Orientador: Otavio Augusto Camara Clark / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T13:39:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sasse_AndreDeeke_D.pdf: 24031684 bytes, checksum: 2accebd159f3ca01d70c9229968723b0 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: RAZÕES: O melanoma maligno é o mais agressivo de todos os cânceres de pele, e sua incidência vem continuamente aumentando no mundo. O principal tratamento é a excisão cirúrgica da lesão primária, com intenção curativa em estágios iniciais. Os pacientes que apresentam doença metastática são considerados incuráveis, pois o melanoma é considerado refratário à maioria das terapias sistêmicas. Existem vários estudos prospectivos randomizados comparando diferentes esquemas de tratamento. Alguns estudos sugerem maior eficácia antitumoral combinando quimioterapia com imunoterapia, mas não existem evidências definitivas, pois comparações paralelas randoinizadas com tratamento com apenas quimioterapia apresentam resultados controversos. A conduta médica atual é baseada na opinião de especialistas, que determina qual é o tratamento considerado padrão. Frente a resultados controversos derivados de estudos randomizados, uma revisão sistemática da literatura faz-se necessária para determinar qual das abordagens terapêuticas apresenta ganhos reais para o paciente OBJETIVOS: Comparar os efeitos da quimioterapia associada à imunoterapia (quimioimunoterapia) com os da quimioterapia isolada em pacientes com melanoma maligno metastático. MÉTODOS: Revisão sistemática da literatura com meta-análise. Estudos clínicos randomizados no tratamento do melanoma metastático foram identificados, através de busca nas bases de dados Cochrane Central Register of Controlled Trials (CENTRAL), MEDLINE, EMBASE, e LILACS. Referências de artigos encontrados, resumos de apresentações em congressos e bases de dados de estudos em andamento também foram utilizados para localizar estudos pertinentes. Critérios de inclusão: estudos controlados randomizados que compararam o uso de quimioterapia com o de quimioimunoterapia no tratamento de pacientes com qualquer idade, portadores de melanoma metastático. Dois revisores extraíram independentemente os dados dos artigos utilizando formulários de extração de dados. Quando possível, para cada desfecho clínico foi feita meta-análise com os dados extraídos, com o fim de calcular o efeito dos tratamentos entre os estudos. Os resultados da meta-análise são expressos com Risco Relativo (RR), Diferença entre os Riscos (DR) e Hazard Ratio (HR), com o correspondente intervalo de confiança (1C) de 95% Os desfechos clínicos avaliados foram sobrevida global, sobrevida em 1, 2 e 5 anos, taxas de resposta, sobrevida livre de progressão, toxicidade e qualidade de vida. RESULTADOS: No total, aproximadamente 1050 citações foram analisadas. 26 estudos foram inicialmente identificados Destes, 18 foram incluídos. A meta-análise dos dados mostra evidência de aumento das taxas de resposta objetiva [RR=1,40, IC95% 1,20 a 1,63; p<0,0001] em pacientes tratados com quimioimunoterapia, em relação aos tratados com quimioterapia. No entanto, o impacto deste aumento nas taxas de resposta não se traduziu em benefício em sobrevida [HR=0,89; IC95% 0,72 a 1,11; p=0,31]. Adicionalmente, há maior toxicidade hematológica e não-hematológica nos pacientes tratados com quimioimunoterapia, o que demonstra danos em relação ao benefício de aumento nas taxas de resposta. CONCLUSÃO: Há evidências de que de que a utilização de quimioimunoterapia não aumenta a sobrevida em pacientes com melanoma metastático. O aumento nas taxas de resposta não justifica a combinação de quimioterapia e imunoterapia fora do ambiente de estudos clínicos / Abstract: BACKGROUND: Malignant melanoma, the most aggressive of all skin cancers, is in increasing incidence throughout the world. Surgery remains the cornerstone of curative treatment in earlier stages. Metastatic disease is incurable in most patients, as melanoma is reputed as refractory to most systemic treatments. The combination of chemotherapy with immunotherapy has been reported to improve treatment results, but it is still unclear whether evidence exists to support this choice, compared with chemotherapy alone OBJECTIVES: To review and to compare the effects of therapy with chemotherapy plus immunotherapy (chemoimmunotherapy) versus chemotherapy alone in patients with metastatic malignant melanoma. METHODS: Systematic review, with meta-analysis. andomized controlled trials in the treatment of metastatic melanoma were identified. We searched the Cochrane Central Register of Controlled Trials (CENTRAL), MEDLINE, EMBASE, and LILACS. References, conference proceedings, and databases of ongoing trials were also used to locate trials. We included all randomized controlled trials that compared the use of chemotherapy versus chemoimmunotherapy in the treatment of people with any age, diagnosed with metastatic melanoma. Two reviewers independently extracted the data from the articles using data extraction forms. Whenever possible, a meta-analysis was performed with the data extracted, in order to calculate a weighted treatment effect across trials For binary endpoints the risk ratio (RR) or the risk difference (RD) was calculated, and for time-to-event data, we calculated Hazard Ratio (HR), both with 95% confidence intervals. The endpoints evaluated were overall survival, one-, two-, and five- year survival rates, response rates, progression-free survival, treatment-related toxicity and quality of life measures. RESULTS: Approximately 1050 citations were scanned. We initially identified 26 studies. Of these, 18 studies were included This systematic review showed evidence of an increase of objective response rates [RR=1.40; 95%CI 1.20 to 1.63; p0.0001] in patients treated with chemoimmunotherapy, in comparison with patients treated with chemotherapy Nevertheless, the impact of these increased response rates in patients was not translated in a survival benefit [HR=0 89; 95%CI 0.72 to 1.11; p=0.31]. Additionally, we found increased hematological and non-hematological toxicities in patients treated with chemoimmunotherapy, which bring harms to the subjective vantage of increased responses. CONCLUSION: There is evidence that the use of chemoimmunotherapy does not increase survival in patients with metastatic melanoma. The improve in response rates did not justify the use of combination of immunotherapy and chemotherapy in chemoimmunotherapy regimens outside of clinical trials / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Mario Jose Abdalla Saad / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T23:49:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lemos_ChristineMarinhode_M.pdf: 1925163 bytes, checksum: 3618c226fce7bf7ab354e89c68dcfa14 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Estudos recentes demonstraram que tratamentos prolongados com drogas inibidoras da atividade tirosina quinase (TKI) poderiam agir favoravelmente não só controlando crescimento e replicação celular, como também funções fisiológicas responsáveis por manter a homeostase da glicose. Porém, os efeitos diretos de PD 153035, um TKI, na regulação das etapas iniciais da ação da insulina não são conhecidos. A insulina, ao se ligar à subunidade a de seu receptor heterotetramérico, dá início a uma série de ações imediatas e tardias, metabólicas e promotoras de crescimento .Tais eventos ocorrem através da estimulação da subunidade ß transmembrana do receptor, que autofosforila e ativa a fosforilação de substratos endógenos intracelulares, conhecidos como substratos do receptor de insulina ou IRSs. Os principais substratos do receptor de insulina são o IRS-1 e IRS-2, que quando fosforilados em tirosina se ligam e ativam proteínas com porção SH2, como a PI 3-quinase. A ativação destas proteínas desencadeia a ativação de suas serinas-quinases importantes que são a AKT e as ERKs (1/2), que são essenciais, respectivamente, para os efeitos metabólicos e de controle gênico do homônio. No presente estudo investigamos o efeito do tratamento com PD 153035, por 7 dias, na sensibilidade e sinalização da insulina em fígado, musculo e tecido adiposo de ratos Wistar. Foi investigado o grau de fosforilação em tirosina do receptor de insulina, dos substratos 1 e 2 do receptor ( IRS-1 e IRS-2 ), a associação deles com a enzima PI 3-quinase, o grau de fosforilação em serina/treonina da AKT, a fosforilação das ERKs (1/2), da p70s6k, da AMPK, da JNK e I?Ba nos três tecidos. Nenhuma diferença nos níveis glicêmicos foi observado durante o GTT entre os grupos tratado com PD 153035 e controle. As taxas de desaparecimento de glicose plasmática estavam altas nos animais tratados. No fígado de ratos tratados com PD 153035, observamos um aumento da fosforilação em tirosina do IR, IRS-1 e do IRS-2 e um aumento da associação desses substratos com a PI 3-quinase. Porém uma diminuição significativa da fosforilação da AKT e da p70s6k foi observada, sem alteração no grau de fosforilação das ERKS (1/2). Não foi observado diferença significativa no grau de fosforilação da JNK, porém os animais tratados apresentaram uma redução significativa nos níveis de I?Ba . O grau de fosforilação da AMPK mostrou-se aumentado nos animais tratados. Quando estudamos o tecido muscular, após estímulo agudo com insulina observamos uma