Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, 2009. / Submitted by Camila Duarte (camiladias@bce.unb.br) on 2017-01-26T17:01:17Z No. of bitstreams: 1 2009_EufranioNunesDaSilvaJunior.pdf: 36628683 bytes, checksum: 853a09e92d5415a1cb5303133c45f294 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2017-01-29T10:59:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_EufranioNunesDaSilvaJunior.pdf: 36628683 bytes, checksum: 853a09e92d5415a1cb5303133c45f294 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-29T10:59:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_EufranioNunesDaSilvaJunior.pdf: 36628683 bytes, checksum: 853a09e92d5415a1cb5303133c45f294 (MD5) / Diversas nor-p-lapachonas 3-arilamino e 3-alcóxi-substituídas e p- lapachonas 1,2,3-triazólicas foram sintetizadas e apresentaram potente atividade citotóxica contra quatro linhagens de células tumorais: HL-60 (leucemia), MDAMB-435 (mama), HCT-8 (cólon) e SF-295 (sistema nervoso central) com valores de IC50 abaixo de 1 pg/mL. A citotoxidade das substâncias descritas foi comparada com doxorrubicina, fármaco utilizado como controle positivo, e os precursores sintéticos p-lapachona e nor-p-lapachona. A atividade das substâncias em relação às células normais, avaliada em Células Mononucleares Periféricas do Sangue, mostrou que alguns derivados apresentam seletividade contra linhagens de células tumorais. Nor-p-lapachonas 3-arilamino e 3-alcóxi- substituídas e p-lapachonas 1,2,3-triazólicas também foram avaliadas contra o parasito Trypanosoma cruzi, agente causador da doença de Chagas. Todos os derivados foram mais ativos do que as quinonas originais, P-lapachona e nor-p- lapachona e várias substâncias foram mais ativas do que o fármaco, benznidazol, utilizado como controle positivo. Várias substâncias descritas emergem como potenciais protótipos a serem utilizados na terapêutica da doença de Chagas e contra tumores malignos. Estudos visando à obtenção de novos heterocíclicos e a completa elucidação estrutural do ‘peróxido lapachol’ de Hooker, por espectroscopia de RMN e por cristalografia de raios X, foram realizados. / Several 3-arylamino and 3-alkoxy derivatives of nor-|3-lapachone and (3- lapachone-based 1,2,3-triazoles were synthesized and found to show very potent cytotoxicity against four neoplastic cancer cells: SF-295 (central nervous system), HCT-8 (colon), MDAMB-435 (breast) and HL-60 (leukaemia), with IC50 below 1 pg/mL. Their cytotoxicities were compared to doxorubicin and with their synthetic precursors, p-lapachone and nor-p-lapachone. The activity against normal peripheral blood mononucluear cells (PBMC) showed that some of the compounds were selective against cancer cells. 3-arylamino and 3-alkoxy derivatives of nor-|3- lapachone and 0-lapachone-based 1,2,3-triazoles were assayed against the infective bloodstream trypomastigote form of Trypanosoma cruzi, the etiological agent of Chagas’ disease. All the derivatives were more active than the original quinones and some compounds were more active than benznidazole, used as positive control. Several substances described herein emerge as interesting new lead compounds in drug development for Chagas’ disease and for cancer. Studies towards the obtention of new heterocycles and the complete elucidation of the ‘Hooker peroxide’ by NMR spectroscopy and X-ray diffraction were accomplished.

