Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-15Bitstream added on 2014-06-13T18:55:46Z : No. of bitstreams: 1 bichuette_ma_me_jabo.pdf: 713275 bytes, checksum: da5fda57eb8e30e69990f683adf48e2a (MD5) / Dentre as zoonoses que têm a participação de cães na sua transmissão, merecem destaque a leptospirose e a leishmaniose visceral, presentes em todas as regiões do Brasil. No Estado de São Paulo a leptospirose é endêmica e a ocorrência de leishmaniose visceral vem apresentando aumento significativo. No Distrito de Córrego Rico, Jaboticabal/SP, é grande o número de cães soltos nas ruas e de roedores que invadem as residências. Há relato, na literatura, de um cão reagente à leishmaniose visceral. Recentemente, em 2011, um jovem veio a óbito por leptospirose. Diante desses fatos, o presente estudo teve como objetivo realizar uma avaliação sorológica das duas enfermidades em cães de Córrego Rico e identificar fatores predisponentes ou relacionados à sua ocorrência. Para tanto, as residências que abrigam cães foram visitadas, aplicou-se um questionário semi-estruturado para levantamento de informações que permitissem avaliar as condições gerais de posse e saúde de cada animal, com entrega de panfleto educativo. Amostras de sangue foram obtidas de 274 cães para serem submetidas à prova de soroaglutinação microscópica (SAM) frente a 24 sorovares de Leptospira spp. Vinte e duas amostras mostraram-se reagentes com títulos 1:100, sendo os sorovar butembo, seguido pelo autumnalis, bratislava e pyrogenes os mais frequentemente encontrados. As mesmas amostras passaram por avaliação de anticorpos contra Leishmania chagasi, por meio das técnicas de imunofluorescência indireta (RIFI) e ensaio imunoenzimático indireto (ELISA). Pela imunofluorescência, duas amostras mostraram-se positivas. Já no teste ELISA, todas as amostras testadas foram negativas. A Análise Multivariada permitiu identificar fatores locais que podem estar relacionados com a ocorrência de leptospirose. Embora não tenha sido detectado... / Among the zoonosis transmitted by dogs in Brasil, leptospirosis and visceral leishmaniosis can be found throughout the country. In São Paulo state, leptospirosis is endemic and the occurrence of visceral leishmaniosis is significantly increasing. In the district of Córrego Rico, Jaboticabal/SP, there is a large number of free roaming dogs and homes that are invaded by rodents, and according to the literature, dogs have also tested positive for leishmaniosis in that region. Recently, in 2011, a fatal human case of leptospirosis was reported. This study was conducted to evaluate the serological response of both diseases in the above mentioned district and to identify predisposing factors that could be related to their occurrence. The households with dogs were visited and a questionnaire was filled to compile the information and evaluate the general conditions of dog health and ownership. An educational folder was also distributed to each participant. Blood samples of 274 dogs were submitted to microscopic serum agglutination (SAM) to 24 serotypes de Leptospira spp. Twenty tow samples were positive with titers 1:100. The serotypes butembo, followed by autumnalis, bratislava and pyrogenes were the most commonly found. The blood samples were also evaluated against Leishmania chagasi antibodies using indirect immunoflourescence (IFI) and ELISA. Two samples were positive based on IFI and all tested negative by the ELISA. The multivariate statistical analysis was able to identified local factors related to the incidence of leptospirosis. There were no findings on positive seroconversion of leishmaniosis and the reagents to leptospirosis were 8,0%. However, this study clearly shows the importance of the population control of dogs and... (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by FLÁVIO GONÇALVES BRITO (britofilhoo@hotmail.com) on 2017-10-04T16:19:06Z No. of bitstreams: 1 TESE DE DOUTORADO final impresso flavio.pdf: 3777537 bytes, checksum: fb617dcd0c40ddcc6eeb32ed0bc1f810 (MD5) / Rejected by Monique Sasaki (sayumi_sasaki@hotmail.com), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo a orientação abaixo: O arquivo submetido está sem a ficha catalográfica. A versão submetida por você é considerada a versão final da dissertação/tese, portanto não poderá ocorrer qualquer alteração em seu conteúdo após a aprovação. Corrija esta informação e realize uma nova submissão contendo o arquivo correto. Agradecemos a