Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-12-13Bitstream added on 2014-06-13T20:05:17Z : No. of bitstreams: 1 bozzo_fr_dr_jabo.pdf: 619203 bytes, checksum: 6820d53fb990167e2aa609d317f21fee (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Este ensaio teve como objetivo avaliar da cinética da inflamação aguda induzida na bexiga natatória de pacus, Piaractus mesopotamicus por Aeromonas hydrophila inativada e tioglicolato nos peixes que receberam suplementação dietética com as vitaminas C, E ou sua associação. A inflamação foi avaliada quatro, 24 e 48 horas depois dos estímulos. Um grupo mantido como controle recebeu salina e foi examinado após os mesmos períodos. Um outro grupo, não inoculado, foi avaliado para determinação dos tipos de células residentes. Nos tempos determinados os peixes foram sacrificados por aprofundamento do plano anestésico, o exsudato colhido e o componente celular avaliado. Os resultados demonstraram aumento ou diminuição gradativa do número de células totais acumuladas após quatro, 24 e 48 horas para os estímulos Aeromonas hydrophila e tioglicolato respectivamente. Esse fenômeno foi caracterizado pelo acúmulo dos trombócitos e linfócitos nos grupos inoculados com A. hydrophila e suplementados com a vitamina C seguidos pelos peixes tratados com a vitamina E. O contrário foi observado nos grupos inoculados com Tioglicolato, onde predominaram os linfócitos nos peixes alimentados com dietas contendo as vitaminas C e E e trombócitos nos que receberam a vitamina C demonstrando a eficácia das vitaminas independentemente dos estímulos inflamatórios utilizados. A citoquímica foi efetiva na identificação dos tipos celulares presentes. / The purpose of this test was to value the kinetics of acute inflammation induced by inactivated Aeromonas hydrophila and thioglycolate, which were inoculated into Piaractus mesopotamicus´ natatory bladder and supplemented with diet containing vitamins C, E or their associations. The inflammation was valued four, 24 and 48 hours after the stimulus. A considered control group received a saline solution and was examined after the same lapses of time. Another group, not inoculated, was valued to determine the types of resident cells. On the stipulated times, the fishes were sacrificed by a deepening on the anesthetic plane. The exudate was collected and the cellular component was valued. Results demonstrated a gradual increase or descrise in the total number of collected cells after four, 24 and 48 hours of the stimulus Aeromonas hydrophila and thioglycolate respectly. This phenomenon was characterized by the accumulation of thrombocytosis and lymphocytosis on those groups inoculated with A. hydrophila and supplemented with vitamin C, followed by those fishes treated with vitamin E. On those groups that received thioglycolate inoculated, It´s been observed a predominance of lymphocytosis in fishes submitted to vitamins C and E diet, as well as, thrombocytosis in those who received vitamin C, which demonstrates the vitamins efficacy, no matter what inflammatory stimulus is used. The citochemistry was effective for identification of cell types.

Orientador: Dalton José Carneiro / Banca: Wilson Massamitu Furuya / Banca: Nilva Kazue Sakomura / Banca: Margarida Maria Barros / Banca: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Resumo: Neste estudo foram avaliados os coeficientes de digestibilidade aparente (CDA) dos aminoácidos (AA), proteína e energia de seis alimentos utilizados em dietas para o pacu. Os ingredientes apresentaram altos valores de digestibilidade para todos os aminoácidos e diferenças foram detectadas entre os CDA individuais dos aminoácidos dos alimentos (P<0,01). O glúten de milho, o farelo de soja e a farinha de peixe foram os alimentos que apresentaram os maiores CDA para os aminoácidos, mas seus CDA da proteína não devem ser usados como indicativo para a digestibilidade médias dos AA. Dentre os alimentos, o glúten de milho apresentou alto CDA da energia. O escore químico dos alimentos mostrou que a lisina é o primeiro aminoácido limitante para a farinha de peixe, glúten de milho, farelo de trigo e milho e o segundo limitante para o farelo de soja. A metionina apresentou-se como primeiro limitante para o farelo de soja e a levedura. No