Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CHAPTER 2: Orlistat is the first compound of a new pharmacological class which limits dietary fat absorption by inhibiting gastric and pancreatic lipases. It does not affect the neuronal circuits regulating appetite, and its action consists basically of obstructing digestion of dietary triglycerides. Recent researches suggest that orlistat stops the growth of some tumors because it inhibits the action of fatty acid synthase enzyme, whose activity favors the survival of cancer cells. However, research concerning the long-term use of this drug is unknown, and there are doubts as to possible genotóxico/mutagenic effects from its use. Thus, this study was carried out with the aim of evaluating the mutagenic, recombinogenic and carcinogenic potential of orlistat by means of a test for somatic mutation and recombination test (SMART) and test for epithelial tumor detection (wts), both in Drosophila melanogaster. When analyzed by means of SMART, larvae descending from crosses standard and high bioactivation were chronically treated with three concentrations of orlistat (2.4, 4.8 and 9.6 mg/mL) alone and in combination with DXR (0.125 mg/mL). The results demonstrated recombinogenic effect of orlistat at all concentrations tested in the HB cross and no concentration at the ST cross. In the wts test, conducted with offspring of crosses between virgin females wts/TM3 with males mwh/mwh, larvae were treated with three concentrations of orlistat quoted separately and in combination with mitomycin C (0.1 mM). The results showed that orlistat has no carcinogenic potential, nor reduce tumors induced by mitomycin C. Therefore, in these experimental conditions, orlistat had recombinogenic effects, coupled with the increased presence of cytochrome P450, but was not able to induce or inhibit the occurrence of tumors in D. melanogaster. / CAPITULO 2: O orlistat é o primeiro composto de uma nova classe farmacológica que limita a absorção de gorduras ao promover a inibição das lipases gástrica e pancreática. Ele não possui efeitos sobre circuitos neuronais reguladores do apetite e sua ação resume-se ao bloqueio da digestão dos triglicérides dietéticos. Pesquisas recentes sugerem que o orlistat paralisa o crescimento de alguns tumores por inibir a ação da enzima ácido graxo sintetase, cuja atividade favorece a sobrevivência de células cancerosas. Entretanto, não são conhecidos resultados em longo prazo e pouco se sabe sobre possíveis efeitos genotóxicos/mutagênicos associados ao seu uso. Sendo assim, o presente trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar o potencial mutagênico, recombinogênico e carcinogênico do orlistat através do teste para detecção de mutação e recombinação somática (SMART) e do teste para a detecção de clones de tumor epitelial (wts), ambos realizados em Drosophila melanogaster. Na avaliação por meio do SMART foram tratadas cronicamente larvas descendentes dos cruzamentos padrão (ST) e de alta bioativação (HB) com três concentrações de orlistat (2,4; 4,8 e 9,6 mg/mL) isoladamente e em associação com a DXR (0,125 mg/mL). Os resultados demonstraram efeito recombinogênico do orlistat em todas as concentrações testadas no cruzamento HB e em nenhuma concentração no cruzamento ST. No teste wts, realizado com descendentes do cruzamento de fêmeas virgens wts/TM3 com machos mwh/mwh, as larvas foram tratadas com as três concentrações citadas de orlistat isoladamente e em associação com a mitomicina C (0,1 mM). Os resultados mostraram que o orlistat não possui potencial carcinogênico e também não reduz os tumores induzidos pela mitomicina C. Portanto, nas presentes condições experimentais, o orlistat apresentou efeito recombinogênico, associado à presença aumentada de enzimas do citocromo P450, porém não foi capaz de induzir, nem inibir a ocorrência de tumores em D. melanogaster. / Mestre em Genética e Bioquímica

Orientador: Edgard Graner / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-27T15:46:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_LucianaYamamotode_D.pdf: 2870342 bytes, checksum: 136928121fd9ee8f8c8b29bf904ee111 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: O carcinoma espinocelular (CEC) é a neoplasia epitelial maligna mais frequente na cavidade oral, que pode apresentar vários graus de diferenciação escamosa e emite metástases em linfonodos regionais precocemente. Ocorre predominantemente na quinta e sexta décadas de vida em pacientes etilistas e tabagistas. O prognóstico é dependente do tamanho do tumor primário e da presença de linfonodos positivos e/ou metástases à distância no momento do diagnóstico. A cirurgia é a principal modalidade terapêutica para o CEC oral, no entanto, em estágios avançados, os pacientes são incluídos em protocolos radioterápicos e quimioradioterápicos. 