Orientadora : Profª. Drª. Maria da Graça Bicalho / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Genética. Defesa: Curitiba, 24/04/2009 / Inclui bibliografia / Desde a descoberta do sistema de histocompatibilidade a literatura específica tem relacionado genes envolvidos com a resposta imune, como os do sistema HLA para um melhor prognóstico do transplante. Contudo, outros genes não HLA podem estar também influenciando, como por exemplo, os genes codificantes de receptores semelhantes à Imunoglobulina das células Natural Killer (KIR). A descoberta que receptores semelhantes à Ig (KIR) das células NK interagem com epítopos geneticamente polimórficos em moléculas HLA classe I, e que o repertório próprio de receptores KIR é geneticamente variável, levou à investigação da relevância do sistema KIR para transplante de células progenitoras hematopoiéticas. A cura dos pacientes com leucemias e outras doenças malignas hematológicas após o Transplante de Medula Óssea (TMO) alogênico tem sido atribuída, em parte, à capacidade das células imunes do doador, presentes no enxerto, reconhecerem e eliminarem as células neoplásicas do paciente. A ação citotóxica das células NK é mediada por interações entre receptores de superfície celular e moléculas HLA de classe I específicas na superfície da célula alvo. A ausência de ligantes HLA I específicos na superfície da célula alvo para receptores KIR inibidores pode levar a aloreatividade das células NK do receptor contra células do aloenxerto (hipótese .missing-self.). Esta ausência do ligante específico é denominada em vários estudos como .Incompatibilidade KIR-Ligante.. No presente estudo foi analisada, através da técnica de tipagem PCR-SSOP, a presença/ausência de 16 genes KIR, os genótipos e haplótipos KIR de 39 famílias de pacientes com doenças hematopoiéticas e, uma comparação foi realizada com dados de uma amostra da população paranaense. Foi realizada também a tipagem do locos HLA-Cw, conhecido por ser um dos ligantes específicos de KIR, e, com base no genótipo KIR de potenciais doadores no núcleo familiar e genótipos HLA-Cw do paciente desenvolveu-se um modelo teórico com o grupo de 11 pacientes LMA para escolha de duplas doador/receptor baseando-se na incompatibilidade KIR-ligante. Neste estudo foi desenvolvido também um modelo de banco de dados que descreve as características gerais, como grupo racial, sexo, idade e doença de base. As freqüências da presença/ausência dos genes KIR foram semelhantes às freqüências observadas em populações européias, o que seria de se esperar considerando-se a predominância de Brancos euro-descendentes na região Sul do Brasil. Os genes de moldura KIR3DL3, KIR3DP1, KIR2DL4 e KIR3DL2 foram positivos em todas as amostras. A comparação do repertório KIR entre pacientes, irmandades e pais de pacientes com indivíduos controles normais pertencentes ao banco de dados do LIGH, revelou na amostra paciente que os genes inibidores KIR2DL2 (p=0,0005) e KIR2DL5 (p=0,0067), bem como os genes ativadores KIR2DS1 (p=0,0013), KIR2DS2 (p=0,0038), KIR2DS3 (p=0,0153) apresentaram diferenças significativas (p<0,05). No presente estudo, observamos uma maior freqüência de haplótipos A nos grupos analisados. Entre os 39 pacientes observamos 59% haplótipos A vs 41% haplótipos B; na irmandade 62% vs 38% e entre os pais, 57% vs 43% No que se refere à distribuição e comparações de genótipos entre pacientes e controles, observamos que os homozigotos AA (p=0,0463) e heterozigotos AB (p=0,0282) apresentaram diferenças significativas. Tais achados merecem ser interpretados com ampliação do tamanho amostral em novos estudos investigativos.

