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Correlação entre ácido ascórbico plasmático, contagem de células somáticas no leite e o perfil metabólico de vacas secas e em lactação / Correlation between plasma ascorbic acid, milk somatic cell count and metabolic profile in lactating and dry cows

Marcos Veiga dos Santos 26 October 1998 (has links)
Vacas em lactação apresentam capacidade de síntese endógena de ácido ascórbico para suprir os seus requerimentos, no entanto, sob condições estressantes como altas temperaturas e umidade, elevadas produções de leite, parasitoses e incidência de doenças, pode haver produção insuficiente de ácido ascórbico para as demandas metabólicas do animal. Foram objetivos do presente estudo avaliar o efeito do estágio de lactação e número de lactações sobre a concentração plasmática de ácido ascórbico de 153 vacas em lactação e 40 vacas no período seco em 3 fazendas leiteiras, e sua correlação com: a contagem de células somáticas (CCS) no leite, níveis de glicose plasmática, níveis de ácidos graxos não-esterificados (AGNE), níveis de insulina plasmática, níveis de beta-hidroxibutirato (BHBA) plasmático, níveis de aspartato-aminotransferase (AST) plasmática, níveis de produção de leite e escore de condição corporal. Os animais foram escolhidos ao acaso e agrupados em 5 grupos de acordo com o estágio de lactação (estágio 1: 1-28 dias; estágio 2: 29-56 dias; estágio 3: 57-140 dias; estágio 4: 141-280 dias e estágio 5: vacas secas) e de acordo com o número de lactações (primíparas ou multíparas). Amostras de sangue foram coletadas para determinação de ácido ascórbico plasmático utilizando técnica de cromatografia líquida de alta pressão. A análise estatística foi realizada com o uso do programa computacional SAS. A concentração média (mg/L) de ácido ascórbico plasmático foi de 2,67; 2,60; 2,46; 2,63 e 2,60 para os estágios de 1 a 5 respectivamente, e de 2,52 e 2,63 para multíparas e primíparas. Foi identificada correlação negativa entre o ácido ascórbico plasmático e glicose e AGNE plasmáticos, e correlação positiva entre ácido ascórbico plasmático e produção de leite. Não foram registradas correlações entre ácido ascórbico plasmático e demais parâmetros. Baseado nos resultados do presente estudo, foi possível concluir que o ácido ascórbico plasmático não sofreu efeito de estágio de lactação ou número de lactações, e ainda que identificada correlação entre ácido ascórbico plasmático e as variáveis glicose, AGNE e produção de leite não foi possível identificar o fator determinante da variabilidade do ácido ascórbico plasmático em vacas leiteiras. / Dairy cows are totally dependent of endogenous synthesis of ascorbic acid to meet their requirements. Therefore, any condition that decrease the availability of ascorbic acid precursors like glucose and galactose, may result in insufficient synthesis of ascorbic acid. High producing dairy cows may be predisposed to subclinical ascorbic acid deficiency due to the elevated demand for glucose to lactose synthesis by mammary gland. The purpose of this study was to determine the effects of stage of lactation and number of lactations on plasma ascorbic acid concentration, and to establish the association between plasma ascorbic acid level and glucose, insulin, non-esterified fatty acids (NEFA), beta-hydroxybutyrate (BHBA), aspartate-amino transferase (AST), milk somatic cell count (SCC), milk yield and body condition score in dairy cows. One hundred and ninety three dairy cows (153 lactating and 40 dry cows) from 3 different herds were used in this study. Animals were randomly selected, and assigned to 5 groups according the stage of lactation (stage 1: 1-28 days; stage 2: 29-56 days; stage 3: 57-140 days; stage 4: 141-280 days and stage 5: dry cows) and the number of lactation (primiparous or multiparous). Blood samples were taken for ascorbic acid determination by HPLC technique. Statistical analysis was performed using the SAS program. Statistical significance was declared at the 5% level. Average plasma ascorbic acid concentration (mg/L) for Group 1 to 5 were 2.67; 2.60; 2.46; 2.63 and 2.60, respectively, and 2.63 and 2.52 for primiparous and multiparous cows. A negative correlation was observed between ascorbic acid and both glucose and NEFAs and a positive correlation between ascorbic acid and milk yield. No correlation was found between ascorbic acid and other parameters. Results of this study demonstrated that plasma ascorbic acid concentration did not change in response to stage of lactation and number of lactations and eventhough plasma ascorbic acid was correlated to glucose, NEFAs and milk yield, it was not possible to identify the factor that determine ascorbic acid variability in dairy cows.
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Análise metabolômica (1H RMN) do líquido sinovial de equinos hígidos e acometidos por osteocondrite dissecante / 1H RMN-base metabolomics for the investigation of normal and osteochondritic synovial fluid in the horse

Cristina de Faria Mantovani 29 November 2013 (has links)
A osteocondrite dissecante (OCD) é uma das principais doenças que afetam os equinos jovens e uma das condições incluídas nas Doenças Ortopédicas do Desenvolvimento. Por se tratar de importante afecção articular, a OCD pode ser responsabilizada por perdas econômicas substanciais em decorrência da diminuição do desempenho atlético e reprodutivo dos animais acometidos. Sua etiologia é considerada multifatorial sendo associada a fatores nutricionais, endócrinos, genéticos e biomecânicos. A análise dos biomarcadores do líquido sinovial fornece dados fundamentais acerca das alterações representativas de inflamação e danos à cartilagem articular, por isso o monitoramento do ambiente articular caracteriza-se como uma importante ferramenta para o diagnóstico e acompanhamento da progressão da doença. A análise metabolômica por Ressonância Magnética Nuclear de prótons de hidrogênio (1H RMN) é um método de avaliação holístico, simultâneo e em tempo real, dos metabólitos de pequenas moléculas presente no líquido sinovial, capaz de fornecer dados a respeito da progressão da doença, da resposta a tratamentos e de determinar biomarcadores. No presente estudo objetivou-se estabelecer o perfil metabólico global do líquido sinovial de equinos acometidos por OCD, estudar a aplicabilidade da 1H RMN no diagnóstico da OCD e avaliar a possibilidade de distinção entre os líquidos sinoviais de articulações com OCD sintomática e assintomática. A determinação do perfil metabólico do líquido sinovial de equinos hígidos e acometidos por OCD assintomática e sintomática resultou em 32 metabólitos comuns às três condições articulares. Além destes, 2 compostos foram identificados somente nas articulações doentes, sendo eles o propilenoglicol e o composto aromático, porém, não foi possível diferenciar as articulações com OCD assintomática das articulações sintomáticas, pois ambos os grupos apresentavam metabólitos semelhantes e com intensidades similares.. Na comparação entre a intensidade dos espectros, observaram-se aumentos dos metabólitos glicose, glutamina, etanol, leucina, isoleucina, dimetilsulfona, creatina, creatinina, Nacetilglucosamina e N-acetilglutamina e -metil histidina e dos compostos propilenoglicol e composto aromático nas articulações com OCD