Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias Agrarias / Made available in DSpace on 2012-10-16T11:08:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Foram realizados estudos comparativos do crescimento de Pediococcus pentosaceus, no meio de cultura MRS - Mann, Rogasa & Sharpe (controle) e nos meios experimentais constituídos de melaço de cana-de- açúcar a 5 % e melaço de cana-de-açúcar a 5 % enriquecido com diferentes nutrientes (sais, extrato de levedura, extrato de carne e peptona). O experimento foi realizado em frascos agitados, com dois sistemas de cultivo (S1 a 25°C e S2 35°C) e tempo de fermentação de 28 horas. P. pentosaceus cresceu em todos os meios de cultura avaliados. O sistema de cultivo S2 foi melhor que o S1. A produtividade da biomassa e o número final de células viáveis, foi maior no meio controle nos dois sistemas, seguida dos meios de melaço a 5 % enriquecido com 0,5 % de sais e melaço de cana-de-açúcar a 5 % enriquecido com 0,5 % de extrato de levedura, estatisticamente iguais.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química / Made available in DSpace on 2012-10-24T15:17:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 267697.pdf: 1680226 bytes, checksum: 06a6bcca172ded47f570f3ad61da7d09 (MD5) / O presente trabalho teve como objetivo estudar o cultivo de Pycnoporus sanguineus e a produção do antibiótico cinabarina em meio líquido, e a utilização de resíduos lignocelulósicos como meio de cultivo, em estado sólido, para a produção da cinabarina. Foi realizada a análise do crescimento radial e avaliada a produção de cinabarina de três diferentes cepas de P. sanguineus (MIP 95001, MIP 95002 e MIP 20001). O modelo que melhor representou o crescimento das cepas foi o modelo exponencial, sendo selecionada a cepa MIP 20001 como melhor produtora de cinabarina. Foi proposta neste trabalho uma nova metodologia para o doseamento da cinabarina, em sua forma purificada, através de método espectrofotométrico visando obter um método confiável, mais rápido e prático de doseamento. O método espectrofotométrico mostrou-se adequado para a finalidade pretendida, produzindo resultados semelhantes aos obtidos com o método microbiológico. A cinética de crescimento do P. sanguineus e a produção de cinabarina foram estudadas em caldo de batata dextrose (CBD) com pH inicial 5,6 e 9,0 e também combinando-se as fontes de carbono (glicose, maltose e glicerol), o CBD e as fontes de nitrogênio (peptona, extrato de levedura e uréia). Os cultivos em CBD com pH inicial 5,6 e 9,0 não apresentaram diferenças quanto a produção de cinabarina, sendo que o fungo apresentou maior crescimento em pH inicial 5,6. O meio contendo glicose e extrato de levedura propiciou a maior produção de biomassa, sendo que o meio em que houve a maior produção de cinabarina foi o meio CBD sem a adição de fontes de nitrogênio. Foi avaliada a produção de cinabarina utilizado como substrato os resíduos lignocelulósicos: serragem de Pinus sp. e de Eucalyptus sp. e casca de arroz, enriquecidos com farelo de arroz. A utilização da serragem de Pinus sp., devido ao seu elevado teor de lignina, resultou na maior produção de cinabarina, (1,6 vezes mais do que em CBD). A estabilidade da cinabarina foi avaliada até 60 dias após sua extração e os resíduos foram armazenados em geladeira a 2 ºC de três maneiras: seco, diluído em DMSO e diluído em DMSO com EDTA. O resíduo armazenado seco manteve sua estabilidade pelo período analisado, o resíduo diluído em DMSO apresentou-se estável por um mês e a adição de EDTA aumentou a estabilidade do resíduo em solução por pelo menos 60 dias. / This work has as main objective to study the growth of Pycnoporus sanguineus in liquid medium broth, following their cinnabarin antibiotic production. Besides this, it is aimed to produces the cinnabarin by utilizing wood wastes by growing the broth in solid state of the Pycnoporus sanguineus. We performed the radial growth analysis and evaluated the cinnabarin production starting from three different strains of P. sanguineus (MIP 95001, MIP 95002 and MIP 20001). Among the strains, those which presented the exponential