Orientador: Maria de Fatima Sonati / Texto em portugues e ingles / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-25T22:14:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Wenning_MarciaReginadeSouzaCossa_M.pdf: 14873291 bytes, checksum: a0e561ff18e15096a84204c0f2c4c2a0 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Para identificar as mutações presentes nos genes da globina a da população do Sudeste Brasileiro, foram estudados 7 pacientes com Doença da Hb H e 27 indivíduos com alterações estruturais de cadeia a. A metodologia envolveu a reação em cadeia pela polimerase (PCR), a análise com enzimas de restrição e o sequenciamento direto de DNA. Os pacientes com Hb H, caucasóides. revelaram os seguintes genótipos: -(a)20.5/- a3.7 (2 casos), -- MED/-a3.7 (1 caso), -- MED/aHpha (1 caso) e a interação da deleção -a3.7 com uma forma incomum de talassemia a, não-delecional [-?3.7/(aa)T] (3 casos) Entre as alterações estruturais encontradas estão as Hbs Hasharon (a47AspaHis) (15 caucasóides), J-Rovigo (a 53AlaaAsp) (4 caucasóides), Stanleyville-II (a78AsnaLis) (3 negróides e 1 caucasóide), G-Pest (a74 AspaAsn) (lnegróide), Kurosaki (a7LisaGlu) (l caucasóide), Westmead (al22HisaGln) (1 caucasóide) e Campinas (a26AlaaVal) (1 caucasóide), uma variante não descrita previamente. As Hbs Hasharon e Stanleyville-II foram encontradas em associação com a deleção -a3.7 . Foram determinadas pela primeira vez as bases moleculares das Hbs J-Rovigo, Stanleyville-II, G-Pest e Kurosaki (GCCaGAC, AACaAAA, GACaAAC, AAGaGAG, respectivamente). Embora as hemoglobinopatias sejam freqüentes, pouco se sabe sobre as alterações dos genes a que acometem a população brasileira. As mutações aqui detectadas refletem a importante contribuição italiana e africana na população desta região do Brasil e indicam a presença de formas não-delecionais de talassemia a, bem como de variantes estruturais raras / Abstract: In order to identify the a-globin gene mutations present in the population of southeastern Brazil, 7 unrelated Hb H disease patients and 27 individuals with a-chain structural alterations were studied. Methodology involved PCR, restriction enzyme analyses and DNA direct sequencing. Among the Hb H patients, all Caucasians, 2 showed the -(a)20.5/ -a3.7 genotype, 1 the --MED/-a3.7, 1 the --MED/a Hpha, and 3 the interaction of the - a3.7 deletion with an unusual a-thalassemia, non-deletional [-a3.7/(aa)T]. The structural alterations were the Hbs Hasharon (a47AspaHis) (15 Caucasians), J-Rovigo (a53AlaaAsp) (4 Caucasians), Stanleyville-II (a78AsnaLys) (3 Blacks and 1 Caucasian), G-Pest (a74AspaAsn) (1 Black), Kurosaki (a7LysaGlu) (1 Caucasian), Westmead (al22HisaGln) (1 Caucasian) and Campinas (a26AlaaVal) (1 Caucasian), a variant not previously described. The Hbs Hasharon and Stanleyville-II were found in association with the -a 3 .7 deletion The molecular bases of Hbs J-Rovigo, Stanleyville-II, G-Pest and Kurosaki were determined (GCCaGAC, AACaAAA, GACaAAC, AAGaGAG, respectively). Although hemoglobinopathies are frequent in Brazil, very little is known about the a-globin gene alterations. The deletions and the most prevalent structural alterations found here reflect the Italian and African contribution to the population of this region of Brazil and indicate the presence of non-deletional a thalassemia, as well as rare variants / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Antonio Sergio Ramalho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T23:55:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gomes_RaquelRibeiro_M.pdf: 1313378 bytes, checksum: 1cbaa9198f43434595775fd6ceb3f2e7 (MD5) Previous issue date: 1988 / Resumo: A hemoglobinopatia SC é a segunda síndrome falcêmica mais importante no Brasil, devido à sua significativa prevalência entre negróides e também pelas manifestações clínicas apresentadas Apesar disso, ela tem sido pouco estudada em nosso país, não existindo na literatura nacional nenhum trabalho específico sobre essa doença. No presente trabalho, procurou-se investigar o significado médico da doença SC no Estado de são Paulo, analisando-se dois tipos de casuísticas de pacientes SC. Em um deles, a doença SC foi investigada sistematicamente em uma grande amostra de pacientes negróides, verificando-se a morbidade da doença SC em termos relativos. Para tanto, foram examinadas 1000 amostras de sangue de pacientes negróides que procuraram atendimento médico no Hospital das Clínicas da UNICAMP, as quais foram submetidas a um teste de solubilidade para a hemoglobina S e à eletroforese de hemoglobinas em pH alcalino. Já no outro tipo de casuística , a morbidade da doença SC foi avaliada em termos absolutos , analisando-se as manifestações clínicas de uma amostra de 35 portadores dessa doença. Os resultados obtidos permitiram as seguintes conclusões: l - A hemoglobinopatia SC possui significativa morbidade em negróides paulistas , sendo encontrada entre doentes que freqüentam um hospital-escola em proporção significativamente superior à esperada casualmente na população negróide da mesma área geográfica; 2 - A prevalência de heterozigotos se é particularmente importante em amostras de pacientes negróides com determinadas manifestações