INTRODUÇÃO: As infecções pulmonares constituem uma das principais causas de morbidade e mortalidade após o transplante pulmonar. O transplante expõe a árvore brônquica a uma série de condições, como à lesão de secção e anastomose brônquica e à ação dos imunossupressores, alterando os componentes do epitélio mucociliar. O sistema mucociliar presente nas vias aéreas do sistema respiratório é o principal mecanismo de defesa do trato respiratório, assim a influência de drogas neste sistema precisa ser investigada. A prednisona é um importante corticosteróide usado após o transplante de pulmão, no entanto seu uso pode estar associado ao aumento da mortalidade no período pós por complicações como baixa cicatrização e infecções. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da secção brônquica e da terapia com prednisona na depuração mucociliar. MÉTODOS: Foram utilizados 180 ratos machos Wistar distribuídos em 6 grupos (P1, P2, P3, ScP2, ScSal e Sal). Os animais dos grupos P1, P2 e P3 receberam diferentes doses de prednisona (0,625, 1,25 e 2,5 mg/kg/dia); os do grupo ScP2 foram submetidos à cirurgia de secção e anastomose brônquica e terapia com 1.25 mg/kg/dia de prednisona; do grupo ScSal foram submetidos à cirurgia de secção e anastomose brônquica e gavagem diária de solução fisiológica; por fim, os animais do grupo Sal receberam gavagem de solução fisiológica. Após o período de tratamento (7, 15 ou 30 dias), os animais foram sacrificados, e as medidas de freqüência de batimento ciliar (FBC), velocidade de transporte mucociliar (VTMC) e transportabilidade do muco (TM) coletadas. Para avaliar os efeitos da droga realizamos a análise estatística comparativa entre os grupos P1, P2, P3 e Sal. Para avaliar a possível interação da droga com o procedimento cirúrgico comparamos os grupos ScP2, ScSal e P2. RESULTADOS: A administração das diferentes doses de prednisona estudadas prejudicaram a TM e a dosagem mais alta (P3) diminuiu a VTMC. Os animais submetidos à secção e anastomose brônquica mostraram redução significativa de VTMC e FBC após 7 e 15 dias da cirurgia (p<0.001) Observamos a recuperação desses parâmetros após 30 dias do procedimento cirúrgico. A droga melhorou a TM dos animais submetidos à secção e anastomose brônquica (p<0,02). CONCLUSÕES: Altas dosagens de prednisona prejudicam a depuração mucociliar. A terapia com prednisona associada à cirurgia de secção e anastomose brônquica não altera a depuração mucociliar visto que, apesar de melhorar a transportabilidade do muco, a freqüência de batimento ciliar e a velocidade de transporte mucociliar não são influenciadas / INTRODUCTION: Infections have been and still are the major cause of morbidity and mortality after lung transplantation. Since mucociliary clearance (MCC) plays an important role on the human defense mechanism, the influence of drugs on MCC of patients submitted to lung transplantation must be examined. Prednisone is the most important corticosteroid used after lung transplantation. The aim of this study was to evaluate the effects of bronchial transection and prednisone therapy (P) on mucociliary clearance. METHODS: 180 rats were assigned to 6 groups (P1, P2, P3, ScSal, e Sal) according to surgical procedure or drug therapy: P1 (0.625mg/kg/day), P2 (1.25 mg/kg/day), P3 (2.5mg/kg/day), ScP2 (bronchial section and reanastomosis + 1.25 mg/kg/day ), Sal (saline solution 2ml/day) and ScSal (bronchial section + saline solution 2ml/day). After 7, 15 or 30 days they were killed and lungs were removed from thoracic cavity. Mucociliary transport velocity (MCTV), ciliary beting frequency (CBF) and mucus transportability (MT) were evaluated. RESULTS: The administration of different doses of prednisone studied harmed MT and the highest dosage (P3) decreased MCTV. FBC and MCTV was significantly impaired 7 and 15 days after bronchial transection and reanastomosis (p<0.001), but they showed a partial recovery on the 30th day after surgery procedure. Prednisone therapy improved MT after surgery procedure (p<0,02). CONCLUSION: High dosages of prednisone affect mucociliary clearance. The Prednisone therapy after section and reanastomosis surgery not affect mucociliary clearance since, despite improving MT, the CBF and MCTV are not influenced

Toracoscopia é o método de visibilização da cavidade torácica, tendo sua indicação como exame auxiliar para diagnóstico de afecções como pleuropneumonia, neoplasias, aderências, metástases, pericardites, abscessos pulmomares e hérnias. O aprimoramento da equipe cirúrgica e o avanço tecnológico dos equipamentos endoscópicos fizeram com que esta técnica passasse a ser denominada cirurgia torácica vídeo-assistida, pela sua indicação não somente diagnóstica, mas terapêutica. Este trabalho visou à realização de ressecção da porção dorsocaudal do lobo pulmonar caudal esquerdo com auxílio de sutura mecânica por via toracoscópica. Foram utilizados seis eqüinos clinicamente sadios, machos e fêmeas, de peso, raça e idade variáveis. Estes animais foram avaliados nos períodos pré e pós-operatórios através de exame físico, coleta de material para hemograma e fibrinogênio plasmático, e exame ultra-sonográfico torácico. O local da ressecção pulmonar foi avaliado