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Influência do espaçamento, altura de corte e idade de primeiro corte na produtividade de capim santo. / Influence of the spacing, the cut height and the ideal age of first cut in the lemmon grass productivity.Vieira, Aurilene Vasconcelos January 2006 (has links)
VIEIRA, A. V. Influência do espaçamento, altura de corte e idade de primeiro corte na produtividade de capim santo. 2006. 37 f. Dissertação (Mestrado em Agronomia/Fitotecnia) - Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2006. / Submitted by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2014-06-27T21:42:32Z
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Previous issue date: 2006 / The use of the medicinal plants is one of the oldest weapons maids for the treatment of the human illnesses and it is very already known regarding its use on the part of the popular wisdom. The sacred grass (Cymbopogon citratus (DC.) Stapf) it is a medicinal and aromatic plant, belonging to the family Poaceae. This work had as objective determines the planting spacing, the cut height and the ideal age of first cut, seeking to obtain the largest income in essential oil. For this, was settled in December of 2004, an experiment, in the area of Experimental Farm of the valley of Curu (F.E.V.C.), belonging to the Agrarian Sciences Center of the Federal University of Ceará, located in the municipal district of Pentecoste/Ce. The referred experiment was composed of the following treatments: three spacings (0,5m x 0,5m; 0,5m x 0,8m and 0,8m x 0,8m); three different times from first cut (04, 06 and 08 months) and two cut heights (15cm and 30cm of the soil), with 04 repetitions, being accomplished more two cuts in each treatment in intervals of 04 months. The used experimental delineation was in blocks at random in factorial outline 3 x 3 x 2. The obtained data were transformed for productions by hectare. As for the cut age, the best production of essential oil was obtained to the six months, the same if not verifying for the matter dries that had continuous growth. The begin of the crop to the six months after the planting in the 0,5m spacing between plants and 0,5m among rows promoted the largest production of dry matter and of the essential oil of sacred grass. About the cut height, as much the biomass production as the income of essential oil they were higher in the height of 15cm of the soil. Therefore, the C. citratus should be cultivated in the spacing 0,50m x 0,50m, picked the height of 15cm of the soil, with first harvest to the 6 months of age and consecutive cuts every four months to obtain the largest income in essential oil. / A utilização das plantas medicinais é uma das mais antigas armas empregadas para o tratamento das enfermidades humanas e muito já se conhece a respeito de seu uso por parte da sabedoria popular. O capim santo (Cymbopogon citratus (DC.) Stapf) é uma planta medicinal e aromática, pertencente à família Poaceae. Este trabalho teve como objetivo determinar o espaçamento de plantio, a altura de corte e a idade ideal de primeiro corte, visando obter o maior rendimento em óleo essencial. Para tanto instalou-se em dezembro de 2004, um experimento, na área da Fazenda Experimental do Vale do Curu (F.E.V.C.), pertencente ao Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal do Ceará, localizada no município de Pentecoste/Ce. O referido experimento era composto dos seguintes tratamentos: três espaçamentos (0,5m x 0,5m; 0,5m x 0,8m e 0,8m x 0,8m); três épocas distintas de primeiro corte (04, 06 e 08 meses) e duas alturas de corte (15cm e 30cm do solo), com 04 repetições, sendo realizado mais dois cortes em cada tratamento em intervalos de 04 meses. O delineamento experimental utilizado foi em blocos ao acaso em esquema fatorial 3 x 3 x 2. Os dados obtidos foram transformados para produções por hectare. Quanto à idade de corte, a melhor produção de óleo essencial foi obtida aos seis meses, o mesmo não se verificando para a matéria seca que teve crescimento contínuo. O inicio da colheita aos seis meses após o plantio no espaçamento de 0,5m entre plantas e 0,5m entre fileiras promoveu a maior produção de matéria seca e do óleo essencial de capim santo. No que se refere à altura de corte, tanto a produção de biomassa quanto o rendimento de óleo essencial foram mais elevados na altura de 15cm do solo. Portanto, o C. citratus deve ser cultivado no espaçamento 0,50m x 0,50m, colhido a altura de 15cm do solo, com primeira colheita aos 6 meses de idade e cortes consecutivos a cada quatro meses para se obter o maior rendimento em óleo essencial.
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Estudo do efeito anti-inflamatório da Polygala molluginifolia St.-Hil. & Moq no modelo da pleurisia induzida pela carragenina em camundongosSilva, Fábio Arruda e January 2014 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:59:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2014 / A Polygala molluginifolia é uma planta nativa do sul do Brasil popularmente chamada de cânfora. Plantas do gênero Polygala têm sido usadas na medicina tradicional para o tratamento de diferentes patologias, inclusive doenças inflamatórias. O objetivo deste trabalho foi investigar o efeito anti-inflamatório do extrato bruto, frações e compostos obtidos da espécie Polygala molluginifolia (Polygalaceae) no modelo da pleurisia induzida pela carragenina em camundongos. O material vegetal da Polygala molluginifolia foi submetido a extração por maceração com etanol 96% para a obtenção do extrato bruto (EB). O EB foi submetido a procedimentos cromatográficos em silica gel para a obtenção de diferentes frações, dentre elas as frações aquosa (Aq), acetato de etila (AcOEt) e hexano (Hex). O composto 1 (5,3',4'-trihidroxi-6",6"-dimetilpirano [2",3":7,6] isoflavona) (Iso), foi isolado da fração AcOEt e o composto 2 (Rutina) (Rut), foi isolado da fração Aq e foram identificados por meio de espectroscopia de 1H e 13C NMR e quantificados por meio de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE-UV). A avaliação do efeito anti-inflamatório foi realizada por meio da contagem de leucócitos, neutrófilos e concentrações de exsudato. Foram utilizadas técnicas padronizadas descritas na literatura para verificar a atividade das enzimas mieloperoxidase (MPO) e adenosina-desaminase (ADA) e concentrações de nitrito/nitrato (NOx). Neste estudo também foi investigado o efeito da Polygala molluginifolia sobre a concentração e expressão do RNA mensageiro das citocinas fator de necrose tumoral alfa (TNF-?) e interleucina-1 beta (IL-1?), utilizando as metodologias de enzima imunoensaio (ELISA) e a reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-qPCR) e sobre a via de sinalização do fator nuclear kappa B (NF-kB), mais especificamente sobre a fosforilação da subunidade p65. Os parâmetros inflamatórios foram avaliados 4 horas após a indução da pleurisia. Para