O trabalho teve como objetivo avaliar e quantificar o tecido ósseo neoformado, a distribuição e a importância das proteínas não colágenas (osteocalcina, osteopontina e osteonectina) no processo de reparação tecidual do alvéolo dental de ratos Wistar idosos após exodontia. Para sua realização, foram utilizados 80 Rattus Norvegicus albinus, linhagem Wistar, machos. Os animais foram distribuídos em dois grupos: Grupo Controle, correspondente a animais com 60 dias de vida; e Grupo Experimental correspondente aos animais com 2 anos de vida (700 dias em média). Cada grupo foi dividido em 4 subgrupos de 10 animais em cada grupo. Os animais foram submetidos à exodontia do incisivo superior direito e foram sacrificados com 05, 15, 21 e 28 dias de pós-operatório. Após a dissecção, 5 amostras foram submetidas à análise por microscopia convencional com coloração por Hematoxilina e Eosina e análise da imunohistoquímica e 5 amostras para análise por RT-PCR. Os resultados mostraram que o processo de envelhecimento não alterou a cronologia do reparo ósseo alveolar e não promoveu maior remodelação do alvéolo dental. A osteocalcina não apresentou atuação importante nos períodos pós-operatórios estudados. A osteonectina apresentou-se importante no processo de reparo, não sofrendo alterações no início da reparação óssea, apresentando marcação mais intensa durante a maturação óssea entre 21 e 28 dias de pós-operatório no grupo controle e diminuição da marcação no grupo experimental aos 28 dias de pósoperatório. O envelhecimento proporcionou uma diminuição da imunomarcação da osteonectina e demonstrou marcações positivas principalmente em osteoblastos e matriz mineralizada. A osteopontina apresentou-se importante no processo de reparo ósseo durante todos os períodos pós-operatório, apresentando marcações em osteoblastos, matriz osteóide, osteócitos e matriz mineralizada, apresentando maior marcação dos tipos celulares do no grupo experimental aos 28 de pós-operatório. Apesar desses achados, novos estudos são necessários para o melhor entendimento do processo de reparo ósseo alveolar em ratos adultos e idosos. / The aim of the present study was to evaluate and quantify the newly formed bone tissue, as well as the distribution and the importance of non-collagen proteins (osteocalcin, osteopontin and osteonectin) in the process of dental alveolar repair in Wistar aged rats submitted to tooth extraction. To perform that, about 80 male Rattus Norvegicus albinus, Wistar strain, were randomly distributed into two groups: Control Group corresponding to 60 days old rats; and Experimental Group corresponding to 2 years old animals (about 700 days old). Both groups were later subdivided into 4 subgroups consisting of 10 animals each. All animals were submitted to the upright incisive tooth extraction and were euthanized 05, 15, 21 and 28 days after the tooth extraction surgery. After the dissection, five samples from each subgroup underwent conventional microscopy analysis by hematoxylin-eosin stain as well as immunohistochemistry. Bone tissue from other five samples of each groups were subjected to Real Time RT-PCR analysis of non-collagen proteins expression The results obtained suggest that aging process was not able to change either the chronology of alveolar bone repair or the remodeling of dental alveolus. Osteocalcin did not present any important action in the post-operation periods evaluated. On the other hand, osteonectin showed an important role during the repair process, since its expression was increased in the control group and decreased in comparison to the experimental group at 28 days. Osteopontin was important in the bone repair in all times evaluated, since it was present in osteoblasts, osteiod matrix, osteocytes and mineralized matrix, being even more stained at 21 days after the surgery. Finally, besides the results obtained in the present work, other studies are necessary to better understand the alveolar bone repair in adult and aged rats.