através de novo procedimento toracoscópico no 30º dia de pós-operatório. Em todos os animais a realização da técnica transcorreu de forma adequada, tendo sido possível o controle do pneumotórax, assim como foi observada evolução clínica satisfatória durante o período pós-operatório. Os resultados obtidos indicam que através de técnica cirúrgica vídeo-assistida pode-se realizar ressecção pulmonar parcial com uso de sutura mecânica em eqüinos, e sua aplicação na rotina hospitalar poderá contribuir para resolução das enfermidades sediadas na cavidade torácica. / Thoracoscopy is a method used to evaluate the thoracic cavity and as such, it is indicated as an auxiliary exam in the diagnosis of diseases as pleuropneumonia, neoplasias, adhesions, metastasis, pericarditis, pulmonary abscesses and herniation. Due to the refinement of the surgical team and the technological advance of endoscopic equipment this technique is currently denominated video-assisted thoracic surgery, which is more adequate, since it is indicated for both diagnostic and therapeutic purposes. In this thoracoscopic study we performed a resection of the dorsocaudal portion of the left caudal lung lobe with the aid of endoscopic stapler. For the purpose of this study we used six healthy horses, females and males, of different weights, breeds and ages. During the pre and postoperative periods, these horses were evaluated by means of physical examination, hemogram and plasmatic fibrinogen dosage, and thoracic ultrasound. The site of lung resection was evaluated by means of a second thoracoscopy on the 30th postoperative day. In all animals the performance of the technique was adequate, it was possible to control the pneumothorax, and furthermore, clinical recovery during the postoperative period was adequate. The results of this study determined that the video-assisted surgical technique provided partial lung resection in horses with the use of endoscopic staplers. Its use in hospital routine may contribute to the resolution of thoracic diseases.

Orientador: Manoel Barros Bertolo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-25T16:46:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_MariadoSocorroTeixeiraMoreira_D.pdf: 2149275 bytes, checksum: 99ea931f214943626d6352a600cd07e9 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Objetivo: Determinar a frequência dos antígenos HLA-DR em pacientes piauienses com artrite reumatoide (AR) e envolvimento pulmonar. Pacientes e métodos: Foram avaliados 97 pacientes piauienses com AR. A genotipagem do HLA-DR foi realizada através da técnica de amplificação pela reação em cadeia da polimerase. Resultados: Oitenta e cinco pacientes (88,0%) eram do sexo feminino, 77,0% não caucasoides e tinham idade média de 47,3 anos. Cinquenta e quatro pacientes (56,0%) apresentavam manifestações extra-articulares, sendo nódulos subcutâneos a mais frequente (19,0%). Após a realização de avaliação pulmonar, constatou-se comprometimento pulmonar em 54 (56,0%) pacientes. HLA mais frequente foi o HLA DRB4*01, seguido por DRB1*04, DRB3 e DRB1*01 e nos pacientes com comprometimento pulmonar foram HLA-DRB4*01, HLA-DRB1*04 e HLA-DRB1*13. Conclusão: O HLA mais frequente foi o HLA-DRB4*01 em todos os pacientes do estudos e nos pacientes com envolvimento pulmonar também foi o HLA-DRB4*01, não havendo, no entanto, associação estatisticamente significativa / Abstract: Aims: To establish the frequency of HLA-DR antigens in individuals with rheumatoid arthritis (RA) from Piaui with and without lung affection. Participants and methods: The sample comprised 97 individuals. HLA-DR was genotyped by means of polymerase chain reaction amplification. Results: A total of 85 participants (88.0%) were female; 77.0% were non-white; and the average age of the sample was 47.3 years old. A total of 54 participants (56.0%) exhibited extra-articular manifestations, most frequently subcutaneous nodules (19.0%). Lung assessment detected affection in 54 (56.0%) participants. HLA-DRB4*01 was the most frequently found allele, followed by HLA-DRB1*04, HLA-DRB3 and HLA-DRB1*01, whereas the most frequent alleles were HLA-DRB4*01, HLA-DRB1*04 and HLA-DRB1*01 in the participants with lung affection. Conclusion: HLA-DRB4*01 was the allele most frequently found overall, and HLA-DRB4*01 was the most frequent allele among the participants with lung affection; however, the association was not statistically significant / Doutorado / Medicina Interna / Doutora em Ciências Médicas