compreensão. on 2017-10-04T17:40:59Z (GMT) / Submitted by FLÁVIO GONÇALVES BRITO (britofilhoo@hotmail.com) on 2017-10-09T10:44:22Z No. of bitstreams: 2 TESE DE DOUTORADO final impresso 01 FICHA CATALOGRAFICA.pdf: 1508912 bytes, checksum: 2933176614c440b0061502a7637f9c64 (MD5) TESE DE DOUTORADO final impresso 01 FICHA CATALOGRAFICA.pdf: 1508912 bytes, checksum: 2933176614c440b0061502a7637f9c64 (MD5) / Approved for entry into archive by Monique Sasaki (sayumi_sasaki@hotmail.com) on 2017-10-09T19:05:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 brito_fg_dr_bot.pdf: 1508912 bytes, checksum: 2933176614c440b0061502a7637f9c64 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-09T19:05:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 brito_fg_dr_bot.pdf: 1508912 bytes, checksum: 2933176614c440b0061502a7637f9c64 (MD5) Previous issue date: 2017-02-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O interesse pelo estudo das zoonoses, enfermidades comuns aos humanos e aos animais, aumentou acentuadamente nos últimos anos, sugerindo maior integração, conhecimento e relacionamento entre profissionais da área da saúde. Dentre estas zoonoses a brucelose, a toxoplasmose, a leptospirose e a doença de Chagas (DC) têm elevada importância veterinária e para a saúde pública, pela gravidade e potencial letalidade com que se apresentam em humanos. Atenção especial deve ser dada às pessoas vivendo com HIV/aids (PVHA), pois a imunossupressão à que estão sujeitas pode agravar ainda mais o seu quadro clínico, fato que gera necessidade de diagnósticos mais eficientes para essas infecções. Com o objetivo de determinar o perfil sorológico destas zoonoses em PVHA, atendidos no Serviço de Ambulatório Especializado de Infectologia “Domingos Alves Meira” (SAEI-DAM), entidade pertencente ao complexo de assistência da Faculdade de Medicina de Botucatu – UNESP, bem como relacionar aos hábitos, comportamentos e fatores de risco de exposição a essas doenças, além da obtenção de dados referentes ao grau de conhecimento em relação às zoonoses estudadas. Foram analisadas 236 amostras de soro desses pacientes para a presença de anticorpos anti- Brucella abortus, que mostraram-se negativas para todas as amostras. Para leptospirose quatro (1,69%) amostras foram positivas, para a toxoplasmose 154 (65%) amostras positivas, sendo 146 (94,8%) somente para anticorpos da classe IgG, dois (1,3%) somente para a classe IgM e seis (3,9%) para as duas classes de imunoglobulinas anti-Toxoplasma gondii. Para doença de Chagas encontrou-se quatro (1,69%) das amostras positivas para anticorpos anti Trypanosoma cruzi. Para neurotoxoplasmose e toxoplasmose ocular encontraram-se 21 (8,89%) e seis (2,54%) respectivamente de pacientes diagnosticados. / The interest in the study of zoonoses, common diseases to humans and animals, has increased sharply in recent years, suggesting greater integration, knowledge and relationships among health professionals. Among these zoonoses, brucellosis, toxoplasmosis, leptospirosis and Chagas' disease (DC) are of high veterinary and public health importance due to the seriousness and potential lethality that they present in humans. Special attention should be given to people living with HIV / AIDS (PLWHA), since the immunosuppression to which they are subject may further aggravate their clinical condition, which generates a need for more efficient diagnoses for these infections. The objective of this study was to determine the serological profile of these zoonoses in PLWHA treated at the Domingos Alves Meira Specialized Ambulatory Service (SAEI-DAM), an entity belonging to the assistance center of Botucatu Medical School - UNESP, as well as to relate to the habits, behaviors and risk factors of exposure to these diseases, besides obtaining data regarding the degree of knowledge regarding the zoonoses studied, 236 serum samples of these patients were analyzed for the presence of anti-Brucella abortus antibodies, which showed Negative for all samples. For leptospirosis, four (1.69%) samples were positive for toxoplasmosis, with 154 (65%) positive samples, 146 (94.8%) only for IgG class antibodies, two (1.3%) for IgM class and six (3.9%) for the two classes of anti-Toxoplasma gondii immunoglobulins. For Chagas disease, four (1.69%) of the samples positive for anti-Trypanosoma cruzi antibodies were found. For neurotoxoplasmosis and ocular toxoplasmosis, 21 (8.89%) and 6 (2.54%) respectively of diagnosed patients were found.

