Made available in DSpace on 2015-12-02T01:12:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000476504-Texto+Parcial-0.pdf: 560629 bytes, checksum: 87ce59a68d7f4e868fc301fa05c033ef (MD5) Previous issue date: 2015 / Melanoma is a malignant tumor that develops anywhere on the skin is 1 to 3% of all malignant neoplasms, and also affects men and women, especially in light skin. The development of melanoma may be associated with excessive sun exposure, sunburn, fair skin, blond or red hair, lots of freckles on their shoulders and backs, family history and presence of actinic keratosis. The chemotherapeutic strategies have been based on the use of dacarbazine and temozolomide. In addition to these monoclonal antibodies are also being used, such as ipilimumab, approved in 2011 for the palliative treatment of patients with metastatic cancer. Many studies are underway to evaluate the anticancer activity of compounds like resveratrol. Resveratrol, 3,5,4'-trihydroxy-trans-stilbene (RESV) is a natural phenolic stilbene which has, among the most important properties, antioxidant, anticarcinogenic - inhibiting various cellular events associated with three major stages of carcinogenesis: started, promotion and progression - anti-inflammatory, antiplatelet, antifungal and estrogen. Resveratrol analogs were synthesized by modification of substituents on both rings, without altering the double bond between them: one by the fusion of benzene and other two by fusing a heterocyclic ring; these newly synthesized analogues showed anticancer activity, vasodilatory and anti-tyrosinase. In this paper we propose the synthesis of resveratrol analogues in order to evaluate the biological activity of these. The structural change of resveratrol stilbene modified (alternate double bond between the carbons of the double nitrogens) may be a promising strategy to improve the pharmacological parameters. The replacement of hydroxyl groups by methyls and acetyls can increase the molecular stability, so that there is decreasing susceptibility in the reaction phase II conjugation in vivo, significantly potentiate the cytotoxic activity. Assay in cell culture using melanoma line, B16F10, showed that compounds synthesized had IC50 less than resveratrol. In evaluating the IC50 of the compounds synthesized in fibroblasts, 3T3 line, we see that showed higher values than in melanoma strain except Redresv001 compound, suggesting a specificity of the synthesized compounds in these cancer cells. Among the compounds, methylated Redresv003 and acetylated Redresv004 and Redresv005 have greater prominence, because of having antiproliferative activity at lower concentrations, are selective for cancer tested lineage and maintain their activity long period of time (72 hours), suggesting that did not generate resistance in the B16F10 line. For the qualitative analysis of the mechanism of cell death, we find that the Redresv003, Redresv004 and Redresv005 compounds showed differences compared to the control for apoptosis assay and also by autophagy, suggesting no specific target for action based on these assays. / O melanoma é uma lesão maligna que se desenvolve em qualquer lugar da pele, representa de 1 a 3% de todas as neoplasias malignas e atinge igualmente homens e mulheres, principalmente em peles claras. O desenvolvimento do melanoma pode estar associado à exposição excessiva ao sol, queimaduras solares, pele clara, cabelos loiros ou ruivos, grande quantidade de sardas nos ombros e dorsos, histórico familiar e presença de ceratose actínica. As estratégias quimioterápicas têm sido baseadas no uso de dacarbazina e da temozolomida. Além desses, anticorpos monoclonais também estão sendo utilizados, como o ipilimumabe, aprovado em 2011, para o tratamento paliativo de pacientes com câncer metastático. Muitos estudos estão em andamento para avaliação da atividade antineoplásica de compostos como o resveratrol. Resveratrol, 3,5,4´-trihidroxi-trans-estilbeno (RESV), é um estilbeno fenólico natural que possui, dentre as propriedades mais significativas, a antioxidante, anticarcinogênica - inibindo diversos eventos celulares associados