Made available in DSpace on 2017-03-14T14:10:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-30. Added 1 bitstream(s) on 2017-03-14T14:42:48Z : No. of bitstreams: 1 000874521_20170330.pdf: 98903 bytes, checksum: b6d5c9da1442c85bfd1576edc917d187 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-03-31T12:19:28Z: 000874521_20170330.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-03-31T12:20:24Z : No. of bitstreams: 1 000874521.pdf: 1184298 bytes, checksum: 3c815e7db076a63baa90c4057c3bf4a2 (MD5) / Cimentos de silicato decálciosão estudados como materiais reparadores. O estudo foi divido em 4 capítulos: No primeiro, citotoxicidade (MTT e Apoptose), genotoxicidade (teste Cometa) foram avaliadas em Saos-2 para os materiais: Cimentos de silicato de cálcio puro (CSC); Modificado (CSCM); Resinoso (CSCR1, CSCR2 e CSCR3). Na viabilidade, CSC e CSCR3 (50mg/mL) foram citotóxicos. CSCR1, CSCR2 e CSCR3 mostraram maior apoptose. Somente CSC e CSCR2 não foram genotóxicos em 10mg/mL (P<0.05). No cap.2, CSCM e CSCR2, foram associados a radiopacificadores: óxido de zircônio e óxido de nióbio (micro e nano), óxido de bismuto, tungstato de cálcio. MTA foi o controle para citotoxicidade e bioatividade. Todos foram viáveis e apresentaram apoptose semelhantes (1:8). A necrose foi superior (P<0.05). Ambos CSCs induziram fosfatase alcalina (ALP) e ARS. No cap.3, Biodentine (Septodont), MTA Plus (Avalon), CSCRs Nb2O5 e ZrO2 foram analisados quanto à cito e genotoxicidade. No MTT (1, 3 e 7d), todos foram similares. No qPCR, houve expressão de BAX (3d.) para CSCRs, MTAP e CSCR ZrO2 (5d). Para BCL2, (3 e 5d) somente MTAP e CSCR Nb2O5 (5d.). Na genotoxicidade, todos (1:2 e 1:8) permaneceram similares (P<0.05). Cap. 4, os mesmos foram avaliados na bioatividade: MTT, proliferação celular, ALP (1, 3 e 7d), qPCR (alp e ocn), e ARS. Todos os grupos foram viáveis e induziram ALP, ARS e expressão gênica, destacando os materiais CSCR Nb2O5 e Biodentine. Desta forma, os materiais apresentam potencial biológico para ser usado na endodontia. Estudos adicionais devem ser realizados, especialmente para os materiais experimentais. / Calcium silicate-based cements are studied as reparative materials. This study was divided into 4 chapters: In the first, cytotoxicity (MTT and apoptosis) and genotoxicity (Comet assay) were evaluated in Saos-2 for: Pure calcium silicatebased (CSC); Modified (CSCM); resin-based (CSCR1, CSCR2, CSCR3). In the Viability assay, CSC and CSCR3 (50mg/mL) showed lower cell viability. CSCR1, CSCR2, CSCR3 showed more apoptosis. Only CSC and CSCR2 were not genotoxity in 10mg/mL (P<0.05). Chapter 2, CSCM and CSCR2 were associated with radiopacifiers: zirconium oxide and niobium oxide (micro and nano), bismuth oxide and calcium tungstate. MTA was used for the control of cytotoxicity and bioactivity tests. All were viable and showed similar apoptosis (1:8). Necrosis was superior (P<0.05). CSCM and CSCR induced alkaline phosphatase (ALP) and ARS. Chapter 3, was compared Biodentine (Septodont), MTA Plus (Avalon), CSCRs ZrO2 and Nb2O5, on cytotoxicity and genotoxicity. In MTT (1, 3 and 7 days) all were similar. In the qPCR, BAX was expressed by CSCRs (3d). MTAP and CSCR ZrO2 expressed in 5 days. For BCL2 gene (3 and 5d) only MTAP and CSCR Nb2O5 (5d). In genotoxixity assay, all (1:2 and 1:8) were similar (P<0.05). Chapter 4, we evaluated the same materials in Saos2 bioactivity: MTT, cell proliferation, ALP (1, 3 and 7d), qPCR (alp and ocn) and ARS. All groups were viable and induced ALP, ARS and gene expression, particularly CSCR Nb2O5 and Biodentine. Therefore, the biological materials has the potential to be used in endodontics. Additional studies should be conducted, especially for experimental cements. Additional studies should be conducted, especially for experimental cements.