A solução de Carnoy é rotineiramente empregada na prática clínica do cirurgião buco-maxilo-facial no tratamento coadjuvante de tumores odontogênicos benignos, por acreditar que ela possa provocar uma osteonecrose local e promover uma margem de segurança à cirurgia. O objetivo do presente trabalho foi verificar em um estudo in vivo, se a solução de Carnoy (substância teste) realmente causa osteonecrose e qual o seu impacto na reparação do tecido ósseo quando comparada com o soro fisiológico 0,9% (substância controle). Para isso, um defeito monocortical de 3 mm de diâmetro foi criado bilateralmente na superfície vestibular da mandíbula de 15 ratos Wistar sendo que, do lado direito foi realizada uma aplicação da solução de Carnoy por 5 minutos e do lado esquerdo, uma aplicação de soro fisiológico 0,9% por cinco minutos. Os animais foram igualmente subdivididos em três grupos para avaliar os efeitos da solução imediatamente, 3 e 10 dias após as aplicações, quando os espécimes foram coletados e preparados para as análises histológicas e estatísticas. Imediatamente e após 3 dias de sua aplicação, a substância teste não demonstrou provocar mais osteonecrose que a controle. No terceiro dia, ocorreu maior formação de coágulo sanguíneo dentro do defeito monocortical após a aplicação da substância controle; contudo, após 10 dias das aplicações, a quantidade de neoformação óssea não foi diferente entre elas. Concluímos que os efeitos da solução de Carnoy sobre o tecido ósseo devem ser questionados, mas seu poder fixativo das células tumorais não pode ser desprezado. / Carnoy\'s solution is routinely used in clinical practice of oral and maxillofacial surgeons in the supplementary treatment of benign odontogenic tumors, given its capacity to cause local osteonecrosis, promoting a safety margin to the procedure. The aim of this study was to verify by an in vivo model, if Carnoy\'s solution (test) causes more osteonecrosis and what is it effect on bone healing when compared to saline solution 0,9% (control). For this, a monocortical defect was created bilaterally at vestibular aspect of 15 Wistar rats mandibles; right side received one 5 minutes Carnoy\'s solution application and left, one 5 minutes saline application. The animals were equally subdivided in three groups to investigate Carnoy\'s effect immediately, three and ten days after applications, when specimens were collected and prepared to histological and statistical analysis. Immediately and three days after its application, test substance did not show more osteonecrosis than control. At third day, it was observed more formation of blood clot inside monocortical defect for control; however, 10 days after applications, bone healing was not different between substances. We conclude that Carnoy\'s solution effects to bone tissue ought to be questioned but its capacity to fixate tumor cells may not be despised.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:04:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000422372-Texto+Completo-0.pdf: 14448387 bytes, checksum: fdc8fa6c2b5c86975a8032bed0f8c5a8 (MD5) Previous issue date: 2010 / Objective: This study evaluates the effect of alpha-tricalcium phosphate cement (U- TCP) and platelet-rich plasma (PRP) on osteogenesis, when used alone or together, comparing to the gold-standard (autologous graft). Material and Methods: Thirty-four Wistar-Kyoto rats were used in this study. A bilateral femur defect was created, and each hole was filled with one of the four types of treatments (autologous bone graft, U-TCP cement, PRP and U-TCP cement+PRP) and evaluated in 4 and 8 weeks. In the control group no filling was applied. The X-ray images provided values of area and longitudinal length of the defect, and the histological images, indicated the new bone formation area. Results: Regarding the effect of the treatments on the bone defect, independently of the time, the X-ray results did not provide sufficient data to confirm important differences in both variables analyzed – area and length (p=0,08). In the histomorphometry, it was observed a better performance of the treatment with autologous bone graft, and it presented significant differences regarding the new bone formation area, independently of the time, compared to the PRP (p=0,05) and control (p=0,041). On the other hand, there were no important differences between autologous graft and