com relação às hígidas. Dos metabólitos que apresentaram redução na intensidade dos espectros das articulações doentes têm-se o 3- hidroxibutirato e o acetato. Outros metabólitos demonstraram a mesma intensidade de sinal para os três tipos de articulação, sendo eles: piruvato, citrato, metionina, histidina, tirosina, valina, lactato, alanina, glicina, glicerol e fenilalanina. A análise estatística por PCA foi capaz de realizar o agrupamento dos espectros e atribuir a importância do composto aromático na diferenciação entre os animais hígidos e doentes. A análise metabolômica por 1H NMR mostrou-se técnica com alta reprodutibilidade entre as amostras e sensibilidade de detecção dos componentes do líquido sinovial, revelando claras diferenças entre os perfis bioquímicos de articulações hígidas e acometidas por OCD, indicativo das alterações metabólicas que ocorrem com a progressão desta doença, relacionadas principalmente com o processo de degradação cartilagínea. Este estudo salienta o potencial da análise metabolômica em fornecer uma nova perspectiva dos processos bioquímicos envolvidos na progressão da OCD. / Osteochondritis dissecans (OCD) is one of the most common diseases affecting young horses and one of the conditions classified as Developmental Orthopedic Diseases. As an important joint disorder, OCD is held responsible for substantial economic losses in consequence of the decrease in athletic and reproductive performance in affected horses. The condition presents a multifactorial ethiology, related to nutritional, endocrine, genetic and biomechanical factors, although its pathogeny is well established, associated with a disturbance of the process of endochondral ossification. Synovial fluid biomarkers analysis provide data regarding changes representative of inflammation and articular cartilage damage, which is why monitoring the joint cavity is an important tool for diagnosis and assessing disease progression. Proton Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy is a holistic, simultaneous and real time approach, of the metabolites present in the synovial fluid, offering the potential to provide data regarding disease progression, response to treatment and to determine disease biomarkers. The aim of the present study was to establish the global metabolic profiling of normal and osteochondritic synovial fluid, to evaluate the applicability of the 1H RMN in the diagnosis of OCD, and to asses possible distinctions between symptomatic and asymptomatic horses. The metabolic profile determination resulted in 32 common metabolites to the three joint conditions. Moreover, 2 compounds were identified exclusively in the diseased joints, namely propylene glycol and aromatic compound, but we were unable to discern between asymptomatic and symptomatic individuals for both groups presented similarities in metabolites as well as their concentrations. When comparing spectral intensities, we observed marked increases in the metabolites glucose, glutamine, ethanol, leucine, isoleucine, dimethyl sulphone, creatine, creatinine, N-acetylglucosamine, N-acetylglutamine and -methyhistidine, besides the compounds propylene glycol and aromatic compound, in the affected joints compared to the healthy ones. Decrease in spectral intensities were related to the metabolites 3-hydroxybutirate and acetate in affected joints. Other metabolites showed no difference in intensities in all joint conditions, those being pyruvato, citrate, methionine, histidine, tyrosine, valine, lactate, alanine, glycine, glycerol and phenylalanine. PCA based statistical analysis was able to group spectra and to ascribe the importance of the aromatic compound in differentiating healthy from diseased joints. 1H RMN spectroscopy showed high reproductability between samples and sensitive in detecting synovial fluid compounds, unveiling clear diferences between the biochemical profiles of healthy and OCD affected joints, thus indicating metabolic alterations occuring with disease progression, related mainly with the cartilage degradation process. This study projects the potential of metabolomics analysis in providing a new perspective of the biochemical processes involved in OCD progression.
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SVILUPPO DELL'INDICE DI BENESSERE SDIB PER BOVINE DA LATTE FINALIZZATO ALL'OTTIMIZZAZIONE DEGLI ALLEVAMENTI / Development of the welfare model “SDIB” to optimize dairy cows livestock

PREMI, MICHELE 16 December 2019 (has links)
Dalla panoramica dei sistemi di valutazione del Benessere Animale (BA) si evince che si basa su molteplici indicatori diretti ed indiretti, ma per tutti i sistemi esaminati non vi è mai la possibilità di confermare la stima di benessere con metodi di riferimento oggettivi ed indipendenti. Inoltre, i vari sistemi, pur volendo stimare un dato oggettivo del BA, rispondono a specifiche categorie sociali: opinione pubblica (es. Welfare Quality), politica amministrativa (es. IBA), allevatori (es. FARM, IBS e SDIB), consumatori (FARM, Welfare Quality). Un sistema realmente olistico al momento non esiste, in quanto in relazione all’esigenza principale che deve soddisfare, si tende a semplificare la valutazione omettendo alcuni aspetti significativi. Lo scopo generale di questa attività di ricerca è stato quello di evolvere un sistema di valutazione del BA (modello SDIB) realizzato presso il Dipartimento DIANA di Piacenza, rivolto agli allevamenti in prima istanza, quale strumento di innovazione dell’impresa zootecnica, ma nel pieno rispetto delle normative, della sensibilità sociale e delle istanze etiche. L’obiettivo principale è stato quello di sviluppare un software, denominato IDEAL, dedicato al modello di valutazione SDIB. È stata valutata l’eventuale ridondanza degli indicatori di benessere inclusi nel modello, entro una adeguata popolazione di allevamenti della pianura padana e dello stato dell’Oregon. Inoltre, SDIB ha mostrato incoraggianti risultati circa il suo utilizzo come strumento di valutazione di fattori sovra-aziendali, sono infatti state eseguite valutazioni in gruppi di allevamenti caratterizzati da differenze produttive, e gestionali (es. sistema biologico vs convenzionale; adesione al disciplinare del Grana Padano vs Parmigiano Reggiano; sistema padano vs sistema Oregon) per valutare l’eventuale incidenza sul livello di BA. Applicando questa metodologia l’investigazione di tali fattori esula dalle mode del momento; al contrario, privilegia la risposta degli animali per tali fattori. Nei confronti eseguiti, è stata riscontrata per tutti i gruppi di aziende una elevata variabilità relativa al livello di BA, dimostrando come disciplinari o sistemi di allevamento diversi, non siano da soli, sufficienti a garantire un ottimale livello di BA. Un secondo obiettivo del progetto si è concentrato sullo studio di valori di riferimento ematici nelle varie fasi di lattazione, per fornire una maggiore oggettività ai sistemi di valutazione del BA con dati indipendenti. Pertanto, si sono eseguiti prelievi ematici nelle categorie di allevamento più rappresentative delle bovine durante il ciclo produttivo (asciutta, immediato post-parto, fine del primo mese di lattazione e lattazione avanzata) appartenenti ad allevamenti con un buon livello di benessere in tutti i cluster di SDIB, una adeguata alimentazione