Submitted by RICHARD PEROSA FERNANDES null (spx_rc@yahoo.com.br) on 2017-03-25T20:19:34Z No. of bitstreams: 1 Defesa_Richard-VFinal.pdf: 4655342 bytes, checksum: 472606270b950345a54fb62be6ef2a41 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-03-29T18:38:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 fernandes_rp_me_araiq.pdf: 4655342 bytes, checksum: 472606270b950345a54fb62be6ef2a41 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-29T18:38:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 fernandes_rp_me_araiq.pdf: 4655342 bytes, checksum: 472606270b950345a54fb62be6ef2a41 (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Nos últimos anos, a busca por compostos bioativos oriundos de rotas metabólicas silenciadas (em microrganismos) tem levado o desenvolvimento de novas ferramentas analíticas assim como a aplicação de diferentes metodologias. Uma das mais importantes estratégias para acessar tal produção metabólica é o uso de cultivos em co-cultura, onde a interação entre dois ou mais microrganismos pode mimetizar, de certa maneira, as relações tróficas existentes na natureza. A relação de competição por nutrientes e espaço leva a produção de enzimas e compostos relativos a um determinado tipo de interação que pode estar relacionado a reprodução, inibição de crescimento ou estimulação. Neste trabalho, foi realizado o co-cultivo entre os fungos Fusarium solani e Phomopsis cassiae, ambos isolados da Senna spectabilis. A investigação foi direcionada ao encontro de novos produtos naturais biossitentizados pelas espécies em co-cultivo. Para isso, os fungos foram cultivados em meio sólido de batata dextrose ágar. O acompanhamento do crescimento dos fungos visou a observação de possíveis distinções morfológicas de acordo com nível de interação. Os perfis metabólicos dos microrganismos foram obtidos através do uso de técnicas do estado da arte em CLAE-DAD, CG-EM e RMN. Para os fungos em co-cultivo foi possível determinar a presença de cinco substâncias quando comparado aos cultivos isoladamente pela técnica de CLAE-DAD com o auxílio das ferramentas quimiometricas. Os espectros obtidos por RMN de 1H propiciaram a visualização da existência de sinais únicos presentes no experimento de co-cultivo, porém, sua proporção minoritária impossibilitou a correlação ou identificação dos sinais. A técnica de CG-EM propiciou a sugestão de 30 substâncias através da comparação com o banco de dados NIST. / In recent years, the search for new bioactive compounds has increased the need to develop several methods of analysis, aiming to activate metabolic routes silenced in microorganisms. An important strategy to access the production of distinct secondary mebatolites is co-culture, where the interaction between two or more microorganisms occurs, mimicking, to a certain extent, the relationships existing in nature. The competition for nutrients and space leads to the production of enzymes and compounds, which are related to the type of interaction (reproduction, inhibition of growth or stimulation). In this work, co-cultivation was carried out between the fungi Fusarium solani and Phomopsis cassiae, both isolated from Senna spectabilis’s. The research was directed to the encounter of new natural products biossentetized by the species in co-cultivation. For this, the fungi were cultivated in the solid batata dextrose ágar medium, being monitored their growth in order to observe possible distinctions in their morphologies when the interaction occurs. The metabolites profiles of the microorganisms were observed through the LC-DAD, GC-MS and NMR techniques. For the fungi in co-culture it was possible to determine the presence of five substances when compared to the cultures alone by the CLAE-DAD technique with the help of chemometric tools. The spectra obtained by 1H NMR allowed the visualization of the existence of unique signals present in the co-cultivation experiment, however, its minority proportion made it impossible to correlate or identify the signals. The CG-EM technique provided the suggestion of 30 substances by comparison with the NIST database. / CNPq: 132097/2015-0