clínicas, como dores ósteo-articulares, anemia e úlceras de membros inferiores; 3-.As dores ósteo-articulares constituem o principal motivo de diagnóstico da doença se em nosso meio, sendo um dos sintomas mais freqüentes dessa doença em nossos pacientes 4- Cerca de 77% dos nossos heterozigotos SC manifestam anemia, que é a segunda causa de diagnóstico dessa doença em nosso meio; 5- Apesar de a doença SC ser uma causa importante de úlceras de membros inferiores entre negróides paulistas, sobretudo entre homens com menos de 30 anos de idade, apenas cerca de 3% dos nossos heterozigotos SC apresentam essa alteração clínica, que é a sexta causa de diagnótico da doença SC em nosso meio; 6-A proporção de portadores da hemoglobinopatia SC que deixam de ser diagnosticados em nosso meio deve ser realmente bastante elevada, recebendo esses pacientes tratamento meramente sintomático; 7- A confusão diagnóstica entre a doença SC e a anemia falciforme também parece ser comum em nosso meio (cerca de 17% dos casos neste estudo); 8- Alta proporção dos nossos pacientes SC (cerca de 50% neste estudo) só são diagnosticados após os 15 anos de idade ou mesmo após os 30 anos; 9- Comparando-se a frequência de algumas manifestações clínicas dos pacientes SC com a observada entre negróides paulistas com a anemia falciforme, observou-se entre os primeiros menor incidência de dores ósteo-articulares , pneumonia, hepatomegatia e úlcera de membros inferiores. Já a incidência de dores abdominais, esplenomegalia, , necrose óssea e litíase biliar não diferiu significamente entre os dois grupos de pacientes; 10- Da mesma forma, comparando-se a freqüência de algumas manifestações clínicas dos pacientes SC com a observada entre negróides paulistas com a anemia microdrepanocítica ou s/pOtalassemia, observou-se entre os primeiros menor incidência apenas de hepatomegalia. A incidência de dores ósteo-articulares , dores abdominais, esplenomegalia , necrose óssea, úlceras de membros inferiores e litíase biliar não diferiu significativamente entre os dois grupos de pacientes; 11- O perfil clínico dos nossos pacientes SC não distoa gritantemente do observado por outros autores nacionais e estrangeiros entre indivíduos com a mesma doença; 12- A alvocitose é uma das alterações do esfregaço sanguineo mais freqüentes entre os indivíduos com a doença se, favorecendo esta hipótese diagnóstica em um caso de síndrome falcêmica / Mestrado / Mestre em Ciências

Orientador: Milton Artur Ruiz / Coorientador: Claudia Regina Bonini Domingos / Banca: Silma Maria Alves de Melo / Banca: Isabeth da Fonseca Estevão / Resumo: A anemia falciforme (AF) afeta milhões de pessoas em todo o mundo e está associada a altas taxas de morbidade e mortalidade. Apresenta uma série de manifestações fenotípicas, que são influenciadas por fatores genéticos e ambientais, resultando em fenótipos diversificados, e um tratamento bastante eficaz tem sido o uso de hidroxiureia (HU), que ameniza os sintomas e a necessidade de transfusão sanguínea e hospitalização. Estudos de associação de genomas já demonstraram que polimorfismos genéticos podem desempenhar influência no perfil clínico dos pacientes, assim como na resposta destes à medicação. Os polimofismos -308G/A no gene TNFA e -509C/T no gene TGFB aumentam a produção das suas respectivas citocinas que atuam principalmente em vias inflamatórias e são fortes candidatos a estarem envolvidos na ocorrência de episódios vaso-oclusivos característicos da doença. Dessa forma, o objetivo do trabalho foi verificar a frequência desses polimorfismos em portadores da AF, com e sem o uso de HU, e possível relação com a gravidade das manifestações clínicas da doença. Foram obtidas 588 amostras de sangue periférico de pacientes com doença falciforme em acompanhamento no HEMORIO. A partir destas, foram separados, aleatoriamente, 240 pacientes com AF, cujo genótipo foi confirmado por procedimentos laboratoriais clássicos e moleculares. Estes foram genotipados para os polimorfismos -308G/A (TNFA) e -509C/T (TGFB) por PCR-RFLP. Os dados hematológicos e clínicos parciais de 118, dos 240 pacientes, foram obtidos por questionário e consulta aos prontuários médicos e banco de dados. A frequência do polimorfismo -308G/A foi de 0,83 em homozigose e 17,92% em heterozigose. Para o polimorfismo -509C/T, foi de 6,25% e 48,33%, respectivamente. Não foi observada associação entre o polimorfismo -308G/A e as manifestações clínicas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico aba / Abstract: Sickle cell anemia (SCA) affects millions of people worldwide and is associated with high morbidity and mortality. This affection shows various phenotypic manifestations, which are influenced by genetic and environmental factors, resulting in many phenotypes, and the most effective treatment has been the use of hydroxyurea (HU), which improves the symptoms and the requirement for blood transfusion and hospitalization. Genome association studies have shown that genetic polymorphisms may play role on the clinical profile of patients, as well as in response to these medications. The -308G/A and -509C/T polymorphisms, in TNFA and TGFB genes respectively, increase production of their cytokines, which act on