Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A desnutrição durante o desenvolvimento produz alterações permanentes em diferentes sistemas de neurotransmissores, o que pode gerar modificações na respostas a drogas psicoativas. Apesar dos efeitos da desnutrição precoce no sistema colinérgico serem bem conhecidas, não existem evidências que demonstrem efeitos relacionados a susceptibilidade aos efeitos da nicotina. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar os efeitos da restrição protéica ou calórica durante a lactação de camundongos na susceptibilidade aos efeitos desta droga. Considerando que estudos demonstram que o consumo de tabaco freqüentemente se inicia na adolescência, investigamos neste período, os efeitos da nicotina no teste de campo aberto (CA), teste da preferência condicionada por lugar (CPP) e teste da preferência pela nicotina (PPN). Estudos sugerem que o estresse pode alterar a susceptibilidade ao uso de drogas, por isso foram avaliados os níveis séricos de corticosterona, o conteúdo de catecolaminas da medula adrenal e enzimas desta via. As mães foram randomicamente divididas nos seguintes grupos: 1) Grupo Controle (GC)- dieta padrão (23% de proteína); 2) Grupo Restrição Protéica (RP)- dieta isoenergética (8% de proteína) e 3) Grupo Restrição Calórica (RC)- dieta padrão em quantidade restrita (média de ingestão do grupo RP). A desnutrição abrangeu o período do segundo dia de vida pós-natal (PN2) até o desmame (PN21) e em PN30, foram realizados os testes comportamentais. Após o término dos testes de OP e CPP, os animais foram decapitados e o sangue e a adrenal coletados para análises endócrinas. Os animais do grupo RP e RC apresentaram menor ganho de peso e menor conteúdo de gordura retroperitoneal quando comparados aos animais GC. No teste CA, a administração de nicotina produziu um aumento da atividade locomotora nos animais GC e RP, o que não foi observado nos animais RC A desnutrição levou a uma diminuição do conteúdo de catecolaminas da adrenal em PN30. No teste CPP, apenas o GC e RC apresentaram padrão de condicionamento. Em relação ao teste da PPN, o grupo CG apresentou aumento no padrão de consumo de nicotina, o que não foi visto nos grupos RC e RP. A nicotina não afetou a função adrenal dos grupos programados. Estes resultados sugerem que a desnutrição durante a lactação ameniza os efeitos da nicotina durante a adolescência e que as alterações comportamentais dependem do padrão de desnutrição. / Undernutrition during brain development produces long lasting or permanent alterations in different neurotransmitter systems that could reflect on important behavioral abnormalities and altered responses to psychoactive drugs. Although the recognized effects of early malnutrition on cholinergic system, no evidence that demonstrates the influence of early undernutrition on the nicotine susceptibility has been reported. Thus, the goal of this study was to investigate the effects of protein/caloric deprivation during lactation on the susceptibility of nicotine effects in mice. Considering that tobacco consumption commonly initiates during adolescence, in the current study we investigated the effects of acute administration of nicotine in the open field test (OF), nicotine conditioning place preference (CPP) and nicotine two bottle choice test (TBC) of adolescent mice. Considering that an altered susceptibility to stress could influence the stimulatory response to nicotine, we also evaluated serum corticosterone levels and the adrenal medulla catecholamine system. Mothers were randomly designed to one of the following groups: 1) Control Group (CG) with free access to a standard laboratory diet (23% protein); 2) Protein Restricted Group (PR) with free access to a isoenergenetic diet (8% protein); or 3) Caloric Restricted Group (CR) which received standard laboratory diet in restricted quantities (mean ingestion of PR group). Thus, malnutrition extended from the second postnatal day (PN2) to weaning PN21. At PN30, mice from each litter were distributed into behavioral tests. Immediately after OF and CPP tests, the animals were decapitated and trunk blood was collected for total serum corticosterone while adrenal medulla was dissected for total catecholamine content evaluations. The litters of PR and CR groups showed less weight gain and less visceral fat mass when compared to controls. For OF, nicotine administration produced increased locomotor activity in the control and PR groups, but it was not able to produce alterations in the CR group. Undernutrition elicited a decrease in the catecholamine content of adrenal medulla on PN30. On the other hand, the PR group did not show a conditioning pattern in the CPP test. In addition, in the TBC, the CG presented an increase in the percent of nicotine intake throughout the reduction of nicotine concentration, while both CR and PR groups did not present consumption alterations. Nicotine was not able to produce any alterations in endocrine parameters. Taken together, these results suggest that undernutrition during lactation decreases the effects of nicotine during adolescence. These behavioral effects depended on the undernutrition profile.