Orientadora: Cristiane Duque / Banca: Ana Claudia Okamoto / Banca: Vivien Thiemy Sakai / Resumo: Terapias biológicas tem buscado novas substâncias/protocolos que promovam a eliminação microbiana e induzam ou estimulem a regeneração pulpa r e o desenvolvimento completo radicular d e dente s permanente s jove ns com processos patológicos pulpares. Os objetivos do estudo foram avaliar a a tividade antimicrobiana /antibiofilme de algumas combinações de antibióticos sobre microrganismos de interesse endodôntico e analisar o efeito da combinação de antibióticos com melhor ação antimicrobiana associada à sinvastatina na expressão de marcadores o dontoblásticos em células da polpa dental humana (CPDH) . A atividade antimicrobiana dos seguintes antibióticos : Metronidazol (ME), C iprofloxacina (CI), Minociclina (MI), Doxicilina (DO) e F osfomicina (FO), isolados ou em combinação dupla (ME+CI, ME+MI, ME+DO, ME+FO, CI+MI, CI+DO, CI+FO, DO+FO, MI+FO) ou tripla (ME+CI+MI, ME+CI+FO, ME+MI+FO, ME+CI+DO, ME+DO+FO, CI+DO+FO, CI+MI+FO) foram testados contra Streptococcus mutans, Enterococcus faecalis, Actinomyces israelii e Candida albicans em condições planctônicas. Biofilmes mono - espécie de E. faecalis e biofilmes em dual - espécies de E. faecalis and C. albicans fora m prepara dos em bloc os de dentina para testar a atividade anti biofilme das combinações de antibióticos com os melhores result ados microbiológicos. O efeito antibiofilme das combinações antibióticas sobre biofilme de E. faecalis dentro dos túbulos dentinários foi também avaliada por microscopia confocal. Culturas de CPDH foram expostas à combinação antibiótica com melhor resultad o microbiol ógico e sinvastatina e determinada a viabilidade celular, atividade da f osfatase alcalina (ALP), deposição de nódulos de mineralização e expressão de DSPP (sialofosfoproteína dentinária), importante marcador odontoblástico... / Abstract: Biological therapies have searching for substances/protocols, which promote microbial elimination and induce or sti mulate pulp regeneration and completion of apical root development in young perm anent teeth wi th pulp pa thological processes . The objective s of this study were to evaluate the anti microbial /anti - biofilm activity of some antibiotics combinations on endodontic microorgan isms and the effect of the combina tion of anti biotics with the best anti microbial action associated with simvastatin on expression of odontoblast markers by human dental pulp cells (HDPC) . The antimicrobial activity of the following antibiotics : Metronidazole ( ME ), Ciprofloxacin ( CI), Minocycline (MI), Doxycycline (DO) and Fosfomycin ( FO), either alone or in double (ME+CI, ME+MI, ME+DO, ME+FO, CI+MI, CI+DO, CI+FO, DO+FO, MI+FO) or triple combinations (ME+CI+MI, ME+CI+FO, ME+MI+FO, ME+CI+DO, ME+DO+FO, CI+DO+FO, CI+MI+FO ) were tested against Streptococcus mutans, Enterococcus faecalis, Actinomyces israelii and Candida albicans in planktonic conditions . Mono - species biofilm of E. faecalis and dual - species biofilms of E. faecalis and C. albicans were prepared in dentin blocks to test the anti - biofilm activity of antibiotic combi nations with the best microbiolo gical results . Antibiofilm effect of antibiotic combination on E. faecalis biofilm inside dentin tubules was also evaluated by confocal microscopy . Culture s of HDPC were exposed to the antibiotic combination with the best antimicrobial effect and simvastatin and determined cell viability, alkaline phosphatase activity, deposition of mineralization nodules and expression of Dspp (dentin sialophosphoprotein), important odontoblast markers of dentin mineralization. Data were analyzed statistically, considering p<0.05 . All antibiotic combina tions reduced statistically the growth of bacteria... / Mestre