5-fluorouracil (5-FU), cisplatina (CDDP) e paclitaxel (PTX) são drogas usadas em regimes quimioterapêuticos de várias neoplasias, dentre as quais o CEC oral. Entretanto, independente da modalidade de tratamento, a taxa de sobrevida global em 5 anos ainda está próxima a 50%. Diversos estudos mostram que a enzima metabólica ácido graxo sintase (FASN), responsável pela biossíntese endógena de ácidos graxos de cadeia longa, apresenta expressão aumentada em neoplasias malignas, incluindo o CEC oral, no qual está aparentemente associada a um pior prognóstico. Orlistat (ORL) é uma droga antiobesidade que também possui propriedades antineoplásicas por inibir de maneira irreversivel FASN. Em nosso laboratório, demonstramos que os camundongos BALB/c nude inoculados de maneira ortotópica com células SCC-9 ZsGreen LN1 e tratados com ORL apresentam CECs de língua menores e redução significativa (43%) no número de metástases para linfonodos cervicais. Até o momento, não existem estudos investigando o efeito de ORL como adjuvante nos protocolos de quimioterapia em uso clínico. Portanto, no presente trabalho, investigamos os efeitos da associação de ORL com 5-FU, CDDP e PTX, em seus respectivos IC50, na linhagem celular metastática SCC-9 ZsGreen LN1, sobre a proliferação, morte, migração (em monocamada e em transwell) e invasão celular. As combinações ORL + CDDP (OC) e ORL + PTX (OP) foram as únicas capazes de aumentar significativamente os índices apoptóticos em 48 h de tratamento, o que foi precedido por acúmulo das células nas fases S e G2/M do ciclo celular, respectivamente. A terapia ORL + 5-FU (OF) não foi capaz de induzir alterações significativas na progressão do ciclo ou na morte celular. OP reduziu a expressão de ciclina B1, mas sem causar alterações significativas em CDK1 ou na fosfatase Cdc25C, os quais constituem complexos proteicos envolvidos diretamente na transição G2/M. Já OC, apesar de não alterar os níveis proteicos de CDK1, reduziu a expressão de ciclina B1 e de Cdc25C. OC e OP aumentaram a expressão de FASN mas não alteraram significativamente os níveis do receptor ERBB2, envolvido na regulação desta enzima. O fenótipo invasivo foi reduzido pelo tratamento com OC e OP, mas a capacidade migratória das células foi alterada principalmente pela ação de PTX. Em conjunto, estes achados sugerem que as combinações OC e OP têm efeitos sinérgicos nas células metastáticas SCC-9 ZsGreen LN-1 e potencial aplicação no tratamento de CECs orais / Abstract: Squamous cell carcinoma (SCC) is the most frequent malignant epithelial tumor of the oral cavity, which presents variable degree of squamous differentiation and early regional lymph node metastases. It is most frequent in alcohol and tobacco users at the fifth and sixth decades of life. The prognosis of oral SCC depends on the size of the primary tumor, presence of positive lymph nodes and / or distant metastases at the moment of diagnosis. Surgery is the main treatment modality of choice for oral SCC, however, in advanced stages, patients are included in radiotherapy and chemoradiotherapy protocols. 5-fluorouracil (5-FU), cisplatin (CDDP) and paclitaxel (PTX) are used in chemotherapeutic regimens of several neoplasms, including OSCC. However, regardless the treatment modality, the overall 5-year survival rate is approximately 50%. Several studies demonstrate that the metabolic enzyme fatty acid synthase (FASN), responsible for the endogenous biosynthesis of long-chain fatty acids, is highly expressed in malignant neoplasms, including oral SCC, in which it seems to be associated with a worse prognosis. Orlistat (ORL) is an anti-obesity drug that also has antineoplastic properties by irreversibly inhibiting FASN. In our laboratory, we previously demonstrated that BALB/c nude mice orthotopically inoculated with SCC-9 ZsGreen LN1 cells and treated with ORL have smaller primary tumors as well as significant less cervical lymph node metastases (43%). To date, there are no studies investigating the effect of ORL as an adjuvant for chemotherapy of OSCC. In the present study, we describe the effects of ORL combined with 5-FU, CDDP and PTX at their respective IC50 on proliferation, death, migration and invasion on metastatic SCC-9 ZsGreen LN-1 cells. ORL + CDDP (OC) and ORL + PTX (OP) significantly increased apoptosis after 48 h, which was preceded by the accumulation of cells in the S and G2/M phases of the cell cycle, respectively. ORL + 5-FU therapy (OF) did not change cell cycle progression or cell death. OP decreased cyclin B1 production without significant changes in CDK1 and Cdc25C levels, which are responsible for G2/M transition. Although CDK1 were not changed by OC, this combination reduced the expression of cyclin B1 and Cdc25C. OC and OP increased FASN but not changed ERBB2, a cell surface receptor involved in the regulation of the former. The invasive phenotype was reduced by treatment with OC and OP, however, PTX was the main drug responsible for the inhibition of cell migration. Together, these findings suggest that OC and OP combinations show synergistic effects in the metastatic SCC-9 ZsGreen LN-1 cells and may have potential application for the oral SCC treatment / Doutorado / Patologia / Doutora em Estomatopatologia

Orientador: Edgard Graner / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-28T00:41:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Melo_EstevaoAzevedo_M.pdf: 1050744 bytes, checksum: b28d2d7f1bf1683ed75a9b3e47166ad2 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: A ácido graxo sintase (FASN) é a enzima responsável pela biossíntese endógena de ácidos graxos e apontada como uma oncoproteína metabólica, por favorecer a proliferação e sobrevivência das células tumorais nas quais sua expressão é elevada. Vários são os compostos capazes de inibir a atividade de FASN, dentre eles o orlistat (Xenical®), que possui efeitos antiproliferativos previamente mostrados em células de câncer de mama, próstata, boca e melanoma. O sistema imunológico apresenta um importante papel na prevenção e defesa do organismo contra neoplasias malignas. As células do sistema imune que se infiltram nos melanomas são produtoras de uma vasta gama de citocinas, dentre elas interleucina 12 (IL-12) e interferon gama (IFN-?) que favorecem uma resposta imune bem sucedida contra os tumores, porém, as células dos melanomas possuem capacidade de produzir interleucina 10 (IL-10) e fator de crescimento transformante beta (TGF-?), capazes de inibir as células