com os 3 maiores estágios da carcinogênese: início, promoção e progressão – anti-inflamatória, antiplaquetária, antifúngica e estrogênica. Análogos do resveratrol foram sintetizados pela modificação de substituintes em ambos os anéis, não alterando a dupla ligação entre eles: um pela fusão de benzeno e outros dois pela fusão de um anel heterocíclico; esses análogos recentemente sintetizados apresentaram atividade antineoplásica, vasodilatadora e antitirosinase. Nesse trabalho propomos a síntese de análogos do Resveratrol com o intuito de avaliar a atividade biológica destes. A alteração estrutural de estilbeno modificado do resveratrol (substituição da ligação dupla entre carbonos pela dupla entre nitrogênios) pode ser uma estratégia promissora para melhorar os parâmetros farmacológicos. substituição de grupos hidroxilas por metilas e acetilas pode aumentar a estabilidade molecular, fazendo com que haja diminuição da suscetibilidade na reação de conjugação de fase II in vivo, além de potencializar significativamente a atividade citotóxica. Ensaios em cultura celular utilizando linhagem de melanoma, B16F10, demonstraram que os compostos sintetizados apresentaram IC50 menor que do resveratrol. Ao avaliarmos o IC50 dos compostos sintetizados em fibroblastos, linhagem 3t3, vimos que apresentaram valores maiores que na linhagem de melanoma, exceto o composto Redresv001, sugerindo uma especificidade dos compostos sintetizados nessas células neoplásicas. Dentre os compostos, o metilado Redresv003 e os acetilados Redresv004 e Redresv005 apresentam melhores resultados, pelo fato de possuírem atividade antiproliferativa em menores concentrações, serem seletivos para a linhagem cancerígena testada e por manterem sua atividade em longo período de tempo (72 horas), sugerindo que não geraram resistência na linhagem B16F10. Pela análise qualitativa do mecanismo de morte celular, verificamos que os compostos Redresv003, Redresv004 e Redresv005 apresentaram diferença em relação ao controle para ensaio de apoptose e também por autofagia, sugerindo não haver alvo específico para ação com base nesses ensaios.

A morte celular programada (apoptose) tem sido implicada no desenvolvimento tumoral e no potencial metastático. O Bcl-2, um proto-oncogene inibidor da apoptose, vem sendo estudado em várias neoplasias incluindo o Melanoma Cutâneo (MC). Esse estudo avaliou a expressão imunoistoquímica da proteína bcl-2 em 35 metástases linfonodais regionais, 28 metástases subcutâneas e 17 metástases viscerais de MC e correlacionou com a sobrevida. O tempo médio de acompanhamento foi de 29,7 meses nas metástases linfonodais, 23,1 meses nas metástases subcutâneas e 22,9 meses nas metástases viscerais. A expressão de bcl-2 foi de 74,3% nas metástases linfonodais, 85,7% nas subcutâneas e 82,4% nas viscerais. Após análise uni e multivariada não houve correlação entre a positividade para bcl-2 e a sobrevida em nenhum dos tipos de metástases. Conclui-se que a avaliação imunoistoquímica da proteína bcl-2 isoladamente, em metástases, não é um marcador prognóstico no MC. Estudos posteriores das relações entre os membros da família BCL-2 poderão elucidar seu papel no desenvolvimento do Melanoma Cutâneo.

Camundongos AIRmax e AIRmin diferem na sensibilidade à carcinogênese, sendo os AIRmin mais sensíveis à carcinogênese de pele devido ao seu fundo genético e um polimorfismo no gene Ahr. Mais que isso, estas linhagens possuem um desequilíbrio de frequência dos alelos do gene Slc11a1. Para estudar a interação dos alelos de resistência (R) ou suscetibilidade (S) do gene Slc11a1 com os loci de resposta inflamatória aguda dos animais AIRmax e AIRmin, foram produzidas sublinhagens homozigotas para estes alelos:AIRmaxRR, AIRmaxSS, AIRminRR e AIRminSS. Nosso objetivo foi investigar a diferença de sensibilidade à carcinogênese de pele induzida por DMBA nestas sublinhagens. A incidência de câncer de pele foi de 7% nos animais AIRminRR e de 13% nos animais AIRminSS.Os animais AIRmaxSS não apresentaram câncer de pele, mas a incidência de câncer em órgãos internos foi 100% nesta sublinhagem.Esses dados mostraram que os