todos os experimentos, a dexametasona (Dex, 0,5 mg/kg, i.p.) foi utilizada como fármaco de referência anti-inflamatória. A análise estatística utilizada foi o teste de variância ANOVA, complementado pelo teste de Neuman-Keuls, e quando necessário, foram realizados teste t de Student e correlação de Pearson. Valores de p < 0,05 foram considerados significativos. O EB, as as frações Aq, AcOEt e Hex, além dos compostos Iso e Rutina, foram capazes de reduzir a migração de leucócitos, as custas de neutrófilos e a exsudação formada na cavidade pleural (p < 0,05), além das atividades de: MPO (p < 0,01), ADA (p < 0,001). As concentrações de NOx também foram inibidas (p < 0,001), exceto quando os animais foram tratados com a rutina. Além disso, houve redução na concentração da TNF-? (p < 0,01) e IL-1? (p < 0,001). Os compostos isolados (Iso e Rutina) foram capazes de inibir a transcrição do RNAm do TNF-? (p < 0,01) e IL-1? (p < 0,001) além de reduzir significamente a fosforilação da subunidade p65 do NF-kB (p < 0,001). Finalmente, foi verificada uma correlação positiva entre a inibição na migração celular e exsudação com a capacidade de ambos compostos em reduzir a fosforilação da p65. Os resultados demonstraram que a P. molluginifolia tem importante ação anti-inflamatória e este efeito é devido, pelo menos em parte, a presença de Iso e Rutina. Além disso, esse efeito parece estar relacionado a capacidade dos compostos isolados interferirem na via de sinalização do NF-kB.<br> / Abstract : The Polygala molluginifolia is a plant native to southern Brazil that is popularly called "canfora". This study was conducted to investigate the anti-inflammatory activity of Polygala molluginifolia (Polygalaceae) on the mouse pleurisy model induced by carrageenan. The whole Polygala molluginifolia plant material was extracted by maceration with 96% ethanol. The crude hydroalcoholic extract (CE) was subjected to chromatographic procedures to produce derivate fractions, including aqueous (Aq), ethyl acetate (AcOEt), and hexane (Hex) fractions. Compound 1 (5,3',4'-trihydroxy-6?,6?-dimethylpyrano [2?,3?:7,6] isoflavone) (Iso), which was isolated from the AcOEt fraction, and Compound 2 (Rutin) (Rut), which was isolated from the Aq fraction, were identified using 1H and 13C NMR spectroscopy and quantified using an HPLC apparatus. In this experimental protocol, swiss mice were used in the murine carrageenan-induced pleurisy model previously described by Saleh et al. (1996). The anti-inflammatory effect was evaluated by total leukocyte and neutrophil count, exsudate concentration, myeloperoxidase (MPO) and adenosine-deaminase (ADA) activities, nitrite/nitrate concentrations (NOx), concentrations and mRNA expression of tumor necrosis factor alpha (TNF-?? and interleukin 1-beta (IL-1). In addition, we studied the effect of Polygala molluginifolia isolated compounds on the nuclear factor kappa B (NF-?B). The inflammatory parameters were evaluated 4 hours after pleurisy induction. Dexamethasone (Dex, 0,5 mg/kg, i.p.) was used as reference anti-inflammatory drug. For statistical analysis were used the variance test (ANOVA), complemented by Newman-Keuls and when required, Student's t test and Pearson's coeficient. p < 0.05 was considered significant. The CE, Aq, AcOEt, and Hex fractions, and the isolated compounds Iso and Rut were able to reduce cell migration and exudation (p < 0.05). Furthermore, the plant material also decreased the MPO (p < 0.01) and ADA (p < 0.001) activities and the nitric oxide (NOx) (p < 0.001), TNF-a (p < 0.001), and IL-1ß (p < 0.001) levels. In addition, Iso and Rut reduced the TNF-a (p < 0.01) and IL-1ß (p < 0.001) mRNA expression levels and significantly decreased NF-?B p65 phosphorylation (p < 0.001). Finally, was observed a positive correlation on leukocyte migration and exudate levels with inhibition upon p65 phosphorilation. The results show that P. molluginifolia has a significant anti-inflammatory action and that this effect is due, at least in part, to the presence of Iso and Rut in large amounts. Moreover, this effect was found to be closely related to the inhibitory effects of the isolated compounds on the NF-kB pathway.
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Plantas medicinais e alimentícias na Mata Atlântica e CaatingaLiporacci, Heitor Suriano Nascimento 05 February 2015 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia de Fungos, Algas e Plantas, Florianópolis, 2014 / Made available in DSpace on 2015-02-05T21:02:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1
329004.pdf: 4729755 bytes, checksum: 6c7e1f7e8fa0bdf753cfa38a524dffa1 (MD5) / Grande parcela da população mundial depende diretamente de recursos vegetais medicinais e alimentícios para suprir necessidades, estando as plantas medicinais e alimentícias dentre as temáticas mais investigadas pela Etnobotânica na América Latina. O objetivo geral do trabalho foi o de compilar as espécies conhecidas e utilizadas para fins medicinais e alimentícios citadas nos trabalhos de etnobotânica realizados em áreas pertencentes ao território original da Mata Atlântica e Caatinga no Brasil. Foram selecionados artigos científicos por meio dos portais de busca Web of Science e Scopus, utilizando-se as palavras chaves "Ethnobotany" + "Brazil", adicionados pela busca por artigos nas principais revistas brasileiras com abertura para trabalhos de etnobotânica. As fitofisionomias de cada bioma foram classificadas com a utilização de mapas e a colaboração de especialistas; a classificação da forma de vida, origem das espécies, nomenclatura botânica e casos de sinonímias utilizamos a base de dados da Flora do Brasil (JBRJ), consulta a especialistas e literaturas complementares. Foram selecionados 90 artigos, sendo 57 para a Mata Atlântica e 33 para a Caatinga. Há proporcionalmente menos artigos sobre plantas alimentícias do que sobre plantas medicinais, com predomínio de trabalhos em áreas rurais e urbanas em ambos os biomas. As fitofisionomias Floresta Ombrófila Densa e Caatinga Arbustivo-Arbórea são as mais representadas em cada bioma; a região sudeste abrigou o maior número de trabalhos realizados na Mata Atlântica, e o estado de Pernambuco foi o predominante na Caatinga. Várias espécies compiladas são utilizadas para mais de uma finalidade. Há uma baixa similaridade florística entre as 842 espécies medicinais compiladas para a Mata Atlântica e 591 para a Caatinga. A representatividade das famílias botânicas das espécies medicinais revela o compartilhamento de famílias importantes, devido a um conjunto de fatores como teor de compostos secundários, adaptabilidade das espécies e relação com a diversidade estimada das famílias em escalas ecossistêmicas e mundiais. As folhas são as partes mais conhecidas e usadas para finalidades medicinais em ambos os biomas, porém o uso da casca do caule assume maior destaque de uso em áreas de Caatinga, possivelmente pela influência do período sazonal de estiagem prolongado, mas fatores extra-ambientais podem também colaborar no predomínio e destaque de determinada parte usada. Ambos os biomas tiveram as ervas e as plantas de pequeno porte como predominantes no uso para finalidades medicinais. Não houve diferenças entre as proporções de espécies nativas e exóticas entres os biomas. É evidente a amplitude de 14 abordagens possibilitada por meio de uma revisão bibliográfica, reforçando a sua importância no desenvolvimento e avanço da etnobotânica.