Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This study was carried out at the Poultry Science Laboratory (LAVIC) of Federal University of Santa Maria (UFSM). The objective was to evaluate the antioxidant effect of canthaxanthin on diets with or without addition of carotenoids to breeding males. It was used a total of 48 White Plymouth Rock breed hens from the 48th to the 59th week of age in a completely randomized design in a factorial arrangement, with two ingredients (corn or sorghum), and two levels of canthaxanthin (0 mg/kg or 6 mg/kg) totaling four experimental diets with 12 repetitions, being each hen considered a repetition. The experimental phase was divided into 3 periods of 28 days, to evaluate the performance of the hens. The evaluated parameters were: body weight, food consumption, semen volume, sperm motility, sperm vigor, sperm concentration and fertility. All parameters, except the sperm concentration, were not affected by the diets. The sperm concentration was significantly affected by the ingredient corn and by the canthaxanthin supplementation in the third period (56th to 59th week of age). The use of sorghum is suggested in the diets of roosters with no need of canthaxanthin supplementation. Researches in breeding males and the use of new antioxidants may help in better reproductive rates in poultry. / O presente estudo foi conduzido no Laboratório de Avicultura (LAVIC) da Universidade Federal de Santa Maria (UFSM). O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito antioxidante da cantaxantina em dietas com ou sem adição de carotenoides para machos reprodutores avícolas. Foram utilizados 48 galos da raça White Plymouth Rock da 48ª a 59ª semana de idade, distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado em arranjo fatorial, com dois ingredientes (milho ou sorgo), e dois níveis de cantaxantina (0mg/kg ou 6mg/kg), totalizando 4 dietas experimentais com 12 repetições, sendo que, cada ave foi considerada uma repetição. A fase experimental foi dividida em 3 períodos de 28 dias, para avaliar o desempenho das aves. Os parâmetros avaliados foram: peso corporal, consumo alimentar, volume do ejaculado, motilidade, vigor espermático, concentração espermática e fertilidade. Todos os parâmetros avaliados, exceto a concentração espermática, não foram afetados pelas dietas. A concentração espermática foi afetada significativamente pelo ingrediente milho e pela a suplementação de cantaxantina no terceiro período (56ª a 59ª semana de idade). Sugere-se o uso de sorgo nas dietas de reprodutores avícolas sem a necessidade de suplementação de cantaxantina. Pesquisas em reprodução de machos e o uso de novos antioxidantes poderá contribuir em melhores índices reprodutivos na avicultura.

Made available in DSpace on 2016-05-17T16:51:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-26. Added 1 bitstream(s) on 2016-05-17T16:55:03Z : No. of bitstreams: 1 000858362.pdf: 1021113 bytes, checksum: 02b2cfecd7a9e23dece803944857347c (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os equinos e asininos pertencem à família Equidae e género Equus, por este motivo são considerados similares e tratados de forma equivalente em relação à fisiologia reprodutiva. A membrana plasmática do espermatozoide funciona como uma barreira física ao ambiente externo e a sua integridade estrutural está diretamente relacionada ao tipo e quantidade de lipídios que a compõem. Desta forma, este estudo teve como objetivos comparar perfil lipídico dos espermatozoides de jumentos e cavalos e comparar o perfil lipídico da membrana dos espermatozoides de jumentos antes e após os processos de criopreservação. No Experimento 1 comparamos o perfil lipídico da membrana espermática de jumentos e cavalos e foram identificados 101 íons lipídicos em cavalos e 105 em jumentos. Os asininos apresentaram maior abundância relativa em 18 íons. No Experimento 2 foram avaliadas as alterações do perfil lipídico da membrana espermática de jumentos durante o processo de criopreservação e observou-se perda de 14 íons lipídicos e 16 novos íons surgiram após os processos de criopreservação. De acordo com os resultados obtidos podemos concluir que a composição lipídica da membrana do espermatozoide de jumentos é diferente de cavalos e os processos de criopreservação levam a alterações na composição de fosfolipídeos da membrana plasmática de espermatozoides de jumentos / The horses and donkeys belong to the Equidae family and genus Equus, for this reason are considered similar and treated