in tutte le fasi ed ottimi standard di strutture ed attrezzature, con lo scopo di identificare i livelli di riferimento di vari indicatori fisiologici. Per le 4 fasi sono pertanto stati individuati nuovi range di riferimento che potranno essere usati per validare i vari sistemi di valutazione del BA. / The overview of Animal Welfare (AW) assessment systems shows that it is based on multiple direct and indirect indicators, but for all systems examined, there is never the possibility of confirming the welfare estimate with objective and independent reference methods. Even though the various systems want to estimate an objective data of animal welfare, they respond to specific social categories: public opinion (e.g., Welfare Quality), administrative policy (e.g., IBA), breeders (e.g., FARM, IBS and SDIB), consumers (FARM, Welfare Quality). At the moment, there is no truly holistic system; in relation to the main need to satisfy, there is a tendency to simplify the evaluation by omitting some significant aspects. The general aim of this research activity was to evolve an animal welfare evaluation system (SDIB model), that has been carried out at the DIANA Department of Piacenza. Firstly, this system is suggested for farms as a tool for innovation of the livestock enterprise, but in full compliance with the regulations, social sensitivity, and ethical requirements. The main objective was to develop a software, called IDEAL, dedicated to the SDIB evaluation model. The possible redundancy of the welfare indicators included in the model was evaluated within an adequate population of farms in the Po Valley and in the State of Oregon. In addition, SDIB has shown encouraging results about its use as a tool for the evaluation of extra company factors. In fact, some evaluations have been carried out in groups of farms characterized by differences in production and management (e.g., biological system vs. conventional, adherence to Grana Padano Disciplinary vs. Parmigiano Reggiano Disciplinary, Po Valley system vs. Oregon system) to assess the possible impact on the level of AW. Applying this methodology, the investigation of these factors goes beyond the current trends. On the contrary, it favors the animals' response to these factors. With regard to the comparisons carried out, a high variability relative to the level of animal welfare has been found for all groups of farms, demonstrating how different disciplines or farming systems are not sufficient to ensure an optimal level of AW, if not related to something else. A second objective of the project was to study blood reference values at the various stages of lactation in order to provide greater objectivity to the AW assessment systems with independent data. Therefore, blood samples were taken from the most representative categories of cows during the production cycle (dry, immediate post-partum, end of the first month of lactation and advanced lactation) belonging to herds with a good level of welfare in all SDIB clusters, adequate feeding at all stages and excellent standards of facilities and equipment, with the aim of identifying the reference levels of various physiological indicators. For the 4 phases, new reference ranges have been identified, and they can be used to validate the various assessment systems of the AW.
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Diversidade taxonômica e funcional de comunidades microbianas em lagoas salino-alcalinas do Pantanal brasileiro / Taxonomical and functional diversity of microbial communities in saline-alkaline lakes from Brazilian Pantanal

Silva, Gabriela Machineski da 26 February 2015 (has links)
As lagoas salino-alcalinas (salinas) da sub-região Nhecolândia do Pantanal, Mato Grosso do Sul, combinam valores de pH elevados com a presença de altas concentrações de sal, assemelhando-se aos lagos de soda da África Oriental. O entendimento atual dos mecanismos físicos, químicos e biológicos nestes ambientes extremos do Brasil é limitado. Embora os micro-organismos estejam envolvidos nos processos biogeoquímicos em ecossistemas aquáticos, investigações sobre os grupos bacterianos que contribuem para a diversidade e funções específicas nessas salinas inexistem. Assim, a presente dissertação centrou-se na avaliação da comunidade bacteriana de duas salinas (Salina Verde e Salina Preta), localizadas na sub-região da Nhecolândia. Especificamente, investigou-se a diversidade e a estrutura das comunidades bacterianas, os perfis metabólicos das lagoas e genes funcionais que codificam enzimas relacionadas a transformação do nitrogênio, mercúrio, selênio e arsênio. As amostras de água foram coletadas durante a estação seca (setembro de 2012) na Salina Verde (pH 9,5, E.C. 2575 mS cm-1), caracterizada pela presença constante de floração de cianobactérias e na Salina Preta (pH 8,9, E.C. 1500 mS cm-1), sem registro de ocorrência de floração. As amostragens foram realizadas em triplicatas em duas profundidades (superfície e fundo) e duas vezes no dia (10:00 h e 15:00 h) devido à ocorrência natural de saturação de oxigênio observada na Salina Verde. O DNA total de cada amostra ambiental foi extraído e a diversidade bacteriana e funcionalidade foram acessadas por pirosequenciamento do gene de 16S RNAr e sequenciamento metagenômico. A análise de PCR quantitativa do gene de 16S RNAr foi realizada de forma a quantificar a comunidade bacteriana. A abundância bacteriana foi maior na Salina Verde do que na Salina Preta (1010 e 109 cópias mL-1, respectivamente). As sequências parciais do gene de 16S RNAr obtidas no pirosequenciamento mostraram a dominância de táxons do gênero Anabaenopsis sp. na floração da Salina Verde, englobando até 92% do total de sequências. A comunidade bacteriana da Salina Preta apresentou os maiores índices de diversidade e riqueza, sendo dominantes os filos Proteobacteria, Bacteroidetes, Acidobacteria e Verrucomicrobia. Apenas a Salina Preta mostrou diferenças na comunidade bacteriana de acordo com as profundidades amostradas. Na superfície desta lagoa, os filos Actinobacteria e Verrucomicrobia predominaram, enquanto no fundo, prevaleceram os filos Proteobacteria e Chlamydiae. A temperatura foi detectada como o fator abiótico que influenciou a heterogeneidade espacial da Salina Preta. Por sua vez, a alcalinidade e o pH foram os fatores que impulsionaram as diferenças e variações das comunidades bacterianas em ambas as lagoas. Genes bacterianos envolvidos nos ciclos biogeoquímicos do nitrogênio, mercúrio e arsênio foram encontrados nas salinas Verde e Preta, sugerindo uma elevada redundância funcional nas transformações desses elementos. Não foram encontrados genes microbianos envolvidos no ciclo do selênio. Os dados gerados revelaram uma comunidade microbiana taxonômica e funcionalmente complexa que habita as salinas. Os resultados deste estudo fornecem uma avaliação aprofundada baseada em abordagens independentes de cultivo, sendo este um passo importante na compreensão da dinâmica funcional desses ambientes no Pantanal brasileiro. / The saline-alkaline lakes (salinas) of the Nhecolândia sub-region of the Pantanal, Mato Grosso do Sul state, combine high pH values with the presence of high salt concentrations, resembling the soda lakes of East Africa. The current understanding of physical, chemical and biological mechanisms