imunocompetentes, favorecendo a progressão tumoral e disseminação metastática. O objetivo deste estudo foi avaliar a secreção das citocinas IL-10, IL-12, IFN-? e TGF-? pelas células de melanoma murino B16-F10 após tratamento com orlistat. Para isto, inicialmente determinou-se a dosagem de orlistat capaz de inibir a proliferação celular em 50% (IC50). Em seguida, as células foram tratadas por 24 e 48 horas, quando realizou-se a quantificação da secreção das citocinas por ELISA. Após 24 horas de tratamento, observou-se aumento da secreção de IL-10 e IL-12, no entanto, após 48 horas de tratamento não foi detectada diferenças estatisticamente significantes na secreção de ambas as citocinas, quando comparadas aos seus controles. IFN-? e TGF-? não foram detectáveis. Assim, os resultados desta pesquisa mostram que o tratamento com orlistat alterou a produção das citocinas IL-10 e IL-12, sugerindo que o tratamento promove um equilíbrio entre estas citocinas pró e anti-inflamatórias nas células estudadas / Abstract: Fatty acid synthase (FASN) is the enzyme responsible for the endogenous biosynthesis of fatty acids suggested as a metabolic oncoprotein by promoting proliferation and survival of cancer cells. Several compounds are known to inhibit FASN activity, including orlistat (Xenical®), which has antiproliferative effects in breast, prostate, and oral cancer as well as melanoma cells. Melanoma is an aggressive malignant tumor of melanocytes with high propensity for metastatic spread and resistant to chemotherapy. The immune system plays an important role in the prevention and defense against malignant neoplams. In fact, immune cells that infiltrate melanomas produce a wide range of cytokines, such as interleukin 12 (IL-12) and interferon gamma (IFN-?), which favor a successful immune response against the tumor. However, melanomas cells are able to produce interleukin 10 (IL-10) and transforming growth factor beta (TGF-?) and in turn inhibit immunocompetent cells, favoring tumor progression and metastatic spread. The aim of this research was to evaluate the effect of the FASN inhibitor orlistat on the secretion of the cytokines IL-10, IL-12, IFN-? and TGF-? by B16-F10 mouse melanoma cells. For this purpose, we first searched for the IC50 Of orlistat in B16-F10 cells. Then, cells were treated for 24 and 48 hours with the drug and the secretion of cytokines quantified by ELISA. After 24 hours of treatment the secretion of IL-10 and IL-12 was increased, however, after 48 hours there were no statistically significant changes in the secretion of both cytokines, compared to their controls. IFN-? and TGF-? were not detectable. Thus, the results of this study show that the treatment with orlistat change the production of IL-10 and IL-12, suggesting a balance between the secretion of pro- and anti-inflammatory cytokines / Mestrado / Estomatopatologia / Mestre em Estomatopatologia

No description available.

A síndrome dos ovários policísticos (PCOS) é o distúrbio endócrino mais comum em mulheres em idade reprodutiva, sendo caracterizado por anovulação crônica e manifestações de hiperandrogenismo. O sobrepeso e a obesidade afetam a maioria das mulheres com PCOS e, quando presentes, podem acentuar as alterações reprodutivas e metabólicas associadas à síndrome. Dessa forma, a redução de peso através da restrição calórica é de suma importância nas mulheres com PCOS e excesso de peso. Entretanto, ainda não está estabelecido se a composição da dieta por si só pode ter efeitos significativos sobre as alterações metabólicas e hormonais da PCOS. Poucos ensaios clínicos randomizados avaliando o efeito de diferentes intervenções dietéticas foram realizados em mulheres com PCOS, sendo que os estudos existentes apresentam, em sua maioria, curta duração e pequeno tamanho amostral. Dietas com redução de carboidratos, assim como dietas com baixo índice glicêmico e carga glicêmica têm sido o principal foco de estudo em mulheres com PCOS e, embora os resultados sejam controversos, estudos demonstram superioridade desses tipos de dieta em relação a uma dieta convencional na melhora do perfil antropométrico e da sensibilidade insulínica. Por outro lado, mudanças de estilo de vida podem não ser suficientes para promover uma redução de peso significativa e intervenções farmacêuticas podem ser necessárias. O orlistat é um fármaco usado no tratamento da obesidade que age através da inibição das lipases gástricas e pancreáticas e não tem efeitos adversos sistêmicos, sendo o único fármaco antiobesidade disponível em muitos países. Dessa forma, com o objetivo de avaliar os efeitos do orlistat nas variáveis clínicas relacionadas à perda de peso, assim como comparar esses efeitos com aqueles obtidos com o uso da metformina, em mulheres com PCOS, realizou-se uma revisão sistemática e meta-análise. Os resultados dessa revisão sistemática sugerem que o orlistat leva a uma redução significativa do peso/índice de massa corporal (IMC) em mulheres com PCOS. Além disso, os resultados da meta-análise evidenciaram que o orlistat e a metformina têm efeitos similares na redução de IMC, testosterona, Homeostasis Model Assessment of Insulin Resistance (HOMA-IR) e insulina em mulheres com PCOS com sobrepeso e obesidade. Outro fator a ser considerado é o aumento do risco cardiovascular associado à PCOS. Estudos demonstram que as alterações cardiovasculares pré-clínicas são mais frequentes nesta população do que em mulheres sem a síndrome de mesma idade. A variabilidade da frequência cardíaca (VFC) é a medida das variações cíclicas dos intervalos entre as batidas cardíacas (intervalo R-R), e reflete a função cardíaca autonômica. Alterações