diminuição significativa no grau de fosforilação do receptor de insulina nos animais tratados com PD 153035. Entretanto, nesses animais, pudemos observar após estímulo agudo com insulina, que a fosforilção em tirosina do IRS-1 aumentou significativamente. O aumento da fosforilação do IRS-1 foi acompanhada pelo aumento na associação IRS-1/ PI 3-quinase e pelo aumento no grau de fosforilação da AKT e da p70s6k. a. O grau de fosforilação da AMPK mostrou-se aumentado nos animais tratados. Não foi observada alteração no grau de fosforilação das ERKs (1/2) neste tecido. Foi observado uma redução do grau de fosforilação das serinas quinases JNK e I??a no músculo dos animais tratados. Os animais que receberam tratamento crônico com PD 153035 por 7 dias apresentaram uma redução da adiposidade visceral, bem como uma perda de peso em relação ao grupo controle. Observamos nesses animais uma redução significativa no grau de fosforilação do IR e do IRS-1 no tecido adiposo. A associação IRS-1/PI 3-quinase mostrou uma redução significativa. A fosforilação da AKT e da P70s6k mostrou-se significativamente reduzida nos animais tratados. Entretanto observamos um aumento significativo da fosforilação do IRS-2 após estímulo insulínico agudo, porém acompanhado pela redução significativa na associação IRS-2/PI 3-quinase. Não observamos diferença nos níveis de fosforilação das ERKs. Observamos que o grau de fosforilação da proteína AMPK aumentou significativamente no ratos que receberam tratamento com PD 153035. Foi observado uma redução significativa do grau de fosforilação da JNK e I??a no tecido adiposo dos animais tratados. Sumariamente, o tratamento com PD 153035 por 7 dias aumentou a fosforilação em tirosina do IR, IRS-1 e IRS-2 no fígado, apesar da fosforilação da AKT apresentar-se reduzida neste tecido. No músculo dos animais tratados com PD 153035 observamos que a droga melhora a sinalização da insulina, provavelmente pela redução da atividade das serinas quinases JNK, IKKß e mTOR. No tecido adiposo a droga induziu resistência à insulina, acompanhada de redução no ganho de peso e redução da adiposidade visceral, possivelmente pelo aumento da secreção de adiponectina pelos adipócitos. Em conclusão, os resultados do nosso estudo demonstram que o tratamento com PD 153035 aumentou a sensibilidade à insulina, por aumento da adiponectina, aumento da AMPK em fígado, músculo e adiposo, e aumentada via IRS/PI3K/AKT em músculo / Abstract: It has been recently demonstrated that long-term treatment with some of tyrosine kinase inhibitor (TKI) drugs, might favorably act at steps in controlling not only cell growth and replication, but also physiological functions responsible for maintaining glucose homeostasis. However, the direct effects of PD 153035, a TKI, in the regulation of the early steps of insulin action are not known. Insulin initiates its growth and metabolic promoting effects by biding to its receptor at the plasma membrane, which has tyrosine-kinase activity, and is able to autophosphorylates and phosphorylates cytoplasmatic proteins called insulin receptor substrates (IRSs). The main substrates of insulin receptor are IRS-1 and IRS-2, which when phosphorylated in tyrosine bind and activate several proteins, including phosphatidylinositol (PI) 3-kinase. These initial steps lead to the activation of two serine/threonine kinases ¿ AKT and ERK family (1/2) of MAPK. In the present study, we investigated the effect of treatment with PD 153035, for 7 days, on insulin sensitivity and insulin signaling in liver, muscle and adipose tissue of Wistar rats. It was investigated the tyrosine phosphorylation of IR, IRS-1 and IRS-2, their association with PI 3-kinase, and Akt serine/threonie phosphorylation , ERKs (1/2) phosphorylation, p70s6k, AMPK, JNK and ???a phosphorylation, in the three tissues. No differences in fasting plasma glucose levels were observed in animals treated with PD 153035. Plasma glucose disappearance rates were higher in treated animals In the liver of rats treated with PD 153035, we observed an increased IR, IRS-1 and IRS-2 tyrosine phosphorilation and an increased association of these substracs with PI 3-quinase. However a significant decrease of AKT and of the p70s6k phosphorylation was observed too, without alteration in ERKs phosphorylation levels (1/2). No significant difference was observed in JNk phosphorylation levels, however ??? showed a reduced phosphorylation in the liver of these animals. AMPK showed a significant increased phosphorylation in treated animals. When we studied muscle, insulin-induced IR tyrosine phosphorylation showed significantly reduced in these animals, however treating rats with PD153035 significantly increased the insulin-induced IRS-1 phosphorylation in the muscle. The increased phosphorylation of IRS-1 was accompanied by increase in IRS-1/PI3-kinase association and Akt and p70s6k phosphorylation were higher in treated animals after insulin stimulation. AMPK showed a significant increased phosphorylation in treated animals. There was no significant changes in ERKs (/2) phosphorylation in this tissue. Reduced phosphorylation of serine-kinases as c-jun N terminal (Jnk) and I?kß was observed. The animals that received chronic treatment with PD 153035 for 7 days had presented a reduction in visceral fat mass, as well as a loss of weight, regarding the control group We observed in these animals a significant decreased IR and IRS-1 tyrosine phosphorylation in the adipose tissue. The association IRS-1/PI3-kinase showed a significant reduction. AKT and P70s6K phosphorylation showed significantly decreased in treated animals. However we observe a significant increased phosphorylarion of insulin-induced IRS-2 phosphorylation, but the association IRS-2/PI 3-kinase showed a significant reduction. We did not observe any difference in phosphorylation levels of ERKs (1/ 2). AMPK phosphorylarion increased significantly in animals that received treatment with PD 153035. Reduced phosphorylation of JNK and Ikkßa was observed in adipose tissue of treated animals. In summary, our results demonstrated that in 7 days of treatment with PD 153035 increased tyrosine phosphorylation of IR/IRS-1/IRS-2 in the liver were observed, in spite of AKT phosphorylation had decreased in this tissue. In muscle of animals treated with PD 153035 we observed that the drug had improved the insulin signalling, probably by reduction of the serine kinase activity JNK, ???ß and mTOR. In the adipose tissue, the drug induced insulin resistance, accompanied of visceral fat mass reduction as well as a loss of weight, probably due to an increased adiponectin secretion by fat cels. In conclusion, the results of our study demonstrate that the treatment with PD 153035 increased the insulin sensibility, by increased levels of adiponectin, increased AMPK in liver, muscle and adipose tissue, and increased IRS/PI3K/AKT pathway in muscle / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Considerando o potencial de morbidade das complicações orais em pacientes com leucemia, procurou-se avaliar as alterações clinicas e microbiológicas da mucosa, em crianças com LLA. na faixa etária de O a 15 OOos, submetidas a quimioterapia antineoplásica e ao uso profilático do gluconato de clorexidina a 0,12%, durante dez dias, o qual era administrado em todas as fases do tratamento quimioterápico. A coleta para o estudo microbiológico foi obtida, preferencialmente, na fase de intensificação, ao término do tratamento profilático. A amostra foi constituida por 20 crianças, na qual evidenciou-se em nivel clinico, uma freqüência reduzida de mucosite, com 8 ocorrências (40%) apenas. No exame microbiológico, constatou-se a presença de reduzido número de microrganismos patogênicos, como Staphylococcus coagulase-negativo (40%), Klebsiella pneumoniae (5%), Escherichia coli-enteropatogênica (15%), Stenotrophomonas maltophilia (5%) e Candida albicans (35%). Diante dos resultados, sugeriu-se que o uso do referido antisséptico contribuiu para a reduzida ocorrência de mucosite, no entanto, não foi possivel estabelecer correlação entre os microrganimos isolados e o desenvolvimento da mucosite. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT: Regarding the morbidity potential of oral complications in patients with leukemia, it evaluated the clínical and microbiologic changes of oral mucosal in children with LLA, with age range of O to 15 years old, undergone the chemotherapy antineoplastic and for the use prophylactic of chlorhexidine gluconate 0,12% during ten days, that was utilized in each chemotherapy treatment stage. The collect for rnicrobiological study was obtained preferentiality in intensification stage at the end prophylatic treatment. The study grouup had 20 children, where it observed clinically decrease in frequency of mucositis, with 8 cases (40%) only. In microbiological examination observed one reduced incidence of pathogenic microorganisms with Staphylococcus coagulase- negative (40%), Klebsiella pneumoniae (5%), Escherichia coZi enteropathogenic (15%), Stenotrophomonas maltophilia (5%) e Candida albicans (35%). The findings obtained in the present trial suggest that the use of chlorhexidine gluconate 0,12% can be responsible for incidence reduced of mucositis, but it wasn t possible to make correlation between isolated pathogenic microorganisms and mucositis development.