camundongos AIRmaxSS tem maior suscetibilidade à carcinogênese, sugerindo que o alelo S, no fundo genético AIRmax, pode influenciar na suscetibilidade ao câncer. / Mice AIRmax and AIRmin differ on sensibility to carcinogenesis. AIRmin mice are significantly more sensitive to skin carcinogenesis than AIRmax mice due to the genetic background and the polymorphism of aryl hydrocarbon receptor (Ahr) gene. Furthermore,these mice have an imbalance of frequency of Slc11a1 gene alleles.To study the interaction of resistant (R) or susceptible (S) Slc11a1 alleles with acute inflammatory reaction loci found in AIRmax and AIRmin mice, homozygous sublines for these alleles were produced: AIRmaxRR, AIRmaxSS, AIRminRR and AIRminSS. The objective of this study was to investigate the difference in skin carcinogenesis sensibility induced by DMBA agent in these sublines.The incidence of skin cancer was 7% in AIRminRR mice and 13% in AIRminSS mice.AIRmaxRR and AIRmaxSS mice did not show skin cancer, but the incidence of internal organs cancer was 100% only in AIRmaxSS mice. These data showed that AIRmaxSS animals have higher susceptibility, suggesting that the S allele in the AIRmax background could influence susceptible to cancer.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-03-18T12:23:02Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Versão final com ficha catalográfica DISSERTAÇÃO 2015.1 Ana Catarina Alves.pdf: 2184522 bytes, checksum: bc55cd97de7113fdac97605c3454c6aa (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-18T12:23:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Versão final com ficha catalográfica DISSERTAÇÃO 2015.1 Ana Catarina Alves.pdf: 2184522 bytes, checksum: bc55cd97de7113fdac97605c3454c6aa (MD5) Previous issue date: 2015-03-20 / CAPEs / O câncer de pele não melanoma apresenta alta incidência e pode estar relacionado a fatores ocupacionais de diferentes naturezas. O objetivo deste estudo foi descrever os casos de câncer de pele não melanoma (CPNM) em residentes do Distrito Sanitário IV da Cidade do Recife-Pernambuco segundo exposição ocupacional, considerando as condições de saúde referidas e fatores predisponentes ao câncer de pele. Trata-se de um estudo descritivo do tipo série de casos, cuja população do estudo limitou-se aos casos de CPNM do Registro de Câncer de Base Populacional (RCBP) da cidade do Recife entre os anos de 2005 a 2007. Foram pesquisados 32 casos dos quais 31 tiveram diagnostico de carcinoma basocelular (CBC). A maioria era do sexo feminino, a média de idade foi de 66,5 anos, renda de até dois salários mínimos e ensino fundamental incompleto. Os casos foram mais frequentes entre trabalhadores de atividades ao ar livre como da construção civil, do comércio, da agricultura, lavadeiras e expostos a substâncias químicas como agrotóxicos, solventes, combustíveis, corantes e radiações solares e não solares. Quanto mais intensa e prolongada a exposição, mais recidivas e outros tipos de cânceres ou novas lesões primárias foram relatados. / Nonmelanoma skin cancer has high incidence and may be related to occupational factors of different natures. The aim of this study was to describe cases of nonmelanoma skin cancer (NMSC) in residents of the Health District IV of Recife-Pernambuco according to occupational exposure, considering referred health conditions and predisposing factors to skin cancer. This was a descriptive study of case series type, whose population was limited to NMSC cases of the population-based cancer registry (RCBP) of Recife, between the years of 2005 and 2007. Were surveyed 32 cases of which 31 were diagnosed with basal cell carcinoma. Most of cases were female; mean age was 66.5 years, income up to two minimum wages, and elementary school incomplete. The more frequent cases were among outdoor working activities such as construction, commerce, agriculture, washerwomen and people exposed to chemicals like pesticides, solvents, fuels, dyes, or also to solar and not solar radiation. Furthermore, the more intense and prolonged the exposure was, more relapses and other types of cancers or new primary injuries have been reported.

