Made available in DSpace on 2014-06-12T18:28:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3058_1.pdf: 5603906 bytes, checksum: 4bea935ff4411527fbfe87b4255e77c4 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O uso das drogas antirretrovirais no Brasil tem aumentado a sobrevida e melhorado a qualidade de vida dos pacientes com HIV/Aids, porém alguns indivíduos podem apresentar falha terapêutica devido a resistência do HIV, entre outros fatores. Testes genotípicos podem detectar resistência em pacientes que nunca fizeram uso da terapia, possibilitando identificar cepas resistentes que podem ser transmitidas. Ensaios imunoenzimáticos com metodologias específicas podem identificar se uma pessoa foi infectada recentemente, distinguindo-as de pessoas com infecção crônica. Esta tese é composta por uma revisão da literatura abordando resistência primaria, infecção recente e subtipos do HIV, e por dois artigos. No primeiro, sob o titulo Resistência primaria do HIV aos antirretrovirais em Centros de Testagem e Aconselhamento (CTA) da Região Metropolitana do Recife (RMR), Pernambuco foram analisadas 130 amostras de usuários soropositivos para o HIV e virgens de tratamento antirretroviral recrutados no período de julho/2007 a abril/2009, de cinco CTA. As amostras foram analisadas utilizando-se o kit TRUGENE® HIV-1 Genotyping Assay OpenGene DNA Sequencing System (Siemens Diagnostics, USA) para detecção de mutações de resistência e no ensaio BED-CEIA® IgG HIV-1 (Calypte Biomedical Corporation- USA) , para identificação de infecção recente. Encontraram-se freqüências de 6,1% e de 4,6% de resistência primária segundo os critérios do International AIDS Society (IAS USA,2009) e Surveillance Drug Resistance Mutations- SDRM-OMS- 2009, respectivamente. O percentual de infecção recente foi de 23,1% nas amostras genotipadas e foram identificados 56,9% de subtipo B e 37,7% de subtipo F. Em conclusão, o achado de freqüência de resistência primária foi mais elevada do que a detectada em 2002 em Recife (2%), revelando um aumento da resistência associada aos Inibidores da Transcriptase Reversa Não-Nucleosideos (ITRNN). Em relação aos subtipos virais, destaca-se o alto percentual de subtipo F na Região Metropolitana do Recife, e um alto percentual de infecção recente nas amostras sequenciadas. No segundo artigo, intitulado Infecção recente e prevalência do HIV em usuários de Centros de Testagem e Aconselhamento da Região Metropolitana do Recife - Pernambuco descreve-se a taxa de infecção recente em 169 amostras de cinco CTA da RMR, a prevalência da infecção nesses CTA no período de julho/2007 a abril/2009 e as possíveis associações entre as características sócio- demográficas e laboratoriais dessa população. Observou-se um percentual de infecção recente de 23,7%, e taxas de prevalência variando de 1,2% a 3,9%. Concluímos que a infecção recente ocorre principalmente nas faixas etárias mais jovens e com maior frequência entre heterossexuais, apesar de frequência significativa entre HSH. A infecção pelo HIV-1 observada neste estudo, predominou no sexo masculino e Recife revelou-se com maior prevalência da infecção pelo HIV e com maior percentual de infecções recentes

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:31:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8082_1.pdf: 668539 bytes, checksum: 66bb373f3ac4dbb3abf9a1d4d65e8fca (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2005 / Neste trabalho investigamos a associação de subtipos do HIV-1 com evolução clínica dos pacientes submetidos à vacina com células dendríticas (CD). O vírus autólogo inativado foi usado para pulsar as células dendríticas, as quais foram utilizadas posteriormente como vacina. Os isolados virais dos pacientes foram seqüenciados e suas seqüências foram usadas para análise filogenética. Para análise clínica os níveis de células TCD4 +e TCD8+ foram monitorados por um ano assim como a quantificação da carga viral (CV). Dos 19 pacientes, 13/19 apresentaram subtipo B, 5/19 subtipo F e 1/19 subtipo D. Dos pacientes com subtipo F 4/5 mostraram queda média de 1,5 Log na CV enquanto apenas 4/13 com subtipo B apresentaram queda média de 1,16 Log. Os pacientes que controlaram a carga viral também tiveram uma forte resposta celular considerando os parâmetros imunológicos. Aos 112 dias de imunização 14/19 pacientes apresentaram aumento significativo de linfócitos TCD4+ e diminuição de 0,5 Log de carga viral (CV) inicial. Destes 8/19 sustentaram a resposta virológica (CV≥1.0Log) no período de 360 dias de imunização Devido à pequena população não foi possível associar a resposta virológica com os subtipos, embora tenha sido observada uma tendência dos pacientes subtipo F serem capazes de mostrar um melhor controle viral ápos imunização. .Dos pacientes do subtipo F, apenas um não foi capaz de controlar a carga viral durante um ano. Todavia, outros fatores além do subtipo viral parecem desenvolver importante papel na sustentação das respostas imunológica e virológica, tais como a imunidade inata, polimorfismo viral, ativação de linfócitos T reguladores entre outros mecanismos ainda não conhecidos