Orientador: Lucia Helena Sipaúba Tavares / Banca: Maria Stela Maioli Castilho Nol / Banca: Claudinei da Cruz / Resumo: A microalga A. gracilis é conhecida pela sua capacidade de ser usada em nutrição de organismos aquáticos. Alguns estudos relatam que a adição de vitamina junto ao meio de cultura promove uma melhora nas condições do cultivo. O objetivo deste estudo foi avaliar o desempenho da microalga Chlorophyceae, Ankistrodesmus gracilis, em condições controladas em três diferentes meios de cultura, sendo um comercial (CHU12) e dois alternativos (NPK (20:5:20) e Macrófita + NPK) durante o período de 28 dias de cultivo para cada meio. O experimento foi realizado em recipientes de 13L durante 28 dias, com luminosidade constante de 60 μmol m-2 s-1 e para cada recipiente foram adicionados 20 mg de vitamina do complexo B. No meio CHU12 apresentou densidade celular máxima de 25,6 x 105 cel mL-1 e nos meios NPK e M+NPK foi de 25,5 e 24,2 x 105 cel mL-1 , respectivamente. As quantidades de lipídios obtidas no presente estudo foram, para o meio NPK o valor médio foi de 12,68% do peso seco e para os meios M + NPK e CHU12 os valores obtidos foram 9,85 e 2,82% do peso seco respectivamente. Em relação às proteínas a microalga A. gracilis apresentou valores significativos comprovando assim o seu grande potencial como nutriente na alimentação de organismos aquáticos, foram obtidos para o meio NPK valores de 41,26% do peso seco, e para os meios M + NPK e CHU12 valores de 37,71 e 31,76% do peso seco respectivamente. Através dos dados obtidos neste estudo, pode-se concluir que a utilização dos meios de cultura alternativos NPK (20:5:20) e macrófita + NPK apresentaram resultados satisfatórios no crescimento e desenvolvimento da microalga A. gracilis. Em relação à nutrição de organismos aquáticos pode ser uma grande ferramenta como alimento natural / Abstract: The microalgae A. gracilis is known for its ability to be used in nutrition of aquatic organisms. Some studies report that the addition of vitamin on the culture medium promotes an improvement in the conditions of cultivation. The objective of this study was to evaluate the performance of microalgae Chlorophyceae, Ankistrodesmus gracilis, under controlled conditions in three different culture media, being a commercial (CHU12) and two alternatives (NPK (20:5:20) and Macrophyte+NPK) during the period of 28 days of cultivation for each half. The experiment was accomplished in 13L containers during 28 days, with constant brightness of 60 μmol m-2 s-1 and for each container were added 20 mg of vitamin B complex. In the middle CHU12 has maximum cell density 25,6 x 105 cel mL-1 and NPK and M+NPK media was 25,5 and 24,2 x 105 cel mL-1, respectively. The quantities of lipid obtained in this study were, in the middle the average value was NPK 12,68% of the dry weight and the means M + NPK and the values obtained CHU12 were 9,85 and 2,82% of the dry weight respectively. In relation to protein microalgae A. gracilis presented significant values proving so its great potential as a nutrient in the feeding of aquatic organisms, were obtained for the NPK values of 41,26% of dry weight, and for the means CHU12 37,71 values and M+NPK and 31,76% of the dry weight respectively. Through the data obtained in this study, it can be concluded that the use of alternative culture media NPK (20:5:20) and macrophyte + NPK presented satisfactory results in the growth and development of microalgae A. gracilis. In relation to the nutrition of aquatic organisms can be a great tool as health food / Mestre

Orientador: Lúcia Helena Sipaúba-Tavares / Banca: Maria Stela Mioli Catilho Noll / Banca: Cintia Erbert / Resumo: A biotecnologia utilizada no cultivo de microalgas à base de meio comercial é de alto custo. Sendo assim, alguns estudos indicam que o uso de meios de cultura alternativos com a finalidade de reduzir o preço de produção em curto espaço de tempo e mantendo alto valor nutricional, são procedimentos a serem adotados. O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade de diferentes meios de cultivo a base de macrófitas. O meio com macrófita foi associado ao fertilizante inorgânico NPK (20:5:20). O experimento foi conduzido no período de 28 dias em triplicata. O meio de cultura com E. crassipes alcançou maior densidade celular (434 x 105 cel. mL-1), comparado com os outros meios de cultura com macrófitas que variaram de 319,7 x 105 cel. mL-1 (E. azurea) a 223,5 x 105 cel. mL-1 (T. domingensis). Durante o período experimental o oxigênio dissolvido, pH e condutividade elétrica não apresentaram diferenças significativas (P>0,05). A taxa de crescimento e densidade celular da microalga cultivada em meio de cultura com plantas aquáticas foram maiores (P>0,05) do que no meio NPK porém, similares (P<0,05) ao meio comercial CHU12. Em relação aos nutrientes, o teor de N (67 g.L-1) foi o mais elevado no meio de cultura com T. domingensis e os demais nutrientes (P, K, Ca, S, B, Cu, Fe e Zn) apresentaram concentrações abaixo de 35 g.L-1, nos diferentes meios utilizados. O uso de macrófitas como fonte alternativa para ser utilizada como meio de cultura no desenvolvimento de A. gracilis demonstro... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Since biotechnology in commercial medium-based culture of microalgae has very high costs, several studies recommend alternative medium cultures to reduce product costs in a short time period, coupled to high nutritional values. Objective of this work was to evaluate the quality of different macrophytes based culture media. Medium with macrophyte was associated with inorganic fertilizer NPK (20:5:20). Assay was conducted for 28 days, in triplicate. Culture medium with E. crassipes had the greatest cell density (434 x 105 cel. mL-1) when compared to other culture media with macrophytes and ranged between 319.7 x 105 cel. mL-1 (E. azurea) and 223.5 x 105 cel. mL-1 (T. domingensis). Dissolved oxygen, pH and electric conductivity did not show any significant differences during the experimental period (p>0.05). Growth rate and cell density of microalga cultivated in a medium with aquatic plants were greater (p>0.05) than in NPK medium, albeit similar (p<0.05) to the commercial medium CHU12. Further, N rate (67 g.L-1) was the highest in culture medium with T. domingensis, whilst the other nutrients (P, K, Ca, S, B, Cu, Fe and Zn) had lower than 35 g.L-1 concentrations in the different media employed. The use of macrophytes as an alternative source as culture medium in the development of A. gracilis proved to be viable from the economic and nutritional point of view, coupled to high algal biomass. E. crassipes, E. azurea and T. domingensis provided the best results. / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-10Bitstream added on 2014-06-13T18:40:35Z : No. of bitstreams: 1 000755380.pdf: 1446040 bytes, checksum: 68388d851035743262279c6845346dbd (MD5) / Tendo em vista a elevação de áreas produtoras de sementes de feijão e de soja infectadas por Sclerotinia sclerotiorum e a recomendação do cumprimento do nível de tolerância zero para este agente patogênico na comercialização de sementes, o trabalho teve por o objetivo verificar a eficiência de um plano de amostragem sequencial para sementes de feijão e da soja, na detectação de S. sclerotiorum. Deste modo, primeiramente foi avaliada a heterogeneidade das amostras dos lotes dos cultivares de para as cultivares de feijão, cultivares Pérola (sementes C1), Pérola (“sementes salvas”) e Bolinha (“sementes salvas”), e de soja, cultivar IAC-Foscarin (sementes C1) pelos testes dos valores H e R e, concomitantemente verificada a qualidade fisiológica e sanitária utilizando-se métodos descritos pelas Regras para Análise de Sementes (BRASIL, 2009). Para testar a presença ou ausência do patógeno foi realizada a verificação da distribuição do mesmo através do modelo binomial positivo, utilizando-se para este fim, o número de sementes infectadas naturalmente e recuperadas pelos testes Neon-S e Rolo de Papel. A eficiência do teste Neon-S, foi obtida para diferentes níveis de infecção (1:100, 1:200, …,1:1000), variando-se a proporção de 1 a 10 sementes por porção fixa analisada. Para a caracterização das amostras, a análise estatística para cada teste foi feita, em delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e as médias dos tratamentos foram comparadas pelo teste de Tukey (P ≤ 0,05) de probabilidade. O plano de amostragem sequencial foi aplicado variando-se o tamanho da... / Given the elevation of producing areas of bean seeds and infected by Sclerotinia sclerotiorum and soybean recommendation of compliance with level zero tolerance for this pathogen in the marketing of seeds, the study was aimed to verify the efficiency of a plan sequential sampling for seed beans and soybeans in S. sclerotiorum detection list. Thus, first the heterogeneity of samples of lots of cultivars to cultivars of beans, Perola (seeds C1 ), Perola ( saved seed ) and Bolinha ( saved seed ), and soybean