Les maladies cardiovasculaires (CV) représentent la première cause de mortalité lors de l'insuffisance rénale chronique (IRC). Cette morbidité apparat précocement lors de l'IRC et ne peut être explique par les facteurs de risque traditionnels. Le stress oxydant (SO), composante du cortège métabolique de l'IRC, représente un facteur de risque non traditionnel intriqué avec l'inflammation et la malnutrition. Le but de ce travail a été d'étudier la place du SO dans la survenue des complications CV au cours de l'IRC sur modale animal, puis de comparer le profil protéomique et la fonctionnalité des HDL in vitro entre sujets hémodialysés (HD) et témoins. Le SO au niveau CV a été étudié dans un modèle animal (adénine) d'IRC associé à la malnutrition. L'activité de la NADPH oxydase cardiaque est triple, alors que les activités des complexes de la chaîne respiratoire mitochondriale et de la SOD sont normales. Cette surproduction d'anion super oxyde est associé à une surexpression de l'ostéopontine et du pro-collagène de type I. L'étude protéomique des HDL de sujets HD et témoins a permis de préciser les anomalies qualitatives associées à la baisse des HDL induite par l'IRC. Les propriétés anti-oxydantes des HDL de ces mêmes sujets ont été étudiées in vitro sur un modèle d'oxydation des LDL au cuivre et sur un modèle cellulaire d'activation de la NADPH oxydase. En comparaison aux témoins, les HDL des sujets HD perdent leur capacité de protection des LDL contre l'oxydation. Par contre, la modulation de la NADPH oxydase sur modèle cellulaire est conservée avec les HDL de sujets HD mais serait moindre en présence d'une forte inflammation systémique. Ces résultats suggèrent que le SO est au cœur des complications cardiaques au cours de l'IRC. Parmi les mécanismes de défense endogènes, les propriétés anti-oxydantes des HDL sont en partie altérées chez le sujet HD. / Cardiovascular (CV) diseases are the first cause of mortality during chronic kidney disease (CKD) and cannot only be explained by traditional risk factors (age, gender, dyslipidemia, hypertension). Oxidative stress, which has been associated with CKD, appears as a non-traditional risk factor closely interconnected with inflammation and malnutrition.This study aimed at investigating oxidative stress in CV complications in uremic rats. Then, HDL proteomic profile and in vitro functionality of HDL were compared between hemodialyzed (HD) patients and control subjects.First, an animal model of CKD associated with malnutrition, the adenine-fed rats, was set up in order to study CV oxidative stress. NADPH oxidase activity was increased three-fold, but the maximal activity of mitochondrial respiratory chain complexes and SOD were not different between groups. Superoxide anion output was associated with accumulation of osteopontin and of pro-collagen type I. In a second part, HDL proteomic study from HD and control subjects was performed to characterize qualitative modifications associated with the decrease in HDL observed in CKD. HDL anti-oxidative activities from these subjects were studied in vitro in a model of copper-induced LDL oxidation and in a cellular model of NADPH oxidase activation. Compared to control, HDL from HD patients failed to protect LDL oxidation. By contrast, HDL modulation of NADPH activity is maintained in HD patients but could be impaired by elevated inflammation.These results suggest that oxidative stress is a key event in cardiac complications during CKD. Among protective endogenous mechanisms, HDL anti-oxidative properties could be impaired in HD patients.

Introdução:Uma das causas da doença cardiovascular do diabético é a dislipidemia associada ao diabetes mellitus tipo 2 (DM2), caracterizada basicamente por hipertrigliceridemia e baixa concentração de HDL-colesterol. O bom controle da glicemia geralmente resulta em diminuição dos triglicerídeos plasmáticos, mas há controvérsia na literatura quanto aos níveis de HDL-colesterol e outros parâmetros lipídicos. As transferências lipídicas para a HDL têm importante função na sua formação e remodelamento e no seu papel antiaterogênico do transporte reverso do colesterol. A transferência de lípides entre as lipoproteínas é bidirecional e depende da estrutura e concentração da lipoproteína doadora e receptora, assim como da ação das proteínas de transferências, CETP e PLTP. Objetivo:Investigar as relações dos níveis glicêmicos com as transferências lipídicas para a HDL e com outros parâmetros do metabolismo lipídico em pacientes com DM2. Métodos:143 pacientes com DM2, que não estavam usando drogas hipolipemiantes, foram selecionados e separados em dois grupos: grupo com hemoglobina glicada (HbA1c) <= 6,5% (n=62) e grupo com HbA1c > 6,5% (n=81). O método in vitro de transferência lipídica para a HDL foi realizado através da incubação sob agitação, por 1 hora, de uma nanoemulsão doadora contendo colesterol esterificado e não esterificado, fosfolipídios e triglicerídeos, marcados radioativamente, com o plasma do paciente, seguido de precipitação química e contagem dos lipídios radiomarcados transferidos para HDL. Outras