inflammatory pathways and are strong candidates to be involved in the occurrence of vaso-occlusive episodes. The aim of this study was to determine the frequency of these polymorphisms in patients with AF, with and without HU utilization, and possible relationship with the severity of clinical manifestations of disease. We obtained 588 peripheral blood samples of patients with sickle cell disease at HEMORIO. From these, were separated at random 240 patients with AF, whose genotype was confirmed by classical and molecular laboratory procedures. They were genotyped for polymorphisms-308G/A (TNFA) and-509C/T (TGFB) by PCR-RFLP. The hematological and clinical data of 118 of the 240 patients, were obtained by questionnaire and medical records and database. The frequency of polymorphism -308G/A was 0.83% in homozygous and 17.92% in heterozygous. For the polymorphism -509C/T, was 6,25% and 48.33% respectively. No association between polymorphism -308G/A and clinical manifestations in patients was found. Concerning the polymorphism-509C/T, the mutant allele (T) proved to be a risk... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-28Bitstream added on 2014-06-13T19:53:58Z : No. of bitstreams: 1 torres_ls_me_sjrp.pdf: 665668 bytes, checksum: 4aaf2ab7e9956b74cfe43d4216ad0030 (MD5) / A anemia falciforme (AF) afeta milhões de pessoas em todo o mundo e está associada a altas taxas de morbidade e mortalidade. Apresenta uma série de manifestações fenotípicas, que são influenciadas por fatores genéticos e ambientais, resultando em fenótipos diversificados, e um tratamento bastante eficaz tem sido o uso de hidroxiureia (HU), que ameniza os sintomas e a necessidade de transfusão sanguínea e hospitalização. Estudos de associação de genomas já demonstraram que polimorfismos genéticos podem desempenhar influência no perfil clínico dos pacientes, assim como na resposta destes à medicação. Os polimofismos -308G/A no gene TNFA e -509C/T no gene TGFB aumentam a produção das suas respectivas citocinas que atuam principalmente em vias inflamatórias e são fortes candidatos a estarem envolvidos na ocorrência de episódios vaso-oclusivos característicos da doença. Dessa forma, o objetivo do trabalho foi verificar a frequência desses polimorfismos em portadores da AF, com e sem o uso de HU, e possível relação com a gravidade das manifestações clínicas da doença. Foram obtidas 588 amostras de sangue periférico de pacientes com doença falciforme em acompanhamento no HEMORIO. A partir destas, foram separados, aleatoriamente, 240 pacientes com AF, cujo genótipo foi confirmado por procedimentos laboratoriais clássicos e moleculares. Estes foram genotipados para os polimorfismos -308G/A (TNFA) e -509C/T (TGFB) por PCR-RFLP. Os dados hematológicos e clínicos parciais de 118, dos 240 pacientes, foram obtidos por questionário e consulta aos prontuários médicos e banco de dados. A frequência do polimorfismo -308G/A foi de 0,83 em homozigose e 17,92% em heterozigose. Para o polimorfismo -509C/T, foi de 6,25% e 48,33%, respectivamente. Não foi observada associação entre o polimorfismo -308G/A e as manifestações clínicas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico aba / Sickle cell anemia (SCA) affects millions of people worldwide and is associated with high morbidity and mortality. This affection shows various phenotypic manifestations, which are influenced by genetic and environmental factors, resulting in many phenotypes, and the most effective treatment has been the use of hydroxyurea (HU), which improves the symptoms and the requirement for blood transfusion and hospitalization. Genome association studies have shown that genetic polymorphisms may play role on the clinical profile of patients, as well as in response to these medications. The -308G/A and -509C/T polymorphisms, in TNFA and TGFB genes respectively, increase production of their cytokines, which act on inflammatory pathways and are strong candidates to be involved in the occurrence of vaso-occlusive episodes. The aim of this study was to determine the frequency of these polymorphisms in patients with AF, with and without HU utilization, and possible relationship with the severity of clinical manifestations of disease. We obtained 588 peripheral blood samples of patients with sickle cell disease at HEMORIO. From these, were separated at random 240 patients with AF, whose genotype was confirmed by classical and molecular laboratory procedures. They were genotyped for polymorphisms-308G/A (TNFA) and-509C/T (TGFB) by PCR-RFLP. The hematological and clinical data of 118 of the 240 patients, were obtained by questionnaire and medical records and database. The frequency of polymorphism -308G/A was 0.83% in homozygous and 17.92% in heterozygous. For the polymorphism -509C/T, was 6,25% and 48.33% respectively. No association between polymorphism -308G/A and clinical manifestations in patients was found. Concerning the polymorphism-509C/T, the mutant allele (T) proved to be a risk... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-03-03T02:01:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000465946-Texto+Completo-0.pdf: 1245081 bytes, checksum: 32c1690d51b54b12f00a7daa37c21cda (MD5) Previous issue date: 2015 / Objective: To analyze the risk factors of blood stream infections of patients with positive blood cultures of central venous catheters (CVC).Methods: Retrospective descriptive study, with analysis of medical records and laboratory tests, which examined 28 patients with 44 blood cultures positive CVC. The variables were: age, gender, reason for hospitalization, length of hospital stay, type of catheter, micro-organism with sensitivity, antimicrobial resistance and outcome.Results: We analyzed 28 patients who had positive blood cultures in the CVC, and who did not have clinical or laboratory diagnosis of any other focus, 321 patients had negative blood cultures, and only 28 with positive blood cultures in the periphery and CVC (paired samples). The identified risk factors for infections related to catheters were age less than 1 year of patients (8. 3 vs 23 months, the uninfected, p <0. 01), catheter usage time (16 vs. 7 days; p <0. 01) and length of stay in PICU (25 vs 6 days; p <0. 01). The greater involvement of the catheters were short double lumen residence and located in the right subclavian. The most diagnosed bacteria in blood cultures of these patients were Sthaphylococcos epidermidis Staphylococcus aureus and that showed high resistance to oxacillin and sensitivity to vancomycin.Conclusions: The rate of bloodstream infection associated with the use of central venous catheters in intensive care units and pediatric ward is significantly affected by presençao the central venous catheter. The bloodstream infections are important causa de morbidity and mortality in pediatric patients and premature removal of the central venous catheter is important for the prevention of such infection. / Objetivo: Analisar os fatores de risco das infecções de corrente sanguínea dos pacientes com hemocultura positiva dos cateteres venosos centrais (CVC).Métodos: Estudo retrospectivo descritivo, com analise de prontuários e exames laboratoriais, que analisou 28 pacientes com 44 hemoculturas de CVC positivas. As variáveis foram: idade, sexo, motivo da internação, tempo de permanência hospitalar, tipo de cateter, microrganismo com sensibilidade, resistência antimicrobiana e desfecho.Resultados: Foram analisados 28 pacientes que tiveram hemoculturas positivas nos CVC, e que não tiveram diagnóstico clínico ou laboratorial de qualquer outro foco, 321 pacientes apresentaram hemoculturas negativas, sendo apenas 28 com hemocultura positiva em periferia e CVC (coletas pareadas). Os fatores de risco identificados para infecções relacionadas ao uso de cateteres foram a idade do paciente menor de 1 ano (8,3 vs 23 meses, dos não infectados; p<0,01), tempo de uso do cateter (16 vs 7 dias; p<0,01) e tempo de permanência em UTIP (25 vs 6 dias; p< 0,01). Os cateteres de maior comprometimento foram os de curta permanência duplo lúmen e os localizados em subclávia direita. As bactérias mais diagnosticadas nas hemoculturas destes pacientes foram o Sthaphylococcos epidermidis e o Sthaphylococcus aureus que mostraram elevada resistência à oxacilina e sensibilidade à vancomicina.Conclusões: A taxa de infecção da corrente sanguínea associada ao uso de cateter venoso central, nas unidades de terapia intensiva e enfermaria pediátrica é significativamente afetada pela presençao do cateter venoso central. As infecções da corrente sanguínea são importantes causade morbidade e mortalidade em pacientes pediátricos e a retirada precoce do cateter venoso central é importante para a prevenção de tal infecção.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2010. / Submitted by Shayane Marques Zica (marquacizh@uol.com.br) on 2011-09-08T20:30:30Z No. of bitstreams: 1 2010_MariaAparecidadosSantosTeixeira.pdf: 490574 bytes, checksum: 07f8110f7af2e267b99ec62854309bcc (MD5) / Approved for entry into archive by LUCIANA SETUBAL MARQUES DA SILVA(lucianasetubal@bce.unb.br) on 2011-09-20T15:27:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_MariaAparecidadosSantosTeixeira.pdf: 490574 bytes, checksum: 07f8110f7af2e267b99ec62854309bcc (MD5) / Made available in DSpace on 2011-09-20T15:27:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_MariaAparecidadosSantosTeixeira.pdf: 490574 bytes, checksum: 07f8110f7af2e267b99ec62854309bcc (MD5) / Introdução e Objetivos – Pacientes pediátricos em peroperatório de cirurgia cardíaca estão especialmente expostos à complicações infecciosas, sobretudo infecção de corrente sanguínea (ICS). Apesar do crescente aumento do número de unidades de terapia intensiva (UTIs) cardiopediátricas, contudo, ainda são poucos os estudos que buscam identificar os fatores de risco para o surgimento de ICS. O presente estudo teve como objetivos determinar quais os principais fatores de risco para o desenvolvimento de ICS, analisando características clínicas como idade e doença de base; e aspectos relacionados à cirurgia cardíaca, como tempo de circulação extracorpórea (CEC) e uso de cateter venoso central; e se houve associação entre óbito e ICS. Metodologia – Trata-se de coorte retrospectiva longitudinal, realizada na UTI de Cardiopediatria de um serviço terciário, entre fevereiro de 2005 e junho de 2008. Os critérios de inclusão foram: idade entre 0 e 16 anos, cirurgia