the groups U-TCP cement+PRP and U-TCP cement (p>0,05). The treatments PRP, U-TCP cement and U-TCP cement+PRP did not differ significantly from the control group, as well as when they were compared to each other. Conclusion: The data of this study suggest that the treatments with U-TCP cement and PRP, when applied alone or together, do not present positive effect on bone healing. / Objetivo: Avaliar o efeito de cimento de alfa-fosfato tricálcico (U-TCP) e plasma rico em plaquetas (PRP) sobre a osteogênese, quando utilizados isoladamente ou em conjunto, comparando os resultados com o padrão-ouro (enxerto autólogo). Material e Métodos: Trinta e quatro ratos Wistar-Kyoto foram utilizados no estudo. Foi criado um defeito cavitário bilateral no fêmur e cada cavidade foi preenchida com um dos 4 tipos de tratamentos (enxerto autólogo; cimento U-TCP; PRP; cimento U-TCP+PRP), sendo avaliados em 4 e 8 semanas. No grupo controle não foi aplicado nenhum preenchimento. As imagens radiográficas forneceram valores da área e do comprimento longitudinal da lesão, e as imagens histológicas indicaram a área de neoformação óssea. Resultados: Quanto ao efeito dos tratamentos sobre a lesão óssea independentemente do tempo, os resultados radiográficos encontrados não forneceram dados suficientes para comprovar diferenças significativas nas duas variáveis analisadas, área e comprimento (p=0,08). Na histomorfometria, foi observado um melhor desempenho do tratamento com enxerto autólogo, apresentando diferenças significativas quanto à área de neoformação óssea, independente do tempo, em relação aos grupos PRP (p=0,05) e controle (p=0,041). Em contrapartida, não foram verificadas diferenças com significância entre enxerto autólogo e os grupos cimento U-TCP+PRP e cimento U-TCP (p>0,05). Os tratamentos PRP, cimento U-TCP e cimento U-TCP+PRP não diferiram significativamente do grupo controle, assim como não foram evidenciadas diferenças quando comparados entre si. Conclusão: Os dados do presente estudo sugerem que os tratamentos com cimento U-TCP e PRP, aplicados isoladamente ou em conjunto, não demonstram efeito positivo sobre o reparo ósseo.

A descoberta das células tronco adultas tornou possível a sua aplicação clínica em protocolos de medicina regenerativa e de engenharia de tecidos para a reparação de órgãos danificados ou pouco funcionais. Neste sentido, são conhecidas muitas fontes diferentes de células tronco adultas, entre elas o tecido epitelial, o tecido muscular e a medula óssea. Recentemente, o tecido adiposo adulto foi reconhecido como uma fonte alternativa, acessível e rica em células tronco mesenquimais (MSCs), também denominadas de células tronco derivadas do tecido adiposo (hADSCs). As hADSCs são as células tronco adultas que apresentam a maior plasticidade, e são facilmente isoladas pela característica de aderência a substratos plásticos. Sob condições específicas de cultivo, as hADSCs podem diferenciar-se em células precursoras osteoblásticas. Dentre as proteínas necessárias para a diferenciação das hADSCs, o papel do complexo minichromosome maintenance (MCM) não é muito bem conhecido. A proteína MCM2 é parte do complexo MCM, fazendo parte do complexo pré-replicativo (pre-RC). Em células proliferativas, o gene MCM2 apresenta alta expressão, sendo que o seu produto gênico está relacionado com os mecanismos de reparação de DNA. Sendo assim, analisamos as mudanças na expressão do gene MCM2 durante a osteodiferenciação das hADSCs em diferentes meios de cultura, contendo BMP-4 ou OM. Os genes relacionados com a osteodiferenciação, como osteocalcina (OC), osteopontina (OP) e fosfatase alcalina (ALP) foram analisados por RT-PCR, por PCR em tempo real e citoquímica. Os dados obtidos pelas técnicas citoquímicas e de biologia molecular indicaram uma diminuição da expressão do gene MCM2 durante a osteodiferenciação, que pode estar relacionada com danos ao DNA ou senescência nas hADSCs. / The discovery of adult stem cells is a promise field in regenerative medicine and tissue engineering. There are many sources of adult stem cells among which of whom are the skin, muscle and bone marrow. Currently, the adipose tissue has been an alternative source of mesenchymal stem cells (MSCs), termed human adipose-derived stem cells (hADSCs). The MSCs are the most plastic adult stem cells known until now and are easily isolated by adherence in plastic substrates. Under