determinações plasmáticas do metabolismo lipídico também foram realizadas. Foi também verificado o percentual de pacientes nos dois grupos com o perfil lipídico dentro das metas estabelecidas pela American Diabetes Association. Pacientes com ou sem uso de insulina e com níveis maiores e menores de ácidos graxos livres (AGL) foram comparados quanto aos parâmetros estudados. Resultados:O grupo HbA1c > 6,5% apresentou maior trigliceridemia (205±115 vs 140±54mg/dl; p < 0,0001) e colesterol não esterificado (36,4±7,6 vs 33,7±5,7mg/dl; p > 0,05), além de apresentar maior concentração de triglicerídeos na partícula de HDL (9,2±2,8 vs 8,1±2,3%; p < 0,05), do que o grupo HbA1c<=6,5%. As concentrações de triglicerídeos, colesterol total e não esterificado e também o colesterol da fração não-HDL correlacionaram-se positivamente com a HbA1c (r=0,25, r=0,19, r=0,18, r=0,17, respectivamente, p < 0,05). A concentração de colesterol esterificado da HDL correlacionou-se negativamente com a HbA1c (r=-0,19, p < 0,05). Os pacientes com HbA1c <= 6,5% atingiram mais a meta trigliceridêmica do que os com HbA1c > 6,5% (66 vs 37%; p < 0,001). Os pacientes com maiores níveis de AGL tiveram maior trigliceridemia (196±105 vs 153±81 mg/dl; p < 0,01) e atividade de LCAT (1,36±0,10 vs 1,29±0,10 470/390nm; p < 0,01), além de uma maior concentração de triglicerídeos na partícula de HDL (9,4±2,9 vs 7,8±2,0%; p < 0,001), em relação aos pacientes com menores níveis de AGL. A transferência dos quatro lipídios da nanoemulsão para a HDL foi igual na comparação de todos os grupos deste estudo. Conclusão:Os resultados deste estudo mostraram pela primeira vez que junto com os triglicerídeos, o colesterol não esterificado é também um marcador de pobre controle glicêmico em pacientes com DM2 / Introduction:One cause of cardiovascular disease (CVD) of patients with type 2 diabetes mellitus (T2DM) is diabetic dyslipidemia, characterized primarily by hypertriglyceridemia and low HDL-cholesterol. Good blood glucose control usually results in decreased plasma triglycerides, but there is controversy in the literature as to the levels of HDL-cholesterol and other lipid parameters. Lipid transfers to HDL play an important role in the formation and remodeling of HDL and on its antiatherogenic role of reverse cholesterol transport. The transfer of lipids between lipoproteins is bidirectional and depends on the structure and concentration of the donor and acceptor lipoprotein as well as the action of the transfers proteins, PLTP and CETP. Objective:Investigate the relationship of blood glucose levels with lipid transfers to HDL and other parameters of lipid metabolism in patients with T2DM. Methods:143 patients with T2DM, who were not using lipid-lowering drugs, were selected and divided into two groups: group with glycated hemoglobin (HbA1c) <= 6.5% (n=62) and group with HbA1c > 6.5% (n=81). In vitro lipid transfers to HDL was performed by 1 hour incubation under stirring of a donor nanoemulsion containing radioactively labeled unesterified and esterified cholesterol, phospholipids and triglycerides with whole patient plasma, followed by chemical precipitation and counting of radiolabeled lipids transferred to HDL. Other determinations of plasma lipid metabolism were also performed. It was also checked the percentage of patients in both groups with lipid profile within the targets set by the American Diabetes Association criteria. Patients with or without insulin use and with higher and lower free fatty acids (FFA) levels were also compared for the studied parameters. Results:HbA1c>6.5% group had higher triglyceridemia (205 ± 115 vs 140 ± 54 mg/dl, p<0.0001) and unesterified cholesterol (36.4 ± 7.6 vs 33.7 ± 5.7 mg/dl, p<0.05) than the HbA1c<=6.5% group. The concentrations of triglycerides, total and unesterified cholesterol and also non-HDL cholesterol was positively correlated with HbA1c (r=0.25, r=0.19, r=0.18, r=0.17, respectively, p<0,05). The concentration of esterified cholesterol from HDL was negatively correlated with HbA1c (r = -0.19, p<0.05). Patients with HbA1c<=6,5% achieved more the triglyceridemic target than the patients with HbA1c>6.5% (66 vs 37%, p<0.001). Patients with higher levels of FFA had higher triglycerides levels (196 ± 105 vs 153 ± 81 mg/dl, P<0.01) and LCAT activity (1.36 ± 0.10 vs 1.29 ± 0.10 470/390nm, p<0.01), in addition to a higher concentration of triglycerides in the HDL particle (9.4 ± 2.9 vs 7.8 ± 2.0%, p <0.001). The transfer of the four lipid of the nanoemulsion to HDL was equal in the comparison of all the studied groups. Conclusion:The results of this study showed for the first time that unesterified cholesterol, along with triglycerides, is also a marker of poor glycemic control in patients with T2DM