equivalently with respect to reproductive physiology. The plasma membrane of the sperm works as a physical barrier to the external environment and its structural integrity is directly related to the type and quantity of lipids that comprise it. Thus, this study aimed to compare the lipid profile of sperm donkeys and horses and compare the lipid membrane of the donkey sperm before and after cryopreservation processes. In Experiment 1 compared the lipid profile of the donkeys and horses sperm membrane and 101 lipid ions were identified in horses and 105 donkeys in. The donkeys had higher relative abundance in 18 ions. In Experiment 2 were evaluated changes in the lipid profile of the donkeys sperm membrane during the cryopreservation process and there was loss of 14 lipid ions and 16 new lipid ions arose after the cryopreservation processes. According to the obtained results we can conclude that the lipid composition of donkey sperm membrane is different from horses and cryopreservation processes lead to changes in the phospholipid composition of the plasma membrane of sperm donkeys / FAPESP: 2013/12838-9

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-11-06Bitstream added on 2014-06-13T20:24:15Z : No. of bitstreams: 1 atiquenetto_h_dr_jabo.pdf: 752417 bytes, checksum: 1940ba0e1342e275a0d75fb22bd55128 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O trabalho presente objetivou pesquisar a presença de Leptospira interrogans sorovar Canicola em 32 cães, dos quais 20 infectados e 12 controle, em 4 grupos de estudo com 5 infectados e 3 de controle. No G1 os animais foram eutanasiados 7 dias após a inoculação, no G2, 15 dias, no G3, 30 dias e no G4 45 dias. Colheu-se sêmen, urina e sangue nos dias 0, 3, 5, 7, 10 e após, a cada 5 dias, com realização de exames andrológicos do sêmen e bioquímicos da urina e do sangue, e reação em cadeia da polimerase (PCR) dessas amostras. Avaliou-se o estado clínico, e o soro sangüíneo foi submetido à soro-aglutinação microscópica (SAM). Os títulos sorológicos dos infectados chegaram a 2.560. Na PCR, detectou-se DNA de leptospiras primeiro no sêmen e depois na urina, e não se detectou nos testículos, epidídimos, próstata, rins e fígado. Na Levaditi, foi encontrada leptospira em um fígado, e no histopatológico, 5 animais com prostatite, evidenciada também pelo aumento do número de espermatozóides com a patologia cabeça isolada. O exame andrológico mostrou declínio na motilidade, no vigor, na concentração espermática e defeitos maiores acima de 10%. No hemograma, observou-se alterações a partir do dia 3 pós-infecção, e ao exame bioquímico a partir do dia 30, indicando possíveis alterações hepáticas e renais. Conclui-se que cães infectados com Leptospira interrogans sorovar Canicola apresentam queda na qualidade espermática, sendo importantes fontes de infecção para o homem e animais, podendo inclusive transmitir a leptospirose por meio de sêmen nos primeiros dias pós-infecção, antes da transmissão urinária, sendo detectada pela PCR anteriormente a SAM. / The present study aimed to investigate the presence of Leptospira interrogans serovar Canicola. in 32 dogs, of which 20 are infected and 12 control, 4 study groups with 5 infected and 3 of control. In G1 animals were euthanasing 7 days after inoculation, the G2, 15 days, the G3, 30 days in the G4 and 45 days. It is collected semen, urine and blood on days 0, 3, 5, 7, 10 and after, every 5 days, with laboratory tests of semen andrological and biochemical of urine and blood, and polymerase chain reaction (PCR ) Of these samples. Evaluated the clinical status, and serum was submitted to serum-microscopic agglutination (SAM). The serological evidence of infection arrived in 2560. In PCR, DNA was found in semen of leptospires first and then in the urine, and is not detected in testis, epididymis, prostate, kidney and liver. In Levaditi, was found leptospira in a liver, and the histopathology, 5 animals with prostatitis, evidenced also by increasing the number of sperm with the pathology head alone. The examination showed andrologic decline in motility, in effect, defects in sperm concentration and higher above 10%. In the blood, it was observed changes from day 3 post-infection, and the biochemical examination on the day 30, indicating possible kidney and liver abnormalities. It follows that dogs infected with Leptospira interrogans serovar Canicola present decrease in sperm quality, and important sources of infection for humans and animals, which may include forward to leptospirosis through semen during the first day post-infection, before urinary transmission, and PCR detected earlier by the SAM.