117 f. / Submitted by Ana Hilda Fonseca (anahilda@ufba.br) on 2013-03-27T15:42:25Z No. of bitstreams: 1 TESE ELIANE SOUSA PDF.pdf: 1394635 bytes, checksum: 18b8caae16311cb7698b248e0c0258f0 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Hilda Fonseca(anahilda@ufba.br) on 2013-06-04T15:57:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TESE ELIANE SOUSA PDF.pdf: 1394635 bytes, checksum: 18b8caae16311cb7698b248e0c0258f0 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-04T15:57:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE ELIANE SOUSA PDF.pdf: 1394635 bytes, checksum: 18b8caae16311cb7698b248e0c0258f0 (MD5) Previous issue date: 2012 / CNPq, FINEP, FAPESB / As quinonas são um grupo de substâncias orgânicas coloridas e semivoláteis onipresentes na natureza e derivado s de compostos aromáticos como benzeno,naftaleno e antraceno. São emitidas diretamente a partir de combustão incompleta de matéria orgânica, especialmente combustíveis fósseis, sendo esta a principal fonte antrópica direta de emissão de quinonas. A foto-oxidação de HPA, degradação pela ação da luz solar e/ou por interações com espécies reativas atmosféricas (NO3, O3 e. OH), é a mais importante fonte secundária de geração de quinonas na atmosfera podendo ocorrer nas fases vapor, líquida ou particulada. Produtos de redução de quinonas (semiquinonas e hidroquinonas) são de interesse toxicológico devido à sua habilidade para gerar espécies reativas de oxigênio (ERO) que podem causar danos em membranas, proteínas e no DNA, podendo induzir a apoptose e, entre outros, a carcinogenese. Neste trabalho foi desenvolvido um método para a quantificação direta por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas (CG-EM) de 1,4-benzoquinona; 1,2-naftoquinona; 1,4-naftoquinona; 9,10- fenantraquinona e 9,10-antraquinona no ar atmosférico associadas ao material particulado (MP 2,5) e em fase vapor. Com o objetivo de verificar a existência ou não de decomposição térmica foi feito um estudo sistemático do comportamento térmico de quinonas empregando técnicas de análise térmica sob condições semelhantes às de cromatografia em fase gasosa para identificar as temperaturas em que os eventos térmicos ocorrem quando quinonas diferentes foram submetidas a aquecimento durante a rampa típica de temperatura usada na análise por cromatografia em fase gasosa. A validação dos métodos de CG-EM, no modo SIM, apresentou resultados considerados satisfatórios. Testes de repetibilidade proporcionaram a obtenção de coeficientes de variação 1,63 -9,29% (D) e 5,53-7,93% (SD)), bem como a constatação da linearidade das curvas de calibração (R2 variando 0,9700 -1,000). Os limites de detecção 0,01– 2,18 mgL-1 (SD) e 0,05 -0,20mgL-1 (D) e limites de quantificação 0,05-4,37mgL-1 (SD) e 0,35-0,47mgL-1(D) foram estabelecidos e demonstraram a aplicabilidade do método utilizado para a análise de amostras ambientais em material particulado (MP) e em fase vapor. As amostras ambientais de MP e fase vapor foram coletadas na Estação da Lapa (Salvador, BA), utilizando amostradores de grande volume e amostrador simultâneo de MP e fase vapor. Os XII níveis ambientais de quinonas encontrados nas amostras coletadas na estação de ônibus estiveram na faixa de 0,15 a 7,39 ngm-3. / Salvador

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:18:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 327688.pdf: 1457038 bytes, checksum: 2aa37a38003e3b6e579ae614ab6e60cb (MD5) Previous issue date: 2014 / As quinonas são uma classe de substâncias químicas de interesse na terapêutica do câncer, visto que algumas delas apresentam potencial antitumoral. Pesquisas sugerem que o efeito antitumoral destes compostos pode ser potenciado por substituições estratégicas dos substituintes ligados ao núcleo quinóide. Desta forma, este trabalho teve como objetivo caracterizar o potencial citotóxico, antiproliferativo e antitumoral bem como o mecanismo molecular de ação de 1,4-naftoquinonas substituídas. Dentre os compostos avaliados, os que apresentaram maior atividade citotóxica para linhagem tumoral MCF7 (câncer de mama humano), avaliada pelo método do MTT, foram DPB1, DPB2, DPB4 e DPB5 (CI50 < 25 µM). Sugerindo-se que o efeito citotóxico é influenciado principalmente por seus substituintes onde grupos doadores e aceptores de elétrons modulam as propriedades eletrônicas do átomo de nitrogênio presente nas moléculas, facilitando ou dificultando a ocorrência do ciclo redox. Além disso, estes mesmos quatro compostos inibiram a formação de colônias celulares, promovendo um efeito citostático. Através do ensaio de fragmentação do DNA plasmidial e ensaio cometa constatou-se que as 1,4-naftoquinonas substituídas promoveram dano direto ao DNA e que a fotoativação pela luz UV-A (365 nm) potencializou este dano. Para verificar se as mesmas possuíam interação direta com o DNA, foi utilizada a técnica de varredura por espectrometria, utilizando-se o CT-DNA. Foi observado que os compostos interagem com o DNA, promovendo um efeito hipocrômico, indicando que a interação seja por intercalação, o que foi confirmado pelo ensaio de fluorescência, utilizando o brometo de etídeo como agente intercalante. O dano ao DNA induzido pelos compostos foi também confirmado por imunoeletroforese, as naftoquinonas substituídas aumentaram a fosforilação da histona gH2Ax. Por outro lado, a citometria de fluxo demonstrou que os compostos avaliados promoveram a parada do ciclo celular na fase G2, o que foi também confirmada pelo ensaio de imunoeletroforese, onde não se observou inibição na expressão da proteína cdk2, o que poderia ser devido ao