specifics conditions of culture hADSCs can be differentiated in osteoblast cell precursors. Among proteins needed for hADSCs differentiation, the roles of minichromosome maintenance (MCM) complex remains poorly understood. The protein complex MCM2-7 is part of DNA pre-replicative complex (pre-RC), being abundant in proliferating cells and involved in DNA repair mechanisms. In this sense, the Mcm2 is essential for the activity of the MCM complex. Thus, we analysed MCM2 gene expression changes during osteoinduction by culturing hADSCs in different media containing BMP-4 or in osteogenic medium. Genes related to osteodifferentiation, like osteocalcin (OC), osteopontin (OP) and alkaline phosphatase (ALP) were analysed by molecular and cytochemistry approaches during osteodifferentiation. Interestingly, we observed a decrease in the MCM2 gene level osteoinduction of hADSCs in osteogenic medium, which could be related to an increase in genome damage and senescence in hADSCs.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-01-26 / Introdução: É sabido que tanto as isoflavonas da soja (ISO) e a vibração mecânica de baixa intensidade e alta freqüência (VIB) possuem efeitos protetores no tecido ósseo de ratas ooforectomizadas (OVX). Objetivos: estudar os efeitos dos tratamentos com ISO e VIB isolados e combinados no tecido ósseo de ratas OVX. Métodos: 50 ratas Wistar com 6 meses de idade foram SHAM operadas ou OVX e após três meses, divididas em 5 grupos: SHAM; OVX; OVX tratadas diariamente por gavage com 200mg/kg de ISO por 90 dias consecutivos (OVX-ISO); OVX tratadas com VIB, 20 min./dia, 30 Hz, 0.6g, 5 dias por semana por 90 dias (OVX-VIB) e OVX tratadas com ISO e VIB (OVX-ISO+VIB). Após o tratamento, os fêmures e tíbias foram coletados e seus comprimento e espessura foram medidos. Os fêmures foram processados para histomorfometria e aos métodos histoquímicos, bioquímico e do TUNEL. As tíbias foram congeladas e destinadas para testes físicos e biomecânicos. Resultados: Os tratamentos não exerceram efeitos significantes no peso corporal e nas medidas de comprimento e espessura, exceto na espessura das tíbias dos grupos OVX-ISO e OVX-ISO+VIB que foi significantemente maior comparado ao grupo SHAM. Os testes físicos mostraram que o peso imerso, a porcentagem de material orgânico e a densidade óssea foram maiores nos grupos SHAM, OVX-VIB e OVX-ISO+VIB quando comparados aos outros grupos, enquanto que o volume ósseo, a densidade mineral óssea, porc entagem de material mineral e o peso das cinzas foram maiores nos grupos OVX e OVX-ISO do que nos outros grupos e não houve diferenças significantes nos parâmetros biomecânicos analisados entre os grupos. Nos fêmures, os tratamentos não exerceram efeitos significantes no volume ósseo trabecular, porém, o tratamento combinado exerceu efeitos positivos no osso cortical. Os tratamentos tiveram efeitos positivos em relação à quantidade e na organização das fibras colágenas e esse efeito foi mais expressivo no grupo OVX-ISO+VIB. O método do TUNEL não detectou diferenças nas células TUNEL-positivas entre os grupos. Conclusão: Esses resultados demonstram que o tratamento combinado (ISO+VIB) exerce maior efeito nos constituintes do tecido ósseo de ratas ooforectomizadas osteopênicas, quando comparado aos tratamentos isolados. / Introduction: It has been shown that both soy isoflavones (ISO) and low intensity high frequency mechanical vibration (VIB) have protective effects in bone tissue of ovariectomized (OVX) rats. Objective: We investigated whether combined treatments with ISO and VIB would exhibit cooperative effects in bone tissue of OVX rats. Methods: Fifty female Wistar rats at the age of 6 months were either sham-operated or OVX. After operation, the rats were divided in five groups: SHAM; OVX; OVX treated daily by gavage with 200mg/kg/body weight of ISO for 90 days (OVX-ISO); OVX treated with VIB, 20 min./day, at 60 Hz, 0.5g, 5 days/ week for 90 days (OVX-VIB) and OVX treated with ISO and VIB (OVX-ISO+VIB). After treatment, the femurs and tibias were collected and its length and thickness were measured. The femurs were then processed for histomorphometry, histochemistry and biochemical assay. The tibias were frozen for subsequent physical and mechanical tests. Results: Treatments did not have significant effects on body weight and in the bone measurements, except in the tibial thickness of