Introdução:Uma das causas da doença cardiovascular do diabético é a dislipidemia associada ao diabetes mellitus tipo 2 (DM2), caracterizada basicamente por hipertrigliceridemia e baixa concentração de HDL-colesterol. O bom controle da glicemia geralmente resulta em diminuição dos triglicerídeos plasmáticos, mas há controvérsia na literatura quanto aos níveis de HDL-colesterol e outros parâmetros lipídicos. As transferências lipídicas para a HDL têm importante função na sua formação e remodelamento e no seu papel antiaterogênico do transporte reverso do colesterol. A transferência de lípides entre as lipoproteínas é bidirecional e depende da estrutura e concentração da lipoproteína doadora e receptora, assim como da ação das proteínas de transferências, CETP e PLTP. Objetivo:Investigar as relações dos níveis glicêmicos com as transferências lipídicas para a HDL e com outros parâmetros do metabolismo lipídico em pacientes com DM2. Métodos:143 pacientes com DM2, que não estavam usando drogas hipolipemiantes, foram selecionados e separados em dois grupos: grupo com hemoglobina glicada (HbA1c) <= 6,5% (n=62) e grupo com HbA1c > 6,5% (n=81). O método in vitro de transferência lipídica para a HDL foi realizado através da incubação sob agitação, por 1 hora, de uma nanoemulsão doadora contendo colesterol esterificado e não esterificado, fosfolipídios e triglicerídeos, marcados radioativamente, com o plasma do paciente, seguido de precipitação química e contagem dos lipídios radiomarcados transferidos para HDL. Outras determinações plasmáticas do metabolismo lipídico também foram realizadas. Foi também verificado o percentual de pacientes nos dois grupos com o perfil lipídico dentro das metas estabelecidas pela American Diabetes Association. Pacientes com ou sem uso de insulina e com níveis maiores e menores de ácidos graxos livres (AGL) foram comparados quanto aos parâmetros estudados. Resultados:O grupo HbA1c > 6,5% apresentou maior trigliceridemia (205±115 vs 140±54mg/dl; p < 0,0001) e colesterol não esterificado (36,4±7,6 vs 33,7±5,7mg/dl; p > 0,05), além de apresentar maior concentração de triglicerídeos na partícula de HDL (9,2±2,8 vs 8,1±2,3%; p < 0,05), do que o grupo HbA1c<=6,5%. As concentrações de triglicerídeos, colesterol total e não esterificado e também o colesterol da fração não-HDL correlacionaram-se positivamente com a HbA1c (r=0,25, r=0,19, r=0,18, r=0,17, respectivamente, p < 0,05). A concentração de colesterol esterificado da HDL correlacionou-se negativamente com a HbA1c (r=-0,19, p < 0,05). Os pacientes com HbA1c <= 6,5% atingiram mais a meta trigliceridêmica do que os com HbA1c > 6,5% (66 vs 37%; p < 0,001). Os pacientes com maiores níveis de AGL tiveram maior trigliceridemia (196±105 vs 153±81 mg/dl; p < 0,01) e atividade de LCAT (1,36±0,10 vs 1,29±0,10 470/390nm; p < 0,01), além de uma maior concentração de triglicerídeos na partícula de HDL (9,4±2,9 vs 7,8±2,0%; p < 0,001), em relação aos pacientes com menores níveis de AGL. A transferência dos quatro lipídios da nanoemulsão para a HDL foi igual na comparação de todos os grupos deste estudo. Conclusão:Os resultados deste estudo mostraram pela primeira vez que junto com os triglicerídeos, o colesterol não esterificado é também um marcador de pobre controle glicêmico em pacientes com DM2 / Introduction:One cause of cardiovascular disease (CVD) of patients with type 2 diabetes mellitus (T2DM) is diabetic dyslipidemia, characterized primarily by hypertriglyceridemia and low HDL-cholesterol. Good blood glucose control usually results in decreased plasma triglycerides, but there is controversy in the literature as to the levels of HDL-cholesterol and other lipid parameters. Lipid transfers to HDL play an important role in the formation and remodeling of HDL and on its antiatherogenic role of reverse cholesterol transport. The transfer of lipids between lipoproteins is bidirectional and depends on the structure and concentration of the donor and acceptor lipoprotein as well as the action of the transfers proteins, PLTP and CETP. Objective:Investigate the relationship of blood glucose levels with lipid transfers to HDL and other parameters of lipid metabolism in patients with T2DM. Methods:143 patients with T2DM, who were not using lipid-lowering drugs, were selected and divided into two groups: group with glycated hemoglobin (HbA1c) <= 6.5% (n=62) and group with HbA1c > 6.5% (n=81). In vitro lipid transfers to HDL was performed by 1 hour incubation under stirring of a donor nanoemulsion containing radioactively labeled unesterified and esterified cholesterol, phospholipids and triglycerides with whole patient plasma, followed by chemical precipitation and counting of radiolabeled lipids transferred to HDL. Other determinations of plasma lipid metabolism were also performed. It was also checked the percentage of patients in both groups with lipid profile within the targets set by the American Diabetes Association criteria. Patients with or without insulin use and with higher and lower free fatty acids (FFA) levels were also compared for the studied parameters. Results:HbA1c>6.5% group had higher triglyceridemia (205 ± 115 vs 140 ± 54 mg/dl, p<0.0001) and unesterified cholesterol (36.4 ± 7.6 vs 33.7 ± 5.7 mg/dl, p<0.05) than the HbA1c<=6.5% group. The concentrations of triglycerides, total and unesterified cholesterol and also non-HDL cholesterol was positively correlated with HbA1c (r=0.25, r=0.19, r=0.18, r=0.17, respectively, p<0,05). The