fato desta cinase dependente de ciclina estar particularmente envolvida na regulação do ciclo celular na fase G1. Além disso, também foi observado que os compostos promoveram a morte celular predominantemente por apoptose independente de caspase e/ou necrose programada tanto in vivo quanto in vitro. Considerando que estes compostos aumentaram a expressão da p53 e não promoveram a clivagem da PARP. Diante desses resultados, sugere-se que os compostos possam ter promovido a morte celular por necrose programada ou necrosis like/ apoptose independete de caspase. Sugere-se ainda que os efeitos citotóxicos, genotóxicos e citostático promovido pelos compostos se devam a geração de EROS, que foi observado pelo ensaio com DCFH-A, onde os compostos DPB1, DPB2, DPB4 e DPB5 apresentaram um aumento significativo de geração de EROs (7874,22; 6056,37; 10547,47 e 3833,33 unidades de fluorescência/mg de proteína) em relação ao controle negativo (1493,10 unidades de fluorescência/mg de proteína). Os ensaios in vivo, demonstraram que DPB1, DPB2, DPB4 e DPB5 apresentaram efeito antitumoral, se destacando o composto DPB4. Em relação ao tipo de morte celular in vivo foi observado que os compostos aumentaram o percentual de células apoptóticas iniciais e principalmente tardias e/ou necróticas, confirmando os resultados visualizados in vitro. Além disso, foi investigado se os compostos poderiam também ter uma atividade antiangiogênica, sendo este efeito observado para todos os compostos avaliados (DPB1, DPB2, DPB4 e DPB5), destacando-se o composto DPB2 que em concentrações de 5, 10 e 20 µM/ml reduziram o percentual de vasos em 67,69; 53,84 e 76,92%. Por fim, sugere-se que os efeitos mediados pelas 1,4-naftoquinonassubstituídas em estudo se devam ao sinergismo de três mecanismos: ciclo redox, pelo aumento da geração de EROs, intercalação ao DNA e/ou inibição da topoisomerase II, que consequentemente induz a morte das células tumorais.<br> / Abstract : Quinones are a class of chemicals of interest in cancer therapy, since some of them have antitumor potential. Research suggests that the antitumor effect of these compounds can be potentiated by strategic substitutions quinoid substituents attached to the core. Thus, this study aimed to characterize the cytotoxic, antiproliferative and antitumor potential as well as the molecular mechanism of action of substituted 1,4- naphthoquinones. Among the compounds evaluated, showed the highest cytotoxic activity to tumor cell line MCF7 (human breast cancer), as evaluated by the MTT method were DPB1, DPB2, DPB4 and DPB5 (IC50 < 25 mM) having substituents attached directly to the naphthoquinone nucleus. Suggesting that the cytotoxic effect is mainly influenced by their substituents groups where donors and electron acceptors modulate the electronic properties of this nitrogen atom in molecules, facilitating or hindering the occurrence of the redox cycle. Furthermore, these same four compounds inhibited the formation of cell colonies by promoting a cytostatic effect. Through the fragmentation test and the plasmid DNA comet assay was found that 1,4- naphthoquinones substituted promoted direct DNA damage and that the photoactivation by UV-A light (365 nm) potentiated this damage. To verify whether they had direct interaction with DNA, the technique of scanning spectrometer was used, using the CT-DNA. It was observed that the compounds interact with the DNA, providing a hypochromic effect, indicating that the interaction is by intercalation, which was confirmed by fluorescence assay using ethidium bromide as the intercalating agent. The DNA damage induced by the compounds was also confirmed by immunoblot, substituted naphthoquinones increased phosphorylation of histone ?H2Ax. Furthermore, flow cytometry showed that the compounds evaluated promoted cell cycle arrest in the G2 phase, which was also confirmed by immunoelectrophoresis assay where no inhibition was observed in the expression of the cdk2 protein, which could be due to the fact this cyclin dependent kinase to be particularly involved in the regulation of the cell cycle in the G1 phase. Moreover, it was observed that the compounds promoted cell death predominantly by caspase -independent apoptosis and / or programmed necrosis both in vivo and in vitro. Whereas these compounds increased the expression of p53 and did not promote the cleavage of PARP. From these results, it is suggested that the compounds may have promoted cell death by necrosis or programmed like necrosis. It is also suggested that the cytotoxic, genotoxic and cytostatic effects promoted by the compounds are due to generation of ROS, which was observed by DCFH-A assay, where DPB1 , DPB2 , DPB4 and DPB5 compounds showed a significant increase in ROS generation (7874.22, 6056.37, 3833.33 and 10547.47 fluorescence units / mg protein ) compared to negative control (1493.10 fluorescence units/mg protein). In vivo assays showed that DPB1, DPB2, DPB4 and DPB5 showed antitumor effect, highlighting the compound DPB4. Regarding the type of cell death was observed that compounds increased the percentage of early apoptotic cells and mostly late and/or necrotic, confirming the results shown in vitro. Furthermore, we investigated whether the compounds could also have a antiangiogenic activity, this effect being observed for all compounds evaluated (DPB1, DPB2, DPB4 and DPB5), highlighting the compound DPB2 that at concentrations of 5, 10 and 20µM /ml reduced the percentage of vessels in 67.69, 53.84 and 76.92 %. Finally, it is suggested that the effects mediated by substituted 1,4- naphthoquinones study are due to the synergism of three mechanisms: redox cycle by the increased generation of ROS, and DNA intercalating / or inhibition of topoisomerase II, which consequently leads to tumor cell death.