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Uso de transplante de astrócitos na redução da epilepsia experimental

Farias, Kelly Soares 28 February 2018 (has links)
Submitted by Automação e Estatística (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-07-26T17:35:31Z No. of bitstreams: 1 KellySoaresFarias_TESE.pdf: 6619140 bytes, checksum: 0781e67a43aafb62031ffc8c16432ec1 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-07-27T20:19:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 KellySoaresFarias_TESE.pdf: 6619140 bytes, checksum: 0781e67a43aafb62031ffc8c16432ec1 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-27T20:19:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 KellySoaresFarias_TESE.pdf: 6619140 bytes, checksum: 0781e67a43aafb62031ffc8c16432ec1 (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / Os astrócitos, células especializadas da glia, estão envolvidos na homeostase extracelular por tamponar íons de potássio (K+), metabolizar neurotransmissores, controlar o disparo e a sincronização neuronal e contribuir para a formação da barreira hematoencefálica. Em condições patológicas, os astrócitos podem alterar a sua morfologia (hipertrofia dos seus processos celulares) e bioquímica (aumento da expressão da proteína ácida fibrilar glial, GFAP), sendo conhecidos por astrócitos reativos (a.k.a., gliose reativa). Apesar de serem frequentemente observados em regiões cerebrais associadas à geração e propagação de crises epilépticas, a participação dos astrócitos reativos na sincronização anormal é pouco conhecida. Enquanto os astrócitos modificam o metabolismo do potássio e do glutamato, a sua reativação, por períodos prolongados, pode levar à disfunção da atividade neuronal. A epilepsia do lobo temporal (ELT), uma das formas mais comuns de epilepsia e frequentemente associada à refratariedade ao tratamento farmacológico, é caracterizada por morte neuronal em regiões temporais (esclerose do hipocampo), reorganização sináptica (brotamento aberrante de fibras musgosas) e gliose reativa. Nessa tese testamos a hipótese de que o transplante de astrócitos imaturos no hipocampo de animais cronicamente epiléticos reduzirá a atividade epileptiforme, incluindo a ocorrência de crises espontâneas eletrográficas e comportamentais. Para isso, os animais foram feitos epilépticos pela injeção sistêmica da pilocarpina (que induziu o estado epiléptico, SE) e foram transplantados unilateralmente no hilo do giro denteado (GD) com astrócitos que expressavam a proteína fluorescente verde (GFP+) 30 dias após o SE. A alocação dos animais epilépticos nos grupos controle (SE-controle) e experimental (SE-astro GD) foi feita de acordo com a severidade comportamental do SE. Atividades epileptiformes espontâneas (espículas interictais, oscilações de alta frequência e crises recorrentes) foram registradas em ambos os hipocampos (tratado e não tratado) usando eletrodos cronicamente implantados. A sobrevivência dos astrócitos foi de 1 %. Astrócitos GFP+ foram encontrados em diversas sub-regiões hipocampais por até sete meses após o transplante, sendo que algumas células migraram aproximadamente até 1500 µm no polo anteroposterior. Essas células foram localizadas principalmente no hilo, na camada granular do giro dentado e na camada molecular do hipocampo, e em alguns animais, no córtex, tálamo e fímbria. Células ou grupos de tecidos indicativos de tumor não foram identificados. A atividade epileptiforme eletrográfica foi registrada em 80% dos animais controle (SE-controle, N = 8/10), em 80% dos animais experimentais com astrócitos GFP+ localizados no córtex (SE-Astro Córtex, N = 4/5) e em 60% dos animais com astrócitos GFP+ no hipocampo (SE-Astro GD, N=2/5). A frequência de crises espontâneas foi variável entre os animais (21 vs 12 vs 1 crises espontâneas registradas nos grupos SE-control, SEAstro Córtex e SE- Astro GD, respectivamente) e não houve diferença na frequência de crises entre os grupos (crises/hora: 0,05 ± 0,01 vs 0,03 ± 0,003 vs 0,02, para SE-controle e SE-Astro Córtex e SE-Astro GD, respectivamente). O transplante dos astrócitos não alterou a duração das crises (67,5 ± 3,6 s vs 74,2 ± 3,9 s vs 65,3, para SE-controle e SE-Astro Córtex e SE-Astro GD, respectivamente). Além disso, não observamos diferenças quanto à morfologia, periodicidade ou frequência das espículas interictais do hipocampo entre os grupos experimentais e/ou entre os hemisférios tratados. Interessantemente, o transplante de astrócitos reduziu significativamente a severidade das crises comportamentais nos animais que receberam astrócitos no córtex (Escala livre: 5,0 ± 0,6 vs 4,0 ± 0,4, SE-controle e SE-Astro Córtex, respectivamente, p=0,02, teste de MannWhitney). O grupo SE-Astro GD apresentou apenas uma crise epiléptica e, portanto, não candidato a estatística. Nossos resultados enfatizam o uso da terapia celular para o tratamento das epilepsias e reforçam a importância do sítio do transplante para a redução da atividade epileptiforme. / Astrocytes are specialized glial cells involved in the extracellular homeostasis by buffering potassium cation (K+) concentration, metabolizing neurotransmitters, controlling neuronal firing and synchronization and contributing to the blood-brain barrier. Under pathological conditions, astrocytes may change their morphology in order to compensate abnormal function, being referred to as activated astrocytes (reactive gliosis). This phenomenon is commonly observed in brain regions associated with seizure generation and spread, although its role in abnormal synchronization is unknown. While astrocytes can enhance potassium and glutamate-related metabolism, sustained long-term reactivation can lead to neuronal dysfunction. Temporal lobe epilepsy (TLE) is the most common form of epilepsy and is usually associated to refractoriness. TLE is characterized by extensive cell death (hippocampal sclerosis), synaptic reorganization (mossy fiber sprouting) and reactive gliosis. Here, we hypothesize that transplantation of immature astrocytes in chronically epileptic hippocampus would reduce epileptiform activity, including the occurrence of electrographic and behavioral seizures. To test this hypothesis, animals made epileptic by the systemic injection of pilocarpine (which induced status epilepticus, SE) were unilaterally transplanted with green fluorescent protein-positive (GFP) astrocytes into the hippocampus 30 days after the SE. Group assignment (SE-Saline e SE-Astro GD) was made according to SE behavioral severity and spontaneous epileptiform activities (interictal spikes, high-frequency oscillations, seizures) were recorded in both (treated and untreated) hippocampi using chronically implanted multi-electrodes. Astrocytes had migrated approximately 