concentration of esterified cholesterol from HDL was negatively correlated with HbA1c (r = -0.19, p<0.05). Patients with HbA1c<=6,5% achieved more the triglyceridemic target than the patients with HbA1c>6.5% (66 vs 37%, p<0.001). Patients with higher levels of FFA had higher triglycerides levels (196 ± 105 vs 153 ± 81 mg/dl, P<0.01) and LCAT activity (1.36 ± 0.10 vs 1.29 ± 0.10 470/390nm, p<0.01), in addition to a higher concentration of triglycerides in the HDL particle (9.4 ± 2.9 vs 7.8 ± 2.0%, p <0.001). The transfer of the four lipid of the nanoemulsion to HDL was equal in the comparison of all the studied groups. Conclusion:The results of this study showed for the first time that unesterified cholesterol, along with triglycerides, is also a marker of poor glycemic control in patients with T2DM

Orientadores: Eliana Cotta de Faria, José Eduardo Tanus dos Santos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T16:38:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zago_VanessaHelenadeSouza_M.pdf: 4029424 bytes, checksum: 82a248a89f7f9c4b4bee67ad6c6f0d07 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O óxido nítrico (NO) é produzido no endotélio vascular pela óxido nítrico sintase endotelial (eNOS), enzima regulada negativamente pela presença do polimorfismo T- 786C, levando à disfunção endotelial. A lipoproteína de alta densidade (HDL) têm funções anti-aterogênicas bem estabelecidas, incluindo mecanismos que aumentam a atividade da eNOS. As estatinas são fármacos que possuem, dentre seus efeitos pleiotrópicos, a melhora na função do endotélio e na composição da HDL. Dada a importância tanto da expressão quanto da atividade da eNOS para a função endotelial, bem como dos efeitos pleiotrópicos das estatinas sobre estas duas variáveis, avaliamos os parâmetros bioquímicos e a composição das sub-frações de HDL (HDL2 e HDL3) após uso de placebo e atorvastatina em uma amostra populacional de 30 indivíduos, divididos em dois grupos: 15 indivíduos portadores do polimorfismo T-786C do gene da eNOS (CC) e 15 não portadores (TT). Duzentos indivíduos foram genotipados, e pareamos conforme idade e IMC 15 indivíduos TT e 15 indivíduos CC, que receberam placebo e/ou atorvastatina na dose de 10mg/dia, por 14 dias. Os parâmetros séricos analisados foram determinados através de métodos bioquímicos enzimáticos, radiométricos, nefelométricos e microultracentrifugação. Mediu-se lípides, lipoproteínas, composição das sub-frações da HDL (HDL2 e HDL3), apolipoproteínas, atividade da proteína de transferência de colesteril éster, metabólitos do NO e proteína C reativa. Após o uso da estatina, como esperado, drásticos efeitos redutores foram observados tanto nos lípides, lipoproteínas, apolipoproteínas e de forma independente do polimorfismo, além da redução de ácidos graxos livres nos portadores do genótipo CC. Nas sub-frações a relação lípides/proteínas foi reduzida tanto em HDL2 quanto em HDL3.O aumento da atividade da CETP nos portadores foi corrigido pela estatina e os níveis de ácidos graxos livres reduziram-se de maneira polimorfismo-dependente, em oposição à redução observada do nitrito, que foi polimorfismo-independente. usPCR e Lp(a) não se modificaram. A atorvastatina pode ter atuado sobre o transporte reverso de colesterol através da redução da atividade da lipase hepática e aumento de atividade da PLTP. Foram observadas interações genótipo/tratamento limítrofes para CETP e Lp(a). Estes resultados sugerem que o tratamento com estatinas pode ser relevante na prevenção primária da aterosclerose em portadores do polimorfismo, independentemente de modificações lipídicas séricas. Portanto estes indivíduos se beneficiariam com o uso de estatinas através da modulação da atividade da CETP e redução da concentração de ácidos graxos livres. / Abstract: Nitric oxide (NO) is produced in the vascular endothelium by endothelial nitric oxide synthase (eNOS), an enzyme negatively regulated by the presence of the T-786C polymorphism, leading to endothelial dysfunction. High-density lipoproteins (HDL) have well-established anti-atherogenic functions, for example mechanisms that enhance eNOS activity. Statins are drugs that have pleiotropic effects, such as the improvement in endothelial function and beneficial composition of HDL. Taking into account both the activity of eNOS on endothelial function, and the validity of the pleiotropic effects of statins, we evaluated the biochemical parameters and the composition of subfractions of HDL (HDL2 and HDL3) after use of placebo and atorvastatin at a dose of 10mg/day for 14 days, in a population sample of 30 individuals divided into two genotype groups of the T-786C polymorphism of the eNOS gene: CC (carriers) or TT (non-carriers). Two hundred individuals were genotyped, and the selected groups paired by age and BMI. The serum parameters analyzed were determined using biochemical enzymatic, radiometric, nephelometric and microultracentrifugation methods. We measured lipids, lipoproteins, the composition of sub-fractions of HDL (HDL2 and HDL3), apolipoproteins, activity of cholesteryl