was evaluated, IAC - Foscarin (seeds C1) for values tests of H and R, concomitantly observed physiological and sanitary quality using methods described in the Rules for Seed Analysis (BRAZIL, 2009). To test for the presence or absence of the pathogen to check the distribution thereof was performed using the positive binomial model, using for this purpose the number of seed naturally infected and recovered by Neon-S and Roll Paper tests. The efficiency of Neon- S test was obtained for different levels of infection (1:100 , 1:200 , ..., 1:1000), varying the ratio 1 to 10 seeds per flat portion analyzed. For the characterization of samples, statistical analysis for each test was taken in a completely randomized design with four replications. Data were subjected to analysis of variance and the treatment means were compared by Tukey test (P ≤ 0,05) probability. The sequential sampling method was applied by varying the sample size from 100 to 1000 seeds at intervals of 100 seeds for different cultivars analyzed. The sampling sequence of beans seeds and soybean for detection of Sclerotinia sclerotiorum in the mycelial form was efficient, since 800 and 1.000 seeds are evaluated considering incidences of 0,01 and 0,005 % , respectively. Methods Neon-S and Roll Paper tests were sensitive in the detection of Sclerotinia sclerotiorum mycelial seed and soya beans.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-01Bitstream added on 2014-06-13T21:05:08Z : No. of bitstreams: 1 voltan_ar_dr_arafcf.pdf: 1013360 bytes, checksum: 7a427a197309b3a1913694635297ee6e (MD5) Bitstreams deleted on 2015-05-25T13:05:07Z: voltan_ar_dr_arafcf.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-05-25T13:05:43Z : No. of bitstreams: 1 000715398_20160301.pdf: 174801 bytes, checksum: 8a2d22fd4d7938bc5ecd9d9d0fdd4b6c (MD5) Bitstreams deleted on 2016-03-02T17:37:22Z: 000715398_20160301.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-02T17:38:08Z : No. of bitstreams: 1 000715398.pdf: 978625 bytes, checksum: f9f26554857da3d03570f04ef587630d (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os fungos dimórficos, Paracoccidioides brasiliensis (espécies cripticas S1, PS2, PS3) e Paracoccidioides lutzii (Pb01-like espécies), são agentes da paracoccidioidomicose (PCM), doença granulomatosa crônica, endêmica na América Latina, principalmente no Brasil. A doença apresenta grande variedade de manifestações clínicas, desde formas localizadas até disseminadas evoluindo para letalidade. O fungo tem capacidade de aderir, invadir e extravasar barreiras impostas pelos tecidos do hospedeiro. P. brasiliensis (Pb18) já foi observado tanto no interior de macrófagos, como no interior de células epiteliais in vivo e in vitro. A identificação do mecanismo pelo qual este fungo sobrevive no interior da célula hospedeira é campo fértil para a descoberta de sua patogênese, já que este microrganismo possui a capacidade de induzir sua própria endocitose em células epiteliais e muito provavelmente em macrófagos. A absorção de micronutrientes pelo fungo apresenta papel singular, tanto para sua nutrição e processo invasivo, como para sua sobrevivência no interior da célula hospedeira. A via endocítica em microrganismos é de fundamental importância na regulação de todo esse processo. O objetivo deste estudo foi avaliar a via endocítica de Pb18 e também de macrófagos infectados com este fungo. A avaliação da via endocítica de Pb18 foi realizada na condição de depleção de metais, onde foram analisados os genes Clatrina e Ypt7 (Homólogo de Rab7) por RT-PCR semi-quantitativo e PCR em tempo real (RT-PCR quantitativo). Também foi analisada a infecção de macrófagos por Pb18 cultivado na depleção de metais e em diferentes tensões de oxigênio. A via endocítica de macrófagos foi analisada por RT-PCR quantitativo e imunofluorescência. Esta análise foi realizada quando o fungo foi cultivado em... / The dimorphic fungus, Paracoccidioides brasiliensis (cryptic species S1, PS2, PS3) and Paracoccidioides lutzii (Pb01-like species), are agents of paracoccidioidomycosis (PCM), chronic granulomatous disease, endemic in Latin America, especially in Brazil. The disease has a wide variety of clinical manifestations, from localized forms to disseminated