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Há um extenso número de evidências apontando para o estresse como tendo um papel crítico na iniciação, manutenção e relapso após a retirada, do hábito do tabagismo. De modo geral, adolescentes são mais sensíveis aos efeitos no sistema nervoso central de ambos estresse e nicotina, principal componente psicoativo do cigarro. No entanto, há uma escassez de estudos em neurobiologia básica que avaliem as possíveis interações entre os efeitos no sistema nervoso central entre nicotina e estresse nesta idade. Deste modo, o objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos da exposição à nicotina e estresse durante a adolescência de camundongos em comportamentos sociais e comportamentos associados a ansiedade e depressão. Para este estudo utilizamos camundongos Suíços de ambos os sexos. A partir do 30 dia pós-natal (PN) camundongos foram expostos à nicotina (até PN40) e/ou estresse (até PN38 para os animais avaliados em PN39-40 e PN40 para os animais avaliados nas outras idades). Desta forma, utilizamos quatro grupos experimentais: 1) Exposição concomitante de solução de nicotina (diluida na água potável, 50g/ml) e estresse por contenção (1h/dia); 2) Exposição somente à nicotina via oral; 3) Exposição somente ao estresse por contenção; 4) Grupo controle. Para a avaliação comportamental utilizamos: o teste do labirinto em cruz elevado (LCE), o teste de abordagem social de três câmaras (TS) e o teste do nado forçado (FST). Cada animal foi avaliado nos três testes, em um entre três momentos: ao final do período de exposição (PN39/40), após um curto período a partir do término da exposição (PN44/45) ou na vida adulta (PN69/70). A exposição ao estresse promoveu menor ganho de massa corporal durante a adolescência, sendo o consumo de nicotina incapaz de alterar este parâmetro. Além disso, o estresse não afetou o consumo da solução de nicotina. Nosso modelo não foi capaz de alterar os parâmetros de ansiedade avaliados pelo teste do LCE. Entretanto, a exposição de estresse em concomitância com nicotina gerou hiperatividade ao final do período de exposição em ambos os sexos. Na avaliação do TS e do FST observamos alterações significativas somente após período de retirada. Após um curto período de abstinência pela nicotina, fêmeas apresentaram aumento do comportamento associado à depressão, tendo este efeito sido revertido pela exposição concomitante ao estresse. De forma contrária, na mesma idade, somente a exposição combinada promoveu aumento do comportamento associado à depressão em machos. Além disso, nossos resultados sugerem um aumento de sociabilidade no grupo submetido a exposição combinada após longo período de interrupção da exposição durante a vida adulta. O presente trabalho fornece evidências experimentais que indicam que nicotina e estresse interagem durante a adolescência resultando em alterações na resposta emocional durante o período de exposição e tardiamente, após a sua interrupção causando alterações que perduram até o início da vida adulta. / Extensive evidence points out to psychological stress as having a key role in initiation, maintenance and relapse after withdrawal, of cigarette smoking. Adolescents tend to be more sensitive to the central nervous systems effects of both psychological stress and nicotine, the main psychoactive compound in cigarettes. However, there are few basic neurobiology studies evaluating the possible interactions between nicotine and psychological stress at this age. Therefore, our objective was to study the effects of nicotine and stress exposure during adolescence on anxiety-like, social and depressive-like behaviors in mice. For this study, we have used male and female Swiss mice. Starting on the 30th post-natal day (PN), mice were exposed to nicotine (ending on PN40) and/or stress (ending in PN38 for mice evaluated on PN39/40, and on PN40 for mice evaluated at other ages). Thus, four experimental groups were formed: 1) Simultaneous exposure to nicotine (drinking water, 50g/ml) and restraint stress (1h/day); 2) Nicotine-only exposure; 3) Stress-only exposure; 4) Control group. For behavioral assessment, we utilized: elevated plus-maze test (EPM), three-chambered social approach (TS) and forced swimming test (FST). We evaluated each animal on all tests at one among three time points: At the end of the exposure (PN39/40), after a short period of withdrawal (PN44/45) and at adulthood (PN69/70). Stress exposure reduced body mass gain during adolescence while nicotine had no effect on body mass during the same period. Also, stress did not affect nicotine consumption. Our model was not capable of altering anxiety parameters evaluated in EPM. However, stress+nicotine exposure caused hyperactivity at the end of exposure in both sexes. Concerning TS and FST, we have only observed significant behavioral differences after the end of the exposure. In a short period of withdrawal, nicotine-only exposed females showed an increase in depressive-like behavior, an effect that disappeared by simultaneous stress exposure. Conversely, in the same age, only combined exposure promoted an increase of depressive-like behavior in males. Our data also suggests a long-term increase of sociability in stress+nicotine exposed mice. This work provides experimental evidence for an interaction between nicotine and stress exposure in adolescence resulting in immediate, short-term and long-term alterations in emotional responses.