the OVX-ISO and OVX-ISO+VIB groups that was significant higher than the SHAM group. Physical tests showed that the immersed weight, content of organic material and bone density were higher in the SHAM, OVX-VIB and OVX-ISO+VIB groups than the other groups, while the bone volume, bone mineral density, mineral material and the ash weight were higher in the OVX and OVX-ISO groups than the other groups and there were no significant differences in the mechanical tests among the groups. Treatment did not have significant effects in the trabecular bone volume, but it was not detected cortical bone loss in the group treated with the combined therapy. The treatments showed positive effects in the content of glycosaminoglycans, as well as in the organization of collagen fibers and these effects was higher in the OVX-ISO+VIB group. The TUNEL-positive cell profile was similar among the groups. Conclusion: These results demonstrate that the combined treatment (ISO+VIB) have better effects in the bone tissue constituents of ovariectomized osteopenic rats, when compared with the treatments isolated. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

A descoberta das células tronco adultas tornou possível a sua aplicação clínica em protocolos de medicina regenerativa e de engenharia de tecidos para a reparação de órgãos danificados ou pouco funcionais. Neste sentido, são conhecidas muitas fontes diferentes de células tronco adultas, entre elas o tecido epitelial, o tecido muscular e a medula óssea. Recentemente, o tecido adiposo adulto foi reconhecido como uma fonte alternativa, acessível e rica em células tronco mesenquimais (MSCs), também denominadas de células tronco derivadas do tecido adiposo (hADSCs). As hADSCs são as células tronco adultas que apresentam a maior plasticidade, e são facilmente isoladas pela característica de aderência a substratos plásticos. Sob condições específicas de cultivo, as hADSCs podem diferenciar-se em células precursoras osteoblásticas. Dentre as proteínas necessárias para a diferenciação das hADSCs, o papel do complexo minichromosome maintenance (MCM) não é muito bem conhecido. A proteína MCM2 é parte do complexo MCM, fazendo parte do complexo pré-replicativo (pre-RC). Em células proliferativas, o gene MCM2 apresenta alta expressão, sendo que o seu produto gênico está relacionado com os mecanismos de reparação de DNA. Sendo assim, analisamos as mudanças na expressão do gene MCM2 durante a osteodiferenciação das hADSCs em diferentes meios de cultura, contendo BMP-4 ou OM. Os genes relacionados com a osteodiferenciação, como osteocalcina (OC), osteopontina (OP) e fosfatase alcalina (ALP) foram analisados por RT-PCR, por PCR em tempo real e citoquímica. Os dados obtidos pelas técnicas citoquímicas e de biologia molecular indicaram uma diminuição da expressão do gene MCM2 durante a osteodiferenciação, que pode estar relacionada com danos ao DNA ou senescência nas hADSCs. / The discovery of adult stem cells is a promise field in regenerative medicine and tissue engineering. There are many sources of adult stem cells among which of whom are the skin, muscle and bone marrow. Currently, the adipose tissue has been an alternative source of mesenchymal stem cells (MSCs), termed human adipose-derived stem cells (hADSCs). The MSCs are the most plastic adult stem cells known until now and are easily isolated by adherence in plastic substrates. Under specifics conditions of culture hADSCs can be differentiated in osteoblast cell precursors. Among proteins needed for hADSCs differentiation, the roles of minichromosome maintenance (MCM) complex remains poorly understood. The protein complex MCM2-7 is part of DNA pre-replicative complex (pre-RC), being abundant in proliferating cells and involved in DNA repair mechanisms. In this sense, the Mcm2 is essential for the activity of the MCM complex. Thus, we analysed MCM2 gene expression changes during osteoinduction by culturing hADSCs in different media containing BMP-4 or in osteogenic medium. Genes related to osteodifferentiation, like osteocalcin (OC), osteopontin (OP) and alkaline phosphatase (ALP) were analysed by molecular and cytochemistry approaches during osteodifferentiation. Interestingly, we observed a decrease in the MCM2 gene level osteoinduction of hADSCs in osteogenic medium, which could be related to an increase in genome damage and senescence in hADSCs.