ester transfer protein, NO metabolites and hsCRP. After statin, as expected, drastic effects were observed both in lipids, lipoproteins, apolipoproteins, independently of the polymorphism. In HDL sub-fractions the ratio lipid/protein was smaller in both HDL2 and HDL3. CETP activity and free fatty acids were reduced in a polymorphism-dependent manner, and the reduction of nitrite was polymorphism-independent. hsCRP did not change. Atorvastatin may have acted on the reverse cholesterol transport by reducing the activity of hepatic lipase, increased PLTP activity and reducing CETP. There was a genotype/drug interaction effect on CETP and Lp(a). These results suggest that statin treatment may be relevant for primary prevention of atherosclerosis in patients with the polymorphism, irrespective of serum lipid changes. These individuals would benefit from the use of statins because of reduction of CETP activity and free fatty acids. / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Eliana Cotta de Faria / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-10T15:03:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kinchoku_Harumi_M.pdf: 2499549 bytes, checksum: e5ef36d494fba41f42bf6fe5ac2c96dc (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Os principais determinantes da dieta que elevam as concentraçoes de LDL-C sao as gorduras saturadas, gorduras trans e, em menor grau, o colesterol da dieta. O aumento relativo na proporçao de carboidratos resulta em dislipidemia caracterizada pelo aumento das concentrações plasmáticas de TG e VLDL-C, baixas concentrações de HDL-C, razão C:HDL aumentada e, algumas vezes, a presença de partículas de LDL-C pequenas e densas.O propósito deste estudo foi avaliar o impacto do aconselhamento nutricional exclusivo em portadores de dislipidemias,verificando a resposta entre sexos e entre faixas etárias (<60 anos e = 60 anos) e a influência do tempo no tratamento (3,6 e 12 meses). Participaram do estudo 129 sujeitos, 56 homens e 73 mulheres com idade entre 20 a 73 anos sem uso de medicaçao hipolipemiante por no mínimo 30 dias antes e durante o tratamento, e com pelo menos três meses de seguimento nutricional. Para hipercolesterolemia foi orientada a restrição de gorduras saturadas (<7% do VET) e colesterol (<200 mg/dL) e, para hipertrigliceridemia a restriçao de carboidratos simples, bebidas alcoólicas e, restrição de gorduras totais (<20% do VET) para TG>300 mg/dL. Na presença de sobrepeso ou obesidade foi orientada dieta hipocalórica com redução gradativa das calorias. As concentrações de colesterol (C), LDL-C, e triglicérides (TG) foram significativamente reduzidas na população estudada em 14%, 5%, 30% respectivamente. No primeiro trabalho, em que foi avaliada a influência do tempo de aconselhamento nutricional comparado ao período basal, as respostas significativas às orientações dietéticas com três meses foram: para C (-16%), LDL-C (-0,1%) e não HDL-C (-19%); com seis meses para C (-13%), TG (-30%), LDL-C (-9%), nao HDL-C (-17%), Castelli I (-14%) e Castelli II (-4%) e, com 12 meses para C (-14%), TG (-27%) e Castelli I (-13%). As concentrações plasmáticas de HDL-C e o peso corporal não se modificaram. Entre os sexos (trabalho 2) foi observado uma redução de 16% para C e 36% para TG em homens, e de 12% para C, 12% para LDL-C, e 26% para TG nas mulheres e, entre faixa etária de 15% para C, 2% para LDL-C e 33% para TG nos adultos e 14% para C nos idosos. O aumento na concentração de HDL-C foi significativa em homens em relação às mulheres (+5% e -4 %) com hiperlipidemia mista.Todos os participantes responderam ao aconselhamento nutricional reduzindo as concentrações de C, TG, LDL-C e a nao HDL-C. O tempo de orientação dietética não modificou as respostas em lípides e lipoproteínas plasmáticos; sendo o tempo de três meses suficiente para observar os efeitos benéficos da dieta. Um maior número de parâmetros foi reduzido com seis meses indicando que a partir de sexto mês houve um efeito mais abrangente da dieta. Homens e adultos foram mais responsivos à orientação nutricional. As respostas foram maiores que os coeficientes de variação biológico para cada parâmetro avaliado exceto para LDL-C.Recomenda-se a aplicação desta experiência terapêutica positiva em outros Serviços de Saúde por se tratar de uma terapia de baixo custo podendo também contribuir na prevenção e controle de doença cardiovascular / Abstract: The strongest dietary determinants of elevated LDL cholesterol concentrations are dietary saturated fatty acid and trans fatty acid intakes to a lesser extent, dietary cholesterol and excess body weight The aim of the present study was to evaluate the responses plasma lipid to nutritional counseling on dyslipidemic outpatients and analyze their responses by gender and age and analyzing the influence of time (3, 6 and 12 months) of treatment. One-hundred and twenty nine dyslipidemic subjects i.e. 56 males and 73 females aged 20 - 73 years comprised this study. No medication was used 30 days before and during following the diet as part of the inclusion criteria. Patients with hypercholesterolemia