Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-09T11:49:13Z No. of bitstreams: 1 Marcia Nieves Carneiro da Cunha.pdf: 873639 bytes, checksum: 110419134a2cc87e1cbcfafbb7b86801 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-09T11:49:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcia Nieves Carneiro da Cunha.pdf: 873639 bytes, checksum: 110419134a2cc87e1cbcfafbb7b86801 (MD5) Previous issue date: 2010-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Bovine Mastitis is one of the main diseases that affect the dairy herds in the world and is considered one of the greatest obstacles to their operation profitable. The greatest losses from mastitis are due to the decrease in milk production, depreciation in nutritional quality, treatment cost, cost of veterinary care and laboratory losses in genetic potential. Several microorganisms are cited as agents of bovine mastitis and the species most frequently isolated are Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus dysgalactiae, Streptococcus uberis and Escherichia coli. The β-lactam antibiotics are important antibacterial agents, but sensitive to β-lactamase enzymes capable of cleaving the β-lactam ring, rendering them inactive. Inhibitors of β-lactamases are an alternative for diseases treatment caused by resistant-penicillin bacteria. This study evaluated the ability to produce β-lactamase inhibitors by 71 actinomycetes isolated from lichens of the Amazonian and its antimicrobial activity using Staphylococcus aureus, penicillin-resistant isolates of bovine mastitis. The selection of actinomycetes that produced β-lactamases inhibitors was performed using the agar block technique against Klebsiella pneumoniae ATCC 29665 and selected actinomycetes were tested against Staphylococcus aureus penicillin resistant. The best producers of β-lactamase inhibitors were Streptomyces sp. DPUA 1542 and Nocardia sp DPUA 1571, which were subjected to submerged cultivation in the study of the growth curve, pH and antimicrobial activity. The largest inhibition zones using S. aureus, were obtained after 96 hours of culture for both Nocardia sp (13.5 and 12.0 mm) and for Streptomyces sp. (8.0 and 14.0 mm) with diffusion-tests on the discs and wells, respectively. Nocardia sp DPUA 1571 was used in the production of inhibitors of β-lactamases by factorial design where the influence of three variables: concentrations of carbon source (0.5, 1.0 and 1.0%), concentrations of nitrogen source (1.0, 2.5 and 4.0%) and pH (6.0, 6.5 and 7.0) were evaluated. The production carried out in 250mL flasks containing 100mL of culture medium MS-2 modified according to the experimental design, the flasks were incubated in an orbital shaker (200 rpm) at 28 ° C for 120 hours and each 24 hours, aliquots of 5 mL were withdrawn and centrifuged at 5000 rpm for 20 minutes at 4 ° C for the study of biological activity and dry weight. The biological activity of the liquid assay was performed using the diffusion-tests on the discs and wells, the best cultive conditions (test 3) with concentration of carbon source of 1.0% concentration of the soy bean flour 1% and pH 6,0, were obtained from the inhibition of up to 22mm diameter test against microorganisms used. The results showed that the actinomycetes are a promising source of β-lactamase inhibitors, demonstrated the potential application to pharmaceutical industry. / A mastite bovina é uma das principais enfermidades que acometem os rebanhos leiteiros no mundo, sendo considerada um obstáculo à sua exploração lucrativa. As maiores perdas causadas pela mastite são devidas à diminuição na produção de leite, depreciação na qualidade nutritiva, custo de tratamento, custo de atendimento veterinário e laboratorial e perdas no potencial genético. Vários microorganismos são citados como agentes etiológicos da mastite bovina sendo que as espécies mais frequentemente isoladas são Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus dysgalactiae, Streptococcus uberis e Escherichia coli. Os antibióticos β-lactâmicos são importantes agentes antibacterianos, porém sensíveis às enzimas β-lactamases, capazes de clivar o anel β-lactâmico, tornando-os inativos. Os inibidores de β-lactamases são uma alternativa para o tratamento de doenças causadas por bactérias resitentes à penicilina. Neste estudo foi avaliada a capacidade de produzir inibidores de β-lactamases por 71 actinomicetos isolados de liquens da Região Amazônica e sua atividade antimicrobiana utilizando Staphylococcus aureus, resistentes à penicilina, isolados de mastite bovina. A seleção dos actinomicetos que produziram inibidores de β-lactamases foi realizada através da técnica de bloco de gelose contra Klebsiella pneumoniae ATCC 29665 e os actinomicetos selecionados foram testados contra Staphylococcus aureus resistentes. Os melhores produtores de inibidores de β-lactamases foram Streptomyces sp. DPUA 1542 e Nocardia sp DPUA 1571, os quais foram submetidos a cultivo submerso para o estudo da curva de crescimento, pH e atividade antimicrobiana. Os maiores halos de inibição, utilizando S. aureus, foram obtidos após 96 horas de cultivo tanto para Nocardia sp (13,5 e 12,0 mm) como para Streptomyces sp. (8,0 e 14,0 mm) com os testes-difusão nos discos e poços, respectivamente. Nocardia sp DPUA 1571 foi utilizado na produção de inibidores de β-lactamases por planejamento fatorial onde a influencia de três variáveis foi avaliada: concentrações da fonte de carbono (0,5, 1,0 e 1,0%), concentrações de fonte de nitrogênio (1,0, 2,5 e 4,0%) e pH (6,0, 6,5 e 7,0). A produção ocorreu em Erlenmeyers de 250mL contendo 100mL do meio de cultivo MS-2 modificado de acordo o modelo experimental, os frascos foram incubados em agitador orbital (200 rpm) a 28°C por um período de 120 horas e a cada 24 horas, alíquotas de 5mL foram retiradas e centrifugadas a 5.000 rpm por 20 minutos a 4ºC, para a determinação da atividade biológica e peso seco. A atividade biológica do líquido metabólico foi realizada através da técnica de difusão em disco e poço, nas melhores condições de cultivo (ensaio 3) com concentração da fonte de carbono de 1,0%, concentração do filtrado de soja de 1% e o pH 6,0, foram obtidos halos de inibição de até 22mm de diâmetro frente aos microrganismos teste utilizados. Os resultados permitiram concluir, que os actinomicetos isolados de liquens da Região Amazônica são uma fonte promissora de inibidores de β-lactamases, com potencial para aplicação futura na indústria farmacêutica.