pode ser difundida e aplicada no intuito de promover qualidade de vida aos pacientes durante os tratamentos quimioterápicos e radioterápicos. / BACKGROUND: The study was conducted to determine whether Low level laser therapy (LLLT) in addition to oral care can reduce the duration of chemotherapy and/or radiotherapy induced oral mucositis (OM). PROCEDURE: A placebo-controlled randomized study was carried out using LLLT or placebo (sham-treatment) in two centers of cancer treatment - Pediatric Oncology Unit (POU) of HCPA and Oncology Unit (OU) of HSVP. Patients treated with chemo and/or radiotherapy between Oct, 2005 and May, 2006 were eligible as soon as they developed OM. Patients received intervention for 5 days. The LLLT group was treated with Laser GaAlAs, wavelenght: 830nm (infrared), power: 100mW, dose: 4J/cm2 and the control group with sham-treatment. The grade of OM was clinically assessed by the WHONCI- CTC scale. RESULTS: Results were showed according with the center. POU-HCPA: Twenty-one patients developed OM in the children group and were submitted for analysis; 18 (86%) patients had a diagnosis of leukemia or lymphoma and 3(14%) had solid tumors. The mean age was 8.2 (± 3.1) years. Nine patients were randomized in the laser group and twelve patients in the placebo-control group. OM was measured when symptoms were manifest and the duration of OM and the grade of lesions found in each patient were recorded at the start of laser therapy and daily until complete healing of the lesions. On day 7 after OM diagnosis, 11% of patients presented lesions in laser group and 75% of patients in the sham-treatment group (P=0.029). In the group treated with laser the mean of OM duration was 5.8 ± 2 days and in the sham-treatment group 8.9± 2.4 days (P=0.004). OU-HSVP: Thirty-four patients developed OM and were submitted for analysis; 22 patients (65%) had diagnosis of solid tumors and 12 (35%) leukemia or lymphoma. The mean age was 41 (± 20) years. Eighteen patients were randomized in the laser group and 16 patients in the placebo-control group. Once OM was diagnosed, the patients had daily OM grading assessments before laser application, and thereafter until complete healing process of lesions. On day 7 after OM diagnoses , 32% of patients presented lesions in laser group and 94% of patients in the sham-treatment group (P=0.001). In the laser group the mean of OM duration was 6.8 ± 2.2 days and in the sham-treatment group was 11.5 ± 3.5 days (P<0.001). CONCLUSION: Our study has shown evidence that laser therapy in addition to oral care can decrease the duration of chemotherapy induced OM. It should encourage clinicians to use this technique to improve quality of life of cancer patients during the oncology treatment.
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Disfunção temporomandibular : prevalência e efeitos da terapia laser de baixa potência na dor miofascial crônica

Cardoso, Lorena Marcelino January 2014 (has links)
Submitted by ROBERTO PAULO CORREIA DE ARAÚJO (ppgorgsistem@ufba.br) on 2016-10-25T16:13:29Z No. of bitstreams: 1 Tese Lorena_.pdf: 4057653 bytes, checksum: 98d19e4642f563444973b90d4abf6173 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-25T16:13:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Lorena_.pdf: 4057653 bytes, checksum: 98d19e4642f563444973b90d4abf6173 (MD5) / Introdução: A dor miofascial (DMF) é uma disfunção muscular que é causa difundida de dor e comumente ignorada pelos profissionais de saúde. Sua prevalência entre os pacientes atendidos em clínica médica geral e de especialidades varia de 21% a 93%, sendo comumente encontrada na investigação diagnóstica da cefaleia, da dor lombar, cervical e de ombro, assim como, também constitui um dos subgrupos diagnósticos das disfunções temporomandibulares (DTMs). Seu diagnóstico é eminentemente clínico, no qual o exame físico é soberano. Objetivo: Identificar a prevalência de DTM em pacientes de clínica de dor e avaliar os efeitos da terapia laser em pacientes com DMF em DTM. Metodologia: O presente estudo foi realizado em duas etapas, a primeira, constituiu-se em levantamento baseado nos prontuários do Hospital Universitário Professor Edgar Santos – HUPES, objetivando o perfil dos pacientes com dor atendidos no seu Serviço de Dor e, a segunda, triagem, através do Índice Anamnésico de Fonseca