Orientador: Laura Sterian Ward / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-09T04:46:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Garbim_JanainaLuisaLeite_D.pdf: 8361906 bytes, checksum: b8f6cf0d2690bfc52710d97eef61e003 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Interações entre vírus, o sistema imunológico e a ação de enzimas detoxificantes têm sido associadas à etiologia de muitas doenças incluindo o câncer e várias doenças auto-imunes. Investigamos o papel dos herpes vírus tipo 6 (HHV-6) e tipo 1 (HHV-1) e das variantes do códon 72 (P72) e códon 47 do éxon 4 de TP53, responsáveis por uma diminuição da atividade antiapoptótica de TP53, na suscetibilidade ao câncer de pele e à Doença de Basedow-Graves. Utilizamos PCR para a detecção dos vírus, polimorfismos de TP53 e GSTs, com restrição enzimática para alguns dos polimorfismos. Quando estudamos 120 pacientes com lesões de pele, comparados com 41 controles mostramos que a infecção por HHV-6 aumenta o risco de um indivíduo apresentar carcinoma basocelular (OR=3,182;95%IC:1,125-8,997). O risco para indivíduos infectados por HHV-1 foi aumentado em seis vezes (OR=6,078;95%IC:1,365-27,061). Observamos que este risco tendia a ser maior entre os indivíduos imunosuprimidos. Estudamos 78 pacientes transplantados renais comparados com 151 controles. A infecção por HHV-6 foi realmente mais freqüente nos transplantados renais (35,89%) do que nos controles (11,25%) (F; p<0,0001). Indivíduos positivos para HHV-6 apareciam com maior freqüência entre os transplantados renais que possuíam variantes de P72 (60,71%) do que nos que apresentaram o genótipo selvagem Arg/Arg (22%) (F; p=0,001). Para estudarmos a relação entre o HHV-6 e as doenças auto-imunes, analisamos 127 pacientes com diagnóstico da Doença de Basedow-Graves, observando que indivíduos que estavam infectados pelo HHV-6 tinham maior risco de desenvolver esta doença (OR=2,225;95%IC=1,197-4,135). O genótipo Pro/Pro de TP53 estava presente em 11,8% dos pacientes com Doença de Basedow-Graves (p<0,001), aumentando significativamente o risco para a doença (OR=28,395; 95%IC=1,658-486,36). Assim, nossos estudos mostram que a presença do HHV-6 e HHV-1 aumenta o risco para o câncer de pele, sugerindo que esses vírus podem ter um papel na suscetibilidade a malignidades da pele; a herança germinativa de P72 aumenta o risco para a infecção de HHV-6 e há uma tendência para o aumento de risco para desenvolvimento da Doença de Basedow-Graves quando associamos a infecção por HHV-6 e a presença do alelo prolina do códon 72 de TP53 / Abstract: Interactions between viruses, the immune system and detoxifying enzymes have been associated to the etiology of many conditions including cancer and various autoimmune diseases. We investigated the role of herpes viruses type 6 (HHV-6) and 1 (HHV-1) and the codon 72 (P72) and codon 47 (S47) variants of exon 4 of TP53, responsible for a diminished antiapoptotic activity of TP53, in the susceptibility to skin cancer and to Graves-Basedow Disease. We used PCR for virus detection, TP53 polymorphisms and GSTs, with restriction fragment length polymorphism analysis of some polymorphisms. When we studied 120 patient with skin lesions, compared with 41 controls we showed that the HHV-6 infection increases the risk of a patient to present basal cell carcinoma (OR=3.182; 95%CI: 1.125-8.997). The risk for HHV-1 infected patients was increased six times (OR=6.078;95%CI:1.365-27.061). We observed that this risk tended to be higher among immunocompromized patients. Were studied 78 kidney recipients compared with 151 controls. Was observed that HHV-6 infection was more frequent among kidney recipient patients (35.89%) than among the controls (11.25%) (F;p<0.0001). We also observed that HHV-6 positive patients appeared more frequently among kidney recipients patients that presented P72 variants (60.71%) than among those presenting the wild-type genotype Arg/Arg (22%) (F; p=0.001). To study the relationship between HHV-6 and autoimmune diseases, we analyzed 127 patients with Graves-Basedow Disease, observing that HHV-6 infected patients had a higher risk to developed this disease (OR=2.225;95%CI=1.197-4.135). The Pro/Pro of TP53 genotype was present in 11.8% of Graves-Basedow Disease patients (p<0.001), increasing significantly the risk to this disorder (OR=28.395; 95%CI=1.658-486.36). Therefore, our studies indicate that the presence of HHV-6 and HHV-1 increase the risk to skin cancer, suggesting that this virus can play a role in the susceptibility to skin malignancies; the germline inheritance of P72 increases the risk to HHV-6 infection and there is a tendency to a higher risk of Graves-Basedow Disease development in patients that have both an HHV-6 infection and the proline allele of codon 72 of TP53 / Doutorado / Doutor em Farmacologia