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-11-24Bitstream added on 2014-06-13T19:04:20Z : No. of bitstreams: 1 fernandes_la_dr_araca.pdf: 1070170 bytes, checksum: 5b88fec778e5c29fd6d418138e92a16f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência da terapia fotodinâmica (PDT) como coadjuvante ao tratamento não cirúrgico da doença periodontal (DP) experimentalmente induzida em ratos tratados ou não com nicotina. Cento e oitenta ratos foram divididos em 2 grupos de 90 animais cada. Os do Grupo Controle (C) receberam aplicações subcutâneas de soro fisiológico; os do Grupo Nicotina (N) receberam aplicações subcutâneas de nicotina. As injeções foram realizadas duas vezes ao dia e iniciadas 30 dias antes da indução da DP, continuando pós tratamento periodontal até os respectivos períodos de sacrifício. A DP foi induzida através da colocação de ligadura com fio de algodão na região dento-gengival dos primeiros molares inferiores esquerdos. Após 7 dias da indução, a ligadura foi removida e, os animais foram divididos em subgrupos de acordo com os seguintes tratamentos locais: Tratamento I - raspagem e alisamento radicular (RAR) e irrigação com soro fisiológico; Tratamento II - RAR e irrigação com azul de toluidina O (TBO) e Tratamento III – RAR, irrigação com TBO e, após 1 minuto, aplicação do laser em baixa intensidade (LLLT) (GaAsAl, 660 nm, 4J), realizando a PDT. Dez animais de cada subgrupo foram sacrificados aos 7, 15 e 30 dias. Os espécimes foram processados laboratorialmente e analisados histológica, histométrica e imunoistoquímicamente. Aos 7, 15 e 30 dias, em ambos os grupos, o tratamento RAR apresentou um tecido conjuntivo desorganizado, com elevado número de neutrófilos e discreto número de fibroblastos. O tecido ósseo apresentou áreas de necrose e trabéculas ósseas finas. Nos períodos de 7 e 15 dias os animais dos grupos C e N, tratados pela PDT, apresentaram um tecido conjuntivo bem desenvolvido com moderado número de fibroblastos, discreto infiltrado inflamatório crônico e tecido ósseo moderadamente... / The aim of this study was to evaluate the influence of photodynamic therapy (PDT) as an adjunct to non-surgical treatment of periodontal disease (PD) experimental induced in rats treated with or without nicotine. One hundred and eighty rats were divided into 2 groups of 90 animals each. Control group (C) received subcutaneous infusions of saline, group of Nicotine (N) received subcutaneous infusions of nicotine. The injections were performed twice a day and started 30 days before induction of PD, continuing after periodontal treatment until their period of sacrifice. PD was induced by placing cotton ligature in the dento-gingival region of the left lower first molars. After 7 days of induction, the ligature was removed and the animals were divided into subgroups according to the following local treatments: treatment I - scaling and root planing (SRP) and irrigation with saline; Treatment II - SRP and irrigation with O toluidine blue (TBO) and Treatment III - SRP, irrigation with TBO and 1 minute after application of low intensity laser therapy (LLLT) (GaAlAs, 660 nm, 4J), performing the PDT. Ten animals of each subgroup were sacrificed at 7, 15 and 30 days. The laboratory specimens were processed and analyzed histologically, histometrically and immunohistochemically. At 7, 15 and 30 days in both groups, treatment SRP showed a disorganized tissue with high numbers of neutrophils and a small number of fibroblasts. The bone tissue showed areas of necrosis and trabecular bone thin. At 7 and 15 days the animals in groups C and N, treated by PDT, showed a well developed connective tissue with a moderate number of fibroblasts, mild chronic inflammatory infiltrate and bone moderately developed. At 30 days, they presented an intact periodontal ligament, and organized collagen fibers in parallel. The connective tissue was well-developed, healthy and with no inflammatory... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-20Bitstream added on 2014-08-13T18:00:09Z : No. of bitstreams: 1 000764801_20190820.pdf: 734784 bytes, checksum: f02d0abc63b33bea92e41da025d32f22 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este estudo avaliou histomorfometricamente, imunoistoquimicamente e pela reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa em tempo real (qRT-PCR) os efeitos da Terapia com Laser em Baixa Intensidade (LLLT) e da Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) adjuvantes ao tratamento mecânico da periodontite experimental (PE) em ratas com deficiência de estrógeno e sob influência sistêmica da nicotina. Foram utilizadas 360 ratas, divididas em 4 grupos: Grupo A (SH-vei) normais, Grupo B (SH-nic) - normais tratadas com nicotina, Grupo C (OVX-vei) - ovariectomizadas e Grupo D (OVX-nic) - ovariectomizadas tratadas com nicotina. A administração de nicotina foi iniciada nos animais do Grupo B (SH-nic) e Grupo D (OVX-nic) 30 dias antes da indução da PE. Os animais dos Grupos OVX-vei e OVX-nic foram submetidos à ovariectomia (OVX) bilateral 21 dias antes da PE realizada por adaptação de fio de algodão ao redor dos primeiros molares inferiores direitos e esquerdos. Após 7 dias, a ligadura foi removida e os animais subdivididos de acordo com os seguintes tratamentos locais realizados nos molares inferiores direitos e esquerdos: RAR – Raspagem e alisamento radicular e irrigação com soro fisiológico; LLLT - RAR e irrigação com soro fisiológico associada à LLLT; aPDT- irrigação com azul de toluidina-O (TBO) e após 1 minuto, irradiação com laser em baixa intensidade. Foram eutanasiados 10 animais de cada subgrupo, aos 7, 15 e 30 dias após o tratamento local. A perda óssea (PO) na furca foi avaliada por meio de análises histomorfométrica e imunoistoquímica. A expressão gênica das citocinas TNF-α, IL-1β e IL-6 foram avaliadas pela qRT-PCR. Os dados foram submetidos à análise estatística (α = 5%). Os animais do Grupo OVX-nic apresentaram maior PO comparativamente ao grupo SH-vei (p<0,05). O tratamento... / This study evaluated histomorphometrically, immunohistochemically and by polymerase chain reaction via real-time reverse transcriptase (qRT-PCR) the effects of Laser Therapy in Low Intensity (LLLT) and antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT) adjuncts to mechanical treatment of periodontitis experimental (PE) in rats with estrogen deficiency and under the influence of systemic nicotine. It was used 360 rats divided into 4 groups: Group SH-veh: sham treated with saline (vehicle); Group SH-nic: sham treated with