<br> / Abstract: A large portion of the world's human population depends directly on medicinal and food plant resources in order to meet their needs, where medicinal and edible plants being among the most investigated by Ethnobotany in Latin America. The general objective of this study was to create a compilation of species known and used for medicinal and food purposes cited in ethnobotanical studies in areas of original Atlantic Forest and Caatinga in Brazil. Scientific articles were selected through search engines Web of Science and Scopus, utilizing the keywords "Ethnobotany" + "Brazil", as well as a search for articles within the main Brazilian journals that are open to ethnobotanical works. Maps and collaboration with specialists were used to classify vegetation types; the database Flora of Brazil (JBRJ), collaboration with experts, and complimentary literature was used to classify life forms, species origin, botanical nomenclature, and synonymy cases. Ninety articles were selected, 57 for the Atlantic Forest and 33 for the Caatinga. There are proportionately fewer articles about edible plants than medicinal plants, with predominance of studies in rural areas and urban areas in both biomes. The vegetation types Dense Rainforest and Shrub-Tree Caatinga obtained the highest number of studies in the Atlantic Forest and Caatinga, respectively; the southeast region harbored the largest number of studies for the Atlantic Forest, and the state of Pernambuco was predominant for the Caatinga. Various species are used for more than one purpose. There was low floristic similarity regarding the 842 medicinal species for the Atlantic Forest and 591 for the Caatinga. The medicinal botanical families representativeness reveals the sharing of important families in both biomes, due to a number of factors such as secondary compounds content, species adaptability, and relation with the estimated family diversity at ecosystem and global scales. The leaves stood out as the most popular parts used for medicinal purposes both in the Caating and Atlantic Forest, however, the use of the bark has a greater prominence in areas of Caatinga, possibly because of the seasonal period of prolonged drought present in semi-arid areas, with influence of extra-environmental factor as well. Life form both biomes had herbs and small plants as predominantly used for medical purposes. There were no differences between the proportions of native species and exotic species between biomes. The range of approaches made possible by literature reviews is evident, emphasizing its importance in the development and advancement of ethnobotany.
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Caracterização dos efeitos imunomodulador e antiviral de uma espécie da família marcgraviaceae em modelo in vitro de infecção em linhagem de hepatócitos HUH-7 pelo vírus dengue-2Fialho, Luciana Gomes January 2012 (has links)
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Previous issue date: 2015-05-21 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Várias doenças relacionadas à desregulação do sistema imunológico têm sido, há muito tempo, tratadas com a medicina fitoterápica, considerando que vários efeitos terapêuticos podem ser induzidos pela modulação de citocinas. Entretanto, não são encontrados relatos científicos do uso de plantas medicinais na dengue. A identificação de compostos com propriedades imunomoduladoras é extremamente importante para o tratamento da dengue, uma vez quea gravidade da doença está relacionada a uma produção exacerbada da resposta imunológica, principalmente, de citocinas que podem levar à distúrbios hemodinâmicos e de coagulação. A família Marcgraviaceae, pertencente à flora brasileira, tem sido avaliada quanto às suas atividades biodinâmicas, devido ao seu quase completo ineditismo químico e farmacológico. A atividade anti-inflamatória dessa família tem sido descrita por alguns autores. Assim sendo, o objetivo principal do trabalho foi caracterizar os potenciais antivirais e imunomoduladores de uma espécie de Marcgraviaceae. Foi estabelecido e utilizado um modelo in vitrocultivando uma linhagem de hepatócitos \2013 as células HuH-7- que foram infectadas com DENV-2
As células HuH-7 infectadas foram incubadas, por 48 horas, com uma fração butanólica e 4 subfrações (26-30, 40-43, 89-98 e 99-134) derivadas de um extrato bruto etanólico de folhas de uma espécie de Marcgraviaceae. As amostras passaram por uma triagem, a qual identificou a atividade antiviral das mesmas, através da detecção do antígeno viral (DENV Ag) nas células HuH-7, pela citometria de fluxo e a atividade imunomoduladora, através da dosagem de MIF, por ELISA, no sobrenadante das culturas infectadas e tratadas. Os resultados da triagem indicaram que a fração butanólica e sua subfração 89-98 apresentaram ambasas atividades, sendo selecionadas para os demais estudos de caracterização dos mecanismos de ação. Após a seleção, a atividade antiviral destas frações/subfrações foram avaliadas quanto à produção de óxido nítrico (NO), através dareação de Griess, e detecção da proteína viral NS1, através de ELISA. A ação imunomoduladora foi avaliada através da dosagem de IL-8 também por ELISA. Nossosresultados demonstraram que a fração butanólica e sua subfração 89-98, foram capazes de reduzir a taxa de produção de NS1, além de estimular a produção de NOpelas células HuH-7
Além disso, a subfração 89-98 também reduziu a produção de IL-8. Em conclusão, acreditamos que estas frações/subfrações sejam boascandidatas para o desenvolvimento de fitoterápicos a serem usados no tratamento da dengue. Considerando que o organismo é capaz de controlar ainfecção por DENV em poucos dias e que as reações imunológicas possuem um papel importante na patogênese da dengue, o estudo de fatores imunomoduladores é uma abordagem de investigação inovadora e relevante / Various diseases related to immunodesregulation have been long treated by herbal
medicine, considering that several therapeutical effects are observed in the
modulation of cytokines. However, there are few reports regarding to the use of
medicinal plants in dengue. The identification of compounds with immunomodulatory
properties is extremely important for the treatment of dengue, since the disease
severity is related to an exacerbated production of the immunological response,
mainly cytokines that may lead to hemodynamic and coagulation disorders.