entanto, o farelo de soja revelou-se a fonte de proteína de melhor qualidade por apresentar o maior índice de aminoácidos essenciais digestíveis (133,1). Os resultados deste estudo demonstraram que os valores de aminoácidos digestíveis podem ser utilizados na formulação de rações balanceadas para o pacu. / Abstract: The apparent digestibility coefficients (ADCs) of amino acids (AA), protein, and energy in six feed ingredients (Brazilian fish meal, soybean meal, corn gluten meal, yeast, corn, and wheat meddling) were evaluated for pacu juveniles. In general, all ingredients showed high digestibility values for all AA, and differences among ADCs of individual amino acid were detected (P<0.01). Corn gluten, soybean, and fish meals had the highest ADCs of AA. The ADCs of protein in fish meal, yeast, and corn gluten meal should not be used as AA digestibility indicators, because those showed differences up to 6.7% between the ADCs of protein and AA. All ingredients had lower ADCs of energy than corn gluten meal (P<0.01). Lysine was the first limiting amino acid in fish meal, corn gluten meal, wheat meddling, and corn, and the second limiting amino acid in soybean meal, as methionine was the first limiting amino acid in soybean meal and yeast. However, the soybean meal was the best quality protein source, as it had the highest digestible essential amino acid index. This demonstrated that digestible amino acid values can be used to formulate practical diets for pacu, preventing potential deficiencies or excess that might cause environmental and economic losses. / Doutor

A ingestão de lipídios e seus constituintes, os ácidos graxos, são essenciais na manutenção do crescimento, na eficiência alimentar, na higidez do organismo, no funcionamento adequado dos rins e das brânquias e na reprodução. Este estudo visa identificar a influência exercida pelos lipídios dietéticos sobre as variáveis hematológicas e desempenho imunológico de pacus Piaractus mesopotamicus expostos à ação bacteriana. Juvenis de pacu (14,4 ± 0,4g) foram alimentados com dietas contendo níveis crescentes (20, 40, 60, 80, 100%) de óleo de linhaça (OL), óleo de girassol (OG) e sebo bovino (SB), ricas em ômega-3, ômega-6 e gordura saturada, respectivamente e, posteriormente, comparadas a uma dieta isenta destas fontes e a uma ração comercial. Os resultados obtidos foram submetidos a uma análise das variâncias, rearranjados em grupos e analisados sob o teste de Dunnett. Os níveis dietéticos de 20% de óleo de linhaça, 80% de óleo de girassol ou 80% de sebo bovino condicionaram as melhores taxas de desempenho zootécnico; o uso de 80% de óleo de girassol foi o mais adequado para ganho de peso (67,51±4,950g), taxa de conversão alimentar (1,05±0,088) e taxa de crescimento específico (2,19±0,085%), assim como para o aumento no número de linfócitos (1.964,13 ± 413,550), concomitante ao aumento dos leucócitos (1.986,00 ± 256,700), o que conferiu maior resistência aos animais, quando expostos à bactéria Aeromonas hydrophila. / The intake of lipids and its components, the fatty acids, are essential for proper growth, feed efficiency, health, appropriate kidney and gills function and reproduction performance. This study aims at identifying effects of dietary lipids on hematological variables and immunological performance of pacu Piaractus mesopotamicus exposed to bacterial challenges. Performance of juvenile pacu (14.4 ± 0.4 g) fed a diet with increasing levels (20, 40, 60, 80, 100 %) of linseed oil (LO); sunflower oil (80) and beef tallow (BT), rich in omega-3, omega-6 fatty acids, and saturated fat, respectively, was contrasted to the performance of fish fed diets containing soybean oil as lipid source, and a commercial aquafeed. Recorded results were subjected to ANOVA, grouped and submitted to Dunnett\'s test. Dietary levels of 20 % LO, 80% 80 or 80% beef tallow yielded the best growth performance; fish fed 80% 80 had the best weight gain (67.51 ± 4.95 g), best feed conversion ratio (1.05 :t 0.10), specific growth rate (2.10 ± 0.10 %), and also increased number of Iymphocytes (1,964.13 ± 413.55) concomitantly to increased number of leukocytes (1,986.00 ± 256.70), which also elicited the best immunological performance to fish challenged with Aeromonas hydrophila.