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:34:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 328156.pdf: 3621653 bytes, checksum: a1674e84d3d1c5637439c7111832d541 (MD5) Previous issue date: 2014 / Casearia sylvestris é uma planta utilizada popularmente no tratamento de tumores. Quinonas tratam-se de compostos que apresentam significativo efeito antitumoral. Evidências indicam que o efeito antineoplásico de quinonas pode ser elevado pela associação destas com o ascorbato de sódio (ASC). Desta forma, este trabalho tem como objetivo avaliar os mecanismos envolvidos nos efeitos antiproliferativo e antitumoral mediados pelo extrato bruto (EB-ETOH) e frações de Casearia sylvestris, bem como pelas fenilaminonaftoquinonas 7 (Q7) e 9 (Q9) administradas isoladamente ou em associação ao ascorbato de sódio. A análise fitoquímica demonstrou a presença de casearina C na fração clorofórmica (f-CHCl3) e EB-ETOH de C. sylvestris. EB-ETOH e f-CHCl3, apresentaram importante citotoxicidade sobre células MCF-7. Quando administrados em doses subtóxicas (= CI20), EB-ETOH e f-CHCl3 exerceram atividade antiproliferativa sobre células MCF-7, sendo capazes de promover a parada do ciclo celular em G1, devido ao aumento da expressão de p53 e p16, bem como da redução da expressão de CDK2. Além disso, os extratos elevaram a fosforilação de ?H2Ax. EB-ETOH e f-CHCl3 apresentaram significativa atividade antitumoral in vivo em camundongos isogênicos Balb-C portadores do tumor sólido de Ehrlich, reduzindo a razão área da massa tumoral/área do osso em torno de 18 e 40%, respectivamente. Q7 e Q9 mostraram citotoxicidade seletiva sobre células T24, a qual foi potencializada pela associação destes compostos a ASC (CI50 Q7 = 27,1; CI50 Q9 = 44,3; CI50 Q7 + ASC = 14,5; CI50 Q9 + ASC= 16,9 µM). Fenilaminonaftoquinonas (10 µM) isoladas ou associadas à ASC não foram capazes de promover a ativação de caspases e a clivagem da PARP, sugerindo-se que o mecanismo de morte induzido pelas associações trata-se de necrose, visto que ambos tratamentos promoveram lise celular. Q7, Q9, Q7 + ASC e Q9 + ASC reduziram a proliferação de células T24 em torno de 29,7; 3,5; 36,7 e 88,8 %, respectivamente Além disso, fenilaminonaftoquinonas associadas ao ASC modificaram o número de células presentes na fase G2/M e elevaram a atividade da ß-galactosidase ácida, sugerindo que tais tratamentos são capazes de induzir senescência. Os efeitos citotóxico e antiproliferativo promovidos pela associação de fenilaminonaftoquinonas ao ASC envolve modificações na sinalização mediada por MAPKs. Os resultados obtidos permitem sugerir que tanto a associação de fenilaminonaftoquinonas ao ASC, quanto os extratos deC. sylvestris tratam-se de promissores coadjuvantes na terapêutica do câncer quando administrados juntamente a agentes citotóxicos.<br> / Abstract : The branches and leafs of Casearia sylvestris tree has medicinal properties comproved through ethnobotanical surveys reporting plant extracts has being used in traditional therapy as first approaches to several conditions, including cancer. Evidences indicate that quinones antineoplastic effect could be raised up through sodium ascorbate association (ASC). Thus, this study aims to evaluate some mechanisms related to in vitro antiproliferative and antitumor effects mediated by C. sylvestris ethanol crude extract (EB-EtOH) and fractions, as well mediated only by synthetic phenylaminonaphthoquinones or co-administered with ASC. EB-EtOH and its chloroformic fraction (f-CHCl3) had casearin C, a clerodane diterpene with chemopreventive activity. Consequently, both extracts showed significant cytotoxicity over MCF-7 cells. Furthermore, using subtoxic concentrations (= IC20), EB - EtOH and f-CHCl3 exerted antiproliferative activity on MCF - 7 cells, being able to promote cell cycle arrest in G1 due to increased expression of p53 and p16, as well as reducing CDK2 expression. Additionally, these extracts were still able to increase the ?H2Ax expression. EB-EtOH and f-CHCl3 had significant in vivo antitumor activity throught Ehrlich carcinoma-bearing Balb-c mice model causing reduction in the ratio tumor over bone area about 18 and 40 %, respectively. On the other hand, synthetic phenylaminonaphthoquinone 7 (Q7) and phenylaminonaphthoquinone 9 (Q9) showed selective cytotoxicity for T24 cells, which enhanced in the ASC presence (IC50 Q7 = 27.1; IC50 Q9 = 44.3; IC50 Q7 + ASC = 14.5; IC50 Q9 + ASC = 16.9 µM). Take into account that both phenylaminonaphthoquinones (10 µM) isolated or associated with ASC were not able to activate caspase 3 or PARP cleavage, ours results suggest that necrosis occurs instead apoptosis as cell death mechanism possible induced by the ASC association, since both treatments showed cytolytic effect. Q7, Q9, Q7 + ASC and Q9 + ASC reducing cell proliferation about 29.7; 3.5; 36.7 and 88.8%, respectively. Besides, phenylaminonaphthoquinones associated with ASC augment G2 / M phase cells and also increase acid ß-galactosidase activity, suggesting senescence induction capability. Moreover, cytotoxic and antiproliferative effects promoted by the ASC association involves changes in MAPK signaling pathways. These results suggest that C. sylvestris extracts and the association between phenylaminonaphthoquinones and ASC are promising adjuvants incancer therapy and could be administered together with conventional quimioterapic agents.