Orientador: Adolorata Aparecida Bianco Carvalho / Coorientador: David Luciano Rosalen / Banca: Karina Paes Bürger / Banca: Caris Maroni Nunes / Resumo: Dentre as zoonoses que têm a participação de cães na sua transmissão, merecem destaque a leptospirose e a leishmaniose visceral, presentes em todas as regiões do Brasil. No Estado de São Paulo a leptospirose é endêmica e a ocorrência de leishmaniose visceral vem apresentando aumento significativo. No Distrito de Córrego Rico, Jaboticabal/SP, é grande o número de cães soltos nas ruas e de roedores que invadem as residências. Há relato, na literatura, de um cão reagente à leishmaniose visceral. Recentemente, em 2011, um jovem veio a óbito por leptospirose. Diante desses fatos, o presente estudo teve como objetivo realizar uma avaliação sorológica das duas enfermidades em cães de Córrego Rico e identificar fatores predisponentes ou relacionados à sua ocorrência. Para tanto, as residências que abrigam cães foram visitadas, aplicou-se um questionário semi-estruturado para levantamento de informações que permitissem avaliar as condições gerais de posse e saúde de cada animal, com entrega de panfleto educativo. Amostras de sangue foram obtidas de 274 cães para serem submetidas à prova de soroaglutinação microscópica (SAM) frente a 24 sorovares de Leptospira spp. Vinte e duas amostras mostraram-se reagentes com títulos 1:100, sendo os sorovar butembo, seguido pelo autumnalis, bratislava e pyrogenes os mais frequentemente encontrados. As mesmas amostras passaram por avaliação de anticorpos contra Leishmania chagasi, por meio das técnicas de imunofluorescência indireta (RIFI) e ensaio imunoenzimático indireto (ELISA). Pela imunofluorescência, duas amostras mostraram-se positivas. Já no teste ELISA, todas as amostras testadas foram negativas. A Análise Multivariada permitiu identificar fatores locais que podem estar relacionados com a ocorrência de leptospirose. Embora não tenha sido detectado... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Among the zoonosis transmitted by dogs in Brasil, leptospirosis and visceral leishmaniosis can be found throughout the country. In São Paulo state, leptospirosis is endemic and the occurrence of visceral leishmaniosis is significantly increasing. In the district of Córrego Rico, Jaboticabal/SP, there is a large number of free roaming dogs and homes that are invaded by rodents, and according to the literature, dogs have also tested positive for leishmaniosis in that region. Recently, in 2011, a fatal human case of leptospirosis was reported. This study was conducted to evaluate the serological response of both diseases in the above mentioned district and to identify predisposing factors that could be related to their occurrence. The households with dogs were visited and a questionnaire was filled to compile the information and evaluate the general conditions of dog health and ownership. An educational folder was also distributed to each participant. Blood samples of 274 dogs were submitted to microscopic serum agglutination (SAM) to 24 serotypes de Leptospira spp. Twenty tow samples were positive with titers 1:100. The serotypes butembo, followed by autumnalis, bratislava and pyrogenes were the most commonly found. The blood samples were also evaluated against Leishmania chagasi antibodies using indirect immunoflourescence (IFI) and ELISA. Two samples were positive based on IFI and all tested negative by the ELISA. The multivariate statistical analysis was able to identified local factors related to the incidence of leptospirosis. There were no findings on positive seroconversion of leishmaniosis and the reagents to leptospirosis were 8,0%. However, this study clearly shows the importance of the population control of dogs and... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Luis Antonio Mathias / Coorientador: Raymundo Rizaldo Pinheiro / Banca: Samir Issa Samara / Banca: Luís Guilherme de Oliveira / Banca: Darci Lara Perecin Nociti / Banca: Anna Monteiro Correia Lima / Resumo: A brucelose e a leptospirose são doenças infectocontagiosas de ampla distribuição geográfica que acometem animais domésticos, silvestres e o homem. Devido a isso, possuem importância econômica, por perdas advindas de transtornos reprodutivos e para a saúde pública, devido ao fato de serem zoonoses. Tendo em vista a importância da caprinovinocultura para a região Nordeste, este trabalho teve como objetivo avaliar a presença de aglutininas anti-Leptospira e de reação anti-Brucella lisa em pequenos ruminantes de quatro Estados da região nordeste, bem como avaliar os sorovares de Leptospira spp mais prevalentes e os fatores associados à infecção. Foram obtidas 6.431 amostras de pequenos ruminantes. No Estado do Ceará foram 931 amostras de ovinos e 817 de caprinos, na Paraíba foram 443 ovinos e 1.215 caprinos, em Sergipe foram 923 ovinos e 499 caprinos e na Bahia 918 ovinos e 685 caprinos. O diagnóstico