1500µm injection site, and survival rate was 1%. Astrocytes were found in the host hippocampus seven months after transplantation and were mainly localized at the hilus, at the granular layer of the dentate gyrus, at molecular layer of hippocampus. Cells or tissue clusters indicative of tumor were not identified. In a second group, astrocytes were found in the cortex and constituted the SE-Astro Cortex group. No difference was found in epileptiform activity recorded between groups. Epileptiform electrographic activity was recorded in 80% of control animals (SE-Saline, N= 8/10, in 80% of SE-Astro Cortex group (SE-Astro Córtex, N=4/5) and in 60% of animals that received astrocytes into the hippocampus (SE-Astro GD, N=2/5). Spontaneous seizure occurrence was variable between animals (21 vs 12 vs 1 recorded seizures in SE-Saline and SE-Astro Cortex and SE-Astro GD groups, respectively), however, no difference was observed in seizure frequency between groups (seizures/hour: 0.05±0.01 vs 0.03±0.003 vs 0.02, SE-Saline, SE-Astro Cortex and SE-Astro GD, respectively). Astrocytes grafting did not change seizure duration (67.5 ± 3.6 s vs 74.2 ± 3.9 s vs 65.3 s for SE-Saline, SE-Astro Cortex and SE-Astro GD groups, respectively). Also, we did not observe any difference in the morphology, periodicity or frequency of hippocampal interictal spikes between experimental groups and/or treated hemisphere. Additionally, however, the animals of SE-Astro Cortex group showed reduced behavioral seizure severity (scores: 5 ± 0.1 vs 4 ± 0.4; for SE-Saline and SE-Astro Cortex, respectively; p =0.02, Mann-Whitney test). SE-Astro GD group animals showed only one spontaneous seizure, and therefore not a candidate for statistics. Even thought the small sample size, our results present the cell therapy relevance for the treatment of epilepsies and reinforce importance of transplantation site for epileptiform activity reduction.
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Epidemiologia e genética populacional de lobos guarás, Chrysocyon brachyurus, (ILLIGER 1815) (CARNIVORA, CANIDAE) no nordeste do estado de São Paulo

Mattos, Paulo Sergio Ribeiro de 02 June 2003 (has links)
Made available in DSpace on 2016-06-02T19:29:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TesePSRM.pdf: 2134848 bytes, checksum: f2e72b242b86b33b1b87eef088f5bfc2 (MD5) Previous issue date: 2003-06-02 / Universidade Federal de Minas Gerais / This study was accomplished in the northeastern area of the state of São Paulo, obtaining biological material of maned wolves for the epidemiology (parasitic diseases) and populacional genetic study. The occurrences of deaths were also verified and the relationships between the farmers and wolves were appraised. In the studies of parasitic diseases, infestations by ancilostomídeos, tricurídeos, estrongilídeos, ascarídeos, Dypilidium sp., coccídeos, Dioctophyme renale, ticks and fleas were detected. The inedited parasitosis occurrences by Hymenolepis sp and Prosthenorchis sp were verified. in the parasitoses, it was possible to detect hematological alterations of animals infected by ancilostomídeos, Hymenolepis sp., coccídeos and ticks. The populational genetic studies were accomplished with proteic markers, to evaluate the heterozygosity and the existence of populational structuring in the area. The polymorphysm degree (20%) verified in this study does not differ from the values that were verified by other authors in maned wolves and others wild canids populational studies. F statistics indicated that there were not significant reduction of the heterozygosity in the sample. This test also indicated that there was not a populacional structuring in the area, indicating that the Moji Guaçu and Pardo rivers were not characterized as a gene flow block to the species. In this area, three translocations to the interior of the Ecological Station of Jataí were verified. Also verified four death by road kill accident in the highways, one death by firegun and an occurrence of an sub-adult animal with strong dehydration and caquexis. The main problems associated with the conservation of the species, identified by the inhabitants relates of the area were the domestic avian predation, the access to the garbage and supertitions. The preservative actions discussed in the present work include the establishment of the parasitic monitoring program in wolves, promotion of critic attitudes in relation to the translocations, traffic signs in highways and implementation of environmental education programs involving adults and childrens resident in the area. / Este estudo foi realizado na região nordeste do estado de São Paulo, com a obtenção de material biológico de lobos guarás para o estudo de epidemiologia (doenças parasitárias) e genética populacional. Foram levantadas também as ocorrências de mortes e avaliadas as relações entre os moradores da área rural e a espécie. Nos estudos de doenças parasitárias, foram detectadas infestações por ancilostomídeos, tricurídeos, estrongilídeos, ascarídeos, Dypilidium sp., coccídeos, Dioctophyme renale, carrapatos e pulgas. Foram constatadas também ocorrências inéditas de parasitoses por Hymenolepis sp e Prosthenorchis sp. Entre as parasitoses, foi possível detectar alterações do quadro hemático de animais parasitados por ancilostomídeos, Hymenolepis sp., coccídeos e carrapatos. Os estudos de genética populacional foram realizados com marcadores protéicos, com o objetivo de avaliar a heterozigosidade e a existência de estruturação populacional na região. O grau de polimorfismo encontrado (20%) não difere muito dos valores encontrados por outros autores em estudos populacionais de lobos guarás e outros canídeos silvestres. A estatística F indicou que não há uma redução significativa da heterozigosidade na amostra. Este teste indicou também que não há uma estruturação populacional na região, indicando que os rios Moji Guaçu e Pardo não se caracterizaram como bloqueadores do fluxo gênico para a espécie. Nesta região foram constatados 3 translocamentos para o interior da Estação Ecológica de Jataí, 4 atropelamentos em estradas, uma morte por arma de fogo e uma ocorrência de uma animal sub-adulto em avançado estado de desidratação e caquexia. Os principais problemas relacionados com a conservação da espécie, relatados pelos moradores da região, foram a predação de aves domésticas, o acesso ao lixo e crendices populares. Entre as ações conservativas discutidas no presente trabalho está a implantação de medidas de monitoramento da carga parasitária na espécie, a promoção de atitudes mais criteriosas em relação aos translocamentos, a sinalização das estradas e a implementação de programas de educação ambiental, envolvendo adultos e crianças residentes na região.