cardíaca realizada naquela admissão, tempo mínimo de permanência de 48 horas na unidade e presença de pelo menos um acesso venoso central no pós-operatório imediato. Apenas o primeiro episódio de ICS foi considerado. Foram aplicadas análises univariadas e multivariadas, para identificar associação entre variáveis clínicas e cirúrgicas com os desfechos: ICS e óbito. Significância estatística foi definida por P < 0,05. Para análise dos dados foi utilizado pacote estatístico SPSS versão 17.0. Resultados - Foram estudados 386 pacientes, com mediana de idade de 16 meses, sendo 195 do gênero masculino (51%) e 191 do gênero feminino (49%). Houve 46 pacientes (12%) neonatais, e a faixa de um a oito anos foi a mais prevalente, com 171 casos (44%). O grupo mais encontrado de cardiopatias foi shunt esquerda-direita, com 170 casos (44%), e as categorias mais observadas do escore de RACHS-1, foram II e III. Utilizou-se CEC em 270 pacientes (70%), com tempo médio de duração de 114 ± 53 minutos. Em 62 (16%) pacientes houve fechamento tardio do esterno. Apresentavam dois ou mais cateteres venosos centrais no pós-operatório imediato 47 (12,2%) pacientes. A taxa de incidência de ICS resultou 7,7% (30 episódios em 386 pacientes, havendo confirmação microbiológica em 14 casos e com predominância de gram negativos (86%). A variável “cada 10 minutos de tempo de CEC” (P = 0,02) apresentou associação independente com ICS, com ponto de corte maior ou igual a 124 minutos identificado na curva ROC. A incidência de ICS foi maior no grupo de maior complexidade e com esterno aberto (P < 0,001). A letalidade na amostra avaliada foi de 11% (43 óbitos em 386 pacientes) e “tempo de CEC” esteve significativamente associada ao óbito: (P = 0,01). A incidência de óbito foi maior no grupo com ICS (P = 0,005), apesar de não se observar associação significativa entre ICS e óbito na análise multivariada. Conclusão – Cateter venoso central não mostrou valor preditor independente para o desenvolvimento de ICS. “Tempo de CEC”, embora pudesse refletir gravidade dos pacientes, esteve fortemente associada à ocorrência de ICS no presente estudo, sobretudo a partir dos 124 minutos de duração. A ICS não foi preditora independente para óbito na população analisada. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Background and Objectives - Pediatric patients undergoing cardiac surgery are particularly prompted to infectious complications, mainly bloodstream infection (BSI). Despite of crescent amount of pediatric cardiac intensive care units (PICU), there are few studies about risk factors to BSI development. The aim of this study was to identify major risk factors for BSI, evaluating clinical characteristics as age and underlying sickness; and cardiac surgical aspects as cardiopulmonary bypass duration and central venous catheter use; and if there was association between death and BSI. Methods – We conducted a retrospective longitudinal cohort study, in a tertiary care institution’s PICU, between February, 2005 and June, 2008. Inclusion criteria were the following: age between 0 and 16 years, cardiac surgery performed in that admission, ICU stay for at least 48 hours and at least one central venous catheter on immediate postoperative time. Only the first BSI episode was considered. Univariate and multivariate conditional logistic regression analyses were used to identify association between clinical and surgical variables with outcomes: BSI and death. P value < 0,05 was statistically significant. SPSS version 17.0 was used for statistical analysis. Results – Three hundred and eighty six patients, with median age of 16 months, being 195 male (51%). There were 46 neonatal patients (12%), and age between one and eight years was the most prevalent, being 171 patients (44%). The most common cardiac congenital malformations were left-to-right shunt, with 140 patients (44%), and most prevalent risk categories RACHS-1, were II and III. Cardiopulmonary bypass was used in 270 (70%) patients, with mean duration of time of 114 ± 53 minutes. In 62 (16%) patients open chest was performed. Forty seven (12,2%) patients had two or more central venous catheter. BSI’s ratio was 7,7% (30 BSI /386 patients), with microbiologic confirmation in 14 patients which 86% of causal agent were gram-negative bacteria. The variable “duration of cardiopulmonary bypass” (P = 0,02) was independent associated with BSI, with a cut off equal or above 124 minutes, which was identified on ROC curve. BSI was more frequent in the highest severity group and in patients with open chest (P < 0,001). Mortality was 11% (43 deaths/386 patients) and “duration time of cardiopulmonary bypass” was significant associated with death (P = 0,001). Death incidence was higher in BSI patients (P = 0,005), but in the multivariate analysis it did not maintain statistical significance. Conclusions – Central venous catheter did not show independent association with BSI development. Although “cardiopulmonary bypass duration” could reflect the patient’s severity, it was strongly associated with BSI occurrence in this study, mainly after 124 minutes of duration. The BSI was not identified as independent risk factor for death in this population.