Breast cancer is cancer that affects more women worldwide. Brazil has faced the similar rates of developed countries such as Japan. Estimates of INCA grow every year, in Sergipe for 2012 were provided 370 new cases. More than half of the drugs approved by the FDA are for oral use, which is preferred by more than 80% of patients receiving chemotherapy for various reasons. Studies have shown adherence ranging from 15-90%, this leads to not guarantee the effectiveness of treatment and increases the likelihood of cancer recurrence. Thus the present study aimed to assess adherence to chemotherapy among women diagnosed with breast cancer. Methodology: The methodological approach was divided into three stages: 1) Step exploratory or approach to the problem of the research, which was conducted a systematic review of the literature (RS) in order to check the different methodologies used to measure adherence to pharmacotherapy in cancer. Active search was performed in Medline / Pubmed, Scopus and Cinhal and Lilacs, Articles that measured adherence to pharmacotherapy in patients with oral cancer, 2) Stage of development of the measuring instrument, by means of the simplified translation and cross-cultural adaptation of the questionnaire "Cancer Patient Self-Report Questionnaire Non-Adherence" (CPSRNA) and the Morisky-Green questionnaire used to measure adherence to cancer treatment. The methodology was done with the translation, back-translation and pilot testing with 30 patients diagnosed with breast cancer, and 3) Stage field, where CPSRNA questionnaire was applied to a sample of patients diagnosed with breast cancer treatment at the Oncology Center Hospital Emergency Sergipe (HUSE). Results: In the development of RS 1089 citations were found, and after the screening process, 21 articles were included for review. Only seven articles used two or more methods. The methodology used was found in the MEMS seven articles and MPR in six articles, as sole measure to assess adherence. In the stage of development of the measuring instrument, the pilot test, it was observed that patients who considered quitting all his treatment had a score of 4.6 (± 0.5), this value was higher than those who did not consider stop treatment (score 2.6 ± 2.3). This difference was significant (ANOVA followed by the Mann- Whitney test = 7.48, p = 0.006). Similarly, the difference between the means of individuals who considered quitting part of treatment (mean score of 3.85 ± 1.77) than those who did not bother to stop their treatment (mean score of 2.65 ± 2.4), was also considered significant suggesting that those individuals have a higher probability of non-adherence to treatment. In the last article found a compliance rate of 31.85% for Morisky-Green questionnaire and family history was found in 49.1% of patients. / O câncer de mama é a neoplasia que mais acomete mulheres em todo o mundo. O Brasil tem registrado taxas semelhantes a de países desenvolvidos como o Japão. As estimativas do INCA crescem a cada ano, em Sergipe para 2012 foram previstos 370 novos casos. Mais da metade das drogas aprovadas pelo FDA são de uso oral, a qual é preferida por mais de 80% dos pacientes em uso de quimioterapia, por vários motivos. Estudos tem mostrado adesão variando de 15-90%, isto leva a não garantia da efetividade do tratamento e aumenta a probabilidade de recorrência do câncer. Deste modo o presente trabalho teve como principal objetivo avaliar a adesão ao tratamento oncológico, entre mulheres com diagnóstico de câncer de mama. Metodologia: O percurso metodológico foi dividido em três etapas: 1) Etapa exploratória ou de aproximação ao problema da pesquisa, onde foi realizado uma revisão sistemática da literatura (RS) com o intuito de verificar as diversas metodologias usadas para mensurar a adesão a farmacoterapia em câncer. Foi realizada a busca ativa nas bases de dados Medline/Pubmed, Scopus e Cinhal e Lilacs, dos artigos que mensuraram a adesão a farmacoterapia oral de pacientes com câncer; 2) Etapa de desenvolvimento do instrumento de medida, por intermédio do procedimento simplificado de tradução e adaptação transcultural do questionário Cancer Patient Self-Report Non-Adherence Questionnaire (CPSRNA) e o questionário de Morisky e Green utilizados para mensurar adesão ao tratamento do câncer. A metodologia foi feita com a tradução, retro-tradução e um teste piloto com 30 pacientes com diagnóstico de câncer de mama; e 3) Etapa de campo, onde foi aplicado o questionário CPSRNA a uma amostra de pacientes com diagnóstico de câncer de mama, em tratamento no Centro de Oncologia do Hospital de Urgência de Sergipe (HUSE). Resultados: No desenvolvimento da RS foram encontrados 1089 citações, sendo que após o processo de triagem, foram incluídos 21 artigos para revisão. Apenas sete artigos usaram duas ou mais metodologias. A metodologia mais utilizada foi o Sistema de monitoramento microeletrônico (MEMS) encontrada em sete artigos e Taxa de posse de medicamento (MPR) em seis artigos, como medida exclusiva para avaliar a adesão. Na etapa de desenvolvimento do instrumento de medida, no teste piloto, foi observado que os pacientes que pensaram em parar todo seu tratamento tiveram um escore de 4,6(± 0,5), este valor foi maior que as pessoas que não pensaram em parar o tratamento (escore de 2,6 ± 2,3). Esta diferença foi considerada significativa (ANOVA seguida do teste de Mann-Whitney = 7,48, p=0,006). Do mesmo modo, a diferença entre as médias dos indivíduos que pensaram em parar parte do tratamento (escore médio de 3,85 ± 1,77), em relação as pessoas que não pensaram em parar seu tratamento (escore médio de 2,65 ± 2,4), também foi considerada significativa sugerindo que aqueles individuos têm uma maior probabilidade de não-adesão ao tratamento. No último artigo foi encontrado a taxa de adesão de 31,85% pelo questionário de Morisky e Green e o histórico familiar foi encontrado em 49,1% dos pacientes.