sorológico para leptospirose foi feito por meio do teste de soroaglutinação microscópica, para brucelose foi feito o antígeno acidificado tamponado como teste de triagem, e, como confirmatórios foram realizados os testes de polarização fluorescente e de fixação de complemento. A leptospirose encontra-se amplamente distribuída na região estudada, com frequências de 27,15% (IC95%: 25,62-28,69) em ovinos e 34,34% (IC95%: 32,69-35,97) em caprinos. No Estado da Paraíba, as frequências foram 28,89% (IC95%: 24,67%-33,11%) em ovinos e 34,65% (IC95%: 31,97%-37,33%) em caprinos. Em Sergipe, a prevalência em ovinos foi 12,89% (IC95%: 10,73-15,05), e 32,67% (IC95%: 28,55-36,78) em caprinos. No Ceará, 29,22% (IC95%: 26,29-32,13) em ovinos e 28,52% (IC95%: 25,42-31,62) em caprinos; e na Bahia, 38,56% (IC95%: 35,41-41,71) em ovinos e 41,90% (IC95%: 38,20-45,59) em caprinos. A prevalência em rebanhos na região foi 93,26% (IC95%: 89,57-96,94) em rebanhos ovinos e 97,16% (IC95%: 93,52-98,78) em rebanhos... / Abstract: Brucellosis and leptospirosis are infectious diseases widely geographically distributed that affect domestic and wild animals, as well humans. Because of this, they have economic importance, for losses arising from reproductive disorders and production loss, and also to the public health due to be a zoonosis. Seen the goat importance to the Northeast region, this study aimed to evaluate the presence of antibodies to Leptospira and antibodies to smooth Brucella in small ruminants in the states of Sergipe, Bahia, Ceará and Paraíba, and to assess the more prevalent sorovars of Leptospira spp and the factors associated with the infection. We obtained 6,431 samples of small ruminants, 931 sheep samples and 817 goat samples from Ceará, 443 sheep samples and 1,215 goat samples from Paraíba, from Sergipe 923 sheep samples and 499 goat samples, and 918 sheep samples and 499 goat samples from Bahia. The leptospirosis serologic diagnosis was made through the microscopic agglutination test. To brucellosis the buffered acidified antigen test was used as a screen test and then confirmed using the fluorescence polarization and the complement fixation tests. Leptospirosis was found widely distributed in the studied area, with frequencies of 27.15% (95% CI 25.62 to 28.69) in sheep and 34.34% (95% CI 32.69 to 35.97) in goats. In the state of Paraíba, the frequency was 28.89% (95% CI: 24.67% -33.11%) in sheep and 34.65% (95% CI: 31.97% -37.33%) in goats. In Sergipe, the prevalence in sheep was 12.89% (95% CI 10.73 to 15.05) and 32.67% (95% CI 28.55 to 36.78) in goats. In Ceará, the prevalence was 29.22% (95% CI 26.29 to 32.13) in sheep and 28.52% (95% CI 25.42 to 31.62) in goats, and in Bahia it was 38.56% (95% CI 35.41 to 41.71) in sheep and 41.90% (95% CI 38.20 to 45.59) in goats. The prevalence in herds in the region was 93.26% (95% CI 89.57 to 96.94) in sheep flocks and 97.16% (95% CI 93.52 to 98.78) in goat herds. All municipalities analyzed ... / Doutor

Resumo: Camundongos experimentalmente infectados com estirpes patogênicas de Leptospira interrogans sorovar Pomona e Canicola foram avaliados quanto à produção de anticorpos antileptospiras e distribuição do microrganismo em tecidos, em diferentes momentos após infecção. A técnica de soroaglutinação microscópica foi avaliada após tratamento das amostras de soro com 2-mercaptoetanol (SAM-2ME), e pela comparação do seu resultado com as respectivas amostras não tratadas (SAM) foi possível determinar a presença de anticorpos da classe IgM e, dessa forma, diferenciar a fase da infecção. Pela SAM, não houve reação para qualquer outro sorovar testado, diferente do homólogo inoculado, podendo indicar resposta imunológica específica em camundongos para os sorovares inoculados experimentalmente. Em relação à distribuição do microrganismo nos tecidos, pesquisado pela reação em cadeia pela polimerase (PCR), observou-se que os camundongos infectados não apresentaram fase de leptospiremia, e não houve colonização renal e ovariana, sugerindo que esses animais, talvez, não participem de forma importante na epidemiologia da leptospirose para os sorovares Pomona e Canicola. / Abstract: Experimentally infected mice with pathogenic strains of Leptospira interrogans serovar Pomona and Canicola were evaluated to anti-leptospiral antibodies production and to verify the distribution of the microrganism in tissues in different moments of the infection. Microscopic agglutination test was evaluated after treatment of the sera samples with 2-mercathoethanol (MAT-2ME), and by the comparison of its results with the respective samples not-treated (MAT) was possible to determine the presence of IgM antibodies and, thus, to differentiate the stage of infection. MAT does not present reaction for any other serovar tested, different the homologous serovar inoculated, indicating specific immunological response in mice to the experimentally inoculated serovars. In