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2543.pdf: 1092936 bytes, checksum: 2fe1545577f51cbb0e2fb861e1efb516 (MD5) Previous issue date: 2009-07-16 / Financiadora de Estudos e Projetos / The bone tissue is influenced by internal and external factors and heavy metals, as mercury, are examples of external or environmental factors. The mercury chloride (HgCl2) when absorbed by human body, deposits in the bone and fat tissue and dislocates bones and muscles minerals to circulation, being able to provoke illnesses. In this study, Wistar rats were divided in 4 groups: 3m, 6m, 9m and 12 months (12m) days of life. The animals were treated with HgCl2 or saline through gavage. The treatment began at 30 days of age, 5 times per week, during 60 days. The daily dose was of 0,3mg/Kg of body weight (BW) of HgCl2 and 0,1ml of saline/100g BW. After this period, the group 3m was sacrificed immediately afterwards by decapitation whereas the other groups had remained without treatment until they completed the desired age. The right femurs and vertebrae (L5) were removed for biometrics, physical and biomechanics analysis. The treatment with mercury chloride induced higher values of physical and biometric parameters in the 6m group and lower values in the 12m group and no odifications in the 3 and 9 m groups, when compared with saline treatment. Moreover, the treatment with CM promoted rats vaginal opening with 51 days of life in treated group whereas in the controls this opening occurred in 44,4 days of life.We concluded that the treatment with HgCl2, in the dose of 0,3mg/Kg BW retarded the age at the speed change of the growth of the animals, especially in 6m and 12m groups. Moreover, the HgCl2 promoted bone fragility in animals from 12m group, as can be observed by the analysis of the biometrics, physicals and biomechanics properties, in both femur and vertebrae. The treatment with CM still delayed the sexual maturity of rats. / O tecido ósseo sofre influências de fatores intrínsecos e extrínsecos. Entre os fatores externos ou ambientais, encontram-se os metais pesados, como por exemplo, o mercúrio. O composto cloreto de mercúrio (CM - HgCl2) quando absorvido pelo ser humano, se deposita no tecido ósseo e gorduroso deslocando minerais nobres dos ossos e músculos para a circulação, podendo provocar doenças. Neste estudo, ratas Wistar foram divididas em 4 grupos: 3m, 6m, 9m e 12 meses (12m) de vida. Os animais tratados com mercúrio receberam HgCl2 e os controles, salina por gavagem gástrica. O tratamento iniciou-se aos 30 dias de vida do animal, 5 vezes por semana, durante 60 dias. A dose diária foi de 0,3mg/kg de peso corporal de HgCl2 e de 0,1ml de salina /100g de peso corporal. Após esse período, o grupo 3m foi sacrificado logo em seguida por decapitação enquanto que os demais grupos permaneceram sem tratamento até que completassem a idade desejada. Os animais tiveram seus fêmures direitos e vértebras (L5) retirados para análise dos parâmetros biométricos, físicos e biomecânicos. O tratamento com CM promoveu aumentos dos valores dos parâmetros físicos e biométricos no grupo 6m e redução no grupo 12m, e inalteração nos grupos 3 e 9 meses. Além disso, o tratamento com CM promoveu abertura vaginal das ratas tratadas com CM aos 51 dias de vida enquanto que nos controles essa abertura ocorreu nos 44,4 dias de vida. Concluímos que o tratamento com HgCl2, na dose de 0,3mg/Kg PC retardou a idade em que ocorre a mudança de velocidade do crescimento dos animais, especialmente nos grupos 6m e 12m. Além disso, a contaminação com mercúrio promoveu fragilidade óssea nos animais do grupo 12m, comprovada pela análise das propriedades biométricas, físicas e biomecânicas, tanto dos fêmures como das vértebras, além de atrasar a maturidade sexual das ratas.