Orientador: Ronei Jesus Poppi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-13T21:27:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Trevisan_MarcelloGarcia_D.pdf: 3921294 bytes, checksum: 59fe442f53af8cb6eaeb8166b7b6980f (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Esta tese tem como objetivo desenvolver um conjunto de metodologias que incorporem a utilização da espectroscopia na região do infravermelho médio/próximo com métodos de estatística multivariada (quimiometria) em aplicações com enfoque em Química Analítica de Processos (QAP). Para atingir estes objetivos, este trabalho conta com um capítulo introdutório e três aplicações propriamente ditas. A introdução (capítulo 1) tem como finalidade divulgar a importância da QAP no âmbito acadêmico e indutrial, além de estabelecer algumas terminologias que serão discutidas nos capítulos posteriores. A primeira aplicação deste trabalho envolve o monitoramento de uma reação de biotransformação que foi acompanhada por infravermelho médio e por cromatografia gasosa, sem etapas de extração ou pré-concentração, permitindo o desenvolvimento de um modelo multivariado capaz de fazer a previsão da concentração dos componentes analisados ao longo do tempo. A segunda e terceira aplicações se referem ao monitoramento espectroscópico da reação de transesterificação do óleo de soja na região do infravermelho médio e próximo, respectivamente. Neste segundo trabalho, foi utilizado um acessório de reflectância total atenuada para monitorar a transesterificação. Os resultados foram comparados com aqueles obtidos por RMN H, permitindo a construção de um modelo multivariado que se mostrou robusto para descrever a variação da concentração intra e extra bateladas, por meio de uma correção efetuada pela 'análise de fatores evolucionários¿ (EFA). Na última aplicação, um conjunto maior de bateladas reacionais foi obtido, incorporando-se bateladas consideradas normais e outras com falhas, monitorando-se no infravermelho próximo. Construindo-se o modelo com as bateladas sob-controle, foi possível obter um modelo matemático que permitiu prever a variação da concentração do rendimento intra e extra batelada, além de identificar as falhas ocorridas através da construção de cartas multivariadas de controle. Estes resultados foram avaliados utilizando dois modelos diferentes, propostos pela estatística multivariada para controle de processos / Abstract: The goal of this thesis is to develop a set of research works with a combination of infrared spectroscopy and multivariate statistical techniques (chemometrics) for applications in the Process Analytical Technology (PAT). To reach the goal, this work has an introductory chapter and three applications. The introduction (Chapter 1) contributed to the scientific divulgation of the importance of PAT in the academic and manufactures fields and also had the definition of some terminologies used in the forward chapters. The first application is about the monitoring of a bioreaction based on biotransformation with yeast by middle infrared spectroscopy and by GC-MS, enabling the development of a multivariate model based on Partial Least Squares (PLS). This application was carried out without extraction steps and pre-concentration processes. The second and the third applications consist of a soy bean oil transesterification reaction monitored by middle and near infrared spectroscopy, respectively. In the second application, an attenuated total reflectance (ATR) accessory was used to perform the reaction monitoring. The reaction was also monitored by H NMR, enabling the construction of a robust multivariate model to describe the variation in the analyte concentration intra and extra reaction batches, throughout a temporal correction by Evolving Factor Analysis (EFA). In the last application, a larger set of batches were obtained with batches under control and another ones with process fails. All the batches were monitored by near infrared spectroscopy with an Acousto-Optic Tunable Filter (AOTF). A multivariate model constructed with batches obtained under control conditions allowed a predictable model for sequential batches and also to detect fails around the batches, using the multivariate control charts. The data were evaluated using two different methods proposed to Multivariate Statistical Process Control (MSPC) and compared each other / Doutorado / Quimica Analitica / Doutor em Ciências

Orientador:Selma Giorgio / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-09T03:42:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ayres_DianaCopi_M.pdf: 1836758 bytes, checksum: 420db1cc65cdcfd2ad1eb3aa3a054589 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: A Leishmania amazonensis, espécie transmitida principalmente na região amazônica, está associada com a presença de lesões cutâneas locais e a quimioterapia é a principal forma de controle da doença, já que vacinas efetivas ainda necessitam ser desenvolvidas. Neste contesto, tem havido uma intensa busca por compostos sintéticos ou produtos naturais com potencial para o tratamento da leishmaniose que evite a exposição de pacientes a drogas potencialmente tóxicas. A própolis é uma resina que abelhas coletam de diferentes exsudatos de plantas. Ela apresenta muitas atividades farmacológicas e já vêm sendo utilizada para o tratamento de diversas doenças. No presente trabalho, avaliamos a atividade leishmanicida da Anfotericina B, Glucantime, Miltefosina e dos imunoestimuladores Propinobacterium acnes (P. acnes) e Polyinosinic-Polyribocytidylic acid (Poly IC) no modelo in vitro em condições de hipóxia (6% O2) e de Glucantime, própolis e P. acnes no modelo in vivo em condições de hiperóxia (100% O2 a uma pressão de 2.5 ATA). Primeiramente, nós descrevemos o efeito da Anfotericina B, Glucantime, Miltefosina, P. acnes e Poly IC em condições de normóxia e hipóxia. Em condições hipóxicas, todos os compostos foram menos efetivos em macrófagos peritoneais infectados com L. amazonensis. Avaliamos também o efeito de diferentes tratamentos no modelo in vivo de infecção com L. amazonensis na região do dorso. Nossos resultados mostram a análise dos efeitos do extrato etanólico de própolis vermelha tipificada, assim como dos géis de própolis e papaína, Glucantime e P. acnes isolados ou juntamente com o tratamento hiperbárico. Grupos de camundongos BALB/c tratados com Glucantime, Glucantime e HBO ou Glucantime e gel de própolis apresentaram uma diminuição significativa do tamanho das lesões, comparado com as lesões de animais do grupo controle. Diferenças significativas entre os tecidos das lesões de camundongos infectados com L. amazonensis e não tratados, tratados com gel de própolis, gel de papaína, Glucantime, Glucantime e gel de própolis ou P. acnes, submetidos ou não a HBO foram observadas através da análise histopatológica. Finalmente, investigamos a produção das citocinas INF-??e IL-4 por camundongos BALB/c infectados com L. amazonensis e tratados com gel de HBO, própolis, Glucantime, Glucantime e gel de própolis ou Glucantime e HBO. O único grupo de camundongos a apresentar uma produção de INF-??maior que o grupo controle foi o grupo tratado com Propaína. Não foi observada a produção de IL-4 nos grupos analisados / Abstract: L. amazonensis, a species transmitted mainly in the Amazon region, which is associated with localized cutaneous lesions and chemotherapy remains the mainstay for the control of leishmaniasis, as effective vaccines have yet to be developed. In this context, there is an intense search for potential new synthetic compounds and natural products for the treatment of leishmaniasis that avoids exposure to potentially toxic drugs. Propolis is a resinous substance that honey bees collect from different plant exsudates. It posses versatile valuable pharmacological activities and has, to date, been taken in internal and external dosage forms for the treatments of various diseases. In this work we evaluated the leishmanicidal activity of Amphotericin-B, Glucantime, Miltefosine and the immunostimulatory Propinobacterium acnes (P. acnes) e Polyinosinic-Polyribocytidylic acid (Poly IC) in vitro under hypoxic (6% O2) and of Glucantime, propolis and P. Acnes in vivo under hyperoxic conditions (100% O2 at a pressure of 2.5 ATA). First, we describe the effect of Amphotericin-B, Glucantime, Miltefosine and the immunostimulatory P. Acnes and Poly IC under normoxic and hypoxic conditions. Under hypoxic condition all compounds were less efective in L. amazonensis infected peritoneal macrophages. We also evaluated the role of different treatment in a in vivo model of rump infection, with leishmaniasis. We describe the effects of ethanolic extract of typified Brazilian red propolis sample, red propolis and papain gel, Glucantime and the imunomodulator P. acnes with or with out the HBO terapy. For this reason, we have performed a longitudinal analysis in the expanding lesions of the susceptible BALB/c mouse. BALB/c mice treated with Glucantime, a combinated therapy of Glucantime and HBO or Glucantime and propolis gel showed significant delay in lesion development and reduction in lesion parasite burdens compared with control mice. Significant differences in the tissue pathology between red propolis and papain gel, Glucantime and P. acnes with or without the HBO terapy and untreated mice were observed by the end of treatments. Finally, we investigated the citokyne production by BALB/c mouse infected with L. amazonensis and treated with propolis gel, Glucantime and HBO terapy. Propolis gel was the only treatment that increases the INF-??productin. We do not observe IL-4 production in the tested groups / Mestrado / Mestre em Parasitologia