relation to the distribution of the microrganism in the tissues detected by polymerase chain reaction (PCR), the infected mice didn't present leptospiremia, and there was not renal and ovarian colonization, suggesting that these animals, maybe do not participate of the epidemiology of leptospirosis to the serovar Pomona and Canicola. / Orientador: Paulo Francisco Domingues / Coorientador: Hélio Langoni / Banca: Paulo Roberto de Oliveira / Banca: Silvio Arruda Vasconcelos / Banca: Marcio Garcia Ribeiro / Banca: Luiz Carlos de Souza / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003Bitstream added on 2014-06-13T18:47:30Z : No. of bitstreams: 1 lopes_als_me_botfmvz.pdf: 611886 bytes, checksum: c91fe529eddcd5ed4071746c69230150 (MD5) / Durante a 33.a campanha de vacinação anti-rábica em cães, em 2001, no município de Botucatu-SP, foram colhidas mil amostras de sangue, em vinte postos representativos de quarenta postos, distribuídos geográfica e homogeneamente na área territorial urbana de Botucatu-SP. As amostras foram submetidas ao exame de soroaglutinação microscópica (SAM) aplicada à leptospirose, utilizando como antígeno, para tal, 24 sorovares de leptospira. A freqüência de 17,9% de ocorrência de Leptospira spp. em cães foi correlacionada com um inquérito realizado com os proprietários dos animais, para determinar alguns fatores de risco à leptospirose canina. A análise estatística apontou significância na correlação entre animais soropositivos e aqueles que tinham contato com roedores e animais que tinham acesso à rua. Já na correlação entre animais de residências não ligadas à rede pública de esgoto e a soropositividade não foi observado significância estatística. Os títulos detectados na prova de aglutinação microscópica variaram entre 1:100 e 1:12800. Foram detectados anticorpos contra os sorovares castellonis (28,68%), autumnalis (19,12%), pyrogenes (17,65%), icterohaemorrhagiae (11,03%), canicola (9,56%), australis (4,41%), shermani (3,68%), copenhageni (1,47%), grippotyphosa (1,47%), brasiliensis (0,73%), butembo (0,73%), panama (0,73%) e wolffi (0,73%). Os resultados mostram a diversidade de sorovares envolvidos na epidemiologia da leptospirose canina, bem como fatores de riscos aos quais cães estão expostos, servindo dessa maneira como alerta ao risco de infecção humana. / During the 33rd vaccination campaign against rabies in dogs in 2001, in the city of Botucatu, SP, Brazil, thousand blood samples were collected at twenty immunization centers representative of forty immunization centers, geographically and homogeneously distributed in the urban area of Botucatu. The samples were submitted to the microscopic agglutination test (MAT) applied to leptospirosis, making use of 24 leptospire serovars as antigens. The 17.9% frequency of occurrence of Leptospira spp. in dogs was compared to a questionnaire applied to the owners of the animals in order to determine some risk factors to canine leptospirosis. Statistical analysis demonstrated significance in the correlation between seropositive animals and those that had already been in contact with rodents or had free access to the street. No statistical significance could be found when correlating seropositivity and those animals living in areas with no sewerage system. The titers detected on the microscopic agglutination test ranged from 1:100 to 1:12800. Antibodies were detected for the serovars castellonis (28.68%), autumnalis (19.12%), pyrogenes (17.65%), icterohaemorrhagiae (11.03%), canicola (9.56%), australis (4.41%), shermani (3.68%), copenhageni (1.47%), grippotyphosa (1.47%), brasiliensis (0.73%), butembo (0.73%), panama (0.73%) and wolffi (0.73%). The results demonstrated the large diversity of serovars involved in the epidemiology of canine leptospirosis, as well as the risk factors to which the dogs are exposed, therefore highlighting the risk to human infection.

Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2018-08-14T13:28:54Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Dienny Rodrigues de Souza - 2018.pdf: 2932501 bytes, checksum: b9f00bbcfe53fb6001ad592bd08bbc63 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-08-16T11:24:33Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Dienny Rodrigues de Souza - 2018.pdf: 2932501 bytes, checksum: b9f00bbcfe53fb6001ad592bd08bbc63 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-16T11:24:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Dienny Rodrigues de Souza - 2018.pdf: 2932501 bytes, checksum: b9f00bbcfe53fb6001ad592bd08bbc63 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-07-02 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Leptospirosis is a zoonosis caused by pathogenic spirochetes belonging to the genus Leptospira. The disease may progress to acute renal failure (Weil's Syndrome) and severe pulmonary haemorrhagic syndrome (SPHS), with a mortality rate of > 50%. The highest incidence of the disease occurs