model growth showed the best results. We choose the strains of MIP 2001 as the better cinnabarin producer. In this work, we proposed a new routine for measuring the cinnabarin content in their pure state via spectrometric method aiming a more reliable, fast and practical method. The spectrometric method fit to the existing procedures, with same results as the microbiological method ones. The P. sanguineus kinetic growth and the cinnabarin production were performed in a potato dextrose broth (PDB), having an initial p-H's of 5.5 and 9.0. It is composed of a carbon source as glucose, maltose, and glycerol, the PDB, and the nitrogen source as (peptone, yeast extract and urea). The growing of PBD at initial p-H's of 5.6 and 9.0 presented nor differences in cinnabarin production, whereas the yeast presented more rate of growing at initial p-H of 5.6. Most biomass production was obtained with the broth plus glucose and yeast extract; whereas most cinnabarin production was obtained with the PBD without nitrogen addition. Further, the cinnabarin production was evaluated utilizing wood waste as substrate: Pinus sp. and Eucalyptus sp. sawdust and bark of rice with addition of milled rice. The Pinus sp. sawdust, due to its high content of lignin, presented more cinnabarin production than others ones (1.6 times more than in CBD). After the cinnabarin extraction, their stability after drying was evaluated by three methods for periods of time performing a total of 60 days. The extracts were put onto a freezer at temperature of 2 oC in three forms: dried (1) diluted on DMSO (2) and diluted on DMSO plus EDTA (3). The method (1) presented stability for the analyzed period of 60 days, the method (2) the method presented stability for a period of 30 days, and the method (3) presented stability for 60 days. We conclude that the EDTA addition enhanced the stability of the dried cinnabarin extract for at least 60 days.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química, Florianópolis, 2009 / Made available in DSpace on 2012-10-24T17:31:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 268241.pdf: 7143408 bytes, checksum: 0ef0609e9a43aedaa47013bde18e1f5f (MD5) / Para aumentar a produtividade das plantações de espécies de Eucalyptus e Pinus, sem aumentar a pressão sobre os remanescentes de florestas nativas ou a quantidade de insumos químicos, existem várias estratégias de caráter biotecnológico. Uma delas é a inoculação das plantas com fungos ectomicorrízicos (fECM). Esses fungos beneficiam as plantas pelo aumento da captação de água e nutrientes e proteção contra fatores adversos. Essa prática exige, no entanto, o desenvolvimento de tecnologias de produção de inoculantes fúngicos. Demonstrou-se que é possível cultivar esses fungos em biorrreatores do tipo airlift, mas quando o micélio desses fungos é fragmentado, no início do processo de cultivo, ou na etapa final para veiculação do inoculante, ele perde grande parte de sua viabilidade. Nesse âmbito, este trabalho teve por principal objetivo identificar os metabólitos responsáveis por esse processo, através de técnicas de separação e análises cromatográficas, espectroscópicas e de infravermelho. Além disso, procurou-se investigar formas de atenuar esses efeitos e verificar a toxicidade desses metabólitos frente a outros microrganismos: Fusarium oxysporum, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus e Candida albicans, através de testes em meio de cultura. Estudou-se se a manutenção do pH e a adição de carvão ativo influenciavam o crescimento desses fungos em meio líquido. Além disso, investigou-se o efeito da adição de ácido ascórbico e de oxigênio na viabilidade de suspensões Micelianas. Para esses estudos foram utilizados quatro isolados de fungos ctomicorrízicos: dois Pisolithus microcarpus (UFSC-Pt116 e UFSC-Pt188), de eucalipto, um isolado de Scleroderma sp (UFSC-Sc42) e um de Rhizopogon nigrescens (UFSC-Rh90), ambos de pínus. Por último, equipou-se um biorreator airlift com um sistema de controle da vazão de ar, de pH e de oxigênio dissolvido, instalou-se um software gerenciador, e realizou-se um cultivo