Orientador: Kleber Gomes Franchini / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T04:16:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Deckmann_AnaCarolina_D.pdf: 7310325 bytes, checksum: 97d12a5e15b0b17033701d84779632e1 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O termo síndrome coronária aguda compreende a angina instável e o infarto do miocárdio, entidades clínicas freqüentes e potencialmente letais. Ambas as situações caracterizam-se por um desbalanço entre a oferta e a demanda de oxigênio no miocárdio, freqüentemente desencadeadas pela diminuição da perfusão resultante de estreitamento ou oclusão de artérias coronárias em conseqüência de aterosclerose. As elevadas taxas de morbidade e mortalidade destas condições são atribuídas, principalmente, à perda de massa miocárdica e instabilidades elétricas decorrentes não apenas da isquemia, mas também da reperfusão espontânea ou induzida de áreas do miocárdio isquêmico. Desta forma, é intensa a busca por estratégias e agentes farmacológicos que possam reduzir os danos miocárdicos provocados tanto pela isquemia como pela reperfusão. Evidências experimentais e algumas evidências clínicas indicam que a adenosina (Ado) administrada sistemicamente é capaz de proteger o miocárdio dos efeitos da isquemia/reperfusão. A proteção conferida pela Ado ocorre tanto aguda (1-6 horas) como tardiamente (1-3 dias) após a administração em dose única. Enquanto a proteção aguda depende da ativação de vias de sinalização que mobilizam efetores constitutivamente expressos nas células, a proteção tardia parece depender da alteração da expressão de genes envolvidos em múltiplas funções celulares. No entanto, algumas características da ação sistêmica da Ado, tais como a meia-vida curta e seus efeitos cardiovasculares (i.e. bradicardia e hipotensão), são barreiras importantes para seu uso clínico nas síndromes coronárias agudas. Uma das maneiras de evitar estes efeitos indesejáveis é utilizar agentes farmacológicos que aumentam a biodisponibilidade de Ado, como antagonistas de seus transportadores ou inibidores da adenosina quinase, uma enzima-chave no metabolismo de purinas que fosforila a adenosina em AMP através de hidrólise do ATP. Neste contexto, demonstramos anteriormente que compostos derivados de anilinoquinazolinas são inibidores de adenosina quinase e induzem a proteção miocárdica tanto aguda como tardia em modelo de coração isolado. Tendo em vista que a proteção tardia depende da expressão diferencial de genes, o presente estudo foi planejado para investigar as respostas transcricionais envolvidas na cardioproteção induzida tardiamente após a administração do composto quinazolínico líder inibidor de adenosina quinase, DMA. Para tanto, foram utilizados lâminas de oligonucleotídeos contendo as sequências referentes a todos os genes de camundongo (~35 mil genes). As sondas de RNA foram sintetizadas a partir de corações de camundongos tratados com dose única de DMA O termo síndrome coronária aguda compreende a angina instável e o infarto do miocárdio, entidades clínicas freqüentes e potencialmente letais. Ambas as situações caracterizam-se por um desbalanço entre a oferta e a demanda de oxigênio no miocárdio, freqüentemente desencadeadas pela diminuição da perfusão resultante de estreitamento ou oclusão de artérias coronárias em conseqüência de aterosclerose. As elevadas taxas de morbidade e mortalidade destas condições são atribuídas, principalmente, à perda de massa miocárdica e instabilidades elétricas decorrentes não apenas da isquemia, mas também da reperfusão espontânea ou induzida de áreas do miocárdio isquêmico. Desta forma, é intensa a busca por estratégias e agentes farmacológicos que possam reduzir os danos miocárdicos provocados tanto pela isquemia como pela reperfusão. Evidências experimentais e algumas evidências clínicas indicam que a adenosina (Ado) administrada sistemicamente é capaz de proteger o miocárdio dos efeitos da isquemia/reperfusão. A proteção conferida pela Ado ocorre tanto aguda (1-6 horas) como tardiamente (1-3 dias) após a administração em dose única. Enquanto a proteção aguda depende da ativação de vias de sinalização que mobilizam efetores constitutivamente expressos nas células, a proteção tardia parece depender da alteração da expressão de genes envolvidos em múltiplas funções celulares. No entanto, algumas características da ação sistêmica da Ado, tais como a meia-vida curta e seus efeitos cardiovasculares (i.e. bradicardia e hipotensão), são barreiras importantes para seu uso clínico nas síndromes coronárias agudas. Uma das maneiras de evitar estes efeitos indesejáveis é utilizar agentes farmacológicos que aumentam a biodisponibilidade de Ado, como antagonistas de seus transportadores ou inibidores da adenosina quinase, uma enzima-chave no metabolismo de purinas que fosforila a adenosina em AMP através de hidrólise do ATP. Neste contexto, demonstramos anteriormente que compostos derivados de anilinoquinazolinas são inibidores de adenosina quinase e induzem a proteção miocárdica tanto aguda como tardia em modelo de coração isolado. Tendo em vista que a proteção tardia depende da expressão diferencial de genes, o presente estudo foi planejado para investigar as respostas transcricionais envolvidas na cardioproteção induzida tardiamente após a administração do composto quinazolínico líder inibidor de adenosina quinase, DMA. Para tanto, foram utilizados lâminas de oligonucleotídeos contendo as sequências referentes a todos os genes de camundongo (~35 mil genes). As sondas de RNA foram sintetizadas a partir de corações de camundongos tratados com dose única de DMA / Abstract: The term acute coronary syndrome includes unstable angina and myocardial infarction, which are frequent and potentially lethal clinical entities. Both situations are characterized by an imbalance between myocardial oxygen supply and demand, often triggered by the reduced perfusion caused by narrowing or occlusion of coronary arteries due to atherosclerosis. The high morbidity and mortality rates determined by these conditions are attributed mainly to loss of myocardial and electrical instabilities, arising not only from ischemia, but also from spontaneous or induced reperfusion of the ischemic regions. Thus, there is much interest in the development of strategies and pharmacological agents able to minimize the injuries caused not only by myocardial ischemia but also by reperfusion. Experimental and clinical data indicate that systemically administered adenosine (Ado) is able to protect the myocardium from ischemia/reperfusion injuries. The protection induced by Ado occurs in two phases, an acute (1-6 hours) and a late (1-3 days) phase after a single dose administration. While acute protection depends on activation of signaling pathways that mobilize end-effectors constitutively expressed in the cells, the late protection depends on the alterations of the expression of genes involved in multiple cellular functions. However, some characteristics of the systemic action of Ado, such as its short half-life and cardiovascular side effects (i.e. bradycardia and hypotension), are major barriers to its clinical use in acute coronary syndromes. One way to circumvent these undesirable effects is to use pharmacological agents that increase Ado bioavailability, as antagonists of its transporters or adenosine kinase (ADK) inhibitors. ADK is a key enzyme in the metabolism of purines that phosphorilates adenosine to AMP by ATP hydrolysis. In this context, we have previously demonstrated that derivatives of anilinoquinazolines are potent inhibitors of adenosine kinase and induce