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Telemetria convencional e via satélite na determinação da área de vida de três espécies de carnívoros da região nordeste do Estado de São Paulo.

Mantovani, José Eduardo 01 June 2001 (has links)
Made available in DSpace on 2016-06-02T19:30:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseJEM.pdf: 5339758 bytes, checksum: f1e40b6505d282bd0e0eab7cf2e5b07f (MD5) Previous issue date: 2001-06-01 / Universidade Federal de Sao Carlos / The main objectives of this work were to determine diet, and home range of three mammal carnivore species, which are endangered of extinction in São Paulo State: the maned wolf ((Chrysocyon brachyurus, Illiger 1815), cougar (Puma concolor, Linnaeus 1771), and ocelot (Felis pardalis, Linnaeus 1758); and to draw strategies for landscape planning in order to improve the conditions for the conservation of that species in the surroundings of Jataí Ecological Station. From October 1998 to January 2001 (29 months) 10 maned wolves, 4 cougar and 1 ocelot were tagged, and 6 maned wolves, 2 cougar and 1 ocelot out of them were collared with radio-collar and their home range were determined. Vegetation cover and land uses were obtained from TM/Landsat 5 image classification. Animal locations were compared to vegetation cover and land use maps in order to determine hábitat preferences for such three species in that region. Faeces collected along that period were analyzed in order to determine the diet of maned wolf and cougar in 4 different sub-areas. Prey abundance was determined through sightings along with field work. The impact of roads was determined as animal road killing rates in 4 roads types: high way, paved road, dirt road and roads at Jataí . For maned wolves estimated home ranges varied between 31 and 132 km2, with preferences for open wet vegetation, and mainly consumed lobeira , small rodents and small passerines. Cougar showed home ranges varying between 51 and 140 km2, and preferences for forest native vegetation, and preyed principally on armadillos, capybara and deer. Ocelot showed home ranges between 18 and 23 km2, and preference for cerrado vegetation. Jataí sub-area showed greater abundance of prey than the surrounding sub-areas, and the paved road showed, on average, the greatest rates of animal road killing. landscape changing, regarding land use in the surrounding Jataí and road adaptation in order to reduce animal road killing are suggested, in the perspective to improve the conditions of survivorship for such carnivores at that region. / Este trabalho teve como objetivos principais determinar as áreas de vida de lobos-guarás (Chrysocyon brachyurus, Illiger 1815), onças-pardas (Puma concolor, Linnaeus 1771) e jaguatiricas (Felis pardalis, Linnaeus 1758) em uma região do Nordeste do Estado de São Paulo, centralizada na Estação Ecológica de Jataí, bem como determinar estratégias para planejamento da paisagem na perspectiva de proporcionar condições para a conservação destas duas espécies. No período de outubro de 1998 a janeiro de 2001 (29 meses) foram marcados 10 lobos-guarás, 4 onças-pardas e 1 jaguatirica. Destes, 6 lobos, 2 onças-pardas e 1 jaguatirica foram monitorados mediante rádio telemetria, determinando suas localizações e áreas de vida. A abundância de presas e o impacto das estradas também foram determinados neste período. A cobertura vegetal e o uso do solo foram extraídos pelo processamento de Imagens TM/Landsat 5. As localizações dos animais foram comparadas com os mapas de uso do solo e cobertura vegetal, determinando-se desta forma os hábitats preferenciais destas espécies na região. As fezes coletadas durante este período foram analisadas para determinação das dietas de lobo-guará e onça-parda em 4 sub-áreas. A abundância de presas foi estimada com base nos avistamentos de animais durante os trabalhos de campo, e o impacto das estradas foi estimado pela taxa de atropelamento em 4 tipos de estradas. Para os lobos-guarás foram estimadas áreas de vida entre 31 e 132 km2, com preferência por vegetação nativa próxima de corpos d água, e consumiram lobeira, roedores e aves de pequeno porte principalmente. Para as onçaspardas foram estimadas áreas de vida entre 51 e 140 km2, com preferência por vegetação arbórea nativa, e consumo de tatus, capivaras e veados principalmente. Para a jaguatirica foi estimada a área de vida entre 18 e 23 km2, com preferência pela vegetação de cerrado. A sub-área Jataí apresentou maior abundância de presas do que as sub-áreas do entorno, e as estradas pavimentadas apresentaram as maiores taxas de atropelamento de animais da região. Mudanças no uso do solo na paisagem do entorno do Jataí e adaptações nas estradas são sugeridas, na perspectiva de melhorar as condições de sobrevivência destes carnívoros nesta região.