were oriented to follow the NCEP step 2 diet, and those with hypertriglyceridemia were oriented to restrict simple carbohydrates and alcoholic beverage and, in presence of TG >300 mg/dl, to use low fat diet (=20%). After nutritional counseling plasma cholesterol (C) concentrations, LDL-C, and triglycerides (TG) were significantly reduced in the population sample by (14%, 5%, 30%), respectively. The response were significant after 3 months for C (-16%), LDL-C (-0,1%) and NHDL-C (-19%), after 6 months for C (-13%), TG (-30%), LDL-C (-9%), NHDL-C (-17%), Castelli I (-14%) and Castelli II (-4%) and, after 12 months for C (-14%), TG (-27%) and Castelli I (-13%). No change was detected in plasma HDL-cholesterol and body weight, after nutritional counseling. Between sexes plasma concentrations reduced for C and TG by 16%, and 36% in men, and by 12% and 26% and 12% for LDL-C in women, and between age by 15% to C, 2% to LDL-C and 33% to TG in middle age and, 14% for C in elderly people. HDL cholesterol concentration was significantly higher in men than in women with mixed hyperlipidemia (+5% and -4 %). All participants responded to nutritional counseling reducing C, TG, LDL-C, NHDL-C, LDL-C. The nutritional counseling time did not modify the responses of plasma lipids and lipoproteins. After 3 months, beneficial effects of the diet were observed, and the higher number of parameters were reduced after 6 month showing a broader actions of diet. Men and adults patients presented better responses to nutritional counseling. The responses to nutritional counseling were higher than coefficient biology variation for each parameter evaluated except to LDL-C. We recommend this positive experience is recommended to other Health Service because is low cost treatment and also contribute in prevention and control of risk factors for cardiovascular disease / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Orientadores: Andrei Carvalho Sposito, Valéria Nasser Figueiredo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-26T20:27:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_LuizSergioFernandesde_D.pdf: 19288751 bytes, checksum: ea3c4fda36c00d542fbe2d8c4f4242e8 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Introdução: A resposta de fase aguda (RFA) transforma a lipoproteína de alta densidade (HDL) em uma partícula disfuncional que pode favorecer o estresse oxidativo/inflamatório e disfunção da enzima óxido nítrico sintase endotelial (eNOS). Ao mesmo tempo, a modulação do metabolismo da HDL pela proteína de transferência de colesteril ester (CETP) parece estar associada a um potencial efeito anti-inflamatório durante a RFA relacionada a sepse. Embora esses mecanismos possam estar envolvidos na disfunção endotelial que se segue ao infarto do miocárdio com supra de ST (IMCSST), essas hipóteses nunca foram testadas em humanos. Método: Plasma foi obtido de pacientes consecutivos com IMCSST (n=116 a 180) nas primeiras 24 horas após o início dos sintomas (D1) e no 5o dia (D5), sendo utilizado para medir: proteína C reativa (PCR), nitrato/nitrito (NOx) e atividade de CETP. As lipoproteínas foram isoladas por ultracentrifugação de gradiente. A oxidabilidade de LDL co-incubada com HDL (HDLaoxLDL) e auto-oxidabilidade da HDL (HDLautox) foram medidas após a incubação com CuSO4. A atividade anti-inflamatória da HDL foi estimada pela secreção de VCAM-1 por células endoteliais da veia umbilical humana, após a incubação com TNF-?. Dilatação mediada por fluxo (FMD) foi avaliada no 30o dia (D30). Resultados: Entre os pacientes no 1o tercil de HDL-colesterol no D1 (<33mg/dL), o incremento de NOx entre D1 e D5 e a FMD ajustada para várias co-variáveis foram maiores do que naqueles no 2o (33- 42mg/dL) e 3o (>42mg/dL) tercis. Do D1 ao D5 houve redução no tamanho e no número de partículas de HDL, bem como aumento da HDLaoxLDL e HDLautox. A secreção de VCAM-1 após estímulo com TNF-? foi reduzida após co-incubação com HDL de voluntários saudáveis, de doentes com IM no D1 e D30, mas não para a HDL do D5. A oxidação da HDL foi medida pela concentração de TBARS em partículas de HDL isoladas, sendo observado aumento entre D1 e D5, e permanecendo elevado no D30. O aumento no conteúdo de TBARS na HDL foi associado com a atividade de CETP (r=0,72; p=0,014), FMD (r =-0,61; p=0,046) e HDL-C (r=0,83; p=0,004). Em paralelo, elevada atividade de CETP na admissão foi associado a menor FMD, menor biodisponibilidade de NOx e a maior incidência de morte súbita e infarto recorrente após 30 (OR=12,8; p=0,032) e 180 dias (OR=3,3; p=0,044). Conclusão: O IMCSST induz mudanças na composição química e função do HDL, bem como alterações na atividade enzimática da CETP que paralelamente contribuem para o aumento da oxidação de partículas de HDL, que se traduz em disfunção endotelial / Abstract: Introduction: Acute phase response (APR) turns high-density lipoprotein (HDL) into a dysfunctional particle that may favor oxidative/inflammatory stress and endothelial nitric oxide (NO) synthase (eNOS) dysfunction. Moreover, modulation of HDL intravascular metabolism by cholesteryl ester transfer