among the poorer populations and is associated with the lack of basic sanitation that gets worse during periods of heavy rainfall and flooding. Rodents and dogs are the main sources of transmission of the disease. Therefore, the identification of infected animals is essential towards eliminating reservoir hosts such as dogs and rodents. Therefore, means allowing the identification of leptospira infection in dogs and rodents is essential to permit control actions, decreasing the infection rate in the environment and consequently helping to prevent disease in humans. The objective of this study was to develop prototypes of lateral flow immunochromatographic tests to aid in the diagnosis and control of leptospirosis. The design used in the prototypes was based on a lateral flow immunochromatographic test for direct detection of specific antibodies using a recombinant antigen, known as rLigBrep, attached to the nitrocellulose membrane test line. As an antigen/antibody binding marker, polyvalent antibodies were conjugated to 40 nm colloidal gold, murine anti-mouse immunoglobulin for the murine, anti-canine (Rockland) and anti-canine IgG (Jackson) for canine prototypes. The canine prototypes were tested with 10 positive samples and 10 negative samples previously confirmed by the MAT and ELISA for canine leptospirosis. The staining intensity was recorded on a scale of 0 to 3. Low concentrations of rLigBrep antigen resulted in weak staining intensity. The results of the murine prototype provided the basic specifications to developed the canine prototypes. In the first canine prototype using Rockland conjugate, 5/10 positive samples presented staining intensity of 1. In the canine prototype using Jackson conjugate, 9/10 positive samples presented staining intensity variation of 1 to 3. The results of negative samples 8/10 presented a tenuous staining intensity on the test line, indicating the necessity to reduce the concentration of antigen and/or conjugate on the test. The studied prototypes were not evaluated to determine sensibility and specificity as they didn’t present similar results obtained on ELISA and MAT. Therefore, it has not been defined if the rLigBrep protein can be utilized in the development of a rapid immunochromatography test for the diagnosis of canine leptospirosis and as a marker of infection in rodents. / A leptospirose é uma zoonose causada por espiroquetas patogênicas do gênero Leptospira. A doença pode progredir para falência renal aguda (Síndrome de Weil) e síndrome hemorrágica pulmonar severa (SPHS), com taxa de mortalidade > 50%. A maior incidência da doença ocorre em populações mais carentes, ligada a deficiências em saneamento básico agravando-se em períodos de chuvas constantes e enchentes. Os roedores e os cães são os principais transmissores da doença. Portanto, meios que permitam a identificação de infecção por lepstospira em cães e roedores é essencial para permitir ações de controle, diminuindo a taxa de infecção no meio ambiente e consequentemente auxiliando na prevenção da doença nos humanos. O objetivo desse estudo foi desenvolver protótipos de testes imunocromatograficos de fluxo lateral para auxiliar no diagnóstico e controle da leptospirose. O desenho utilizado nos protótipos se baseiam em um teste imunocromatográfico de fluxo lateral para detecção direta de anticorpos específicos, utilizando antígeno recombinante rLigBrep fixado na linha teste da membrana de nitrocelulose. Como marcador da ligação antígeno/anticorpo foram utilizado nanoparticulas deouro coloidal de 40 nm conjugados a anti-imunoglobulina murina polivalente para o protótipo murino, anticorpo policlonal anti-IgG F(c) canino da Rockland e anticorpo policlonal anti-IgG F(c) canino da Jackson para os protótipos caninos. Os protótipos caninos foram testados com 10 amostras positivas e 10 amostras negativas confirmadas em MAT e ELISA para leptospirose canina. A intensidade de coloração dos resultados foi registrada em escala entre 0 a 3. As especificações dos materiais e concentrações do protótipo murino serviram de base para o desenvolvimento do protótipo canino. No protótipo canino utilizando conjugado Rockland, 5/10 amostras positivas apresentaram intensidade de coloração 1. Com o protótipo canino, utilizando conjugado Jackson, nas 9/10 amostras positivas a intensidade de coloração variou de 1 a 3. Entre resultados das amostras negativas 8/10 apresentaram uma coloração tênue na linha teste, indicando a necessidade de reduzir a concentração de antígeno e/ou conjugado no teste. Os protótipos estudados não foram avaliados para determinar a sensibilidade e especificidade pois ainda não apresentaram resultados semelhantes aos obtidos em ELISA e MAT. Portanto, não foi definido se proteína rLigBrep pode ser utilizada no desenvolvimento de um teste imunocromatográfico rápido para diagnóstico de leptospirose canina e como marcador de infecção por leptospiras em roedores.