evolving to lethality. The fungus is able to adhere, invade and spill barriers imposed by host tissues. P. brasiliensis (Pb18) has already been observed both within macrophages, but also inside of epithelial cells in vivo and in vitro. Identification of the mechanism by which this fungus survive within the host cell is a fertile field for the discovery of their pathogenesis, since this microorganism has the ability to induce its own endocytosis in epithelial cells and most probably in macrophages. The micronutrient uptake by the fungus presents unique role, both for its nutritional and invasive procedure, such as for survival within the host cell. The endocytic pathway in microorganisms is of fundamental importance in the regulation of this process. The aim of this study was to evaluate the endocytic pathway of Pb18 and also macrophages infected with this fungus. The evaluation of the endocytic pathway of Pb18 was performed under the condition that depletion of metals, where the genes were analyzed Clathrin and Ypt7 (Rab7 homolog) by RT-PCR semi-quantitative and real-time PCR (RT-PCR quantitative). Was also analyzed by Pb18 infection of macrophages cultured in the depletion of metals at different oxygen tensions. The endocytic pathway of macrophages was analyzed by quantitative RT-PCR and immunofluorescence. This analysis was performed when the fungus was grown at different oxygen tensions and macrophages were infected with this and when the infection was incubated at... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-03-03T11:52:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-06-06Bitstream added on 2015-03-03T12:06:55Z : No. of bitstreams: 1 000804740.pdf: 427264 bytes, checksum: a59271f661e7ce490375621680ab8a3e (MD5) / A microalga A. gracilis é conhecida pela sua capacidade de ser usada em nutrição de organismos aquáticos. Alguns estudos relatam que a adição de vitamina junto ao meio de cultura promove uma melhora nas condições do cultivo. O objetivo deste estudo foi avaliar o desempenho da microalga Chlorophyceae, Ankistrodesmus gracilis, em condições controladas em três diferentes meios de cultura, sendo um comercial (CHU12) e dois alternativos (NPK (20:5:20) e Macrófita + NPK) durante o período de 28 dias de cultivo para cada meio. O experimento foi realizado em recipientes de 13L durante 28 dias, com luminosidade constante de 60 ?mol m-2 s-1 e para cada recipiente foram adicionados 20 mg de vitamina do complexo B. No meio CHU12 apresentou densidade celular máxima de 25,6 x 105 cel mL-1 e nos meios NPK e M+NPK foi de 25,5 e 24,2 x 105 cel mL-1 , respectivamente. As quantidades de lipídios obtidas no presente estudo foram, para o meio NPK o valor médio foi de 12,68% do peso seco e para os meios M + NPK e CHU12 os valores obtidos foram 9,85 e 2,82% do peso seco respectivamente. Em relação às proteínas a microalga A. gracilis apresentou valores significativos comprovando assim o seu grande potencial como nutriente na alimentação de organismos aquáticos, foram obtidos para o meio NPK valores de 41,26% do peso seco, e para os meios M + NPK e CHU12 valores de 37,71 e 31,76% do peso seco respectivamente. Através dos dados obtidos neste estudo, pode-se concluir que a utilização dos meios de cultura alternativos NPK (20:5:20) e macrófita + NPK apresentaram resultados satisfatórios no crescimento e desenvolvimento da microalga A. gracilis. Em relação à nutrição de organismos aquáticos pode ser uma grande ferramenta como alimento natural / The microalgae A. gracilis is known for its ability to be used in nutrition of aquatic organisms. Some studies report that the addition of vitamin on the culture medium promotes an improvement in the conditions of cultivation. The objective of this study was to evaluate the performance of microalgae Chlorophyceae, Ankistrodesmus gracilis, under controlled conditions in three different culture media, being a commercial (CHU12) and two alternatives (NPK (20:5:20) and Macrophyte+NPK) during the period of 28 days of cultivation for each half. The experiment was accomplished in 13L containers during 28 days, with constant brightness of 60 ?mol m-2 s-1 and for each container were added 20 mg of vitamin B complex. In the middle CHU12 