Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-12-16Bitstream added on 2014-08-13T18:00:04Z : No. of bitstreams: 1 000767343.pdf: 3215422 bytes, checksum: 9125130d909671b9cef996c05ab020e6 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência dos polimorfismos -786T>C, 894G>T e Íntron 4 do gene NOS3 sobre os parâmetros cardiovasculares e bioquímicos em adultos submetidos ao treinamento físico aeróbio. Oitenta e seis voluntários, sendo cinquenta e cinco normotensos (49,6±0,6 anos) e trinta e um hipertensos (52,9±1,2 anos) finalizaram todas as etapas do estudo. Em relação aos parâmetros antropométricos, foram avaliados o índice de massa corporal e circunferência abdominal. Para os parâmetros cardiovasculares, foram avaliados a pressão arterial sistólica e diastólica (através do método auscultatório - tycos® e o monitoramento ambulatorial da Pressão Arterial – Dyna MAPA®), frequência cardíaca de repouso e exercício (FC), mensurada através monitor de frequência cardíaca (Polar® RS 800CX) e consumo máximo de oxigênio (VO2max) (através do teste de 1 milha). Para os parâmetros bioquímicos, foram avaliados o perfil lipídico (colesterol total - CT, HDL-C, LDL-C, VLDL-C e triglicerídeos – TG), creatinina, glicemia (através do método enzimático automático – Cobas Mira Plus®), atividade da superóxido dismutase, catalase, concentrações de nitrito e nitrato (NOx-) e malondialdeído (MDA) pelo método colorimétrico, através do espectrofotômetro (Cayman Chemical, Ann Arbor, MI, USA). A determinação dos polimorfismos para as três posições do gene NOS3 analisadas no estudo foi realizada através da extração de DNA, utilizando protocolo clorofórmio-fenol, seguida pela reação em cadeia da polimerase – PCR em termociclador (Mastercycler® Eppendorf) e sequenciada para as regiões as regiões de interesse através do sequenciador (ABI 3500 Applied Biosystems). O treinamento físico aeróbio (TFA) aeróbio foi realizado por 24 sessões em um período de oito semanas (freqüência de três vezes/semana, com duração de trinta a quarenta minutos por sessão). A determinação da... / The objective of this study was to evaluate the effects of NOS3 gene polymorphisms at -786T>C, 894G>T e Íntron 4 on the cardiovascular and biochemical parameters in middle-aged trained adults. Eighty six volunteers (fifty five normotensive [49,6±0,6 years] and third one hypertensive volunteers [52,9±1,2 years]) finished the study. The anthropometric (body mass index – BMI and waist circumference – WC), cardiovascular (office blood pressure - tycos®; ambulatory blood pressure - Dyna MAPA®; VO2 peak – one mile treadmill test; heart rate (HR) - Polar® RS 800CX) and biochemical (lipid profile, glycemia, creatinine - Cobas Mira Plus®, superoxide dismutase, catalase, nitrate/nitrite, malondialdehyde - Cayman Chemical, Ann Arbor, MI, USA). The NOS3 gene polymorphisms were performed by DNA extraction, followed by PCR (Mastercycler® Eppendorf) and genotype sequence (ABI 3500 Applied Biosystems). The aerobic exercise training was performed by 24 sessions (during 8 weeks), 3 times per week, 30-40min, in the maximal lactate steady state intensity. The crossover and double blind study were performed. Follow the main results: 1) Office blood pressure decreased for both normotensive and hypertensive groups in response of exercise training. The hypertensive group showed higher reduction of diastolic blood pressure than normotensive group (table 3 and figure 12). On the other hand, the ambulatory blood pressure did not change for hypertensive group in response of exercise training, whereas the normotensive group decrease both daytime and 24h (table 4 and figures 13,14). The cardiovascular HR (table 2 e figure 10), oxidative stress and NOx- (table 6 and figure 17) parameters did not explain the results. 2) The intron 4b/a polymorphism blunted both office (table 10 and figures 23,24) and ambulatory (table 11 and figures 29,30) blood pressure in response of exercise training. However, the -786T>C and 894G>T polymorphisms did not change both the... / FAPESP: 10/00866-0

Neste estudo observamos os efeitos do bloqueio crônico do óxido nítrico por uma (1s), duas (2s) e quatro (4s) semanas de tratamento sobre a pressão arterial, freqüência cardíaca e o controle reflexo da circulação. O bloqueio crônico do óxido nítrico pela L-nitro-arginina-metil-éster (L-NAME), na água de beber, aumentou a pressão arterial média (PAM) em mmHg (1s=144; 2s=153 e 4s=167) de maneira tempo-dependente, quando comparado ao grupo controle (c=102). Tal aumento foi acompanhado pelo aumento de consumo de L-NAME e pelo aumento da relação peso do coração/peso corporal, um índice de hipertrofia cardíaca. A freqüência cardíaca (FC) basal não foi diferente entre os grupos tratados e o controle. O reflexo comandado pelos pressorreceptores estava atenuado significativamente (c=-4,17; 1s=-2,72; 2s=-2,10 e 4s=2,41) nos animais tratados, enquanto o reflexo cardiopulmonar estava exacerbado, de forma semelhante, em todos os grupos tratados. É possível que a atenuação do baroreflexo esteja relacionada ao aumento da sensibilidade do reflexo cardiopulmonar onde houve tanto aumento da resposta bradicárdica em bpm (c=-77; 1s=-109; 2s=-114 e 4s=-122) quanto da resposta hipotensora em mmHg (c=-14; 1s=-28; 2s=-29 e 4s=-31) . A resposta hipertensora comandada pelos quimiorreceptores estava diminuída enquanto a resposta de bradicardia praticamente não se alterou. Em todos os reflexos testados a bradicardia reflexa estava normal ou aumentada. As respostas reflexas