O objetivo do presente trabalho foi determinar a soroprevalência da leptospirose bovina no Estado da Bahia, bem como identificar fatores de risco associados à infecção. A amostragem foi delineada para a determinação da prevalência de propriedades positivas (focos) e de animais soropositivos para a leptospirose. O Estado foi dividido em quatro circuitos produtores, nos quais foram amostradas 10.823 fêmeas bovinas com idade ≥24 meses distribuídas em 1.414 propriedades. Na ocasião da colheita de sangue, foi aplicado um questionário epidemiológico por propriedade e as coordenadas geográficas foram obtidas com um aparelho de GPS. A reação de Soroaglutinação Microscópica (SAM), empregando 24 sorovares de Leptospira spp. como antígenos, foi utilizada como teste diagnóstico. O rebanho foi considerado foco quando apresentou pelo menos um animal soropositivo. As prevalências de foco e de animais soropositivos no Estado foram de 77,93% [75,73% 79.99%] e 45,42% [42,00% 48,88%], respectivamente. O sorovar mais freqüente foi o Hardjoprajitno, com 34,49% [31,93% 37,14%] de propriedades positivas e 14,95% [12,59% - 17,67%] de animais soropositivos. Nos circuitos produtores 1, 2, 3 e 4, as prevalências de focos foram de 62,40% [57,43% 67,13%], 88,10% [84,16% 91,15%], 77,47% [72,88% 81,49%] e 78,25% [73,47% 82,37%], e as prevalências de animais soropositivos foram de 42,52% [35,82% 49,51%], 48,60% [43,68% 53,56%], 47,72% [40,36% 55,18%] e 44,18% [38,13% 50,41%], respectivamente. A compra de reprodutores, presença de animais silvestres, utilização de pasto compartilhado, presença de eqüinos, cães e suínos, presença de cervídeos, abate de reprodutores nas fazendas, existência de áreas alagadiças, exploração de corte, aluguel de pasto e predominância de raças especializadas foram os principais fatores de risco identificados. A presença de gatos foi um fator de proteção contra a leptospirose. / The aim of this work was to determine the seroprevalence of bovine leptospirosis in Bahia State, Northeastern Brazil, as well as to identify risk factors associated to infection. The sampling was delineated for the determination of the prevalence of positive herds and seropositive animals for bovine leptospiroses. The State was divided into four productive circuits in which 10,823 bovine females aged ≥24 months allocated in 1,414 herds were sampled. On the occasion of the blood collection, an epidemiological questionnaire was applied in each herd and the geographical coordinates were obtained with a GPS. The Microscopic Agglutination Teste (MAT), using 24 Leptospira spp. serovars as antigens, was employed as diagnostic test. The herd was considered positive if at least one animal was seropositive. The prevalences of positive herds and seropositive animals in State were 77. 93% [75.73% 79.99%] and 45.42% [42.00% 48.88%], respectively. Serovar Hardjoprajitno was the most frequent, with 34.49% [31.93% 37.14%] of positive herds and 14.95% [12.59% - 17.67%] of seropositive animals. In the productive circuits 1, 2, 3 and 4, the prevalences of positive herds were 62.40% [57.43% 67.13%], 88.10% [84.16% 91.15%], 77.47% [72.88% 81.49%] and 78.25% [73.47% 82.37%], and the revalences of seropositive animals were 42.52% [35.82% 49.51%], 48.60% [43.68% 53.56%], 47.72% [40.36% 55.18%] and 44.18% [38.13% 50.41%], respectively. Purchase of reproducers, presence of wild animals, utilization of shared pasturage, presence of equine, dogs and swine, presence of cervides, slaughter of reproducers in the farms, existence of flooded areas, meat farm enterprise, rent of pasturage and predominance of specialized breeds were the main identified risk factors. Presence of cats was a protective factor against leptospirosis.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-20T11:35:44Z No. of bitstreams: 1 Maria Betania de Queiroz Rolim.pdf: 462361 bytes, checksum: b6ba98d10b7e0778c5957fa72635c65a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-20T11:35:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Betania de Queiroz Rolim.pdf: 462361 bytes, checksum: b6ba98d10b7e0778c5957fa72635c65a (MD5) Previous issue date: 2010-02-23 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Given the economic impact with health public caused Leptospira spp and Brucella abortus, and absence prevalence of Leptospirosis and brucellosis in beef cattle in Pernambuco State, the purpose this work was to estimate the prevalence of anti-Leptospira spp. and anti- Brucella abortus in cattle slaughtered in abattoir public in the Pernambuco State. 