Orientadores: Alfio José Tincani, Luciana Rodrigues de Meirelles / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-18T22:17:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Franco_FernandoFabricio_D.pdf: 2115089 bytes, checksum: b74f7a822f16bf0228730d3a2f4ab28a (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Introdução: A lipoaspiração é um procedimento cirúrgico que consiste na retirada do excesso de tecido gorduroso localizado, em indivíduos saudáveis. Este procedimento, que muito aumentou nas últimas décadas em todo o mundo, pode ser associado à lipoenxertia. Ambos são empregados para melhora do contorno corporal. Uma das principais complicações relacionadas com a lipoaspiração é a embolia gordurosa. O presente estudo tem por objetivo verificar qualitativamente se existe mobilização intravascular da gordura após lipoaspiração manual pela técnica de infiltração superúmida para pulmões, fígado, rins e cérebro, em ratos da raça Wistar, seguida ou não de lipoenxertia. Método: Utilizou-se 30 modelos animais de ratos da linhagem Wistar. Os animais foram submetidos ao método usual da lipoaspiração e analisados em três diferentes grupos. Todos os animais foram anestesiados e infiltrados no subcutâneo do abdome com soro fisiológico contendo adrenalina, distribuídos da seguinte forma: no grupo A, dez animais serviram de controle, no grupo B, 10 animais foram lipoaspirados na região abdominal e no grupo C outros 10 animais, além de lipoaspirados, foram lipoenxertados na região dorsal inferior. Uma amostra de sangue foi colhida logo após a anestesia e após 48h dos procedimentos em todos os grupos, para gota de esfregaço em lâmina. Esse procedimento analisou os valores da hemoglobina, bem como a oxigenação sanguínea. Todos os animais foram submetidos á eutanásia após 48h, e os pulmões, rins, fígado e cérebro analisados histologicamente por duas colorações diferentes: Hematoxilina e Eosina (H&E) e Sudan Negro. Resultado: Foram encontradas partículas de gordura nos pulmões de três animais do Grupo B que foram apenas lipoaspirados e, em seis animas do grupo C, lipoaspirados e lipoenxertados. Nos animais do grupo controle, não foram identificados à presença de partículas de gordura em nenhum órgão estudado. Conclusão: Este estudo demonstra que há risco de mobilização sistêmica de gordura, após lipoaspiração e este risco aumenta, quando o procedimento está associado à lipoenxertia, em ratos Wistar / Abstract: Introduction: Liposuction is a surgical procedure that consists of the removal of excess fatty tissue found in health subjects. This procedure, which has become increasingly common in recent decades throughout the world, can be associated with fat grafting. Both are employed to improve the body contour. One of the main complications of liposuction is fat embolism. The present study aims to verify whether there is qualitative intravascular mobilization of fat after the employment of the liposuction technique manual super wet infiltration of the lungs, liver, kidneys and brain in Wistar rats followed or not by fat grafting. Method: We used animal models of 30 Wistar rats. The animals were subjected to the usual method of liposuction and analyzed in three different groups. All animals were anesthetized and infiltrated with saline solution containing epinephrine, distributed as follows: Group A, ten animals served as controls, in group B, 10 animals were liposuction in the abdominal region in group C and 10 other animals, and liposuction were in the lower back fat grafting. A blood sample was collected immediately after anesthesia and 48h of procedures in all groups, to drop the smear slide and examine the values of hemoglobin, and blood oxygenation. All animals were euthanized after 48h, and the lungs, kidneys, liver and brains were histologically examined by two different colors: hematoxylin and eosin (H & E) and Sudan Black. Results: There were fat particles in the lungs of three animals in Group B that were only subject to liposuction and six animals in group C, subject to liposuction and fat grafting. Fat particles were not found in any organ studied in the control group. Conclusion: This study demonstrates that there is risk of systemic fat mobilization after liposuction and this risk increases when the procedure is associated with fat grafting in Wistar rats / Doutorado / Fisiopatologia Cirúrgica / Doutor em Ciências

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:49:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Laura Dutra Rezem Brizio.pdf: 973981 bytes, checksum: dc6bbe3c70199b00b9eb8f2827ca60fd (MD5) Previous issue date: 2013-02-27 / The aim of this study was to investigate the association between physical activity (PA) engagement throughout life and the incidence of lung cancer (CA) in southern Brazil. A case control study was carried out. Both cases and controls responded to a questionnaire containing questions about sociodemographics , gender, age and skin color, anthropometric information, marital status, education, smoking and family history of CA. Physical activity was measured using the Lifetime Physical Activity Questionnaire. We studied a total of 249 individuals (81 cases and 168 controls). In the crude analysis, active commuting increased the odds for CA (p=0.01) and sports activities resulted in non-significant protection (p=0.05). In the adjusted analysis, the occupational PA (p=0,009) and lifetime PA (p=0.02) were associated to lower odds of CA, while active commuting (p=0.03) and household activities (p=0.01) were associated with increased odds of CA. For this reason, it s extremely important to encourage the practice of PA since childhood, because considering the consistent evidence on the importance of PA in the prevention of many diseases in adulthood, including CA, its encouragement at early ages may represent a strategy to control physical inactivity worldwide and hence reduce the epidemic of