Orientador: Sarah Arana / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-23T12:36:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Peterlini_MarianaFrem_M.pdf: 4643636 bytes, checksum: cd0d6e62df40edebf5ce8326f7c80cd0 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A agricultura intensiva no Brasil tem aumentado o risco de contaminação dos recursos hídricos e dos organismos aquáticos por agroquímicos. Esse é o caso da atrazina, detectada em alta frequência em rios e córregos da região. Assim, neste trabalho, o pacu (Piaractus mesopotamicus) foi escolhido como bioindicador por sua importância econômica e ecológica em Bacias do Pantanal. As brânquias e o tegumento foram aqui avaliados como biomarcadores da toxicidade induzida por atrazina, uma vez que estes órgãos se encontram em contato direto com o ambiente aquático. Para avaliar a sensibilidade de alevinos de pacu e determinar a Concentração Letal Média (CL50) à atrazina foram conduzidos experimentos, em duplicata, em sistema estático por 96 horas, com as seguintes concentrações: 0,0; 13,2; 17,6; 22,0; 26,4; 30,8; 35,2; 39,6 mgL-1. A CL50 obtida para a atrazina foi de 28,58 mgL-1 (96h). Foram realizadas análises anatomopatológica, histopatológica qualitativa e semi-quantitativa para brânquias e análises anatomopatológica e histopatológica qualitativa para o epitélio tegumentar. Amostras de brânquia e de pele dorsal e ventral foram fixadas em Bouin e incluídas em parafina. Para o grupo controle não foi registrada qualquer alteração com os métodos empregados. Os alevinos expostos à atrazina apresentaram alterações comportamentais como: escurecimento da pele, boquejamento intenso e distúrbios motores, além disso, nesses aquários houve constante presença de muco na água; e, alterações anatomopatológicas, como: hiperemia na pele, dilatação da região ventral, presença de líquido no estômago e ascite sanguinolenta. Nas brânquias dos grupos tratados foram observadas as seguintes alterações morfológicas: edema e afastamento na região interlamelar, hipertrofia e hiperplasia na região interlamelar, destacamento do epitélio respiratório, hipertrofia de células do epitélio respiratório, congestão, telangiectasia e fusão de lamelas secundárias. Na pele dorsal e ventral dos grupos tratados não se observou alteração histopatológica. As alterações motoras observadas são provavelmente decorrentes do efeito neurotóxico da atrazina. As análises branquiais confirmam o comprometimento respiratório e de osmoregulação nesse órgão, sendo que a análise semi-quantitativa indicou a hipertrofia de células do epitélio respiratório como a lesão mais severa. Finalmente, as brânquias mostraram-se biomarcadores adequados na avaliação dos efeitos tóxicos da atrazina em pacu e o valor da CL50 sugere que a atrazina é levemente tóxica para o pacu, porém pelos demais resultados observados, se infere que só analisar a mortalidade não é o suficiente para determinar o dano causado por agrotóxicos em peixes, assim, recomenda-se o emprego de vários biomarcadores, como por exemplo, análise de vários outros órgãos. Os resultados obtidos reforçam a importância de estudos desta natureza, para embasar medidas ambientais preventivas e reguladoras quanto ao uso desse herbicida / Abstract: The intensive agriculture in Brazil has caused growing increase of pollution risks of hydric resources and the aquatic organisms by agrochemicals. This is the case of atrazine, detected in high frequency in the rivers and streams. Therefore, in this research, the pacu (Piaractus mesopotamicus) was chosen by bioindicator because of its great economic and ecological importance to the water ecosystem of the Pantanal region. The gills and skin were assessed here as biomarkers of induced toxicity by atrazine, considering that these organs are in direct contact with the aquatic environment. To evaluate the sensitivity of pacu fingerlings and determine the Median Lethal Concentration (LC50) by atrazine, experiments were conducted, performed in duplicate, in static system for 96 hours, with the following concentrations: 0.0; 13.2; 17.6; 22.0; 26.4; 30.8; 35.2; 39.6 mgL-1. The LC50 for pacu was 28.58 mgL-1 (96h). Anatomopathological, qualitative histopathological and semiquantitative histopathological analyses were performed for the gills, and anatomopathological and qualitative histopathological analysis were performed for the skin epithelium. Gills and dorsal and ventral skin samples were fixed in Bouin and processed for the inclusion in paraffin. The control group did not register any other