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-05-14Bitstream added on 2014-06-13T20:04:31Z : No. of bitstreams: 1 lopes_wdz_dr_jabo.pdf: 1071597 bytes, checksum: d61e6ffa60481492021ac9df6eda129f (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Ovinos machos isentos de Toxoplasma gondii, foram distribuídos em três grupos sendo, G1: um ovino inoculado, pela via oral, com 2,0 x 105 oocistos da cepa P, G2: um ovino infectado, pela via subcutânea, com 1,0 x 106 taquizoítos da cepa RH e G3: um ovino não infectado mantido como controle. Após a inoculação dos machos com T. gondii, 12 ovelhas reprodutoras, não gestantes, sorologicamente negativas para doenças reprodutivas, sobretudo toxoplasmose, foram sincronizadas e em seguida expostas à monta natural pelos machos, anteriormente inoculados, sendo: cinco ovelhas submetidas à monta natural pelo macho do G1; cinco ovelhas expostas à monta natural pelo macho do G2 e duas ovelhas pelo macho pertencente ao grupo controle. Nos soros das ovelhas obtidos nos dias -30, -14, -7, -1, zero (antes da monta natural) e nos dias 1, 3, 5, 7, 11, 14 e semanalmente até o parto, foi pesquisada a presença de anticorpos contra T. gondii pela RIFI. Bioensaio em camundongos e PCR foram realizados em amostras de sêmen e tecidos dos machos, tecidos das fêmeas e de seus respectivos filhotes. Cinco das 12 fêmeas utilizadas apresentaram anticorpos específicos contra T. gondii após a monta natural, sendo duas pelo macho inoculado com oocistos (G1) e três pelo ovino infectado com taquizoítos (G2). Pelo bioensaio foi possível diagnosticar, no dia da monta natural, a presença do T. gondii em amostras seminais dos ovinos infectados (G1 e G2) e em amostras do “pool” de tecidos das cinco fêmeas e em cinco de seus respectivos filhotes. Foi possível, ainda, pela técnica da PCR isolar o DNA de T. gondii em amostras seminais dos machos reprodutores no dia do coito, e no “pool” de tecidos de uma e duas fêmeas expostas à monta natural por reprodutores infectados com oocistos e taquizoítos, respectivamente. É importante relatar que, por meio desta técnica foi possível diagnosticar... / Male sheep in reproductive age and with no prior Toxoplasma gondii disease, were divided into three groups: G1, a sheep inoculated with 2.0 x 105 of P strain oocysts; G2, a sheep infected with 1.0 x 106 of RH strain tachyzoites and; G3 a control uninfected sheep. After inoculation of males with T. gondii, 12 breeding ewes, not pregnant, serologically negative for reproductive diseases, particularly toxoplasmosis, were synchronized and then exposed to natural mating by those males, previously inoculated, being: five ewes submitted to natural mating by male G1, five ewes exposed to natural mating by the male of G2 and two ewes submitted to natural mating by the male control from group. In sera obtained from all ewes on days -30, -14, -7, -1, zero (before natural mating) and on days 1, 3, 5, 7, 11, 14 and weekly until partum, was investigated the presence of antibodies against T. gondii by IFAT. Bioassay and PCR were performed on samples of semen and tissues of males/females tissues and their offspring. Five of the 12 females submitted to natural mating, had antibodies anti-T. gondii, being, two by male inoculated with oocysts (G1) and three for sheep infected with tachyzoites (G2). For the bioassay was possible to diagnose on the day of natural mating, the presence of T. gondii in semen samples from infected sheep (G1 and G2) and in samples of pool of tissues from five females and five of their puppies. It was also possible by PCR to isolate the DNA of T. gondii in semen samples of rams on sexual intercourse, and the pool of tissues of one and two females exposed to breeding by natural mating infected with tachyzoites and oocysts, respectively. It is important to report that through this technique it was possible to diagnose the presence of this parasite also in the pool of tissue from the offspring of a female submitted to the natural breeding sheep infected with oocysts. From the results... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-03-03T11:52:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-11Bitstream added on 2015-03-03T12:06:58Z : No. of bitstreams: 1 000809199.pdf: 1446944 bytes, checksum: 5379752a42af00e2798af08df7c27195 (MD5) / Este trabalho teve como objetivos avaliar a utilização de GnRHm associada ao inibidor da dopamina, o metoclopramide (Ovopel® – D-Ala6,Pro9 Net-mGnRH) em três concentrações diferentes 1mg/kg (T1), 2 mg/kg (T2) e 4 mg/kg (T3) , na indução a espermiação de Brycon cephalus e, avaliar a eficiência de 2 soluções crioprotetoras: Bestlvile Thawing Solution (BTS®) e outra composta por leite em pó (Ninho fortificado Nestlé) + glicose e dos crioprotetores metilglicol e metanol (Sigma Aldrich) nas concentrações de 10 e 15%, na preservação dos espermatozoides de B. cephalus. Para tal, foram realizados dois ensaios, no primeiro foram testadas três diferentes dosagens hormonais de Ovopel®, aonde foram avaliados os parâmetros seminais: de volume seminal, motilidade espermática subjetiva, duração da motilidade, pH, osmolaridade e concentração espermática. Após análise dos dados verificou-se que o tratamento T3 (4,66±1,52mL) apresentou maior volume seminal e valor significativamente diferente dos outros tratamentos e do controle (2,37±1,14 mL). Quanto a motilidade espermática apresentou percentual elevado (Nível 5; 80 a 100% ) nos tratamentos T2 e T3, em relação a T1 e ao controle que teve (Nível 4; 61-80%). Em relação à duração d motilidade espermática, o tratamento 3 apresentou duração de motilidade significativamente menor (22±5s), em relação aos outros tratamentos e ao controle. As dosagem hormonal de 2 mg/kg de Ovopel®, ser a mais indicada para indução hormonal de machos de B. cephalus, pela manutenção dos parâmetros de qualidade seminal. Para o segundo ensaio, foram utilizados seis exemplares adultos de B. cephalus. O sêmen coletado foi avaliado através dos parâmetros seminais e posteriormente foi realizado teste de toxidade das soluções crioprotetoras. Após isso, o sêmen foi diluído na proporção de 1:5 (sêmen:diluente), envasado em palhetas 0,5 ml (IMV) e congelado em vapores de ... / The objective of this study was to evaluate the use of Ovopel ® associated with an inhibitor of dopamine in inducing spermiation and evaluate the efficiency of cryoprotectant solutions using cryoprotectants such as methyl glycol, methanol , Bestlvile Thawing Solution ( BTS ® ) and powdered milk preservation the sperm of B. cephalus . For this purpose, two tests were conducted , the first consisted of 20 adult male B. cephalus in which the application was tested in three different dosages of hormonal Ovopel ® , 1mg/kg (T1), 2 mg / kg (T2), and 4 mg / kg (T3) and control group (saline) . Seminal volume, subjective sperm motility, duration of motility, pH, osmolarity and sperm concentration: Following the analysis of seminal parameters was performed. Treatment 3 (4.66 ± 1.52 mL) showed higher semen volume compared to control (2.37 ± 1.14 mL). Sperm motility showed high percentage in treatments 2 and 3, with level 5 (81-100 %) compared to the control that had scale 4 (61-80 %). Regarding the duration of sperm motility, treatment 3 had the lowest duration of motility with 22 ± 5 seconds, compared to the other treatments and control . Hormone levels 2 and 4mg/kg of Ovopel ®, demonstrated through the analysis of seminal parameters, are most appropriate for hormonal induction of males of B. cephalus, because they have better semen quality . In the second trial cryoprotectant solutions were evaluated : The 5.4 - g glucose 15 g whole milk powder ( fortified Nestle Nest ) ; B - 5g Bestlvile Thawing Solution (BTS ®) Minitub ®) in 10 or 15 mL of methanol and methyl cellosolve internal cryoprotectant . For this purpose, six adult specimens of B. cephalus were used. The collected semen was evaluated by semen parameters and was subsequently performed toxicological testing of cryoprotectant solutions. After that, the semen was diluted at a ratio of 1:5 (semen: diluent), packaged in 0.5 ml straws (IMV) and frozen in liquid nitrogen vapor and then ...

Orientador: José Antonio Dell'Aqua / Banca: Marco Antonio Alvarenga / Banca: André Maciel Crespilho / Resumo: O objetivo do presente estudo foi comparar a viabilidade e fertilidade do sêmen refrigerado bovino diluído em meio diluidor comercial Botu Bov® com e sem crioprotetor glicerol a 5°C por 24 horas em sistema passivo de refrigeração Botu Flex® e comparados com amostras congeladas. Foram realizadas analises dos padrões de cinética espermática pelo CASA e viabilidade celular pela Citometria de Fluxo. Para o teste de fertilidade foram utilizados pool de 3 touros da raça Nelore, com idade média de 30 meses em programas de IATF. Os ejaculados foram divididos em 3 grupos experimentais de acordo com o meio diluidor, sendo Grupo (BB c/ crio), diluidor Botu Bov® com 