controlado do isolado UFSC-Rh90. Nestes estudos, observou-se que a incorporação de carvão ativo em meio líquido, em frascos estáticos, aumentou a produção de biomassa pelo isolado UFSC-Pt116, mas não pelos isolados UFSC-Pt188, UFSC-Rh90 e UFSC-Sc42. Porém, a adição de carvão ativo à suspensão miceliana do isolado UFSCPt116 manteve a viabilidade do micélio por até 7 dias após a fragmentação, ao passo que a suspensão com ácido ascórbico manteve-se viável somente 48 h. A retirada do oxigênio na suspensão de micélio fragmentado evitou a oxidação de lipídeos, mas não aumentou a viabilidade. Não houve efeito benéfico da manutenção do pH no crescimento dos fungos. Para o isolado UFSC-Pt188 ficou claramente demonstrado que a maior produção de biomassa foi acompanhada pela maior variação de pH do meio. Os isolados UFSC-Rh90 e UFSC-Sc42 não formaram metabólitos inibidores não voláteis, quando cultivados em meio sólido. O filtrado de cultura do isolado UFSC-Pt188 não apresentou toxicidade ao fitopatógeno Fusarium oxysporum, nem ao próprio fungo, nas diferentes concentrações testadas. Em confrontação direta, o isolado UFSC-Rh90 inibiu Fusarium oxysporum, tanto na presença quanto na ausência de carvão ativo. Já o isolado UFSC-Pt188 inibiu o fitopatógeno apenas na ausência de carvão. Os metabólitos extracelulares dos isolados UFSCRh90 e UFSC-Sc42 não apresentaram toxicidade contra os microrganismos testados (bactérias e Candida albicans). Porém, a fração aquosa resultante da extração dos metabólitos intracelulares do isolado UFSC-Sc42, embora não tenha apresentado toxicidade contra o próprio fungo nem contra o fitopatógeno, foi tóxica para Staphylococcus aureus. A fração de acetato de etila apresentou toxicidade contra o próprio fungo. As análises das frações intra e extracelulares, através da espectroscopia de infravermelho, revelaram bandas de absorção características de ácidos graxos, ésteres, fenóis e carboidratos. O cultivo controlado do isolado UFSC-Rh90, após instrumentalização do biorreator airlift, foi considerado eficiente, pois proporcionou alta produtividade e alta conversão. Os dados obtidos, analisados por um software específico, permitiram uma melhor compreensão do cultivo e representarão uma importante ferramenta para o desenvolvimento de técnicas de produção de inoculantes.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-graduação em Biologia Vegetal, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T05:08:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 287086.pdf: 1269495 bytes, checksum: 5768072f9a14427ef78735e55eaa05cc (MD5)

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T07:34:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 281753.pdf: 1196893 bytes, checksum: ccfe2b8d4509b809737b088e6acc4502 (MD5) / Dentre as numerosas aplicações comerciais do uso de microalgas podemos destacar sua importância na aqüicultura onde podem ser empregadas como fonte primária de alimento para larvas, organismos jovens e até de adultos de moluscos, camarões e peixes marinhos, uma vez que, o elevado valor nutricional das microalgas justifica sua necessidade na alimentação destes organismos. Muitos fatores influenciam o crescimento das microalgas, sendo que, a disponibilidade de nutrientes é bastante relevante nesse aspecto. Para determinar o crescimento das culturas das microalgas Thalassiosira weissflogii, Chaetoceros muelleri, Isochrysis sp. e Pavlova sp. quando cultivadas com diferentes concentrações de nitrogênio e fósforo durante todo o cultivo, foram desenvolvidos cultivos experimentais com essas espécies. As espécies foram cultivadas em meio de cultura Guillard (1975) e a diferença dos tratamentos foi a quantidade de nitrogênio e fósforo utilizada nas soluções estoques para compor o meio de cultivo. Os parâmetros de crescimento analisados foram a densidade celular máxima, o tempo de cultivo e a velocidade de crescimento. Foi aplicado um delineamento uni-fatotorial para blocos casualizados.Os dados obtidos foram submetidos à analise de variância fatorial (Anova com P<0,05) e quando necessário ao Teste de Comparação de Médias de TuKey (p<0,05). Quanto ao crescimento das culturas o emprego do meio f - com o dobro da concentração de nitrato de sódio e de fosfato de sódio descrita em Guillard (1975), promoveu uma maior densidade celular nas culturas de Thalassiosira weissflogii, (66,7 x 104 cel/mL) Chaetoceros muelleri, (1566,7 x 104 cel/mL) Isocrysis sp (1903,3 x 104 cel/mL) e Pavlova sp (2362,3 x 104 cel/mL). (p<0,05) Quanto ao tempo de cultivo e a velocidade de crescimento não houve diferença significativa para nenhuma das espécies (p<0,05).