Orientador: Jean Leandro dos Santos / Banca: Gustavo Troiano Feliciano / Banca: Priscila Longhin Bosquesi de Oliveira / Resumo: A anemia falciforme (AF) é uma das doenças hematológicas genéticas mais prevalentes no mundo. Atualmente, as estratégias terapêuticas visando aumento dos níveis de hemoglobina fetal (HbF) contribuem significativamente na redução da morbidade e mortalidade associadas à doença. A compreensão dos mecanismos moleculares responsáveis pelo silenciamento gênico para produção de hemoglobina fetal pode permitir o desenvolvimento de fármacos indutores de HbF mais efetivos e seguros. Durante a eritropoiese, a expressão gênica de gama-globina é silenciada, em partes, pela ligação de um complexo protéico contendo entre outras proteínas a GATA-1, que se liga em sítios próximos aos promotores do gene de gama-globina impedindo o processo de transcrição. Especificamente, o recrutamento de GATA-1 é realizada pelo bromodomínio-3 (BRD-3). Neste trabalho, nossa hipótese foi a de que a inibição de BRD-3 possa constituir uma nova abordagem terapêutica capaz de promover o aumento dos níveis de HbF. Para tal, foi realizado um estudo prévio de triagem virtual com 2.2 milhões de moléculas, em que se identificaram alguns candidatos a ligantes do bromodomínio-3 (BRD-3). A partir destes, e aplicando a técnica do planejamento de fármacos baseado em fragmentos (FBDD), foi realizado um estudo de docagem molecular (docking) destes derivados, a fim de se explorar o padrão de substituição mais adequado para as interações com os resíduos de aminoácidos presentes no BRD-3. Os compostos finais apresentaram interaç... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The sickle cell anemia (SCA) is the most common inherited hemoglobinopathy in the world. The therapies currently availables to increase the levels of fetal hemoglobin contribute significantly to reduce morbidity and mortality associated with the disease. An understanding of the molecular mechanisms for drug development in order to increase the fetal hemoglobina levels may allow the development of more effective and safe HbF-inducing drugs. During erythropoiesis, gamma-globin gene expression is partially inhibited by the binding of a protein complex containing GATA-1 among other proteins, which binds at sites close to the gamma-globin gene promoters by preventing the transcription. Specifically, recruitment of GATA-1 is performed by bromodomain-3 (BRD-3). In this work, our hypothesis was the BRD-3 inhibition may be a new therapeutic approach capable of promoting the increase of HbF levels. Preliminary study of virtual screening was carried out with 2.2 million molecules. It was identified some candidates for bromodromain-3 (BRD-3) ligands. Using Fragment Based Drug Design (FBDD), the fragments were optimized and a docking study was carried out, in order to explore the most adequate substitution pattern in order to improve the interactions present in BRD-31. The final compounds showed interactions with residues of asparagine-116, proline-58, glutamine-61 and tryptophan-57, and docking scores between -10.357 kcal/mol and -7.152 kcal/mol. It has been synthesized, identified and characterized nine compounds with yields between 17 and 86%. The compounds showed enzymatic inhibition range between 13 and 80% in BRD-3 (BD1). After 24 hours, compound IX was able to induce gamma globin expression in culture of K562 cells. These results suggest that compounds IX is a novel prototype, BRD-3 inhibitor, able to induce gamma-globin expression. / Mestre

Orientador: Jean Leandro dos Santos / Banca: Carolina Lanaro / Banca: Magnun Nueldo Nunes dos Santos / Banca: Rafael Victorio Carvalho Guido / Banca: Jeanine Giarolla Vargas / Resumo: A Anemia Falciforme (AF) é uma anemia hemolítica genética caracterizada por uma mutação no gene da globina beta. Além do quadro vaso-oclusivo, os pacientes com AF apresentam processo inflamatório crônico caracterizado pelo aumento de diversas citocinas pró-inflamatórias, a exemplo do Fator de Necrose Tumoral alfa (TNF-α). Atualmente, a hidroxiureia (HU) é o único fármaco disponível para o tratamento e seus efeitos benéficos estão associados ao óxido nítrico (NO), gerado após biotransformação. O NO desempenha efeitos benéficos na doença tais como: vasodilatação, inibição da agregação plaquetária e aumento na produção de hemoglobina fetal (HbF). Nesse contexto, foram sintetizados os compostos 3(a-b); 4(a-b) e 5(a-b) obtidos através da estratégia de hibridação molecular da subunidade inibidora de TNF-α presente na pomalidomida com o núcleo furoxânico (1,2,5-oxadiazol-2-N-óxido) com propriedades doadores de NO. Os compostos sintetizados foram obtidos em rendimentos que variaram entre 13 e 30%. As moléculas do estudo demonstraram capacidade de liberar NO em níveis que variaram entre 1 e 30%. Em cultura de células CD34+, o composto 4b (2,5 μM) foi capaz de induzir gobina γ, enquanto HU foi ativa apenas em concentrações 4 vezes superiores (10 μM). Estudos preliminares do possível mecanismo de ação mostraram que o composto 4b não interefe na expressão de fatores de transcrição a exemplo do BCL11A, IKAROS, LRF e nos níveis de acetilação de histona H3. O composto 4b foi capaz de induzi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Sickle Cell Anemia is a genetic blood disease in which there is a mutation in the β-hemoglobin gene. This mutation promotes polymerization of hemoglobin molecules that change the structure of the erythrocyte cytoskeleton promoting sickling of the cell. Moreover, there is increased adhesion of blood cells in the