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-11-29. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:07Z : No. of bitstreams: 1 000832261.pdf: 4195140 bytes, checksum: 6e2b831f192d8949fd6dfe375c6ff96a (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As atividades biológicas e farmacológicas dos biflavonoides são diversas incluindo suas propriedades imunossupressivas, anticancerígenas, antioxidantes, antiangiogênicas, antibacterianas, antivirais e antifúngicas. No presente estudo, avaliou-se a potencial capacidade do biflavonoide morelloflavona, isolada de Garcinia xanthochymus, em modular a expressão de HLA-G (Human Leukocyte Antigen- G), bem como seu potencial efeito quimiopreventivo. Inicialmente, foi avaliado o índice de morte celular causado pela morelloflavona por meio do ensaio de Anexina V - Iodeto de proídio em PBMC (Células mononucleares do sangue periférico), o qual apresentou índices de morte celular significantes. Através da citometria de fluxo observou-se um aumento da expressão de HLA-G vinculado à membrana celular em linhagens de melanoma (FON) (p < 0,001). Pôde-se observar a indução de HLA-G solúvel em linhagens de melanoma transfectada (M8-HLA-G1) (p < 0,001), sem alteração para os demais tipos celulares estudados, pelo ensaio imunoenzimático- ELISA. A expressão de RNAm de HLA-G também foi induzida pela morelloflavona, observada pela RT- PCR, em células de melanoma M8 que não expressam HLA-G constitutivamente. Ainda, foi avaliada a atividade quimiopreventiva da morelloflavona. Observou-se a duplicação da atividade da enzima quinona redutase na linhagem de hepatocarcinoma celular (Hepa1c1c7) por meio do ensaio quinona redutase. Pelo ensaio do cometa foi possível verificar a capacidade genotóxica e antigenotóxica. Em relação à antigenotoxicidade, a morelloflavona causou dano de DNA no pré-tratamento. No pós-tratamento foi observado que a morelloflavona pode ter a capacidade de reverter danos de DNA causados pelo peróxido de hidrogênio. Sendo assim, os dados demonstrados revelam que a morelloflavona induz a expressão de HLA-G e possui efeito quimiopreventivo. / The biological and pharmacological activities of biflavonoids are diverse, including their immunosuppressive, anticancer, antioxidant, antiangiogenic, antibacterial, antiviral and antifungal properties. In the present study we assessed the potential ability of morelloflavone, a biflavonoid isolated from Garcinia xanthochymus in modulating the expression of HLA-G (Human Leukocyte Antigen-G), as well as their potential chemopreventive effect. First, we measured the rate of cell death by morelloflavone using Annexin V - Propidium iodide assay in PBMC (peripheral blood mononuclear cells), which showed significant levels of cell death. By flow cytometry was observed the increased expression of HLA-G membrane bound in melanoma cells line (FON) (p < 0.001). Also, was observed the induction of HLA-G soluble in transfected melanoma cells line (M8-HLA-G1) (p < 0.001), with no change to other cell types studied by Enzyme-linked immunosorbent assay - ELISA. The expression of HLA-G mRNA was also induced by morelloflavone, observed by RT-PCR, in melanoma cells (M8) that do not express HLA-G constitutively. Still, we evaluated the chemopreventive activity of morelloflavone. We observed a doubling of quinone reductase enzyme activity in hepatocellular carcinoma cells line (Hepa1c1c7) by quinone reductase assay. By comet assay we were able to verify the genotoxic and antigenotoxic capacity. Regarding antigenotoxicity, morelloflavone caused DNA damage pre treatment. In the posttreatment was observed that morelloflavone may be capable of reversing DNA damage caused by hydrogen peroxide. Thus, the data show that morelloflavone induces the expression of HLA-G and has chemopreventive effect. / FAPESP: 09/52716-4 / CNPq: 140022/2010-4 / CAPES: 0103-110

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-08-02T12:22:03Z No. of bitstreams: 1 Josinete Angela da Paz.pdf: 3629787 bytes, checksum: dcb726d1e947c299c9912abf9504dab4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-02T12:22:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Josinete Angela da Paz.pdf: 3629787 bytes, checksum: dcb726d1e947c299c9912abf9504dab4 (MD5) Previous issue date: 2015-01-30 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The synthesis of some sampangine analogs was accomplished by using suitable natural and synthetic quinones, namely lapachol and nor-lapachol. These readily available compunds were functionalized by a sequence of O-methylation using dimethylsulfate in basic media, and chemoselective nucleophylic displacement with 2-aminoethanol and 3-aminopropanol. Further