na VFC podem refletir doença cardiovascular subclínica. A redução do consumo de gordura saturada tem um importante papel na prevenção primária e secundária de doenças cardiovasculares. Dessa forma, realizou-se um estudo com objetivo de avaliar se o consumo de ácidos graxos saturados (SFA) está associado com VFC em mulheres com PCOS. Oitenta e quatro mulheres com PCOS foram incluídas no estudo. A análise da VFC foi realizada no repouso e após teste de stress mental. As participantes foram estratificadas de acordo com a mediana do consumo de SFA (8,5% do consumo energético total), avaliado por questionário de frequência alimentar. Os resultados desse estudo indicam que o menor consumo de SFA combinado com menor consumo de carne vermelha e maior consumo de frutas, vegetais e feijões está associado com melhor VFC em resposta ao stress e níveis circulantes mais baixos de testosterona em mulheres com PCOS. / Polycystic ovary syndrome (PCOS), the most common endocrinological disorder in women of reproductive age, is characterized by hyperandrogenism and chronic anovulation. Obesity or overweight affect most of patients with PCOS and may accentuate reproductive and metabolic issues. Thus, weight reduction through calorie restriction is extremely important in overweight/obese PCOS women. However, it remains unclear whether the diet composition per se may have significant effects on metabolic and hormonal issues of PCOS. A few randomized controlled trials (RCTs) evaluating the effect of different dietary interventions have been performed in PCOS women, and most studies have short-term and small sample size. Low-carbohydrate diets as well as diets with low glycemic index and glycemic load have been the main focus of studies in PCOS women, and although the results are controversial, studies demonstrated superiority of these diets in relation to a conventional diet in improving anthropometric profile and insulin sensitivity. On the other hand, lifestyle changes may not be sufficient to promote significant weight loss, and pharmaceutical interventions may be required. Orlistat is a drug for the treatment of obesity that acts by inhibiting gastric and pancreatic lipases. Orlistat does not have systemic adverse effects and it is currently the sole anti-obesity agent available in many countries. In this way, a systematic review and meta-analysis was performed. The aim was to assess the effects of orlistat on weight loss-associated clinical variables and to compare these effects to those obtained with metformin treatment in overweight/obese women with PCOS. The results of this systematic review indicate that orlistat leads to significant reduction in weight/body mass index (BMI) in PCOS. In addition, the results of meta-analysis indicate that orlistat and metformin have similar effects in reducing BMI, HOMA, testosterone and insulin in overweight/obese PCOS women. Another point to consider is the increased cardiovascular risk associated with PCOS. Studies have demonstrated that preclinical cardiovascular disorders are more frequent in PCOS than in women without the syndrome of same age. The heart rate variability (HRV) is a measure of the time variation between heart beats (R-R interval), and reflects autonomic cardiac function. Alterations in HRV may reflect subclinical cardiovascular disease. Reduction in saturated fat intake has an important role in primary and secondary of cardiovascular disease. Thus, we performed a study assessing whether dietary saturated fatty acids (SFA) intake is associated with stress-induced HRV in patients with PCOS. Eighty-four PCOS women were included in the study. The HRV analysis was performed at rest and after mental stress test. Participants were stratified by median SFA intake (8.5% of daily energy intake), assessed by food frequency questionnaire. The results indicate that lower SFA intake is associated with more favorable stress-related HRV and lower testosterone in women with PCOS.

Loh Shwu Chun. / Thesis (M.Phil.)--Chinese University of Hong Kong, 2005. / Includes bibliographical references (leaves [109]-120). / Abstracts in English and Chinese; appendix also in Chinese. / Acknowledgements --- p.i / Abstract --- p.ii / Abstract (in Chinese) --- p.iv / List of Abbreviations --- p.v / List of Tables --- p.vii / List of Figures --- p.ix / Table of Contents / Chapter Chapter One: --- Introduction and Study Objectives / Chapter 1. --- Introduction --- p.1 / Chapter 1.1 --- Definition and diagnostic criteria of the metabolic syndrome --- p.2 / Chapter 1.2 --- Clinical states of the metabolic syndrome --- p.5 / Chapter 1.2.1 --- Impaired Glucose Tolerance (IGT) and Impaired Fasting Glucose (IFG) --- p.6 / Chapter 1.2.2 --- The metabolic syndrome and type 2 diabetes mellitus --- p.7 / Chapter 1.2.3 --- Dyslipidaemia --- p.8 / Chapter 1.2.4 --- Hypertension --- p.10 / Chapter 1.2.5 --- Obesity --- p.11 / Chapter 1.3 --- Effects of weight loss on the metabolic syndrome --- p.13 / Chapter 1.4 --- Ethnic differences in the prevalence of the metabolic syndrome --- p.15 / Chapter 1.5 --- Treatment of the metabolic syndrome --- p.16 / Chapter 1.6 --- Oral Hypoglycaemic agents and their failure in the metabolic syndrome --- p.17 / Chapter 1.6.1 --- Sulphonylureas --- p.17 / Chapter 1.6.2 --- Biguanides --- p.18 / Chapter 1.6.3 --- Alpha-glucosidase Inhibitors --- p.20 / Chapter 1.6.4 --- Peroxisome Proliferator-Activated Receptors (PPARs) --- p.21 / Chapter 1.6.4.1 --- Thiazolinedinediones --- p.22 / Chapter 1.6.4.1.1 --- Rosiglitazone --- p.24 / Chapter 1.6.4.1.1.1 --- Mode of Action --- p.24 / Chapter 1.6.4.1.1.2 --- Adverse events and current status --- p.26 / Chapter 