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-06T12:22:38Z No. of bitstreams: 1 Elizabeth Sampaio de Medeiros.pdf: 1026668 bytes, checksum: c3f8468fa38781ce0ffddc9e51ab6c38 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-06T12:22:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Elizabeth Sampaio de Medeiros.pdf: 1026668 bytes, checksum: c3f8468fa38781ce0ffddc9e51ab6c38 (MD5) Previous issue date: 2008-02-25 / The goal of this research was to evaluate the occurrence and the sensitivity of Staphylococcus spp to antibiotics and disinfectants used in the control of bovine mastitis. Fifteen dairy farms located in the Metropolitan Recife regions (A), Agreste (B) and Zona de Mata (C), of the state of Pernambuco were studied. A total of 1,080 milk samples were collected and submitted to microbiological culture in order to isolate and identify Staphylococcus spp. To study the sensitivity and resistance of Staphylococcus spp to antimicrobials the diffusion disk technique with the following antibiotics was used: amoxiciline (10 mcg), ampiciline (10 mcg), azitromicine (15 mcg), cefquinome (30 mcg), cephalonium (30 mcg), ciprofloxacine (5mcg), cloxacillin (25 mcg), danofloxacine (10 mcg), enrofloxacine (5 mcg), eritromicine (15 mcg),florfenicol (30mcg), gentamicine (10 mcg), penicillin + novobiocine (10 mcg), sulfa (25 mcg) + trimetoprim (5 mcg),tobramicine (10 mcg) e tetraciclina (30 mcg) + neomicine (30 mcg) + bacitracine (10 mcg). For the in vitro study of sensitivity and resistance of S. aureus and Staphylococcus coagulase positive to the disinfectants, the following products were used: iodine (0.5%), chlorine (2.5%), quaternary ammonium (4%), lactic acid and chlorhexidine (2.0%). Of the 1,080 samples analyzed, 740 (68.5%) were positive and 340 (31.5%) negative. From the positive samples, Staphylococcus were isolated in 291 (39.3%). Of these, 170 (58.4%) were classified as coagulase negative Staphylococcus (SCN), 84(28.9%) as Staphylococcus aureus (S. aureus), and 37(12.7%) as coagulase positive Staphylococcus (SCP). The most efficient antibiotic in vitro was the combination between neomicine (98.4%), and bacitracine (99.3%) and tetracycline (89.7%) for regions A, B e C, respectively. The least efficient was ampicillin, which only showed a resistance of 56.5% to the isolates from region A, 72.8% for region B e 71.8% for region C. With respect to the disinfectants, iodine proved to be the most effective for S. aureus and SCP. The least effective was chlorine. Based on the results, it can be concluded with the epidemiological importance of Staphylococcus spp in subclinical mastitis in dairy cows in the regions chosen and the need for periodic evaluation of the antibiotics and disinfectants used to control mastitis. / Objetivou-se com esse trabalho avaliar a ocorrência e a sensibilidade de bactérias do gênero Staphylococcus spp frente aos antibióticos e desinfetantes utilizados no controle das mastites bovinas. Foram estudadas 15 propriedades situadas em municípios da Região Metropolitana do Recife (A), Agreste (B) e Zona da Mata (C) do estado de Pernambuco. Foram coletadas 1080 amostras de leite de vacas com mastite subclínica que foram submetidas ao exame microbiológico para isolamento e identificação dos Staphylococcus spp. Para o estudo da sensibilidade e resistência dos Staphylococcus spp aos antimicrobianos foi empregada a técnica de difusão em discos frente aos seguintes antibióticos: amoxicilina (10 mcg), ampicilina (10 mcg), azitromicina (15 mcg), cefquinome (30 mcg), cephalonium (30 mcg), ciprofloxacina (5mcg), cloxacilina (25 mcg), danofloxacina (10 mcg), enrofloxacina (5 mcg), eritromicina (15 mcg), florfenicol (30mcg), gentamicina (10 mcg), penicilina + novobiocina (10 mcg), sulfa (25 mcg) + trimetoprim (5 mcg), tobramicina (10 mcg) e tetraciclina (30 mcg) + neomicina (30 mcg) + bacitracina (10 mcg). Para o estudo “in vitro” da sensibilidade e resistência dos Staphylococcus aureus e Staphylococcus coagulase positiva aos desinfetantes, foram utilizados o iodo (0,57%), cloro (2,5%), amônia quaternária (4%), ácido lático e clorexidine (2,0%). Das 1080 amostras analisadas, 740 (68,5%) foram positivas ao exame microbiológico e 340 (31,5%) negativas. Das amostras positivas, isolaram-se bactérias do gênero Staphylococcus em 291 (39,3%). Dos 291 isolados, 170(58,4%) foram classificados como Staphylococcus coagulase negativa (SCN), 84(28,9%) como Staphylococcus aureus (S.aureus) e 37(12,7%) como Staphylococcus coagulase positiva (SCP). A melhor eficácia in vitro foi obtida pela associação entre neomicina + bacitracina + tetraciclina com percentuais de 98,4%, 99,3%, 89,7% para as regiões A, B e C respectivamente. O menos eficaz foi a ampicilina que apresentou 56,5% de resistência para os isolados da região A, 72,8% para a região B e 71,8% na região C. Com relação aos desinfetantes, observou-se que o iodo foi o mais eficaz para os S. aureus e SCP e o menos eficaz foi o cloro. Conclui-se com este estudo a importância epidemiológica dos Staphylococcus spp nas mastites subclínicas em vacas leiteiras nas regiões estudadas e a necessidade da avaliação periódica dos antibióticos e desinfetantes utilizados no controle da mastite.