nicotine; Group OVX-veh: ovariectomized treated with saline (vehicle) and Group OVX-nic: ovariectomized treated with nicotine. Nicotine was administered to groups SH-nic and OVX-nic 30 days before the induction of PE. The animals in Groups OVX-veh and OVX-nic underwent ovariectomy (OVX) bilaterally 21 days before PE performed by adaptation of cotton thread around the first molars right and left. After 7 days, the ligature was removed and the animals divided according to the following local treatments performed in the right and left molars: RAR - Scaling and root planing and irrigation with saline; LLLT - RAR and irrigation with saline associated with LLLT; aPDT - irrigation with toluidine blue O (TBO) and after 1 minute irradiation with LLLT. Ten animals were euthanized of each group at 7, 15 and 30 days after treatment site. Bone loss (BL) in the furcation was evaluated by histomorphometric and immunohistochemical analyzes. The gene expression of TNF-α, IL-1β and IL-6 were measured by qRT-PCR. Data were subjected to statistical analysis (α = 5%). The animals of the OVX-nic group showed higher BL group compared with SH-vei (p <0,05). Local treatment with aPDT showed BL reduced, decreased expression of RANKL and the number of TRAP-positive cells and increased the expression of OPG and the number... / FAPESP: 10/15094-2

Resumo A nicotina é um alcalóide encontrado em cigarros de tabaco sendo um dos maiores responsáveis pelo vício e por problemas associados ao tabagismo. Com relação ao vício, que é um fenômeno comportamental complexo, ressaltamos a ação da nicotina como um potente agente viciante que altera não só mecanismos celulares como também comportamentais e de aprendizagem. O trabalho para a reversão do vício a drogas como a nicotina é bastante difícil de modo que intervenções alternativas, como o exercício físico, são práticas que têm estado cada vez mais em evidência. Após tratarmos cronicamente ou não ratos com nicotina durante 60 dias e submetê-los ou não a atividade física espontânea por 7 semanas, verificamos que nem o tratamento crônico com a droga e nem a atividade física alteraram parâmetros como o peso e a pressão arterial média dos ratos bem como a marcação para o RNAm da enzima tirosina hidroxilase na Área Tegmental Ventral e da glutaminase no Córtex Pré-Frontal. Porém, verificamos alterações na frequência cardíaca e na ansiedade dos ratos, além do RNAm da glutaminase e do fator neurotrófico derivado do cérebro em áreas hipocampais, sugerindo que ambos o treinamento físico espontâneo e o tratamento crônico com nicotina podem alterar o comportamento, a ansiedade e a memória dos ratos utilizados. / Resumo A nicotina é um alcalóide encontrado em cigarros de tabaco sendo um dos maiores responsáveis pelo vício e por problemas associados ao tabagismo. Com relação ao vício, que é um fenômeno comportamental complexo, ressaltamos a ação da nicotina como um potente agente viciante que altera não só mecanismos celulares como também comportamentais e de aprendizagem. O trabalho para a reversão do vício a drogas como a nicotina é bastante difícil de modo que intervenções alternativas, como o exercício físico, são práticas que têm estado cada vez mais em evidência. Após tratarmos cronicamente ou não ratos com nicotina durante 60 dias e submetê-los ou não a atividade física espontânea por 7 semanas, verificamos que nem o tratamento crônico com a droga e nem a atividade física alteraram parâmetros como o peso e a pressão arterial média dos ratos bem como a marcação para o RNAm da enzima tirosina hidroxilase na Área Tegmental Ventral e da glutaminase no Córtex Pré-Frontal. Porém, verificamos alterações na frequência cardíaca e na ansiedade dos ratos, além do RNAm da glutaminase e do fator neurotrófico derivado do cérebro em áreas hipocampais, sugerindo que ambos o treinamento físico espontâneo e o tratamento crônico com nicotina podem alterar o comportamento, a ansiedade e a memória dos ratos utilizados.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:23:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6776.pdf: 1764671 bytes, checksum: 0befe5018516a7acffe79be054e73ae7 (MD5) Previous issue date: 2014-07-07 / Universidade Federal de Minas Gerais / Adolescence marks a period of increased vulnerability to drug abuse. Early initiation of tobacco use is strictly associated with alcohol use and dependence in adolescence and adulthood. The present study aims to investigate: 1) changes in anxiogenic-like effects and on operant ethanol self-administration in adult rats exposed to nicotine during adolescence; 2) changes on pro-dynorphin (PDYN) gene expression in the nucleus accumbens (NAc) on late nicotine withdrawal and after ethanol self-administration; 3) which brain areas are activated on short or long-term nicotine withdrawal during adolescence. Our results showed that pre-exposure to nicotine during ten days (3mg/kg/day; s.c) in adolescent rats, did not change anxiogenic-like effects in the elevated plus maze, 15 days after the treatment cessation [postnatal day (PND) 52], progressive ratio (PND 75-79) and binge (PND 81-84) in the operant ethanol selfadministration protocol. However, animals pre-treated with nicotine displayed increased motivation to saccharin seeking. No changes were observed on gene expression of PDYN 15 days after chronic nicotine treatment cessation or 24 hours after the last binge session of ethanol self-administration. Concerning the areas involved on nicotine withdrawal, we observed that adolescent rats exposed to nicotine through the minipumps during 10 days (PND 28-37), showed enhanced Fos activation in the medial prefrontal cortex (mPFC) 3 days after nicotine treatment cessation (PND 40). The percentage of neuronal