transformation of hydroxyl group in azide by a sequence involving tosylation results in the key intermediates. These 2-amino-ω-azido compunds were submitted to catalytic hydrogenation over palladium on charcoal yielding the corresponding quinoxaline and 1,4-diazepine nucleus. Some of these compounds were sequentially cyclized with the aid of DDQ to yield the corresponding tetracyclic analogs of sampagine alkaloids. All compounds were characterized by usual methods including proton and carbon-13 NMR, infrared. / Partindo-se de quinonas naturais e sintéticas facilmente disponíveis em nosso laboratório foi sintetizada uma série de 2-amino-quinonas intermediárias e derivados cíclicos nitrogenados, sendo alguns inéditos na literatura. Assim, a partir das 2-hidroxi-quinonas, lapachol e nor-lapachol obteve-se os correspondentes derivados 2-metoxilados via alquilação com sulfato de dimetila em meio básico. A seguir reagiram quimiosseletivamente com 2-etanolamina e 3-propanolamina, formando os amino-álcoois correspondentes. Através da sequência de tosilação seguida de substituição nucleofílica com azida de sódio, obteveram-se os azido compostos correspondentes, os quais são os intermediários-chave na síntese de análogos cíclicos do alcalóide natural quinonóide sampangina. Os azidos compostos, deram origem a novas quinoxalinas e diazepinas, quando submetidos a hidrogenação catalítica usando-se paládio sobre carvão que oxidadas com DDQ permitiram a ciclização da cadeia lateral prenílica originando um novo composto tetracíclico análogo da sampangina. Os rendimentos globais obtidos variaram de 58 a 91%. Os compostos foram caracterizados por espectroscopia de RMN 1H, RMN 13C, IV.

Orientador: Lauro Tatsuo Kubota / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-03T14:33:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Yamashista_Miyuki_D.pdf: 2691412 bytes, checksum: d9599fb74aa0c3831f9b0cd0b287a7d8 (MD5) Previous issue date: 2002 / Doutorado

Submitted by Biblioteca da Faculdade de Farmácia (bff@ndc.uff.br) on 2017-04-04T18:00:06Z No. of bitstreams: 1 Cardoso, Mariana Filomena do Carmo [Dissertação, 2012].pdf: 7461706 bytes, checksum: 1ba99c29719229ef773ca5d72b10c91f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-04T18:00:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cardoso, Mariana Filomena do Carmo [Dissertação, 2012].pdf: 7461706 bytes, checksum: 1ba99c29719229ef773ca5d72b10c91f (MD5) / Esse trabalho descreve uma nova metodologia sintética de novos derivados pirazólicos análogos a 2,2-dimetil-2,3-di-hidronafto[1,2-b]furan-4,5-diona (nor-β-lapachona), através da inserção do núcleo pirazólico a posição C-3 da nor-β-lapachona. Nesta dissertação foram sintetizados 16 (dezesseis) substâncias inéditas, sendo oito da família 3-pirazolil-2,2-dimetil-2,3-di-hidronafto[1,2-b]furan-4,5-diona contendo o núcleo pirazólico acoplado à naftoquinona os quais foram submetidos a testes biológicos para avaliação de suas atividades citotóxicas in vitro contra quatro linhagens de células tumorais humanas e uma linhagem de células normais humanas. Todas as amostras mostraram-se ativas para as linhagens tumorais e não apresentaram hemólise. A metodologia clássica para a substituição nucleofílica no carbono 3 da nor-β-lapachona desenvolvida pelo nosso grupo de pesquisa mostrou-se pouco eficaz, levando a baixos rendimentos com formação de vários produtos colaterais. Desta forma, realizou-se um estudo metodológico a fim de se viabilizar a síntese de uma família de 3-pirazolil-nor-β-lapachonas com rendimentos satisfatórios. Assim, após várias modificações nos parâmetros reacionais, observou-se que o melhor intermediário sintético era o 3-hidroxi-2,2-dimetil-2,3-di-hidronafto[1,2-b]furan-4,5-diona / This paper describes a new synthetic methodology to new pyrazole derivatives analogous to the 2,2-dimethyl-2,3-dihidronaphtho-[1,2-b]-furan-4 ,5-dione (nor-β-lapachone) by inserting the core pyrazolic on the C-3 position of the nor-β-lapachone. In this essay were synthesized 16 (sixteen) new compounds, being eight 3-pyrazolyl-2,2-dimethyl-2,3-dihidronaphtho [1,2-b]-furan-4 ,5-dione family containing core pyrazolic naphthoquinone attached to which were submitted to biological tests to evaluate their in vitro cytotoxic activities against four human tumor cell lines and normal human cell line. All samples were active for tumor cell lines and showed no hemolysis. The classical methodology for the nucleophilic substitution at carbon 3 of the nor-β-lapachone developed by our research group proved to be ineffective, leading to low yields with the formation of various side products. Thus, there was a methodological study in order to facilitate the synthesis of a family of 3-pyrazolyl-nor-β-lapachones with satisfactory yields. Then, after the various modifications on the reaction parameters, it was found that the better synthetic intermediate was the 3-hydroxy-2,2-dimethyl-2,3-dihidronaphtho-[1,2-b]-furan-4 ,5-dione