protein (CETP) action has also been implicated as a potentially anti-inflammatory and thrombotic mechanism during APR. Although these mechanisms may be involved into endothelial dysfunction that follows acute ST-elevation myocardial infarction (STEMI), these assumptions have never been in investigated in humans. Method: Plasma was obtained in the first 24-hours after STEMI symptoms onset (D1) and after 5 days (D5) in consecutive patients (n=116 to 180), and then used to measure C-reactive protein (CRP), nitrate/nitrite (NOx) and CETP activity. Lipoproteins were isolated by gradient ultracentrifugation. The oxidizability of low-density lipoprotein incubated with HDL (HDLaoxLDL) and the HDL self-oxidizability (HDLautox) were measured after CuSO4 co-incubation. Anti-inflammatory activity of HDL was estimated by VCAM-1 secretion by human umbilical vein endothelial cells after incubation with TNF-?. Flowmediated dilation (FMD) was assessed at the 30th day (D30) after STEMI. Results: Among patients in the first tertile of admission HDL-Cholesterol (<33mg/dL), the increment of NOx from D1 to D5 and the FMD adjusted for multiple covariates were higher than in those in the second (33-42mg/dL) or third (>42mg/dL) tertiles, respectively. From D1 to D5, there was a decrease in HDL size and particle number and increase in both HDLaoxLDL and HDLautox. VCAM-1 secretion after TNF-a stimulation was reduced after co-incubation with HDL from healthy volunteers, from MI patients at D1 and D30 but not from D5. Oxidized HDL was measured by TBARS in isolated HDL particles and increased from D1 to D5, and remaining elevated at D30. The change in TBARS content in HDL was associated with CETP activity (r=0.72;p=0.014), FMD (r=-0.61;p=0.046) and HDL-C (r=0,83,p=0,004). High CETP activity at admission was associated lower FMD, lower NOx bioavailability and with the incidence of sudden death and recurrent MI at 30 days (OR 12.8;p=0.032) and 180 days (OR 3.3;p=0.044). Conclusion: STEMI induces changes in the chemical composition and function of HDL as well as changes in the enzymatic activity of CETP that in parallel contribute to increased oxidation of HDL particles, and thus inducing endothelial dysfunction / Doutorado / Patologia Clinica / Doutor em Ciências Médicas

Objetivo: comparar o perfil lipídico de em crianças e adolescentes, com e sem inflamação, atendidas num pronto atendimento geral de pediatria de um hospital universitário de nível de atendimento secundário, segundo estado nutricional, sexo e idade. Métodos: Estudo transversal, realizado entre outubro de 2012 e agosto de 2013, avaliou 124 crianças e adolescentes (3 meses a 14 anos de idade) em atendimento na unidade de emergência do Hospital Universitário da Universidade de São Paulo, com queixa relacionada a processo inflamatório/infeccioso. Os pacientes foram separados em dois grupos de acordo com os níveis de proteína C reativa (PCR): grupo I se maior ou igual a 5 mg/L, e grupo II se menor que 5mg/L. Dosagens de colesterol total, lipoproteína de alta densidade (HDL) e baixa densidade (LDL), triglicerídeos e albumina foram comparadas entre os dois grupos, levando em conta o estado nutricional (avaliado através de medidas antropométricas), gênero e idade. Resultado: A mediana de idade foi de 51 meses, com maioria dos pacientes classificados como eutróficos (76,5%). Do total da amostra, 34,7% dos pacientes apresentaram colesterol total e/ou triglicerídeos alterados e 67% apresentaram baixos níveis de HDL. Não houve diferença significativa do perfil lipídico entre os dois grupos de pacientes separados de acordo com PCR. Dentre os pacientes com PCR >= 5mg/L, a PCR apresentou correlação inversa com HDL [r= (-)0,363 e p=0,001], com LDL [r= (-) 0,235 e p=0,034], com albumina [r= (-) 0,308 e p=0,005] e correlação direta com TG (r=0,426 e p > 0,001). Na analise de regressão linear, se evidenciou que para cada aumento de 1mg/L nos valores da PCR espera-se uma redução média de 0,072 mg/dL da HDL, de 0,083 mg/dL da LDL, de 0,002g/dL de albumina, e um aumento médio de 0,564 mg/dL do triglicerídeo. Conclusão: Pacientes com processo inflamatório apresentam alterações nos níveis séricos do HDL, LDL e triglicerídeos que se relacionam com o grau de inflamação, de forma independente do estado nutricional / Aim: To compare the lipid profile in children and adolescents with and without inflammation, met a ready general pediatric service of a university hospital secondary care level, according to nutritional status, gender and age. Methods: Cross-sectional study conducted between October 2012 and August 2013, assessed 124 children and adolescents (3 months to 14 years old) in the emergency department of the University Hospital of the University of São Paulo, with reports of inflammatory/ infectious process. The patients were divided into two groups according to the C reactive protein (CRP) levels: group I is higher than or equal to 5 mg/L, and Group II was lower than 5 mg/L. Total cholesterol, high density lipoprotein (HDL) and low density lipoprotein (LDL), triglycerides and albumin were compared between the two