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3395.pdf: 2690333 bytes, checksum: 00f09a0b23fd204a83ebf1fa55f2b3ed (MD5) Previous issue date: 2010-10-08 / Financiadora de Estudos e Projetos / The aim of this study was to investigate the effects of lead on femurs and vertebrae during development and skeletal maturity of female rats. For this purpose, one month old female rats were treated with lead acetate 100mg/kg BW or saline 0,9% 0,1ml/100g BW . The treatment was administrated by gastric gavage, once a week, during two months. After the treatment period, the animals received only tap water and commercial chow ad libitum until they completed 6, 9 and 12 months of life. The 3 months old groups were sacrificed soon after the treatment. The incorporation of lead in bone tissue occurred in all groups of intoxicated animals. The lead did not interfere the body development of experimental animals. The lead intoxication induced reduced maximum load, stiffness and resilience of the femur in the threepoint bending test in the groups 6, 9 and 12 months of life. The compression test of vertebrae of contaminated rats showed reduction of biomechanical parameters only in skeletally mature rats (9 months). The present study revealed that lead exposure during early stage of development affected the bone mineral profile leading to biomechanical weakness with skeletal maturity. The results allow us to conclude that lead exposure affects the biomechanical properties of mature bone increasing susceptibility to fractures. / O objetivo deste trabalho foi investigar os efeitos do chumbo sobre fêmures e vértebras de ratas durante seu desenvolvimento e maturidade esquelética. Para este propósito, ratas com um mês de idade foram intoxicadas com acetato de chumbo 100mg/Kg de massa corporal, e os grupos controles tratados com salina 0,9% 0,1 ml/100g de massa corporal. O tratamento foi realizado via gavagem gástrica, uma vez por semana, durante 2 meses. Após este período, a contaminação foi cessada e os animais receberam apenas água e ração comercial ad libitum até completarem 6, 9 e 12 meses de vida, sendo os animais do grupo 3 meses eutanasiados ao final do tratamento. A incorporação do chumbo no tecido ósseo ocorreu em todos os grupos de animais intoxicados. O chumbo não prejudicou o desenvolvimento corporal dos animais experimentais. No teste de flexão a três pontos, foi observada a redução da força máxima, rigidez e resiliência dos fêmures dos animais contaminados dos grupos 6, 9 e 12 meses. Nas vértebras (teste de compressão), esta redução foi evidente em ratas maduras esqueléticamente (9 meses de idade). O presente estudo revelou que a exposição ao chumbo, durante o estágio inicial de desenvolvimento esquelético, afeta o perfil mineral ósseo levando ao enfraquecimento biomecânico com a maturidade esquelética. Os resultados nos levam a concluir que a exposição ao chumbo afeta as propriedades biomecânicas do osso maduro aumentando a predisposição à fraturas.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:40Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000418943-0.pdf: 9796765 bytes, checksum: 405509b47e3c4c0af3b7ead50b0ef57a (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / This study evaluated the effect of low level laser therapy (LLLT) on the percentage of new bone formation and on the chemical composition, crystallinity and crystalline structure at the site of distraction osteogenesis (DO). Fifteen rabbits underwent DO (latency: 3 days; activation: 7 days at 0. 7 mm/day; consolidation: 10 days). LLLT was performed with 10 J/cm2 AsGaAI (830 nm, 40 mW) laser irradiations applied directly to the site that underwent DO at 48-hour intervals during bone consolidation. Specimens were collected after consolidation; 10 specimens, 6 of which received LLLT, were analyzed using light microscopy to measure the percentage of new bone formation, and six, 3 of which were treated with LLLT (one excluded due to early fragment union and another due fracture of specimen after dissection) were analyzed using fluorescence and X-ray diffraction to analyze chemical composition, crystallinity and crystalline structure at the DO site.The percentage of new bone formation was greater in the LLLT group (57. 89%) than in the control group (46. 75%) (p=0. 006). The analysis of chemical composition and of Ca and P ratios showed greater mineralization in the LLLT group. Crystallinity percentages were greater in rabbits in the LLLT group. Diffractograms showed that crystalline structures were similar to hydroxyapatite. Results showed that LLLT had a positive effect on the percentage of new bone formation and on the chemical composition and crystallinity of the DO site. The DO site regeneration was confirmed by the detection of hydroxyapatite in the crystalline structure. / Esta pesquisa objetivou avaliar a ação do laser de baixa potência (LLLT) no percentual de osso neoformado, na composição química, na cristalinidade e na estrutura cristalina do sítio da distração