chronic diseases / O objetivo deste estudo foi verificar a associação entre a prática de Atividades Físicas (AF) durante toda a vida e a incidência de câncer (CA) de pulmão no sul do Brasil. Este estudo utilizou o delineamento caso-controle. Tanto casos quanto controles responderam ao questionário contendo questões sobre características sócio-demográficas, sexo, idade e cor da pele, variáveis antropométricas, situação conjugal, escolaridade, tabagismo e histórico familiar de CA. A atividade física foi medida pelo Lifetime Physical Activity Questionnaire. Foram estudados ao todo 249 indivíduos (81 casos e 168 controles). Na análise bruta, a AF de deslocamento aumentou a chance de CA (p=0,01) e as atividades esportivas resultaram em proteção não significativa (p=0,05). Na análise ajustada, a AF ocupacional (p=0,009) e por toda vida (p=0,02) estiveram associadas com menos chance de CA, enquanto que as AF's de deslocamento (p=0,03) e domésticas (p=0,01) estiveram associadas a maior chance de CA. Por essa razão, é de extrema importância o incentivo da prática de AF desde a infância, pois considerando as consistentes evidências da importância da AF na prevenção de inúmeras doenças na idade adulta, incluindo o CA, o seu estímulo em idades precoces pode representar uma estratégia no controle da inatividade física observada em todo o mundo e, consequentemente, reduzir a epidemia das doenças crônicas

Orientador: Ivan Felizardo Contrera Toro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-07T09:33:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mussi_RicardoKalaf_D.pdf: 7974637 bytes, checksum: 40bf555137ac51738964d4e90337bddf (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Objetivos: A proposta deste estudo foi avaliar os efeitos do treinamento físico na resposta inflamatória (permeabilidade vascular e influxo neutrofílico) após isquemia-reperfusão pulmonar (IRP) em ratos. Considerando que o treinamento físico tem propriedades protetoras em determinadas doenças cardiovasculares, hipotetizamos que animais submetidos a treinamento com exercício físico podem ficar protegidos contra a lesão causada pela isquemia e reperfusão pulmonar. Métodos: ratos Wistar machos (pesando entre 350g e 450g) foram divididos em três grupos: sham operados (SHAM); animais sedentários submetidos à isquemia-reperfusão (IR/SD) e animais treinados submetidos à isquemia-reperfusão (IR/TR). Animais treinados foram submetidos a um programa de oito semanas de treinamento em corrida, com sessões de 60min por dia, cinco dias por semana. Os ratos foram anestesiados e ventilados artificialmente. Após a toracotomia, a artéria pulmonar esquerda, o brônquio principal esquerdo e a veia pulmonar esquerda foram clampeados, mantendo o pulmão inflado parcialmente por 90 minutos. O clampe foi então removido e os pulmões voltaram a ventilar, e foram reperfundidos por duas horas. A circulação pulmonar foi perfundida através do tronco arterial pulmonar com solução salina. O extravasamento de proteína plasmática foi medido através do acúmulo de albumina sérica marcada com I. em ambos os pulmões, enquanto que a infiltração neutrofílica foi medida através da atividade de mieloperoxidase (MPO). 125Resultados: Após oito semanas de treinamento em corrida, o peso corpóreo foi significativamente menor em 15% no grupo treinado comparado com o do grupo sedentário (p<0,05). A contagem de células mononucleares e polimorfonucleares em ratos treinados não se altera significativamente quando comparada à dos ratos sedentários. A IRP causou acentuado aumento (p< 0,05) na permeabilidade vascular e na atividade da mieloperoxidase do pulmão direito dos animais sedentários. O precondicionamento físico dos animais atenuou significativamente (p< 0,05) a elevação da permeabilidade vascular, sem afetar o influxo neutrofílico. O protocolo de isquemia e reperfusão também resultou em níveis elevados de IL-1 ß e TNF-a no grupo sedentário, e foram revertidos pelo programa de treinamento em corrida. Os níveis séricos de IL-10 não foram alterados nos três grupos. Conclusões: Os dados deste estudo mostram que o precondicionamento físico atenua a elevação da permeabilidade vascular, mas não o influxo neutrofílico induzido pela isquemia-reperfusão em ratos. Estes dados sugerem que o treinamento físico age no componente vascular mas não no celular da resposta inflamatória, deste modelo, protegendo contra a lesão pulmonar causada pela isquemia-reperfusão / Abstract: Objective: The purpose of this study was to evaluate the effects of exercise training on the inflammatory response (vascular permeability and neutrophil influx) after lung ischemia-reperfusion in rats. Considering that exercise training have protective properties in certain cardiovascular disease, we hypothesized that animals undergoing exercise physical training would be protective against direct lung ischemia-reperfusion injury. Methods: Male Wistar rats (weighing 350g and 450g) were divided into tree groups: Sham operated (SHAM); sedentary animals submitted to ischemia-reperfusion (IR/SD) and trained animals submitted to ischemia-reperfusion (IR/TR). Trained animals underwent 8 weeks of run training program in sessions of 60 min/day, 5 days/week. Rats