groups, taking into account the nutritional status (assessed by anthropometric measurements), gender and age. Results: The median age was 51 months, with patients mostly classified as well-nourished (76.5%). Of the overall sample, 34.7% of patients had total cholesterol and/or triglycerides altered and 67% had low levels of HDL. There was no significant difference in lipid profile between the two groups of PCR. For the patients with CPR > 5mg/L, CPR presented an inverse correlation with HDL [r = (-) 0.363 and p = 0.001], with LDL [r = (-) 0.235 and p = 0.034], with [r = albumin (-) 0.308 and p = 0.005] and direct correlation with TG (r = 0.426 and p < 0.001). Linear regression analysis it became clear that for each increase of 1 mg/L in the values of CRP expected an average reduction of 0,072 mg/dL of HDL, the 0,083 mg/dL of LDL, the 0,002 g /dL albumin, and an average increase of 0,564 mg/dL of triglycerides. Conclusion: Patients with an inflammatory process exhibit changes in the serum levels of the lipids HDL, LDL and TG that are related to the degree of inflammation. These changes occurred regardless of nutritional status

Objetivo: comparar o perfil lipídico de em crianças e adolescentes, com e sem inflamação, atendidas num pronto atendimento geral de pediatria de um hospital universitário de nível de atendimento secundário, segundo estado nutricional, sexo e idade. Métodos: Estudo transversal, realizado entre outubro de 2012 e agosto de 2013, avaliou 124 crianças e adolescentes (3 meses a 14 anos de idade) em atendimento na unidade de emergência do Hospital Universitário da Universidade de São Paulo, com queixa relacionada a processo inflamatório/infeccioso. Os pacientes foram separados em dois grupos de acordo com os níveis de proteína C reativa (PCR): grupo I se maior ou igual a 5 mg/L, e grupo II se menor que 5mg/L. Dosagens de colesterol total, lipoproteína de alta densidade (HDL) e baixa densidade (LDL), triglicerídeos e albumina foram comparadas entre os dois grupos, levando em conta o estado nutricional (avaliado através de medidas antropométricas), gênero e idade. Resultado: A mediana de idade foi de 51 meses, com maioria dos pacientes classificados como eutróficos (76,5%). Do total da amostra, 34,7% dos pacientes apresentaram colesterol total e/ou triglicerídeos alterados e 67% apresentaram baixos níveis de HDL. Não houve diferença significativa do perfil lipídico entre os dois grupos de pacientes separados de acordo com PCR. Dentre os pacientes com PCR >= 5mg/L, a PCR apresentou correlação inversa com HDL [r= (-)0,363 e p=0,001], com LDL [r= (-) 0,235 e p=0,034], com albumina [r= (-) 0,308 e p=0,005] e correlação direta com TG (r=0,426 e p > 0,001). Na analise de regressão linear, se evidenciou que para cada aumento de 1mg/L nos valores da PCR espera-se uma redução média de 0,072 mg/dL da HDL, de 0,083 mg/dL da LDL, de 0,002g/dL de albumina, e um aumento médio de 0,564 mg/dL do triglicerídeo. Conclusão: Pacientes com processo inflamatório apresentam alterações nos níveis séricos do HDL, LDL e triglicerídeos que se relacionam com o grau de inflamação, de forma independente do estado nutricional / Aim: To compare the lipid profile in children and adolescents with and without inflammation, met a ready general pediatric service of a university hospital secondary care level, according to nutritional status, gender and age. Methods: Cross-sectional study conducted between October 2012 and August 2013, assessed 124 children and adolescents (3 months to 14 years old) in the emergency department of the University Hospital of the University of São Paulo, with reports of inflammatory/ infectious process. The patients were divided into two groups according to the C reactive protein (CRP) levels: group I is higher than or equal to 5 mg/L, and Group II was lower than 5 mg/L. Total cholesterol, high density lipoprotein (HDL) and low density lipoprotein (LDL), triglycerides and albumin were compared between the two groups, taking into account the nutritional status (assessed by anthropometric measurements), gender and age. Results: The median age was 51 months, with patients mostly classified as well-nourished (76.5%). Of the overall sample, 34.7% of patients had total cholesterol and/or triglycerides altered and 67% had low levels of HDL. There was no significant difference in lipid profile between the two groups of PCR. For the patients with CPR > 5mg/L, CPR presented an inverse correlation with HDL [r = (-) 0.363 and p = 0.001], with LDL [r = (-) 0.235 and p = 0.034], with [r = albumin (-) 0.308 and p = 0.005] and direct correlation with TG (r = 0.426 and p < 0.001). Linear regression analysis it became clear that for each increase of 1 mg/L in the values of CRP expected an average reduction of 0,072 mg/dL of HDL, the 0,083 mg/dL of LDL, the 0,002 g /dL albumin, and an average increase of 0,564 mg/dL of triglycerides. Conclusion: Patients with an inflammatory process exhibit changes in the serum levels of the lipids HDL, LDL and TG that are related to the degree of inflammation. These changes occurred regardless of nutritional status