normalmente associadas à ativação do ramo simpático do sistema nervoso autônomo estavam reduzidas enquanto os quimiorreceptores e os barorreceptores foram estimulados. Já a resposta de hipotensão mediada pelos cardiopulmonares estava aumentada nos animais hipertensos. Esses dados em conjunto sugerem um aumento tônico da atividade simpática periférica reduzindo a reserva para respostas excitatórias e facilitando as respostas inibitórias. Alterações do sistema renina angiotensina como aumento da atividade da renina plasmática nos animais tratados por duas semanas, não se correlacionaram com as alterações de PAM ou do controle reflexo da FC. A atividade da enzima de conversão da angiotensina I (ECA) se correlacionou positivamente com a hipertrofia cardíaca. Não foram observadas alterações da ECA pulmonar e da aorta. Alterações da atividade das enzimas antioxidantes mostraram variações tempo-dependentes que culminaram, no grupo de quatro semanas, com redução do estresse oxidativo expresso pela quimiluminescência. Neste tempo de tratamento, o aumento da atividade da enzima superóxido dismutase indica um papel para o ânion superóxido na fisiopatologia desse modelo de hipertensão. Finalizando, o bloqueio da síntese do óxido nítrico em ratos, pela administração crônica de L-NAME durante uma, duas e quatro semanas na água de beber, induziu hipertrofia cardíaca e aumentou a PAM. Esse aumento foi maior após 4 semanas de tratamento. Entretanto, diferentemente do que esperávamos, as alterações do controle reflexo da circulação encontradas após uma semana, não foram diferentes das encontradas em 4 semanas, com exceção do quimiorreflexo, que foi menor só na segunda e quarta semanas.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-03-29Bitstream added on 2014-06-13T18:31:52Z : No. of bitstreams: 1 nogueira_avb_me_arafo.pdf: 2700802 bytes, checksum: 5b146aeb52f063137a5ffe5cdf7b1da9 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O movimento ortodôntico ocorre por meio da remodelação dos tecidos periodontais em resposta à aplicação de uma força mecânica, sendo que vários mediadores químicos são sintetizados e liberados para seu início e manutenção. Dentre esses mediadores, o óxido nítrico (NO) atua como modulador da atividade de osteoclastos e osteoblastos na remodelação óssea. Interleucina-1_ (IL-1-_), interleucina-6 (IL-6) e fator de necrose tumoral-_ (TNF-_) estimulam a reabsorção óssea e encontram-se aumentados no movimento ortodôntico. Estes mesmos mediadores também encontram-se aumentados e participam da destruição tecidual na doença periodontal. O objetivo deste estudo é avaliar in vivo a expressão de IL-1b, IL-6, TNF-_, NO sintase constitutiva endotelial (ecNOS), e NO sintase indutível (iNOS) nos tecidos periodontais de dentes sob movimentação ortodôntica em condições de saúde e doença periodontal, correlacionando-as às alterações histomorfométricas nesses tecidos. Para isso, 88 ratos foram divididos nos grupos: 1-controle (CONTR), 2- doença periodontal experimental induzida por ligaduras (DP), 3- movimento ortodôntico (MO), 4- doença periodontal experimental induzida por ligaduras, seguido de movimento ortodôntico (MODP). Biópsias dos tecidos gengivais ao redor 13 dos primeiros molares foram removidas para análise da expressão protéica e de mRNA, respectivamente, por Western blot e RT-PCR em tempo real. Cortes histológicos foram obtidos para avaliação histomorfométrica da perda óssea alveolar. Análise estatística foi realizada através do one-way ANOVA e a comparação entre os grupos foi feita com o teste de Tukey (nível de significância de 5%). Resultado: Máxima expressão gênica de todas as proteínas avaliadas foi observada no grupo MODP, nos períodos de 3h (eNos) ou de 1 dia (citocinas e iNOS) (p<0.05)... / Orthodontic tooth movement (OTM) occurs in response to mechanical forces through periodontal tissues remodeling. Several chemical mediators are synthesized and released for the beginning and maintenance of tissue remodeling. Among these mediators, nitric oxide (NO) acts as modulator of osteoclasts and osteoblasts activities in bone turnover. Interleukin-1_ (IL-1_), interleukin-6 (IL-6) and tumor necrosis factor-_ (TNF-_) stimulate bone resorption and are increased in orthodontic movement. These same signaling molecules are also increased and play an important role on tissue destruction in periodontal disease. Objectives: The aim of this study was to assess in vivo the expression of IL-1ß, IL-6, TNF-_, NO synthase constitutive endothelial (ecNOS), and inducible NO synthase (iNOS) in dental tissues during orthodontic tooth movement in rats suffering from ligature-induced periodontal disease or in periodontally health animals. Cytokines expressions were correlated to histomorphometric changes on alveolar bone and other periodontal tissues. Methods: Eighty-eight rats were divided into four groups: 1- negative control (sham operated), 2 - ligature-induced periodontal disease (PD), 3 - orthodontic movement (OM), 4 - ligature-induced periodontal disease, followed by orthodontic movement (OMPD). Biopsies of gingival tissue around the first molars were removed for protein and mRNA expression analysis, respectively by, Western blot and Real Time RT-PCR. Histologic tissue sections were obtained for histomorphometric evaluation of alveolar bone loss. Statistical analysis was performed by one-way ANOVA and Tukey´s posthoc tests for all parameters (5% significance level). Results: Maximum mRNA expression of all evaluated proteins was observed in the OMPD group, on 3h (eNos) or day 1 (citokines and iNos) periods (p<0.05). Also on day 1, all proteins were expressed in high levels for all groups... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-11-25Bitstream added on 2014-06-13T18:57:09Z : No. of bitstreams: 1 000736296.pdf: 4233456 bytes, checksum: d4f70261c2f3ef33e27f9d851acefc69 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Doenças neurodegenerativas são definidas como distúrbios que acarretam na perda progressiva de estrutura e/ou função, e até mesmo morte de células neuronais especificas, em diferentes distribuições anatômicas, e, consequentemente, dando origem a diferentes sintomas clínicos. Entre as varias doenças neurodegenerativas a doença de Alzheimer (DA) é a principal e a mais comum forma de demência. A DA é uma condição progressiva complexa que envolve interações sequenciais de cascatas patológicas, incluindo a interação dos peptídeos β-amiloides (βA) que se agregam levando ao desenvolvimento de placas senis, e a hiperfosforilação e agregação da proteína tau formando emaranhados neurofibrilares (ENF), juntamente a processos associados, como a inflamação e o estresse oxidativo. O fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) é uma das principais citocinas pró-inflamatórias cujos níveis elevados são observados em diversas doenças neurodegenerativas. O óxido nítrico (NO) é uma importante molécula de sinalização na modulação da plasticidade sináptica e está associada ao processo de aprendizagem e memória, assim como seus efeitos neuroprotetores quando presente em baixas concentrações. Assim, compostos derivados ftalimídicos, capazes de inibir TNF-α, poderiam reduzir o processo de neuroinflamação que é descrita na DA, retardando a progressão da doença, e derivados doadores de NO poderiam contribuir na plasticidade sináptica, cognição e memória dos pacientes acometidos pela DA. Foi objetivo deste trabalho a obtenção dos compostos Lapdesf FUR-FD I-VI, planejados por meio da estratégia de hibridação molecular entre a subunidade ftalimídica e o núcleo furoxânico. Os compostos obtidos foram avaliados para determinar o potencial efeito anti-inflamatório através do modelo de inflamação aguda (edema de pata), a determinação do Log P experimentalmente para avaliar sua capacidade de permear a barreira... / Neurodegenerative diseases are defined as disorders that result in progressive loss of structure and/or function, and even cell death in neuronal specific in different anatomical distributions, and hence giving rise to varying clinical symptoms. Among the various neurodegenerative diseases Alzheimer's disease (AD) is the main and most common form of dementia. AD is a progressive condition that involves complex interactions and sequential pathological cascades, including the interaction of β-amyloid peptide (βA) which clump together leading to the development of senile plaques, and hyperphosphorylation and aggregation of tau forming neurofibrillary tangles (ENF) along the associated processes, such as inflammation and oxidative stress. The tumor necrosis factor alpha (TNF-α) is a major proinflammatory cytokines whose high levels are observed in several neurodegenerative diseases. Nitric oxide (NO) is an important signaling molecule in the modulation of synaptic plasticity and its correlation with the process of learning and memory, as well as its neuroprotective effects when present in low concentrations. Thus phthalimidic derived compounds capable of inhibiting TNF-α , could reduce the neuroinflammation process that is described in AD, slowing the disease progression, and NO donors derived may contribute to synaptic plasticity, cognition and memory of patients affected by AD. This work aims to obtain the compounds (Lapdesf FUR-FD I-VI), designed by molecular hybridization strategy between the subunit and core phthalimidic and furoxan. The compounds obtained were evaluated for potential anti-inflammatory effect through the model of acute inflammation (paw edema), their ability to permeate the blood-brain barrier (BBB) using a tool of the partition coefficient (log P) obtained experimentally mutagenicity with the in vivo micronucleus test in reticulocytes obtained in peripheral blood, the ability of the compounds to inhibit the ...

Orientador: Kleber Gomes Franchini / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T15:54:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RolimFilho_LuizdeArruda_M.pdf: 6797204 bytes, checksum: 3733b1923e94735d5da7ca431fefa996 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Fundamentação: O pré-condicionamento isquêmico (PCI) é uma resposta adaptativa, na qual a exposição a breves períodos de isquemia aumenta a capacidade do miocárdio em resistir à isquemia prolongada. Originalmente, o PCI foi descrito como uma adaptação imediata do miocárdio a curtos episódios de isquemia, mas atualmente sabemos que se trata de um fenômeno bifásico. O fenômeno de PCI agudo é mediado por mecanismos de sinalização intracelulares. Diversos hormônios, neurotransmissores e substâncias de liberação local são considerados gatilho desse fenômeno, dentre eles se destaca a adenosina (ADO). Por outro lado, o PCI tardio envolve a transcrição gênica. Evidências indicam que a NOS possui papel importante na geração e manutenção do PCI agudo e tardio do miocárdio. No presente trabalho utilizamos o DMA, um derivado de 4-anilinoquinazolinas e inibidor da atividade tirosina quinases da família de receptores EGF, como um indutor farmacológico de proteção