alterations with the methods used. The fingerlings exposed to atrazine presented behavioral changes, such as: darkening of the skin, an increase in the frequency of gasping and motor disturbances. Furthermore, these aquariums presented the constant presence of mucus in the water; and, anatomopathological alterations, such as: skin hyperemia, dilation of the ventral region, the presence of liquid in the stomach and bloody ascites. In the gills of treated groups were found the following morphological alterations: edema and spacing in the interlamellar region, hypertrophy and hyperplasia in the interlamellar region, epithelial lifting, hypertrophy of respiratory epithelium cells, congestion, telangiectasis and fusion of the secondary lamellae. For dorsal and ventral skin of treated groups no histological alterations were observed. The motor alterations observed are probably due to the neurotoxic effects of atrazine. The gills analysis confirm respiratory and osmoregulatory compromise in this organ, noting that semi-quantitative analysis indicated the hypertrophy of respiratory epithelium cells as the most severe lesion. Finally, the gills showed adequate biomarkers in the assessment of toxic atrazine effects in pacu and the LC50 value suggests that atrazine is lightly toxic to pacu. However, by other results observed, it is concluded that analyzing the mortality index alone is not enough to determine the damages caused by agrotoxics in fishes, so the use of other biomarkers is recommended, like for instance, analysis some other organs. The results obtained reinforce the importance of research of this nature, in order to establish preventive and regulatory environmental measures regarding the use of this herbicide / Mestrado / Histologia / Mestra em Biologia Celular e Estrutural

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-05-19Bitstream added on 2014-06-13T19:00:41Z : No. of bitstreams: 1 abimorad_eg_dr_jabo.pdf: 424023 bytes, checksum: 1e6737277cac346bea282786846d4e06 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Neste estudo foram avaliados os coeficientes de digestibilidade aparente (CDA) dos aminoácidos (AA), proteína e energia de seis alimentos utilizados em dietas para o pacu. Os ingredientes apresentaram altos valores de digestibilidade para todos os aminoácidos e diferenças foram detectadas entre os CDA individuais dos aminoácidos dos alimentos (P<0,01). O glúten de milho, o farelo de soja e a farinha de peixe foram os alimentos que apresentaram os maiores CDA para os aminoácidos, mas seus CDA da proteína não devem ser usados como indicativo para a digestibilidade médias dos AA. Dentre os alimentos, o glúten de milho apresentou alto CDA da energia. O escore químico dos alimentos mostrou que a lisina é o primeiro aminoácido limitante para a farinha de peixe, glúten de milho, farelo de trigo e milho e o segundo limitante para o farelo de soja. A metionina apresentou-se como primeiro limitante para o farelo de soja e a levedura. No entanto, o farelo de soja revelou-se a fonte de proteína de melhor qualidade por apresentar o maior índice de aminoácidos essenciais digestíveis (133,1). Os resultados deste estudo demonstraram que os valores de aminoácidos digestíveis podem ser utilizados na formulação de rações balanceadas para o pacu. / The apparent digestibility coefficients (ADCs) of amino acids (AA), protein, and energy in six feed ingredients (Brazilian fish meal, soybean meal, corn gluten meal, yeast, corn, and wheat meddling) were evaluated for pacu juveniles. In general, all ingredients showed high digestibility values for all AA, and differences among ADCs of individual amino acid were detected (P<0.01). Corn gluten, soybean, and fish meals had the highest ADCs of AA. The ADCs of protein in fish meal, yeast, and corn gluten meal should not be used as AA digestibility indicators, because those showed differences up to 6.7% between the ADCs of protein and AA. All ingredients had lower ADCs of energy than corn gluten meal (P<0.01). Lysine was the first limiting amino acid in fish meal, corn gluten meal, wheat meddling, and corn, and the second limiting amino acid in soybean meal, as methionine was the first limiting amino acid in soybean meal and yeast. However, the soybean meal was the best quality protein source, as it had the highest digestible essential amino acid index. This demonstrated that digestible amino acid values can be used to formulate practical diets for pacu, preventing potential deficiencies or excess that might cause environmental and economic losses.