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Hábitos alimentares e conservação do lobo-guará (Chrysocyon brachyurus) (Illiger, 1815) em um remanescente de Cerrado em Pirassununga – SP

Müller, Samara Thays Moreira 21 March 2016 (has links)
Submitted by Alison Vanceto (alison-vanceto@hotmail.com) on 2017-05-15T12:45:34Z No. of bitstreams: 1 DissSTMM.pdf: 1080724 bytes, checksum: 68de3b353941c06406669885110a7681 (MD5) / Approved for entry into archive by Ronildo Prado (ronisp@ufscar.br) on 2017-05-18T20:23:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissSTMM.pdf: 1080724 bytes, checksum: 68de3b353941c06406669885110a7681 (MD5) / Approved for entry into archive by Ronildo Prado (ronisp@ufscar.br) on 2017-05-18T20:23:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissSTMM.pdf: 1080724 bytes, checksum: 68de3b353941c06406669885110a7681 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-23T12:30:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissSTMM.pdf: 1080724 bytes, checksum: 68de3b353941c06406669885110a7681 (MD5) Previous issue date: 2016-03-21 / Não recebi financiamento / The Brazilian Cerrado, the second largest biome in the country, holds a high diversity of species. An important remnant is located at the Air Force Academy (AFA). Previous to this project, no biological studies had ever been carried out on AFA grounds and collecting extensive data in this area will be crucial for its conservation. An important step is to gather knowledge about species of conservation interest such as the maned wolf (Chrysocyon brachyurus), which is considered both a key-species and a flagship species for the Cerrado. It is estimated that over 90% of the maned wolf’s world population lives in Brazil, where the species is considered threatened and classified as “vulnerable”. Therefore, the protection of this species must be a priority in conservation projects in the country. It is also necessary that conservation efforts include a new way of looking at environmental challenges, in which humans are considered an integral part of the environment. The involvement of local communities can be decisive in the success or failure of conservation programs. In order to contribute to the conservation of the Cerrado, this project sought to verify the occurrence of the maned wolf in the Cerrado fragments at AFA and study the feeding habits of this species through the analysis of fecal samples. In addition, we tried to understand the perceptions of the workers at AFA regarding the Cerrado fragments and their associated wildlife, as well as the relationships between these people and the natural areas. The diet of the maned wolf was studied through the analysis of 61 fecal samples collected from October 2014 to September 2015. By frequency of occurrence, the queen palm coconut, arthropods and the wolf’s fruit were the most consumed items. Queen palm coconut, armadillos and lizards provided most of the consumed biomass. The niche breadth calculated through the standardized Levins’ index was 0,29 and chi-square and G tests showed there is seasonality in the diet. Our findings support the view that maned wolves are omnivorous. The items consumed were similar to the ones found in studies in more pristine areas, but there was a variation regarding the relative importance of food categories. The queen palm coconut and Arthropods were more frequent than in other studies, while birds, rodents and reptiles were found in smaller numbers. We investigated the perception of the personnel from AFA towards the Cerrado through the analysis of 40 semi structured interviews. The results indicate that most people do not have any knowledge regarding the fragments. This lack of knowledge is directly related to the attitudes that people have towards the Cerrado: most participants reported that they don’t feel any kind of connection with the biome. Finally, using the principles of critical environmental education as reference, we suggest a series of activities that can be employed to transform the relationship of these people with the environment. We emphasize that more studies should be done in this area, to which there is little information. / O Cerrado, segundo maior bioma brasileiro, possui uma grande diversidade de espécies. Um importante remanescente está localizado na Academia da Força Aérea (AFA). Antes deste projeto, nenhum estudo de biodiversidade havia sido feito no espaço da AFA e fazer um levantamento de dados extensivo desta área será crucial para a sua conservação. Um passo importante é coletar dados específicos de espécies que sejam de interesse para a conservação, como o loboguará (Chrysocyon brachyurus), animal considerado espécie-chave e espéciebandeira para o Cerrado. Estima-se que mais de 90% da população mundial de lobos-guarás viva em território brasileiro, onde a espécie é considerada ameaçada de extinção e classificada como “vulnerável”. Portanto, a proteção desta espécie deve ser uma prioridade nos projetos de conservação do país. É necessário também que os esforços de conservação incluam uma nova maneira de olhar para a problemática ambiental, na qual os humanos sejam considerados parte integral do meio ambiente. A participação de comunidades locais pode ser decisiva no sucesso ou fracasso dos programas de conservação. Com o propósito de contribuir para a conservação do Cerrado, este projeto buscou verificar a ocorrência do lobo-guará nos fragmentos de Cerrado da AFA e estudar os hábitos alimentares desta espécie através da análise de amostras fecais. Além disso, procuramos compreender as percepções dos funcionários da AFA em relação aos fragmentos de Cerrado da área e à fauna a eles associada, além das relações estabelecidas entre essas pessoas e as áreas naturais. A dieta do lobo-guará foi estudada através da análise de 61 amostras fecais coletadas entre outubro de 2014 e setembro de 2015. Por frequência de ocorrência o jerivá, os artrópodes e a fruta do lobo foram os itens mais consumidos. Jerivá, tatus e lagartos compuseram a maioria da biomassa consumida. A amplitude de nicho calculada através do índice padronizado de Levins foi 0,29, o que indica uma certa especialização. Os testes qui-quadrado e G demonstram que há sazonalidade na dieta. Nossos resultados corroboram com a ideia de que os lobos-guará são onívoros. Os itens consumidos na AFA foram semelhantes aos encontrados em estudos em áreas mais conservadas, mas houve uma variação em relação à importância relativa das categorias de alimentos. Jerivá e artrópodes foram detectados com mais frequência do que em outros estudos, enquanto aves, roedores e répteis foram encontrados em menor número. Investigamos as percepções dos funcionários da AFA através da análise de 40 entrevistas semi-estruturadas. Os resultados indicam que a maioria deles não tem nenhum tipo de conhecimento sobre os fragmentos de vegetação nativa. Esta falta de conhecimento está diretamente conectada às atitudes das pessoas: a maioria dos participantes relatou não sentir nenhum vínculo com este bioma. Por fim, usando como base os princípios da educação ambiental crítica, sugerimos uma série de atividades que podem transformar a relação destas pessoas com o ambiente. Ressalta-se que mais estudos devem ser feitos nessa área, para a qual há pouca informação.