miocárdica contra os danos da isquemia / reperfusão. OBJETIVO: Os objetivos do presente trabalho são: 1 - avaliar o efeito do composto derivado quinazolinico DMA (Cloridrato de 6,7-dimetóxi-4-N-(3'-N,N-dimetilfenil) aminoquinazolina) como indutor de proteção tardia na prevenção de danos da isquemia / reperfusão em corações isolados de ratos; 2 - avaliar a participação de oxido nítrico sinteíase (NOS) na proteção tardia induzida pelo DMA em corações isolados de ratos RESULTADOS: Os ratos foram tratados com doses únicas de DMA (1,2 mg/Kg, via endovenosa) ou veículo (DMSO) por períodos que variaram de 24 a 72 horas de antecedência ao protocolo de isquemia / reperfusão (l/R) em corações isolados. Esse protocolo foi composto de um registro de 10 minutos para período controle, 30 minutos de isquemia e 35 minutos de reperfusão. Animais tratados com veículo apresentaram aumento da pressão diastólica no ventrículo esquerdo (VE), enquanto que a pressão sistólica no VE manteve-se nos mesmos níveis do período controle. Sendo assim, a pressão desenvolvida no VE foi reduzida nestes animais. Nos animais tratados cora DMA houve aumento da pressão diastólica no VE durante a reperfusão, porém, com menor intensidade que aquele observado em corações de animais tratados com veículo. Como a pressão sistólica no VE atingiu níveis semelhantes aos do período controle, a pressão desenvolvida pelos corações de animais tratados com DMA foi maior que aquela dos corações de animais tratados com veículo, indicando proteção parcial aos efeitos da I/R. Para avaliar se a proteção conferida pelo DMA é dependente da ação de NO, os animais tomaram L-NA.ME (30mg/Kg/dia) por 3 dias antes do tratamento com DMA ou veículo, sendo o L-NAME continuamente ingerido através da água até seus corações serem submetidos ao protocolo de I/R em períodos de 24 a 72 horas após o tratamento com DMA ou veículo. Nos corações dos animais tratados com I.-NAME + veículo e nos corações dos animais tratados com L-NAME + DMA a recuperação dos batimentos foi acompanhada de aumento da pressão diastólica no VE quando comparado ao período controle. A pressão sistólica no VE atingiu níveis semelhantes àqueles do período controle. Sendo assim, a pressão desenvolvida no VE apresentou-se reduzida nos 35 minutos que se seguiram, indicando a perda da proteção parcial aos efeitos da I/R, outrora conferida pelo DMA. Para avaliar o efeito do DMA na expressão da NOS, os animais foram tratados com DMA ou veículo 24 e 48 horas antes dos experimentos de westhern blot. Os resultados indicara que 24 horas após o tratamento com DMA ocorreu aumento de cerca de 189% na quantidade de iNOS expressa no miocárdio e que nos corações de ratos tratados com DMA, com 48 horas de antecedência, ocorreu aumento de cerca de 48% na quantidade de iNOS expressa no miocárdio. CONCLUSÕES: O composto DMA induziu: I - a proteção tardia em corações isolados de ratos; 2 - a maior expressão de óxido intrico sintetase nos corações de ratos e 3 -esta proteção pode ser dependente de óxido nítrico / Abstract: Background: -The phenomenon of Ischemic preconditioning (IP) is a period of sublethal ischemia that can profoundly protect the cell from infarction during a subsequent ischemic. The cardioprotection has become known "early"' and "delayed" ischemic preconditioning, The early cardioprotection provokes the release of several autacoids that trigger protection by occupying cell surface receptors. The delayed cardioprotection confers a new protein synthesis, posttranslational protein modification, and a change in the compartments 1 bation of existing proteins. Adenosine acts to trigger ischemic preconditioning's protection. In addition, nitric oxide (NO) has been linked to the trigger and end-effector phases of delayed preconditioning. In the present work, we tested DMA, derived from 4-anilinoquinazolines, described firstly as a tyrosine kinase inhibitor, belonging to EOF receptor family, to test its mechanism of action in the IP. Objectives: The aims of the present study are: 1 - to evaluate the effect of DMA (4-AM3'-AlA?-dimethylphenyl)ammo-6,7-dimethoxyqinnazoline hydrochloride) in the late delayed IP; 2 - to study the delayed protection of NO sinthetase (NOS) induced by DMA. Results: Wistar rats were once treated with DMA (1,2 rag/Kg, intravenous) or vehicle (DMSO) in the periods of 24 or 72 hours before IP protocols. The IPs were composed by 30 minutes of ischemia and 35 minutes of reperfusion. In the animals treated with vehicle it was observed increasing in the dyastolic pressure, and the systolic pressure was maintained in the same level of control. In the animals treated with DMA. it was observed increasing in the diastolic pressure (reperfusion period), but less intense than that observed in the vehicle-treated animals. As the systolic pressure observed in the DMA-treated animals had the same intensity observed in the control period, the developed pressure in the reperfusion period had the same intensity, indicating parcial effect in the IP. To evaluate whether the DMA protection is dependent on NOS, the animals were treated with L-NAME (30mg/Kg''day, before DMA or vehicle treatment] for 3 days., ft was observed in both groups, in the animals treated with L-NAME vehicle and L-NAME DMA. that the heart beating recovery was followed by increasing in the dyastolic pressure, when compared with the control period. The systolic pressure had the same level observed m the control period, indicating decrease in the partial protection. Finally, to evaluate