has maximum cell density 25,6 x 105 cel mL-1 and NPK and M+NPK media was 25,5 and 24,2 x 105 cel mL-1, respectively. The quantities of lipid obtained in this study were, in the middle the average value was NPK 12,68% of the dry weight and the means M + NPK and the values obtained CHU12 were 9,85 and 2,82% of the dry weight respectively. In relation to protein microalgae A. gracilis presented significant values proving so its great potential as a nutrient in the feeding of aquatic organisms, were obtained for the NPK values of 41,26% of dry weight, and for the means CHU12 37,71 values and M+NPK and 31,76% of the dry weight respectively. Through the data obtained in this study, it can be concluded that the use of alternative culture media NPK (20:5:20) and macrophyte + NPK presented satisfactory results in the growth and development of microalgae A. gracilis. In relation to the nutrition of aquatic organisms can be a great tool as health food

Orientador: Fausto Viterbo de Oliveira Neto / Resumo: A pesquisa em Biologia Celular, depende de técnicas laboratoriais que possam ser usadas para estudar a estrutura e função celular. Importantes avanços na compreensão das células têm sucedido diretamente o desenvolvimento de novas técnicas, que permitiram novos meios de investigação. Uma grande inovação da indústria biotecnológica é a produção de anticorpos monoclonais que são de extrema importância na área médica. Todas as células do organismo apresentam um conjunto de marcadores de superfície que caracterizam a singularidade biológica e a marca das células que os contêm. Contudo, as células-tronco mesenquimais (CTMs) apresentam poucos marcadores imunofenotípicos específicos, sendo sua caracterização estabelecida pela identificação de um perfil de marcadores específicos e não específicos. Essa imunofenotipagem é realizada com a utilização de anticorpos monoclonais que reconhecem esses antígenos de superfície da membrana celular, conforme demonstrado em estudos contemporâneos. Tendo em vista a inexistência no mercado de testes rápidos para identificação das CTM-TA, optou-se em delinear um projeto que desenvolvesse a ferramenta diagnóstica explorando seu potencial de uso, caracterizando os anticorpos monoclonais previamente produzidos a partir de células-tronco mesenquimais do tecido adiposo humano utilizando as técnicas de Western blotting e Citometria de fluxo com posterior análise proteômica a fim de identificar a especificidade dos mesmos em um processo de validação e inova... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. / Made available in DSpace on 2012-10-17T18:39:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / O pectinídeo Nodipecten nodosus (LINNAEUS, 1758) apresenta-se como um molusco de grande potencial para aquicultura. Sua consolidação como alternativa de produção depende da solução de problemas relacionados com a produção de sementes que sofre grandes flutuações, principalmente devido a doenças bacterianas. Neste trabalho buscou-se conhecer a flora bacteriana associada a larviculturas de N. nodosus frente à presença e ausência do antibiótico cloranfenicol (3mg.L-1). O conhecimento desta microbiota pode melhorar as ações sanitárias contra bactérias patogênicas, principalmente nos estágios mais sensíveis do cultivo. Em 3 experimentos efetuados em distintas épocas do ano (outono, primavera e verão) verificou-se os efeitos da presença ou ausência do cloranfenicol sobre a sobrevivência larval de N. nodosus e da flora bacteriana associada. Paralelamente avaliaram-se as fontes de contaminação dos cultivos larvais. Os 3 experimentos revelaram que o uso de antibiótico inibe o crescimento de bactérias do tipo Víbrio proporcionando melhores sobrevivências larvais. O gênero bacteriano dominante na microbiota associada aos cultivos foi Pseudoalteromonas sp. Nos cultivos sem cloranfenicol encontrou-se uma espécie de Vibrio (Vibrio sp. STD3-348-3), que parece patogênica, pois sua presença coincide com os resultados de menor sobrevivência larval. Dentre as possíveis fontes de contaminação ficou evidente que bactérias heterotróficas totais e vibrionáceas são aportadas aos cultivos larvais a partir de larvas véligers "D" e principalmente por meio da água de abastecimento.