Marcgraviaceae, a family of the Brazilian flora, has been evaluated for its biodynamic
activities, due to its almost complete chemical and pharmacological uniqueness. The
anti-inflammatory activity of this family has been described by some authors.
Therefore, the aim of this work was to characterize the antiviral and
immunomodulator potentials of a Marcgraviaceae species. It was established and
used an in vitro model cultivating an hepatocyte cell line – HuH-7 cells – that were
infected with DENV-2. Infected, HuH-7 cells were incubated with a buthanolic
fraction and four subfractions ((26-30, 40-43, 89-98 e 99-134) derived from a crude
ethanol leave extract from a Marcgraviaceae species, for 48 hours. The samples
went through a screening that revealed their antiviral activity, by detection of viral
antigen (Ag DENV) in HuH-7 cells, using flow cytometry.The immunomodulator
activity was measured by ELISA detecting MIF levels in the supernatant of infected
and treated cultures. The results of screening indicated that the buthanolic fraction
and its subfraction 89-98 presented both activities, being selected for the other
studies to characterize the mechanisms of action. After selection, the antiviral activity
of these fractions/subfractions were evaluated for the production of nitric oxide (NO)
by Griess reaction, and viral protein NS1 detection, by ELISA. The immunomodulator
action was evaluated by IL-8 measurement by ELISA as well. Our results
demonstrated that the buthanolic fraction and its subfraction 89-98 were able to
reduce NS1 production ratio, besides stimulating NO production by HuH-7 cells.
Furthermore, the 89-98 subfraction also reduced IL-8 production. In conclusion, we
believe that these are good candidates for the development of herbal medicines for
the treatment of dengue. Considering that the host is able to control infection by
DENV in a few days and that immune responses develop an important role in the
pathogenesis of dengue, the study of immunomodulatory factors is a relevant
approach in research.
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Análise da vigilância sanitária de fitomedicamentos na cidade do Recife / Analysis of health surveillance from herbal products in RecifeSilva, Fabiana Barbosa do Nascimento January 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / A ação e intervenção da Vigilância Sanitária (VISA) frente ao risco estão pautadas em legislações, no Brasil a VISA está descentralizada e atua nos três níveis de governo através do Sistema Nacional de Vigilância Sanitária (SNVS), coordenado pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA). Dentre os produtos sujeitos a VISA encontram-se os de origem vegetal chamados de fitomedicamentos, e com o objetivo de entender a VISA nestes produtos em Recife/PE a partir da descrição do marco regulatório internacional e nacional, comparando-os; bem como da análise de processos administrativos originados de irregularidades encontradas nos produtos comercializados em Recife/PE, de 2009 a 2012, e a identificação da existência de lacunas nas normas que dificultam a atuação da VISA nesta cidade foi motivo do estudo, através da análise qualitativa de documental. Observou-se a existência nas normas brasileiras de 11 formas diferentes de classificação dos produtos (de alimento a medicamento); Quando comparado a Argentina, Bolívia, Estados Unidos, México, Paraguai, Uruguai e Venezuela, o Brasil apresentou o maior número de normas sobre o tema (75), com 60 relacionadas a produção. Em Recife, de 2009 a 2012, ocorreram 11 processos de autuação relacionados a fitomedicamentos, dos quais 8 estavam relacionados a rotulagem dos produtos. A VISA local utilizou-se na maioria dos documentos de normas não específicas, com apenas um indicativo de notificações dos produtos irregulares a ANVISA, no Brasil a denominação fitomedicamentos inexistente nas legislações sanitárias, e existe em manual técnico da área de inovação e produção do Ministério da Saúde. As conclusões indicam que existiu uma baixa intervenção da VISA em Recife sobre fitomedicamentos irregulares, possivelmente, existe uma falha no SNVS que permite a chegada de produtos irregulares no comércio, e não é a quantidade de norma existentes na regulação que diminui o risco da população a exposição de produtos irregulares.
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Avaliação de diferentes técnicas de extração do glicosídio fenólico bioativo amburosídio A a partir da casa do caule de camuru (Amburana cearensis) / Evaluation of different techniques for extraction of bioactive phenolic glycoside amburoside A from the stem bark of Cumaru (Amburana cearensis)Lima, Marcelo Victor 05 February 2014 (has links)
LIMA, M. V. Avaliação de diferentes técnicas de extração do glicosídio fenólico bioativo amburosídio A a partir da casa do caule de camuru (Amburana cearensis). 2014. 56 f. Dissertação (Mestrado em Engenharia Química) - Centro de Tecnologia, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by Marlene Sousa (mmarlene@ufc.br) on 2015-02-25T16:51:05Z
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Previous issue date: 2014-02-05 / Studies with extracts of vegetable origin have grown tremendously in recent years due to increased global demand for medicinal purposes. Among the raw materials used, the stem bark of A. cearensis A. Smith C has been studied because of its use to combat respiratory diseases. Compounds present in the bark, such as isocampferídio, kaempferol and amburosídio are responsible for the bronchodilator, analgesic and anti - inflammatory activity. In this context, the aim of this work is to optimize the extraction process of the present amburosídio A stem bark of A. cearensis. Initially, experiments were conducted to evaluate the effect of different processes ( Soxhlet , Maceration Dynamic and Ultrasound Assisted Extraction ) in extracting amburosídio A. Different solvents (water, ethanol and water + ethanol 1:1) were used. An experimental design was also performed to evaluate the influence of some variables (power and time) on the extraction and removal of sugars analyzed the extract by two processes: adsorption and fermentation. High Performance Liquid Chromatography coupled to Mass Spectrometry (HPLC -MS) was used to quantify the amount of the extracted amburosídio. According to the results, the extracts obtained by dynamic steeping process showed higher amounts of the compound. Extracts obtained by extraction Assisted Ultrasound showed concentration values close to that obtained by dynamic steeping. Extraction made with water + ethanol (1:1) showed greater amburosídio A content compared to other solvents. The variable power and power x time interaction were significant in Ultrasound Assisted Extraction process. Analyzing the relationship of the variables, the best condition found for amburosídio A Ultrasonic was 100% power for 6 minutes. The adsorption process was more efficient in the removal of sugar compared to the fermentation process. But both processes have reduced the concentration of amburosídio during removal of sugars. / Estudos com extrato de origem vegetal têm crescido muito nos últimos anos devido ao aumento da demanda mundial para fins medicinais. Dentre as matérias-primas utilizadas, a casca do caule de Amburana cearensis tem sido objeto de estudos devido sua utilização ao combate a doenças respiratórias. Compostos presentes na casca do caule, tais como, isocampferídio, campferol e amburosídio são responsáveis pela atividade broncodilatadora, analgésica e anti-inflamatória. Neste contexto, o objetivo deste trabalho consiste em otimizar o processo de extração de amburosídio A presente na casca do caule de Amburana cearensis. Inicialmente, conduziram-se experimentos para avaliar o efeito de diferentes processos (Soxhlet, Maceração Dinâmica e Extração Assistida por Ultrassom) na extração de amburosídio A. Diferentes solventes, (água, etanol e água + etanol 1:1) foram utilizados. Também foi realizado um planejamento experimental para avaliar a influência de algumas variáveis (Potência e Tempo) sobre a extração e analisado a remoção de açúcares do extrato por dois processos: adsorção e fermentação. Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplada a Espectrômetro de Massa (CLAE-MS) foi utilizada para quantificar o teor de amburosídio A extraído. De acordo com os resultados, os extratos obtidos pelo processo de maceração dinâmica apresentaram maiores quantidades do composto. Extratos obtidos por Extração Assistida por Ultrassom apresentaram valores de concentração próximos ao obtido por maceração dinâmica. Extração realizada com água + etanol (1:1) apresentou teor de amburosídio A maiores em relação aos outros solventes. As variáveis potência e interação potência x tempo foram significativas no processo de Extração Assistida por Ultrassom. Analisando a relação das variáveis, a melhor condição encontrada para obter amburosídio A por Ultrassom foi potência de 100% durante 6 minutos. O processo de adsorção mostrou-se mais eficiente, na remoção de açúcar, em relação ao processo de fermentação. Porém ambos os processos reduziram a concentração de amburosídio durante a remoção de açúcares.