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:27:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 341241.pdf: 3543052 bytes, checksum: 36790c5c0f439dd829f9e8eaefb5aa21 (MD5) Previous issue date: 2016 / As neoplasias hematológicas, que incluem as leucemias agudas e o mieloma múltiplo compreendem um grupo heterogêneo de doenças originadas a partir da proliferação anormal e descontrolada de uma célula clonal neoplásica de origem hematopoiética. Não é incomum a observação de células neoplásicas que desenvolvem resistência aos fármacos utilizados e pacientes que apresentam morbidade associada ao uso de quimioterápicos. Dessa forma, há necessidade de se investigar novas estruturas para o desenvolvimento de fármacos que tenham maior eficiência em induzir morte apenas nas células tumorais, que sejam de fácil administração, que não causem resistência e com poucos ou insignificantes efeitos adversos. Duas classes de compostos, as sulfonamidas e as quinonas, são bastante relatadas na literatura com atividade citotóxica. Nessa perspectiva, este estudo objetivou investigar o efeito citotóxico de um grupo de sulfonamidas e de uma quinona (GE2, primina) sobre linhagens celulares de neoplasias hematológicas. Entre as 26 sulfonamidas avaliadas, pelo método do MTT, o composto DFS16 (N-(3,3-difenilpropil)-2,4-dinitrobenzenosulfonamida) foi o selecionado para os ensaios posteriores, por apresentar maior atividade citotóxica sobre as três linhagens celulares utilizadas nesse trabalho (K562, Jurkat e MM.1S). Os resultados desse estudo permitem sugerir que a sulfonamida DFS16 possui atividade citotóxica sobre células K562 e Jurkat pela indução de apoptose (observada na microscopia com brometo de etídio e laranjada de acridina, fragmentação de DNA e marcação com Anexina V) por meio da ativação das vias intrínseca e extrínseca, além do envolvimento de alterações do potencial de membrana mitocondrial. A ativação da via intrínseca nessas células parece estar relacionada com a diminuição da expressão da proteína Bcl-2 e aumento da expressão da proteína Bax. Além disso, a diminuição da expressão da proteína de proliferação celular Ki-67 e o aumento da expressão do fator indutor de apoptose, observados por citometria de fluxo, demonstram possível relação com o mecanismo de morte induzido pelo tratamento com DFS16 nas células Jurkat. A apoptose induzida pela sulfonamida DFS16 nas células MM.1S sugere que a ativação ocorre por uma via diferente daquelas investigadas nesse trabalho, sem relação com a sinalização de caspases e com o envolvimento do bloqueio na progressão do ciclo celular na fase G2/M. Os resultados encontrados para a quinona GE2 indicam que a apoptose possivelmente é ativada pelas vias intrínseca e extrínseca nas células K562, Jurkat e MM.1S, com diminuição do potencial mitocondrial, além de diminuição da expressão da proteína Ki-67. Assim como, a quinona GE2 apresentou excelente seletividade para as células neoplásicas quando comparado com o tratamento em células não neoplásicas. O conjunto de resultados sugere que os compostos DFS16 e GE2 são promissores protótipos para o estudo e desenvolvimento de novos fármacos para o tratamento de neoplasias hematológicas.<br> / Abstract : Hematological malignancies, including acute leukemias and multiple myeloma, comprise a heterogeneous group of diseases originated from an abnormal and uncontrolled proliferation of neoplastic clonal cells of hematopoietic origin. It is not uncommon to observe neoplastic cells that develop resistance to the used drugs, as well as patients with morbidity associated to chemotherapy. Thus, it is necessary to investigate new structures for the development of drugs that present higher efficiency and specificity in inducing tumor cells death, that are easy to administer, that do not cause resistance and that have little or negligible adverse effects. Two classes of compounds, sulfonamides and quinones, were reported in the literature with a wide range of pharmacological properties and among them, the antitumor activity. In this perspective, this study aimed to investigate the cytotoxic effect of a group of sulfonamides and a quinone (GE2, primina) on hematological malignancies cell lines. Among the 26 sulfonamides evaluated, by MTT method, the compound DFS16 (N-(3,3-diphenylpropyl)-2,4-dinitrobenzenesulfonamide) was selected for the further tests due to its higher cytotoxic activity against the three cell lines that were analyzed