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Avaliação morfofuncional do testículo e do processo espermatogênico do lobo guará (Chrysocyon brachyurus, Illiger, 1811) adulto / Morfofuncional evaluation of the testis and the spermatogenic process in adult maned wolf (Chrysocyon brachyurus, Illiger, 1811)

Bittencourt, Viviane Lewicki 14 April 2003 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 904533 bytes, checksum: 510e40809cf84c3ec07a41810444c906 (MD5) Previous issue date: 2003-04-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The study of spermatogenic process is extremely important, subsiding with basic information the development and sedimentation of technologies in attended reproduction. Although the maned wolf is the biggest dog of Americas, much little are know regarding its testicular morfofisiology, including spermatogenesis. In this study it was stimated that in the maned wolf about 12,0 primary spermatocites are produced from spermatogonia of the type A. To the meiotic yield was around 1,9 cells, what is equivalent to a loss of 53% in the meiotic process; the general yield of spermatogenesis was 22,6 cells. Each Sertoli cell is capable to support about 7,6 rounded spermatids. The total duration of seminiferous epithelium cycle was about 8,99 days; 4,5 cycles are necessary to the spermatogenesis process so 40,45 days were necessary from spermatogonia of the type A till spermatozoa. The maned wolf, with approximately twenty nine million spermatozoa per gram of testicle per day, is classified in the highest spermatogenic efficiency species. / O estudo do processo espermatogênico torna-se extremamente relevante, subsidiando informações básicas para o desenvolvimento de tecnologias em reprodução assistida. O lobo-guará (Chrysocyon brachyurus) é o maior canídeo das Américas, mas está entre as espécies ameaçadas de extinção segundo o IBAMA. Pouco se sabe a respeito de sua morfofisiologia testicular, incluindo a sua espermatogênese. Foram estudados no presente experimento quatro lobos-guarás adultos provenientes de cativeiro. Estimou-se que cerca de 0,04% da massa corporal é alocada em testículo, o índice gonadossomático e, cerca de 0,03% da massa corporal alocada em túbulos seminíferos, o índice tubulossomático. O rendimento meiótico foi em torno de 1,9 células, o que equivale a uma perda de 53% do processo meiótico e o rendimento geral da espermatogênese foi de 22,6 células. Cada célula de Sertoli é capaz de sustentar cerca de 7,6 espermátides arredondadas. A duração total do ciclo do epitélio seminífero desta espécie foi calculada em 8,99 dias e, como aproximadamente 4,5 ciclos são necessários para o processo espermatogênico, então 40,45 dias são consumidos na produção de espermatozóides, a partir de uma espermatogônia do tipo A . O lobo-guará produz aproximadamente vinte e nove milhões de espermatozóides por grama de testículo por dia, sendo classificado entre as espécies de alta eficiência espermatogênica.
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"D'este viver aqui neste papel descripto": memória, trauma e infância em António Lobo Antunes (2008-2012)

Collares, Paula Renata Lucas January 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2015-06-24T02:06:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000470936-Texto+Completo-0.pdf: 1544296 bytes, checksum: c74cd923896d59b43baa01e9e7a7d407 (MD5) Previous issue date: 2015 / This thesis studies the space of childhood in the narrative of the Portuguese writer António Lobo Antunes. The object of analysis are the follow in novels: O arquipélago da insónia (2008), Que cavalos são aqueles que fazem sombra no mar? (2009), Sôbolos rios que vão (2010), Comissão das lágrimas (2011) and Não é meia noite quem quer (2012). The study shows how the childhood theme is fictionally revisited through the memory of a usually traumatic past. Thus, it starts a reflection turning to the other novels of the author, which comprise a period of 33 years (from 1979 to 2012). To sustain the hypothesis that memory is a constitutive element in the narratives of António Lobo Antunes, the study examines how the characters rearticulate the past through childhood memory and, several times, before the supremacy of death. It analyzes the reconstruction (and narrative) of previous moments adopting the contributions of Paul Ricoeur, Sigmund Freud, Márcio Seligmann-Silva and Walter Benjamin. / Esta tese dedica-se ao estudo do espaço da infância na narrativa do escritor português António Lobo Antunes, tomando como objeto de análise os seguintes romances: O arquipélago da insónia (2008), Que cavalos são aqueles que fazem sombra no mar? (2009), Sôbolos rios que vão (2010), Comissão das lágrimas (2011) e Não é meia noite quem quer (2012). Tenciona-se mostrar como a temática da infância é revisitada ficcionalmente a partir da memória de um passado quase sempre traumático. Desta maneira, inicia uma reflexão recorrendo aos demais romances do autor que compreendem um período de 33 anos (de 1979 a 2012). Para fundamentar a hipótese de que a memória é um elemento constitutivo nas narrativas antunianas, busca-se perceber como as personagens rearticulam o passado através da memória da infância e, muitas vezes, diante da eminência da morte. Procura-se analisar a reconstrução (e narração) de momentos precedentes partindo das contribuições de Paul Ricoeur, Sigmund Freud, Márcio Seligmann-Silva e Walter Benjamin.