osteogênica (DO). Quinze coelhos foram submetidos à DO (protocolo: latência – três dias, ativação – sete dias 0,7mm/d e consolidação – 10 dias). Foi empregado o LLLT de AsGaAl (830 nm, 40 mW) com o seguinte protocolo: dose pontual de 10 J/cm2 diretamente sobre o sítio ósseo submetido à DO, no período de consolidação óssea, respeitando-se intervalos de 48 horas. As amostras foram coletadas no final da consolidação, 10 (seis com LLLT) delas foram analisadas por microscopia óptica, para mensuração do percentual de osso neoformado e seis (três com LLLT, um desses foi excluído por haver união precoce dos fragmentos e outro for ocorrer fratura da peça na dissecação) foram analisadas por fluorescência e difração por raios X, a fim de ter analisada a composição química, a cristalinidade e a estrutura cristalina do sítio da DO. O percentual do osso neoformado foi maior no grupo com LLLT (57,89%) do que no controle (46,75%), p=0,006. A composição química revelou, a partir das razões de Ca e P, uma mineralização maior no grupo com LLLT. Os percentuais de cristalinidade indicaram maiores percentuais cristalinos nos coelhos com LLLT. As amostras indicaram semelhança da estrutura cristalina com as hidroxiapatitas, a partir dos difratogramas obtidos. Concluiu-se que o LLLT apresentou efeito positivo no percentual de osso neoformado, na composição química e na cristalinidade do sítio da DO. Ocorreu regeneração no sítio da DO, comprovada pela identificação da hidroxipatita na estrutura cristalina.

A solução de Carnoy é rotineiramente empregada na prática clínica do cirurgião buco-maxilo-facial no tratamento coadjuvante de tumores odontogênicos benignos, por acreditar que ela possa provocar uma osteonecrose local e promover uma margem de segurança à cirurgia. O objetivo do presente trabalho foi verificar em um estudo in vivo, se a solução de Carnoy (substância teste) realmente causa osteonecrose e qual o seu impacto na reparação do tecido ósseo quando comparada com o soro fisiológico 0,9% (substância controle). Para isso, um defeito monocortical de 3 mm de diâmetro foi criado bilateralmente na superfície vestibular da mandíbula de 15 ratos Wistar sendo que, do lado direito foi realizada uma aplicação da solução de Carnoy por 5 minutos e do lado esquerdo, uma aplicação de soro fisiológico 0,9% por cinco minutos. Os animais foram igualmente subdivididos em três grupos para avaliar os efeitos da solução imediatamente, 3 e 10 dias após as aplicações, quando os espécimes foram coletados e preparados para as análises histológicas e estatísticas. Imediatamente e após 3 dias de sua aplicação, a substância teste não demonstrou provocar mais osteonecrose que a controle. No terceiro dia, ocorreu maior formação de coágulo sanguíneo dentro do defeito monocortical após a aplicação da substância controle; contudo, após 10 dias das aplicações, a quantidade de neoformação óssea não foi diferente entre elas. Concluímos que os efeitos da solução de Carnoy sobre o tecido ósseo devem ser questionados, mas seu poder fixativo das células tumorais não pode ser desprezado. / Carnoy\'s solution is routinely used in clinical practice of oral and maxillofacial surgeons in the supplementary treatment of benign odontogenic tumors, given its capacity to cause local osteonecrosis, promoting a safety margin to the procedure. The aim of this study was to verify by an in vivo model, if Carnoy\'s solution (test) causes more osteonecrosis and what is it effect on bone healing when compared to saline solution 0,9% (control). For this, a monocortical defect was created bilaterally at vestibular aspect of 15 Wistar rats mandibles; right side received one 5 minutes Carnoy\'s solution application and left, one 5 minutes saline application. The animals were equally subdivided in three groups to investigate Carnoy\'s effect immediately, three and ten days after applications, when specimens were collected and prepared to histological and statistical analysis. Immediately and three days after its application, test substance did not show more osteonecrosis than control. At third day, it was observed more formation of blood clot inside monocortical defect for control; however, 10 days after applications, bone healing was not different between substances. We conclude that Carnoy\'s solution effects to bone tissue ought to be questioned but its capacity to fixate tumor cells may not be despised.