Orientador: Julieta Rodini Engracia de Moraes / Banca: Eduardo Makoto Onaka / Banca: Laura Satiko Okada Nakaghi / Banca: Sérgio Henrique Canello Schalch / Banca: Francisca Neide Costa / Resumo: Este ensaio teve como objetivo avaliar da cinética da inflamação aguda induzida na bexiga natatória de pacus, Piaractus mesopotamicus por Aeromonas hydrophila inativada e tioglicolato nos peixes que receberam suplementação dietética com as vitaminas C, E ou sua associação. A inflamação foi avaliada quatro, 24 e 48 horas depois dos estímulos. Um grupo mantido como controle recebeu salina e foi examinado após os mesmos períodos. Um outro grupo, não inoculado, foi avaliado para determinação dos tipos de células residentes. Nos tempos determinados os peixes foram sacrificados por aprofundamento do plano anestésico, o exsudato colhido e o componente celular avaliado. Os resultados demonstraram aumento ou diminuição gradativa do número de células totais acumuladas após quatro, 24 e 48 horas para os estímulos Aeromonas hydrophila e tioglicolato respectivamente. Esse fenômeno foi caracterizado pelo acúmulo dos trombócitos e linfócitos nos grupos inoculados com A. hydrophila e suplementados com a vitamina C seguidos pelos peixes tratados com a vitamina E. O contrário foi observado nos grupos inoculados com Tioglicolato, onde predominaram os linfócitos nos peixes alimentados com dietas contendo as vitaminas C e E e trombócitos nos que receberam a vitamina C demonstrando a eficácia das vitaminas independentemente dos estímulos inflamatórios utilizados. A citoquímica foi efetiva na identificação dos tipos celulares presentes. / Abstract: The purpose of this test was to value the kinetics of acute inflammation induced by inactivated Aeromonas hydrophila and thioglycolate, which were inoculated into Piaractus mesopotamicus' natatory bladder and supplemented with diet containing vitamins C, E or their associations. The inflammation was valued four, 24 and 48 hours after the stimulus. A considered control group received a saline solution and was examined after the same lapses of time. Another group, not inoculated, was valued to determine the types of resident cells. On the stipulated times, the fishes were sacrificed by a deepening on the anesthetic plane. The exudate was collected and the cellular component was valued. Results demonstrated a gradual increase or descrise in the total number of collected cells after four, 24 and 48 hours of the stimulus Aeromonas hydrophila and thioglycolate respectly. This phenomenon was characterized by the accumulation of thrombocytosis and lymphocytosis on those groups inoculated with A. hydrophila and supplemented with vitamin C, followed by those fishes treated with vitamin E. On those groups that received thioglycolate inoculated, It's been observed a predominance of lymphocytosis in fishes submitted to vitamins C and E diet, as well as, thrombocytosis in those who received vitamin C, which demonstrates the vitamins efficacy, no matter what inflammatory stimulus is used. The citochemistry was effective for identification of cell types. / Doutor

Made available in DSpace on 2017-07-10T18:13:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sidnei Klein.pdf: 674707 bytes, checksum: 12d531ad9dbec523abd994dd964a51c8 (MD5) Previous issue date: 2011-02-18 / Itaipu Binacional / The present study aimed evaluate the performance of pacu (Piaractus mesopotamicus) reared in cages in the Itaipu Reservoir, fed diets with different protein levels. The experiment was conducted at the Centre for Development of Technology for fish farming in cages, located along the Biological Refuge of Santa Helena - PR, for a period of 74 days. We used 2.000 fish with average weight of 150,5 ± 2,1 g distributed in a completely randomized design with five treatments and four replicates in 20 cages, with 5,0 m3 of usable volume, and the experimental unit consists of a tank with 100 fish. The treatments consisted of five extruded feeds with different crude protein levels (18,5; 20,7; 23,7; 25,6; and 28,3%). The feeding was performed three times daily until satiation of the animals. After the experiment were measured the parameters of growth performance, hematology, carcass yield and fillet chemical composition. The Average final weight, weight gain and daily weight gain was statistically different (P<0,05), showing a quadratic effect. We used linear effect on feed conversion. After the derivation of the equations the average