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Imagem de tensor de difusão na epilesia de lobo temporal mesial

Sanches, Patrícia January 2016 (has links)
Orientador: Luiz Betting / Resumo: Objetivo: Epilepsia de lobo temporal mesial (ELTM) é a epilepsia refratária mais comum do adulto. A esclerose hipocampal (EH) é a alteração estrutural mais frequentemente relacionada a esta doença. Técnicas quantitativas de análise de difusão permitem a análise mesoscópica in vivo da fisiopatologia das epilepsias. O objetivo deste estudo foi analisar a variação dos principais parâmetros de difusão e explorar as diferenças entre duas metodologias de análise voxel à voxel de imagens comparando um grupo de pacientes com ELTM com controles. Métodos: Foram selecionados pacientes com diagnóstico de ELTM. Os pacientes e um grupo controle foram submetidos a ressonância magnética de 3 Tesla. Os parâmetros de difusão foram obtidos das imagens. Com base nos tensores, um template customizado foi criado e as imagens registradas em um espaço padrão. Três formas de comparação de cada parâmetro foram realizadas: morfometria baseada em voxel (VBM), estatística espacial baseada em tratos (TBSS) e analise especifica de tratos. Resultados: Foram investigados 24 pacientes com ELTM e 36 controles. 10 apresentaram EH à esquerda, 11 à direita e três bilateral com predomínio à esquerda. Nos pacientes, o VBM mostrou as maiores alterações localizadas no giro parahipocampal direito (aumento de difusão axial, radial e média; volumes de 290, 758 e 595 mm3; p = 0,001, < 0,0001 e < 0,0001 respectivamente) e no lobo temporal esquerdo (redução de anisotropia fracionada; 719 mm3; p < 0,0001). Nos pacientes, o ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objectives: Mesial temporal lobe epilepsy (MTLE) is the most common refractory epilepsy of adults. Hippocampal sclerosis (HS) is the most frequent structural abnormality associated with this disease. Quantitative techniques of diffusion analysis allow an in vivo mesoscopic analysis the epilepsy physiopathology. The objective of this investigation was to analyze the variation of the main diffusion parameters and explore differences between two methodologies of voxel-wise neuroimaging analysis, comparing a group of patients with MTLE to controls. Methods: Patients with MTLE and controls were selected. All patients and controls were underwent 3 Tesla magnetic resonance imaging. Diffusion parameters were obtained from the raw images. Based on the tensors, a customized template was created and images were transformed into standard space. Three comparisons for each parameter were performed: voxel-based morphometry (VBM), tract based spatial statistics (TBSS) and specific tract analysis. Results: 24 patients with MTLE and 36 controls were investigated. 10 patients presented with left HS, 11 with right and 3 bilateral with left predominance. VBM showed major abnormalities localized in the right parahippocampal gyrus (increased axial, radial and mean diffusivity; volumes 290, 758 and 595 mm3; p = 0.001, < 0.0001 and < 0.0001, respectively) and in the left temporal lobe (decreased fractional anisotropy; 719 mm3; p < 0.0001). TBSS showed major abnormalities in the left superior temporal... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Din?mica do status epilepticus em dois modelos animais de epilepsia do lobo temporal

Bessa, Rafael dos Santos de 30 August 2016 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-10-04T23:54:47Z No. of bitstreams: 1 RafaelDosSantosDeBessa_DISSERT.pdf: 5392283 bytes, checksum: e272b2b1fcdcb6eb2e291aaaead851c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-10-16T20:46:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RafaelDosSantosDeBessa_DISSERT.pdf: 5392283 bytes, checksum: e272b2b1fcdcb6eb2e291aaaead851c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-16T20:46:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RafaelDosSantosDeBessa_DISSERT.pdf: 5392283 bytes, checksum: e272b2b1fcdcb6eb2e291aaaead851c7 (MD5) Previous issue date: 2016-08-30 / A epilepsia do lobo temporal (ELT) ? a forma mais frequente de epilepsia em adultos, caracterizada clinicamente por um quadro progressivo de crises epil?pticas com foco no lobo temporal, em particular no hipocampo. Dentre os modelos animais, os mais utilizados na investiga??o dos mecanismos fisiopatol?gicos desta condi??o geram crises recorrentes espont?neas atrav?s da indu??o inicial de um estado convulsivo sustentado (status epilepticus, SE) ? por administra??o do agonista glutamat?rgico ionotr?pico, ?cido ca?nico (AC) ou do agonista colin?rgico muscar?nico, pilocarpina (PILO). Entretanto, o uso de inje??es sist?micas e a falta de controle preciso sobre a dura??odo SE geram alta mortalidade, morte celular dispersa e grande variabilidade comportamental durante a fase cr?nica da epilepsia, o que difere em v?rios aspectos do quadro humano. A nosso ver, este padr?o decorre da a??o sist?mica da droga e da dificuldade de controlar a atividade eletrogr?fica/tempo de SE a que cada animal ? submetido, influenciando a din?mica da epileptog?nese. Portanto, este projeto teve como objetivo gerar modelos de ELT por infus?o intra-hipocampal de AC e PILO em ratos e analisar seus comportamentos e atividade eletrofisiol?gica durante o SE. Vale ressaltar que ainda n?o h? estudos eletrofisiol?gicos aprofundados sobre o modelo de PILO intra-hipocampal. Para isto, implantamos feixes de microeletrodos bilateralmente no hipocampo e unilateralmente no c?rtex pr?-frontal medial (CPFm), junto a uma c?nula no hipocampo ventral para infus?o de AC ou PILO. Ap?s a indu??o do SE analisamos a progress?o comportamental e eletrofisiol?gica dos animais. O SE foi bloqueado ap?s 2h por um coquetel anti-convulsivante mais potente do que o utilizado na maioria dos estudos atuais e os animais foram acompanhados por registros cont?nuos de v?deo-EEG sincronizado por at? 72h. Sete dias ap?s o SE, os animais foram sacrificados e seus c?rebros retirados para verifica??o histol?gica da posi??o da c?nula e eletrodos. Os registros de v?deo e de EEG foram analisados por inspe??o visual e t?cnicas de an?lise de s?ries temporais. Nossos resultados mostraram que os animais PILO apresentam 1a crise comportamental com menor lat?ncia do que os animais tratados com AC, por?m com severidade mais vari?vel (AC: 90% animais classe 1 vs. PILO: 50% animais ?classe 3, escala de Racine). Animais PILO tamb?m tiveram menor n?mero de comportamentos do tipo wet-dog shakes que os animais AC, associado