in these extreme environments is limited. Although microorganisms are involved in biogeochemical processes in aquatic ecosystem, researches on the bacterial groups that contribute to diversity and specific functions in these salinas are scarce. This dissertation therefore focused on the evaluation of bacterial community of two salinas (Salina Verde and Salina Preta) located in the Nhecolândia subregion. Specifically, it was investigated the diversity and structure of bacterial communities, the metabolic profile of the lakes and functional genes that encode the nitrogen, mercury and arsenic-transforming enzymes. Water samples were collected during the dry season (September 2012) from Salina Verde (pH 9.5, E.C. 2575 mS cm-1), characterized by constant presence of cyanobacterial bloom, and from Salina Preta (pH 8.9, E.C. 1500 mS cm-1), with no report of bloom occurrence. Triplicate samplings were carried out in two depths (surface and bottom) and twice a day (10 AM and 3 PM) due to naturally occurrence of oxygen saturation, observed at Salina Verde. Total DNA of each environmental sample was extracted and bacterial diversity and functionality were accessed by 16S rRNA gene pyrosequencing and metagenomic sequencing. Analysis of quantitative PCR of the 16S rRNA gene was performed in order to quantify the bacterial community. Bacterial abundance was higher in the Salina Verde than in the Salina Preta (1010 and 109 copies mL-1, respectively). The partial sequences of the 16S rRNA gene obtained in the pyrosequencing revealed the genus Anabaenopsis sp. as the dominant taxa in the Salina Verde bloom, encompassing up to 92% of the total bacteria. Bacterial community of the Salina Preta showed the highest diversity and richness index, with dominant phyla Proteobacteria, Bacteroidetes, Acidobacteria and Verrucomicrobia. Only the Salina Preta showed differences in bacterial community in accordance with the depths sampled. On the surface of this lake, the phyla Actinobacteria and Verrucomicrobia predominated, while in the bottom, Proteobacteria and Chlamydiae prevailed. The temperature was detected as the abiotic factor influencing the spatial heterogeneity at Salina Preta. On the other hand, alkalinity and pH were the factors driving the differences and variation of bacterial community in both lakes. Bacterial genes involved in the biogeochemical cycles of nitrogen, mercury and arsenic were found in Salina Verde and Salina Preta, suggesting a high metabolic redundancy in the transformation these elements. No microbial genes involved in selenium cycle were found. The data showed a taxonomic and functional complex microbial community inhabiting salinas. The results of this study provide a detailed assessment based on culture-independent approaches, which is a stepping stone to understand the functional dynamics of these environments in the Brazilian Pantanal.
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Perfil nutricional, metabólico e risco cardiovascular em pacientes pós-transplante hepático

Alves, Bruna Cherubini January 2016 (has links)
No pós-transplante hepático (pós-TxHep), complicações da doença cardiovascular (CV) têm sido cada vez mais prevalentes e aparecem entre as principais causas de morte nessa população. Sabe-se que alterações metabólicas e nutricionais podem estar associadas ao aumento de risco CV. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o risco CV e suas associações com o estado nutricional, ingestão alimentar e o perfil metabólico em pacientes pós-TxHep. Este estudo transversal incluiu pacientes adultos pós-TxHep. Pacientes transplantados há menos de 1 ano e com histórico de insuficiência hepática fulminante, perda de enxerto hepático ou insuficiência renal crônica pós-TxHep não foram incluídos. Os pacientes passaram por avaliação clínica, nutricional e laboratorial. A avaliação nutricional compreendeu a ingestão alimentar, através de Registro Alimentar de três dias, antropometria e dinamometria. A medida da espessura da camada íntima-média carotídea (EIMC) foi avaliada por ultrassonografia Doppler e considerada alterada quando maior que 1 milímetro. Foram avaliados 69 pacientes transplantados há 2,8 (1,4 - 6,3) anos, sendo a maioria do sexo masculino (61%). Encontrou-se alta prevalência de desnutrição e sarcopenia, apresentada por 45% dos pacientes com área muscular do braço abaixo do percentil 15, e 71% com força do aperto de mão abaixo do percentil 30. Em contraste, 72% dos pacientes estavam com excesso de peso e 35% apresentaram Índice de Massa Corporal (IMC) maior que 30 kg/m2. Pacientes com EIMC alterada (54%) apresentaram maior LDL colesterol (P = 0,01), maior proporção de proteína-C reativa ultrassensível (PCR-us) maior que 1mg/L (P = 0.02) e maior ingestão de ácidos graxos saturados e trans (P = 0.01). Em conclusão, este estudo mostrou alta prevalência de EIMC alterada em uma amostra de pacientes pós-TxHep com sobrepeso e sarcopenia, associada a níveis mais elevados de LDL colesterol, PCR-us maior que 1mg/L e maior ingestão de ácidos graxos saturados e trans. Este estudo reforça que é necessário fornecer medidas preventivas, incluindo a melhoria da qualidade dietética, para todos os pacientes pós-transplante hepático, a fim de minimizar o risco CV. / In post-liver transplantation (post-LT), complications of cardiovascular (CV) disease have been increasingly prevalent and have become one of the main causes of death in this population. It is known that metabolic and nutritional imbalance may be associated with increased CV risk. Thus, the aim of this study was to evaluate CV risk and its associations with nutritional status, food intake and metabolic profile in post-LT patients. This cross-sectional study included adult post-LT patients, who underwent clinical, nutritional and laboratory evaluation. Patients who have undergone LT for less than 1 year, and with history of fulminant hepatic failure, loss of liver graft or chronic renal failure after LT were not included. The nutritional evaluation included food intake, through a three-day Food Record, anthropometry and dynamometry. The carotid intima-media thickness (CIMT) was assessed by Doppler ultrasonography and considered abnormal when greater than 1 millimeter. A total of 69 patients transplanted 2.8 (1.4 - 6.3) years ago were evaluated, being the majority male (61%). There was a high prevalence of malnutrition and sarcopenia, presented by 45% of patients with arm muscle area below the 15th percentile, and 71% with handgrip strength below the 30th percentile. In contrast, 72% of the patients were overweight and 35% had Body Mass Index greater than 30 kg/m2. Patients with altered CIMT (54%) had higher LDL cholesterol (P = 0.01), higher proportion of high-sensitive C-reactive protein (hs-CRP) greater than 1mg/L (P = 0.02) and higher intake of saturated and trans fatty acids (P = 0.01). In conclusion, this study showed a high prevalence of abnormal CIMT in a sample of post-LT patients with overweight and sarcopenia, associated with higher levels of LDL cholesterol, hs-CRP greater than 1mg/L, and higher intake of saturated and trans fatty acids. This study reinforces that it is necessary to provide preventive measures, including improvement of dietary quality, for all patients after liver transplantation, in order to minimize CV risk.