were anesthetized and artificially ventilated. After thoracotomy, the left pulmonary artery, bronchus and pulmonary vein were occluded, maintaining the lung in a partially inflated state for 90min. The clamp was then removed, and lungs were allowed to ventilate and reperfuse for 2h. The pulmonary circulation was flushed through the main pulmonary artery with salin solution. Protein plasma extravasation was measured as accumulation of human serum albumin labeled with I in the botht lung tissues, whereas neutrophil infiltration was measured as the myeloperoxidase (MPO) activity.125 Results: After 8 weeks of run training, the body weight was significantly 15% lower in trained groups compared with the sedentary group (p<0.05). Counts of mononuclear and polymorphonuclear cells in trained rats did not significantly changed compared with sedentary rats. The lung ischemia-reperfusion caused a marked increase (p<0.05) in vascular permeability and MPO activity in the right lung of sedentary animals. The physical preconditioning of the animals significantly attenuated (p<0.05) the increased vascular permeability, without affecting the neutrophil influx. The ischemia-reperfusion protocols also resulted in increased levels of serum IL-1ß and TNF-a in sedentary group, and that was reversed by run training program. The serum levels IL-10 were not altered in all groups. Conclusions: Our data show that physical preconditioning attenuate the increased vascular permeability but not the neutrophil influx induced by rat lung ischemia-reperfusion. This data suggests that physical training act in the vascular (but not in the cellular) component of the inflammatory response to protect against the injury caused by lung ischemia-reperfusion / Doutorado / Cirurgia / Doutor em Cirurgia

Orientador: Adyléia Aparecida Dalbo Contrera Toro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-26T18:51:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernandes_SuelendoCouto_M.pdf: 1358397 bytes, checksum: 9992e4af63587275f7ab021f9bb34023 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: A exposição intra uterina ao vírus da imunodeficiência humana (HIV) pode levar a corioaminionite e déficit no desenvolvimento pulmonar. Há evidências crescentes de que muitas alterações possam persistir até a infância tardia ou mesmo até a idade adulta. Objetivo: Avaliar a função pulmonar de crianças e adolescentes verticalmente expostas ao HIV e não infectados através de Espirometria e Capnografia Volumétrica (CapV), e comparar os resultados obtidos com grupos de crianças e adolescentes saudáveis e de infectados pelo HIV por transmissão vertical. Casuística e métodos: Estudo observacional, analítico, do tipo corte transversal, envolvendo crianças e adolescentes com idade entre 6 à 19 anos de ambos os sexos, que foram expostas verticalmente ao HIV e acompanhadas no Serviço de Imunodeficiência Pediátrica do Hospital de Clínicas da Universidade Estadual de Campinas. Todos os indivíduos realizaram espirometria e CapV. Três comparações foram feitas: pacientes filhos de mães HIV, mas não infectados pelo vírus HIV (Grupo I) pacientes infectados pelos vírus HIV sem doença pulmonar (Grupo II) indivíduos saudáveis (Grupo III). Os testes estatísticos foram: teste exato de Fisher, teste de Mann-Whitney, teste de Wilcoxon, teste de Kruskal-Wallis e o teste de Comparações Múltiplas Não-paramétrico. Em todos os casos adotou-se o nível de significância de 5% (p=0,05). Resultados: Foram incluídos 122 indivíduos, destes, 24 eram pacientes filhos de mães HIV, mas não infectados pelo vírus HIV (Grupo I); 21 pacientes infectados pelos vírus HIV sem doença pulmonar (Grupo II) e 77 indivíduos saudáveis (Grupo III). A idade foi maior no Grupo II (14,9 ± 3,1) quando comparado ao Grupo I e ao Grupo III respectivamente (9,7 ± 2,3; 11,2 ± 1,7) p< 0,001. O z-escore da altura e do IMC foram significativamente menores nos pacientes do Grupo II (-0,72 ± 0,99; -0,50 ± 1,14) quando comparados ao Grupo I (0,65 ± 1,05; 0,56 ± 1,34) p <0,001. As variáveis VEF1% (p=0,007) e FEF25-75% (p=0,007) do Grupo I foram significativamente menores quando comparados ao Grupo III. Os resultados capnográficos não mostraram diferenças estatisticamente significativas entre os grupos estudados.Em relação as variáveis espirométricas pré e pós broncodilatador, o Grupo I não apresentou nenhuma diferença. Já o Grupo II após broncodilatador apresentou maiores valores de VEF1% (p=0,014), de VEF1%/CVF% (p=0,025) e de FEF25-75% (p=0,001) que foram estatisticamente significativos. Houve redução nos valores do Slope 2 (p=0,004 e p=0,025) no Grupo I e no Grupo II respectivamente após broncodilatador. Conclusões: Os pacientes sororeversores (Grupo I), apresentaram valores espirométricos de VEF1, FEF 25-75 menores que os seus controles (Grupo III), porém não apresentaram diferenças significativas quando comparados aos pacientes com HIV (Grupo II). Portanto os pacientes filhos de mães infectadas pelo vírus HIV apresentaram volumes e fluxos alterados que podem ser secundários ao menor calibre da via aérea, mas dentro do padrão da normalidade. Os resultados capnográficos não mostraram diferenças estatisticamente significativas entre os