the effects of DMA in the NOS expression, the animals were treated with DMA or vehicle 24 and 48 hours before westhern blot assays. In the animals treated 24 hours before DMA administration, it was observed increase (189%) in the iNOS expression. In addition, a 48%-increasing was observed in the animals 48 hours before DMA administration. Concluding remarks: The effects of DMA observed were: I - delayed protection, in isolated hearts from rats; 2 - increased expression of iNOS and finally 3 this protection might be dependent on nitric oxide / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Marta Helena Krieger / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-25T08:07:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Negreti_AmandaAlvim_M.pdf: 4855920 bytes, checksum: 587474864a97f3d14df8bf3c945ee76b (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: O óxido nítrico (NO) é um agente biológico multifuncional que vem sendo alvo de diversos estudos. A sua capacidade de promover a reendotelização ou inibir a formação da neointima após injúria vascular é reconhecida nos últimos anos devido a sua eficácia em atuar na proliferação e na migração de células endoteliais, bem como na sua capacidade de inibir a adesão e agregação plaquetária. A neointima intra-stent pode ser combatida com o desenvolvimento de stents eluidores de drogas (SED). Os nitrosilos complexos de rutênio se destacam dentre os doadores de NO, devido a sua capacidade de liberar o NO de forma controlada e incorporados a veículos. Este estudo se propôs padronizar as condições de cultivo das células endoteliais umbilicais humana (HUVEC) "saudáveis", verificar a margem de segurança do composto trans-[Ru(NO)Cl(cyclam)](PF6)2, nomeado Ru(cyclam)NO, em células HUVEC por meio de ensaios de citotoxicidade, verificar sua capacidade de promover proliferação/migração celular e a inibição da adesão de plaquetas humanas, e, também verificar a biocompatibilidade deste composto quando incorporados em plataformas de aço. Expressão de proteínas fenotípicas da célula endotelial foi utilizada para padronização de cultivo de HUVEC. A concentração de 0,5mM foi definida como ótima nas condições experimentais. A ação do composto foi caracterizada pelas respostas de manutenção da proliferação (incorporação de timidina triciada - 3HT) e no aumento da migração celular (ensaio transwell), entretanto foi capaz de reduzir as ações estimulatórias do fator de crescimento epidermal (EGF). A citotoxicidade do complexo e das plataformas de incorporação foi determinada por ensaio de redução do 3-brometo de 4,5-dimetil-2-tiazolil-2,5-difenil-tetrazólio (MTT). Em relação ao nitroprussiato de sódio (SNP) a toxicidade induzida pelo composto nas concentrações de 0,5mM a 2,0mM foi reduzida, mesmo na maior concentração após 24 horas de exposição (MTT: 59% ± 4,42). O complexo mostrou ser capaz de reduzir a adesão ao fibrinogênio de plaquetas humanas ativadas ou não. A biocompatibilidade total das plataformas de inox, matriz de siloxano e matriz de siloxano incorporado com Ru(cyclam) foram demonstradas pelo ensaio de redução de MTT e a funcionalidade pelo ensaio de migração transwell. A margem de segurança do Ru(cyclam)NO e de suas respectivas plataformas de imobilização foram caracterizadas como baixa e ausente citotoxicidade. As avaliações funcionais evidenciaram que o Ru(cyclam)NO manteve a proliferação celular, estimulou a migração das HUVEC e inibiu a adesão de plaquetas humanas. Estas evidências constituem-se de pontos fundamentais para se obter a reendotelização / Abstract: Nitric oxide (NO) is a multifunctional biological agent that has been the subject of several studies. In recent years, its ability to promote re-endothelialization or inhibit neointimal formation after vascular injury is recognized due to its efficacy in stimulates proliferation and migration of endothelial cells, as well as its ability to inhibit platelet adhesion and aggregation. The in-stent neointimal can be prevented with the development of drug-eluting stents (DES). Nitrosyl ruthenium complexes highlighted from the NO donors, due to their ability to release NO in a controlled manner and incorporated into vehicles. This study aimed to: 1) standardize the cultivation conditions of " healthy " human umbilical endothelial cells (HUVEC); 2) verify the safety margin of the compound trans - [Ru(NO)Cl(cyclam)](PF6)2, named Ru(cyclam) O, in HUVEC cells by cytotoxicity assay; 3) determine its ability to promote proliferation/migration cell and inhibition adhesion of human platelets; and also 4) verify biocompatibility of this compound when incorporated in slides. Phenotypic expression of the endothelial cell protein was used to standardize cultured HUVEC. A concentration of 0.5 mM was set to the optimal experimental conditions. The Ru(cyclam)NO action was characterized by responses of the proliferation maintenance (tritiated thymidine incorporation - 3HT ) and migration cell increased (transwell assay), however was able to reduce the stimulatory actions of epidermal growth factor (EGF). The cytotoxicity of the compound and its incorporation slides was determined by reduction of 3- bromide, 4,5-dimethyl -2-thiazolyl -2 ,5 -diphenyl tetrazolium bromide (MTT). In relation to sodium nitroprusside (SNP), Ru(cyclam)NO showed reduced toxicity from 0.5 mM to 2.0 mM, even at the highest concentration that was 59% ± 4.42 of the cell viability. The Ru(cyclam)NO was shown to reduce adhesion to fibrinogen of human platelets activated or not. The total biocompatibility of stainless slide with siloxane matrix and siloxane matrix incorporated with Ru(cyclam)NO were demonstrated by MTT reduction assay and their functionality by transwell migration assay. The safety margin of Ru(cyclam)NO and their respective slide incorporated were characterized as low or absent cytotoxicity, respectively. Functional evaluations showed that the Ru(cyclam)NO maintained cell proliferation and stimulated the migration of HUVEC, well as well, inhibited adhesion of human platelets. These obtained evidences are key points to get the re-endothelialization / Mestrado / Fisiologia / Mestra em Biologia Funcional e Molecular