activation in this group was 22.03%, of those activated neurons, 28.5% were GABAergic and only 2.5% were glutamatergic neurons. Meanwhile, 15 days after the mini-pumps were removed, no difference was observed on Fos activation in the different brain areas analyzed. We concluded that: a) administration of nicotine during adolescence was not able to modify anxiety-like behaviors and ethanol seeking behavior in adulthood; b) late nicotine withdrawal did not change gene expression of PDYN in NAc, as well as, did not change Fos protein neuronal activation in the regions of mPFC, NAc and habenula; c) short-term nicotine withdrawal involves the activation of neural ensembles in the mPFC. / A adolescência é o período de maior vulnerabilidade ao abuso de drogas. O início precoce do uso de tabaco está significativamente associado ao abuso e dependência de etanol na adolescência e na vida adulta. O presente trabalho teve como objetivo investigar: 1) as alterações nos comportamentos relacionados a ansiedade e na autoadministração operante de etanol em ratos adultos expostos a nicotina durante a adolescência; 2) as alterações na expressão gênica da pró-dinorfina (PDYN) no núcleo acumbens (NAc) na abstinência tardia à nicotina e ao final da autoadministração de etanol; 3) quais as áreas encefálicas ativadas na abstinência, imediata e tardia, à nicotina durante a adolescência. Nossos resultados mostraram que a administração de nicotina durante 10 dias (3mg/kg/dia; s.c), em ratos adolescentes [dia pós-natal (DPN) 28-37], não causou alterações nos comportamentos relacionados a ansiedade no labirinto em cruz elevado 15 dias após a término do tratamento (DPN 52), assim como não alterou a autoadministração operante de etanol na razão progressiva (DPN 75-79) e no binge (DPN 81-84). Contudo, animais pré-tratados com nicotina apresentaram aumento da motivação para a busca de sacarina. Não foram observadas alterações na expressão gênica de PDYN 15 dias após a suspensão do tratamento crônico com nicotina ou 24 horas após a última sessão do binge de etanol. Quanto às áreas envolvidas na abstinência à nicotina, observamos que ratos adolescentes expostos à nicotina, por meio de mini-bombas, durante 10 dias (DPN 28-37), apresentaram maior ativação de Fos no córtex pré-frontal medial (CPFm) 3 dias após o término do tratamento. A porcentagem de ativação neuronal nesse grupo, foi de 22,03%, sendo que 28,5% desses neurônios ativados eram GABAérgicos e apenas 2,5% eram glutamatérgicos. Entretanto, 15 dias após a retirada das mini-bombas não houve diferença na ativação de Fos nas diferentes áreas encefálicas. Concluímos que: a) a administração de nicotina, durante a adolescência, não foi capaz de alterar os comportamentos relacionados a ansiedade e o comportamento de busca pelo etanol na idade adulta; b) a retirada tardia da nicotina não promoveu alterações na expressão gênica de PDYN no NAc, assim como não promoveu alterações na ativação neuronal da proteína Fos nas regiões do CPFm, NAc e habenula; c) a retirada da nicotina a curto prazo envolve a ativação de grupamentos neurais no CPFm.

Orientador: Daniela Leal Zandim-Barcelos / Banca: Joni Augusto Cirelli / Banca: Flávia Aparecida Chaves Furlaneto Messora / Resumo: Os peptídeos antimicrobianos são componentes da resposta imune inata, que apresentam propriedades imunomodulatórias adjuntas às propriedades antimicrobianas e, portanto, podem ter um papel chave na susceptibilidade ou resistência a doenças na cavidade oral.O propósito deste estudo foi investigar a influência do tabagismo sobre os níveis dos peptídeos antimicrobianos, alfa-defensinas (HNP 1-3) e LL-37, no fluido crevicular gengival de pacientes com periodontite crônica, e avaliar a relação destes peptídeos com saúde e doença periodontal. Um total de 40 pacientes com periodontite crônica, sendo 20 fumantes e 20 não fumantes, e 20 pacientes periodontalmente saudáveis foram incluídos no estudo. Os parâmetros clínicos avaliados foram: profundidade de sondagem, sangramento à sondagem, nível clínico de inserção, Índice de placa visível e Índice de sangramento gengival. Amostras de fluido crevicular gengival foram coletadas com tiras de papel absorvente e o volume mensurado com Periotron. Nos pacientes com periodontite crônica, foram coletadas amostras de sítios sadios e doentes. A quantificação da LL-37 e HNP 1-3 foi realizada pela técnica ELISA sanduíche.Os níveis de LL-37 e HNP 1-3 foram menores tanto nos sítios sadios como nos sítios doentes de pacientes fumantes em comparação com os não fumantes, sendo essas diferenças significativas exceto para os níveis de LL-37 nos sítios sadios (p<0,05). Os sítios doentes dos pacientes fumantes e não fumantes com periodontite crônica mostrar... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Antimicrobial peptides are components of the innate immune response that have immunomodulatory properties adjuncts to the antimicrobial properties and, therefore, may have a key role in susceptibility or resistance to diseases in the oral cavity. The purpose of this study was to investigate the influence of smoking on the levels of antimicrobial peptides, alpha-defensins (HNP 1-3) and LL-37 in the gingival crevicular fluid of patients with chronic periodontitis, and evaluate the relationship of these peptides with health and periodontal disease. A total of 40 patients with chronic periodontitis, 20 smokers and 20 non-smokers, and 20 periodontally healthy patients were included in the study. The clinical parameters evaluated were probing depth, bleeding on probing, clinical attachment level, visible plaque index and gingival bleeding index. Samples of gingival crevicular fluid were collected with absorbent paper strips and the volume measured on Periotron. In patients with chronic periodontitis, samples of healthy and diseased sites were collected. The quantification of LL-37 and HNP 1-3 was carried out by sandwich ELISA tecnique. The levels of LL-37 and HNP 1-3 were lower both in healthy sites such as diseased sites in smokers compared to non-smokers, those with significant differences except for the LL-37 levels in healthy sites (p<0.05). Diseased sites of smokers and non-smokers with chronic periodontitis patients showed higher levels of LL-37 and lower levels of HNP 1-3 th... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-04-01T19:13:13Z No. of bitstreams: 1 JoseHenriqueTarginoDiasGois_DISSERT.pdf: 8111349 bytes, checksum: df4a2a7f9ab95c60e4e75a96288b99f9 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-04-06T00:26:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 JoseHenriqueTarginoDiasGois_DISSERT.pdf: 8111349 bytes, checksum: df4a2a7f9ab95c60e4e75a96288b99f9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-06T00:26:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JoseHenriqueTarginoDiasGois_DISSERT.pdf: 8111349 bytes, checksum: df4a2a7f9ab95c60e4e75a96288b99f9 (MD5) Previous issue date: 2015-02-24 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / A administra??o de nicotina em seres humanos e roedores ? pensada como um melhorador de mem?ria e aten??o, tamb?m pelo seu efeito positivo na Doen?a de Alzheimer. O complexo do Septo Medial / Banda Diagonal de Broca (MS/DBB) ? um dos principais sistemas colin?rgicos ? massivamente projetado para o hipocampo atrav?s da F?mbria-F?rnix, via esta chamada de via septo-hipocampal. Foi demonstrado que o MS/DBB afeta diretamente o potencial de campo local (LFP) e a organiza??o r?tmica do hipocampo, especialmente na gera??o do ritmo teta - um LFP r?tmico intrinsecamente relacionado com a fun??o mnem?nica do hipocampo. Experimentos in vitro deram evid?ncias de que a nicotina aplicada no MS/DBB pode gerar um ritmo teta na rede local do MS/DBB. Assim, o presente estudo se prop?e a elucidar a fun??o da nicotina no MS/DBB sobre a via septo-hipocampal. Experimentos in vivo, comparando o efeito de microinfus?es no MS/DBB de solu??o salina (n = 5) ou nicotina (n = 8) em camundongos anestesiados por ketamina/xilazina mostraram um aumento na densidade de pot?ncia no espectro banda de gama (35 a 55 Hz) em ambas as estruturas (teste de Wilcoxon Rank-Sum, p = 0,038), mas sem alterar a coer?ncia entre as estruturas na mesma banda (teste de Wilcoxon Rank-Sum, p = 0,60). Houve tamb?m uma diminui??o na densidade pot?ncia na banda delta (1-3 Hz) ? oscila??o induzida pela ketamina. Realizamos tamb?m experimentos in vitro sobre o efeito da nicotina na voltagem de membrana e no potencial de a??o de neur?nios do MS/DBB. Registramos neur?nios (n=22) em current-clamp antes e depois da presen?a de nicotina no meio extracellular; 12 neur?nios responderam ? nicotina, metade aumentou a taxa de potenciais de a??o; outros seis diminu?ram, diferindo significativamente no limiar do potencial de a??o (- 47,3 ? 0,9 mV vs. -41 ? 1,9 mV, respectivamente, p = 0,007) e na largura do disparo (1,6 ? 0,08 vs. 2 ms ? 0,12 ms, respectivamente, p = 0,01). Al?m disso, realizamos outro conjunto de experimentos in vitro, relativo ? conectividade das tr?s grandes popula??es neuronais de MS / DBB que usam a acetilcolina, GABA ou glutamato como neurotransmissores. O registro pareado de patch-clamp mostrou que neur?nios glutamat?rgicos e GABA?rgicos realizam contatos intra-septais capazes de produzir correntes sin?pticas em neur?nios p?s-sin?pticos do MS/DBB. A probabilidade da conectividade entre diferentes popula??es neuronais foi implementada em um modelo realista que corrobora que a rede ? altamente sens?vel ? gera??o de ritmo gama. Juntamente com os dados dispon?veis, o conjunto completo de experi?ncias corrobora que a nicotina pode atuar como potenciador cognitivo, e um substrato eletrofisiol?gico prov?vel ? atrav?s da indu??o de oscila??o gama no circuito local do MS/DBB. / Nicotine administration in humans and rodents enhances memory and attention, and also has a positive effect in Alzheimer's Disease. The Medial Septum / Diagonal Band of Broca complex (MS/DBB) ? a main cholinergic system ? massively projects to the hippocampus through the fimbria-fornix, and this pathway is called the septohippocampal pathway. It has been demonstrated that the MS/DBB acts directly on the local field potential (LFP) rhythmic organization of the hippocampus, especially in the rhythmogenesis of Theta (4-8Hz) ? an oscillation intrinsically linked to hippocampus mnemonic function. In vitro experiments gave evidence that nicotine applied to the MS/DBB generates a local network Theta rhythm within the MS/DBB. Thus, the present study proposes to elucidate the function of nicotine in the MS/DBB on the septo-hippocampal pathway. In vivo experiments compared the effect of MS/DBB microinfusion of saline (n=5) and nicotine (n=8) on Ketamine/Xylazine anaesthetized mice. We observed power spectrum density in the Gamma range (35 to 55 Hz) increasing in both structures (Wilcoxon Rank-Sum test, p=0.038) but with no change in coherence between these structures in the same range (Wilcoxon Rank-Sum test, p=0.60). There was also a decrease in power of the ketamineinduced Delta oscillation (1 to 3 Hz). We also performed in vitro experiments on the effect of nicotine on membrane voltage and action potential. We patch-clamped 22 neurons in current-clamp mode; 12 neurons were responsive to nicotine, half of them increased firing rate and other 6 decreased, and they significantly differed in action potential threshold (-47.3?0.9 mV vs. -41?1.9 mV, respectively, p=0.007) and halfwidth time (1.6?0.08 ms vs. 2?0.12 ms, respectively, p=0.01). Furthermore, we performed another set of in vitro experiments concerning the connectivity of the three major neuronal populations of MS/DBB that use acetylcholine, GABA or glutamate as neurotransmitter. Paired patch-clamp recordings found that glutamatergic and GABAergic neurons realize intra-septal connections that produce sizable currents in MS/DBB postsynaptic neurons. The probability of connectivity between different neuronal populations gave rise to a MS/DBB topology that was implemented in a realistic model, which corroborates that the network is highly sensitive to the generation of Gamma rhythm. Together, the data available in the full set of experiments suggests that nicotine may act as a cognitive enhancer, by inducing gamma oscillation in the local circuitry of the MS/DBB.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A desnutrição durante o desenvolvimento produz alterações permanentes em diferentes sistemas de neurotransmissores, o que pode gerar modificações na respostas a drogas psicoativas. Apesar dos efeitos da desnutrição precoce no sistema colinérgico serem bem conhecidas, não existem evidências que demonstrem efeitos relacionados a susceptibilidade aos efeitos da nicotina. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar os efeitos da restrição protéica ou calórica durante a lactação de camundongos na susceptibilidade aos efeitos desta droga. Considerando que estudos demonstram que o consumo de tabaco freqüentemente se inicia na adolescência, investigamos neste período, os efeitos da nicotina no teste de campo aberto (CA), teste da preferência condicionada por lugar (CPP) e teste da preferência pela nicotina (PPN). Estudos sugerem que o estresse pode alterar a susceptibilidade ao uso de drogas, por isso foram avaliados os níveis séricos de corticosterona, o conteúdo de catecolaminas da medula adrenal e enzimas desta via. As mães foram randomicamente divididas nos seguintes grupos: 1) Grupo Controle (GC)- dieta padrão (23% de proteína); 2) Grupo Restrição Protéica (RP)- dieta isoenergética (8% de proteína) e 3) Grupo Restrição Calórica (RC)- dieta padrão em quantidade restrita (média de ingestão do grupo RP). A desnutrição abrangeu o período do segundo dia de vida pós-natal (PN2) até o desmame (PN21) e em PN30, foram realizados os testes comportamentais. Após o término dos testes de OP e CPP, os animais foram decapitados e o sangue e a adrenal coletados para análises endócrinas. Os animais do grupo RP e RC apresentaram menor ganho de peso e menor conteúdo de gordura retroperitoneal quando comparados aos animais GC. No teste CA, a administração de nicotina produziu um aumento da atividade locomotora nos animais GC e RP, o que não foi observado nos animais RC A desnutrição levou a uma diminuição do conteúdo de catecolaminas da adrenal em PN30. No teste CPP, apenas o GC e RC apresentaram padrão de condicionamento. Em relação ao teste da PPN, o grupo CG apresentou aumento no padrão de consumo de nicotina, o que não foi visto nos grupos RC e RP. A nicotina não afetou a função adrenal dos grupos programados. Estes resultados sugerem que a desnutrição durante a lactação ameniza os efeitos da nicotina durante a adolescência e que as alterações comportamentais dependem do padrão de desnutrição. / Undernutrition during brain development produces long lasting or permanent alterations in different neurotransmitter systems that could reflect on important behavioral abnormalities and altered responses to psychoactive drugs. Although the recognized effects of early malnutrition on cholinergic system, no evidence that demonstrates the influence of early undernutrition on the nicotine susceptibility has been reported. Thus, the goal of this study was to investigate the effects of protein/caloric deprivation during lactation on the susceptibility of nicotine effects in mice. Considering that tobacco consumption commonly initiates during adolescence, in the current study we investigated the effects of acute administration of nicotine in the open field test (OF), nicotine conditioning place preference (CPP) and nicotine two bottle choice test (TBC) of adolescent mice. Considering that an altered susceptibility to stress could influence the stimulatory response to nicotine, we also evaluated serum corticosterone levels and the adrenal medulla catecholamine system. Mothers were randomly designed to one of the following groups: 1) Control Group (CG) with free access to a standard laboratory diet (23% protein); 2) Protein Restricted Group (PR) with free access to a isoenergenetic diet (8% protein); or 3) Caloric Restricted Group (CR) which received standard laboratory diet in restricted quantities (mean ingestion of PR group). Thus, malnutrition extended from the second postnatal day (PN2) to weaning PN21. At PN30, mice from each litter were distributed into behavioral tests. Immediately after OF and CPP tests, the animals were decapitated and trunk blood was collected for total serum corticosterone while adrenal medulla was dissected for total catecholamine content evaluations. The litters of PR and CR groups showed less weight gain and less visceral fat mass when compared to controls. For OF, nicotine administration produced increased locomotor activity in the control and PR groups, but it was not able to produce alterations in the CR group. Undernutrition elicited a decrease in the catecholamine content of adrenal medulla on PN30. On the other hand, the PR group did not show a conditioning pattern in the CPP test. In addition, in the TBC, the CG presented an increase in the percent of nicotine intake throughout the reduction of nicotine concentration, while both CR and PR groups did not present consumption alterations. Nicotine was not able to produce any alterations in endocrine parameters. Taken together, these results suggest that undernutrition during lactation decreases the effects of nicotine during adolescence. These behavioral effects depended on the undernutrition profile.