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Resposta metabólica da associação da palma miúda (Nopalea cochenillifera) com feno de maniçoba (Manihot pseudoglaziovii) e feno de capim tifton 85 (Cynodon dactylon) na alimentação de ovinos morada nova e de caprinos Moxotó / Metabolic response of the association of the cactus pear (Nopalea cochenillifera) with maniçoba (Manihot pseudoglaziovii) and tifton 85 (Cynodon dactylon) hay in the diet of morada nova sheep and moxotó breed goat

SILVA NETO, Izildo Ferreira da 07 December 2011 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-09T13:17:15Z No. of bitstreams: 1 Izildo Ferreira da Silva Neto.pdf: 850238 bytes, checksum: 4039b570d51165ae86b4f8afb20d7ab8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T13:17:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Izildo Ferreira da Silva Neto.pdf: 850238 bytes, checksum: 4039b570d51165ae86b4f8afb20d7ab8 (MD5) Previous issue date: 2011-12-07 / In order to evaluate the metabolic response of native sheep and goats fed Tifton 85 hay (Cynodon dactylon) or Maniçoba hay (Manihot pseudoglaziovii) associated with cactus pear (Nopalea cochenillifera), with a total of 32 animals (16 sheep and 16 goats Morada Nova Moxotó) in randomized block design. Blood samples were collected every two weeks, divided into four samples. Were analyzed creatinine, urea, total protein, albumin, globulin, glucose, fructosamine, AST, GGT, alkaline phosphatase, sodium, potassium and chlorine. Sheep consuming Tifton hay had a higher blood urea concentration and goats consuming maniçoba hay had higher total protein and fructosamine concentration and higher GGT activity when consumed Tifton hay. The animals of both species had increased plasma concentration glucose and serum alkaline phosphatase activity, and decreased serum sodium concentration. It was observed a positive linear effect in serum urea (P <0.0007), plasma glucose (P <0.0129), serum fructosamine (P <0.0001), serum alkaline phosphatase activity (P <0.0001) and serum sodium (P <0.0001), but with a quadratic effect on serum potassium (P <0.0012) in the sheeps. It was observed a linear effect in the activity of serum GGT (P <0.0001) and serum potassium (P <0.0272), whereas a quadratic effect was recorded for serum urea (P <0.0007) in the goats. Sheep and goats respond satisfactorily to the diets with replacement of Tifton 85 by Maniçoba hay, associated with the cactus. Greater alkaline phosphatase activity was observed in sheep and goats receiving both diets throughout time. These data serve as reference values for nutrition and metabolic profile studies of sheep and goats, particularly in relation to the values of fructosamine for goats. / Objetivou-se avaliar a resposta metabólica de ovinos e caprinos nativos, alimentados com feno de Tifton 85 (Cynodon dactylon) ou feno de Maniçoba (Manihot pseudoglaziovii) associados à palma forrageira (Nopalea cochenillifera). Foram utilizados 32 animais (16 ovinos Morada Nova e 16 caprinos Moxotó) em delineamento em blocos casualizados. Amostras de sangue foram coletadas quinzenalmente, constituindo-se quatro coletas. Foram analisados creatinina, uréia, proteína total, albumina, globulina, glicose, frutosamina, aspartato aminotransferase (AST), γ-glutamil transferase (GGT), fosfatase alcalina, sódio, potássio e cloro. Ovinos consumindo feno de tifton tiveram maior concentração de uréia no sangue e caprinos consumindo feno de maniçoba tiveram maior concentração de proteína total, frutosamina e GGT quando consumiram feno de tifton. Os animais de ambas as espécies tiveram aumento da glicose plasmática e de fosfatase alcalina, e diminuição da concentração de sódio sérico. No grupo dos ovinos, efeito linear positivo foi observado na concentração sérica de uréia (P<0,0007), glicose plasmática (P<0,0129), frutosamina (P<0,0001), atividade da fosfatase alcalina (P<0,0001) e sódio (P<0,0001), porém com efeito quadrático para o potássio (P<0,0012). No grupo dos caprinos, efeito linear negativo foi observado na atividade da GGT (P<0,0001) e concentração de potássio (P<0,0272), enquanto que efeito quadrático foi registrado para a concentração sérica de uréia (P<0,0007). Ovinos e caprinos respondem satisfatoriamente às dietas com substituição do feno de Tifton 85 pelo feno de Maniçoba, associado à palma forrageira. Grande atividade da fosfatase alcalina é observada em ovinos e caprinos recebendo tais dietas ao longo do tempo. Os dados servem como valores de referência para estudos sobre nutrição e perfil metabólico de ovinos e de caprinos, particularmente em relação aos valores de frutosamina para caprinos.
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Diversidade taxonômica e funcional de comunidades microbianas em lagoas salino-alcalinas do Pantanal brasileiro / Taxonomical and functional diversity of microbial communities in saline-alkaline lakes from Brazilian Pantanal

Gabriela Machineski da Silva 26 February 2015 (has links)
As lagoas salino-alcalinas (salinas) da sub-região Nhecolândia do Pantanal, Mato Grosso do Sul, combinam valores de pH elevados com a presença de altas concentrações de sal, assemelhando-se aos lagos de soda da África Oriental. O entendimento atual dos mecanismos físicos, químicos e biológicos nestes ambientes extremos do Brasil é limitado. Embora os micro-organismos estejam envolvidos nos processos biogeoquímicos em ecossistemas aquáticos, investigações sobre os grupos bacterianos que contribuem para a diversidade e funções específicas nessas salinas inexistem. Assim, a presente dissertação centrou-se na avaliação da comunidade bacteriana de duas salinas (Salina Verde e Salina Preta), localizadas na sub-região da Nhecolândia. Especificamente, investigou-se a diversidade e a estrutura das comunidades bacterianas, os perfis metabólicos das lagoas e genes funcionais que codificam enzimas relacionadas a transformação do nitrogênio, mercúrio, selênio e arsênio. As amostras de água foram coletadas durante a estação seca (setembro de 2012) na Salina Verde (pH 9,5, E.C. 2575 mS cm-1), caracterizada pela presença constante de floração de cianobactérias e na Salina Preta (pH 8,9, E.C. 1500 mS cm-1), sem registro de ocorrência de floração. As amostragens foram realizadas em triplicatas em duas profundidades (superfície e fundo) e duas vezes no dia (10:00 h e 15:00 h) devido à ocorrência natural de saturação de oxigênio observada na Salina Verde. O DNA total de cada amostra ambiental foi extraído e a diversidade bacteriana e funcionalidade foram acessadas por pirosequenciamento do gene de 16S RNAr e sequenciamento metagenômico. A análise de PCR quantitativa do gene de 16S RNAr foi realizada de forma a quantificar a comunidade bacteriana. A abundância bacteriana foi maior na Salina Verde do que na Salina Preta (1010 e 109 cópias mL-1, respectivamente). As sequências parciais do gene de 16S RNAr obtidas no pirosequenciamento mostraram a dominância de táxons do gênero Anabaenopsis sp. na floração da Salina Verde, englobando até 92% do total de sequências. A comunidade bacteriana da Salina Preta apresentou os maiores índices de diversidade e riqueza, sendo dominantes os filos Proteobacteria, Bacteroidetes, Acidobacteria e Verrucomicrobia. Apenas a Salina Preta mostrou diferenças na comunidade bacteriana de acordo com as profundidades amostradas. Na superfície desta lagoa, os filos Actinobacteria e Verrucomicrobia predominaram, enquanto no