in this study (K562, Jurkat and MM.1S). The results suggest that sulfonamide DFS16 has cytotoxic activity against K562 and Jurkat cells by apoptosis induction (observed in ethidium bromide and acridine orange microscopy, DNA fragmentation and labeling with Annexin V) by the intrinsic and the extrinsic pathways, involving also the mithocondrial membrane potential. The activation of the intrinsic pathway in these cells appears to be related by decreased Bcl-2 expression and increased Bax expression. Furthermore, the decreased expression of the cellular proliferation protein Ki-67 and the increased expression of apoptosis-inducing factor, observed by flow cytometry, also appear to be related to the death mechanism induced by DFS16 in Jurkat cells. Apoptosis induced by sulfonamide DFS16 in MM.1S cells appear to be activated by a different pathway from those investigated in this work, i.e. no relation with caspase signaling and blocking the cell cycle progression at G2/M phase. The quinone GE2 appears to induce apoptosis by activation of the intrinsic and the extrinsic pathways in K562, Jurkat and MM.1S cell lines, and by decreasing the expression of Ki-67 protein. The results suggest that the compounds DFS16 and GE2 are promising molecules for the use in hematological malignancies therapy or as prototypes for the development of new chemotherapics.

Orientadores : Maria Edwiges Hoffmann, Anibal Eugenio Vercesi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-18T04:13:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinto_NadjaCristhinadeSouza_M.pdf: 7374799 bytes, checksum: 7c7af052807d27fd8393ba05ac080fc0 (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: A THO é uma hidroxiquinona que auto-oxida rapidamente em solução gerando radicais semiquinona e espécies ativadas de oxigênio, o que produz uma situação de estresse oxidativo. Neste trabalho, investigamos a participação~do íon Ca2+ no mecanismo de citotoxicidade da THO, e analisamos o possível papel do DNA e da mitocôndria como alvos celulares da ação~da THO. Demonstramos que a reação de auto-oxidação da THO causa efeitos tóxicos em células de mamíferos (linhagem V79), como i) a inibição da proliferação celular; ii) a fragmentação do DNA celular; e iii) a alteração da membrana mitocondrial interna. Estudos de proteção evidenciaram que a espécie oxidante responsável pelo efeito citostático e pelas alterações mitocondriais é o peróxido de hidrogênio, e que esses efeitos são provavelmente causados pela reação do H202 com os radicais semiquinona, gerando radicais hidroxila. Mostramos também que o íon Ca2+ tem um papel fundamental na citotoxicidade da THO, participando dos 3 mecanismos acima descritos. Enquanto que nos dois primeiros processos se observa uma potencialização dos efeitos da THO na presença de Ca2+ , a produção das alterações mitocondriais é completamente dependente de sua presença. Finalmente, evidenciamos que células V79 possuem mecanismos para reverter tanto as quebras de DNA quanto as lesões mitocondriais Isto sugere que a indução dessas lesões deverá interferir com o crescimento celular somente quando os sistemas celulares responsáveis por sua reversão estiverem saturados, caracterizando uma condição de irreversibilidade que conduz a morte celular / Abstract: THO is a hydroxyquinone wich autoxidases readily in aqueous solution producing semiquinone radicaIs and active oxygen species, that leeds to a condition of oxidative stress. In this work we describe the involvement of Ca2+ in the mechanism of THO induced Cytotoxicity and analyse the possible roles of DNA and mitochondria as critical targets for THO toxicity. Our studies show that during THO autoxidation deleterious effects are generated in mammalian fybroblasts (V79 line), such as i) inhibition of cell proliferationi ii) induction of DNA breaksi and iii) alteration of lnner mitochondrial membrane permeability. Protection experiments with antioxidants showed that both, growth inhibition and mitochondrial damage results from hydrogen peroxide dependent and metal independent reactions, probably via hydroxyl radical generation. We also report here the crucial role of Ca2+ on THO Cytotoxicity, increasing the inhibition of cell proliferation and the levels of DNA breakage. In addition, our results evidenciated that mitochondrial membrane THO results from a Ca2+ dependent mechanism. permeability by It is also showed that V79 cells are able to repair the THO induced DNA breaks and restore mitochondrial functions. It is hypothesized that irreversible oxidant injury occurs when the cellular antioxidant mechanisms ocerwhelmed and the cell is no longer able to survive / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas