Orientador: Frab Norberto Boscolo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-25T21:51:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Monteiro_SolangeAparecidaCaldeira_D.pdf: 4241690 bytes, checksum: c8ffa3fd13a2994df6ab7bb20e7ae969 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Com a finalidade de estudar o efeito de irradiação por elétrons em tecido de reparação, foram utilizados 75 ratos Wistar e divididos em 4 grupos. Foram realizadas feridas excisionais medindo 2 cm x 1 cm a uma distância de 1 cm da espinha dorsal. Para cada tempo dos grupos foram utilizados 3 animais. O grupo controle e o grupo ferida irradiada imediatamente após a cirurgia, foram analisados nos tempos 2, 4, 7, 11, 14, 17 e 21 dias. O grupo controle e o grupo tecido de granulação, irradiado 3 dias após a remoção do tecido, foram analisados nos tempos 5, 7, 10, 14, 17, 20 e 24 dias. O feixe de elétrons produzido por um acelerador linear Mevatron 74, com 6 MeV de energia, foi ministrado na dose de 1 Gy. No momento da irradiação houve coincidência entre a ferida e a abertura da lâmina de chumbo usada para proteção do animal, ficando o resto do corpo do animal protegido da irradiação por elétrons. Os tecid'os foram submetidos aos tratamento de HE para estudo da morfologia do tecido de granulação, impregnação pela prata- para verificação da formação e maturação dos feixes de colágeno, reação histoquímica pelo azul de toluidina pH 4 para verificação da produção de GAGs e suas ligações com as moléc.ulas de colágeno. Os resultados mostliaram atraso na reparação do grupo ferida irradiada (tecidos irradiados imediatamente após a cirurgia) e no grupo tecido de granulação irradiado (irradiação ministrada no 3° dia da gênese tecidual), sobretudo no grupo tecido de granulação irradiado. Ao final do período experimental, todos tecidos apresentavam características bastantes semel ha'ntes , indicando ser o atraso transitório / Abstract: In order to study the effect of electrons irradiation on the repair tissue, 75 Wistar rats were used. The animais were divided at random into 4 experimental groups. The controls groups were sacrificed at: 2, 4,5,7,10, 11,14, 17, 20, 21 and 24 days after the surgical procedure. The animais that had the wound irradiated immediately after the surgery were analyzed at 2, 4, 7, 11, 14, 17 and 21 days after irradiation. The groups which had the granulation tissue irradiated 3 days after the removal ofthe tissue were evaluated at 5,7,10,14,17,20 and 24 days after wounding. Ali the wounds were 2 cm x 1 cm and were located 1 cm to the dorsal spine. The electron beam produced using a Mevatron 74 linear accelerator, with energy of 6 MeV, was applied to give a dose of 11Gy. In the moment of the irradiation, the beam was directed to the hole of a leaded. apron that was used to protect the rest of the animal body from the electrons radiation. Ali the tissues were submitted to treatment by silver impregnation, in order to study col/agen formation and maturation, and histochemical reaction by toluidine-blue aqueous solution at pH 4, for the evaluation of GAG production, as wel/ as its association to the col/agen macromolecules. HE was employed to study tlile morphology of granulation tissue. The results showed a delay in the repair of the tissues irradiated just after; the wounding and mainly at the 3rd day of formation.; however, at the end of the experimental period, ali the tissues presented very similar characteristics, which indicated that the delay was temporary / Doutorado / Doutor em Radiologia Odontológica