both acute and late phases of cardioprotection, as showed in isolated heart model. The present study was designed to investigate the transcriptional responses involved in late cardioprotection induced by administration of the anilinoquinazoline DMA. We used oligonucleotide microarrays containing representative sequences of all genes from mouse genome (~35 thousand genes). The RNA probes were synthesized from hearts of mice treated with DMA (30 mg/kg, single dose) ou vehicle (DMSO), 24 and 48 hours prior to tissue excision. We considered differentially expressed (fold change>[2.0], p<0.1) a total of 1061 genes in 24-hour and 844 genes in 48-hour groups, in comparison to vehicle treated samples. Most of these transcripts were unknown genes (ESTs-Expressed Sequence Tags; 63% at 24 hours, 76% in 48 hours). In 24h transcriptome, most of the genes (75% of the known genes and 62% of ESTs) were upregulated, while in 48h transcriptome 56% of the known genes and 58% of ESTs were upregulated. The functional analysis of known genes showed large representation of classes associated with cell adhesion, signaling, transport and metabolism in 24 hours, and cell adhesion, development of multicellular organism and metabolism in 48 hours. The analysis of gene identities revealed few coincidences between the two transcriptomes, and clustering analysis performed to study the gene profile transition from 24 to 48h revealed that most genes presents transitory regulation of its expression (i.e., tendency of upregulation at 24h followed by downregulation at 48h and vice-versa). Analysis of differentially expressed genes in terms of metabolic and signaling pathways in which they are inserted allowed us to assess a putative metabolome of myocardial cells treated by the quinazoline DMA. Results indicated that the most affected pathways are glucose and lipids metabolism, PPAR-? and adipocytokines, angiogenic responses, among others. Among these results, we confirmed experimentally the angiogenic effect of DMA and also the expression of genes and proteins associated with modifications in cardiac energy metabolism. Our results indicate that various cellular responses, including the energetic metabolism, ion homeostasis and changes in cell osmolarity, must cooperate to induce the cardioprotection phenotype after DMA administration. Studies focusing the mechanistic modifications of these groups of genes will contribute to elucidate their involvement in the protection induced by treatment with quinazolines, and will provide clues to comprehend myocardial protection phenomenon. Keywords: cardioprotection, quinazolinic compounds, gene expression, oligonucleotide microarrays, Mus musculus / Doutorado / Medicina Experimental / Doutor em Clínica Médica

Orientadores: Maria Aparecida Azevedo Pereira da Silva, Maria Regina Bueno Franco / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-11T06:51:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Wagner_Roger_D.pdf: 16615627 bytes, checksum: b068e5da383032c870abd8ff386a4d07 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Os salames são produtos cárneos fermentados e desidratados/maturados apreciados mundialmente e possuem características sensoriais peculiares, principalmente envolvendo o aroma e sabor. No Brasil este produto tem conquistado sucessivos recordes em faturamento no mercado interno, registrando R$ 265,3 milhões em vendas no ano 2005. Apesar de sua importância econômica, poucos estudos envolveram o perfil de voláteis do produto brasileiro e, nenhum deles avaliou a importância odorífera dos compostos voláteis. Assim, os objetivos do presente estudo foram: otimizar as condições de isolamento dos voláteis de salame para duas técnicas diferentes, headspace dinâmico (HD) e microextração em fase sólida (SPME); a partir destes métodos, caracterizar quantitativamente (CG-DIC) e identificar (CG-EM) os voláteis das amostras de salame brasileiro; determinar o impacto odorífero dos compostos voláteis (CV) presentes na amostra mais aceita pelos consumidores, por duas técnicas de CGO, OSME e Freqüência de detecção dos odores; determinar através da ADQ, o Perfil Sensorial dos salames e verificar a aceitação destes por consumidores potenciais; e por fim, correlacionar as medidas instrumentais com as sensoriais por métodos estatísticos multivariados. Foram analisadas seis amostras de salames brasileiros de dois tipos -Italiano (SI-1, 2 e 3) e Milano (SM-1, 2 e 3)- produzidos por três grandes fabricantes. As condições ótimas de isolamento obtidas com o auxílio da metodologia de superfície de resposta para o método de HD corresponderam à 3h e 26¿ de captura a 40°C, enquanto que para o de SPME, foram 45 minutos de extração a 50°C. A representatividade do aroma original da amostra de salame obtido nas condições otimizadas por SPME (7,2) foi superior à alcançada pelo método de HD (6,4). No entanto, ambos os métodos foram eficientes para discriminar as amostras de salame através da composição de voláteis, apesar dos diferentes perfis cromatográficos. Nos dois casos, os resultados da Análise de Componentes Principais (ACP) revelaram que as amostras dos fabricantes 1 e 2 foram caracterizadas por compostos provindos principalmente da oxidação de lipídeos, da atividade proteolítica e da fermentação de carboidratos (aldeídos, ésteres, álcoois e cetonas alifáticas), enquanto que as amostras do fabricante 3 apresentaram áreas maiores dos compostos com o grupo funcional fenol e de algumas cetonas cíclicas. Adicionalmente, os salames SI-2, SM-2 e SI-3 distinguiram-se das amostras SI-1, SM-1 e SM-3, pela maior quantidade de terpenos, o que sugere um maior grau de condimentação para aquelas amostras. As análises realizadas por CG-O (OSME e Freqüência de detecção dos odores) revelaram elevada correspondência quando aplicada a um mesmo método de isolamento. Além disso, apesar das diferenças entre os métodos de isolamento empregados, foram comumente importantes para o aroma de salame tipo Italiano os compostos metilalilsulfeto, os ésteres acetato de metilpropila, butanoato de etila, 2- e 3-metilbutanoato de etila, 1-octen-3-ona, 2-ciclohexen-1-ona, 1-octen-3-ol, 2-nonanona, (E)2-octenal, linalool, ácido 3-metilbutanóico, p-guaiacol, p-creosol e 1,4-dimetoxi-2-metilbenzeno. No teste de aceitação, realizado com 96 consumidores, a amostra SM-1 apresentou maior escore de aceitação global, e juntamente com as amostras SI-1 e SI-2 formaram um segmento com a maior parte dos consumidores ajustados no Mapa Interno de Preferência. Os resultados da ADQ foram analisados em dois grupos de atributos: aparência/textura e aroma/sabor das amostras. No primeiro grupo, os atributos distribuição da gordura e tamanho dos glóbulos de gordura discriminaram as amostras em função dos tipos dos salames e a cor vermelha diferenciou os fabricantes. Já os atributos de aroma e sabor foram correlacionados com 51 compostos voláteis (SPME), selecionados pelo seu elevado poder de discriminação das amostras e importância odorífera, juntamente com as propriedades físico-químicas, por PLSR-2. Assim, as amostras do fabricante 3 foram caracterizadas por aroma e sabor de defumado, as quais mostraram elevada correlação com os compostos fenólicos e cetonas cíclicas. O salame SM-2 apresentou maior proporção de compostos provenientes da oxidação lipídica e foi fortemente correlacionado com os atributos aroma e sabor de ranço. Já as amostras SI-2 e SM-1 foram descritas com aromas ácido e de gordura e sabor de gordura, e foram correlacionadas com teores elevados de gordura e por CVs originados da oxidação de lipídeos e da degradação de proteínas e carboidratos. A amostra SI-1 apresentou elevada quantidade de ácido acético, metionol e dos compostos recentemente relatados e, ainda foi caracterizada pelo maior teor protéico. Com as mesmas variáveis, os modelos desenvolvidos para prever os escores dos atributos sensoriais mostraram ajustes adequados (r>0,9) e habilidade de previsão (erro padrão médio de 15,3%). Desta forma, este estudo proporcionou informações sobre a qualidade dos salames brasileiros, incluindo os perfis dos constituintes voláteis e sensoriais das amostras, além de determinar a importância odorífera dos voláteis da amostra mais aceita com relação ao aroma / Abstract: Dry-fermented sausages are meaty products resulting from fermentation and dehydration/ripening processes. They are produced and consumed worldwide because of their typical sensory characteristics mainly in relation to the aroma and flavor. In Brazil this product has reached successive record sales in the internal market, with a total sale of R$ 265 million during the year 2005. In spite of its increased commercialization