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Vegetal, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T15:59:49Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Kappaphycus alvarezii (Doty) Doty ex P. C. Silva é uma alga vermelha de grande importância comercial por ser fonte de carragenana, hidrocolóide utilizado como agente espessante e gelificante em diversos ramos da indústria. Conseqüentemente, uma expansão dos cultivos por diversos países tem ocorrido durante mais de 40 anos, sendo que ao longo desse tempo, a espécie foi cultivada através de propagação vegetativa, resultando em diminuição da sua variabilidade genética. Uma das alternativas para melhorar a qualidade das linhagens cultivadas é ampliar os estudos básicos referentes à sua micropropagação e identificação da ploidia. Esse trabalho teve como objetivos: 1. determinar a ploidia de três linhagens de K. alvarezii cultivadas em laboratório; 2. analisar a ontogênese de calos da linhagem tetrasporofítica marrom. Para o primeiro objetivo, núcleos marcados com DAPI de três linhagens indicadas como "tetrasporofítica" marrom, "gametofitica" marrom e linhagem "EP" foram analisados através da microscopia de fluorescência confocal e programa ImageJ. O "tetrasporófito" marrom apresentou maior intensidade de fluorescência do núcleo, indicando o caráter tetrasporofítico (2N) quando comparado com o "gametófito" marrom e linhagem "EP", que apresentaram, respectivamente, 55,78% e 57,10% da intensidade de fluorescência, confirmando o caráter gametofítico (N) das mesmas.. Foi possível constatar ainda que esta técnica pode ser utilizada como uma ferramenta rápida para auxiliar na identificação da ploidia de linhagens até então desconhecidas. Para o segundo objetivo, explantes axênicos da linhagem tetrasporofítica marrom de K. alvarezii foram incubados em meio sólido por 60 dias. Ao 7o, 14o, 21o, 28o, 35o e 60o dia, amostras de explantes foram retirados da cultura e analisados através da microscopia de luz e eletrônica de transmissão. No final do período experimental, amostras de 60 dias foram analisadas ainda através da microscopia confocal. A formação do calo filamentoso foi iniciada na primeira semana, a partir das células corticais e medulares da região seccionada do explante em contato com o ar. Alterações na porção superior, das células corticais e medulares do explante, como o espessamento de parede celular, proliferação de membranas convolutas, aumento no número de mitocôndrias e alterações nos cloroplastos, indicaram a desdiferenciação destas células como pré-requisito para formação de células indiferenciadas. Durante todo o período experimental, as células do calo filamentoso apresentaram parede celular espessada com presença de polissacarídeos ácidos, sugerindo grande quantidade de carragenana, juntamente com polissacarídeos neutros (celulose). O citoplasma das células do filamento apresentou como principais características: grande quantidade de grãos de amido como material de reserva; presença de cloroplastos alterados com inúmeros plastoglóbulos em seu interior e tilacóides desorganizados; presença de diversas membranas convolutas e formação de vesículas vacuolares visualizadas pela compartimentalização citoplasmática. À medida que iam se proliferando os filamentos mantinham sua organização unisseriada, e ramificavam irregularmente, com diversas conexões intercelulares entre si. No interior de suas células, estruturas autofluorescentes foram observadas, sugerindo a presença de pigmentos fotossintetizantes, como também vários núcleos, indicando a capacidade de proliferação destas células. Observamos que apesar do estresse inicial causado no momento de isolamento de explantes e ínicio da cultura dos calos, os filamentos foram capazes de crescer e se desenvolver, mantendo suas células desdiferenciadas com intensa atividade metabólica. Esse conhecimento é de fundamental importância para o entendimento do processo de formação da estrutura do calo e pode criar bases para a compreensão posterior do processo de regeneração do talo apartir das células do calo.