Submitted by Celso Magalhaes (celsomagalhaes@ufrrj.br) on 2017-07-26T14:34:03Z No. of bitstreams: 1 2012 - Elaine Concei??o Liporage de Mendon?a.pdf: 3515906 bytes, checksum: ebf489151f2cd6961ddeeb292cd910a7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-26T14:34:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012 - Elaine Concei??o Liporage de Mendon?a.pdf: 3515906 bytes, checksum: ebf489151f2cd6961ddeeb292cd910a7 (MD5) Previous issue date: 2012-03-16 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / The use of antibiotic in the control of intramammary infections and in the elimination of its possible sources in dairy farms is an important control measure. However, the inappropriate use of antibiotics can result in the appearance of resistant strains and compromise the efficiency of the treatment. Besides Staphylococcus spp. are among the main pathogens of bovine mastitis, they are often resistant to antibiotics, especially beta-lactamics, mainly by two distinct mechanisms: the production of extracellular enzyme beta-lactamase, encoded by the blaZ gene, and production of PBP2a or PBP2 ' a penicillin-binding protein with low affinity, encoded by the mecA gene. The expression of mecA gene is constitutive or induced by beta-lactamic antibiotics, such as oxacillin and cefoxitin. The mecA gene is inserted into the chromosome through a staphylococcal mobile genetic element, called staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec). The present study evaluated the phenogenotypical resistance profile to betalactam antibiotics of 250 Staphylococcus spp. isolates, using oxacillin and cefoxitin as markers in order to produce data to the knowledge of resistance in dairy farms located in the South-Fluminense and the Metropolitan regions of the State of Rio de Janeiro to support the implementation of measures to control this disease. The assessment of resistance was made through 8 different phenotypic tests and yielded 54 profiles. Disk diffusion and agar screen with oxacillin were used as "gold standard" for the calculation of sensitivity, specificity and prediction once they are recommended by the CLSI veterinarian as standardized tests. Disk diffusion with cefoxitin achieved the best performance in the prediction of oxacillin resistance. Genotypic detection of mecA do not provided any positive isolate, otherwise mecI and mecRI genes were also detected in 11.6% (29/250) of the studied Staphylococcus spp. Four cassette mec types were detected (I, II, III and IV), being type I the most disseminated one. Gene blaZ was detected in 5.2% (13/250) isolates. From these 13 blaZ positive isolates, the whole system comprising blaR1-blaI-blaZ was detected in 23.1% (3/13) isolates / MENDON?A, Elaine Concei??o Liporage. Caracteriza??o fenogenot?pica da resist?ncia antimicrobiana em Staphylococcus spp. isolados de mastites cl?nicas e subcl?nicas em unidades leiteiras de munic?pios do Rio de Janeiro como subs?dio para implementa??o de medidas de controle. 89 p. Disserta??o (Mestrado em Ci?ncias Veterin?rias). Instituto de Veterin?ria, Departamento de Parasitologia Animal, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Serop?dica, RJ, 2012. A utiliza??o de antibi?ticos no controle das infec??es intramam?rias e na elimina??o de prov?veis fontes de infec??o nas fazendas leiteiras se constitui em importante medida de controle. No entanto, o uso inadequado de antibi?ticos no tratamento da doen?a pode gerar o aparecimento de cepas resistentes e comprometer a efici?ncia do tratamento. Bact?rias do g?nero Staphylococcus spp. est?o entre os principais agentes etiol?gicos da mastite bovina e s?o freq?entemente resistentes aos antimicrobianos, em especial aos beta-lact?micos, principalmente por dois mecanismos distintos: a produ??o da enzima extracelular beta-lactamase, codificada pelo gene blaZ, e a produ??o de PBP2a ou PBP2?, uma prote?na ligante de penicilina de baixa afinidade, codificada pelo gene mecA. A express?o do gene mecA ? constitutiva ou induzida por antibi?ticos betalact?micos, como a oxacilina e cefoxitina. O gene mecA est? inserido no cromossomo estafiloc?cico atrav?s de um elemento gen?tico m?vel, denominado cassete estafiloc?cico cromoss?mico mec (SCCmec). O presente estudo avaliou o perfil fenogenot?pico de resist?ncia aos beta-lact?micos em 250 isolados de Staphylococcus spp, utilizando os marcadores oxacilina e cefoxitina, de modo a produzir dados que possam contribuir para o conhecimento da resist?ncia antimicrobiana em algumas propriedades leiteiras das regi?es Sul-Fluminense e Metropolitana do Estado do Rio de Janeiro com o objetivo de subsidiar a implementa??o de medidas de controle dessa enfermidade. A avalia??o da resist?ncia foi feita a partir de 8 diferentes testes fenot?picos, sendo obtidos 54 perfis. Os testes de difus?o em disco simples e ?gar screen com oxacilina foram utilizados como ?padr?o ouro? para os c?lculos dos valores de sensibilidade, especificidade e predi??o por serem preconizados pelo CLSI veterin?rio. O teste de difus?o em disco simples com cefoxitina foi o de melhor desempenho na predi??o da resist?ncia a oxacilina. Na avalia??o genot?pica, n?o foi detectado qualquer isolado positivo para o gene mecA, j? os genes mecI e mecRI foram detectados igualmente em 11,6% (29/250) dos Staphylococcus spp avaliados. Foram detectados os quatro tipos de cassete mec analisados (I, II, III e IV), sendo o tipo I o que teve mais ampla distribui??o entre as regi?es estudadas. Gene blaZ foi detectado em 5,2% (13/250) dos isolados, sendo que nestes, todo o sistema blaZ-blaI- blaR1 foi detectado em 23,1% (3/13) dos isolados.