412 animal’s blood samples were collected after section of the great vessels of the neck during bleeding, and serum obtained in Bacteriology Laboratory University of Course of Medicine Veterinary of Universidade Federal Rural de Pernambuco. These were processed at Laboratório Nacional Agropecuário de Pernambuco, according to official methodology. For detect antibodies anti-Leptospira spp. was used the Microscopic Agglutination Test (SAM). The samples were diluted 1:50 and screening with 27 Leptospira spp. Were positive serum with titer equal or more than 100, Leptospira spp. agglutination equal or more than 50%. Screening of Brucella abortus was performed with Buffered Acidified Antigen (AAT) in order to identify possible reagent samples to test Complement Fixation Complement (TFC). The statistical analysis of the samples was performed by descriptive analysis of them. For Leptospira spp., of the 412 samples tested, 55 were positive (MAT> 1:100), resulting in a seroprevalence of 13.3% (95% CI = 10.1% and 16.6%). Positive animals were from 20 of the 24 counties of origin. Of the 24 serovars studied, 16 were detected: Shermani (25.5%), Wolffi (14.5%), Hebdomadis (10.9%), Grippotyphosa (9.1%), Canicola (7.3%), saxkoebing ( 5.5%), Bratislava (5.5%), Copenhagen (3.6%), Hardjo (3.6%), djasiman (3.6%),Icterohaemorrhagiae RGA (1.8), Icterohaemorrhagiae Icteria No. 1 (1.8), Serjoe (1.8%), Panama (1.8%), Pyrogenes (1.8%) and Patoc (1.8%). The antibodies anti-Brucella abortus were not detected, giving a prevalence of 0%. Although there are not cattle with brucellosis, the animals evaluated offer risk for health public, because the people have chance to acquire Leptospirosis through them. / Em virtude da importância econômica da Leptospira spp. e Brucella abortus para a saúde pública, e da ausência de dados referentes à soroprevalência da leptospirose e brucelose para bovinos de corte consumidos no Estado, neste trabalho objetivou-se estimar a prevalência de anticorpos anti-Leptospira spp. e anti-Brucella abortus em bovinos abatidos em matadouro público no Estado de Pernambuco. 412 amostras de sangue de bovinos foram colhidas após venossecção dos grandes vasos do pescoço, durante a sangria, e encaminhados ao Laboratório de Bacteriologia do Curso de Medicina Veterinária da Universidade Federal Rural de Pernambuco para obtenção do soro. Estes foram processados no Laboratório Agropecuário Nacional de Pernambuco, de acordo com metodologia oficial. Para a detecção de anticorpos anti-Leptospira spp. foi utilizada a Técnica de Soroaglutinação Microscópica (SAM). As amostras foram diluídas 1:50 e submetidas à triagem com 27 sorovares de Leptospira spp., sendo positivas aquelas com título igual ou superior a 100 com 50% ou mais de Leptospira spp. aglutinadas. A triagem dos anticorpos anti-Brucella abortus foi realizada com o Antígeno Acidificado Tamponado (AAT), a fim de identificar possíveis amostras reagentes ao Teste de Fixação do Complemento (TFC). A análise estatística das amostras foi realizada através da análise descritiva das mesmas. Para Leptospira spp., das 412 amostras testadas, 55 foram positivas (MAT > 1:100), resultando em uma soroprevalência de 13,3% (95% IC = 10,1% e 16,6%). Animais soropositivos foram provenientes de 20 dos 24 municípios de origem, sendo muitos sorovares de Leptospira spp. identificados. Dos sorovares pesquisados, 16 foram detectados: Shermani (25,5%), Wolffi (14,5%), Hebdomadis (10,9%), Grippotyphosa (9,1%), Canicola (7,3%), Saxkoebing (5,5%), Bratislava (5,5%), Copenhageni (3,6%), Hardjo (3,6%), Djasiman (3,6%), Icterohaemorrhagiae RGA (1,8), Icterohaemorrhagiae ICTERO nº 1 (1,8), Serjoe (1,8%), Panama (1,8%), Pyrogenes (1,8%) e Patoc (1,8%). Totalizando as amostras analisadas, 0 (0%) foi reagente ao TFC. Diante dos resultados, conclui-se que apesar de não haver bovinos brucélicos, os animais avaliados representam risco à saúde pública, devido à possibilidade das pessoas adquirirem a leptospirose através deles.

A leptospirose é uma zoonose mundial causada por espiroquetas patogênicas do gênero Leptospira, que colonizam os túbulos renais de animais domésticos e silvestres e são liberadas ao ambiente externo pela urina. Neste estudo avaliou-se a interação de seis prováveis lipoproteínas de membrana externa de leptospira com as proteínas do hospedeiro: colágeno I, colágeno IV, elastina, fibrinogênio, fibronectina celular e plasmática, laminina e plasminogênio. Os experimentos de adesão demonstraram que as proteínas recombinantes Lp21, Lp22 e Lsa30 apresentaram interação com os componentes do hospedeiro de maneira dose-dependente. Estas aderiram à fibronectina plasmática e laminina, além destes, a Lp21 e a Lp22 interagiram com plasminogênio, a Lp22 e a Lsa30 interagiram com colágeno IV. A Lp22 aderiu à elastina e ao fibrinogênio. No estudo de conservação gênica, os genes que codificam estas proteínas foram observados somente nas Leptospiras patogênicas. Portanto estas proteínas devem contribuir na adesão aos tecidos do hospedeiro na patogênese da Leptospira. / Leptospirosis is a worldwide zoonosis caused by pathogenic spirochetes of the genus Leptospira that colonize the renal tubules of wild and domestic animals and are excreted in the environment by their urine. The aim of this work was to study the interaction of six leptospiral probable outer-membrane lipoproteins with host proteins: collagen I, collagen IV, elastin, fibrinogen, cellular fibronectin, plasma fibronectin, laminin, and plasminogen. The binding experiments demonstrated that the recombinant proteins showed interaction with host components in a dose-dependent manner were Lp21, Lsa30 and Lp22. These proteins adhered to plasma fibronectin and laminin, in addition to these components, Lp21 and Lp22 interacted with plasminogen, Lp22 and Lsa30 interacted with collagen IV. The Lp22 adhered to elastin and fibrinogen. The genes encoding the probable lipoproteins were found only in pathogenic Leptospira. These results demonstrated that these proteins may contribute in the adhesion to host tissues, in the pathogenesis of Leptospira.