7% de glicerol à 5°C/24horas; Grupo (BB s/ crio) diluidor Botu Bov® sem glicerol à 5°C/24horas; Grupo (BB) sêmen congelado com Botu Bov® com 7% de glicerol. Para o teste de fertilidade foram inseminadas 762 vacas da raça Nelore (Bos taurus indicius) em programas de IATF de forma randomizada: sendo 278 para (BB c/ crio), 268 para (BB s/ crio) e 216 para (BB). Os índices de concepção foram de 51%a,44%ab e 41%b respectivamente para (BB c/ crio), (BB s/ crio) e (BB) (p< 0,05). A partir dos resultados alcançados pode-se concluir que houve uma melhor preservação espermática das amostras mantida sob refrigeração com crioprotetor glicerol à 5°C/24horas, quando comparado com a amostra congelada. Esses resultados promovem a perspectiva da maximização de touros da fazenda utilizados em monta natural e animais geneticamente superiores que não apresentam índices de congelabilidade satisfatórios serem utilizados como doadores de sêmen em programas de IATF / Abstract: Not available / Mestre

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da utilização da associação do butafosfan e da vitamina B12 (Catosal B12®) na qualidade do sêmen fresco e refrigerado de garanhões. Foram utilizados quatro garanhões divididos aleatoriamente em dois grupos, A e B, cada um com dois garanhões. Um dos grupos serviu como controle e o outro como grupo tratado. Como tratamento utilizaram-se duas aplicações intramusculares de 5 ml /100 kg PV de Catosal por semana. O projeto se dividiu em 4 etapas de 84 dias cada uma. Na primeira etapa o grupo A foi tratado enquanto que o grupo B serviu de controle. Na segunda etapa ambos os grupos deixaram de ser tratados. Na terceira etapa se inverteram os grupos, sendo o B tratado e o A controle. Finalmente na quarta etapa, nenhum dos grupos foi tratado. Imediatamente após a coleta o sêmen foi avaliado e diluído a uma concentração final de 25 x 10 6 de espermatozoides por mililitro. O sêmen fresco e refrigerado a 5ºC foi avaliado quanto a numero total de espermatozoides, motilidade total e progressiva, vigor, morfologia, funcionalidade (HOS test) e integridade de membrana (CFDA/PI staining). Foi realizada ANOVA e as médias pelo teste de Tukey. Não se observaram diferenças significativas entre os grupos tratados e os controles em nenhum dos parâmetros espermáticos avaliados tanto no sêmen fresco quanto no sêmen resfriado. Tampouco foram detectadas interações entre os garanhões para nenhum dos parâmetros observados. O uso prolongado de Catosal intramuscular não teve efeitos negativos e pode ser utilizado com segurança, em garanhões destinados á reprodução. O tratamento intramuscular com Catosal nas doses administradas e recomendadas pelo fabricante, durante 84 dias, não alterou a qualidade do sêmen fresco ou refrigerado por 24 horas dos garanhões jovens e férteis. / The objective of this study was to evaluate the action of butaphosphan, in combination with vitamin B12 (Catosal B12®) on the quality of fresh and cooled stallion semen. Four healthy stallions were randomly assigned to two groups A and B (n=2 per group). One acted as control group and the other one as treatment group. The treatment consisted in two intramuscular applications of 5 ml / 100 kg PV of Catosal per week following the manufacturer’s doses recommendations. The project was divided in 4 stages of 84 days. In the first stage group A was treated while group B was the control. After that both groups were not treated allowing a washout period for the treated group. Then, the groups were reversed, group B was treated and group A acted as a control. Finally in the last 84 days both groups were kept without any treatment. Semen was diluted to 25 million sperm/mL and evaluated for total sperm count, total and progressive sperm motility (light microscopy), membrane integrity (CFDA/PI staining) and membrane functionality (HOS test) at 0 and 24 hours after preservation at 5º C. Data were analyzed by one way ANOVA and means compared by the Tukey test at 5% level of significance. Experimental endpoints were analyzed to compare the values for the treated stallions in the period of time between the sixty and eighty-four days of treatment versus the same stallions without treatment. No significant differences between treatment and control groups were detected for any of the sperm parameter evaluated in this study. No interactions between stallions were detected. Results show that the use of Catosal for 84 days in the given doses does not alter fresh and cooled semen quality of the young and fertile stallions.