e exame físico, para pacientes portadores de DTM miofascial para a etapa experimental. A segunda etapa, um ensaio clínico, simples cego e placebo controlado, versou sobre os efeitos da terapia laser no tratamento de portadores de DTM miofascial crônica. Como ferramentas avaliativas foram empregados: questionário de qualidade de vida sf-36, escala de ansiedade e depressão (HAD), escalas visual anlógica (EVA) e numérica (EN) de dor, algometria de pressão, eletromiografia de superfície (EMGs) e imagem por termografia infravermelha. Resultados: O percentual dos pacientes portadores de DMF com indícios de DTM (8,3%) é superior ao percentual geral do serviço (5,8%), evidenciando casos subdiagnosticados. Em relação ao ensaio clínico com terapia laser nos pacientes com DTM miofascial, o questionário sf-36 não apresentou mudança significativa do quadro inicial e, em relação à escala HAD, detectou-se um nível de ansiedade discretamente reduzido durante a terapia. A terapia laser promoveu redução na EN (p=0,016), melhoria na algometria de pressão (p= 0,010, masseter, e p=0,028, temporal) e melhoria na EMGs dos músculos estudados (p<0,002, para ambos grupos musculares, nas condições de contração isométrica e relaxamento). As imagens por infravermelho evidenciam assimetrias térmicas, no entanto, não foram esclarecedoras quando se trabalhou com diferenças térmicas durante o tratamento. Conclusão: O laser, nos parâmetros empregados neste estudo, foi efetivo em relação à promoção de analgesia e melhoria no desempenho muscular, do masseter e temporal anterior, nas situações de contração isométrica voluntária máxima e no relaxamento.
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Laser de baixa intensidade na reparação de tíbias de ratos submetidas a radiação ionizante / Low level Laser therapy in the reparation of rats tibias submitted to ionizing radiation

Abramoff, Meire Maman Fracher [UNIFESP] January 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T23:45:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Introdução: A radiacao ionizante (RI) desenvolve alteracoes estruturais que retardam e impedem a reparacao do tecido osseo. O LASER de baixa intensidade (LLLT) desencadeia o incremento celular qualitativo e quantitativo, acelerando o processo de reparacao no osso. OBJETIVO: Avaliar os efeitos do LLLT na reparacao de tibias de ratos submetidas a RI. METODO: Setenta e dois ratos Wistar-EPM-1, machos e saudaveis foram distribuidos nos seguintes grupos: Grupo I: Controle sham (18 tibias); Grupo II: LASER (18 tibias); Grupo III: RI (18 tibias); Grupo IV: RI e LASER (18 tibias). Os Grupos III e IV foram submetidos a RI com dose unica (30GY). Em cada tibia foi realizada uma perfuracao monocortical (ø=2,5mm), na porcao de diafise. Nos grupos III e IV, a operacao foi realizada apos 28 dias da RI. Nos grupos II e IV, foram realizadas tres aplicacoes de LLLT sobre a pele (AsGaAL, 100mW, 808nm, 20s, 3,57W/cm², 72J/cm², 2J), em dias alternados iniciando logo apos a operacao. A eutanasia ocorreu aos 7, 14 e 21 dias apos a cirurgia com seis amostras de osso de cada grupo. A histomorfometria foi realizada por analise digital da imagem e a celularidade foi analisada qualitativamente. RESULTADOS: Em todos os periodos: houve aumento significativo (p<0,006) de osso neoformado no Grupo IV, comparado ao Grupo III; nao houve diferenca significante entre o Grupo IV e o Grupo I; a radiacao ionizante reduziu a neoformacao ossea no Grupo III em comparacao ao Grupo I. CONCLUSAO: O LLLT aumentou a area ossea neoformada durante a fase inflamatoria abreviando a reparacao das tibias de ratos submetidas a RI / INTRODUCTION: Ionizing radiation (IR) develops structural changes that delay and restrain bone tissue repair. The Low-Level Laser therapy (LLLT) unchains a qualitative and quantitative cell growth, accelerating the bone repair process. OBJECTIVE: To evaluate the effects of LLLT on the repair of tibias from rats subjected to IR. METHOD: 72 male and healthy Wistar were divided into four groups: Group I: Sham Control (18 tibias), Group II: LASER (18 tibias), Group III: IR (18 tibias), Group IV: IR and LASER (18 tibias). Groups III and IV were submitted to IR with a single dose (30Gy). Monocortical perforation (diameter 2.5mm) was surgically performed in the portion of the tibial dyaphisis. In Groups III and