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Influência do espaçamento, altura de corte e idade de primeiro corte na produtividade de capim santo. / Influence of the spacing, the cut height and the ideal age of first cut in the lemmon grass productivity.Vieira, Aurilene Vasconcelos 22 February 2006 (has links)
VIEIRA, Aurilene Vasconcelos. Influência do espaçamento, altura de corte e idade de primeiro corte na produtividade de capim santo. 2006. 38f. Dissertação(Mestrado em Agronomia/Fitotecnia)- Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2006. / Submitted by Maria Naires Souza (marianaires@ufc.br) on 2011-12-14T20:01:59Z
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Previous issue date: 2006-02-22 / The use of the medicinal plants is one of the oldest weapons maids for the treatment of the human illnesses and it is very already known regarding its use on the part of the popular wisdom. The sacred grass (Cymbopogon citratus (DC.) Stapf) it is a medicinal and aromatic plant, belonging to the family Poaceae. This work had as objective determines the planting spacing, the cut height and the ideal age of first cut, seeking to obtain the largest income in essential oil. For this, was settled in December of 2004, an experiment, in the area of Experimental Farm of the valley of Curu (F.E.V.C.), belonging to the Agrarian Sciences Center of the Federal University of Ceará, located in the municipal district of Pentecoste/Ce. The referred experiment was composed of the following treatments: three spacings (0,5m x 0,5m; 0,5m x 0,8m and 0,8m x 0,8m); three different times from first cut (04, 06 and 08 months) and two cut heights (15cm and 30cm of the soil), with 04 repetitions, being accomplished more two cuts in each treatment in intervals of 04 months. The used experimental delineation was in blocks at random in factorial outline 3 x 3 x 2. The obtained data were transformed for productions by hectare. As for the cut age, the best production of essential oil was obtained to the six months, the same if not verifying for the matter dries that had continuous growth. The begin of the crop to the six months after the planting in the 0,5m spacing between plants and 0,5m among rows promoted the largest production of dry matter and of the essential oil of sacred grass. About the cut height, as much the biomass production as the income of essential oil they were higher in the height of 15cm of the soil. Therefore, the C. citratus should be cultivated in the spacing 0,50m x 0,50m, picked the height of 15cm of the soil, with first harvest to the 6 months of age and consecutive cuts every four months to obtain the largest income in essential oil. / A utilização das plantas medicinais é uma das mais antigas armas empregadas para o tratamento das enfermidades humanas e muito já se conhece a respeito de seu uso por parte da sabedoria popular. O capim santo (Cymbopogon citratus (DC.) Stapf) é uma planta medicinal e aromática, pertencente à família Poaceae. Este trabalho teve como objetivo determinar o espaçamento de plantio, a altura de corte e a idade ideal de primeiro corte, visando obter o maior rendimento em óleo essencial. Para tanto instalou-se em dezembro de 2004, um experimento, na área da Fazenda Experimental do Vale do Curu (F.E.V.C.), pertencente ao Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal do Ceará, localizada no município de Pentecoste/Ce. O referido experimento era composto dos seguintes tratamentos: três espaçamentos (0,5m x 0,5m; 0,5m x 0,8m e 0,8m x 0,8m); três épocas distintas de primeiro corte (04, 06 e 08 meses) e duas alturas de corte (15cm e 30cm do solo), com 04 repetições, sendo realizado mais dois cortes em cada tratamento em intervalos de 04 meses. O delineamento experimental utilizado foi em blocos ao acaso em esquema fatorial 3 x 3 x 2. Os dados obtidos foram transformados para produções por hectare. Quanto à idade de corte, a melhor produção de óleo essencial foi obtida aos seis meses, o mesmo não se verificando para a matéria seca que teve crescimento contínuo. O inicio da colheita aos seis meses após o plantio no espaçamento de 0,5m entre plantas e 0,5m entre fileiras promoveu a maior produção de matéria seca e do óleo essencial de capim santo. No que se refere à altura de corte, tanto a produção de biomassa quanto o rendimento de óleo essencial foram mais elevados na altura de 15cm do solo. Portanto, o C. citratus deve ser cultivado no espaçamento 0,50m x 0,50m, colhido a altura de 15cm do solo, com primeira colheita aos 6 meses de idade e cortes consecutivos a cada quatro meses para se obter o maior rendimento em óleo essencial.