grupos estudados / Abstract: The intra uterine exposure to human immunodeficiency virus (HIV) can lead to corioaminionite and a lung development deficit. There is increasing evidence that many changes may persist until late childhood or even adulthood. Objective: To evaluate pulmonary function in children and adolescents vertically HIV-exposed and not infected by Spirometry and Volumetric Capnography (VC), and compare the results with groups of healthy children and adolescents and vertically HIV-infected. Patients and methods: Observational and analytical transversal cohort study, with children and adolescents aged 6-19 years of both genders who were vertically exposed to HIV and followed at Immunodeficiency Pediatric Clinical Hospital of the State University of Campinas, and a control group of healthy children. All subjects underwent spirometry and VC. Three comparisons were made: uninfected HIV children born of HIV-infected mothers (Group I) vs patients infected by the HIV virus without pulmonary disease (Group II) vs healthy subjects (Group III). The tests used were: Fisher's exact test, Mann-Whitney test, Wilcoxon test, Kruskal-Wallis test and the Test of Nonparametric Multiple Comparisons (TMC). In all cases we adopted the significance level of 5% (? = 0.005). Results: We included 122 individuals. Group I contained 24 patients; Group II contained 21 and Group III, 77 patients. The age was higher in Group II (14.9 ± 3.1) when compared to Group I and Group III respectively (9.7 ± 2.3, 11.2 ± 1.7) p <0.001. The z-score of height and BMI were significantly lower in Group II (-0.72 ± 0.99, -0.50 ± 1.14) when compared to Group I (0.65 ± 1.05; 0, 56 ± 1.34) p <0.001; p = 0,002. As variables FEV1% (p = 0.007) and FEF 25-75% (p = 0.007) in Group I were lower with statistically significant differences when compared to Group III. Capnographic results showed no statistically significant differences between studied groups. In comparison with the pre and post bronchodilator spirometry variables, Group I showed no difference. Group II showed higher FEV1% (p = 0.014), FEV1/FVC% (p = 0.025) and FEF 25-75% values (p = 0.001) which were statistically significant after bronchodilator. There was a reduction in slope 2 values (p = 0.004 and p = 0.025) in Group I and Group II respectively. Conclusions: The seroreverter patients (Group I) had spirometry FEV1, FEF 25-75 lower than their controls (Group III), but not significantly different when compared to HIV-patients (Group II). Therefore patients born to mothers infected with HIV had altered volumes and flows that may be secondary to the lower airway diameter, but within the normality standard. Capnographic results showed no statistically significant differences between the studied groups, because the patients are not sick and they do not show changes in the ventilation-perfusion relationship in the lung / Mestrado / Saude da Criança e do Adolescente / Mestra em Ciências

As alterações genéticas mais frequentes em câncer de pulmão são mutações pontuais que ativam o oncogene KRAS. Embora estas mutações estejam causalmente relacionadas à oncogênese, até hoje diferentes abordagens para inibir as proteínas RAS diretamente não obtiveram sucesso. Portanto, para que melhores alvos terapêuticos para o câncer de pulmão se tornem disponíveis é necessário identificar os mecanismos moleculares ativados por KRAS que estão diretamente envolvidos com a aquisição de propriedades malignas importantes, como o desenvolvimento e a manutenção de um fenótipo tronco-tumoral pelas células iniciadoras de tumor (CITs). CITs, também conhecidas como células tronco-tumorais, são definidas como uma subpopulação de células tumorais capazes de se autorrenovar, iniciar a formação de tumores e sustentar o crescimento tumoral. O desenvolvimento de estratégias terapêuticas dirigidas a estas células é imprescindível para melhorar a eficácia da terapia antitumoral. Uma vez que KRAS está associada a manutenção de um fenótipo tronco-tumoral e ativa o fator de transcrição NF-kB através da quinase IKK&#946; para promover a tumorigênese pulmonar, nós hipotetizamos que a quinase IKK&#946; contribui para o fenótipo tronco-tumoral induzido por KRAS em câncer de pulmão. Nós utilizamos ensaios de formação de tumoresferas para enriquecer e avaliar a função de CITs das linhagens pulmonares positivas para KRAS A549 e H358. As células A549 e H358 formaram tumoresferas em cultura de baixa aderência e, quando comparadas às células derivadas da cultura aderente, as células oriundas da cultura de tumoresferas apresentaram maior crescimento clonogênico, maior expressão de genes associados ao fenótipo tronco por qPCR e maior atividade da quinase IKK&#946;. A inibição da atividade de IKK&#946; através de um inibidor farmacológico altamente específico (Composto A) diminuiu levemente a proliferação de células A549 e H358, sem resultar em morte celular significativa. Entretanto, a inibição da atividade ou da expressão de IKK&#946; por interferência de RNA reduziu a expressão de genes associados ao fenótipo tronco e diminuiu a formação de tumoresferas. A inibição da expressão de IKK&#946; em células A549 reduziu também a capacidade de autorrenovação de CITs. Estes