Foram submetidas a prova do \"California Mastitis Test\"(CMT), 468 vacas leiteiras pertencentes a seis propiedades rurais produtoras de leite tipo B, localizadas na região do Município de Barretos, SP. Das 56 (12,0 por cento ) fêmeas reagentes a esta prova, 48 (1O,3 por cento ) foram confirmadas através do isolamento e identificação do agente etiológico. A elevada concordância (85,71 por cento ) verificada entre, a prova do CMT e o exame bacteriológico, confirma a eficiência desta prova na detecção de transtôrnos da glândula mamária não perceptíveis clínicamente, uma vez que nenhuma das fêmeas analisadas apresentou sinais da enfermidade. A contagem leucocitária e a pesquisa do teor de cloretos efetuadas nas 56 fêmeas reagentes a prova do CMT, apresentaram concordâncias de 87,5 por cento e 50,0 por cento , respectivamente, em relação ao exame bacteriológico. O Staphylococcus aureus foi o agente etiológico mais frequente (52,08 por cento ) nos casos de mastite bovina. O estudo comparativo entre a contagem padrão em placas e a prova da redução do azul de metileno, efetuado nas 56 amostras reagentes a prova do CMT, revelou que 30 (53,57 por cento ) amostras apresentaram tempo de redução não condizente com o número de microrganismos determinado, isto é, tempo de redução menor que 3 l/2 horas e contagem total de microrganismos inferior a 500.000 microrg/ml. Observou-se, ainda, que destas 30 amostras, 26 (86,67 por cento ) apreesentaram contagens leucocitárias superiores a 2.500.000 leucócitos/ml., sugerindo deste modo, uma provável interferência dos leucócitos quando em número elevado, na prova da redução do azul de metileno. O estudo comparativo entre a contagem padrão em placas e a prova da redução do azul de metileno, efetuado nas 30 amostras negativas a prova do CMT, revelou que 27 (90,0 por cento ) amostras apresentaram o tempo de redução condizente com o número de microrganismos determinado, o que confirma a importância de sua utilização na rotina do Serviço de Inspeção. A provãvel interferência dos leucócitos não compromete a eficiência desta prova, pois as variações observadas ocorrem no sentido de abreviar o tempo de redução, sendo muito pequena a probabilidade de aceitação de um produto com o número de microrganismos superior ao permitido pelo Ministério da Agricultura. Dentre as provas utilizadas pelo Serviço de Inspeção na detecção da mastite bovina a nível de Estabelecimentos Industriais a prova de Whiteside foi a que apresentou maior sensibilidade e especificidade, capaz de revelar a presença de leite anormal em rebanhos cuja prevalência desta doença foi igual ou superior a 7,0 por cento das fêmeas ou 1,4 por cento dos quartos analisados. A pesquisa do teor de cloretos apresentou menor sensibilidade e especificidade, incapaz de revelar a presença de leite anormal em todos os rebanhos analisados. Entretanto, este fato não invalida a utilidade de sua aplicação, pois esta prova pode ser de fundamental importância na detecção de fraudes no leite. A prevalência da mastite bovina em até 20,0 por cento das fêmeas leiteiras ou em ate 5,0 por cento dos quartos examinados, não foi suficiente para colocar os quesitos analisados nas amostras de leite, fora dos padrões normais. Acredita-se que estes padrões devam ser objeto de estudos posteriores. / Four-hundred and sixty-eigth milk cows, belonging to six type B milk producing dayry farms, located in the region of Barretos, SP, Brazil were submitted to \"California Mastitis Test\", of the fifty-six (12,0 per cent ) cows positive to the mentioned test, forty eigth (10,31) had the diagnosis confirmed throght isolation and identification of the etiologic agent. High agreement (85,7 per cent ) was obtained between CMT and bacteriologic examination, which confirms the efficiency of CMT in the detection of diseases of the mammary glands, not perceptible by clinical examination, as none the animals examined presented signs of disease. Leucocyte count and determination of chloride level performed on the fifty-six reactors presented agreement of 87,5 per cent and 50,0 per cent , respectively, with bacteriological examination. Staphylococcus aureus was the most frequently isolated bacterium (52,08 per cent of cases). Comparison between total plate count and reductase test, performed on thirty samples negative to CMT, showed that twenty-seven samples (90,0 per cent ) presented a reduction time compatible with the number of microorganisms present, confirming the importance of reductase test regarding inspection. The theoretical interference of leucocytes was not important in practice, as variations observed were abreviation of reduction time, rendering the propability of accepting a product with a number of microorganisms over legal limits very small. Considering tests used by the Inspection Service for detection of bovine mastitis, the Whiteside test presented highest sensivity and specificity, as it was capable of reveling abnormal milk when prevalence was 7,0 per cent and over, considering animals and 1,1 per cent considering quarters. Chloride level presented lower sensitivity and specificity as it was unable to detect abnormal milk in all dairy farms. However it is very important in the detection of frauds. Prevalence of mastitis of up to 20,0 per cent of animals or of 5,0 per cent of quarters was not sufficient to bring the total milk produced below standards.

Submitted by Geandra Rodrigues (geandrar@gmail.com) on 2018-08-23T19:32:17Z No. of bitstreams: 1 naiaraaparecidarodriguesdeoliveira.pdf: 913286 bytes, checksum: a8b96b3b7d78237e6a66fbd73d141644 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2018-08-28T12:27:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 naiaraaparecidarodriguesdeoliveira.pdf: 913286 bytes, checksum: a8b96b3b7d78237e6a66fbd73d141644 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-28T12:27:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 naiaraaparecidarodriguesdeoliveira.pdf: 913286 bytes, checksum: a8b96b3b7d78237e6a66fbd73d141644 (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / A mastite está entre as doenças do gado leiteiro que mais causam prejuízos em todo mundo. Entre os agentes causadores estão os patógenos de origem contagiosa Staphylococcus aureus e Streptococcus agalactiae que mais contribuem para o aumento da Contagem de Células Somáticas (CCS) em rebanhos infectados.Desde a implantação da Instrução Normativa 51 ( IN 51/2002) do Ministério da Agriculutura Pecuária e Abastecimento(MAPA) em 2005, pouco se avançou em melhorias no parâmetro CCS dos rebanhos brasileiros, fazendo-se necessário o levantamento da situação das regiões a fim de traçar estratégias específicas para o controle da mastite e atendimento aos requisitos da legislação. O objetivo do presente estudo foi estabelecer uma classificação baseada em risco (dados probabilísticos) (risco) para presença de S. aureus e S. agalactiae em rebanhos bovinos leiteiros localizados Zona da Mata do Estado de Minas Gerais e vinculados a uma cooperativa. O trabalho foi realizado utilizando a população de bovinos leiteiros vinculados à Cooperativa dos Produtores de Leite de Leopoldina de Responsabilidade Ltda (LAC). A avaliação da dependência espacial entre as coordenadas geográficas dos rebanhos e a média geométrica anual da contagem de células somáticas foi realizada por meio de semivariogramas e os mapas de isolinhas por meio do método de Krigagem. Amostras para análise de CCS foram coletadas mensalmente.Para o estudo de prevalência foram selecionados aleatoriamente 43 rebanhos dos quais foram coletadas 3 amostras consecutivas de cada rebanho para análises microbiológicas durante o período de junho de 2016 a novembro de 2017. A análise espacial apresentou grau de dependência espacial e coeficiente de determinação fracos (GD<0,25; r2<0,13). A distribuição de frequência da CCS mostrou que apenas 23,3% dos rebanhos atendem ao limite de 400.000 células/mL . A prevalência de S. aureus foi de 93% a de S. agalactiae de 81,4% não diferindo estatisticamente entre si. Dos 43 rebanhos analisados, em tres (7%) não houve isolamento de S.aureus e de S. agalactiae, cinco (11,6%) apresentaram isolamento somente de S. aureus e 35 (81%) apresentaram isolamento de ambos patógenos. Não houve rebanhos com isolamento somente de S. agalactiae. Dos rebanhos sem isolamento destes agentes, a média de CCS foi de 224.000 células/mL, com isolamento somente de S. aureus a média de CCS foi de 447.000 células/mL, e para rebanhos com isolamento dos dois patógenos, S. aureus e S. agalactiae, 794.000 células/mL. Os rebanhos sem isolamento ou somente com isolamento de S. aureus estão associados a CCS inferior a 400.000 células/mL e rebanhos com isolamento de ambos os patógenos estão associados a CCS superior a 400.000 células/mL. A utilização da curva ROC para dados de CCS de rebanhos associados ao estudo de prevalência de S. aureus e de S. agalactiae permitiu classificar rebanhos em tres níveis de risco: baixo, médio e alto. A prevalência