fundo, prevaleceram os filos Proteobacteria e Chlamydiae. A temperatura foi detectada como o fator abiótico que influenciou a heterogeneidade espacial da Salina Preta. Por sua vez, a alcalinidade e o pH foram os fatores que impulsionaram as diferenças e variações das comunidades bacterianas em ambas as lagoas. Genes bacterianos envolvidos nos ciclos biogeoquímicos do nitrogênio, mercúrio e arsênio foram encontrados nas salinas Verde e Preta, sugerindo uma elevada redundância funcional nas transformações desses elementos. Não foram encontrados genes microbianos envolvidos no ciclo do selênio. Os dados gerados revelaram uma comunidade microbiana taxonômica e funcionalmente complexa que habita as salinas. Os resultados deste estudo fornecem uma avaliação aprofundada baseada em abordagens independentes de cultivo, sendo este um passo importante na compreensão da dinâmica funcional desses ambientes no Pantanal brasileiro. / The saline-alkaline lakes (salinas) of the Nhecolândia sub-region of the Pantanal, Mato Grosso do Sul state, combine high pH values with the presence of high salt concentrations, resembling the soda lakes of East Africa. The current understanding of physical, chemical and biological mechanisms in these extreme environments is limited. Although microorganisms are involved in biogeochemical processes in aquatic ecosystem, researches on the bacterial groups that contribute to diversity and specific functions in these salinas are scarce. This dissertation therefore focused on the evaluation of bacterial community of two salinas (Salina Verde and Salina Preta) located in the Nhecolândia subregion. Specifically, it was investigated the diversity and structure of bacterial communities, the metabolic profile of the lakes and functional genes that encode the nitrogen, mercury and arsenic-transforming enzymes. Water samples were collected during the dry season (September 2012) from Salina Verde (pH 9.5, E.C. 2575 mS cm-1), characterized by constant presence of cyanobacterial bloom, and from Salina Preta (pH 8.9, E.C. 1500 mS cm-1), with no report of bloom occurrence. Triplicate samplings were carried out in two depths (surface and bottom) and twice a day (10 AM and 3 PM) due to naturally occurrence of oxygen saturation, observed at Salina Verde. Total DNA of each environmental sample was extracted and bacterial diversity and functionality were accessed by 16S rRNA gene pyrosequencing and metagenomic sequencing. Analysis of quantitative PCR of the 16S rRNA gene was performed in order to quantify the bacterial community. Bacterial abundance was higher in the Salina Verde than in the Salina Preta (1010 and 109 copies mL-1, respectively). The partial sequences of the 16S rRNA gene obtained in the pyrosequencing revealed the genus Anabaenopsis sp. as the dominant taxa in the Salina Verde bloom, encompassing up to 92% of the total bacteria. Bacterial community of the Salina Preta showed the highest diversity and richness index, with dominant phyla Proteobacteria, Bacteroidetes, Acidobacteria and Verrucomicrobia. Only the Salina Preta showed differences in bacterial community in accordance with the depths sampled. On the surface of this lake, the phyla Actinobacteria and Verrucomicrobia predominated, while in the bottom, Proteobacteria and Chlamydiae prevailed. The temperature was detected as the abiotic factor influencing the spatial heterogeneity at Salina Preta. On the other hand, alkalinity and pH were the factors driving the differences and variation of bacterial community in both lakes. Bacterial genes involved in the biogeochemical cycles of nitrogen, mercury and arsenic were found in Salina Verde and Salina Preta, suggesting a high metabolic redundancy in the transformation these elements. No microbial genes involved in selenium cycle were found. The data showed a taxonomic and functional complex microbial community inhabiting salinas. The results of this study provide a detailed assessment based on culture-independent approaches, which is a stepping stone to understand the functional dynamics of these environments in the Brazilian Pantanal.
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Pesquisa Cl?nica e Etiol?gica da Anemia em C?es (Canis familiaris). 2009 / Clinical and Etiologycal resarch of Anemia in Dogs (Canis familiaris). 2009.

Antunes, Marcelo Soares 26 January 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-28T20:18:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcelo Soares Antunes.pdf: 2612502 bytes, checksum: 9c4bb850a1a22ef8aaeabded22655ba0 (MD5) Previous issue date: 2010-01-26 / Instituto de Veterin?ria, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Serop?dica, RJ, 2009. Several diseases in dogs causing anemia, with the example of ehrlichiosis are thoroughly investigated. But in Brazil there are no studies to estimate the incidence of anemia in different species and so little, studies that assess the extent and causes related to the problem. Thus, it was developed this study to diagnose and assess the rates of anemia in male and female dogs of different breeds, ages and various conditions of health and nutritional management, but no clinical signs of anemia, and to evaluate the metabolic profile of these animals. We evaluated 148 dogs with anemia that was identified in 40% of the animals, most of then was normochromic normocitic (NNA) in type. It was concluded from the analyzed data that anemia is a significant occurrence, even in asymptomatic dogs. The nutritional deficiency especially of copper and iron, parasites and liver failure were not related to the occurrence of anemia among the animals studied. In this study we highlight the chronic infection with Ehrlichia canis and Anaplasma platys, and periodontal disease (PD) as chronic infectious/inflammatory diseases as likely causes of the NNA between the animals studied. The treatment of PD and evaluation of inflammatory markers would be useful for elucidation of the causes of anemia in the herd studied. / Instituto de Veterin?ria, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Serop?dica, RJ, 2009. Em c?es diversas enfermidades que cursam com anemia a exemplo da erliquiose s?o exaustivamente estudadas. Contudo, n?o existem no Brasil estudos para estimar a incid?ncia de anemia em diferentes esp?cies e, t?o pouco, estudos que avaliem a dimens?o e as causas relacionadas ao problema. Assim, desenvolveu-se o presente estudo visando diagnosticar e avaliar os ?ndices de anemia em c?es machos e f?meas, de diferentes ra?as, idades e condi??es diversas de manejo nutricional e sanit?rio, mas sem sinais cl?nicos de anemia, bem como avaliar o perfil metab?lico desses animais. Foram avaliados 148 c?es, sendo que anemia foi identificada em 40% dos animais, a maioria do tipo normoc?tica normocr?mica (ANN). Conclui-se pelos dados analisados que anemia tem ocorr?ncia significativa, mesmo em c?es assintom?ticos. A defici?ncia nutricional, especialmente de cobre e ferro, as parasitoses e insufici?ncia hep?tica n?o estiveram relacionadas ? ocorr?ncia de anemia entre os animais estudados. Neste estudo destacam-se as infec??es cr?nicas por Ehrlichia canis e/ou Anaplasma platys e a doen?a periodontal (DP), como enfermidades infecciosas /inflamat?rias cr?nicas causadoras prov?veis da ANN entre os animais estudados. O tratamento da DP e a avalia??o de indicadores inflamat?rios seriam ?teis para elucida??o das causas da anemia no rebanho estudado.