A inseminação artificial é utilizada como uma importante ferramenta para o melhoramento reprodutivo, tanto com sêmen resfriado ou congelado. O primeiro experimento teve como objetivo identificar um tampão de pH para resfriamento de sêmen de pôneis por 48 horas a 5°C e 15°C. O efeito de cinco tampões (TES (ácido N-tris (hidroximetil) metil-2-aminoetanosulfônico), PIPES (ácido piperaxín-N,N'-bis(2-etanosulfônico)), BES (ácido N,N-Bis(2-18hidroxietil)-2-aminoetanosulfônico), MES (ácido 4-morfolinoetanosulfônico) e HEPES (ácido N-2-hidroxietilpiperazina-N’-2-etanosulfônico)) foi avaliado em um diluente composto de leite em pó desnatado e glicose. Os testes do diluente com os tampões BES, MES e TES foram conduzidos com o sêmen fresco de oito pôneis e no sêmen resfriado por 48 h a 15°C. Uma amostra de cada grupo foi utilizada para análise da motilidade, pH, osmolaridade, teste hiposmótico, atividade mitocondrial (MTT) e integridade de membrana através das sondas fluorescentes. O pH e a osmolaridade dos diluentes sem o sêmen também foram avaliados. Os dados foram analisados por análise de variância e pelo teste de Tukey, quando P < 0.05 foi significante. A osmolaridade do sêmen diluído não variou entre diluentes e foi para o BES 350.91 ± 11.24 mOsm, MES 350.41 ± 11.76 mOsm e TES 350 ± 12.96 mOsm. O pH do sêmen após diluição nos respectivos diluentes variou entre as horas avaliadas (P < 0.05) e não variou com o passar do tempo o que evidencia o efeito tamponante dos diluentes. A osmolaridade dos diluentes foi similar entre os tampões BES (366 ± 5.47 mOsm), MES (370 ± 6.12 mOsm) ou TES (371 ± 5.47 mOsm) a fresco e sem adição de sêmen. Já o pH variou (P < 0.05) de acordo com o tampão. No experimento a 5°C ocorreu decréscimo na porcentagem de motilidade total, progressiva e local do sêmen resfriado após 24 h e 48 h comparado a avaliação a fresco em todos os grupos. No entanto, a porcentagem de espermatozoides móveis a fresco, 24 h e 48 h a 5°C entre tratamentos foi similar. A porcentagem de espermatozoides reativos ao teste hiposmótico, e com atividade mitocondrial não diferiu entre tratamentos. No experimento a 15°C o vigor e motilidade total, progressiva e local foram similares entre os tampões BES, MES e TES em cada período avaliado. A osmolaridade do sêmen diluído não variou entre diluentes e foi para o BES 360.93 ± 10.52 mOsm, MES 361.47 ± 6.79 mOsm e TES 361.56 ± 7.68 mOsm. Devido as características individuais de cada tampão o pH do sêmen diluído variou entre os diluentes com os tampões utilizados. A porcentagem de espermatozoides reativos ao teste hiposmótico, com atividade mitocondrial e membrana intacta observada com CFDA e PI não diferiu entre tratamentos. Evidenciou-se que tanto BES, MES ou TES podem ser utilizados no armazenamento e transporte do sêmen de pôneis durante 48 h a 5°C ou 15°C. O segundo experimento teve como objetivo foi avaliar a influência da suplementação de ácidos graxos poli-insaturados sobre a qualidade de sêmen de pôneis da raça Brasileira a fresco e após congelamento. Oito pôneis receberam sua dieta convencional não suplementada (grupo controle) ou dieta convencional e 70 g de farinha de alga Schizochytrium sp rica em DHA (grupo PUFA). O efeito da Vitamina E (1 mM, DL-α-tocoferol), adicionada ao diluente de congelamento para sêmen também foi avaliado sobre a qualidade seminal, antes e após o congelamento do sêmen. O sêmen foi coletado a cada 15 dias durante 60 dias. Os garanhões tratados passaram a controle e vice-versa após um intervalo de sessenta dias. O sêmen foi avaliado a fresco e após o congelamento. Motilidade e vigor foram avaliados a fresco. Após o descongelamento motilidade, funcionalidade de membrana, integridade de membrana e análise computadorizada da motilidade foram avaliados. Os valores médios para os parâmetros avaliados a fresco no grupo PUFA e controle foram similares. Os valores médios da motilidade total, progressiva e local, hiposmótico, CFDA/PI e análise computadorizada de sêmen suplementados com DHA e o grupo controle pós-descongelamento não diferiram. A associação da suplementação de DHA e Vitamina E adicionada ao diluente não potencializou a capacidade antioxidante do diluente durante o congelamento. A associação da suplementação de DHA e Vitamina E adicionada ao diluente resultou em diminuição da motilidade total e progressiva comparada ao grupo não suplementado (controle). A suplementação de 70 g de farinha de alga Schizochytrium sp rica em DHA e ou a inclusão de 1 mM de vitamina E ao diluente de congelamento de sêmen em pôneis da raça Brasileira não foi eficiente para promover melhoria na viabilidade seminal após a coleta ou mesmo após o congelamento. / Artificial insemination with cooled and frozen semen is an important tool for breeding industry. The first experiment aimed to identify a pH buffer for cooling semen of ponies for 48 h at 5°C and 15°C. The effect of five buffers (TES (N-tris (hydroxymethyl) methyl-2-aminoethanesulfonic