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2016-08-30T14:03:27Z No. of bitstreams: 1 Tese_ ICS_Jacqueline Ramos Machado Braga.pdf: 1373327 bytes, checksum: 0f33799c989480e22ae9871c63b365c1 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2016-08-31T11:39:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_ ICS_Jacqueline Ramos Machado Braga.pdf: 1373327 bytes, checksum: 0f33799c989480e22ae9871c63b365c1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-31T11:39:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ ICS_Jacqueline Ramos Machado Braga.pdf: 1373327 bytes, checksum: 0f33799c989480e22ae9871c63b365c1 (MD5) / O Carcinoma Basocelular (CBC) é o tipo mais comum e corresponde a 75% de todas as variedades de câncer de pele. Apesar de ser um tumor potencialmente maligno, tem um comportamento benigno na maioria dos casos. O papel dos mecanismos de defesa do hospedeiro nas neoplasias ainda é objeto de controvérsia. O presente estudo teve como objetivo quantificar mastócitos e as células do infiltrado inflamatório nos subtipos histológicos de Carcinoma Basocelular (CBC). Foram utilizados 71 casos de biópsias de pele com diagnóstico de Carcinoma Basocelular (CBC) não-recorrentes, agrupados de acordo com o subtipo de tumor (Circunscrito, Infiltrativo, Superficial, Folicular, Adenóide, Cístico e Morfea). Foi empregada a imuno-histoquímica com os anticorpos monoclonais anti-(CD3, CD4, CD8, CD68, CD20 e MAST cell) para a caracterização do infiltrado inflamatório peritumoral, além do Ki-67 para avaliar o índice de proliferação no tumor. Para a detecção dos mastócitos, foi usada também a técnica histológica do azul de toluidina. Do total de casos analisados, 70% eram homens, com idade média de 56,9±14,2 anos e local mais freqüente da lesão na face (28,6%). Os subtipos mais freqüentes foram o Infiltrativo (26%) e o Superficial (23%). Com relação à composição do infiltrado inflamatório, os linfócitos TCD4+ corresponderam à população mais numerosa (308,9±27,26 células CD3+ e 216,2±22,23 CD4+), seguida por mastócitos (111,0±7,88), linfócitos TCD8+ (57,38± 5,94), linfócitos B (55,9± 6,83) e macrófagos (21,18±2,58). Houve uma baixa atividade proliferativa das células neoplásicas (47,61±7,48), no entanto formas mais agressivas como o Morfea, apresentaram alta atividade proliferativa (217,8±27,01) e infiltrado rico em mastócitos (211,7±19,73). O subtipo Adenóide apresentou o mais denso infiltrado inflamatório dos subtipos de CBC, formado em sua maioria por linfócitos TCD4+ (529,4±54,6) (p<0,001). O subtipo Cístico apresentou o mais pobre infiltrado inflamatório dos subtipos de CBC (p<0,001). Estes dados permitem-nos concluir que o denso infiltrado inflamatório peritumoral no CBC consiste, em sua maioria, de linfócitos TCD4+, sugerindo uma resposta imunológica localizada mediada por célula e que os diferentes tipos celulares, que compõem o infiltrado inflamatório, variam seu número de acordo com o subtipo de tumor, o que poderia interferir na qualidade da resposta imunológica em cada caso. Existiu uma relação inversa entre o número de mastócitos e o de linfócitos T, sem correlação com a agressividade. Com isso supõese que as características próprias a cada subtipo de tumor talvez possam promover diferenças no micro-ambiente tecidual, levando à alterações na composição do infiltrado que poderiam tanto auxiliar quanto impedir o crescimento do tumor.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-07-20T19:38:45Z No. of bitstreams: 1 Joana Paixao Monteiro. Análise da variabilidade genética do vírus da....pdf: 5164575 bytes, checksum: de810e999facd7c4e9d33d14ad2ed0e3 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-20T19:38:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Joana Paixao Monteiro. Análise da variabilidade genética do vírus da....pdf: 5164575 bytes, checksum: de810e999facd7c4e9d33d14ad2ed0e3 (MD5) Previous issue date: 2009 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / O grupo M do HIV -1 envolve a maioria das infecções mundiais e é composto por nove subtipos, denominados de A-K. Esta intensa variabilidade genética reflete-se no surgimento partículas virais com diferentes comportamentos biológicos. Estes representam os principais obstáculos para a eficiência da resposta imune humana e para o desenvolvimento de vacinas e terapias universais. O