1.7 --- Orlistat --- p.27 / Chapter 1.7.1 --- Mode of Action --- p.28 / Chapter 1.7.2 --- Adverse events and current status --- p.28 / Chapter 1.7.3 --- Therapeutic Potential in the Metabolic Syndrome --- p.29 / Chapter 1.8 --- Study Hypothesis --- p.30 / Chapter 1.9 --- Study Objectives --- p.30 / Chapter Chapter Two: --- Research Design and Methods / Chapter 2 --- Study Protocol --- p.31 / Chapter 2.1 --- Overall Design --- p.31 / Chapter 2.1.1 --- Patients Selection Criteria --- p.31 / Chapter 2.1.1.1 --- Inclusion Criteria --- p.31 / Chapter 2.1.1.2 --- Exclusion Criteria --- p.33 / Chapter 2.1.2 --- Recruitment Period --- p.34 / Chapter 2.1.2.1 --- Screening Period --- p.34 / Chapter 2.1.2.2 --- Run- In Period (Visit 0) --- p.35 / Chapter 2.1.2.3 --- Randomisation --- p.35 / Chapter 2.1.2.4 --- Evaluation Periods (Visit 2 to 4) --- p.37 / Chapter 2.2 --- Investigations --- p.37 / Chapter 2.2.1 --- Oral Glucose Tolerance Test (OGTT) --- p.38 / Chapter 2.2.2 --- Anthropometric measurements --- p.38 / Chapter 2.3 --- Analytical Methods --- p.39 / Chapter 2.3.1 --- Determinations of insulin levels in plasma samples --- p.39 / Chapter 2.3.1.1 --- Principle of the Insulin assay --- p.40 / Chapter 2.3.2 --- Determinations of glucose concentrations in samples --- p.42 / Chapter 2.3.2.1. --- Principle of the glucose assay --- p.42 / Chapter 2.4 --- Calculations --- p.43 / Chapter 2.4.1 --- Insulin (hepatic) sensitivity (HOMA) --- p.43 / Chapter 2.4.2 --- Area Under the Curves --- p.44 / Chapter 2.4.3 --- Sample Size Calculations --- p.45 / Chapter 2.5 --- Statistical Analysis --- p.46 / Chapter Chapter Three: --- Results / Chapter 3.1 --- Study Population --- p.48 / Chapter 3.2 --- Randomisation --- p.49 / Chapter 3.3 --- Study Results --- p.50 / Chapter 3.3.1 --- Indices of Glycaemic Control --- p.54 / Chapter 3.3.1.1 --- HbAlc --- p.54 / Chapter 3.3.1.2 --- Fasting Plasma Glucose --- p.58 / Chapter 3.3.1.3 --- Fasting Insulin --- p.58 / Chapter 3.3.1.4 --- 75g Oral Glucose Tolerance Test --- p.59 / Chapter 3.3.1.4.1 --- Glucose --- p.59 / Chapter 3.3.1.4.1.1 --- 2hr-Glucose --- p.61 / Chapter 3.3.1.4.1.2 --- GlucoseAuc --- p.62 / Chapter 3.3.1.4.2 --- Insulin --- p.63 / Chapter 3.3.1.4.2.1 --- 2-hr insulin --- p.63 / Chapter 3.3.1.4.2.2 --- InsulinAuc --- p.65 / Chapter 3.3.1.5 --- HOMA score --- p.67 / Chapter 3.3.2 --- Clinical Determinants --- p.69 / Chapter 3.3.2.1 --- Lipid Profiles --- p.69 / Chapter 3.3.2.1.1. --- Total Cholesterol --- p.69 / Chapter 3.3.2.1.2 --- HDL-Cholesterol --- p.70 / Chapter 3.3.2.1.3 --- LDL-Cholesterol --- p.71 / Chapter 3.3.2.1.4 --- Triglycerides --- p.72 / Chapter 3.3.2.2 --- Anthropometric Evaluations --- p.74 / Chapter 3.3.2.2.1 --- Body Weight --- p.74 / Chapter 3.3.2.2.2 --- Waist Circumference Difference --- p.75 / Chapter 3.3.2.2.3 --- Hip --- p.76 / Chapter 3.3.2.2.4 --- Body Fat --- p.78 / Chapter 3.3.2.2.5 --- BMI --- p.78 / Chapter 3.3.2.3 --- Blood Pressure --- p.79 / Chapter 3.3.2.4 --- RCCA and LCCA --- p.79 / Chapter 3.3.2.5 --- Other outstanding measurements --- p.82 / Chapter 3.4 --- Side Effects experienced --- p.82 / Chapter Chapter Four: --- Discussion and Conclusion / Chapter 4.1 --- Summary of the results --- p.83 / Chapter 4.1.1 --- Effects of Diet and Lifestyle Changes --- p.83 / Chapter 4.1.2 --- Effects of Orlistat --- p.84 / Chapter 4.1.3 --- Effects of Rosiglitazone --- p.35 / Chapter 4.2 --- Implications for therapy --- p.86 / Chapter 4.2.1 --- Management of metabolic syndrome --- p.87 / Chapter 4.2.2 --- Early Diagnosis --- p.88 / Chapter 4.2.3 --- Lifestyle Modification --- p.89 / Chapter 4.2.4 --- Pharmacological Targets --- p.92 / Chapter 4.2.4.1 --- Statins --- p.92 / Chapter 4.2.4.2 --- Fibrates --- p.93 / Chapter 4.2.4.3 --- ACE Inhibitors --- p.93 / Chapter 4.2.4.4 --- Thiazolidinediones --- p.94 / Chapter 4.2.4.4.1 --- Economic Evaluations of Thiazolidinediones --- p.97 / Chapter 4.2.4.5 --- Orlistat --- p.98 / Chapter 4.2.4.5.1 --- Economic Evaluations of Orlistat --- p.102 / Chapter 4.3 --- Limitations of the study --- p.104 / Chapter 4.3.1 --- Small sample size --- p.104 / Chapter 4.3.2 --- Short period of study --- p.105 / Chapter 4.3.3 --- Adherence to lifestyle modifications --- p.105 / Chapter 4.3.4 --- Analytical assays --- p.106 / Chapter 4.3.5 --- Follow up end of study --- p.106 / Chapter 4.3.6 --- Ultrasound measurement of the common carotid arteries --- p.106 / Chapter 4.3.7 --- Availability of thiazolinediones --- p.107 / Chapter 4.4 --- Conclusion and Implications for future studies --- p.107 / References --- p.110 / Appendix I --- p.121 / Appendix II --- p.122 / Appendix III --- p.125

A síndrome dos ovários policísticos (PCOS) é o distúrbio endócrino mais comum em mulheres em idade reprodutiva, sendo caracterizado por anovulação crônica e manifestações de hiperandrogenismo. O sobrepeso e a obesidade afetam a maioria das mulheres com PCOS e, quando presentes, podem acentuar as alterações reprodutivas e metabólicas associadas à síndrome. Dessa forma, a redução de peso através da restrição calórica é de suma importância nas mulheres com PCOS e excesso de peso. Entretanto, ainda não está estabelecido se a composição da dieta por si só pode ter efeitos significativos sobre as alterações metabólicas e hormonais da PCOS. Poucos ensaios clínicos randomizados avaliando o efeito de diferentes intervenções dietéticas foram realizados em mulheres com PCOS, sendo que os estudos existentes apresentam, em sua maioria, curta duração e pequeno tamanho amostral. Dietas com redução de carboidratos, assim como dietas com baixo índice glicêmico e carga glicêmica têm sido o principal foco de estudo em mulheres com