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química. / Made available in DSpace on 2012-10-23T20:52:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 250447.pdf: 927732 bytes, checksum: 767c9ae795ffff5ddefae23c7b5b6544 (MD5) / o principal impacto ambiental inerente da atividade industrial é a poluição dos recursos hídricos, devido ao lançamento de efluentes líquidos nestes. Estes efluentes contêm distintos contaminantesd, estacando-seo enxofre e o nitrogênio. Para minimizar o impacto ambiental é necessário desenvolver e aprimorar sistemas de tratamento de efluentes destinados à remoção destas substâncias. Assim, utilizando-se de uma cultura mista de microrganismos, desenvolveu-se, m um reator contínuo, o processod e desnitrificação autotrófica via oxidação do tiossulfato. Estabelecido o processo e adaptada a cultura à condição de 500 mgS-S203-2.L-1 e 175 mgN-N03-.L-1, iniciou-se os ensaios cinéticos em batelada para definir a concentração celular ideal para os experimentos; determinar a melhor relação S/N e estimar alguns 'parâmetros cinéticos da referida cultura. Operou-se o reator contínuo durante 211 dias, evidenciando uma satisfatória remoção de nitrogênio (92%) e total conversão de tiossulfato a sulfato. Os ensaios cinéticos foram conduzidos com uma concentração celular de 2gSSV.L-), identificando a relação molar S/N estequiométrica (10/8) como propícia ao desenvolvimento dos testes para a determinação dos parâmetros cinéticos. Através das cinéticas da relação SoIXo, verificou-se que o modelo de Monod, foi o mais adequado, estimando-se assim os parâmetrosc inéticos Ks= 100,53 mgS-S203-2.L-e1 KN= 29,96 rngN-N03-I.L-1. Além disso, foram obtidas medidasd e potencial redox em distintas concentraçõesd e enxofre e nitrogênio, com a finalidade de avaliar a variação do potencial no processo.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia / Made available in DSpace on 2013-07-16T01:59:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 224208.pdf: 597493 bytes, checksum: f9b8bd6abdd864d3673dad2d2538cd8b (MD5) / Cedrela fissilis Vellozo (Meliaceae) é uma espécie nativa da Floresta Atlântica, que produz madeira de grande valor econômico. Os objetivos deste trabalho foram estudar o crescimento de calos em diferentes condições de cultivo, realizar análises preliminares do teor de óleos essenciais e dos constituintes voláteis produzidos pelos mesmos e desenvolver estudos sobre a criopreservação de sementes e conservação in vitro de propágulos vegetativos. Em todos os experimentos foram utilizados segmentos nodais cotiledonares, exceto para testar o efeito de diferentes tipos de explantes, em que segmentos apicais e foliares também foram utilizados. O meio de cultura Murashige & Skoog foi utilizado em todos os experimentos, suplementado com 2,5 M de 6-benzilaminopurina (BAP) e 5 M de ácido a-naftalenoacético (ANA), 0,2% de Phytagel e com 58,4 mM de sacarose, exceto nos casos em que outras fontes de carbono foram testadas ou em que foram testadas diferentes concentrações de sacarose na ausência ou na presença de glutamina ou em que diferentes concentrações de BAP e ANA foram utilizadas separadamente ou em combinação. As culturas foram mantidas em sala de crescimento com temperatura controlada de 25 2ºC, sob fotoperíodo de 16 horas (exceto as submetidas ao escuro), provido por lâmpadas fluorescentes Philips TDL (22.3 µmol.m-².s-¹) e foram avaliadas, após quatro e oito semanas, dependendo do experimento, através da determinação da massa fresca, massa seca e do teor de água. Os óleos essenciais foram extraídos por hidrodestilação de calos crescidos na luz em 2,5 M de BAP e 5 M de ANA . A extração dos constituintes voláteis