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Há um extenso número de evidências apontando para o estresse como tendo um papel crítico na iniciação, manutenção e relapso após a retirada, do hábito do tabagismo. De modo geral, adolescentes são mais sensíveis aos efeitos no sistema nervoso central de ambos estresse e nicotina, principal componente psicoativo do cigarro. No entanto, há uma escassez de estudos em neurobiologia básica que avaliem as possíveis interações entre os efeitos no sistema nervoso central entre nicotina e estresse nesta idade. Deste modo, o objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos da exposição à nicotina e estresse durante a adolescência de camundongos em comportamentos sociais e comportamentos associados a ansiedade e depressão. Para este estudo utilizamos camundongos Suíços de ambos os sexos. A partir do 30 dia pós-natal (PN) camundongos foram expostos à nicotina (até PN40) e/ou estresse (até PN38 para os animais avaliados em PN39-40 e PN40 para os animais avaliados nas outras idades). Desta forma, utilizamos quatro grupos experimentais: 1) Exposição concomitante de solução de nicotina (diluida na água potável, 50g/ml) e estresse por contenção (1h/dia); 2) Exposição somente à nicotina via oral; 3) Exposição somente ao estresse por contenção; 4) Grupo controle. Para a avaliação comportamental utilizamos: o teste do labirinto em cruz elevado (LCE), o teste de abordagem social de três câmaras (TS) e o teste do nado forçado (FST). Cada animal foi avaliado nos três testes, em um entre três momentos: ao final do período de exposição (PN39/40), após um curto período a partir do término da exposição (PN44/45) ou na vida adulta (PN69/70). A exposição ao estresse promoveu menor ganho de massa corporal durante a adolescência, sendo o consumo de nicotina incapaz de alterar este parâmetro. Além disso, o estresse não afetou o consumo da solução de nicotina. Nosso modelo não foi capaz de alterar os parâmetros de ansiedade avaliados pelo teste do LCE. Entretanto, a exposição de estresse em concomitância com nicotina gerou hiperatividade ao final do período de exposição em ambos os sexos. Na avaliação do TS e do FST observamos alterações significativas somente após período de retirada. Após um curto período de abstinência pela nicotina, fêmeas apresentaram aumento do comportamento associado à depressão, tendo este efeito sido revertido pela exposição concomitante ao estresse. De forma contrária, na mesma idade, somente a exposição combinada promoveu aumento do comportamento associado à depressão em machos. Além disso, nossos resultados sugerem um aumento de sociabilidade no grupo submetido a exposição combinada após longo período de interrupção da exposição durante a vida adulta. O presente trabalho fornece evidências experimentais que indicam que nicotina e estresse interagem durante a adolescência resultando em alterações na resposta emocional durante o período de exposição e tardiamente, após a sua interrupção causando alterações que perduram até o início da vida adulta. / Extensive evidence points out to psychological stress as having a key role in initiation, maintenance and relapse after withdrawal, of cigarette smoking. Adolescents tend to be more sensitive to the central nervous systems effects of both psychological stress and nicotine, the main psychoactive compound in cigarettes. However, there are few basic neurobiology studies evaluating the possible interactions between nicotine and psychological stress at this age. Therefore, our objective was to study the effects of nicotine and stress exposure during adolescence on anxiety-like, social and depressive-like behaviors in mice. For this study, we have used male and female Swiss mice. Starting on the 30th post-natal day (PN), mice were exposed to nicotine (ending on PN40) and/or stress (ending in PN38 for mice evaluated on PN39/40, and on PN40 for mice evaluated at other ages). Thus, four experimental groups were formed: 1) Simultaneous exposure to nicotine (drinking water, 50g/ml) and restraint stress (1h/day); 2) Nicotine-only exposure; 3) Stress-only exposure; 4) Control group. For behavioral assessment, we utilized: elevated plus-maze test (EPM), three-chambered social approach (TS) and forced swimming test (FST). We evaluated each animal on all tests at one among three time points: At the end of the exposure (PN39/40), after a short period of withdrawal (PN44/45) and at adulthood (PN69/70). Stress exposure reduced body mass gain during adolescence while nicotine had no effect on body mass during the same period. Also, stress did not affect nicotine consumption. Our model was not capable of altering anxiety parameters evaluated in EPM. However, stress+nicotine exposure caused hyperactivity at the end of exposure in both sexes. Concerning TS and FST, we have only observed significant behavioral differences after the end of the exposure. In a short period of withdrawal, nicotine-only exposed females showed an increase in depressive-like behavior, an effect that disappeared by simultaneous stress exposure. Conversely, in the same age, only combined exposure promoted an increase of depressive-like behavior in males. Our data also suggests a long-term increase of sociability in stress+nicotine exposed mice. This work provides experimental evidence for an interaction between nicotine and stress exposure in adolescence resulting in immediate, short-term and long-term alterations in emotional responses.