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Efekti primene molekularnog vodonika i fizičkog vežbanja na telesnu kompoziciju, metabolički profil i kvalitet života žena trećeg doba / Co-administration of molecular hydrogen and exercise on body composition, metabolic profiles and health-related quality of life in aged women

Korovljev Darinka 04 July 2018 (has links)
<p>Istraživanja o primeni molekularnog vodonika prilično su nova, međutim dosada&scaron;nja naučna otkrića smatraju molekularni vodonik za važan agens u biomedicini, a sa saznanjem o njegovoj biolo&scaron;koj raspoloživosti i terapeutskom potencijalu u poslednjih deset godina, primetan je porast upotrebe vodonika u preventivne i terapijske svrhe. Proces starenja često prate metabolički poremećaji, gojaznost, opadanje kvaliteta života i kognitivne funkcije. Molekularni vodonik (H2) efikasno re&scaron;ava poremećaje povezane s metaboličkim poremećajima i kognitivnim funkcionisanjem na primerima dosada&scaron;njih istraživanja. U cilju procene efekata primene molekularnog vodonika na telesnu kompoziciju, metabolički profil i kvalitet života kod odraslih starijih žena, sprovedena su dva eksperimenta. U prvom eksperimentalnom postupku ispitivani su efekti primene putem oralnog uno&scaron;enja rastvora vode obogaćene molekularnim vodonikom (HRW) u trajanju od 28 dana. Prvo eksperimentalno istraživanje sprovedeno je na uzorku ispitanica ženskog pola srednjeg starosnog doba i prekomerne telesne težine (n = 10), koje su nasumice uzimale vodu obogaćenu molekularnim vodonikom i placebo. Analizirani su efekti primene HRW na indikatore telesne kompozicije, hormonalnog statusa, mitohondrijalne funkcije, kvalitet života, navike u ishrani, nivou fizičke aktivnosti, te kardiorespiratornim sposobnostima. Nakon primenjenog tretmana HRW do&scaron;lo je do statistički značajnih promena između posmatranih grupa ispitanica i smanjenja procenta telesnih masti i indeksa masti nadlaktice u korist grupe koja je uzimala H2 (P &lt; 0,05). Nakon primenjenog tretmana HRW do&scaron;lo je do statistički značajnog smanjenja u vrednostima triglicerida u serumu kod ispitanica H2 grupe u poređenju s placebo grupom (21,3% vs. 6,5%; P = 0,04), dok su ostali lipidi krvi ostali stabilni tokom ove studije (P &gt; 0,05). Nivoi serumskog insulina smanjeni su za 5,4%, dok je placebo intervencija uvećala odgovor insulina za 29,3% (P = 0,01). Do&scaron;lo je do statistički značajnih efekata kod H2 grupe u odnosu na placebo grupu u vrednostima maksimalne potro&scaron;nje kiseonika VO2 max (P &le; 0,03), ukupnog izvr&scaron;enog rada prilikom testiranja (P = 0,01), te ukupnog vremena trajanja testa opterećenja (P &le; 0,02). Na osnovu ovog istraživanja može se pretpostaviti da H2 može pozitivno uticati na telesnu strukturu i insulinsku rezistenciju i unapređenje kardiorespiratornih sposobnosti kod žena srednje starosne dobi, prekomerne telesne težine. Drugi eksperimentalni postupak odnosio se na primenu molekularnog vodonika H2 putem inhalacije svaki dan, po 15 minuta u trajanju od 28 dana. Analizirani su efekti primene H2 na telesnu kompoziciju, kognitivne performanse i kvalitet života povezan sa zdravljem žena (n = 13) starijeg starosnog doba. Inhalacija je sprovedena upotrebom inhalatora koji generi&scaron;e 4% H2. Kognitivna funkcija učesnica ocenjena je pomoću kognitivne skale MMSE i skale za procenu Alchajmerove bolesti (ADAS-Cog). Na osnovu dobijenih rezultata nakon intervencije H2 do&scaron;lo je do statistički značajnog povećanja ukupnih rezultata u vrednostima upitnika MMSE (za 13,7%; P &lt; 0,01). Osim toga, primetno je statistički značajno pobolj&scaron;anje vrednosti ADAS-Cog nakon inhalacije H2, s boljim performansama na testu za prisećanje reči (P &lt; 0,01) i pobolj&scaron;anju u testu prepoznavanja reči (P = 0,01). Dobijeni rezultati oba eksperimenta pokazuju da bi H2 mogao biti efikasan biomedicinski agens za upravljanje složenim stanjima nastalih starenjem, usled metaboličkih i kognitivnih poremaćaja, a u cilju unapređenja kvaliteta života.</p> / <p>Research conducted on molecular hydrogen application are rather new, however the latest scientific discoveries consider molecular hydrogen as a significant agent in biomedicine. Owing to the knowledge on its biological availability and terapeutic potential acquired during the last ten years, an increase in the application of molecular hydrogen (H2) for preventive and terapeutic reasons has been noticed. Aging process is most often accompanied by metabolic disorders, obesity, decline in the quality of life and cognitive functions. Molecular hydrogen (H2) is an efficient means for treating disorders related to metabolic disorders and cognitive functioning in compliance with research conducted so far. In order to assess the effects of molecular hydrogen application on body composition, metabolic profile and quality of life in adult elder women, two experiments were carried out. Within the first procedure, the effects of its application via oral consumption of hydrogen-rich water solution (HRW) were tested during 28 days. The first experimental research was conducted on the sample of middle-aged overweighted women (n = 10), who randomly consumed hydrogen-rich water and placebo. The effects of HRW application at indicators of body composition, hormonal status, mitochondrial functions, quality of life, eating habits, level of physical activity and cardiorespiratory capacities were analized. The treatment with HRW brought about statistically significant changes in female subjects as well as body fat percentage and upper-arm fat index reduction in women consuming H2 (P &lt; 0.05). The treatment with HRW also resulted in statistically significant reduction of triglyceride values in serum of women consuming H2 in comparison to the placebo group (21.3% vs. 6,5%; P = 0.04), while other blood lipids remained stable during this study (P &gt; 0.05). Levels of serum insulin were decreased to 5.4%, while placebo intervention increased the insulin level up to 29.3% (P = 0.01). This also resulted in statistically significant effects in H2 group in comparison to the placebo group when values of maximal oxygen consumption VO2 max (P &le; 0.03), total performance during testing (P = 0.01), and total duration of physical endurance test (P &le; 0.02) are concerned. On the grounds of this research, it might be assumed that H2 can have a positive impact on body structure and insulin resistance, as well as improvement of cardiorespiratory capacities in middle-aged overweighted women. The second experimental procedure referred to the application of molecular hydrogen H2 via inhalation on daily basis, 15 minutes per day over 28 days. The effects of molecular hydrogen application on body composition, cognitive performance and quality of life connected with health of elder women (n = 13) were analized. Inhalation was performed by using inhalator generating 4% of H2. The cognitive function of participants was graded by applying the cognitive MMSE scale, as well as the scale for Alzheimer&#39;s Disease Assessment Scale (ADAS-Cog). On the basis of results obtained&nbsp; upon H2 intervention, a statistically significant increase in total results referring to the values of MMSE test (up to 13.7%; P &lt; 0.01) was recorded. Apart from this, a significant improvement of ADAS-Cog values after H2 inhalation was observed, having better performances when testing word recall (P &lt; 0.01) and word recognition (P = 0.01). The findings of both experiments indicate that H2 might be an efficient biomedical agent for managing complex states caused by aging due to metabolic and cognitive disorders, when aiming at improving quality of life.</p>
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Perfil metabòlic del resveratrol dietètic i influència de la matriu de l’aliment en la seva biodisponibilitat en humans.Validació de la metodologia per espectrometria de masses (UPLC-MS/MS)

Rotchés Ribalta, Maria 19 March 2013 (has links)
L’interès creixent de la població general per la “medicina natural”, juntament amb els efectes beneficiosos que s’han demostrat per al resveratrol, ha incrementat la presència en els mercats d’aliments funcionals o nutracèutics basats en la seva composició. Per a poder fer al•legacions nutricionals i de propietats saludables en aquests tipus de productes és necessari un suport científic que recolzi, amb la màxima evidència, els efectes que es pretenen declarar, tenint en compte els paràmetres relacionats amb la biodisponibilitat i l’efecte de la matriu de l’aliment. La biodisponibilitat del resveratrol és baixa, donat el seu elevat metabolisme, de manera que els seus efectes beneficiosos es troben, actualment, en una certa controvèrsia. Les futures investigacions s’estan enfocant cap a la possible activitat dels metabòlits del resveratrol. Abans, però, es requereix informació més concreta sobre la biodisponibilitat del resveratrol i, sobretot, del seu metabolisme després del consum de quantitats moderades d'aliments que el continguin, per tal de conèixer les concentracions dels diferents metabòlits que es poden assolir en l’organisme. Per a dur a terme aquest tipus d’estudis es requereixen tècniques analítiques d’elevada sensibilitat i selectivitat que permetin una clara identificació del perfil metabòlic del resveratrol en mostres biològiques. L’objectiu principal d’aquesta Tesi Doctoral és conèixer el perfil metabòlic del resveratrol quan és administrat en dosis dietètiques en humans i la influència de la matriu de l’aliment en la seva biodisponibilitat, així com desenvolupar la metodologia adient per cromatografia líquida acoblada a espectrometria de masses (UPLC-MS/MS). Per a assolir aquest objectiu i gràcies a la disponibilitat d’estàndards purs dels metabòlits pròpiament, ja sigui per la seva recent disponibilitat comercial o expressament sintetitzats, s’ha desenvolupat una metodologia òptima per a l’anàlisi del perfil metabòlic del resveratrol, que ha estat validada segons els criteris establerts per la FDA. Amb aquesta metodologia, s’ha definit el perfil metabòlic del resveratrol més complet de tota la literatura actual, constituït per 21 compostos que engloben als metabòlits de fase II del resveratrol i el piceid i els derivats de l’acció microbiana, proposant les estructures químiques d’aquells dels quals no es disposa estàndard. La quantificació d’aquest perfil, excretat 4 hores després de la ingesta d’una beguda funcional a base d’extracte de raïm, ha demostrat diferències interindividuals significatives. El coneixement de la biodisponibilitat i el metabolisme del resveratrol al llarg del temps s’ha dut a terme amb un estudi farmacocinètic, en el qual s’ha demostrat que, després d’un consum moderat de vi negre i d’un nutracèutic a base d’extracte de raïm, el piceid pot ser absorbit ràpidament en la seva forma intacte, però assolint baixes concentracions; mentre que la formació de metabòlits de resveratrol requereix un temps major, que encara s’allarga més per als d’origen microbià. L’excreció més lenta dels sulfats de resveratrol ha aportat més evidència a la possible saturació de les vies de glucuronidació del resveratrol. Pel que fa a l’efecte de la matriu alimentària, s’ha demostrat que l’alcohol no afecta al metabolisme del resveratrol, estudiant-ne el perfil metabòlic excretat. A més a més, l’excreció urinària global del perfil metabòlic del resveratrol no s’ha vist afectada per la matriu que constitueixen uns comprimits a base d’extracte de raïm, com a producte nutracèutic, en comparació amb la del vi negre; tot i que la dissolució del comprimit implica una absorció retardada dels compostos d’aquest, que fa augmentar la quantitat de metabòlits microbians excretats. / The beneficial effects reported for resveratrol have aroused interest in its consumption, and thus a lot of functional foods or nutraceuticals based on their composition have been developed. Before making nutritional and health claims about these products, more information is required on the resveratrol bioavailability and metabolism after moderate doses consumed and with a special regard on the effect of the food matrix. In such studies, high sensitivity analytical techniques are necessary to allow clear identification of the metabolic profile of resveratrol in biological samples. The aim of this thesis is to determine the metabolic profile of resveratrol when administered at dietary doses in humans and the influence of the food matrix on its bioavailability, as well as to develop a suitable methodology by liquid chromatography coupled to mass spectrometry (UPLC-MS/MS). With the pure metabolite standards now available, an optimized methodology was developed and validated for analysis of the resveratrol metabolic profile. This method defined the widest profile until now available, consisting of 21 compounds which include resveratrol and piceid phase II metabolites and those derived from microbiota, for whose chemical structures were suggested. The quantification of this profile, excreted 4 hours after ingestion of a grape extract functional beverage, demonstrated significant interindividual differences. The behaviour of resveratrol metabolism after the post-ingestion of natural products was studied in a pharmacokinetic study, which showed that, after a moderate consumption of red wine and a grape extract nutraceutical, piceid can be quickly absorbed in its intact form, but achieving low concentrations. Metabolites’ formation required more time and even though for the microbial ones. The slow excretion of resveratrol sulfates provided more evidence to the possible saturation of the glucuronidation pathway. Regarding the food matrix effect, it was demonstrated that alcohol does not affect resveratrol metabolism. In addition, overall urinary excretion of the resveratrol metabolic profile was not affected by the tablet matrix of the grape extract nutraceutical, compared to red wine. However, dissolution of the tablet delayed absorption of their compounds, which increases the amount of microbial metabolites excreted.

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