foi realizada pelo método líquido-sólido e análise através de cromatografia gasosa. As sementes criopreservadas foram descongeladas em temperatura ambiente ou a 45 C, em banho-maria, por três minutos. Os segmentos nodais foliares foram armazenados, por seis semanas em meio de cultura Murashige & Skoog, com metade da concentração salina, desprovido de sacarose, a 25 C e a 5 C e após o período de armazenamento transferidos para o meio de cultura Murashige & Skoog, suplementado com 2,5 M de BAP e 5 M de ANA. Nenhuma diferença foi detectada entre os valores de massa fresca dos calos iniciados a partir de segmentos nodais cotiledonares e apicais e os maiores valores foram obtidos com 2,5 M de BAP e 5 M de ANA. Não foram detectadas diferenças entre os maiores valores em massa seca de calos iniciados a partir de segmentos nodais cotiledonares e foliares, obtidos com oito semanas de cultivo. Os calos iniciados a partir de segmentos nodais cotiledonares cresceram em todas as combinações de ANA e BAP testadas. Os maiores valores de massa seca foram obtidos em 2,5 M de ANA com 2,5 M de BAP, 5 M de ANA e 2,5 M ou 5 M de BAP. A maior massa seca dos calos ocorreu após oito semanas de cultivo em sacarose, sendo os valores observados para glicose e frutose semelhantes. Os maiores valores de massa seca dos calos foram obtidos com 58,4 mM ou 116,8 mM de sacarose e com 87,6 mM de sacarose e 2,73 mM de glutamina. Os calos apresentaram maior massa seca na luz, com oito semanas de cultivo e maior teor de água no escuro. Calos produzidos a partir de plântulas de diferentes idades não diferiram em massa seca, apenas no teor de água, que foi maior para os calos obtidos de explantes de plântulas com cinco semanas de idade. O rendimento de óleos essenciais extraídos por hidrodestilação, produzidos pelos calos foi de 1,17 % da massa seca. O linalol foi o composto majoritário produzido por calos crescidos na luz ou no escuro. Sete compostos voláteis foram identificados em calos crescidos no escuro e doze foram identificados em calos crescidos na luz. O germacreno apareceu em maior proporção nos calos crescidos na luz. A massa seca dos calos produzidos a partir de segmentos nodais foliares armazenados por seis semanas a 5 C foi maior do que a massa seca dos calos produzidos pelos segmentos apicais, não havendo diferença entre as massas secas quando ambos os explantes foram armazenados a 25 C. As sementes toleraram a criopreservação por quinze meses e o descongelamento lento. O estabelecimento de diferentes condições de cultivo de calos, a detecção de compostos de interesse nos mesmos e o estabelecimento de métodos que permitem a criopreservação, por longos períodos de tempo, e a conservação in vitro, por curtos períodos de tempo, de propágulos vegetativos indicam o potencial da aplicação de abordagens biotecnológicas para a produção de metabólitos secundários e conservação de germoplasma desta espécie. Cedrela fissilis Vellozo (Meliaceae) is a native species of the Atlantic Forest, important for timber production. The aim of this work is to study callus growth in different culture conditions, to carry out preliminary analysis on the content of essential oils and its volatile components and to develop studies on seed cryopreservation and in vitro conservation of vegetative propagules. Cotyledonary nodal segments were used in all experiments, except when different type of explants were used. The Murashige & Skoog medium supplemented with 2,5 M 6-benzilaminopurine (BAP) and 5 M a-naphtaleneacetic acid (ANA), 0,2% Phytagel and 58,4 mM sucrose was used in all experiments, except when different carbon sources, different sucrose concentration, in the absence or presence of glutamine or different concentration of BAP and ANA, isolated or combined, were tested. The cultures were maintained under 25 2ºC, 16 hours photoperiod (except those kept in the dark), provided by fluorescent Philips TDL (22.3 µmol.m-².s-¹) tubes and were assessed after either four or eight weeks, depending on the experiment, for fresh mass, dry mass and water content. The essential oils were extracted by hydrodistillation from callus grown