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Estudo dos efeitos cardiovasculares e hepáticos da trans-desidrocrotonina (t-DCTN), um diterpeno clerodano obtido do Croton cajucara Benth. (sacaca) / Studies on cardiovascular and hepatic effects of trans-dehydrocrotonin, a clerodane diterpene isolated from Croton cajucara benth (sacaca)Prado, Regilane Matos da Silva January 2005 (has links)
SILVA, Regilane Matos da. Estudo dos efeitos cardiovasculares e hepáticos da trans-desidrocrotonina (t-DCTN), um diterpeno clerodano obtido do croton cajucara benth (SACACA). 2005. 170 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) -Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2005. 170 f. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-09-06T13:39:44Z
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Previous issue date: 2005 / Croton cajucara Benth (Euphorbiaceae) is a popular medicinal plant in the Amazon region of Brazil for the treatment of liver and kidney disorders and also to lower blood cholesterol. The trans-dehydrocrotonin (t-DCTN), is the major clerodane diterpene isolated from the stem bark of Croton cajucara, that showed gastroprotective, hypoglycemic and hypolipidemic effects. Since drugs that possess pharmacological properties are often associated with contradictory cardiovascular and hepatic effects with possible cytoprotection or cytotoxicity properties, the present study aimed to examine the effects of t-DCTN (i) in the tests of lethality to Artemia sp and in primary cultures of mesencephalic and hepatic cells in vitro; (ii) on hepatotoxicity induced in vivo by acetaminophen or galactosamine/LPS in mice and (iii) on arterial blood pressure and heart rate in vivo, and on chronotropism and inotropism on isolated preparations of rat atria and aortic rings. The t-DCTN (0.3 to 300 Micromolar) demonstrated low toxicity to Artemia sp (LC50 of 670 ± 80 Micromolar), and manifested no per se cytotoxicity on primary cultures of mesencephalic cells but could effectively revert the reduced cell viability induced by neurotoxin, 6-OHDA (200 Micromolar). On the other hand, t-DCTN (0.3–300 Micromolar) displayed cytotoxicity similar to ethanol (50-400 Milimolar) in primary cultures of hepatocytes. It, however offered hepatoprotection against acetaminophen (500 mg/kg)-induced hepatotoxicity in mice, evidenced from biochemical parameters of hepatic glutathione, and malonaldehyde, and serum AST and ALT levels. Nevertheless, the histological scores in liver tissues were not significantly altered by t-DCTN pretreatment. t-DCTN pretreatment also offered protection against galactosamine/LPS-induced hepatotxcity through restoration of glutathione and reductions in serum AST and ALT levels. In pentobarbital sodium anesthetized normotensive rats, t-DCTN produced hypotensive and bradycardia responses in a dose-dependent manner. The hypotensive effect of t-DCTN (10 mg/kg) was not affected by atropine, propranolol or hexamethonium but was abolished by L-NAME. In isolated right atria, t-DCTN inhibited the spontaneous beating but it was unable to reduce the isoproterenol-induced increase in heart beat. The inotropism was unchanged in the presence of t-DCTN in isolated left atria. In isolated rat aortic rings, t-DCTN relaxed the tonic contraction induced by phenylephrine (1 Micromolar), which was abolished in endothelium denuded or in L-NAME treated tissues. t-DCTN possessed low toxicity to Artemia sp; is devoid of neurotoxicity to mesencephalic cells; either induced hepatotoxicity or hepatoprotection, depending on the models used, and further suggested a possible inhibitory action on cytocrhrome-P450. The hypotensive action of t-DCTN may possibly involve in part the nitric oxide release from endothelium, and in part a direct relaxant effect on vascular smooth muscle. Taken together the data available in literature with the present observations suggest a caution while extrapolating animal data for a promising therapeutic utility of t-DCTN especially in the treatment of hepatic disorders or diabetes associated pathologies. / Croton cajucara Benth. (Euphorbiaceae), planta medicinal da região Amazônica do Brasil, é usada no tratamento de desordens hepáticas, renais e hipercolesterolemia. A transdesidrocrotonina (t-DCTN), principal diterpeno clerodano isolado da casca do caule do Cróton cajucara, possui efeito gastroprotetor, hipoglicêmico e hilpolipidêmico. Uma vez que substâncias com esse perfil farmacológico são geralmente associadas a efeitos contraditórios sobre o sistema cardiovascular ou hepático com possíveis propriedades citoprotetora ou citotóxica, o presente estudo objetivou avaliar os efeitos da t-DCTN (i) no teste de toxicidade para Artemia sp e para cultura de células mesencefálicas primárias e células hepáticas in vitro; (ii) na toxicidade induzida in vivo por acetaminofeno ou galactosamina/LPS em camundongos e (iii) na pressão arterial média e freqüência cardíaca in vivo, e no cronotropismo e inotropismo em átrio isolado e anéis de aorta isolada de rato. A t-DCTN (3-300 Micromolar) possui baixa toxicidade para Artemia sp (CL50 = 670 ± 80 Micromolar) não sendo detectada atividade citotóxica da t-DTCN sobre células mesencefálicas primárias per si, revertendo a diminuição da viabilidade celular induzida por 6-OHDA (200 Micromolar). Por outro lado, a t-DCTN (0,3-300 Micromolar) demonstrou citotoxicidade semelhante ao etanol (50-400 Milimolar) em cultura primária de hepatócitos de rato de acordo com os teste do MTT, embora tenha apresentado proteção na hepatotoxicidade induzida por acetaminofeno (500 mg/kg) em camundongos, pelos testes da glutationa, malonaldeído, AST e ALT em contraste, os escores histológicos de tecido hepático de camundongos não foram significativamente alterados pela t-DCTN para células tratadas com acetaminofeno, mas mostrou hepatoproteção na lesão induzida por galactosamina/LPS, revertendo os níveis de glutationa induzida pela hepatotoxina os níveis séricos de AST e ALT. Em animais normotensos anestesiados com pentobarbital, a t-DCTN produziu hipotenção e bradicardia de forma dose dependente. A hipotenção induzida por t-DCTN (10 mg/kg) não foi alterada pelo pré-tratamento com atropina, propranolol e hexametônio, sendo reduzida pelo L-NAME. A t-DCTN inibe a freqüência de contração espontânea de átrio direito isolado, mas não interfere no aumento dos batimentos atriais induzido pelo isoproterenol. O inotropismo não foi alterado pela t-DCTN em átrio esquerdo isolado. A t-DCTN é capaz de relaxar contrações submaximais de fenilefrina (1 Micromolar), sendo seu efeito parcialmente inibido pela retirada do endotélio ou pela presença de L-NAME. Portanto, a t-DCTN possui baixa toxicidade para Artemia sp, nenhuma neurotoxicidade para células mesencefálicas, hepatotoxicidade e hepatoproteção, dependendo da técnica utilizada, sugerindo uma possível ação inibitória no citocromo P450. A hipotenção induzida pela t-DCTN provavelmente se deve a sua ação combinada bradicardizante e vasodilatadora sendo esse efeito parcialmente mediado pela liberação de NO endotelial e parte por efeitos na musculatura lisa vascular. Em conjunto, os dados disponíveis na literatura com as presentes observações sugerem que a t-DCTN está envolvida com propriedades citotóxicas bem como citoprotetoras e, portanto, cuidados deve ser tomados quanto a extrapolação dos dados em animais para a promissora atividade terapêutica, especialmente para tratamento de desordens hepáticas ou patologias associadas à diabetes.
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Determinação da atividade antibacteriana e inibição de biofilme pelo óleo de folhas secas de Eucalyptus staigeriana / Determination of antibacterial activity and biofilm inhibition of dry leaf oil of Eucalyptus staigerianaCorrêa, Marcos Saldanha January 2017 (has links)
Os óleos essenciais são metabólitos secundários extraídos de plantas e apresentam diversas propriedades para fins medicinais. O objetivo deste trabalho foi caracterizar o óleo essencial de folhas secas de E. staigeriana, verificar sua atividade antimicrobiana e antibiofilme frente a bactérias gram-positivas e gram-negativas e avaliar a expressão dos genes de virulência e resistência em Listeria monocytogenes e Enterococcus faecalis resistente a vancomicina (VRE) na ausência e presença de concentração sub-inibitória do óleo essencial, por PCR quantitativo em tempo real (qPCR). A caracterização do óleo foi realizada por cromatografia gasosa acoplada a massa (GC-MS) verificou-se a presença de 21 compostos, sendo os constituintes majoritários o geranial (28,67 %), neral (19,68 %) e limoneno (17,29 %). A ação antimicrobiana foi avaliada e observou-se que o óleo apresentou atividade frente a bactérias gram-positivas, com diâmetros de halos de inibição de 0 a >45 mm. A concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada para bactérias gram-positivas, sensíveis e resistentes a agentes antimicrobianos como VRE, e variou de 0,19 a 6,25 %. Ação antibiofilme do óleo foi avaliada tanto na formação, quanto sob um biofilme pré-estabelecido. O óleo essencial apresentou capacidade de inibir a formação do biofilme de todas as cepas testadas, mas pouca ou nenhuma capacidade de remoção do biofilme pré-formado. Na análise de expressão gênica por qPCR para L. monocytogenes, verificou-se que três dos genes de estresse celular (sufS, sod e degU) apresentaram uma diferença significativa na presença do óleo. Para a cepa de E. faecalis VRE, nenhum gene selecionado apresentou alteração na expressão gênica. Como conclusão, este estudo demonstrou que o óleo essencial de folhas secas de E. staigeriana possui atividade antimicrobiana do frente a bactérias gram-positivas e sem atividade em gram-negativas. / Essential oils are secondary metabolites extracted from plants and they have been showing several medicinal properties. The aim of this study was to characterize the essential oil extracted from dry leaf of E. staigeriana, as well as to verify the antimicrobial and anti-biofilm activities against gram-positive and gram-negative bacteria, and to evaluate the expression of virulence and resistance genes in Listeria monocytogenes and Enterococcus faecalis vancomycin resistant (VRE) in the absence and presence of sub-inhibitory concentration of the essential oil by quantitative real time PCR (qPCR). The oil characterization was performed by CG-MS and it was verified the presence of 21 compounds, being the geranial (28.67 %), neral (19.68 %) and limonene (17.29 %) the major compounds. The antimicrobial activity was evaluated and it was observed that the essential oil has effect against gram-positive, with inhibition zone diameter ranges from 0 to 45 mm. The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined, to sensible and resistant gram-positive bacteria to antimicrobial agents, such as VRE, and varied between 0.19 to 6.25 %. The anti-biofilm action of the oil was verified on formation, and under a pre-established biofilm. The essential oil showed capacity to inhibit the biofilm formation for all tested strains, but few or no ability to remove the pre-established biofilm. In the analysis of gene expression by qPCR for L. monocytogenes, three cell stress genes (sufS, sod and degU) with significant difference in the presence of the oil. For E. faecalis VRE strain no one of the selected genes showed alteration in the gene expression. In conclusion, this study demonstrates the potential of essential oil from dry leaf of E. staigeriana for future use in the control of gram-positive bacteria.
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Atividade antitumoral de extratos de bidens pilosa linné ricos em poliacetilenos e de juglona associada ao ascorbatoKviecinski, Maicon Roberto January 2013 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-12-05T22:39:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2013 / Introdução. Bidens pilosa L. é uma planta considerada medicinal que contém poliacetilenos presumivelmente responsáveis por ações antitumorais. As quinonas, como a juglona, também compreendem uma classe de substâncias de interesse por seu potencial antitumoral. Além disto, evidências indicam que a associação de ascorbato com algumas quinonas pode potencializar a atividade antitumoral. Objetivos. Avaliar o efeito antitumoral do extrato de B.pilosa obtido pela tecnologia supercrítica, a fim de obter um extrato rico em poliacetilenos (SFE) com atividade superior em comparação ao extrato obtido por maceração hidroetanólica (HCE). Testar a administração de juglona isoladamente ou em associação ao ascorbato em células T24 pela citotoxicidade; caracterizado o mecanismo de morte celular induzido, indução de estresse oxidativo, efeito antiproliferativo e preliminarmente, anti-invasivo in vitro. Por fim, avaliar a administração de juglona e ascorbato em associação a quimioterápicos convencionais, doxorrubicina e cisplatina. Metodologia. A composição fitoquimica dos extratos foi avaliada por cromatografia em camada delgada e espectrofotometria UV-Vis. A citotoxicidade para células MCF-7 e T24 foi avaliada pelo ensaio do MTT. O potencial lesivo sobre o DNA foi avaliado in vitro pela motilidade eletroforética de DNA plasmidial e imunoeletroforese para fosforilação da histona gama-H2Ax em células T24. Foram avaliados marcadores de danos oxidativos, geração celular de EROs e conteúdo de GSH, também a fosforilação do fator de iniciação eucariótico 2 eIF2a. Foi avaliada a morfologia das células em processo de morte, sendo também verificada a ativação de caspases por espectrofluorimetria e clivagem da poli (ADP-ribose) polimerase (PARP) por imunoeletroforese. A atividade antiproliferativa foi medida pelo ensaio de formação de colônias. A inibição da motilidade celular foi investigada pelo ensaio de migração. A atividade antitumoral in vivo foi medida em camundongos Balb-c portadores de tumor ascítico de Ehrlich. Resultados. Os espectros sobre os constituintes majoritários de SFE apresentaram bandas típicas de poliacetilenos com picos de absorção na faixa do UV registrados em 208, 269 e 334 nm. A citotoxicidade in vitro foi dependente da concentração dos extratos. Às 24h, a CI50 foi 811 e 437 µg/mL, respectivamente para HCE e SFE, reduzindo para 291 µg/mL às 48h, no caso de SFE. Às 24h, a CI50 foi 28,5 µM para juglona, reduzindo para 6,3 µM, quando associada ao ascorbato 1 mM. A citotoxicidade da cisplatina chegou a dobrar devida sua associação com juglona e ascorbato. HCE causou danos no DNA em 160 µg/mL, ao passo que 40 µg/mL de SFE causaram danos equivalentes. Juglona iniciou danos sobre o DNA em 20 µM, ao passo que 5 µM associados ao ascorbato 1 mM causaram danos equivalentes. A juglona induziu à geração celular de EROs e consumo de GSH; iniciando fosforilação do eIF2a que indica estresse de retículo endoplasmático. Estes efeitos foram potencializados em até 4 vezes pela associação ao ascorbato. A juglona sozinha ou associada ao ascorbato não causou ativação de caspases; corroborando a morfologia das células T24 em processo de morte, o processo induzido provavelmente está mais relacionado à necrose. Em tratamentos subletais, a juglona diminuiu a proliferação e a motilidade de células T24, ambos os processos potencializados pela associação ao ascorbato, que induziu à morte clonogênica. Finalmente, os ensaios in vivo indicaram que ambos os extratos de B. pilosa apresentaram atividade, mas SFE causou redução superior do volume de líquido ascítico e células compactadas (4 ± 1 e 1 ± 0,4 mL, respectivamente), ao mesmo tempo em que resultou em maior aumento no tempo de sobrevida (~31%) em comparação aos animais do controle negativo. A inibição do crescimento tumoral determinada para HCE foi de cerca de 40%, ao passo que esta determinação ultrapassou 60% no caso de SFE. Conclusão. A extração com fluido de CO2 supercrítico é uma alternativa para a obtenção de um extrato de B. pilosa rico em poliacetilenos citotóxicos com atividade antitumoral superior em comparação ao extrato obtido por maceração hidroetanólica. O ascorbato potencializa a citotoxicidade, o efeito antiproliferativo e inibidor da motilidade de células T24 in vitro da juglona. Os achados deste trabalho levam a sugerir que a dose do tratamento feito com juglona pode ser ajustada, em termos de redução da mesma, em até 4 vezes, se a juglona for administrada em associação ao ascorbato.<br> / Abstract: Introduction. Bidens pilosa L. is a plant considered medicinal containing polyacetylenes expected to be responsible for antitumor actions. Quinones, such as juglone, comprise a class of substances of interest also due to their antitumor potential. Furthermore, evidences indicate that the combination of ascorbate with some quinones can result in potentiated antitumor activity. Objectives. The supercritical technology was assessed to obtain an extract from B.pilosa rich in polyacetylenes (SFE) with superior antitumor activity compared to that of the extract obtained by hydroethanol maceration (HCE). Juglone was tested administered alone and/or combined with ascorbate on T24 cells for cytotoxicity, the mechanism of cell demise was characterized, oxidative stress induction; antiproliferative and, preliminarily, anti-invasive effects. Juglone and ascorbate were evaluated for the cytotoxicity in combination with the conventional chemotherapics doxorubicin and cisplatin. Methodology. The phytochemical composition of extracts was evaluated by thin layer chromatography with UV-Vis spectroscopy. Cytotoxicity on MCF-7 and T24 cells was checked by the MTT assay. The damaging potential on DNA was assessed in vitro by the electrophoretic motility of plasmid DNA and immunoelectrophoresis for phosphorylation of histone gamma-H2Ax in T24 cells. Markers of oxidative stress, ROS generation and GSH consumption, and the phosphorylation of the eukaryotic initiation factor eIF2á were analyzed as well. The induced cell death process was monitored by caspase activation through spectrofluorimetry and poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) cleavage by immunoelectrophoresis. The antiproliferativo action was measured by the colony forming assay. Cell motility inhibition was investigated by a migration assay. In vivo antitumor activity was measured in Ehrlich carcinoma-bearing Balb-c mice. Results. Spectra about the major constituents in SFE presented typical bands of polyacetylenes recorded in UV at 208, 269 and 334 nm. Cytotoxicity in vitro was concentration-dependent. At 24 h, IC50 was 811 and 437 ìg/mL, respectively for HCE and SFE on MCF-7 cells, falling to 291 ìg/mL at 48 h, in the case of SFE. At 24h, IC50 was 28.5 ìM for juglone on T24 cells, falling to 6.3 ìM when it was combined with ascorbate 1 mM. At 24 h, the cisplatin#s cytoxicity on T24 cells increased up to 2-fold due to its combination with juglone and ascorbate. HCE caused DNA damage at 160 ìg/mL, whereas SFE at 40 ìg/mL caused equivalent damage. Juglone triggered DNA damage at 20 ìM, whereas 5 ìM in combination with ascorbate 1 mM caused equivalent damage. Juglone caused reduction in terms of ROS generation and increased GSH consumption, triggering eiF2á phosphorylation that indicates endoplasmic reticulum stress. These actions were potentiated up to 4-fold due to the combination of juglone with ascorbate. Juglone alone or combined with ascorbate did not cause caspase activation, corroborating T24 cell morphology under demise, the induced cell death process seems to be close related to necrosis. Under sublethal treatments, juglone reduced the proliferation and the motility of T24 cells, both actions were potentiated due to the combination with ascorbate, something that finally induced to clonogenic cell death. In vivo assays indicated that both extracts from B. pilosa had activity, but SFE caused superior reduction in terms of ascitic fluid volume and packed cells (4 ± 1 e 1 ± 0.4 mL, respectively). Furthermore, SFE increased more the animals life span (~31%) compared to animals from the negative control. The tumor growth inhibition by HCE was about 40%, whereas more than 60% was reached by SFE. Conclusion. Supercritical extraction with fluid CO2 is a choice to obtain an extract from B. pilosa rich in cytotoxic polyacetylenes with superior antitumor activity in comparison to that of the extract obtained by hydroethanol maceration. Ascorbate potentiated the cytotoxicity, the antiproliferative action and the inhibition of T24 cells motility in vitro by juglone. These findings lead to suggest that the dose of the treatment done with juglone can be adjusted, in terms of reduction, up to 4-fold, if juglone is administered in combination with ascorbate.
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