FIGUEIREDO, Ingrid Samantha Tavares de. Avaliação do efeito da lectina de Cratylia floribunda Benth em feridas cutâneas experimentais. 2008. 112 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2008. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-04-04T13:48:22Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_istfiguerêdo.pdf: 6610819 bytes, checksum: 38c8d7362e86c4dee45b698edf239560 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-04-04T14:09:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_istfiguerêdo.pdf: 6610819 bytes, checksum: 38c8d7362e86c4dee45b698edf239560 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-04-04T14:09:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_istfiguerêdo.pdf: 6610819 bytes, checksum: 38c8d7362e86c4dee45b698edf239560 (MD5) Previous issue date: 2008 / The tissue injury evokes a physiological process of complex cellular and biochemical events that results in wound healing. This process can be divided into three phases: inflammation, proliferation and remodeling. Lectins are (glyco)proteins that can recognize and reversibly bind to carbohydrates or other substances derived from sugars. Cratylia floribunda is a leguminous species, found only in South America, from which was isolated Cratylia floribunda lectin (CFL). The aim of this work was to evaluate the topical treatment of cutaneous wounds using CFL at a cicatricial model. Surgical wounds (1cm2) were produced aseptically in the dorsal region of male Swiss mice (27-33g; n=23/group), which were randomized in two experimental groups according to the treatment set: C (150 mM NaCl) or CFL (100 µg/mL). Wounds were treated topically, daily, with 100 µL from each solution throughout all the post-operative period (PO). Clinical evaluation of the skin lesions was performed along 12 days and the parameters investigated were some macroscopic signals of inflammation and fibroplasia. Cutaneous biopsies have been carried out at 2nd, 7th and 12th PO to histopathological analysis. In parallel, the ability of the lectin to induce the in vitro macrophage release of TNF-α, a pro-inflammatory cytokine, was evaluated. CFL reduced the frequency, intensity and duration of some flogistics signals, such as edema and hiperemy. At 10th and 11th PO the wounds treated with CFL had significantly less crust (p <0.05) than the lesions of the C group. CFL anticipated the formation of granulation tissue, being displayed in a greater percentage of skin lesions. The CFL group injuries presented a higher percentage of area contraction at the firsts day of treatment and this effect remained until the 12th PO (p<0,05). The major differences of the area contraction between the groups occurred at 1st PO (22.5%) and 5th PO (20.5%). CFL group showed a statistically lower area under the curve (AUC) of the area measures than the C group (C-6,27±0,85; CFL- 4,00±1,28, p<0.05). Compared to control group, CFL group showed a significant (p <0.05) percentual of animals with healed wounds at 10th and 11th PO. Treatment with the lectin anticipated the appearance of the cicatricial tissue, being statistically significant (p <0.05) the frequence that it was observed at 6th and 8th day PO. The histopathological analyses revealed that the treatment with CFL diminished the inflammatory phase of the wound healing. Moreover, the proliferation phase was anticipated in CFL group, since there was a fibrous granulation tissue since 7th PO on the lesions treated with CFL, while, at the same period in the C group lesions, there was an initial formation of the granulation tissue. At 12th PO, it was observed a complete reepithelization of the lesions treated with CFL, while, in C group lesions, there was a few collagen fibers among the granulation tissue. CFL stimulated the in vitro release of TNF-α in peritoneal macrophages culture of mice. Those results show that Cratylia floribunda lectin modulates the inflammatory phase of the cicatricial process from cutaneous lesions in mice. We postulate that in in vivo the lectin stimulates resident cells (macrophages) for liberation of TNF-α. Together, those results reveal that CFL favors the repair of lesions. / O trauma tecidual é seguido por uma cascata de eventos celulares e bioquímicos que resulta na formação da ferida cicatrizada. Este processo pode ser dividido em três fases: inflamação, proliferação e remodelação. Lectinas são (glico) proteínas que podem reconhecer e se ligar reversivelmente a carboidratos ou a outras substâncias derivadas de açúcares. Cratylia floribunda é uma espécie de leguminosa, encontrada exclusivamente na América do sul da qual foi isolada a lectina de Cratylia floribunda (CFL). O objetivo deste trabalho foi investigar os efeitos do tratamento tópico diário com a CFL em um modelo de cicatrização de lesões cutâneas em camundongos. Feridas cirúrgicas (1cm2) foram produzidas sob condições assépticas na região dorsal de camundongos Swiss albinos (27-33g, n= 23/grupo), sendo estes posteriormente randomizados em dois grupo experimentais de acordo com o tipo de tratamento estabelecido: grupo C (solução salina) ou grupo CFL (100 µg/mL). As feridas foram tratadas diariamente com 100 μL de cada solução durante todo o período pós-operatório (PO). As lesões cutâneas foram submetidas à avaliações clínicas diárias durante 12 dias, onde investigou-se parâmetros macroscópicos relacionados à fase inflamatória e de fibroplasia. Os fragmentos de pele retirados nos dias de biópsia (2o, 7o e 12o dias PO) foram processados e analisados histopatologicamente. Paralelamente, verificou-se a capacidade da lectina em induzir a liberação de citocinas pró-inflamatórias (TNF-α) por macrófagos in vitro. CFL reduziu a frequência, intensidade e a duração dos sinais flogísticos edema e hiperemia. No 10º e 11º dias PO a presença de crosta nas feridas do grupo tratado com a lectina foi significativamente menor (p<0,05) que no grupo controle. CFL antecipou a formação do tecido de granulação, sendo este visualizado em maior percentual das lesões cutâneas. O grupo CFL apresentou um maior percentual de contração das áreas das lesões desde os primeiros dias de tratamento e se manteve até o 12° dia PO (p<0,05). As maiores diferenças entre os percentuais de contração das lesões entre os grupos ocorreram no 1° dia PO (diferença de 22,5%) e no 5° dia PO (diferença de 20,5%). As áreas compreendidas pelas curvas (ASC) de evolução em ambos os grupos demonstrou diferença estatística entre os grupos (C - 6,27 ± 0,85; CFL - 4,00 ± 1,28, p<0.05). Em relação ao grupo C, CFL apresentou de forma significativa (p<0,05) um maior percentual de animais com feridas cicatrizadas no 10° e 11° dia de PO. O tratamento com a lectina antecipou o surgimento de tecido cicatricial, sendo estatisticamente significante (p<0,05) a frequência com que este foi observado no 6° e 8° dia PO. As análises histopatológicas mostraram que o tratamento com a CFL favoreceu a resolução da fase inflamatória. Além disso, a fase proliferativa foi antecipada no grupo CFL, sendo este aspecto evidenciado pela presença de um tecido de granulação fibroso desde o 7° dia de PO, enquanto que no mesmo período, as lesões do grupo C apresentavam uma formação inicial deste tecido. No 12° de PO foi observado uma completa reepitelização das lesões tratadas com CFL, enquanto que no grupo C um tecido de granulação sendo ainda invadido por fibras colágenas. CFL in vitro estimulou a liberação de TNF- α em cultura de macrófagos peritoneais de camundongos. Esses resultados mostram que a lectina de Cratylia floribunda modula a fase inflamatória do processo cicatricial de lesões cutâneas em camundongos. Hipotetizamos que in vivo a lectina estimula células residentes (macrófagos) a liberação de TNF-α. Em conjunto, esses resultados revelam que a CFL favorece o reparo de lesões.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2013-04-18T18:23:28Z No. of bitstreams: 1 Jamile Gomes Conceição Caracterizaçao clinico...pdf: 1293623 bytes, checksum: 81e290f73ff54554a4e039099727ca5b (MD5) / Made available in DSpace on 2013-04-18T18:23:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jamile Gomes Conceição Caracterizaçao clinico...pdf: 1293623 bytes, checksum: 81e290f73ff54554a4e039099727ca5b (MD5) Previous issue date: 2012 / Universidade Federal da Bahia. Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz / Mucoceles são lesões comuns da cavidade oral, causadas por alterações nos ductos excretórios de glândulas salivares menores. A fim de contribuir para um melhor conhecimento do perfil biológico destas lesões, este trabalho teve como objetivo estudar os aspectos clínico-patológicos em uma amostra de mucoceles da boca, bem como componentes celulares como vasos sanguíneos (anti-CD34), mastócitos (triptase de célula mastocitária), macrófagos (anti-CD68) e da matriz extracelular (metaloproteinase de matriz -1 e -9), por meio da técnica imuno-histoquímica. Foram estudados 100 casos de mucocele de extravasamento, o seu conteúdo de fibrose (picrossirius) e 32 casos investigados para as proteínas propostas, adotando-se critérios morfométricos e semiquantitativos. As lesões de mucocele atingiram mais o lábio inferior e a segunda e terceira décadas de vida, com média de 23.2 anos de idade (DP±12,24), sendo os homens mais acometidos pela lesão (56%). O tamanho médio foi de 1,1 cm (DP±0,57). Os vasos sanguíneos CD34 positivos estavam presentes em todos os espécimes (média de 55 microvasos por mm2; DP±0,36), mas a medida que se aproximavam do lúmen cístico pareciam desaparecer. Os mastócitos estavam presentes em todos os casos (média= 7.4; DP±0,12), mais concentrados na região cápsula em torno do tecido de granulação, reduzindo-se neste último. Os macrófagos estavam presentes no tecido de granulação (média= 88; DP±0,52), também em todos os casos, mas especialmente concentrados na superfície luminal e dentro da cavidade cística, sugerindo um importante papel na fagocitose de muco. MMPs apresentaram marcação variável presentes em fibroblastos, células inflamatórias e matriz extracelular, sendo MMP-1 ausente em um caso e a MMP-9 em dois. A fibrose também mostrou-se variável entre os casos. Apesar de existir associação estatística ente macrófagos e MMP1 (p<0.05, Kruskal Wallis), diferença significativa entre os diferentes marcadores não foi encontrada (p> 0.05, Kruskal Wallis). Este estudo contribuiu para o conhecimento dos mucoceles da boca em uma amostra representativa da população da Bahia, destacando que a dinâmica de desenvolvimento de formação dessas lesões envolve migração e interação chaves entre componentes celulares e da matriz extracelular importantes para o remodelamento tecidual dos mucoceles. / Mucoceles are common lesions of the oral cavity, caused by damage to the excretory ducts of salivary glands. The present study investigated a sample of oral mucoceles in our population, to describe their clinical and histopathological features, and to assess cell components such as blood vessels, mast cells, macrophages, and matrix metalloproteinases (MMPs – 1 and -9), using immunohistochemistry, for a better understanding of biological profile of this lesion. Histochemistry using Picrossirius red staining was also included. The sample consisted of 100 oral mucoceles, 32 of which were included for investigating both cell components and MMPs, adopting morphometrical and semi-quantitative criteria. The lesions were located most often on the lower lip and second and third decades of life, with a mean of 23.2 years (SD±12,24). Males had a higher frequency (56%) and mean size of the lesions was 1.1cm ((DP±0,57). CD34-positive blood vessels were present in all specimens (mean, 55 microvessels per mm2), but as they approached the cystic lumen seemed to disappear. Mast cells were present in all cases (mean= 7.4; SD±0,12) and concentrated in the capsule surrounding the granulation tissue, although they were reduced in the latter. The macrophages were present in the granulation tissue (mean=88; SD±0.52), also in all cases, but they were especially concentrated on the luminal surface and within the cystic cavity, indicating a pivotal role in phagocytosis of mucus. MMPs showed variable immunostaining and were found in fibroblast and inflammatory cells, however, they were absent in one case of MMP1 and two cases of MMP9. Fibrosis was also variable in all of specimens. Although there was a statistical association between macrophages and MMP1 (P<0.05, Kruskal Wallis), significant difference between the different markers was not found (P<0.05, Kruskal Wallis). This study provides an important insight to the knowledge of oral mucoceles from a sample from Salvador, Bahia, Brazil. Furthermore, it highlights that the development dynamic of these lesions involves migration and interaction of key cellular and extracellular matrix components which are essential to the tissue remodeling of oral mucoceles.