under light in 2,5 M BAP and 5 M ANA. The extraction of volatile components was carried out through the liquid-solid method and the analysis by gas chromatography. Seeds cryopreserved in liquid nitrogen and thawed either at room temperature or at 45 C, in a water bath, for three minutes. Leaf nodal segments and apical shoot segments were stored at either 25 C or 5 C, for six weeks in half strength Murashige & Skoog medium, deprived of sucrose, and transferred, after storage, to the Murashige & Skoog medium supplemented with 2,5 M BAP and 5 M ANA. No differences were detected in the fresh mass of calluses initiated either from cotyledonary nodal segments or apical segments and the highest values were obtained in the culture medium with 2,5 M BAP and 5 M ANA. No differences were detected in the highest dry mass values of calluses initiated from either cotyledonary nodal segments or leaf nodal segments, after eight weeks of culture. Growth of calluses initiated from cotyledonary nodal segments was achieved in all combination of ANA and BAP tested. Superior values of dry mass were obtained in 2,5 M ANA with 2,5 M BAP, 5 M ANA and 2,5 M or 5 M BAP. The highest callus dry mass occurred after eight weeks of culture in sucrose, and similar values were obtained for glucose and fructose. Superior values of callus dry mass were obtained on either 58,4 mM or 116,8 mM sucrose and on 87,6 mM sucrose and 2,73 mM glutamine. Calluses showed higher dry mass in the light, when cultivated for eight weeks. Calluses produced from seedlings with different age did not differ in dry mass, only the water content was higher in callus obtained from explants of five week-old seedlings. The content of essential oils produced by the callus was 1,17 % of the dry mass. Linalool was the major compound produced by callus grown either under light or in the dark. Seven volatile compounds were identified in callus grown in the dark and twelve were identified in callus grown in the light. Germacrene appeared in higher proportion in the callus grown in the light. The dry mass of calluses produced from leaf nodal segments stored for six weeks at 5 C was higher than the dry mass of calluses produced from the apical segments, and no difference in the dry mass was detected when both explants were stored at 25 C. Seeds tolerated cryopreservation for fifteen months and the slow thawing. The establishment of different callus culture condition, the detection of important compounds produced by the callus and the establishment of methods which allow long term seed cryopreservation, and short term in vitro conservation of vegetative propagules indicate the potential of application of biotechnological approaches for the production of secondary metabolites and germplasm conservation of this species.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Odontologia. / Made available in DSpace on 2012-10-22T12:59:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 235619.pdf: 1858735 bytes, checksum: e921f3c8d190616791843cc396b0737b (MD5) / O objetivo deste trabalho foi avaliar o crescimento quantitativo de linhagens celulares osteoblásticas oriundas da calvária de rato sobre 3 diferentes superfícies de implantes testando uma metodologia inédita de cultura de células diretamente sobre a superfícies dos implantes : Grupo I, implantes usinados, Grupo II, implantes com textura produzida por ataque ácido e Grupo III, implantes especialmente produzidos para este estudo com superfície jateada por partículas seguida de banhos ácidos. Os implantes (n=27) foram imobilizados através de um dispositivo especialmente criado, cultivadas com 1 x 10 4 células, tripsinizados e submetidos a contagem na câmera de Neubauer após 24, 48 e 72 h. A análise estatística demonstrou não existirem diferenças entre os tipos de implantes com relação ao número de células e o tempo. Os resultados permitem concluir que a superfície proposta neste estudo, grupo III, apresentou comportamento semelhante ao das outras duas tradicionalmente utilizadas, grupos I e II e sugere sua utilização sem riscos. A metodologia tornou possível a contagem do numero de células aderidas diretamente sobre os implantes com micro e macro topografias, aproximando a situação da realidade clinica.