IV, the surgery occurred 28 days after IR. In groups II and IV, post-surgery, three applications of LLLT were carried out (GaALAs, 100mW, 808nm, 20s, 3.57 W/cm², 72J/cm², 2J), on alternate days. Samples were collected after 7, 14 and 21 days. Histomorphometry was processed by digital image analysis and cellularity was qualitatively analyzed. RESULTS: In all periods, there was a significant increase (p <0.006) of new formed bone in Group IV when compared to Group III; no significant difference between Group I and Group IV was observed; the protocol of ionizing radiation reduced bone formation in Group III when compared to Group I. CONCLUSION: LLLT increased the newly formed bone area during the inflammatory phase, abbreviating the repair of rats tibias submitted to IR. / FAPESP: 10/51626-9 / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Laser de baixa potência para mitigação de xerostomia e hipofluxo salivar em pacientes portadores de câncer de cabeça e pescoço submetidos à radioterapia e quimioterapia / Low level lasertherapy for mitigation of xerostomia and low salivary flow in patients irradiated for head and neck tumor

Gonnelli, Fernanda Aurora Stabile [UNIFESP] January 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T23:46:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013 / Objetivo: verificar a eficacia do laser de baixa potencia na mitigacao da xerostomia e do hipofluxo salivar em pacientes portadores de cancer de cabeca e pescoco submetidos a radio e quimioterapia (RT-QT). Material e Metodo: estudo prospectivo, com 29 pacientes submetidos a radioterapia (RT) em aparelho de megavoltagem (acelerador linear 6 MV, ou telecobaltoterapia u60Co) em campos cervicofaciais e fossa supraclavicular, fracoes de 2 Gy/dia, com dose minima de 66 Gy, associada a quimioterapia (QT) (derivados da platina). Foram divididos em: Grupo LASER, com 17 pacientes que receberam a laserterapia antes da primeira sessao da RT, 3 dias por semana e grupo CONTROLE com 12 pacientes que receberam tratamento clinico conforme protocolo do Setor. Foi utilizado um InGaAlP laser diodo, com a ponta do emissor de 0,04 cm3. Para a aplicacao intra oral do laser, foi utilizado comprimento de onda de 660 nm e 40 mW de potencia, dose media de 10 J/cm², 10 segundos por ponto, sendo 3 em cada mucosa jugal, 3 em cada mucosa labial, 2 em palato duro, 1 em palato mole, 1 no dorso da lingua, 2 em cada bordo de lingua, 1 em cada pilar amidaliano, 2 em soalho bucal. Para a aplicacao extra-oral, o comprimento de onda utilizado foi de 780 nm e 15 mW de potencia, dose media de 3,7 J/cm², 10 segundos por ponto, sendo 6 em cada parotida e 2 em cada submandibular. Foram avaliados os sintomas da xerostomia pelo sistema simplificado de Eisbruch et al e o fluxo salivar nao estimulado antes da primeira sessao de RT (N0), na 15ª(N15) e na ultima sessao de RT (Nf), 30 (N30) e 90 (N90) dias depois do termino do tratamento. Resultados: 89,66% dos pacientes eram do genero masculino, com media de idade de 57,37 anos e a maior parte da raca branca (72,41%). A maioria dos pacientes apresentou tumores em faringe (65,5%) em estadio IV (75,9%) e foram tratados predominantemente com dose total da RT de 70 Gy (82,8%). Na avaliacao dos sintomas da xerostomia, o grupo LASER apresentou menores graus em todos os tempos de avaliacao que, porem, nao foram estatisticamente significantes quando comparados aos controles. Em relacao as medidas do fluxo salivar em mL/min, o grupo que foi tratado com o laser apresentou medias significantemente maiores quando comparado ao grupo CONTROLE na 15ª sessao (p=0,009), ao final (p=0,027) da RT e 30 dias apos o termino do tratamento (p=0,035). Noventa dias depois do termino do tratamento, a media do fluxo salivar do grupo LASER foi quase o dobro do grupo CONTROLE, porem nao apresentou significancia estatistica. Conclusoes: O uso do laser de baixa potencia em glandulas salivares nos pacientes portadores de cancer de cabeca e pescoco submetidos a RT-QT permitiu niveis de fluxo salivar significantemente maiores em comparacao aos pacientes que somente receberam o tratamento clinico rotineiro. Os resultados sugerem tambem que o laser de baixa potencia possa reduzir os sintomas relacionados a xerostomia. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

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