estudo molecular e biológico do HIV pode contribuir para o melhor entendimento de suas propriedades, para a escolha adequada de estratégias terapêuticas e para a vigilância da epidemia de HIV / AIDS. O objetivo deste trabalho foi investigar o perfil epidemiológico e molecular do HIV - 1 no estado da Bahia. Para tanto, foram estudadas amostras de DNA provenientes de 261 indivíduos infectados pelo HIV, acompanhados em um hospital de Salvador, a capital do estado. Destas, 228 e 208 amostras foram analisadas através de HMA nos genes gag e env, respectivamente, e 175 foram caracterizadas em ambos os genes. Adicionalmente, 32 amostras de subtipos F e recombinantes BF foram seqüenciadas e analisadas através de métodos filogenéticos. Uma proporção significativa de resultados divergentes entre o HMA e as análises filogenéticas foi observada (84.4%). Os resultados combinados mostraram sete diferentes genótipos de HIV - 1: 147 (84%) B/B, 4 (2.3%) F/F, 3 (1.7%) B/F, 1 (0.6%) F/B, 1 (0.6%) FIO, 1 (0.6%) BF/F e 18 (10.3%) BF/B. As seqüências recombinantes BF não foram relacionadas à Forma Recombinante Circulante (CRF) CRF12, enquanto apenas duas foram relacionadas à CRF28 e à CRF29. 19 variantes BF compartilharam o mesmo ponto de recombinação em gago Em adição, 7 recombinantes BF circulantes na região de Feira de Santana apresentando padrão similar de recombinação, mostraram-se filogeneticamente relacionados aos recombinantes encontrados em Salvador. Em conclusão, o subtipo B é o genótipo predominante, entretanto, a prevalência (13.1%) de variantes BF divergentes entre si e uma possível nova CRF sugerem que recombinação genética está ocorrendo :&eqüentemente nesta região do país. O uso da técnica de HMA não é apropriado em regiões onde diferentes subtipos estão co-circulando e onde a presença de vírus recombinantes é esperada. A epidemia de HIV / AIDS local caracteriza-se por um crescente número de casos entre mulheres e associada a transmissão por via heterossexual. Em particular, a epidemia de subtipo F na Bahia está relacionada aos indivíduos do sexo feminino e à via de transmissão heterossexual. A presença de um vírus recombinante FIO foi reportado pela primeira vez no Brasil. / The Human Immunodeficiency Virus 1 (HIV -I) is characterized by high levels of genetic variability. The majority of the HIV-I infections worldwide is caused by group M strains, which have been c1assified into 9 different genetic subtypes (A-K). As a result ofthis great genetic variability, the virus is also characterized by a diversity of phenotypes, which represents a major obstac1e to the immune system function and to the long-term efficiency of antiretroviral therapy. Therefore, studies involving molecular and biological aspects of HIV-I can contribute to the understanding of its properties, the development of therapeutic and control strategies, and the monitoring of the HIV / AIDS epidemic. The aim of this study is to investigate the epidemiological and genetic variability of HIV -I in the Brazilian state of Bahia. DNA samples from 229 and 213 HIV-I-infected individuaIs followed at a hospital in Salvador, the capital of Bahia, were analyzed using the Heteroduplex Mobility Assay (HMA) in gag and env genes, respectively. Out of these, 175 samples were characterized in both genes. Thirty-two subtype F and BF recombinant viruses were sequenced and analyzed by phylogenetic methods. The combined data showed that seven different HIV -I genotypes comprised this sample: 147 (84%) B/B, 4 (2.3%) F/F, 3 (1.7%) B/F, 1 (0.6%) F/B, 1 (0.6%) F/D, I (0.6%) BF/F, and 18 (10.3%) BF/B. A significant divergence was observed between the HMA and the sequencing results (84.4%). This could be explained by the low accuracy of the HMA for detecting recombinant viruses. These variants were unrelated to CRFI2, while two sequences were related to CRF28 and CRF29. Nineteen BF mosaics shared the same gag breakpoint. In addition, 7 BF recombinants from the city Feira de Santana presenting the same recombination pattern were related to the variants found in Salvador in the phylogenetic analysis. In conc1usion, subtype B is the most common genotype, however, an increasing prevalence (13.1%) of different BF variants and a potentially new CRF suggest that recombination is occurring frequent1y in Bahia. The use of HMA may be inappropriate in regions where different subtypes are co-circulating. The local HIV / AIDS epidemic follows the national epidemiological trends being mainly associated with heterosexual transmission and with an increasing number of cases among women. The subtype F epidemic was associated with women infected heterosexually. Finally, this study identified the presence of an F /D recombinant HIV -I in Brazil.

Made available in DSpace on 2015-04-11T13:38:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Final Luana Karen.pdf: 1636172 bytes, checksum: c9eb81400c0c198ae103082ad8f70318 (MD5) Previous issue date: 2007-11-16 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The Human Immunodeficiency Virus (HIV) is characterized by a wide genetic diversity. Two types of HIV are recognized at present: HIV-1 and HIV-2. The HIV-1, responsible for most of the cases of AIDS in the world, is divided in three groups denominated M (Major), O (Outlier) and N (Non-M/Non-O), and until this moment nine subtypes of the group M (A-D, F-H, J-K) were already identified. Beyond of those subtypes, the HIV-1 also have been classified in circulating recombinant forms (CRFs) and unique recombinant forms (URFs). In Brazil, a pattern complex of distribution of those subtypes has been described in their different geographical areas. In search of elucidating the predominant subtypes of HIV-1 in the city of Manaus, this study had as objective to analyze blood samples of subjects that presented results positive or indeterminate for HIV, in the systematic selection of blood donors of the Fundação de Hematologia e Hemoterapia do Amazonas (HEMOAM). In the moment of the collect, the donors registered their authorization by the signature of the free consent and knowledge term and they answered a questionnaire used for epidemic data investigation. DNA proviral extracted of the samples with indeterminate/positive resulted in Western Blot was submitted a Polimerase Chain Reaction in two stages (Nested PCR) for the confirmation of the HIV-I infection. The amplified products (regions gag, pol and env) of the 31 samples reactivate for PCR were automatically sequencing and analyzed phylogenetically by the Phylip program. All of the indeterminate samples for the confirmatory test presented negative amplification pattern. Of the reactivates samples for HIV in the confirmatory test and PCR, it was observed male predominance (77,4%) and in the donors of first time (67,7%). Among the repetition donors, 60% presented seroconvertion in up to 20 months. Of the total of samples, was identified the predominance of the subtype B (87,1%), following by the subtype C (6,5%), F (3,2%) and recombinant BF (3,2%). The amino acids sequences of 19 isolated were analyzed for the genetic variability characterization of the region of the loop V3. Among the isolated of the subtype B, the tetrapeptide more prevalente was GPGR (68,4%), following by the Brazilian variant B" GWGR (15,8%). The Subtype C occurrence in the North Region still was not reported in the literature. The analyses of similarity of the isolated of the subtype C in this study demonstrated larger similarity of these with other isolated ones brazilian, in relation to isolated in other parts of the world. Our results can contribute to a better understanding of the characteristics of the lineages of the HIV-1 circulating in Brazil, information that can be used in benefit of the diagnosis, treatment, control of the disease and preparation of vaccines. / O Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV) é caracterizado por uma ampla diversidade genética. Dois tipos de HIV são reconhecidos atualmente: HIV-1 e HIV-2. O HIV-1, responsável pela maioria dos casos de aids no mundo, é dividido em três grupos denominados M (Major), O (Outlier) e N (Non-M/Non-O). Para o grupo M, nove subtipos foram identificados até o momento: A-D, F-H, J, K. Além desses subtipos, o HIV-1 também tem sido classificado em formas recombinantes circulantes (CRFs) e formas recombinantes únicas (URFs). No Brasil, um complexo padrão de distribuição desses subtipos tem sido descrito em suas diferentes regiões geográficas. Buscando esclarecer a distribuição dos subtipos de HIV-1 predominantes na cidade de Manaus, este estudo teve como objetivo analisar amostras de sangue de indivíduos candidatos a doadores de sangue que apresentaram resultados positivo ou indeterminado para HIV-1, na triagem sistemática para doação de sangue da Fundação de Hematologia e Hemoterapia do Amazonas (HEMOAM). Na ocasião da coleta, os doadores registraram a sua autorização através da assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido e responderam a um questionário utilizado para investigação de dados epidemiológicos. O DNA proviral extraído das amostras com resultados indeterminado/positivo no Wersten Blot foi submetido a uma Reação em Cadeia da Polimerase em duas etapas (Nested PCR) para a confirmação da infecção pelo HIV-1. Os produtos amplificados (regiões gag, pol e env) das 31 amostras reativas por PCR foram seqüenciados e analisados por métodos filogenéticos usando o programa Phylip. Todas as amostras indeterminadas para o teste confirmatório apresentaram padrão de amplificação negativo. Das amostras reativas para HIV-I no teste confirmatório e PCR, observou-se predominância do sexo masculino (77,4%) e de doadores de primeira vez (67,7%). Entre os doadores de repetição, 60 % apresentaram soroconversão em até 20 meses. Do total de amostras, identificou-se a predominância do subtipo B (87,1%), seguida do subtipo C (6,5%), F (3,2%) e recombinante BF (3,2%). As seqüências de aminoácidos de 19 isolados foram analisadas para a caracterização da variabilidade genética da região da alça V3. Dentre os isolados do subtipo B, o tetrapeptídeo mais prevalente foi o GPGR (68,4%), seguido pelo variante brasileiro B GWGR (15,8%). A ocorrência do Subtipo C na região Norte, ainda não foi relatada na literatura. As análises de similaridade dos isolados do subtipo C nesse estudo demonstraram maior semelhança destes com outros isolados brasileiros, em relação a isolados de outras partes do mundo. Nossos resultados contribuem para uma melhor compreensão das características dos isolados do HIV-1 circulantes no Brasil, informações que poderão ser utilizados em benefício do diagnóstico, tratamento, controle da doença e preparação de vacinas.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2015-03-27T12:59:13Z No. of bitstreams: 1 Tese_ICS_Valdirene Leão Carneiro.pdf: 3088242 bytes, checksum: d92ff6e3e631824f84e771bf545f1b7c (MD5) / Approved for entry into archive by Flávia Ferreira (flaviaccf@yahoo.com.br) on 2015-04-30T12:47:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_ICS_Valdirene Leão Carneiro.pdf: 3088242 bytes, checksum: d92ff6e3e631824f84e771bf545f1b7c (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-30T12:47:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ICS_Valdirene Leão Carneiro.pdf: 3088242 bytes, checksum: d92ff6e3e631824f84e771bf545f1b7c (MD5) / INCT-DT / Introdução: A tuberculose (TB) continua sendo um problema significativo para a saúde pública mundial. A maioria dos indivíduos expostos ao Mycobacterium tuberculosis (Mtb) persistirão infectados, embora, controlem o crescimento micobacteriano. As citocinas podem ter um papel central no controle, susceptibilidade e formas clínicas da TB, além de poderem ser utilizadas como biomarcadores de diagnóstico e prognóstico desta doença. A meta deste estudo foi investigar a possível associação entre o perfil de resposta na produção de citocinas induzida por antígenos do kit Quantiferon®-TB Gold in tube (QFT-IT) e os padrões genéticos de citocinas na tuberculose latente e ativa. Metodologia: Foram selecionados 181 voluntários divididos em três grupos: 51 indivíduos com TB pulmonar, 70 com TST positivo e 60 com TST negativo. Foram coletadas amostras de sangue para a realização do ensaio QFT-IT, imunofenotipagem dos linfócitos e extração do DNA genômico. As citocinas IL-6, IL-10, IFN-γ, TNF e TGF-β1 foram analisadas no sobrenadante do QFT-IT por citometria de fluxo e a genotipagem destas citocinas por PCR-SSP. Resultados e discussão: Houve redução significativa no número de linfócitos totais, células B, células T CD4+ e CD8+ (p <0,005, para todas as células) e aumento percentual de células NK, neutrófilos e monócitos (p=0,038, <0,0001 e <0,001, respectivamente) em pacientes com TB, quando comparados a indivíduos TST positivos e TST negativos. A sensibilidade e especificidade para o QFT-IT foram 92,1% e 80,7%, respectivamente. A concordância entre o TST e o QFT-IT foi de 0,72 (Kappa= 0,45, IC 95% 0,31-0,59). O ponto de corte de 0,30 UI/mL para o QFT-IT não altera a sensibilidade e especificidade no diagnóstico da TB ativa, contudo aumenta a sensibilidade do QFT-IT no diagnóstico da TB latente. O grupo TB apresentou maior frequência do alelo A (p=0,024) e do genótipo AA (p=0,027) IFN-γ +874 em relação aos demais grupos do estudo, sendo que nesse grupo células sanguíneas de indivíduos com genótipo AA apresentaram menores valores de IFN-γ quando estimuladas com a PHA. Para o polimorfismo das outras citocinas não houve diferença significativa entre os grupos do estudo. Sob estímulo da PHA foi observada uma menor produção das citocinas IFN-γ, IL-10 e TNF para o grupo TB em relaçao aos demais. Quando comparada a produção de IL-6 sem estímulo e estimulada com antígenos do Mtb, por grupo de estudo, foi observada uma redução dessa citocina (p= 0,001; <0,0001 e <0,0002 para os grupos TB, TST positivo e TST negativo, respectivamente). Conclusões: O QFT-IT tem concordância moderada com o TST e o ponto de corte de 0,30 UI/mL pode melhorar a sensibilidade para o diagnóstico da TB latente sem perda da especificidade. A imunossupressão sistêmica observada nos pacientes com tuberculose pode levar a diminuição na produção de IL-10, TNF e IFN-γ pelas células sanguíneas quando estimuladas com a PHA. Os antígenos do Mtb podem modulam a resposta imune do hospedeiro por inibir a produção de IL-6 contribuindo para a gravidade da tuberculose. Apesar, do alelo A e o genótipo AA de IFN-γ (+874) estarem associados com a tuberculose e a menor produção de IFN-γ, não há interferência deste polimorfismo sobre o resultado do teste QFT-IT.

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:03:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8776_1.pdf: 656075 bytes, checksum: f415dfef4c4606b9db2dc7acb96ae7ee (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2002 / Este trabalho objetiva avaliar se a atividade proliferativa celular determinada pelo anticorpo MIB 1 mostra diferença significativa entre os vários subtipos do Linfoma de Hodgkin e se poderia, desta forma, ser utilizado no auxílio da caracterização e subclassificação desta entidade nosológica. O material para este estudo foi obtido a partir da seleção de 53 casos do arquivo do Departamento de Patologia do Hospital do Câncer de Pernambuco que tiveram o diagnóstico histológico de Linfoma de Hodgkin. Os casos abrangem pacientes de ambos os sexos, sem restrições de faixa etária, resultantes de biópsias de linfonodos. Foi realizada a revisão histológica e a reação imunohistoquímica utilizando-se o anticorpo anti-Ki67, o qual é expresso por células proliferantes durante todas as fases do ciclo celular, exceto a fase G-0 (repouso) e é considerado o padrão ouro em proliferação celular. O resultado deste estudo mostrou que nenhum padrão característico de expressão do MIB 1(anti-Ki 67) foi observado em qualquer um dos subtipos histológicos do Linfoma de Hodgkin, fazendo com que a realização do marcador MIB 1 (anti-Ki 67), para estes casos, não auxiliasse na subclassificação dos mesmos. A realização de marcadores imunohistoquímicos como o CD 15, CD 30, CD 20, EMA e ALK é recomendada em casos de suspeita de Linfoma de Hodgkin, visto que os mesmos, em conjunto com os achados histológicos, permitem melhor acurácia diagnóstica, subclassificação e exclusão dos diagnósticos diferenciais

A epidemia da Síndrome de Imunodeficiência Adquirida (AIDS) fez aumentar a incidência de sarcoma de Kaposi (SK) em todos os países e o SK passou a ser considerado doença definidora de AIDS. Desde a descoberta de seu agente etiológico, o herpesvírus humano tipo 8 (HHV-8), vários estudos vêm sendo realizados com o objetivo de caracterizar subtipos virais presentes em todas as formas de SK: clássica, endêmica, iatrogênica e epidêmica. Os sistemas rotineiramente usados na subtipagem do HHV-8 têm usado o seqüenciamento de um gene que contém regiões hipervariáveis e que codifica uma glicoproteína de membrana viral (ORF K1). O presente trabalho apresenta um sistema de subtipagem alternativo que se baseia na presença de sítios de restrição enzimática em um pequeno segmento do gene ORF K1, região hipervariável 1 (VR1) e que permite discriminar subtipos virais. A análise de 68 seqüências; 50 que pertenciam a 36 pacientes com sarcoma de Kaposi infectados e não infectados pelo HIV-1 de São Paulo e 18 a protótipos dos subtipos A a E, mostraram mapas de restrição enzimática característicos dos principais subtipos virais descritos até o momento. Tomando como base apenas as enzimas disponíveis comercialmente, foram selecionadas cinco que se mostraram úteis para a subtipagem de HHV-8: Taq I, Nsi I, Hinf I, Hae III e Mse I. Os resultados obtidos com a técnica de PCR-RFLP (reação em cadeia de polimerase associada à análise do polimorfismo de fragmentos de restrição enzimática) mostraram que de 48 espécimes brasileiros previamente classificados como sendo dos subtipos A, B e C por seqüenciamento gênico, todos foram corretamente subtipados pela técnica de PCR-RFLP. Três amostras (duas do subtipo A e uma do B) apresentaram mais um sítio de restrição enzimática além dos descritos como sendo os predominantes. Mais recentemente, outras 27 amostras de 18 casos de infecção por HHV-8 foram subtipadas pela PCR-RFLP. Houve detecção de oito isolados do subtipo A, sendo seis de variante predominante, um de variante minoritária conhecida e um de nova variante viral. Dois casos de infecção por HHV-8 do subtipo B e sete do subtipo C também foram identificados. Finalmente, um provável caso de infecção pelo subtipo E foi encontrado em paciente com SK-AIDS disseminado, resistente à quimioterapia. Na avaliação global, houve maior número de casos de infecção por HHV-8 dos subtipos A e C. Concluindo, devido à alta sensibilidade e especificidade, baixo custo, rapidez e facilidade de execução, a técnica de PCR-RFLP pode ser usada em larga escala para estudos de epidemiologia molecular, principalmente em países em desenvolvimento. / AIDS epidemic has increased the incidence rates of Kaposi’ s sarcoma (KS) in all countries, and KS has been considered an AIDS-defining illness. Since the discovery of the human herpesvirus 8 (HHV-8), the etiological agent of KS, several studies have been conducted in order to characterize HHV-8 in all forms of KS: classic, endemic, iatrogenic, and epidemic. The HHV-8 genome presents a hypervariable region termed ORF K1 useful for virus subtyping. The objectives of the present study were to describe an alternative method for subtyping HHV-8, to compare this new method with DNA sequencing, and to use this method for HHV-8 subtyping. After cloning and sequencing a segment of the ORF K1 (VR1) in 50 HHV-8/DNA isolates from 36 Brazilian KS-AIDS patients, we searched for restriction enzymatic sites in this segment of DNA, and compared them with 18 sequences reported in the literature. Then we constructed the enzymatic restriction maps useful for discriminating all HHV-8 subtypes described up to now, and standardized a PCR-RFLP (restriction fragment length polymorphism analysis) using five commercial enzymes: Taq I, Nsi I, Hinf I, Hae III e Mse I. After comparing the results obtained by the two methods, we used PCR-RFLP for HHV-8 subtyping in 27 new HHV-8/DNA isolates. The results obtained by DNA sequencing and PCR-RFLP showed 100% of concordance, and allowed the use of PCR-RFLP for HHV-8 subtyping. Indeed, we disclosed that among KS-AIDS patients from São Paulo, subtypes A and C are more prevalent than subtype B. Although additional restriction sites were detected in some Brazilian HHV-8 isolates, the majority of them belonged to the predominant strains described in the literature. Interestingly, one probable case of HHV-8 subtype E was detected in a patient who presented disseminated KS and resistance to chemotherapy. Because of its high sensitivity, specificity, low cost, and rapid execution, PCR-RFLP could be used on a large scale, mostly in countries with poor resources and where KS is endemic.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2018-05-11T13:03:15Z No. of bitstreams: 1 PDF - Aline Ferreira de Araújo Jerônimo.pdf: 26670711 bytes, checksum: 92864afd3e086a9cb19dbb47d53bcc6a (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2018-05-22T20:48:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Aline Ferreira de Araújo Jerônimo.pdf: 26670711 bytes, checksum: 92864afd3e086a9cb19dbb47d53bcc6a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-22T20:48:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Aline Ferreira de Araújo Jerônimo.pdf: 26670711 bytes, checksum: 92864afd3e086a9cb19dbb47d53bcc6a (MD5) Previous issue date: 2017-03-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Background: Breast cancer is the type of cancer that most causes deaths among women in developing countries. In Brazil, an incidence of the disease increases and the number of new cases of breast cancer can be attributed to the increase in life expectation of women and changes related to reproductive factors and lifestyle. Objectives: The aim of this study was to analyze the literature on breast cancer risk factors and knowledge about the disease and to identify associations between risk factors and triple-negative breast cancer. Methods: Two scientific articles were developed for publication. The first article deals with an integrative review on the knowledge of breast cancer and its risk factors in Latin American studies. The second article deals with a cross-sectional study on lifestyle risk factors and triple-negative breast cancer, performed with 236 women diagnosed with invasive breast cancer in the state of Paraiba. Results: In the integrative review, of 47 studies selected, 27 were about risk of breast cancer and 20 were about knowledge or awareness. The main risk factors identified by the authors were obesity and overweight, old age, family history of breast cancer, nulliparity and menopause. The articles on knowledge focused in early diagnosis of breast cancer and breast self-examination was the most investigated method of detection. The cross - sectional study showed that smoking and obesity had associations with the triple- negative subtype of breast cancer. Women who smoked sometime in their lives had 3.70 (OR = 0.270, 95% CI: 0.10-0.68, p = 0.006) times less likely to have a triple-negative subtype. Patients with obesity had 3,514 (95% CI: 1.23 - 10.03; p = 0.019) more likely to have the triple-negative subtype when compared to the Luminal A subtype. Conclusions: The literature on breast cancer risk factors presents a better methodological outline and theoretical basis than the literature on the knowledge of the disease. Smoking is associated with lower chances of having triple-negative breast cancer, while obesity is associated with a higher chance of developing this type of breast cancer. / Introdução: O câncer de mama é o tipo de neoplasia que mais causa mortes entre as mulheres nos países em desenvolvimento. No Brasil, a incidência da doença é elevada no Nordeste do país e o aumento no número de casos novos pode ser atribuído às mudanças relacionadas aos fatores reprodutivos e do estilo de vida. Objetivos: Esta dissertação teve como objetivo analisar a literatura sobre os fatores de risco do câncer de mama e o conhecimento sobre a doença e identificar associações entre fatores de risco e o câncer de mama do tipo triplo-negativo. Métodos: Foram desenvolvidos dois artigos científicos para publicação. O primeiro artigo trata-se de uma revisão integrativa sobre o conhecimento da neoplasia mamária e seus fatores de risco em estudos Latino americanos. O segundo artigo trata-se de um estudo transversal sobre fatores de risco do estilo de vida e o câncer de mama triplo-negativo, realizado com 236 mulheres diagnosticadas com câncer de mama invasivo no estado da Paraíba. Resultados: Na revisão integrativa da literatura foram selecionados 47 artigos, dos quais 27 eram sobre fatores de risco do câncer de mama e 20 eram sobre conhecimento ou consciência sobre a doença. Os principais fatores de risco identificados pelos autores foram obesidade e sobrepeso, idade avançada, historia familiar de câncer de mama, nuliparidade e menopausa. Os artigos sobre conhecimento destacaram o diagnóstico precoce da neoplasia mamária e o autoexame foi o método de detecção mais investigado. O estudo transversal mostrou que tabagismo e obesidade tiveram associações com o subtipo triplo-negativo do câncer de mama. As mulheres que já fumaram alguma vez na vida tiveram 3.70 (OR= 0.270; 95% CI: 0.10-0.68; p= 0.006) vezes menos chances de ter o subtipo triplo-negativo. Pacientes com obesidade tiveram 3.514 (95% CI: 1.23- 10.03; p= 0.019) mais chances de ter o subtipo triplo-negativo quando comparadas com o subtipo Luminal A. Conclusões: A literatura sobre fatores de risco do câncer de mama apresenta melhor delineamento metodológico e fundamentação teórica do que a literatura sobre o conhecimento da doença. O tabagismo está associado a menores chances de ter o câncer de mama triplo-negativo, enquanto que a obesidade está associada a maiores chances de desenvolver esse tipo de câncer de mama.

A epidemia da Síndrome de Imunodeficiência Adquirida (AIDS) fez aumentar a incidência de sarcoma de Kaposi (SK) em todos os países e o SK passou a ser considerado doença definidora de AIDS. Desde a descoberta de seu agente etiológico, o herpesvírus humano tipo 8 (HHV-8), vários estudos vêm sendo realizados com o objetivo de caracterizar subtipos virais presentes em todas as formas de SK: clássica, endêmica, iatrogênica e epidêmica. Os sistemas rotineiramente usados na subtipagem do HHV-8 têm usado o seqüenciamento de um gene que contém regiões hipervariáveis e que codifica uma glicoproteína de membrana viral (ORF K1). O presente trabalho apresenta um sistema de subtipagem alternativo que se baseia na presença de sítios de restrição enzimática em um pequeno segmento do gene ORF K1, região hipervariável 1 (VR1) e que permite discriminar subtipos virais. A análise de 68 seqüências; 50 que pertenciam a 36 pacientes com sarcoma de Kaposi infectados e não infectados pelo HIV-1 de São Paulo e 18 a protótipos dos subtipos A a E, mostraram mapas de restrição enzimática característicos dos principais subtipos virais descritos até o momento. Tomando como base apenas as enzimas disponíveis comercialmente, foram selecionadas cinco que se mostraram úteis para a subtipagem de HHV-8: Taq I, Nsi I, Hinf I, Hae III e Mse I. Os resultados obtidos com a técnica de PCR-RFLP (reação em cadeia de polimerase associada à análise do polimorfismo de fragmentos de restrição enzimática) mostraram que de 48 espécimes brasileiros previamente classificados como sendo dos subtipos A, B e C por seqüenciamento gênico, todos foram corretamente subtipados pela técnica de PCR-RFLP. Três amostras (duas do subtipo A e uma do B) apresentaram mais um sítio de restrição enzimática além dos descritos como sendo os predominantes. Mais recentemente, outras 27 amostras de 18 casos de infecção por HHV-8 foram subtipadas pela PCR-RFLP. Houve detecção de oito isolados do subtipo A, sendo seis de variante predominante, um de variante minoritária conhecida e um de nova variante viral. Dois casos de infecção por HHV-8 do subtipo B e sete do subtipo C também foram identificados. Finalmente, um provável caso de infecção pelo subtipo E foi encontrado em paciente com SK-AIDS disseminado, resistente à quimioterapia. Na avaliação global, houve maior número de casos de infecção por HHV-8 dos subtipos A e C. Concluindo, devido à alta sensibilidade e especificidade, baixo custo, rapidez e facilidade de execução, a técnica de PCR-RFLP pode ser usada em larga escala para estudos de epidemiologia molecular, principalmente em países em desenvolvimento. / AIDS epidemic has increased the incidence rates of Kaposi’ s sarcoma (KS) in all countries, and KS has been considered an AIDS-defining illness. Since the discovery of the human herpesvirus 8 (HHV-8), the etiological agent of KS, several studies have been conducted in order to characterize HHV-8 in all forms of KS: classic, endemic, iatrogenic, and epidemic. The HHV-8 genome presents a hypervariable region termed ORF K1 useful for virus subtyping. The objectives of the present study were to describe an alternative method for subtyping HHV-8, to compare this new method with DNA sequencing, and to use this method for HHV-8 subtyping. After cloning and sequencing a segment of the ORF K1 (VR1) in 50 HHV-8/DNA isolates from 36 Brazilian KS-AIDS patients, we searched for restriction enzymatic sites in this segment of DNA, and compared them with 18 sequences reported in the literature. Then we constructed the enzymatic restriction maps useful for discriminating all HHV-8 subtypes described up to now, and standardized a PCR-RFLP (restriction fragment length polymorphism analysis) using five commercial enzymes: Taq I, Nsi I, Hinf I, Hae III e Mse I. After comparing the results obtained by the two methods, we used PCR-RFLP for HHV-8 subtyping in 27 new HHV-8/DNA isolates. The results obtained by DNA sequencing and PCR-RFLP showed 100% of concordance, and allowed the use of PCR-RFLP for HHV-8 subtyping. Indeed, we disclosed that among KS-AIDS patients from São Paulo, subtypes A and C are more prevalent than subtype B. Although additional restriction sites were detected in some Brazilian HHV-8 isolates, the majority of them belonged to the predominant strains described in the literature. Interestingly, one probable case of HHV-8 subtype E was detected in a patient who presented disseminated KS and resistance to chemotherapy. Because of its high sensitivity, specificity, low cost, and rapid execution, PCR-RFLP could be used on a large scale, mostly in countries with poor resources and where KS is endemic.