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2015-10-13T12:03:31Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Flávio Cavarsan - 2014.pdf: 2147420 bytes, checksum: 4c71cd47ba4580423701808c54260308 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-10-13T12:26:12Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Flávio Cavarsan - 2014.pdf: 2147420 bytes, checksum: 4c71cd47ba4580423701808c54260308 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-13T12:26:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Flávio Cavarsan - 2014.pdf: 2147420 bytes, checksum: 4c71cd47ba4580423701808c54260308 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-11-21 / Objective: To analyze the temporal evolution of incidence and trends of skin cancer, either melanoma and nonmelanoma lesions, in the city of Goiania during the period from 1998 to 2008. Methods: From January 1988 to December 2008, all malignant skin tumours of the city of Goiania (Brazil), registered by the Population Based Cancer Register of Goiania were accessed. The cases were stratified according to gender, age, morphology and anatomical site. The proportions, crude coefficients and incidence rates were calculated using the SPSS version 18 software, while Poison's regression model was obtained by Joinpoint software. Results: Twenty six thousand nine hundred and eighty-eight registers of skin cancer were found, 19,961 basal cell carcinomas (BCC), 6,156 squamous cell carcinomas (SCC) and 871 cutaneous melanomas (CM). Histological confirmation was performed in more than 98% of the cases. A significant trend of increasing incidence associated to age was observed in men with SCC (APC=6.6%) and CM (APC=9.8%). The same trend was identified for women with CM (APC=7.7%). A rising incidence related to age was found. Nonmelanomas skin tumours occurred more often on face, while the trunk was more common for melanomas. Conclusions: The incidence of BCC was stable for both genders in Goiania during the study period. In the other hand, it was observed an increasing incidence for CM in men and women, and SCC showed a raise in incidence only for males. The age above 50s is a risk factor for increasing incidence of skin cancer. The trunk and face were the most common sites of either SCC and BCC, while cutaneous melanomas were more often on the trunk and limbs. Prevention through a complete physical exam is the best action for early detection of skin lesions; as well information regarding the risks of excess chronic sun exposition is the best primary prevention method. / Objetivo: Analisar a evolução temporal da incidência e a tendência das neoplasias cutâneas, não melanoma e melanoma no município de Goiânia no período de 1998 a 2008. Metodologia: Foram alvos do estudo os casos registrados de neoplasias malignas de pele de residentes de Goiânia, no período de 1988 – 2008, identificados pelo Registro de Câncer de Base Populacional de Goiânia. Os casos foram estratificados por gênero, grupo etário, morfologia e localização anatômica. Realizaram-se os cálculos das proporções, coeficientes brutos e padronizados de incidência. Utilizou-se o programa SPSS versão 18 e para as análises de tendências, o modelo de regressão linear do programa Joinpoint. Resultados: Foram observados 26.988 casos registrados de neoplasias de pele, com 19.961 carcinomas basocelulares (CBC), 6.156 carcinomas espinocelulares (CEC) e 871 melanomas cutâneos (MC); em mais de 98% dos casos houve confirmação histológica; observou-se tendência de aumento de incidência significante para homens com CEC (APC = 6,6%) e MC (APC = 9,8%) e para mulheres com MC (APC = 7,7%). Houve aumento de incidência com a idade. A face foi o local mais comum entre as neoplasias não melanomas, enquanto o tronco foi o mais comum nos melanomas. Conclusões: A incidência do CBC está estável em homens e mulheres em Goiânia. Para os CEC a incidência está aumentando nos homens enquanto nos MC houve aumento nos dois sexos, maior entre os homens. A idade é um fator de risco após 50 anos com maior aumento de incidência. A face e o tronco foram as localizações mais incidentes para CBC e CEC. Nos melanomas o aumento foi em tronco e membros. A prevenção com exame clínico de todo o tegumento é a melhor recomendação para o diagnóstico precoce do câncer de pele não melanoma e melanoma cutâneo. Medidas de orientação quanto a exposição solar são recomendas na prevenção primária.