final weight was greater for fish fed 25,9% CP and greater weight gain was observed with 25,8% CP. The parameters of carcass yield showed no significant difference (P>0,05). For chemical composition only moisture and ether extract showed significant differences, showing a linear effect for both, with an inverse correlation between these parameters, as increased levels of protein in the diet increased moisture and decreased the ether extract. There were no statistical differences in the hematological and biochemical variables, showing that protein levels contained in the diets did not influence the physiological status of fish. According to the results, we recommend the use of feed containing 25,8% crude protein for pacu (P. mesopotamicus) juvenile, reared in cages system. / O presente estudo objetivou avaliar o desempenho produtivo de pacus (Piaractus mesopotamicus) cultivados em tanques rede no reservatório da Itaipu Binacional, alimentados com rações contendo diferentes níveis de proteína bruta. O experimento foi realizado no Centro de Desenvolvimento de Tecnologia para Piscicultura em Tanques rede, localizado junto ao Refúgio Biológico de Santa Helena - PR, por um período de 74 dias. Foram utilizados 2.000 peixes com peso médio de 150,5±2,1g distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado com cinco tratamentos e quatro repetições em 20 tanques rede, com 5,0 m³ de volume útil por tanque rede, sendo a unidade experimental composta por um tanque com 100 peixes. Os tratamentos foram constituídos por cinco rações extrusadas com diferentes níveis de proteína bruta (18,5; 20,7; 23,7; 25,6 e 28,3 %). O arraçoamento foi efetuado três vezes ao dia, até a saciedade aparente dos animais. Ao término do experimento foram aferidos os parâmetros de desempenho zootécnico, rendimento de carcaça, composição química dos filés e hematologia. O peso final médio, ganho de peso e ganho de peso diário apresentaram efeito quadrático (p<0,05). Foram observados efeito linear para conversão alimentar. Após a derivação das equações o maior peso final médio ocorreu para peixes alimentados com 25,9% PB e o maior ganho de peso foi observado com 25,8% PB. Os parâmetros de rendimento de carcaça não apresentaram diferenças significativas (p>0,05). Para composição química a umidade e o extrato etéreo apresentaram efeito linear, com relação inversa entre estes parâmetros. O aumento do nível de proteína bruta na dieta elevou o percentual de umidade e reduziu a porcentagem de extrato etéreo. Não foram observadas diferenças estatísticas para as variáveis hematológicas e bioquímicas, demonstrando que os níveis protéicos contidos nas dietas não influenciaram na higidez dos peixes. De acordo com os resultados obtidos, recomenda-se a utilização de ração contendo 25,8% de proteína bruta para juvenis de pacu (P. mesopotamicus), criados em sistema de tanques rede.

Submitted by Luciana Sebin (lusebin@ufscar.br) on 2016-10-13T12:06:00Z No. of bitstreams: 1 TeseMMC.pdf: 4981123 bytes, checksum: d5a8170e8917fcba950766e44afd3868 (MD5) / Approved for entry into archive by Ronildo Prado (ronisp@ufscar.br) on 2016-10-14T20:37:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseMMC.pdf: 4981123 bytes, checksum: d5a8170e8917fcba950766e44afd3868 (MD5) / Approved for entry into archive by Ronildo Prado (ronisp@ufscar.br) on 2016-10-14T20:38:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseMMC.pdf: 4981123 bytes, checksum: d5a8170e8917fcba950766e44afd3868 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-17T12:54:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseMMC.pdf: 4981123 bytes, checksum: d5a8170e8917fcba950766e44afd3868 (MD5) Previous issue date: 2016-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / The main goal of the present work was to perform an expression analysis of the Arg1, Arg2 and iNOS genes in the liver, anterior kidney and spleen of pacu (Piaractus mesopotamicus) in 4 different times post-infection, in response to the experimental infection with the bacterium Aeromonas dhakensis. The strain used in the present study was isolated from a specimen of P. mesopotamicus from the CEPTA/ICMBio in Pirassununga – SP, characterized by biochemical tests using the VITEK 2 automated identification system, and identified as belonging to the genus Aeromonas. Further molecular analyses of the 16S rRNA, gyrB and rpoD genes showed that the isolated strain belonged to the species A. dhakensis, a species that had never been