PCOS e, embora os resultados sejam controversos, estudos demonstram superioridade desses tipos de dieta em relação a uma dieta convencional na melhora do perfil antropométrico e da sensibilidade insulínica. Por outro lado, mudanças de estilo de vida podem não ser suficientes para promover uma redução de peso significativa e intervenções farmacêuticas podem ser necessárias. O orlistat é um fármaco usado no tratamento da obesidade que age através da inibição das lipases gástricas e pancreáticas e não tem efeitos adversos sistêmicos, sendo o único fármaco antiobesidade disponível em muitos países. Dessa forma, com o objetivo de avaliar os efeitos do orlistat nas variáveis clínicas relacionadas à perda de peso, assim como comparar esses efeitos com aqueles obtidos com o uso da metformina, em mulheres com PCOS, realizou-se uma revisão sistemática e meta-análise. Os resultados dessa revisão sistemática sugerem que o orlistat leva a uma redução significativa do peso/índice de massa corporal (IMC) em mulheres com PCOS. Além disso, os resultados da meta-análise evidenciaram que o orlistat e a metformina têm efeitos similares na redução de IMC, testosterona, Homeostasis Model Assessment of Insulin Resistance (HOMA-IR) e insulina em mulheres com PCOS com sobrepeso e obesidade. Outro fator a ser considerado é o aumento do risco cardiovascular associado à PCOS. Estudos demonstram que as alterações cardiovasculares pré-clínicas são mais frequentes nesta população do que em mulheres sem a síndrome de mesma idade. A variabilidade da frequência cardíaca (VFC) é a medida das variações cíclicas dos intervalos entre as batidas cardíacas (intervalo R-R), e reflete a função cardíaca autonômica. Alterações na VFC podem refletir doença cardiovascular subclínica. A redução do consumo de gordura saturada tem um importante papel na prevenção primária e secundária de doenças cardiovasculares. Dessa forma, realizou-se um estudo com objetivo de avaliar se o consumo de ácidos graxos saturados (SFA) está associado com VFC em mulheres com PCOS. Oitenta e quatro mulheres com PCOS foram incluídas no estudo. A análise da VFC foi realizada no repouso e após teste de stress mental. As participantes foram estratificadas de acordo com a mediana do consumo de SFA (8,5% do consumo energético total), avaliado por questionário de frequência alimentar. Os resultados desse estudo indicam que o menor consumo de SFA combinado com menor consumo de carne vermelha e maior consumo de frutas, vegetais e feijões está associado com melhor VFC em resposta ao stress e níveis circulantes mais baixos de testosterona em mulheres com PCOS. / Polycystic ovary syndrome (PCOS), the most common endocrinological disorder in women of reproductive age, is characterized by hyperandrogenism and chronic anovulation. Obesity or overweight affect most of patients with PCOS and may accentuate reproductive and metabolic issues. Thus, weight reduction through calorie restriction is extremely important in overweight/obese PCOS women. However, it remains unclear whether the diet composition per se may have significant effects on metabolic and hormonal issues of PCOS. A few randomized controlled trials (RCTs) evaluating the effect of different dietary interventions have been performed in PCOS women, and most studies have short-term and small sample size. Low-carbohydrate diets as well as diets with low glycemic index and glycemic load have been the main focus of studies in PCOS women, and although the results are controversial, studies demonstrated superiority of these diets in relation to a conventional diet in improving anthropometric profile and insulin sensitivity. On the other hand, lifestyle changes may not be sufficient to promote significant weight loss, and pharmaceutical interventions may be required. Orlistat is a drug for the treatment of obesity that acts by inhibiting gastric and pancreatic lipases. Orlistat does not have systemic adverse effects and it is currently the sole anti-obesity agent available in many countries. In this way, a systematic review and meta-analysis was performed. The aim was to assess the effects of orlistat on weight loss-associated clinical variables and to compare these effects to those obtained with metformin treatment in overweight/obese women with PCOS. The results of this systematic review indicate that orlistat leads to significant reduction in weight/body mass index (BMI) in PCOS. In addition, the results of meta-analysis indicate that orlistat and metformin have similar effects in reducing BMI, HOMA, testosterone and insulin in overweight/obese PCOS women. Another point to consider is the increased cardiovascular risk associated with PCOS. Studies have demonstrated that preclinical cardiovascular disorders are more frequent in PCOS than in women without the syndrome of same age. The heart rate variability (HRV) is a measure of the time variation between heart beats (R-R interval), and reflects autonomic cardiac function. Alterations in HRV may reflect subclinical cardiovascular disease. Reduction in saturated fat intake has an important role in primary and secondary of cardiovascular disease. Thus, we performed a study assessing whether dietary saturated fatty acids (SFA) intake is associated with stress-induced HRV in patients with PCOS. Eighty-four PCOS women were included in the study. The HRV analysis was performed at rest and after mental stress test. Participants were stratified by median SFA intake (8.5% of daily energy intake), assessed by food frequency questionnaire. The results indicate that lower SFA intake is associated with more favorable stress-related HRV and lower testosterone in women with PCOS.