Orientador: Frab Norberto Boscolo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-26T02:33:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lourenco_RobertoMartins_D.pdf: 2249820 bytes, checksum: bd8f4a607ea61642bb145975a109046e (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Neste trabalho tivemos por finalidade pesquisar o efeito de baixas doses de radiação de elétrons na atividade das fosfoesterases no tecido de granulação, grupo enzimático este que tem um papel preponderante na nova formação do tecido. Para tanto, os animais sofreram um procedimento cirúrgico, sendo efetuada a inserção subcutânea do disco de esponja de PVC, possuindo 8 mm.de diâmetro por 4 mm. de espessura a uma distância de 3cm da incisão. Esse procedimento foi repetido em 84 animais, os quais foram divididos em dois grupos experimentais, sendo um irradiado, outro controle, contendo, cada grupo, 42 animais. Por sua vez, cada grupo teve seus animais distribuídos segundo 7 tempos de evolução do tecido de granulação: 5, 7, 10, 14, 17,20 e 24 dias, sendo cada tempo composto de 6 animais. Para a irradiação foi utilizado um acelerador linear, com um feixe de elétrons com energia de 6 MeV, a uma distância de 100 em. (fonte até esponja) com dose simples de 1,0 Gy a 1 em. de profundidade. A irradiação foi realizada 3 dias após a implantação da esponja sendo os seus corpos protegidos por 4 mm de chumbo com uma abertura permitindo a exposição da área correspondente a 5 mm de diâmetro maior do que o diâmetro da esponja. Decorrido o tempo proposto para o estudo, foram removidos os tecidos formados e mediu-se a atividade específica de 3 enzimas: - A Adenosina Trifosfatase (ATPase), nos tecidos irradiados, mostrou, quando comparada ao controle, menor atividade, aos 17 dias após a irradiação. - A Fosfatase Alcalina apresentou, aos 11, dias uma maior atividade no grupo irradiado, decaindo dos 14 aos 21, dias porém não significante quando comparada ao grupo controle. - A 5'Nucleotídeo Fosfodiesterase apresentou maior atividade nos animais irradiados dos 2 aos 11 dias, sendo que, aos 2 dias, houve diferença significante em relação ao grupo controle de mesmo tempo. Aos 14 dias houve queda de atividade estatisticamente significante em relação ao grupo não irradiado, seguida de novo aumento de atividade dos 17 aos 21 dias nos animais do grupo irradiado, com diferença estatisticamente significante aos 21 dias, quando comparada ao grupo controle / Abstract: This work had the purpose to seek the effect of low doses of electron radiation on the activity of phosphoesterases in granulation tissue, as this enzymatic group has a major role in the new tissue formation. With that purpose, the animais underwent surgical procedure, receiving a subcutaneous insertion of a disc of PVC foam, averaging 8 milimeters diameter and 4 milimeters thick, at a distance of 3 centimeters away from the incision. This procedure was repeated on eighty-four animais, which were divided into two experimental groups, the irradiated group and the contrai group, each one with forty-two animais. In their tum, the groups had their animal distributed into seven development times for the granulation tissue: five, 7, 10, 14, 17, 20, and 24 days, performing groups of six animais. A linear accelerator was used for irradiation, with a 6 MeV energy electron beam, at a distance of 100 centimeters frem the source to foam, and with a simple dose of 1.0 Gy , 1 centimeter deep. Irradiation was performed three days afier surgical procedure, with the body protected by a lead cover, four milimeters thick, with an aperture allowing an exposition of five milimeters surrounding the foam diameter. Afier the proposed times, the formed tissues were removed and the specific ativity of three enzymes was measured: - The Adenosine Triphosphatase (ATPase) showed a decreased activity, when compared to control, seventeen days afier irradiation. - The Alkaline Phosphatase showed, at eleven days, an increased activity in the irradiated group, decreasing at fourteen and twenty-one days but not significant when compared to the control group. - The 5'Nucleotide Phosphodiesterase showed an increased activity in the irrradiated animais frem two to eleven days, with significant difference from the control groups. At fourteen days a decreasing activity occurred, statistically significant, when compared to the non-irradiated group, followed by a new increasing from seventeen to twenty-one days in the animais belonging to the irradiated group with statistically significant difference at twenty-Oone days, when compared to the control grou / Doutorado / Doutor em Radiologia Odontológica