reported in South America. This strain was resistant to the antibiotics ampicillin, ampicillin/sulbactam, cefoxitin and meroponem, with a high virulence level against experimentally infected pacus, causing clinical signs of acute hemorrhagic septicemia. The fifty per cent lethal dose (LD50) was 1.1 × 105 CFU/fish. Once characterized, this A. dhakensis strain was used in the infection experiments in P. mesopotamicus in order to analyze the expression of the Arg1, Arg2 and iNOS genes. These genes were sequenced and, from the partial sequences, P. mesopotamicus specific primers were designed for the quantitative real time PCR (qPCR) expression analyses. Following the infection with A. dhakensis, the Arg1 gene expression levels decreased in the kidney 24 h post-infection; the Arg2 gene expression of reduced in the liver at 12 h and 24 h post-infection and increased in the spleen at 24 h and 48 h post-infection; the gene expression of iNOS was significantly increased in she spleen at 12 h, 24 h, and 48 h post-infection. The results of the present study showed that the Arg2 and iNOS genes were the most variable in response to the A. dhakensis infection, indicating that these are involved in the initial immune response to bacterial infections in P. mesopotamicus. The organ that was most involved in this response was the spleen, which showed the highest levels of variation in these genes after the challenge. This is the first study assessing the expression levels of the Arg1, Arg2 and iNOS genes in P. mesopotamicus following the infection with A. dhakensis, providing a valuable contribution for the understanding of the immune response mechanisms against bacterial pathogens in this important South American fish species. / O presente trabalho teve como objetivo realizar uma análise da expressão dos genes das enzimas Arg1, Arg2 e iNOS no fígado, rim anterior e baço de pacu (Piaractus mesopotamicus) em 4 períodos diferentes pós-infecção, em resposta à infecção experimental pela bactéria Aeromonas dhakensis. A cepa bacteriana utilizada no presente estudo foi isolada de um exemplar de P. mesopotamicus obtido do CEPTA/ICMbio em Pirassununga – SP, caracterizada por testes bioquímicos pelo sistema de identificação automatizado VITEK 2 e identificada como sendo do gênero Aeromonas. Posteriores análises moleculares dos genes 16S rRNA, gyrB e rpoD demonstraram que a bactéria isolada era da espécie A. dhakensis, cuja ocorrência na América do Sul nunca havia sido relatada. Essa cepa se mostrou resistente aos antibióticos ampicilina, ampicilina/sulbactam, cefoxitina e meropenem, com elevado nível de virulência para pacus experimentalmente infectados, causando sinais clínicos de septicemia hemorrágica aguda. A dose letal para 50% dos animais infectados (DL50) foi de 1,1 × 105 UFC/peixe. Uma vez caracterizada, essa cepa de A. dhakensis foi utilizada no experimento de infecção em P. mesopotamicus para análise de expressão dos genes Arg1, Arg2 e iNOS. Esses genes foram sequenciados e, a partir das sequências parciais, primers específicos para P. mesopotamicus foram desenhados para as análises de expressão por PCR em tempo real quantitativo (qPCR). O gene Arg1 apresentou os maiores níveis de expressão basal no fígado, já o gene Arg2 foi mais expresso no rim e o gene iNOS apresentou os maiores níveis de expressão basal no rim e no fígado. Após a infecção por A. dhakensis, o gene Arg1 apresentou uma leve diminuição na expressão no rim no período de 24 h pósinfecção; o gene Arg2 apresentou uma redução na sua expressão no fígado nos períodos de 12 h e 24 h pós-infecção e um aumento na expressão no baço nos períodos de 24h e 48 h pósinfecção; e o gene iNOS apresentou aumento significativo nos níveis de expressão no baço nos períodos de 12 h, 24 h e 48 h pós-infecção. Os resultados do presente trabalho mostram que os genes Arg2 e iNOS foram os que apresentaram maior variação em resposta à infecção por A. dhakensis, indicando que estes genes estão envolvidos na resposta inicial à infecções por essa bactéria em P. mesopotamicus. O baço foi o órgão mais envolvido nessa resposta, apresentando os maiores variações nos níveis de expressão desses genes após o desafio. Este é o primeiro estudo avaliando os níveis de expressão dos genes Arg1, Arg2 e iNOS em P. mesopotamicus após infecção por A. dhakensis, fornecendo uma valiosa contribuição para o entendimento dos mecanismos de resposta imunológica contra patógenos desse importante peixe sul-americano.