a um in?cio de SE precoce comparado aos animais AC. Do ponto de vista eletrofisiol?gico, observamos oscila??es de alta frequ?ncia (>150 Hz), comumente observadas na fase cr?nica da epilepsia, logo ap?s a inje??o de ambos convulsivantes (15-40 min antes do in?cio do SE) concomitante ?s primeiras crises eletrogr?ficas. Por fim, identificamos que o SE em ambos modelos exibe uma organiza??o modular da atividade parox?stica com v?rios n?veis de ritmicidade sobrepostos. Nossos resultados indicam uma maior epileptogenicidade da PILO em rela??o ao AC e, que estas drogas produzem SE com din?micas distintas. Pudemos observar uma composi??o com m?dulos de oscila??es sobrepostas repetidos periodicamente, m?dulos de hipersincronia sem oscila??es acopladas e segmentos de atividade ass?ncrona. Nossos dados ressaltam a import?ncia do registro eletrogr?fico durante o SE para melhor controlar as respostas individuais durante este per?odo. / Temporal lobe epilepsy (TLE) is the most common form of epilepsy in adults. It is characterized by a progressive occurrence of epileptic seizures originating in the temporal lobe, particularly in the hippocampal formation (mesial TLE). Among the animal models used to investigate the physiopathological mechanisms of TLE, the most used are those that lead to spontaneous seizures after an initial insult, such as a prolonged convulsive state (status epilepticus, SE). This condition can be induced by the administration of the glutamatergic agonist, kainic acid (KA) or the cholinergic agonist, pilocarpine (PILO). However, the use of systemic injections and the lack of electrophysiological monitoring during SE lead to high mortality rates, widespread cell death and high behavioral variability during the chronic phase of epilepsy, which differs in several aspects from the human condition. These effects are mainly due to the lack of electrographic control of SE duration and the dynamics of the epileptogenesis process during the weeks following SE. Therefore, this project aimed to generate two animal models of TLE by intra-hippocampal injections of KA or PILO, and then, to analyze their behavioral and electrographic progression during SE. It is important to notice that no electrophysiological study has investigated the SE dynamics in animals infused with PILO into hippocampus so far. For that, we implanted two bundles of microelectrodes in the hippocampus bilaterally, one bundle in the medial prefrontal cortex and a cannula above the intermediate hippocampus for KA or PILO infusion. Following SE induction, we analyzed the behavioral and electrophysiological evolution of KA and PILO animals. SE was blocked after 2h by the injection of an anti-convulsant cocktail and the animals were continuously monitored by video-EEG for up to 72h. Seven days after SE, animals underwent euthanasia and had the brains removed for histological localization of cannula and electrodes. Video and EEG recordings were analyzed by visual inspection and spectral decomposition. Our results showed that PILO animals had shorter latency for first behavioral seizure than KA rats after drug injection. However, seizure severity showed higher variability among PILO rats (PILO: 50% animals had class 3 or higher vs. KA: 90% animals had class 1; Racine?s scale). PILO animals had a reduced number of wet-dog shake behaviors and shorter latency to SE onset as compared to KA rats. Electrophysiologically, we observed that high frequency oscillations (>150 Hz) occurred short after the injection of both drugs (15-40min before SE onset), as opposed to what is commonly reported to occur during the chronic phase of epilepsy in rodents. They were usually found within the first electrographic seizures. Finally, we have identified a distinct modular organization of paroxystic activity during the SE in each group, which consisted of blocks of nested rhythms. These findings thus suggest that PILO is more epileptogenic that KA and that these drugs produce distinct SE dynamics, which seem to be organized as periodically repeating modules of nested oscillations, modules of hyper synchrony with no nested oscillations and segments of asynchronous activity. Our data emphasizes the importance to conduct electrophysiological recordings during SE induction in order to better control individual brain responses. This can reduce variability during epileptogenesis and produce a more homogeneous model of chronic epilepsy.
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Tempo de recorrência e diferenças entre crises epiléticas precoces ou tardias após cirurgia para epilepsia do lobo temporal

Goellner, Eduardo January 2013 (has links)
Introdução: A recorrência de crises epiléticas pós cirurgia para tratamento da epilepsia do lobo temporal tem sido classificada como precoce ou tardia dependendo do tempo da primeira crise depois do procedimento. Contudo, este tempo de recorrência é variado, sendo arbitrariamente definido nos artigos científicos. Objetivos: Nós desenvolvemos um modelo matemático que pode identificar pacientes com chance de recorrência de crises pós-operatórias precoces ou tardias. Após, analisamos os dois grupos para identificar as diferenças clínicas, eletrofisiológicas e de neuroimagem entre estes pacientes. Métodos: Uma coorte histórica com 247 pacientes tratados com cirurgia para epilepsia do lobo temporal foi estudada. Dentre os paciente onde as crises epiléticas retornaram, utilizamos o tempo de recorrência em uma curva ROC para avaliar com maior acurácia o melhor período para predizer o prognóstico cirúrgico a longo prazo. Com isto, dividimos os pacientes em dois grupos: os de recorrência precoce e os de recorrência tardia. Após, nós analisamos as diferenças clínicas e radiológicas entre estes pacientes. Resultados: As crises epiléticas retornaram em 107 (48.9%) pacientes. A curva ROC mostrou que 6 meses era o tempo onde o prognóstico a longo prazo poderia ser determinado com maior acurácia (AUC = 0.761; sensibilidade = 78.8%; especificidade = 72.1%). Nós observamos que nos pacientes onde a recorrência ocorreu nos primeiros 6 meses após a cirurgia, a epilepsia começou mais precocemente (OR: 6.034; CI95%: 1.056–11.013; p=0.018), estes pacientes possuíam um pior prognóstico (6.849;2.538–18.518;p=0.001), necessitaram de maior número de medicação anti-epilética após o procedimento (2.07;1.162–9.345;p=0.013) e mais freqüentemente foram submetidos a uma nova cirurgia para controle de crises (9.592;1.181–77.877;p=0.021). Nos pacientes com recorrência tardia, as