in the country, few studies about the volatile compounds of Brazilian dried sausages were found and their odoriferous importance had not been evaluated. The aims of the present study were: to optimize the conditions for the isolation of the salami volatile compounds by two different techniques, dynamic headspace (HD) and solid phase microextraction (SPME); to characterize the volatile compounds of some Brazilian salami samples by a gas-chromatograph equipped with a flame ionization detector (GC-FID) and by massspectrometry (MS), using the optimized techniques of isolation; to determine the odoriferous impact of the volatile compounds of the most accepted sample by two olfactometric techniques, OSME and Frequency of odor detection; to determine the sensory profile of the samples by Quantitative Descriptive Analysis (QDA), verifying also their acceptability by potential consumers; and finally to correlate the instrumental and sensory data using multivariate statistic techniques. Six different Brazilian dried sausage samples of the Italian (SI-1,2,3) and Milan types (SM-1,2,3) from three important national producers were analyzed. The optimized conditions for the isolation of the volatile compounds determined with the aid of Response Surface Methodology were 3h 26¿ (trapping time) and 40°C (temperature trapping) for the HD technique and 45¿ (extraction time) and 50°C (extraction temperature) for the SPME. Evaluation of the original aroma of the sample extracted by SPME obtained a higher score (7.2) than that of the HD technique (6.4). However, both methods were efficient in discriminating the salami samples by comparison of the volatile compounds in spite of their different chromatographic profiles. The data obtained from the two methods interpreted by Principal Component Analysis revealed that the samples from producers 1 and 2 were characterized mainly by compounds arising from lipid oxidation, proteolytic activity and carbohydrates fermentation (aldehydes, esters, alcohols and aliphatic ketones). The samples from producer 3 were characterized by greater areas of phenolic compounds and by cyclic ketones. Additionally, the samples SI-2, SM-2 and SI-3 could be distinguished from the SI-1, SM-1 and SM-3 by a higher amount of terpenes, suggesting that more condiments were added to these samples. On the other hand, the analyses carried out by GC-O (OSME and Frequency) showed good agreement when applied to volatile compounds isolated by the same procedure. In spite of the different chromatographic profile obtained by the two methods, the compounds methylallylsulfide, methylpropyl acetate, ethyl butanoate, ethyl 2- and 3-methylbutanoate, 1-octen-3-one, 2-cyclohexen-1-one, 1-octen-3-ol, 2-nonanone, (E)2-octenal, linalool, 3-methylbutanoic acid, p-guaiacol, p-creosol and 1-4 dimethoxybenzene were considered important for the Italian type salami aroma by both olfactometry techniques. An acceptability test applied to 96 potential consumers showed that the SM-1 sample obtained the highest score of overall acceptability and together with the SI-1 and SI-2 samples, they formed a segment with the major part of the consumers adjusted in the Internal Preference Mapping. The QDA data were interpreted after division of the samples¿ attributes in two groups: appearance /texture and aroma/flavor. In the first group, the distribution of fat and size of fat globules discriminated the samples in terms of the salami types while the red color differentiated the producers. The attributes of aroma/flavor were correlated to 51 volatile compounds (SPME) which were selected because of their high discriminatory power in relation to the samples and the odoriferous importance, and to the physicchemical properties by PLSR-2. Thus, the samples of producer 3 were characterized by a smoke aroma/flavor and they showed a high correlation to phenolic compounds and cyclic ketones. The SM-2 sample, characterized by a high proportion of compounds arising from lipid oxidation, was strongly correlated to the aroma and flavor attributes of rancidity. The samples SI-2 and SM-1 were described by acidic and fatty aroma attributes and fatty flavor and they were correlated to high amounts of fat and also to the volatile compounds originating from lipid oxidation and from protein / carbohydrate degradation. The SI-1 sample showed high amounts of acetic acid, metionol, the recently reported compounds and total protein. Considering the same variables, the models developed in order to predict the scores of the sensory attributes of the samples showed adequate adjustment (r>0.9) and prediction ability (mean standard error of 15.3%). Thus, this study provided some information concerning the quality of Brazilian salami samples, including the volatile and sensory profiles, in addition to the determination of the odoriferous importance of the volatile compounds present in the most accepted salami aroma / Doutorado / Consumo e Qualidade de Alimentos / Doutor em Ciência de Alimentos

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A mucosite à um efeito colateral comum ao uso de antineoplÃsicos, podendo afetar Ãreas distintas do TGI resultando em estomatite e/ou diarrÃia que, somados a neutropenia podem culminar em quadro clÃnico grave. Em nosso estudo pretendeu-se, inicialmente, estudar em modelo experimental as aÃÃes da amifostina, um derivado Tiol com atividade de citoproteÃÃo comprovada em tecidos como rim e medula Ãssea, e em seguida utilizÃ-la em pacientes submetidos a protocolos quimioterÃpicos que sabidamente causavam mucosite. Analisamos a eficÃcia da mesma em inibir a lesÃo as cÃlulas das mucosas oral e intestinal atravÃs de mÃtodos bioquÃmicos, sondas biolÃgicas e de parÃmetros, jà consagrados como as escalas de avaliaÃÃo de mucosite e diarrÃia. Para os estudos da mucosite oral (MO) experimental foram utilizados hamsters Golden Siriam e a induÃÃo foi feita com doses de 60 e 40mg/Kg (i.p) de 5-FU nos dias 1 e 2 respectivamente e de irritaÃÃo mecÃnica (I.M) - ranhuras nas mucosas jugais de ambos os lados dos animais com auxÃlio de agulha de ponta romba no 4o dia do experimento. O sacrifÃcio dos animais deu-se no 10o dia do experimento e a segui foram realizados os seguintes procedimentos: 1- anÃlise macroscÃpica das mucosas, 2- coleta de sangue para contagem total e diferencial de leucÃcitos e 3 â retirada de fragmentos da mucosa para histopatologia. Os animais foram pesados diariamente e divididos em grupos de 10, de acordo com a dose de Sal, AMF(100, 200, 400mg/Kg s.c), aplicada 30 min antes da injeÃÃo de 5-FU. Na anÃlise macroscÃpica, a AMF bloqueou significativamente (p<0,05) a hiperemia da mucosa, dilataÃÃo, congestÃo vascular, Ãlceras e abcessos [AMF 400mg/kg: Md=1,5 (1-3) AMF 200mg/kg: Md 1,5 (1-2) e Sal: Md=3 (2-3)]. Os dados foram confirmados pela anÃlise histopatolÃgica [AMF 400mg/kg: Md=1(1-2); AMF 200mg/kg: Md=1(1-2) e SAL: Md=3 (2-3)]. Houve reduÃÃo da leucocitose no 10o de acompanhamento dos animais (AMF 400mg/kg=3,185x103 0,437 vs. Sal=17,767 2,644), diminuindo o nÃmero de neutrÃfilos. A massa corpÃrea mostrou tendÃncia a reversÃo nas doses de 100 e 200 mg/Kg. Avaliamos tambÃm os efeitos da interleucina 11 e da associaÃÃo desta com AMF (400mg/Kg Â0.647; AMF+IL-11: 3.771x10Â0.289; Sal: 7.850x10Â1.699]. NÃo houve reduÃÃo da perda de peso em relaÃÃo ao grupo controle quando analisadas as curvas de peso da IL-11 isoladamente e da associaÃÃo. A AMF (400mg/Kg s.c) mostrou tendÃncia a conservaÃÃo do peso. Quando utilizada a maior dose de AMF (400 mg/Kg) no modelo de mucosite intestinal com MTX (2,5 mg/Kg) percebe-se que nesta dose e modelo, o citoprotetor nÃo foi eficiente em prevenir danos à mucosa intestinal. Entretanto, houve melhora estatisticamente significante da leucocitose nos animais tratados com AMF, bem como melhora no infiltrado inflamatÃrio (p<0,05). Passou-se, entÃo, a avaliar os efeitos da AMF sobre o aumento de permeabilidade intestinal em pacientes submetidos à quimioterapia antineoplÃsica. Vinte (20) voluntÃrios sadios e trinta (30) pacientes com cÃncer, no 10dia pÃs-quimioterapia sabidamente causadora de mucosite, ingeriram 20ml de soluÃÃo com 20g de lactulose e 5g de manitol, em jejum, com posterior coleta de urina durante 5h. Ao volume total acrescentou-se 1ml de clorexidina (2%) e de cada amostra retiraram-se 2ml para congelamento e anÃlise em HPLC, para mensuraÃÃo das taxas de excreÃÃo dos aÃÃcares. Os resultados mostram que a AMF inibiu significativamente (p<0,001) a excreÃÃo urinÃria de lactulose e diminuiu a razÃo de excreÃÃo lactulose/manitol quando analisados os diversos protocolos quimioterÃpicos. Ao se analisar apenas os protocolos a base de