resultados sugerem que IKK&#946; desempenha um papel importante na manutenção do fenótipo tronco-tumoral de CITs pulmonares induzidas por KRAS. Em seguida, nós demonstramos que a inibição da atividade de IKK&#946; afetou preferencialmente a proliferação celular e o crescimento clonogênico de células oriundas da cultura de tumoresfera, sugerindo que IKK&#946; desempenha um papel mais importante em CITs do que em células derivadas da cultura aderente. A análise por citometria de fluxo identificou que células derivadas da cultura de tumoresfera apresentam um enriquecimento para células CD24+ na linhagem A549 e células CD44+ na linhagem H358, sugerindo que estes possam ser marcadores promissores para purificação de CITs nestas linhagens. Adicionalmente, demonstramos, por ensaios de wound-healing de células A549 e H358, que a inibição da atividade de IKK&#946; reduziu a migração celular, uma outra uma propriedade aumentada em CITs. Além disso, mostramos que a atividade da quinase IKK&#946; em células A549 e H358 não depende das vias da MAPK ou PI3K/Akt. Interessantemente, a inibição combinada de IKK (um efetor downstream de KRAS) e de EGFR/ERRB2 (reguladores upstream de KRAS que ativam as vias MAPK e PI3K/Akt) reduziu de forma aditiva a formação de tumoresferas, proliferação e migração celular. Quando avaliados em conjunto, nossos resultados sugerem que a quinase IKK&#946; desempenha um papel importante na biologia de CITs pulmonares portadoras de KRAS oncogênica e que a inibição desta quinase sozinha ou em combinação com a inibição de outras vias pode representar uma estratégia terapêutica promissora a ser explorada para reduzir a recidiva e metástase no câncer de pulmão induzido por KRAS. / The most frequent genetic alterations in lung cancer are point mutations that activate the KRAS oncogene. Although these mutations are causally related to oncogenesis, different approaches to inhibit RAS proteins directly have not been successful to date. Therefore, for better therapeutic targets for lung cancer to become available, it is necessary to identify the molecular mechanisms activated by KRAS that are directly involved with important malignant features, such as the development and maintenance of a cancer stem-like phenotype by the tumour-initiating cells (TICs). TICs, also known as cancer stem cells, are defined as a subpopulation of tumour cells able to self-renew, promote tumour initiation, and sustain tumour growth. The development of therapeutic strategies to target these cells is imperative to improve the efficacy of antitumor therapy. Since KRAS is associated with the maintenance of a cancer stem-like phenotype and activates the transcription factor NF-kB through the IKK&#946; kinase to promote lung tumourigenesis, we hypothesised that IKK&#946; kinase contributes to the cancer stem-like phenotype induced by KRAS in lung cancer. We used tumoursphere formation assays to enrich and evaluate the function of TICs of KRAS-mutant cell lines A549 and H358. A549 and H358 cells formed tumourspheres in low adhesion culture and, when compared to cells grown in adherent culture, sphere-derived cells displayed increased clonogenic growth, higher expression of stemness genes by qPCR, and increased IKK&#946; kinase activity . Inhibition of IKK&#946; activity through a highly specific pharmacological inhibitor (Compound A) slightly decreased proliferation of A549 and H358 cells without inducing significant cell death. On the other hand, inhibition of IKK&#946; activity or expression by RNA interference reduced the expression of stemness genes and decreased tumoursphere formation. Inhibition of IKK&#946; expression in A549 cells also reduced TICs self-renewal . These results suggest that IKK&#946; plays an important role in maintaining the cancer stem-like phenotype of KRAS-driven lung TICs. Next, we demonstrated that IKK&#946; inhibition preferentially reduced cell proliferation and clonogenic growth of sphere-derived cells, suggesting that IKK&#946; plays a more important role in TICs than in adherent culture-derived cells. Flow cytometry analysis identified that sphere-derived cells display an enrichment for the surface marker CD24 in A549 cells and CD44 in H358 cells, indicating that these could be promising markers for the purification of TICs in these cell lines. Furthermore, we have shown by wound-healing assays of A549 and H358 cells that IKK&#946; inhibition reduced cell migration , another feature increased in TICs. In addition, we have shown that IKK&#946; activity in A549 and H358 cells does not depend on the MAPK or PI3K/Akt pathways. Interestingly, combined inhibition of IKK&#946; (a downstream effector of KRAS) and EGFR/ERBB2 (upstream regulators of KRAS that activate the MAPK and PI3K/Akt pathways) additively reduced tumoursphere formation, cell proliferation and migration. Taken together, our results suggest that IKK&#946; kinase plays an important role in the biology of KRAS-driven lung TICs, and that inhibition of this kinase alone or in combination with inhibition of other signalling pathways may represent a promising therapeutic strategy to be explored in order to reduce tumour recurrence and metastasis in KRAS-driven lung cancer.