crises epiléticas eram mais comumente associadas a fatores desencadeantes (9.615;3.521–26.315;p<001). Conclusão: Pacientes com recorrências de crises epiléticas precoces ou tardias possuem diferentes características que podem estar relacionadas a diferenças entre os tipos de zonas epileptogênicas, eficácia dos procedimentos cirúrgicos ou mesmo à própria epileptogenicidade. A existência de tais disparidades podem ajudar a explicar os diferentes padrões de recorrência de crises pós cirurgia para epilepsia, auxiliando no planejamento do tratamento destes pacientes a longo prazo. / Background: Recurrence of seizures after surgery for epilepsy has been generally classified as either early or late depending on the time between surgery and seizure recurrence. However, the time of seizure recurrence is variable and it has been arbitrarily defined in the literatures. Objective: Here we establish a statistical-based model for discriminating patients with early or late seizure recurrence and examine the clinical, electrophysiological, and neuroimaging differences between these two groups of patients. Methods: A historical cohort of 247 patients treated surgically for temporal lobe epilepsy was identified. In those patients who recurred, the post-operative time until seizure recurrence was examined using an ROC curve to discriminate with greater accuracy the best period for predicting the long-term prognosis of patients. This approach divided patients in two groups, those with early and those with late seizure recurrence. Following this division, we compared differences between these groups in terms of a number of clinical and radiological variables. Results: Seizures recurred in 107 (48.9%) patients. The ROC curve showed that 6 months was the time when long-term surgical outcome could be determined with best accuracy, (AUC = 0.761; sensitivity = 78.8%; specificity = 72.1%). We observed that patients with seizure recurrence during first 6 months after surgery started seizing at younger age (OR: 6.034; CI95%: 1.056–11.013; p=0.018), had a worse outcome (6.849;2.538–18.518;p=0.001), needed a higher number of antiepileptic medications after surgery (2.07;1.162–9.345;p=0.013) and were more frequently submitted to reoperations (9.592;1.181–77.877;p=0.021). Patients with late relapse more frequently had seizures associated with trigger events (9.615;3.521–26.315;p<001). Conclusion: Patients with early or late recurrence of seizures have different characteristics that might reflect diversity in the epileptogenic zone and epileptogenicity itself. These disparities might help to explain variable patterns of seizures recurrence after epilepsy surgery.
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Detecção de fragmentos de genomas virais em fezes de lobos marinhos

Chiappetta, Catarina Marcon January 2014 (has links)
O presente estudo foi realizado com o objetivo de identificar genomas de vírus em fezes de lobos marinhos sul-americanos (Arctocephalus australis) e lobos marinhos subantárticos (Arctocephalus tropicalis), duas espécies de pinípedes encontradas no litoral do Rio Grande do Sul. Embora já existam estudos sobre esse tema em outras espécies de pinípedes, nas espécies aqui trabalhadas o tema permanece inexplorado. Amostras de fezes foram obtidas de vinte e um lobos marinhos sul-americanos e dois lobos marinhos subantárticos encontrados no litoral rio-grandense com indícios de morte recente, durante os meses de Junho e Julho de 2012. Através de técnicas de PCR e sequenciamento buscou-se identificar genomas de circovírus, adenovírus, morbilivírus, calicivírus e coronavírus. A amplificação de um fragmento do gene rep permitiu a identificação de prováveis circovírus em amostras de seis lobos marinhos sul-americanos. Análises filogenéticas revelaram que três dos seis segmentos são sugestivos de prováveis membros do gênero Cyclovirus. Os genes amplificados de outras duas amostras provavelmente correspondem a membros do gênero Circovirus. Uma das amostras deu origem a um segmento gênico que não apresenta similaridade com nenhum gênero já proposto da família Circoviridae. Além disso, foi possível detectar também fragmentos de genomas de adenovírus em duas amostras; estes apresentam alto grau de similaridade de nucleotídeos com amostras de adenovírus humano tipo C. Nenhum fragmento genômico indicativo da presença de morbilivírus, calicivírus ou coronavírus foi encontrado. Os resultados aqui obtidos sugerem a presença de circovírus, ciclovírus e adenovírus em populações de lobos marinhos encontrados na costa do Rio Grande do Sul. Estes achados reforçam a necessidade da ampliação do conhecimento a respeito da ocorrência de infecções virais nestas espécies. / This study was conducted with the objective of identifying genomes of viruses in feces of south american fur seals (Arctocephalus australis) and subantarctic fur seals (Arctocephalus tropicalis), two species of pinnipeds found on the coast of Rio Grande do Sul. Although there are studies about this topic in other species of pinnipeds, it remains unexplored in these two species. Stool samples were obtained from twenty-one south american fur seals and two subantarctic fur seals found in Rio Grande do Sul coastline with evidences of recent death, during the months of June and July 2012. PCR and sequencing techniques were utilized to identify circovirus, adenovirus, morbillivirus, calicivirus and coronavirus genomes. The amplification of a rep gene fragment allowed the identification of supposed circoviruses in samples of six south american fur seals. Phylogenetic analysis revealed that three of the six segments are suggestive of probable members of the genus Cyclovirus. The amplified genes from two other samples probably correspond to members of the genus Circovirus. One of the samples gave rise to a gene segment that has no similarity with any genera already proposed of the Circoviridae family. Furthermore, it was also possible to detect fragments of adenovirus genomes in two samples: these have a high degree of nucleotide similarity with a human adenovirus type C genomic fragment. No indication of the presence of morbillivirus, calicivirus and coronavirus genomes was found. The work reported here provide evidence for the occurrence of circoviruses, cicloviruses and adenoviruses in fur seal populations found in Rio Grande do Sul. These findings reinforce the need to expand the knowledge about the occurrence of viral infections in these species.

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