cisplatina, observou-se que a AMF foi capaz de inibir significativamente a excreÃÃo tambÃm de manitol, evidenciando proteÃÃo completa a mucosa intestinal, o que aponta para uma provÃvel aÃÃo quimioterÃpico dependente. O mecanismo de aÃÃo do citoprotetor para a MO e disfunÃÃo da barreira intestinal provavelmente està ligado à inibiÃÃo de formaÃÃo e aÃÃo de radicais livres do oxigÃnio. Conclui-se entÃo que a AMF reduz a inflamaÃÃo da MO, sugerindo efeito citoprotetor local da mesma e tambÃm previne disfunÃÃo da barreira intestinal sugerindo o seu uso como possÃvel ferramenta capaz de minimizar clinicamente os efeitos da mucosite. s.c). Na anÃlise macroscÃpica a AMF e a associaÃÃo reduziram significantemente (p<0,05) a severidade da MO [AMF: Md 1,5(1-3); AMF+IL-11: Md 1(1-2); Sal: Md 3(3-3)]. Todos os grupos obtiveram reduÃÃo significativa do nÃmero de leucÃcitos [AMF 400mg/kg=2.375x10333o / Mucositis induced by antineoplastic drugs is an important dose-limiting and costly side effect of cÃncer therapy. The ulcerative lesions produced by stomatotoxic chemotherapy are painful, restrict oral intake and importantly, act at sites of secondary infection and portals of entry for the endogenous oral flora. Our principal objective was to determine if amifostine, a tiol derivate citoprotection, could reduce the oral mucositis simptoms and to prevent intestinal barrier disfunction in animal models and patients with cancer submitted a chemotherapy treatment. It was injected 5-Fluorouracil (5-FU 60 and 40 mg/Kg i.p) on days 0 and 2. The cheek pouch mucosa was superficially irritated on day 4. This technique has been repeatedly demonstrated to produce ulcerative mucositis which mimics the human condition. In these experiments it was used male Golden Siriam hamsters. Methotrexate (MTX 2,5 mg/Kg â s.c) was used in male rats to induced intestinal mucositis. Hamsters groups were treated with diferent doses of amifostine (100, 200, 400mg/Kg s.c), SAL, interleukin-11 (IL-11 10, 30 90 and 100 Âg/day â s.c) or AMF (400 mg/Kg s.c) plus IL-11 (90Âg/day â s.c) 30 minutes before the 5-FU injection. Differents parameters were evaluated: macroscopic and histopathological analyses, leucogram and body mass variation. Our results demonstrated that amifostine was efficient to prevent the mucositis symptoms in oral affections [AMF 400mg/kg: Md=1,5 (1-3) AMF 200mg/kg: Md 1,5 (1-2) e SAL: Md=3 (2-3)], this results were confirmated by histophatologycal anlyses [AMF 400mg/kg: Md=1(1-2); AMF 200mg/kg: Md=1(1-2) e SAL: Md=3 (2-3)]; but no significant protection was evident in intestinal model. The association AMF plus IL-11 demonstrated significant protection [AMF: Md 1,5(1-3); AMF+IL-11: Md 1(1-2); SAL: Md 3(3-3)], but this protection was not diferent for single dose of AMF (400 mg/Kg). All animals demonstrated a decrease in weight when use IL-11, so AMF in lower doses (100 and 200 mg/Kg) demonstrated significant effect in conservation the weight. The hemathologycal protection was evident in animals when has used AMF in diferent models. 30 cancerâs patients, submitted to treatment with various antineoplasic agents in presence or ausence of amifostine were compared with 20 healthy individuals, in a prospective case-control study, taking in consideration sex, age, type of neoplasia, antineoplasic used, diagnosis of clinical mucositis and detection of alterations in the intestinal permeability through urinary fathoming of lactulose and manitol by the HPLC-PAD. There was no difference in the groups regarding the demographic characters. The mannitol captation did noer in the tests realized, being, however, a considerable increase in the urinary recuperation of lactulose, identifying a broad passage of this sugar through the junction nexuses damaged (p<0,001). The reason lactulose-mannitol decrease in patientes treated with amifostine (p<0,001). When analysed patients that used cisplatin or derivates the citoprotection demontrated significant protection and the sugar captation was simmilar to the control group. In conclusion, the present study demonstrates that amifostine is able to reduces the incidence and severity of mucositis associated with chemotherapy treatment. Efficacy appears clinically acceptable at a relatively low dose that offers superior tolerability. Fhurther randomized studies are now required to determine the exactily mechanism of action and optimal dose of amifostine versus no treatment for this indication.

FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / AlteraÃÃes patolÃgicas nos teciduais podem ser ocasionadas por doenÃas e antimetabÃlitos como o 5-Fluorouracil (5-FU), acometendo o sistema digestÃrio. Para que o processo absortivo ocorra normalmente, a barreira epitelial do intestino deve estar Ãntegra e com taxa de renovaÃÃo celular adequada. A aÃÃo antiproliferativa do 5-FU resulta, principalmente, de apoptose, consequente à lesÃo do DNA. Propomos neste estudo que glutamina (Gln), alanil-glutamina (Ala-Gln), Hyprol 4107 e Hyfoama 77 possam agir como fatores trÃficos para o epitÃlio intestinal. A depleÃÃo do pool de Gln conduz à atrofia de vilos no intestino delgado, a qual parece estar associada a uma interrupÃÃo na barreira intestinal. Objetivamos investigar a mucosite intestinal induzida por 5-FU, e a eficÃcia da suplementaÃÃo com glutamina (Gln), alanil-glutamina (Ala-Gln), Hyprol 4107 (HYP) e hyfoama (HYFO) nesta condiÃÃo clÃnica. Foram utilizadas as avaliaÃÃes morfomÃtricas, metabÃlicas e a de permeabilidade intestinal [(teste lactulose/manitol (L/M)] em camundongos (n=180)). A mucosite intestinal foi induzida por 5-FU (100 mg/kg/24h s.c., durante 3 dias) validada em camundongos, observando-se diarrÃia e prejuÃzo no estado nutricional (-1,88 Â0,537 g) estabelecido apÃs o 3o dia de tratamento. A anÃlise morfomÃtrica demonstrou achatamento de vilos (251Â6,07 Âm) e hiperplasia de criptas (128,3Â4,98 Âm) intestinais com aumento do nÃmero de apoptoses (13,5Â1,89/cripta), no duodeno e no jejuno. A taxa L/M no grupo 5-FU foi maior que no controle (0,27Â0,05). A suplementaÃÃo de Gln, Ala-Gln e peptÃdeos melhoraram o ganho ponderal e a ingestÃo de raÃÃo, as alteraÃÃes morfolÃgicas e a apoptose (2,25Â0,63), no modelo de mucosite intestinal. Nenhuma alteraÃÃo foi observada no padrÃo de mitoses nas criptas intestinais. A suplementaÃÃo nutricional reduziu na mucosite, a elevaÃÃo das taxas de L/M [de 0,86 para 0,45 (Gln)] nas vias paracelular e transcelular. Nossos resultados sugerem que, o restabelecimento da barreira morfofuncional, induzido pela suplementaÃÃo, foi obtido atravÃs do fornecimento de substrato energÃtico para o enterÃcito, inibiÃÃo de apoptose. EntÃo sugerimos que o uso de suplementos ricos em Gln e peptÃdeos pode prevenir a desnutriÃÃo e reduzir as doenÃas diarrÃicas melhorando a morfo fisiologia da barreira intestinal / Pathological disturbances and antineoplasic drugs like 5-Fluorouracyl (5-FU) cause consequences of diarrheal diseases. Intestinal barrier must be preserved to absortive functions. Antiproliferative action of 5-FU results of apoptosis upon DNA lesion. In order to investigate the intestinal mucositis 5-FU-induced and the efficacy of glutamine (Gln), alanyl-glutamine (Ala-Gln), hyprol 4107 (HYP), hyfoama 77 (HYFO) supplementation, on this clinical condition, we used intestinal perfusion approach in mice (n=344) and rabbits (n=72). To evaluate Gln, Ala-Gln, Hyprol 4107 and Hyfoama 77, we used morphometric, metabolic techniques and intestinal permeability test (lactulose/mannitol, L/M). Intestinal mucositis induced by 5-FU in mice was validate by diarrhea occurence and impaired nutritional status (-1,88  0,537 g) establishments, after 3 thd day of 5-FU treatment. Morphometric analysis of duodenum and jejunum, demonstrated a flattening villous (251Â6,07 Âm) and hyperplasic crypts (128,3Â4,98 Âm), as well as a increase in apoptosis (13,5Â1,89/crypt). L/M rate was greater in 5-FU group than control group (0,27Â0,05). Gln, Ala-Gln and peptides improved weight gain and a food intake in mucositis model. Nutrients supplementation reduces morphologic alteration and the increased apoptosis (0,25Â0.05). No changes were observed at intestinal mitosis profile, upon 3 thd day of 5-FU treatment. This supplementation improved transcellular and paracellular routs by establishment of intestinal permeability (0.35 to 0.73) in mucositis. Our results suggest that the improvement of intestinal barrier function was induced by an increase energy substrate to enterocyte, inhibition of apoptosis in crypts. So we suggest that gln and peptides supplementation could prevent the malnutrition, reduce diarrheal diseases and ameliorate intestinal barrier function.