Asma alérgica é uma inflamação pulmonar crônica mediada por células Th2. A Hipótese da Higiene é a teoria aceita para explicar o aumento das alergias nas últimas décadas e preconiza que a menor exposição dos indivíduos a componentes microbianos prejudica a geração mecanismos imunorregulatórios. Nosso estudo abordou a modulação da resposta alérgica pulmonar induzida por ovalbumina, por cepas de bacilo Calmette-Guérin recombinantes (rBCG) que expressam fragmentos de toxinas bacterianas. Observamos que dependendo do antígeno heterólogo expresso, a imunização intranasal com rBCG pode levar tanto a supressão como a exacerbação da resposta alérgica pulmonar. Demonstramos que tanto em um contexto profilático quanto terapêutico, rBCG é capaz de suprimir os parâmetros alérgicos, e a supressão não envolve o recrutamento de células T regulatórias, é um fenômeno local, está associada a maior produção de IFN-g do que IL-4 e é dependente de IL-12. Estes dados sugerem que a infecção pulmonar por rBCG gera um milieu capaz de bloquear a migração de células Th2 inflamatórias. / Allergic asthma is an atopic disorder mediated by Th2 cells. The Hygiene Hypothesis is the accepted theory to explain the increasing in allergy in recent deacades. It states that modern health care and hygiene practices have led to a reduced exposure to microorganisms components which impairs the generation of immunoregulatory mechanisms. The present study analysed how the intranasal infection with recombinant bacillus Calmette-Guérin (rBCG) strains expressing fragments of bacterial toxins could modulate an allergic pulmonary inflammation induced by ovalbumin. We demonstrated that the rBCG strains could supress or exacerbate the allergic inflammation depending on the expressed heterologous antigen. We analysed the effect of the mycobacterial infection in a prophylactic and in a therapeutical contexts, and we have identified that for both situations the of supression allergic features does not involve the recruitment of regulatory T cells to the lungs, is a local phenomena, is associated with an increased production of IFN-g, and is an IL-12 dependent mechanism. Taken togheter, this data suggest that the rBCG pulmonary infection generates a milieu capable to supress the chemotaxis for Th2 cells, which suppress the establishment of the allergic inflammation in the lungs.

Submitted by Adriana Martinez (amartinez@unoeste.br) on 2018-03-22T23:46:19Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Gisele.pdf: 878985 bytes, checksum: f385fcc7c0eb7a372c30d07c4ab76a10 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-22T23:46:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Gisele.pdf: 878985 bytes, checksum: f385fcc7c0eb7a372c30d07c4ab76a10 (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / Introduction: 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid, is one of the most common and ancient herbicides in the world, presents toxicological classification I (extremely toxic) and classification of environmental hazard potential III (dangerous to the environment). Due to the large area of contact between the surface of the respiratory system and the environment, air quality directly interferes with respiratory health, causing an inflammatory response. Objective: To evaluate the histology of the pulmonary epithelium of mice submitted to acute exposure to the 2,4-D herbicide, using histochemical methods. Methods: 60 Swiss male males, divided into four groups, were subjected to acute exposure to the herbicide through two boxes connected to two ultrasonic nebulizers, which sprayed the herbicide with concentration and time recommended for each group. The animals were then euthanized and their lungs removed for analysis. Prism® version 5.6 was used to analyze the results. Normality was determined by the Shapiro-wilk test, to analyze the results of the total, marked, light and body weight areas. Anova was used for two factors (time and concentration), followed by Bonferroni a posteriori test. The values that presented p less than 5% (p <0.05) were considered significant. Results: The analysis of the marked area showed a significant change, more evident in the 48 hour exposure, the most important alteration being found, since the other analyzes did not present significant alteration in any aspect.Conclusion: The present study did not provide evidence of any acute adverse effects of 2,4-D in experimental models, but this result may be related to insufficient exposure time, since the effects on the lower respiratory tract, demonstrated in other studies, occurred in chronically exposed individuals. / Introdução: O ácido 2,4 diclorofenoxiacético, é um dos herbicidas mais comuns e antigos do mundo, apresenta classificação toxicológica I (extremamente tóxico) e classificação do potencial de periculosidade ambiental III (perigoso ao meio ambiente). Devido à grande área de contato entre a superfície do sistema respiratório e o meio ambiente, a qualidade do ar interfere diretamente na saúde respiratória, provocando uma resposta inflamatória. Objetivo: Avaliar a histologia do epitélio pulmonar de camundongos submetidos à exposição aguda ao herbicida 2,4-D, utilizando-se de métodos histoquímicos. Metodologia: Foram utilizados 60 camundongos Swiss adultos machos, divididos em quatro grupos, que sofreram exposição aguda ao herbicida através de duas caixas ligadas a dois nebulizadores ultrassônicos, que pulverizaram o herbicida com concentração e tempo preconizados para cada grupo. Os animais foram então eutanasiados e seus pulmões retirados para análise. Para a análise dos resultados foi utilizado o programa Prism® versão 5.6. A normalidade foi determinada pelo teste de Shapiro-wilk, para análise dos resultados das áreas total, marcada, da luz e do peso corporal. Foi utilizada Anova de dois fatores (tempo e concentração), seguida de teste a posteriori de Bonferroni. Foram considerados significantes os valores que apresentaram p menor que 5% (p<0,05). Resultados: A análise da área marcada apresentou alteração significativa, mais evidente na exposição de 48 horas, sendo a alteração mais importante encontrada, já que as outras análises não apresentaram alteração significativa em nenhum aspecto. Conclusão: O presente estudo não forneceu evidência de qualquer efeito adverso agudo de 2,4-D em modelos experimentais, porém, esse resultado pode estar relacionado ao tempo insuficiente da exposição, visto que os efeitos no trato respiratório inferior, demonstrado em outros estudos, ocorreu em indivíduos expostos de forma crônica.