acid), PIPES (piperaxin-N, N'-bis (2-ethanesulfonic acid)), BES (N, N-Bis (N-2-hydroxyethylpiperazine-N'-2-ethanesulfonic acid)) was evaluated in a extender composed of skimm milk powder and glucose. Analysis with the BES, MES and TES buffers were performed in fresh semen of eight ponies and in cooled semen for 48 h at 15°C. A sample from each group was used for analysis of motility, pH, osmolarity, hyposmotic test, mitochondrial activity (MTT) and membrane integrity through fluorescent probes. The pH and osmolarity of the extenders without semen were also evaluated. Data were assessed by analysis of variance and Tukey's test, when P <0.05 was considered significant. Osmolarity of the diluted semen did not differ between extenders and was for BES 350.91 ± 11.24 mOsm, MES 350.41 ± 11.76 mOsm and TES 350 ± 12.96 mOsm. The pH of the semen after dilution in the respective extenders varied between the hours (P <0.05) and did not change over time as evidenced by the buffering effect of the extenders. Extender osmolarity was similar between BES (366 ± 5.47 mOsm), MES (370 ± 6.12 mOsm) or TES (371 ± 5.47 mOsm) buffers after dilution and without addition of semen. The pH varied (P <0.05) according to the buffer. In the experiment at 5°C all treatments showed a decrease in the percentage of total, progressive and local motility of the cooled semen after 24 h and 48 h compared to the fresh. However, in the percentage of motile sperm to fresh, 24 h and 48 h at 5°C between treatments was similar. Percentage of spermatozoa reactive to the hyposmotic test, and with mitochondrial activity did not differ between treatments. In the experiment at 15°C total, progressive and local vigor and motility were similar between BES, MES and TES buffers in each period. Osmolarity of the diluted semen did not differ between extenders and was for BES 360.93 ± 10.52 mOsm, MES 361.47 ± 6.79 mOsm and TES 361.56 ± 7.68 mOsm. Due to the individual characteristics of each buffer, diluted semen pH varied between the extenders with the buffers used. Percentage of spermatozoa reactive to the hyposmotic test, with mitochondrial activity and intact membrane observed with CFDA and PI did not differ between treatments. We concluded that BES, MES or TES can be used in the storage and transport of ponies semen for 48 h at 5°C or 15°C. The second experiment aimed to evaluate the influence of polyunsaturated fatty acid supplementation in the fresh and after freezing semen of Brazilian ponies. Eight ponies received their conventional diet (control group) or conventional diet and 70 g of DHA-rich Schizochytrium sp algae meal (PUFA group). The effect of Vitamin E (1 mM, DL-α-tocopherol) added to the freezing diluent for semen was also evaluated on seminal quality, before and after freezing. Semen was collected every 15 days during 60 days. Stallions were reversed in treatments after an interval of sixty days. Semen was evaluated fresh and after freezing. Motility and vigor were estimated in the fresh semen. After thawing motility, membrane functionality, membrane integrity and computed motility analysis were evaluated. Mean values for fresh parameters evaluated in the PUFA and control groups were similar. Mean values of total, progressive and local motility, hyposmotic, CFDA/PI and computerized analysis of semen supplemented with DHA and post-thaw control group did not differ. The combination of DHA and Vitamin E supplementation added to the diluent did not potentiate the antioxidant capacity of the diluent during freezing and resulted in decreased total and progressive motility compared to the non-supplemented group. Supplementation of 70 g of DHA-rich microalgae Schizochytrium sp and the addition of 1 mM vitamin E to the semen freezing diluent in Brazilian ponies was not efficient to promote improvement in seminal viability after collection or even after freezing.

Orientador: Marion Burkhardt de Koivisto / Banca: Letícia Zoccolaro Oliveira / Banca: Lindsay Unno Gimenes / Resumo: O objetivo deste trabalho foi verificar as alterações que ocorrem nas células espermáticas durante o processo de criopreservação nas diferentes subespécies Bos taurus e Bos indicus. Analisou-se o ejaculado de 20 animais (10 de cada subespécie) quanto à motilidade, morfologia espermática, integridade de membrana plasmática e acrossoma, peroxidação lipídica, condensação da cromatina e morfometria da cabeça do espermatozoide no sêmen fresco e após criopreservação/descongelamento. Nas avaliações com sêmen fresco, a subespécie Bos taurus mostrou resultados de motilidade superior quando comparada aos zebuínos (68,00%±6,32% e 63,00%±4,83% respectivamente, p<0,05). Os animais europeus mostraram melhor congelabilidade do sêmen, pois seus espermatozoides, de maneira geral, foram menos afetados pelo processo de criopreservação (B. taurus - Motilidade (%): 38,00±7,88, HIPO (%): 40,4±6,45, Área: 11556,14±2055,46, Perímetro: 25,17±1,87, Largura: 5,22±0,96, Fourier 2: 