Orientador: Carmen Silvia Passos Lima / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas. / Made available in DSpace on 2018-08-20T16:27:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_Cristianede_M.pdf: 2437379 bytes, checksum: 5fff08e294a7f4c2d2e6e49723726b29 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Os genes P53 e BAX (pró-apoptóticos) e MDM2 e BCL2 (antiapoptóticos) atuam na morte de células epiteliais danificadas por raios ultravioleta (UV) da luz solar e estão relacionados com a origem do melanoma cutâneo (MC). A proteína codificada pelo alelo selvagem Arg do polimorfismo P53 Arg72Pro induz melhor a apoptose do que a do alelo variante Pro. Os alelos variantes G e A dos polimorfismos MDM2 T309G e BCL2 C(-938)A e o alelo variante A do polimorfismo BAX G(-248)A estão relacionados com maior e menor expressão proteica, respectivamente, quando comparados aos alelos selvagens T, C e G. Como são incertos os papéis desses polimorfismos no risco e manifestações clínicas do MC, estes foram os principais objetivos do presente estudo. O DNA genômico de 150 pacientes e de 150 controles foi analisado por meio da reação em cadeia da polimerase e digestão enzimática. As frequências dos genótipos P53 ArgArg (58,7% vs 44,7%, P= 0,02) e BCL2 AA (28,0% vs 15,3%, P= 0,004) foram maiores em pacientes do que em controles. Portadores dos genótipos estiveram sob riscos 1,86 e 2,87 vezes maior de MC do que os demais, respectivamente. Excessos dos genótipos combinados P53 ArgArg + BCL2 AA (36,1% vs 16,9%, P= 0,002) e P53 ArgArg + BAX AA (29,5% vs 15,3%, P= 0,008) foram observados em pacientes comparados a controles. Indivíduos com os respectivos genótipos estiveram sob riscos 3,43 e 2,71 vezes maior de ocorrência do MC do que os demais, respectivamente. Concluímos que os polimorfismos P53Arg72Pro, BCL2 C(-938)A e BAX G(-248)A alteraram o risco de ocorrência do MC em nossa amostra e indivíduos com os genótipos ArgArg, AA e AA dos respectivos polimorfismos devem receber recomendações adicionais para proteção da pele dos efeitos nocivos dos raios UV e seguimento médico com exames dermatológicos periódicos, para prevenção e diagnóstico precoce do tumor / Abstract: The P53 and BAX (proapoptotic) and MDM2 and BCL2 (antiapoptotic) genes remove cells damaged by ultraviolet (UV) rays of the sunlight and, therefore, are related to the cutaneous melanoma (CM) origin. The Arg wild allele of the P53 Arg72Pro polymorphism is more efficient in inducing apoptosis than the variant Pro allele. The variant G and A alleles of the MDM2 T309G and BCL2 C(-948)A polymorphisms, and the A allele of the BAX G(-248) A polymorphism are related to higher and lower expressions of the encoded proteins, respectively, than the wild T, C and G wild alleles. Since the roles of the referred genetic polymorphisms on the risk and clinical manifestation of the tumor are still unclear, these were the main aims of the present study. Genomic DNA from 150 patients with CM and 150 controls was analyzed by polymerase chain reaction and enzymatic digestion. The frequencies of the P53 ArgArg and the BCL2 AA genotypes were higher in patients than in controls (58.7% versus 44.7%, P= 0.02) and (28.0% versus 15.3%, P= 0.004) respectively. Carriers of these genotypes had a 1.86 and 2.87-fold increased risks for MC than others, respectively. Excesses of the P53 ArgArg + BCL2 AA and P53 ArgArg + BAX AA were seen in patients when compared to controls (36.1% versus 16.9%, P= 0.002) and (29.5% versus 15.3%, P= 0.008), and carriers of these genotypes had a 3.43 and 2.71-fold increased risks for CM than others, respectively. We concluded that the P53 Arg72Pro, BCL2 C(-938)A and BAX G(-248)A polymorphisms alter the risk for CM in our sample. We believe that carriers of the ArgArg wild genotype and the variant AA genotypes of the respective genetic polymorphisms should receive additional recommendation to avoid exposition to sunlight and should be frequently evaluated by a dermatologist with the purpose of preventing and performing an early diagnosis of the disease, respectively / Mestrado / Biologia Estrutural, Celular, Molecular e do Desenvolvimento / Mestre em Fisiopatologia Médica