SILVA, Jose William Alves da. Cultivo da microalga Chlorella vulgaris em efluentes aquícolas e sua influência na concentração lipídica. 2013. 48 f. : Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Ceará, Centro de Ciências Agrárias, Departamento de Engenharia de Pesca, Fortaleza-CE, 2013 / Submitted by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-07-18T13:04:18Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_jwasilva.pdf: 918066 bytes, checksum: 3234978a89ce64bd0d1748d700d6c3a6 (MD5) / Approved for entry into archive by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-07-18T13:04:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_jwasilva.pdf: 918066 bytes, checksum: 3234978a89ce64bd0d1748d700d6c3a6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-18T13:04:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_jwasilva.pdf: 918066 bytes, checksum: 3234978a89ce64bd0d1748d700d6c3a6 (MD5) Previous issue date: 2013 / Microalgae can be used as feedstock for producing biofuels on a large scale, due to the ease of cultivation, strong growth rate, high content of fatty acids and higher productivity than other oils, making it an excellent alternative to fossil fuels. The study evaluated the use of microalgae Chlorella vulgaris in phytoremediation of aquaculture effluents and lipid evaluation. The microalgae was obtained in the algae bank Federal University of Ceará. Were three treatments with six replicates, using as culture medium Guillard f / 2 and effluents of shrimp and fish farming. Cultivation was batch containers of 12 L and was observed daily by spectrophotometry at 680 nm, and determining the concentration of ammonia, nitrite, nitrate and phosphorus performed at the beginning, middle and end of crops. The separation of the cells from culture medium was performed by chemical flocculation using NaOH 2N. After washing, the biomass was dried in an oven with renovation of air at 60 °C for 24 hours and then quantified. Trea tment with effluent was, as biomass production, significantly higher than the others, showing an average weight of 0.91 ± 0.05 g L-1 . The effluent removed satisfactorily nitrogen compounds with a 76% removal of these compounds. The cultivation performed with tilapia effluent showed better lipid productivity with 0.025 ± 0.002 g L -1 day -1. The microalga C. vulgaris can be used for phytoremediation of aquaculture effluent, biomass and lipids. / As microalgas podem ser utilizadas como matéria prima para a produção de biocombustíveis em larga escala, em decorrência da facilidade de cultivo, acentuada velocidade de crescimento, alto teor de ácidos graxos e produtividade maior que outras oleaginosas, sendo uma excelente alternativa aos combustíveis fósseis. O experimento avaliou a utilização da microalga Chlorella vulgaris na fitorremediação de efluentes aquícolas e sua produção lipídica. Foram realizados três tratamentos, com seis repetições cada, utilizando como meios de cultura o Guillard f/2 e efluentes da carcinicultura e piscicultura. O cultivo estacionário foi realizado em um recipiente com volume útil de 12 L e foi acompanhado, diariamente, por espectrofotometria a 680 nm, sendo a determinação das concentrações de amônia, nitritos, nitratos e fosfatos realizada no início, meio e fim dos cultivos. A separação das células do meio de cultivo foi realizada por floculação química, usando NaOH 2N e, depois de lavada, a biomassa foi seca em estufa com renovação de ar a 60 °C por 24 h. O tratamento com efluente da carcinicultura apresentou uma produção de biomassa significativamente maior que os demais, com valor médio de 0,91±0,05 g L-1. Os compostos nitrogenados presentes nos efluentes atingiram remoção média de 76%, resultado considerado satisfatório. O cultivo realizado com efluente de piscicultura apresentou melhor produtividade lipídica com 0,025 ± 0,002 g L-1 dia-1. Assim, a microalga C. vulgaris pode ser utilizada na fitorremediação de efluentes aquícolas para a produção de biomassa e extração de lipídios.