7867,27±1965,47; B. indicus - Motilidade: 30,00±4,71, HIPO: 27,5±6,98, Área: 12416,06±2232,06, Perímetro: 26,02±2,02, Largura: 5,31±0,97, Fourier 2: 8536,77±2058,21). Foi observado que a criopreservação causa danos em todas as estruturas espermáticas, independentemente da subespécie, indicando que avanços nesta técnica ainda são necessários / Abstract: This study aimed to verify the changes that occur in sperm cells during the process of cryopreservation between the different subspecies Bos taurus and Bos indicus. Semen from 20 animals (10 of each subspecies) fresh and after cryopreservation / thawing, were analyzed for motility, sperm morphology, plasma membrane and acrosome integrity, lipid peroxidation, chromatin condensation and sperm head morphology. The fresh semen evaluations results of the subspecies Bos taurus showed higher motility when compared to Zebu (68.00% ± 6.32% and 63.00% ± 4.83% respectively). European animals showed better freezability semen, in general, because their sperm were less affected by the cryopreservation process (B. taurus - Motility (%): 38.00 ± 7.88, HYPO (%): 40.4 ± 6.45, Area : 11556.14 ± 2055.46, Perimeter: 25.17 ± 1.87, Width: 5.22 ± 0.96, Fourier 2: 7867.27 ± 1965.47;1 B. indicus - Motility: 30.00 ± 4.71, HYPO: 27.5 ± 6.98, area: 12416.06 ± 2232.06, Perimeter: 26.02 ± 2.02, Width: 5.31 ± 0.97, Fourier 2: 8536.77 ± 2058.21). It was observed that cryopreservation damages all sperm structures, regardless of subspecies, indicating that improvements in this technique are still needed / Mestre

Made available in DSpace on 2016-08-15T20:30:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LeonardoLMC_DISSERT.pdf: 1176741 bytes, checksum: cae29c28ee7539a3660b0db230755381 (MD5) Previous issue date: 2010-08-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / We evaluated the Thermoregulation of the scrotum associated with quality semen of goats grazed in the meteorological conditions of the semi-arid. 10 goats were used. There were 5 observations, with four days of interval. Five groups were formed, each group was collected in different hours (8am, 10am, 12pm, 2pm and 4pm). The skin surface body temperatures (SSBT) and the scrotum (ST), respiratory rate and rectal temperature were recorded. Heat loss by cutaneous evaporation was measured from the H2O/CO2 analyzer, in the body was used a vented cap and in the scrotum was developed a ventilated capsule adapted for that region. The area of scrotum was determined through analysis of regression. Semen was collected via an artificial vagina and evaluated macro-and microscopically. Irradiance, wind speed, air, wet bulb and black globe temperatures were recorded. The Statistical analysis was based on the method of least squares. For analysis of quality of the semen it was used a 5x5 Latin square design. The SSBT 34.5 ±0.92ºC and ST was 33.5 ±0.36ºC, showing a difference of 1ºC between those regions. The latent heat loss was 57.3 ±18.0 W.m-2 for body surface and 49.4 ±15.0 Wm-2 to the scrotum. Semen samples were considered of good quality at all times and days of collection. The conclusion was that the difference between the surface temperatures derive from a combination of mechanisms which involve thermoregulation of the scrotum, and the animals can be utilized for breeding at any time of the day. / Avaliou-se a Termorregulação da bolsa escrotal associada à qualidade do sêmen de caprinos manejados nas condições meteorológicas do semiárido. Foram utilizados 10 caprinos. Foram realizadas 5 observações, com 4 dias de intervalo entre elas. Formou-se 5 grupos, onde cada grupo era coletado em horas distintas (8, 10, 12, 14 e 16h). As temperaturas da superfície cutânea do corpo (TSPSC) e da bolsa escrotal (TSPBE) e retal e freqüência respiratória foram registradas. A perda de calor por evaporação cutânea foi mensurada a partir do analisador de H2O/CO2, no corpo foi utilizada uma cápsula ventilada e na bolsa escrotal foi desenvolvida uma cápsula ventilada adaptada para esta região. A área da bolsa escrotal foi determinada através de análise de regressão. O sêmen foi colhido através de uma vagina artificial e avaliado macro e microscopicamente. Foram registradas a irradiância, velocidade do vento e temperaturas do ar, do bulbo úmido e do globo negro. A análise estatística foi baseada no método dos quadrados mínimos. Para análise da qualidade do sêmen foi utilizado um delineamento quadrado latino 5x5. A TSPSC 34,5 ±0,92ºC e TSPBE foi 33,5 ±0,36ºC, demonstrando diferença de 1 ºC entre estas regiões. A perda de calor latente foi de 57,3 ±18,0W.m-2 para a superfície do corpo e de 49,4 ±15,0 W.m-2 para a bolsa escrotal. O semên foi considerado de boa qualidade em todos os horários e dias de coleta. Cocluiu-se que a diferença ente as temperaturas de superfícies deriva de uma associação de mecanismos que envolve a termorregulação da bolsa escrotal e que os animais podem ser utlizados para reprodução a qualquer hora do dia.