Vários estudos têm relatado um aumento da incidência de câncer de pele em todo o mundo. No Brasil, o câncer de pele em geral continua sendo a neoplasia mais incidente em ambos os gêneros. Os tumores de anexos cutâneos compõem um grupo grande de neoplasias que exibem diferenciação morfológica para um dos epitélios anexiais da pele normal. Este trabalho trata dos aspectos clínicos, histológicos e imunoistoquímicos de um tumor anexial de origem folicular: o triquilemocarcinoma e sua versão benigna o triquilemoma. Os objetivos foram analisar comparativamente os dados clínicos, epidemiológicos e a expressão de citoqueratinas 15 e 16, claudinas 1,3,4,5,7 e 11, antígeno CD34, do p63 e do índice de proliferação celular pelo Ki67 entre o grupo dos Triquilemomas e Triquilemocarcinomas diagnosticados na Divisão de Dermatologia do Hospital das Clínicas da Universidade de São Paulo no período de 1991 a 2009 e definir um padrão imunofenotípico que auxilie no diagnóstico diferencial dos dois tumores. O estudo foi feito através de revisão clínico-epidemiológica de prontuário dos casos diagnosticados no período de 1991 a 2009; revisão das lâminas em HE e PAS com e sem diastase; realização das técnicas de imunoistoquímica. No período de 18 anos foram identificados 22 casos válidos de triquilemoma e 16 casos válidos de triquilemocarcinoma. Observou-se uma maior incidência de Triquilemoma entre adultos masculinos enquanto que os Triquilemocarcinomas predominaram entre os idosos femininos. A cabeça foi mais acometida entre os casos benignos que entre os malignos. A opção terapêutica predominante entre os triquilemomas foi de eletrocoagulação e de excisão cirúrgica para os demais casos. A claudina-1, claudina-4 e o CD34 apresentavam medianas mais altas nos casos benignos que nos malignos. Portanto, conclui-se que os dados epidemiológicos e clínicos dos dois grupos de tumores se distinguem em relação à idade, gênero, local de acometimento e tipo de tratamento; observou-se perda de expressão das CL1 e 4 e do CD34, marcadores de diferenciação celular, nos Triquilemocarcinomas em comparação aos Triquilemomas. Por outro lado, o índice de proliferação celular pelo Ki67 mostrou-se um marcador inútil para a distinção entre as formas benigna e maligna / Several studies have been reporting an increasing incidence in skin cancers all over the world. In Brazil, skin cancers are the most prevalent neoplasia in both genders. The skin adnexal tumors are a large group of neoplasias that differentiate into normal skin adnexal epithelium. We report here the clinical, histopathological and immunochemical aspects of the tumors of follicular origin: the trichilemmal carcinoma and its benign variation - trichilemmoma. The objectives were to analise comparatively the clinical and histological data and to compare the expression of the cytokeratins 15 and 16, claudins 1,3,4,5,7 and 11, antigen CD34, p63 and the cell proliferation index in the Ki67 between the two groups, defining a immunophenotypic pattern that could help the differential diagnosis of the two tumors. The study was made by identifying in the hospital records the cases of these tumors between 1991 and 2009. After that, a clinico-epidemiological review was made in the medical records, the histological samples were reviewed to confirm the diagnosis. The best areas were selected to compose the Tissue MicroArray that was used to immunochemical reactions. In these 18 years, there were 22 valid cases of trichilemmoma and 16 of trichilemmal carcinoma. There was a higher incidence of trichilemmoma in male adults and of trichilemmal carcinoma in female elderly. The head was more affected in the benign tumors than in the malignat ones. The treatment option was electrodissection in Trichilemmomas and surgical excision in Trichilemmal carcinomas. Claudin-1, claudin-4 and CD34 were more expressed in the first group. So, we concluded that the clinical and epidemiological data in the two groups differ in age, gender, local of the tumor and treatment option. There was loss of expression of CL1 and 4 and of CD34, cell differentiation markers, in the Trichilemmal carcinoma when compared to the Trichilemmomas. On the other hand, the Ki67 expression was of no use in differentiating the two groups of tumor

O Melanoma é um tipo de neoplasia que se origina de melanócitos normalmente presentes na epiderme. Uma das características do melanoma é a capacidade de adquirir resistência a terapias. As células de melanoma podem aumentar a liberação de vesículas extracelulares (VEs) em resposta ao tratamento com quimioterápicos. A cisplatina (CDDP) e a temozolomida (TMZ) são drogas utilizadas para o tratamento de tumores. Ambas as drogas formam adutos no DNA, mas as vias de sinalização que deflagram a morte celular são distintas. O objetivo desse estudo é investigar a morte celular da linhagem B16-F10 na presença de VEs oriundas de células B16-F10 tratadas com cisplatina CDDP ou TMZ. Inicialmente as VEs oriundas de células de melanoma murino, B16-F10, tratadas com CDDP ou TMZ e seus controles, foram isoladas por ultracentrifugações sucessivas. Para os experimentos in vitro, as células foram tratadas com as drogas em combinação com as respectivas VEs. As amostras foram realizados avaliações de ciclo celular e de morte e ensaio clonogênico. Para os experimentos in vivo, as células B16-F10 foram pré-tratadas com VEs, e posteriormente, as células foram inoculadas via subcutânea em camundongos C57BL/6 e os tumores foram mensurados diariamente. Em nosso estudo concluimos que a metodologia do isolamento de VEs é eficiente. Além disso, observamos que o tratamento com CDDP ou TMZ aumenta a liberação de VEs por células tumorais. Apesar do resultado contraditorio, as VEs liberadas por células tumorais tratadas com quimioterápicos aumentam a capacidade de sobrevivência das células de melanoma in vitro. VEs oriundas de células de melanoma não participam inicialmente da sensibilização à morte de células tumorais causada pelas mesmas drogas, mas a longo prazo, as VEs oriundas de células tratadas com a TMZ podem conferir uma resposta celular de sobrevivência às células tumorais in vitro. In vivo, o resultado é inconclusivo, uma vez que para confirmar se as VEs fazem parte da adaptação tumoral conferindo fenômenos de sobrevivência celular in vivo, é necessário avaliar em outros modelos celulares e animais / Melanoma is a neoplasm derived from melanocytes normally present in the skin specifically in the epidermis. One of the malignancies of melanoma is the ability to acquire chemoresistance. Cisplatin (CDDP) and temozolomide (TMZ) are drugs used for the treatment of tumors. Both drugs can form alkylating adducts in DNA, however, the pathways that trigger cell death are distinct. Tumor cells, including melanoma, may increase the release of extracellular vesicles (EVs) in response to chemotherapeutic treatment. The aim of this study is to investigate the cell death phenomenon in B16-F10 cell line in presence of EVs derived from chemotherapeutic-treated B16-F10 cells. For in vitro experiments, the cells were treated with CDDP or TMZ in combination with EVs from chemotherapictreated samples. For in vivo experiments, B16-F10 cells were exposed to EVs and inoculated subcutaneously in C57BL/6 mice. The growth was measured daily. In this work, we established and characterized VEs released by melanoma cells treated with chemotherapics and we established chemotherapics treatments to isolate EVs for next EVs isolation. Our results showed that CDDP or TMZ treatment increase the release of EVs by tumor cells. The EVs released by melanoma cells after CDDP or TMZ treatment seem to increase the survival capacity of melanoma cells. Thus, we concluded that EVs derived from melanoma cells do not participate in the cell death sensitization induced by CDDP or TMZ. However, EVs derived from TMZ treated cells may offer a survival effect to tumor cells in vitro a long term. In vivo, The result is inconclusive since to confirm how VEs are part of the tumor adaptation conferring cellular survival phenomena in vivo, it is necessary to evaluate in other cellular and animal models

Camundongos selecionados para a alta (AIRmax) ou baixa (AIRmin) reatividade inflamatória aguda exibem diferenças no desenvolvimento de tumores de pele. O objetivo foi analisar a expressão gênica na medula e pele dos AIRmax e AIRmin submetidos a inflamação aguda e crônica. Os AIRmax, resistentes ao tumor de pele, apresentam intenso infiltrado celular e alta expressão de Il1b, Il6, Tnf e Ifng após estímulo agudo, sendo a resposta tardia nos AIRmin. Aos trinta dias, o infiltrado celular e a expressão dos genes Il1b, Il6, Tnf, Ifng e Casp8 é maior nos AIRmin. A expressão gênica global na medula dos AIRmax 24 h após o estímulo com Biogel, revelou genes diferencialmente expressos nos cromossomos 1, 3, 6 e 11, agrupados em categorias envolvidas na migração celular e reações inflamatórias. Após o estímulo crônico com TPA, foram encontrados genes de transdução de sinal ativados e de morfogênese de epitélio reprimidos nos AIRmax. Nos AIRmin, genes de transdução de sinal Rho-GTPase e angiogênese são ativados e de proliferação de linfócitos são reprimidos. / Mice selected for high (AIRmax) or low (AIRmin) acute inflammatory reactivity exhibit significant differences in the development of skin tumors. The objective was to analyze gene expression of bone marrow and skin of AIRmax and AIRmin subjected to acute and chronic inflammation. Resistant skin tumor AIRmax have an intense cellular infiltrate and high expression of II 1b, Il6, Tnf and Ifng after acute stimulation, while in AIRmin these responses take more time. After thirty days, the cellular infiltrate and the Il1b, Il6, Tnf, Ifng and Casp8 expressions are higher in AIRmin. The global gene expression in the AIRmax bone marrow 24 h after stimulation with Biogel, showed differentially expressed genes on chromosome 1, 3, 6 and 11, that were related to cell migration and inflammatory reactions. After TPA chronic stimulation, it was observed that genes involved in signal transduction are activated and others related to the epithelium morphogenesis are suppressed in the AIRmax. In the AIRmin, genes involved in Rho-GTPase signal transduction and angiogenesis are activated and others implicated in the proliferation of lymphocytes are repressed.