de S. aureus e de S. agalactiae entre rebanhos foi considerada alta para ambos patógenos, indicando que as medidas de controle para estes patógenos não estão sendo realizadas de maneira eficiente. Não foi observada diferença entre as prevalências de S. aureus e de S. agalactiae entre os rebanhos. Foi observada uma associação entre a CCS dos rebanhos e a presença de ambos os patógenos, permitindo desta forma uma classificação dos rebanhos. / Mastitis is among the most damaging diseases in dairy cattle worldwide. Among the causative agents are the pathogens of contagious origin Staphylococcus aureus and Streptococcus agalactiae that contribute most to the increase of Somatic Cell Count (SCC) in infected herds. Since the implantation of IN 51 in 2005, little progress was made in improving the SCC in the Brazilian dairy herds, therefore it is necessary to survey the mastitis situation of the regions in order to devise specific control strategies for mastitis control and compliance with the legislation requirements . The objective of the present study was to establish a risk - based classification (risk) for the presence of S. aureus and S. agalactiae in dairy herds located in the Zona da Mata of the State of Minas Gerais associated to a cooperative. The work was carried out using the population of dairy herds of Cooperativa dos Produtores de Leite de Leopoldina de Responsabilidade Ltda. (LAC).The evaluation of the spatial dependence between the geographical coordinates of the herds and the annual geometric mean of the somatic cell count was performed using semi-variograms and isoline maps using the Kriging method. Milk samples for SCC analyses were collected monthly. For the prevalence study, 43 herds were randomly selected and three milk samples from each herd were collected for microbiological analyzes during the period of June 2016 to November 2017. The spatial analysis presented degree of spatial dependence and weak determination coefficient (GD <0.25; r2 <0.13) The frequency distribution of CCS showed that only 23.3% of the herds met the limit of 400,000 cells / mL. The prevalence of S. aureus (93%) and of S. agalactiae (81.4%) did not differ statistically from one another. Of the 43 herds analyzed, three (7%) was no isolation of S. aureus and S. agalactiae, five (11.6%) had isolation only of S. aureus and 35 (81%) presented isolation of both pathogens. There were no herds with isolation of S. agalactiae. The mean SCC was 224,000 cels / mL, for the herds with absence of S. aureus and S. agalactiae, and 794.000 cels/ mL when the this two pathogens were present. The mean SCC for the herds with isolation only of S. aureus was 447,000 cells / mL,. The abcense or isolation only S. aureus herds are associated with CCS less than 400,000 cells / mL and herds with isolation of both pathogens associated with CCS greater than 400,000 cells / mL. The use of the ROC curve for herd CCS data associated to the study of S. aureus and S. agalactiae prevalence allowed the classification of the herds at three levels of risk: low, medium and high. The prevalence of S. aureus and S. agalactiae among herds was considered high for both pathogens, indicating that the control measures for these pathogens are not being carried out efficiently. There was no difference between the prevalences of S. aureus and S. agalactiae among the herds. An association was observed between the SCC of the herds and the presence of both pathogens, thus allowing a classification of the herds.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-01-20T11:00:33Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1691022 bytes, checksum: 36423c35cadbb1f2c911606adbed948b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-20T11:00:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1691022 bytes, checksum: 36423c35cadbb1f2c911606adbed948b (MD5) Previous issue date: 2016-07-29 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A grande diversidade de estirpes de Staphylococcus aureus em circulação nos rebanhos leiteiros reforça a necessidade de uma melhor caracterização dessas bactérias a fim de gerar informações que possam ser usadas no controle da mastite bovina. Neste trabalho, hipotetizou-se que estirpes de S. aureus geneticamente relacionadas causam diferentes formas de mastite. As bactérias S. aureus 302 e S. aureus 322, foram isoladas de vacas com mastite persistente e não-persistente, respectivamente, e apresentaram os mesmos genes de virulência e perfis de bandas idênticos quando genotipadas por análise em multilocus de repetições em tandem de número variável (MLVA). Por eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE), utilizado como um método genotípico adicional, comprovou-se que as bactérias são geneticamente relacionadas. Apesar dessa proximidade, ensaios in vitro de produção de biofilme, hemólise, invasão e persistência em células mamárias bovinas MAC-T e virulência in vivo em modelo Galleria mellonella comprovaram diferenças significativas entre as estirpes. Os resultados sugerem que apenas a caracterização molecular é insuficiente para correlacionar sintomas da doença à uma determinada estirpe. S. aureus 302 e S. aureus 322, além de S. aureus 469 (mastite persistente) e S. aureus 366 (mastite não-persistente) foram contrastadas por uma abordagem proteômica. Extratos de proteínas totais foram preparados a partir de bactérias crescidas até a fase exponencial e separados por eletroforese bidimensional. Um total de 35 spots com abundância diferencial foi detectado, dos quais três foram exclusivos de S. aureus 302 quando comparada a S. aureus 322 e S. aureus 366 e podem representar marcadores que indicam a persistência da bactéria no animal. Este trabalho também avaliou a dispersão de biofilmes de S. aureus NRS 155 e S. epidermidis NRS 101 pela lectina BjcuL, isolada de Bothrops jararacussu. Essa lectina não impediu a adesão inicial das células e foi capaz de inibir a formação de biofilmes quando pré-aderida a superfícies abióticas. Houve uma melhor atividade sobre biofilme pré-formado de S. aureus NRS 155 em comparação S. epidermidis NRS 101. Por qRT-PCR, detectou-se uma alteração na expressão de genes envolvidos no controle do operon ica, responsável pela produção do polissacarídeo de adesão intercelular. Finalmente, BjcuL foi capaz de restaurar a susceptibilidade de bactérias em biofilme pré-formado a antibióticos como gentamicina e ampicilina, revelando o potencial da estratégia antibiofilme no controle de infecções de S. aureus. / The great diversity of Staphylococcus aureus strains isolated from milk- producing cattle reinforces the need of bacterial characterization to raise information that can be used in the control of bovine mastitis. In this work, we hypothesized that genetically related S. aureus strains can cause different forms of mastitis. The strains S. aureus 302 and S. aureus 322 were isolated from cows with persistent and non-persistent mastitis, respectively, and harbored the same virulence genes and identical banding profiles when genotyped by multilocus variable-number tandem repeats analysis (MLVA). Pulsed field gel electrophoresis (PFGE) was used as an additional genotyping method and confirmed that the bacteria were genetically related. Despite close proximity, in vitro assays like biofilm production, hemolysis, invasion, and persistence in the bovine mammary epithelial cells (MAC-T) and also in vivo assessment of virulence in the Galleria mellonella model revealed significant differences between the strains. These results suggest that molecular analysis alone is insufficient to establish a link between a bacterial strain and the clinical symptoms of mastitis. Also in this work, S. aureus 302 and S. aureus 322 besides the strains S. aureus 469 (persistent mastitis) and S. aureus 366 (non- persistent mastitis) were analyzed using a proteomic approach. Extracts of intracellular proteins were prepared from bacteria grown until exponential phase and separated by two-dimensional electrophoresis. A total of 35 spots differentially expressed was detected while three of them were exclusive of S. aureus 302 when compared to S. aureus 322 and S. aureus 366, and may represent markers of bacterial persistence in animals. Finally, this study studied the dispersion of S. aureus NRS 155 and S. epidermidis NRS 101 biofilms by the lectin BjcuL isolated from Bothrops jararacussu. The lectin did not prevent the initial adherence of bacterial cells and inhibited biofilm formation when abiotic surfaces were pre-coated with the protein. Anti-biofilm activity was higher on S. aureus NRS 155 preformed biofilms in comparison to S. epidermidis NRS 101. Change in the expression of genes involved in the control of the ica operon, responsible for the production of polysaccharide intercellular adhesin, was detected by qRT-PCR. BjcuL restored susceptibility of preformed biofilms to gentamicin and ampicillin, revealing the potential of antibiofilm strategy to control S. aureus infections.

Os objetivos do presente estudo foram: a) avaliar a frequência de isolamentos de patógenos causadores de mastite em rebanhos leiteiros comerciais; b) determinar a susceptibilidade antimicrobiana de Staphylococcus spp. e Streptococcus spp. isolados de casos de mastite subclínica c) avaliar o perfil de multirresistência de Staphylococcus spp. e Streptococcus spp. d) Detectar o gene mecA em Staphylococcus spp. resistentes a oxacilina/meticilina; e) avaliar a associação entre as práticas de manejo e tratamento de mastite e a susceptibilidade antimicrobiana de Staphylococcus aureus isolados de rebanhos leiteiros. Foram selecionados para o presente estudo 13 rebanhos leiteiros a partir de um total de 60 rebanhos vinculados a um laticínio da região de Pirassununga/SP. Questionários previamente formulados foram respondidos pelos responsáveis do rebanho para avaliar a associação entre as práticas de manejo e tratamento de mastite e a susceptibilidade antimicrobiana de S. aureus. Após a seleção dos rebanhos e aplicação dos questionários, 1069 amostras de leite compostas foram coletadas durante 24 meses, em quatro períodos para realização de cultura e identificação dos patógenos, testes de susceptibilidade antimicrobiana e detecção do gene mecA. Os testes de susceptibilidade foram realizados em todos os isolados de Staphylococcus spp. e em 50% de Streptococcus spp. selecionados aleatoriamente. Os antimicrobianos testados foram: ampicilina 10 mg; clindamicina 2 &micro;g, penicilina 1 mg; ceftiofour 30 &micro;g; gentamicina 10 mg; sulfatrimetropin 25 &micro;g, enrofloxacina 5 &micro;g; sulfonamida 300 &micro;g, tetraciclina 30 &micro;g; oxacilina 1 mg; cefalotina 30 &micro;g e eritromicina 5 &micro;g. Todos os isolados de Staphylococcus spp. que apresentaram resistência a oxacilina/meticilina foram avaliados quanto à presença do gene mecA. Entre os isolados, Staphylococcus coagulase negativa foi o mais prevalente (28,6%), seguido por S. aureus (27,8%) e Corynebacterium spp. (10,9%). A susceptibilidade antimicrobiana dos isolados de S. aureus foi de 95,23% (eritromicina), 93,33% (cefalotina) e 65,71% (ampicilina). A susceptibilidade antimicrobiana dos isolados de Staphylococcus coagulase negativa (SCN) foi de 93,33% (cefalotina), 89,91% (eritromicina) e 62,03% (ceftiofur). Entre os isolados de Staphylococcus coagulase positiva (SCP), a susceptibilidade antimicrobiana foi de 93,33% (eritromicina), 91,11% (clindamicina e sulfonamida). A susceptibilidade antimicrobiana dos isolados de Streptococcus agalactiae foi de 38,46% (ampicilina) e 50% (sulfatrimetropin) e os isolados de S. dysgalactiae apresentaram susceptibilidade à tetraciclina de 19,44% e a clindamicina de 47,22%. A multirresistência foi maior entre os isolados de SCN (20,3%) e S.aureus (15,7%). Não foi detectado o gene mecA em nenhum dos isolados de Staphylococcus spp. Houve associação entre as variáveis para os seguintes antimicrobianos: a) tratamento de mastite clínica: ampicilina (P = 0,0055), ceftiofur (P = 0,0481), sulfatrimetropin (P= 0,0293), sulfonamida (P = 0,0043) e tetraciclina (P = 0,0058); e envio de amostras para cultura e antibiograma: ampicilina (P=0,0032), tetraciclina (P=<0,0001). Os principais fatores de risco para susceptibilidade antimicrobiana de S. aureus foram o não envio de amostras para cultura e antibiograma para tetraciclina (OR=6.012), penicilina (OR=4.687), eritromicina (OR=3.059) e ampicilina (OR=2.571), tratamento de mastite clínica para ampicilina (OR=2.178), ceftiofur (OR=1.956), gentamicina (OR=1.668), oxacilina (OR= 1.132) e penicilina (OR= 1.261) e tratamento de vaca seca para enrofloxacina (OR=2.111) e tetraciclina (OR=2.075). Os microrganismos mais frequentemente isolados foram Staphylococcus coagulase negativa e S. aureus. Os testes de susceptibilidade realizados para as espécies de Staphylococcus spp. e Streptococcus spp. apresentaram alta susceptibilidade para a maioria dos antimicrobianos testados. Com exceção de Streptococcus agalactiae para ampicilina e sulfatrimetropin e os isolados de S. dysgalactiae para tetraciclina e clindamicina. A maioria dos Staphylococcus spp. e Streptococcus spp. não apresentaram perfil de multirresistência. Nenhum dos isolados de Staphylococcus spp. fenotipicamente resistentes a oxacilina/meticilina apresentaram o gene mecA. O maior fator de risco associado à susceptibilidade de S. aureus foi em relação à tetraciclina, penicilina, eritromicina e ampicilina para o não envio de amostras para cultura e antibiograma. Dois fatores de risco importantes identificados foram relacionados à ampicilina, ceftiofur, gentamicina, oxacilina e penicilina para o tratamento de mastite clínica e à enrofloxacina e tetraciclina para o tratamento de vaca seca. / The aims of this study were: a) to evaluate the frequency of mastitis pathogens in commercial dairy herds, b) to determine the antimicrobial susceptibility of Staphylococcus spp. and Streptococcus spp. isolated from subclinical mastitis c) to evaluate the profile of multidrug resistance of Staphylococcus spp. and Streptococcus spp. d) to detect the mecA gene in Staphylococcus spp. resistant to oxacillin / methicillin, e) to evaluate the association between management practices and treatment of mastitis, and antimicrobial susceptibility of Staphylococcus aureus isolates from dairy herds. Thirteen dairy herds were selected from a total of 60 dairy farms in the region of Pirassununga / SP. Questionnaires formulated previously were answered by dairy farmers to evaluate the association between mastitis treatment practices and antimicrobial susceptibility. A total of 1,069 composite samples of milk from all herds were collected for culture and identification of pathogens, susceptibility testing and mecA gene detection, over 24 months in four periods. The susceptibility tests were performed in all isolates of Staphylococcus spp. and in 50% of Streptococcus spp. randomly selected. The antimicrobials tested were ampicillin 10mg; 2&micro;g clindamycin, penicillin 1mg; ceftiofour 30&micro;g; gentamicin 10mg; sulfatrimetropin 25&micro;g, 5&micro;g enrofloxacin; 300&micro;g sulfonamide, tetracycline 30&micro;g; oxacillin 1mg; 30&micro;g cephalothin and erythromycin 5&micro;g. All Staphylococcus spp. that were resistant to oxacillin/methicillin in the susceptibility tests were investigated for the presence of mecA gene. Among the isolated bacteria, CNS was the most prevalent (28.6%), followed by S. aureus (27.8%) and Corynebacterium spp. (10.9%). The antimicrobial susceptibility of isolates of S. aureus was 95.23% (erythromycin), 93.33% (cephalothin) and 65.71% (ampicillin). The antimicrobial susceptibility of isolates of coagulase-negative Staphylococcus (CNS) was 93.33% (cephalothin), 89.91% (erythromycin) and 62.03% (ceftiofur). Among strains of coagulase positive Staphylococcus (CPS), the antimicrobial susceptibility was 93.33% (erythromycin), 91.11% (clindamycin and sulfonamide). The antimicrobial susceptibility of the strains of Streptococcus agalactiae was 38.46% (ampicillin) and 50% (sulfatrimetropin) and isolates of S. dysgalactiae were susceptible to tetracycline and clindamycin (19.44% to 47.22%). The multidrug resistance was higher among isolates of CNS (20.3%) and Staphylococcus aureus (15.7%). The mecA gene was not detected in any of Staphylococcus spp isolates. There was an association between variables for the following antimicrobials: a) treatment of clinical mastitis: ampicillin (P = 0.0055), ceftiofur (P = 0.0481), sulfatrimetropin (P = 0.0293), sulfonamide (P = 0.0043) and tetracycline (P = 0.0058); and sending samples for culture and antibiogram: ampicillin (P = 0.0032), tetracycline (P = <0.0001). Major risk factors for antimicrobial susceptibility of S. aureus were not submitting samples for culture and antibiogram for tetracycline (OR = 6.012), penicillin (OR = 4.687), erythromycin (OR = 3.059) and ampicillin (OR = 2.571), treatment of clinical mastitis: ampicillin (OR = 2.178), ceftiofur (OR = 1.956), gentamicin (OR = 1.668), oxacillin (OR = 1.132) and penicillin (OR = 1.261); and dry cow therapy: enrofloxacin (OR = 2.111) and tetracycline (OR = 2.075). The most frequent organisms isolated were coagulase negative Staphylococcus and S. aureus. The susceptibility tests performed for the species of Staphylococcus spp. and Streptococcus spp. showed high susceptibility to most antimicrobials tested. With the exception of Streptococcus agalactiae to ampicillin and sulfatrimetropin and isolates of S. dysgalactiae to tetracycline and clindamycin. Most Staphylococcus spp. and Streptococcus spp. did not show multidrug resistance profile. None of Staphylococcus spp. phenotypically resistant to oxacillin / methicillin showed the mecA gene. The major risk factor associated with susceptibility of S. aureus to tetracycline, penicillin, erythromycin and ampicillin was not sending samples for culture and sensitivity. Two important risk factors have been identified related to ampicillin, ceftiofur, gentamicin, penicillin and oxacillin for treatment of clinical mastitis and enrofloxacin and tetracycline for the treatment of dry cow dry cow therapy.

A resistência bacteriana é responsável perante o fracasso no tratamento de infecções com agentes quimioterápicos. São necessárias novas alternativas para controlar estes micro-organismos. Entre essas alternativas estão plantas utilizadas tradicionalmente na medicina popular. O presente trabalho avaliou a eficiência dos extratos etanólicos e acetonicos de folhas de Cecropia pachystachya e Curatella americana com atividade antibacteriana in vitro em cepas de Staphylococcus aureus isolado de caso de mastite bovina. Os extratos de C. pachystachya e C. americana apresentam MIC de 2,5 mg.mL-1. O composto isolado de C. pachystachya denominado EEB2 apresentou actividade bactericida para uma concentração de 1,25 mg.mL-1. Estes resultados demonstram que os extratos de C. pachystachya e C. americana contém compostos anti-bacterianos. / Bacterial drug resistance is responsible for the failure of the treatment of infection using chemotherapeutic agents. Thus, new approaches are necessary for the control of these microorganisms. Included among these alternatives are several plants that are traditionally used in folk medicine. Therefore, the aim of this study was to evaluate the antibacterial activity of the ethanolic and acetone extracts of leaves of Cecropia pachystachya and Curatela americana in vitro against S. aureus bacteria isolates from cases of bovine mastitis. The extracts from C. pachystachya and Curatela americana had a MIC of 2.5 mg.mL-1. The compound isolated from C. pachystachya called EEB2 showed bactericidal activity at a concentration of 1.25 mg.mL-1. These results demonstrate that the extracts of C. pachystachya and C. americana contains antibacterial compounds.

Staphylococcus spp. é uma das principais causas da mastite bovina, onde o uso de antimicrobianos tem sido comprometido por mecanismos de resistência bacteriana e geração de resíduos que alteram a qualidade e segurança alimentar do leite e derivados. Foi avaliada a atividade in vitro da nisina (NS), do brometo de dioctadecildimetilamônio (DDA) e do complexo NS/DDA contra Staphylococcus spp. resistentes isolados de mastite bovina. A CBM50 da nisina e DDA foi 50 e 4&#956;g/mL, respectivamente, enquanto que a CBM50 do complexo NS/DDA foi 3/2&#956;g/mL, com efeito parcialmente sinérgico. O estudo de time-kill revelou redução de 3 log10 UFC/mL após uma hora de interação entre NS/DDA e a bactéria. A microscopia de fluorescência confirmou uma perda da viabilidade após 6 horas de interação. A interação NS/DDA resultou na formação de nanopartículas (148,5 nm) catiônicas (+8,84 mV) cuja interação com a superfície bacteriana negativa (-27,32 mV) resultou em ação bactericida. NS/DDA pode ser uma alternativa promissora contra Staphylococcus spp. resistentes isolados de mastite bovina. / Staphylococcus spp. is a major cause of bovine mastitis, where the use of antimicrobials has been compromised by bacterial resistance mechanisms and waste generation that change the food quality and safety of milk and dairy products. The in vitro activity antibacterial was evaluated of the nisin (NS), of the dioctadecyldimethylammonium bromide (DDA) and of the NS/DDA complex against drug-resistant Staphylococcus spp. isolated from bovine mastitis. The CBM50 of nisin and DDA were 50 and 4&#956;g/ml, respectively, while the CBM50 NS/DDA complex was 3/2mg/mL, with partially synergistic effect. The time-kill study showed reduction of 3log10 CFU/mL after an hour of interaction between NS/DDA and bacteria. Fluorescence microscopy confirmed a loss of viability after 6h of interaction. NS/DDA interaction resulted in formation of nanoparticles (148.5 nm) cationic (+8.84 mV) which interact with negative bacterial surface (-27.32 mV) resulted in bactericidal activity. NS/DDA may be a promising alternative against drug-resistant Staphylococcus spp. isolated from bovine mastitis.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-09T15:48:50Z No. of bitstreams: 1 Milena da Silva Albuquerque.pdf: 915379 bytes, checksum: dd414d9f832cb823db0efc59b06ce1fb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T15:48:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Milena da Silva Albuquerque.pdf: 915379 bytes, checksum: dd414d9f832cb823db0efc59b06ce1fb (MD5) Previous issue date: 2014-12-17 / The objective of this work was to investigate the occurrence of encoding staphylococcal enterotoxin (sea, seb, sec and seg) genes and the toxin gene 1 of Toxic Shock Syndrome (tst) from Staphylococcus aureus, coming from mastitis cases bovine in the micro region of Garanhuns, State of Pernambuco. 93 isolates from Staphylococcus aureus were analyzed, which were obtained from milk samples from cows with clinical mastitis and subclinical from 17 properties in 11 municipalities of the Micro Region of Garanhuns, State of Pernambuco. For the molecular characterization of the species Staphylococcus aureus, one of the Polymerase Chain Reaction (PCR) was performed in order to identify the presence of the nuc gene, and to the molecular characterization of enterotoxins, and Staphylococcal toxin Toxic Shock Syndrome. Specific genes were identified: sea, seb, sec, seg and tst. 93 genes were analyzed and we observed the presence of enterotoxigenic gene in 20 (21.6%) samples, of which 11 (55.0%) were positive for tst gene, seven (35.0%) for the sec gene two (10.0%) for the seg gene. 20 isolates amplified segments to the presence of the sec, seg and tst genes. 16 of these (80.0%) were positive for only one gene, and four (20.0%) were positive for both genes (tst and sec). 17 properties were studied, of which seven (41.2%) had positive cultures for at least one of the genes sec, seg and tst. This was the first hit record of encoding gene of the toxin of toxic shock syndrome in mastitis cows milk samples in the state of Pernambuco. Since there was a variation in the distribution of sec, seg and tst genes in strains from different property, it can be inferred that there is genotypic variation in S. aureus strains that cause bovine mastitis. / Objetivou-se com este trabalho pesquisar a ocorrência de genes codificadores de enterotoxinas estafilocócicas (sea, seb, sec e seg) e do gene da toxina 1 da síndrome do choque tóxico (tst) a partir de isolados de Staphylococcus aureus procedentes de casos de mastite bovina na microrregião Garanhuns, estado de Pernambuco. Foram analisados 93 isolados de Staphylococcus aureus obtidos a partir de amostras de leite de vacas com mastite clínica e subclínica, provenientes de 17 propriedades localizadas em 11 municípios da microrregião Garanhuns, no estado de Pernambuco. Para a caracterização molecular da espécie Staphylococcus aureus, foi realizada uma Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) visando a identificação pela presença do gene nuc, assim como para a caracterização molecular das Enterotoxinas Estafilocócicas e da toxina da Síndrome do Choque Tóxico. Foram identificados os genes específicos sea, seb, sec, seg e tst. Dos 93 isolados analisados, observou-se a presença de genes enterotoxigênicos em 20 (21,6%) amostras, das quais 11 (55,0%) foram positivas para o gene tst, sete (35,0%) para o gene sec, duas (10,0%) para o gene seg. Dentre os 20 isolados que amplificaram segmentos para a presença dos genes sec, seg e tst, 16 (80,0%) foram positivos apenas para um gene e quatro (20,0%) foram positivos para dois genes (sec e tst). Das 17 propriedades estudadas, sete (41,2%) apresentaram amostras positivas para pelo menos um dos genes sec, seg e tst. Este foi o primeiro registro de ocorrência do gene codificador da toxina da síndrome do choque tóxico em amostras de leite de vacas com mastite no estado de Pernambuco. Como houve uma variação na distribuição dos genes sec, seg e tst nas cepas procedentes de diferentes propriedades, pode-se inferir que há uma variação genotípica nas cepas de S. aureus que causam mastite bovina.