A síndrome dos ovários policísticos (PCOS) é o distúrbio endócrino mais comum em mulheres em idade reprodutiva, sendo caracterizado por anovulação crônica e manifestações de hiperandrogenismo. O sobrepeso e a obesidade afetam a maioria das mulheres com PCOS e, quando presentes, podem acentuar as alterações reprodutivas e metabólicas associadas à síndrome. Dessa forma, a redução de peso através da restrição calórica é de suma importância nas mulheres com PCOS e excesso de peso. Entretanto, ainda não está estabelecido se a composição da dieta por si só pode ter efeitos significativos sobre as alterações metabólicas e hormonais da PCOS. Poucos ensaios clínicos randomizados avaliando o efeito de diferentes intervenções dietéticas foram realizados em mulheres com PCOS, sendo que os estudos existentes apresentam, em sua maioria, curta duração e pequeno tamanho amostral. Dietas com redução de carboidratos, assim como dietas com baixo índice glicêmico e carga glicêmica têm sido o principal foco de estudo em mulheres com PCOS e, embora os resultados sejam controversos, estudos demonstram superioridade desses tipos de dieta em relação a uma dieta convencional na melhora do perfil antropométrico e da sensibilidade insulínica. Por outro lado, mudanças de estilo de vida podem não ser suficientes para promover uma redução de peso significativa e intervenções farmacêuticas podem ser necessárias. O orlistat é um fármaco usado no tratamento da obesidade que age através da inibição das lipases gástricas e pancreáticas e não tem efeitos adversos sistêmicos, sendo o único fármaco antiobesidade disponível em muitos países. Dessa forma, com o objetivo de avaliar os efeitos do orlistat nas variáveis clínicas relacionadas à perda de peso, assim como comparar esses efeitos com aqueles obtidos com o uso da metformina, em mulheres com PCOS, realizou-se uma revisão sistemática e meta-análise. Os resultados dessa revisão sistemática sugerem que o orlistat leva a uma redução significativa do peso/índice de massa corporal (IMC) em mulheres com PCOS. Além disso, os resultados da meta-análise evidenciaram que o orlistat e a metformina têm efeitos similares na redução de IMC, testosterona, Homeostasis Model Assessment of Insulin Resistance (HOMA-IR) e insulina em mulheres com PCOS com sobrepeso e obesidade. Outro fator a ser considerado é o aumento do risco cardiovascular associado à PCOS. Estudos demonstram que as alterações cardiovasculares pré-clínicas são mais frequentes nesta população do que em mulheres sem a síndrome de mesma idade. A variabilidade da frequência cardíaca (VFC) é a medida das variações cíclicas dos intervalos entre as batidas cardíacas (intervalo R-R), e reflete a função cardíaca autonômica. Alterações na VFC podem refletir doença cardiovascular subclínica. A redução do consumo de gordura saturada tem um importante papel na prevenção primária e secundária de doenças cardiovasculares. Dessa forma, realizou-se um estudo com objetivo de avaliar se o consumo de ácidos graxos saturados (SFA) está associado com VFC em mulheres com PCOS. Oitenta e quatro mulheres com PCOS foram incluídas no estudo. A análise da VFC foi realizada no repouso e após teste de stress mental. As participantes foram estratificadas de acordo com a mediana do consumo de SFA (8,5% do consumo energético total), avaliado por questionário de frequência alimentar. Os resultados desse estudo indicam que o menor consumo de SFA combinado com menor consumo de carne vermelha e maior consumo de frutas, vegetais e feijões está associado com melhor VFC em resposta ao stress e níveis circulantes mais baixos de testosterona em mulheres com PCOS. / Polycystic ovary syndrome (PCOS), the most common endocrinological disorder in women of reproductive age, is characterized by hyperandrogenism and chronic anovulation. Obesity or overweight affect most of patients with PCOS and may accentuate reproductive and metabolic issues. Thus, weight reduction through calorie restriction is extremely important in overweight/obese PCOS women. However, it remains unclear whether the diet composition per se may have significant effects on metabolic and hormonal issues of PCOS. A few randomized controlled trials (RCTs) evaluating the effect of different dietary interventions have been performed in PCOS women, and most studies have short-term and small sample size. Low-carbohydrate diets as well as diets with low glycemic index and glycemic load have been the main focus of studies in PCOS women, and although the results are controversial, studies demonstrated superiority of these diets in relation to a conventional diet in improving anthropometric profile and insulin sensitivity. On the other hand, lifestyle changes may not be sufficient to promote significant weight loss, and pharmaceutical interventions may be required. Orlistat is a drug for the treatment of obesity that acts by inhibiting gastric and pancreatic lipases. Orlistat does not have systemic adverse effects and it is currently the sole anti-obesity agent available in many countries. In this way, a systematic review and meta-analysis was performed. The aim was to assess the effects of orlistat on weight loss-associated clinical variables and to compare these effects to those obtained with metformin treatment in overweight/obese women with PCOS. The results of this systematic review indicate that orlistat leads to significant reduction in weight/body mass index (BMI) in PCOS. In addition, the results of meta-analysis indicate that orlistat and metformin have similar effects in reducing BMI, HOMA, testosterone and insulin in overweight/obese PCOS women. Another point to consider is the increased cardiovascular risk associated with PCOS. Studies have demonstrated that preclinical cardiovascular disorders are more frequent in PCOS than in women without the syndrome of same age. The heart rate variability (HRV) is a measure of the time variation between heart beats (R-R interval), and reflects autonomic cardiac function. Alterations in HRV may reflect subclinical cardiovascular disease. Reduction in saturated fat intake has an important role in primary and secondary of cardiovascular disease. Thus, we performed a study assessing whether dietary saturated fatty acids (SFA) intake is associated with stress-induced HRV in patients with PCOS. Eighty-four PCOS women were included in the study. The HRV analysis was performed at rest and after mental stress test. Participants were stratified by median SFA intake (8.5% of daily energy intake), assessed by food frequency questionnaire. The results indicate that lower SFA intake is associated with more favorable stress-related HRV and lower testosterone in women with PCOS.