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-02-21Bitstream added on 2014-06-13T18:08:04Z : No. of bitstreams: 1 cardoso_crp_me_arafcf.pdf: 859101 bytes, checksum: dc8d0d66975b1493a8b7a5a2830d3074 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Considerando a pesquisa de novas moléculas farmacologicamente ativas, orientada pelo uso tradicional das plantas com finalidade terapêutica, o presente trabalho avaliou os efeitos genotóxicos e de ativação do sistema imunológico em duas espécies de plantas do gênero Byrsonima: Byrsonima crassa e Byrsonima intermedia. Essas espécies são plantas de uso popular, pertencentes à flora do Cerrado Brasileiro, utilizadas pela população para disfunções gástricas e diarréias. Foram realizados ensaios para a caracterização da mutagenicidade dos extratos, através do Teste de Ames (TA), utilizando-se linhagens geneticamente modificadas de Salmonella typhimurium e de ativação da resposta imune celular, utilizando-se cultura de macrófagos de exsudato peritoneal (PEC) de camundongos Swiss, avaliando a liberação celular de Fator de Necrose Tumoral-alfa (TNF-α) e Óxido nítrico (NO), importantes moduladores da resposta inflamatória. Foi verificado que somente o extrato metanólico de B.crassa apresentou atividade mutagênica positiva na linhagem TA98, com e sem ativação metabólica. Analisando-se as frações aquosa e acetato de etila, verificou-se que o composto provavelmente responsável pela atividade mutagênica do extrato metanólico está presente na fração acetato. Testes realizados com os compostos isolados dessa fração (catequina, galato de metila, querecetina -3-O-β-Dgalactopiranosídeo, quercetina-3-O-α-arabinopiranosídeo e amentoflavona) revelaram ação mutagênica da amentoflavona e indícios de mutagenicidade da quercetina arabinopiranosídeo. Nos ensaios imunológicos, verificou-se que os extratos de B.crassa e B.intermedia promoveram estímulo da liberação de NO por macrófagos de camundongos em níveis reduzidos, assim como a fração aquosa do extrato metanólico de B.crassa. A fração acetato de etila do extrato... / Considering the research of active new molecules, leaded by the traditional use of plants with therapeutic proposal, this paper tested the genotoxic effects and the activation of the immune system in two species of Byrsonima: Byrsonima crassa and Byrsonima intermedia. These are popular use species that belong to the Brazilian Cerrado, utilized by population to gastric dysfunctions and diarrheas. Many assays were done to give the characterization of mutagenicity of the extracts, through the Ames test (TA) using a line of genetic changed Salmonella typhimurium and the activation of the cellular response, using a culture of peritoneal macrophages from Swiss mice, to test the cell liberation of the Tumor Necrosis Factor-apha (TNF-a) and Nitric Oxide (NO), important modulators on the inflammation response. It was verified that only the methanolic extract of B.crassa presented positive mutagenic activity in the line TA98, with and without metabolic activation. Analyzing the watering and ethyl acetate portions, it was checked that the substance that probably is responsible by the mutagenic activity of the methanolic extract is present on the ethyl acetate portion. Assays achieved with isolated compounds from this portion - (+)-catechin, methyl galate, quercetin-3-O-ß-D-galactopyranoside, quercetin-3-O-a-Larabinopyranoside and amentoflavone - discovered mutagenic activity of amentoflavone and mutagenicity signals of quercetin-3-O-a-L-arabinopyranoside. On this immunologic assays, it was observed that the B.crassa and B.intermedia extracts did not promote the stimulation of leaving NO and TNF-a by macrophages of mouse, just live the watering portion from B.crassa methanolic extract. The ethyl acetate B.crassa portion presented stimulated and relevant activity to the liberation of NO and TNF-a. (Complete abstract, click electronic address below).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-09-14Bitstream added on 2014-06-13T19:40:22Z : No. of bitstreams: 1 zago_as_dr_rcla.pdf: 686861 bytes, checksum: 50c74390832aa8e2191f5de04dfe308e (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Uma alta incidência de hipertensão arterial, que possui uma etiologia multifatorial envolvendo fatores genéticos, ambientais e psicológicos, tem sido observada na população mundial. Desta forma o entendimento dos mecanismos celulares e moleculares envolvidos na gênese da hipertensão arterial é fundamental para se alcançar medidas preventivas e terapêuticas para o controle da pressão arterial. O óxido nítrico (NO) produzido pelas células endoteliais assume um importante papel no controle cardiovascular, pois tem sido considerado ser um potente vasodilatador e regulador da pressão arterial. Entretanto, as disfunções endoteliais, caracterizadas pela baixa produção e/ou biodisponibilidade do NO e alguns fatores genéticos (polimorfismos), podem contribuir para o surgimento da hipertensão arterial. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar a influência de um programa de exercício aeróbio nas concentrações e biodisponibilidade de NO em portadores do polimorfismo T-786C do gene da eNOS e verificar o efeito dessas variáveis na pressão arterial. O DNA dos participantes foi isolado das células mononucleares periféricas e o diagnóstico genético foi realizado pela técnica de PCR. As análises de concentrações de NO, atividade da superóxido dismutase (SOD), pressão arterial, fluxo sanguíneo, composição corporal (índice de massa corporal e porcentagem de gordura corporal), perfil lipídico (colesterol total, LDL-colesterol, HDL-colesterol e triglicerídeos) e glicemia foram analisadas antes de após 6 meses de um programa de exercício físico aeróbio (70% do VO2 max) em adultos de meia idade e idosos subdivididos de acordo com a genotipagem o nível inicial de pressão arterial. Os resultados mostraram que as variáveis do perfil lipídico não exerceram nenhuma influência na relação entre hipertensão, concentrações de NO e polimorfismo do gene da eNOS... / Hypertension has a high incidence in the population of the world and its etiology is multifatorial, involving genetic, environmental and psychological factors. Understanding of the cell and molecular mechanisms involved in the genesis of hypertension is fundamental for the attainment of preventive and/or therapeutic measures for blood pressure control. Nitric Oxide (NO) produced by the endothelial cells has a particularly important role in cardiovascular control because it is a potent vasodilator and thus its role in blood pressure control is extremely relevant. However, the endothelial dysfunction which is characterized by a lower production and/or NO bioavailability, and some genetic factors can contribute to the genesis of hypertension. Therefore, the purpose of this study was investigate the influence of aerobic exercise training (AEX) on the NO concentration and bioavailability in 786C allele carriers and verify the effect of theses variable on the blood pressure. Genomic DNA was isolated from peripheral mononuclear cells and genotyping was done by standard PCR methods. The NOx assay, SOD activity, casual blood pressure, blood flow, body composition (body mass index and body fat), and lipid profile (cholesterol, LDL-cholesterol, HDLcholesterol, glucose, and triglycerides) was evaluated before and after 6 months of AEX (70% of VO2 max) in adults and elderly divided in groups according genotype and blood pressure levels. The results showed that there is no interference of lipid profile on the relationship among hypertension, NO concentration and eNOS polymorphism and the body composition variables showed a small interference on this relationship. NOx levels was associated with blood pressure values and NOx levels were significantly lower in the TC+CC group compared to the TT group at baseline... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-12-07Bitstream added on 2014-06-13T21:05:34Z : No. of bitstreams: 1 gomes_das_dr_arafo.pdf: 1006802 bytes, checksum: 8054c31dbb8f9513add58d4492f5b5dd (MD5) / Mediadores inflamatórios como mieloperoxidase (MPO) e óxido nítrico (NO) participam do processo inflamatório da doença periodontal e na associação ao diabetes. Inibidores da Óxido Nítrico Sintase (NOS), como o L-NAME têm sido administrados na tentativa de minimizar danos teciduais decorrentes da inflamação. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do L-NAME sobre os níveis da isoforma induzível de óxido nítrico (iNOS), sobre a perda óssea alveolar e sobre os níveis de mieloperoxidase (MPO) em ratos diabéticos com periodontite induzida. Foram utilizados 192 ratos divididos em grupos de 24 animais cada: grupo C: Controle com ingestão de água; grupo C-L: Controle com ingestão de LNAME; grupo D: Ratos diabéticos com ingestão de água; grupo D-L: Ratos diabéticos com ingestão de L-NAME; grupo P: Ratos com periodontite experimental e ingestão de água; grupo P-L: Ratos com periodontite experimental e ingestão de L-NAME; grupo DP: Ratos diabéticos com periodontite experimental e ingestão de água; e grupo DP-L: Ratos diabéticos com periodontite experimental e ingestão de L-NAME. O sacrifício dos animais foram realizados aos 3,7,15,e 30 dias após a indução da periodontite experimental. Foram realizadas análises da taxa glicêmica, da perda óssea alveolar, da atividade de mieloperoxidase e da expressão de iNOS. Os grupos com D, P e DP mostraram níveis de iNOS estatisticamente mais altos quando comparados aos grupos D-L, P-L e DP-L que ingeriram L-NAME em todos os períodos. (p < 0.05). Os grupos que ingeriram L-NAME mostraram perda óssea estatisticamente menor quando comparados aos grupos que ingeriram água (p < 0.05). A alta expressão de MPO foi observada nos grupos com periodontite P e DP que ingeriram água. Foi verificado um pico nos níveis de MPO aos 7 dias em todos os grupos experimentais que ingeriram água... / Inflammatory mediators such as myeloperoxidase (MPO) and nitric oxide (NO) play a role in inflammatory processes related to periodontal disease and diabetes. NO-Synthase (NOS) inhibitors as L-NAME have been administered in attempts to reduce tissue damage resulting from such inflammation. The aim of this study was to evaluate the effects of L-NAME on alveolar bone loss, NO and MPO levels in diabetic rats with experimental periodontitis. A hundred