Made available in DSpace on 2017-07-10T18:13:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jovana S G Zuanazzi.pdf: 1591078 bytes, checksum: 9e7da20305d2110d6ed490d0e1aa024c (MD5) Previous issue date: 2013-08-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study is divided into two scientific articles. The first article was to evaluate the mechanically deboned meat of pacu (CMS) with addition of sodium erythorbate and sodium tripolyphosphate and verifying some of its properties physical and chemical in intervals of 0, 30, 60, 90 and 120 days of storage at -18 °C. The second article it is the preparation of breaded from the CMS of pacu, evaluating the parameters physical, chemical, microbiological and sensory in the intervals of 0, 30, 60, 90 and 120 days of storage at -18°C. The samples of mechanically separated meat were divided into four treatments verifying its stability over the months. The data were analyzed to determine pH, color, water-holding capacity (CRA), myofibrillar fragmentation index (IFM), water activity (Aw) and chemical composition in four different treatments using sodium 0.1% of erythorbate + 0.5% of sodium tripolyphosphate, 0.1% of sodium erythorbate, 0.5% of sodium tripolyphosphate, and no additives. The breaded were prepared according to specific wording and subject to the microbiological, physical and chemical properties and sensory. It is concluded that addition of sodium erythorbate increased significantly Aw, CRA and the IFM by the thirtieth day of storage. The addition of tripolyphosphate had an influence on pH and CRA which remained stable for longer the first parameter and reduced tendency to decrease the value of the second. The storage time influenced differently the parameters analyzed. The Aw and the L* value decreases suffered the greatest at the beginning of storage, while the IFM and CRA tended to decrease continuously over time. The combined use of sodium erythorbate and sodium tripolyphosphate was the most efficient, since promoted the desirable increase in CRA while other treatments tended to decrease the value of this parameter. The lipid oxidation in breaded CMS pacu stored at -18 °C was low, indicating no rate of rancidity in the product. The results of the microbiological analysis of the breaded CMS pacu are the standards set by law; it reflects that the handling of raw materials to the final product was performed adequately for human consumption. The sensory evaluation of breaded of pacu CMS indicated good acceptance by the tasters, where more than 32% would buy the product frequentily. / O presente estudo está dividido em dois artigos científicos. O primeiro artigo teve como objetivos avaliar a carne mecanicamente separada (CMS) de pacu com adição de eritorbato de sódio e tripolifosfato de sódio, e verificar algumas de suas propriedades físicas e químicas nos intervalos de 0, 30, 60, 90 e 120 dias de armazenamento a -18°C. O segundo artigo trata-se da elaboração de empanado a partir da CMS de pacu, avaliando os parâmetros físicos, químicos, sensoriais e microbiológicos nos intervalos de 0, 30, 60, 90 e 120 dias de armazenamento a -18°C. As amostras da carne mecanicamente separada foram divididas em quatro tratamentos verificando sua estabilidade ao longo dos meses. As análises realizadas foram a determinação de pH, cor valor (L*, a* e b*), capacidade de retenção de água (CRA), índice de fragmentação miofibrilar (IFM), atividade de água (Aw) e composição centesimal em quatro tratamentos diferentes utilizando 0,1% de eritorbato de sódio + 0,5% de tripolifosfato de sódio, 0,1% de eritorbato de sódio, 0,5% de tripolifosfato de sódio e sem aditivos. Os empanados foram elaborados segundo formulação específica e submetidos às análises microbiológicas, físicas e químicas e sensoriais. Conclui-se que a adição de eritorbato de sódio elevou de forma significativa a Aw, a CRA e o IFM até o trigésimo dia de armazenamento da CMS. A adição de tripolifosfato teve influência no valor do pH e na CRA, onde manteve por mais tempo estável o primeiro parâmetro e reduziu a tendência de queda do valor do segundo. O tempo de armazenamento influenciou de forma diferente os parâmetros analisados. A Aw e o valor L* sofreram as maiores diminuições no início do armazenamento da CMS, enquanto a CRA e o IFM tiveram a tendência de redução contínua ao longo do tempo. O emprego combinado de eritorbato e tripolifosfato de sódio foi o mais eficiente, pois promoveu o desejável aumento da CRA da CMS enquanto os outros tratamentos apresentaram tendência à queda do valor deste parâmetro. A oxidação lipídica no empanado de pacu armazenado a -18°C foi baixa, não indicando nenhuma taxa de rancificação no produto. Os resultados da análise microbiológica do empanado de CMS de pacu estão nos padrões estabelecidos pela legislação, isso reflete que a manipulação da matéria prima até o produto final foi realizada de forma adequada para o consumo humano. A avaliação sensorial do empanado de CMS de pacu indicou uma boa aceitação por parte dos provadores, onde mais de 32% destes comprariam com frequência.