vessel contributing to the increasement of the vaso-occlusive process, the main characteristic of the disease. It is further known that the chronic inflammation associated with the disease contributes to a number of complications and among the process responsible for this proinflammatory cytokine is TNF-α, which is an important target for therapeutic intervention. Hydroxyurea (HU) is the only available drug for treatment and its beneficial effects are associated with the same capacity biotransformation of nitric oxide. The NO plays beneficial effects such as vasodilation, inhibition of platelet aggregation and production of fetal hemoglobin (Hb F), latter has the function of decreasing polymerization of hemoglobin. In this context, continuing the research line that aims at planning, synthesis and pharmacological evaluation of new prototypes drug candidates for the treatment of sickle cell anemia complications, in this work have synthesized a series of four new hybrid compounds ( I- IV) containing the phtalimide (TNF-alfa inhibitory subunit) and furoxan subunits ( nitric oxide donors) according to structural design. The compounds were presented as NO donors. Compounds I-IV were shown to be inhibitors of TNF-α in the immunoassay of this cytokine assay and the compound IV is the most promising inhibiting between 65% in smaller concentrations than the other. In the assay of ADP-induced platelet aggregation, compounds III and IV were able to inhibit platelet aggregation sigficantily. In addition, the compound I after 72 hours was... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-23Bitstream added on 2014-06-13T18:53:57Z : No. of bitstreams: 1 belinijunior_e_me_sjrp.pdf: 995631 bytes, checksum: d866ab976032b462435b7ca7899faf6d (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A causa principal da doença falciforme (DF) é uma mutação pontual no gene β globina que codifica uma hemoglobina (Hb) com características diferentes da Hb normal, denominada de Hb S. Sua fisiopatologia multifacetada envolve múltiplas alterações nos eritrócitos falcêmicos, episódios vaso-oclusivos, hemólise, ativação de mediadores inflamatórios, disfunção das células endoteliais e estresse oxidativo. Com isso, há uma diminuição do fluxo sanguíneo e obstrução da microcirculação acarretando aos portadores, anemia, crises de dor e insuficiência de múltiplos órgãos. Visto que o excesso de espécies reativas de oxigênio é citotóxico modificando vários mecanismos celulares e, consequentemente, ocasionando danos aos órgãos, pretendeu-se avaliar a capacidade antioxidante e o estresse oxidativo em DF, correlacionando com os genótipos da DF, haplótipos do cluster β globina e o uso de medicação específica. Em um estudo longitudinal, foram avaliadas, para o Tempo 1 (T1) de análise, 69 amostras de sangue e, para o Tempo 2 (T2), 55 amostras de DF do Hemocentro de São José do Rio Preto (SJRP) e do Hemocentro da Santa Casa de São Paulo (SP). As amostras foram submetidas a testes eletroforéticos, cromatográficos e moleculares para a identificação dos genótipos da DF e haplótipos do cluster , bem como dosagens bioquímicas para determinação das espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e da capacidade antioxidante em equivalência ao Trolox (TEAC). Por meio da caracterização genotípica da DF, encontramos um maior número de Hb SS, tanto em SP quanto em SJRP. Houve maior frequência da interação Hb S/Beta talassemia em SJRP (10,9%) com as mutações características de países mediterrâneos como a CD39 e IVS-I-110. O haplótipo Bantu foi mais frequente nos dois grupos (60,6%); o haplótipo II esteve associado à mutação... / The main cause of sickle cell disease (SCD) is a single β-globin gene mutation that encodes a hemoglobin (Hb) with different characteristics from normal Hb, called Hb S. This disease is characterized by presenting a multifaceted pathophysiology which involves multiple changes in sickle erythrocytes, vaso-occlusive episodes, hemolysis, inflammatory mediators activation, oxidative stress and endothelical cells dysfunction. Thereby, there is a decrease in blood flow and obstruction of the microcirculation leading the patients to anemia, pain crises and failure of multiple organs. Since the excess of reactive oxygen species is cytotoxic, modifying various cellular mechanisms, and thus, causing damage to organs, the aim of this work was to assess the antioxidant capacity and oxidative stress in SCD, correlating with SCD genotypes, cluster β-globin haplotypes and specific medication. In a longitudinal study were evaluated for the T1: 69 samples of peripheral blood, and for the T2: 55 samples of the SCD patients from Blood Center of the São José do Rio Preto (SJRP) and the Blood Center of the Santa Casa Medical School of São Paulo (SP). We performed electrophoretics, chromatographic and molecular assays for SCD genotypes and cluster β-globin identification, such as biochemical measurements for the determination of thiobarbituric acid reactive species (TBARS) and Trolox equivalence antioxidant capacity (TEAC). Through SCD genetic characterization, we found a greater number of Hb SS in both SP and in SJRP. There was a higher frequency of interaction Hb S/Beta-thalassemia in SJRP (10.9%) with typical mutation of Mediterranean countries such as CD39 and IVS-I -110. The Bantu haplotype was more frequent in both groups (60.6%); the haplotype II was associated with CD39 mutation and the haplotype I with the IVS-I-110. We found a patient with Cameroon haplotype, rare in the Brasilian... (Complete abstract click electronic access below)