ninety-two rats were divided into one of the following groups with 24 animals each: group C-W: control group with water intake; group C-L: control group with L-NAME intake; group D-W: diabetic rats with water intake; group D-L: diabetic rats with LNAME intake; group P-W: chronic periodontitis rats with water intake; group PL: chronic periodontitis rats with L-NAME intake; group DP-W: diabetic chronic periodontitis rats with water intake, and group DP-L: diabetic chronic periodontitis rats with L-NAME intake. The killing was performed at 3, 7, 15 and 30 days after ligature-periodontitis induction to obtain gingival specimens and to evaluate MPO and NO activity and radiographic bone loss. Groups with D-W or P-W and DP-W showed statistically higher iNOS expression compared to LNAME groups in all periods (p < 0.05). L-NAME treatment (L) statistically decreased iNOS expression in all groups with inflammatory pathological conditions, such as D, P and DP. In general, groups with L-NAME intake showed lower bone loss compared to water intake groups. In addition, P-L or DP-L rats demonstrated statistically lower bone loss compared to diabetics and controls at 30 days (p < 0.05). The highest MPO expression was verified in periodontitis groups with water intake (P-W e DP-W). There was a peak in MPO levels at 7 days in all experimental groups with water intake during experimental evolution. The L-NAME statistically decreased MPO levels from all groups... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-25Bitstream added on 2014-08-13T17:59:51Z : No. of bitstreams: 1 000771322.pdf: 795316 bytes, checksum: e03e738556583e78c68280d321cd6c8e (MD5) / Fundamentação/Objetivos: A Síndrome do Desconforto Respiratório Agudo (SDRA) cursa com altos índices de mortalidade apesar do melhor entendimento de sua fisiopatologia e avanços no tratamento. Existem várias terapias adjuvantes à ventilação mecânica (VM), dentre as quais se destaca a posição prona, que possibilita homogeneização da distribuição do volume corrente (VC) e promove recrutamento alveolar, e o óxido nítrico inalatório (NOi) que promove vasodilatação pulmonar seletiva direcionando o fluxo sanguíneo de áreas mal ventiladas para áreas bem ventiladas e com perfusão diminuída, otimizando a relação ventilação/perfusão e melhorando a oxigenação, com diminuição da resistência vascular pulmonar. Pela melhora da relação ventilação/perfusão, o gás pode permitir o emprego de VM menos agressiva, que, por sua vez, pode diminuir o risco de lesão pulmonar induzida pela VM e a morbidade. Objetivo: comparar os efeitos da posição prona com os do NOi sobre a oxigenação, mecânica respiratória, lesão histopatológica e inflamatória em modelo experimental de lesão pulmonar aguda (LPA). Métodos: Cinquenta coelhos foram instrumentados com traqueostomia e acessos vasculares e ventilados mecanicamente. A LPA foi induzida por infusão traqueal de salina aquecida (30mL/Kg, 38°C). Os coelhos foram submetidos à VMC protetora e distribuídos em quatro grupos: 1) animais com LPA em VMC protetora em posição supina (GVMS; n=15); 2) animais com LPA em VMC protetora + posição prona (GVMP; n=15); 3) animais com LPA em VMC protetora + NOi em posição supina (GVNO; n=15) e 4) animais sem lesão pulmonar submetidos à VMC protetora (sadio – GS; n=5). Os desfechos foram: oxigenação, avaliada pela relação PaO2/FiO2 e índice de oxigenação (IO); inflamação pulmonar, avaliada pela porcentagem de polimorfonucleares (PMN) no lavado broncoalveolar (BAL) e pelo nível de TNF-alfa medido no BAL e lesão ... / Background/Objectives: The Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS) is associated with high mortality rate despite better understanding of its pathophysiology and treatment advances. There are several adjuvant therapies that can be associated to mechanical ventilation (MV), among which stands out the prone position, which allows homogeneous tidal volume (VT) distribution and promotes alveolar recruitment; and inhaled nitric oxide (iNO) which promotes selective pulmonary vasodilation directing blood flow from areas poorly ventilated to well-ventilated areas and decreased perfusion, optimizing the ventilation/perfusion ratio and improving oxygenation with reduced pulmonary vascular resistance. Improved ventilation/perfusion ratio, allows the use of lesser aggressive mechanical ventilation (MV) treatment, which reduces the risk of lung injury induced by MV and morbidity. Objective: To compare the effects of prone position with iNO on oxygenation, respiratory mechanics, inflammatory and histological injury in an experimental model of acute lung injury (ALI). Methods: Fifty rabbits were instrumented with tracheotomy and vascular access and mechanically ventilated. ALI was induced by tracheal infusion of warm saline (30mL/kg, 38°C). Rabbits underwent protective conventional mechanical ventilation (CMV) were divided in four groups: 1) Animals with ALI in protective CMV + supine position (GVMS, n=15), 2) animals with ALI in protective CMV + prone position (GVMP, n=15) and 3) animals with ALI in protective CMV + iNO in supine position (GVNO, n=15). Additionally, there were five animals without lung injury submitted to protective CMV (Healthy group - GS, n=5). The outcomes were oxygenation, measured by PaO2/FiO2 ratio and oxygenation index (OI), lung inflammation assessed by the percentage of polymorphonuclear cells (PMN) in bronchoalveolar lavage (BAL) and TNF-alpha measured in BAL, and histological pulmonary injury determined by a injury ...