Indiana University-Purdue University Indianapolis (IUPUI) / Fatty acid synthase (FASN) is over-expressed in many cancers, and novel inhibitors that target FASN may find use in the treatment of cancers. It has been shown that orlistat, an FDA approved drug for weight loss, inhibits the thioesterase (TE) of FASN, but can be hydrolyzed by TE. To understand the mechanisms of TE action and for designing better FASN inhibitors, I examined the mechanism of orlistat hydrolysis by TE using molecular dynamics simulations. I found that the hexyl tail of orlistat undergoes a conformational transition, destabilizing a hydrogen bond that forms between orlistat and the active site histidine. A water molecule can then hydrogen bond with histidine and become activated to hydrolyze orlistat. These findings suggest that rational design of inhibitors that block hexyl tail transition may lead to a more potent TE inhibitor. To search for novel inhibitors of TE, I performed virtual DOCK screening of FDA approved drugs followed by a fluorogenic assay using recombinant TE protein and found that proton pump inhibitors (PPIs) can competitively inhibit TE. PPIs, which are used for the treatment of gastroesophageal reflux and peptic ulcers, work to decrease gastric acid production by binding irreversibly with gastric hydrogen potassium ATPase in the stomach. Recently, PPIs have been reported to reduce drug resistance in cancer cells when used in combination with chemotherapeutics, although the mechanism of resistance reduction is unknown. Further investigation showed that PPIs are able to decrease FASN activity and cancer cell proliferation in a dose-dependent manner. These findings provide new evidence that FDA approved PPIs may synergistically suppress cancer cells by inhibiting TE of FASN and suggests that the use of PPIs in combinational therapies for the treatment of many types of cancer, including pancreatic cancer, warrants further investigation.

Bakgrund: Det finns läkemedel som ger ökad risk för vitamin D-brist. En kartläggningsstudie av hur patientgrupper med olika riskläkemedel hanteras i Landstinget i Kalmar län har inte gjorts tidigare. En sådan studie är önskvärd, för att få en nulägesanalys och öka medvetenheten bland hälso-och sjukvårdspersonal om hur läkemedel påverkar D-vitaminstatus. Syfte: Syftet var att undersöka omfattningen av ordinerade riskläkemedel hos samtliga patienter, samt hos patientgruppen ≥75år och hur dessa handläggs avseende ordination av supplementering (samtidig behandling med läkemedel innehållande vitamin D3 / kalcium och vitamin D3,), provtagning och analysresultat avseende kalcidiol i serum. Metod: Riskläkemedel för vitamin D-brist identifierades. Inklusionskriterier för studien var patienter med de fördefinierade riskläkemedlen med ordinationer under 2012 och/eller 2013. Populationen som ingick i studien var patienter i Landstinget i Kalmar län. Data hämtades från patientdatasystemet Cambio Cosmic. Utifrån dessa data analyserades förekomst av supplementering, provtagning för S-25(OH)D kalcidiol och analyssvar. Materialet strukturerades efter respektive läkemedel avseende kön och ålder (≥75 år.) Resultat: 9118 individer ordinerades något av riskläkemedelen orlistat, sevelamer, kolestyramin, kolestipol, efavirenz, prednison, prednisolon, fenytoin, fenobarbital eller karbamazepin. 31% av patienterna som ordinerats riskläkemedel var ≥75 år. Totalt behandlades 22% med supplementationspreparat av de som ordinerats riskläkemedel. I åldersgruppen ≥75 år behandlades 43% med supplement. 61% av de supplementerade patienterna var ≥75 år. Totalt provtogs enbart 4,1% avseende kalcidiol av de som ordinerats riskläkemedel. Av dessa hade 37% av de provtagna en bristnivå av S-25(OH)D (≤50 nmol/L) vid första provtillfället. 57% av de som visade brist supplementerades. Endast 8,3% av de som hade en brist följdes upp med ytterligare en eller flera provtagningar. Av patienterna ≥75 år provtogs 4,1% av patienterna i åldersgruppen. Detta innebär att 31% av de som provtogs var ≥75år. 39% led brist. Av de patienter ≥75 år som hade led brist supplementerades 65% av individerna. Konklusion: Det finns förbättringsutrymme för implementering av kunskap kring riskläkemedel i Landstinget i Kalmar län. / Introduction: Some drugs increase the risk for vitamin D deficiency. To date, no survey has been performed in Kalmar County about how patients medicated with risk pharmaceuticals are handled. Such a survey would be desirable in order to increase knowledge among healthcare workers about how substances interfere with vitamin D status. Aim: The aim was to examine the extent to which risk pharmaceuticals are prescribed among all patients and among patients aged ≥75, and to investigate how these patients are treated with respect to supplementation (drugs containing vitamin D3 / Calcuim and vitamin D3), blood sampling and analysis of serum calcidiol levels. Method: Drugs interfering with vitamin D were identified. Inclusion criteria for the survey were patients that had been prescribed the pre-defined risk pharmaceuticals during 2012 and/ or 2013. The surveyed population was residents in Kalmar County. Data were collected from the patient database Cambio Cosmic. From these data analyzes were made about the occurrence of: supplementation, sampling of S-25(OH)D calcidiol and test results. The collected data were arranged by substance, gender and age (elderly aged ≥75). Results: 9118 patients were prescribed at least one of the risk pharmaceuticals; orlistat, sevelamer, cholestyramine, colestipol, efavirenz, prednisol, prednison, phenytoin, phenobarbital or carbamazepine. 31% of these were aged ≥75. Overall, 22% of the patients were prescribed supplements. Out of these, 61% were elderly. Among the patients that had been prescribed risk pharmaceuticals a minority, 4,1% of the patients were sampled for calcidiol. 37% of these had deficiency in S-25(OH)D (≤50 nmol/L). 8.3% of patients with a vitamin D deficiency were sampled more than once. Out of the patients with deficiency 57% were treated with supplements. Out of the elderly patients prescribed risk pharmaceuticals, 4.1% of the patients were tested for calcidiol. This means that 31% of the tested patients were aged ≥75 and 39% of these had a deficiency. Out of the elderly patients with deficiency, 65% were treated with supplements. Conclusion: In Kalmar County, much can be done in order to better implement the existing knowledge about drugs that increase the risk for vitamin D deficiency. / Betydelsen av bra D-vitaminstatus för äldres hälsa – Hur stor är förekomsten av D-vitaminbrist hos äldre i Kalmar län och hur påverkar läkemedel D-vitaminstatus