Orientador: Andrigo Barboza De Nardi / Resumo: As feridas de pele apresentam alta prevalência no atendimento clínico de pequenos animais. Para o tratamento dessas lesões, por segunda intenção, inúmeros produtos já foram descritos buscando-se características como: melhor qualidade e redução no tempo do processo de cicatrização. O objetivo desse trabalho foi avaliar a solução de Tartarato de ketanserina (0,345%) e Asiaticosídeo (0,20%) como opção terapêutica, aplicada via tópica, no processo de cicatrização de lesões cutâneas em cães atendidos no Hospital Veterinário “Governador Laudo Natel” (Unesp-FCAV) de Jaboticabal-SP. Para isso, foi acompanhado o processo de cicatrização de dezenove feridas em cães, divididos em dois grupos de tratamento, o grupo controle (GC) com dez feridas e o grupo tratado (GT) com nove feridas. Os pacientes do GT receberam o produto teste, via tópica, e os pacientes do GC a solução salina 0,9% em momentos pré-determinados. As feridas foram avaliadas quanto às suas características macroscópicas e redução da área em diferentes momentos (T0: início do tratamento; T3: terceiro dia de tratamento; T7: sétimo dia de tratamento; T14: décimo quarto dia de tratamento). A mensuração da área foi realizada por planimetria digital do decalque das feridas, pelo programa computacional “ImageJ”. As variáveis da avaliação macroscópica foram analisadas por correspondência múltipla, com aplicação do teste qui-quadrado, com nível de significância P<0,05. Os dados obtidos da área nos diferentes momentos, foram submetid... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Skin wounds present high prevalence in the clinical care of small animals. For the treatment of these lesions, by means of second intention, numerous products have already been described looking for characteristics such as: better quality and reduction in the time of the healing process. The objective of this study was to evaluate the solution of ketanserin tartrate (0.345%) and Asiaticosídeo (0.20%) as a therapeutic option, applied topically, in the healing process of cutaneous lesions in dogs attended at the Veterinary Hospital "Governador Laudo Natel" (Unesp-FCAV) of Jaboticabal-SP. For this, the cicatrization process of nineteen wounds in dogs was divided into two treatment groups, the control group (GC) with ten wounds and the treated group (WG) with nine wounds. The GT patients received the test product, topical, and the patients of the GC received saline solution 0.9% at predetermined times. The wounds were evaluated for their macroscopic characteristics and reduction of the area at different times (T0: beginning of treatment, T3: third day of treatment, T7: seventh day of treatment, T14: fourteenth day of treatment). The measurement of the area was performed by digital planimetry of the wound decal, by the computer program "ImageJ". The variables of the macroscopic evaluation were analyzed by multiple correspondence, with application of the chi-square test, with significance level P <0.05. The data obtained from the area at the different moments were submitted to anal... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / A obesidade associada às alterações metabólicas, tais como a resitência à insulina, provoca significativas modificações no decorrer do processo de cicatrização. O objetivo desse estudo foi inicialmente avaliar os efeitos da resistência à insulina induzida por uma dieta com elevado teor de gordura durante o reparo tecidual. E, em seguida, investigar o papel dos macrófagos neste processo. Observamos que os animais submetidos à dieta hiperlipídica (RHL) tornaram-se intolerantes à glicose e resistentes à insulina, além de aumentarem as taxas plasmáticas de colesterol e triglicerídeos em relação aos animais alimentados com ração padrão (RP). O grupo RHL apresentou uma menor taxa de contração da lesão e reepitelização em relação ao grupo RP. Observamos ainda maior quantidade de células inflamatórias (células NOS 2-positivas, macrófagos, e neutrófilos), menor densidade de fibras do sistema colágeno e maior densidade de miofibroblastos e vasos sanguíneos no grupo RHL. O dano oxidativo estava maior no grupo RHL bem como a expressão proteica do fator de crescimento transformante-&#946;1 (TGF-&#946;1) e &#945;-actina de músculo liso (&#945;-SMA). O grupo RHL apresentou altos níveis plasmáticos de TNF-&#945; quando comparado com o grupo RP. Além disso, a proporção das células M1 (macrófagos ativados classicamente) e M2 (macrófagos ativados alternativamente) foi a mesma em ambos os grupos. Em relação a síntese e liberação de citocinas e fatores de crescimento avaliados através dos ensaios in vitro, observamos ainda que os níveis do fator de necrose tumoral-&#945; (TNF-&#945;) e interleucina-1&#946; (IL-1&#946;) estavam maiores no meio condicionado de macrófagos isolados dos animais do grupo RHL (MCRHL) em relacão ao meio condicionado de macrófagos isolados dos animais do grupo RP (MCRP). Além disso, os nossos resultados demonstraram claramente que os fatores solúveis produzidos por macrófagos isolados a partir de animais resistentes à insulina inibem a proliferação e a migração de fibroblastos. Através desses resultados podemos mostrar que a resistência à insulina retarda o processo de cicatrização e sugerir os macrófagos participam deste retardo. / Obesity associated with with metabolic alterations such as insulin resistance causes significant modifications during the healing process. Our aim was initially to analyse the effects of insulin resistance induced by a high- significant changes in skin combined fat diet during cutaneous wound healing. And then investigate the role of macrophages in this process. We observed that animals subjected to a high-fat diet (HFC) became glucose intolerant and insulin resistant and increased plasma cholesterol and triglycerides levels when compared to animals fed with a standard chow (SC). The HFC group had a lower rate of wound contraction and re-epithelialization than the SC group. Besides, HFC group presented a greater number of inflammatory cells (NOS 2- and F4/80-positive cells, and neutrophils), lower density of collagen fibers and higher density of myofibroblasts and blood vessels. Oxidative damage was greater in the HFC group as well as the protein expression of TGF-&#946;1 and &#945;-smooth muscle actin (&#945;- SMA). The HFC group presented higher levels of plasma TNF-&#945; when compared to RP group. Furthermore, the proportion of M1 cells (classically activated macrophages) and M2 (alternatively activated macrophages) was the same in both groups. Regarding to the synthesis and release of cytokines and growth factors evaluated by in vitro assays, we also observed that the levels of TNF-&#945; and IL-1&#946; were higher in conditioned medium of macrophages isolated from animals of HFC (MCHFC) group when compared to the conditioned medium of macrophages isolated from animals in of RP (MCSC) group. Furthermore, our results clearly demonstrate that soluble factors produced by macrophages isolated from insulin resistant animals inhibit the proliferation and migration of fibroblasts. Thus, we can show that insulin resistance delays wound healing process and suggest that the macrophages are involved in this delay.

Orientador: Luis Carlos Spolidorio / Resumo: O propósito do trabalho foi avaliar o impacto da depleção de testosterona e sua administração exógena, bem como de drogas bloqueadoras dos receptores de andrógenos (flutamida) e estrógeno (fulvestranto), e inibidoras da conversão de testosterona em estradiol (anastrosol), sobre a reparação tecidual cutânea e reabsorção óssea inflamatória. Foram utilizados 80 ratos, divididos em 8 grupos (n=10/grupo): G1-Sem tratamento, G2-Durateston, G3-Orquiectomia (OQX), G4-OQX+Durateston; G5-Anastrosol, G6-Fulvestranto, G7-Flutamida, G8-Durateston+Anastrosol. Os animais foram submetidos aos diferentes tratamentos por um período de 15 dias e, em seguida, foi realizada a indução de ferida cirúrgica cutânea e reabsorção óssea em calvária durante mais 7 dias. Através dos cortes histológicos foi avaliada a contração das feridas, análise estereométrica e qualitativa do tecido de granulação e mensuração da formação de colágeno; e, ainda, foi realizada reação de imunohistoquímica para os anticorpos PCNA e KGF, e análise da resposta imunoinflamatória por ensaio multiplex. As calvárias foram submetidas a avaliação da porcentagem de tecido ósseo (% BV/TV) através da análise de micromotografia computadorizada (μCT), quantificação do número de osteoclastos e pontos de reabsorção (lacunas de Howship) (H&E), marcação de osteoclastos TRAP+ (imunohistoquímica), e avaliação da resposta imunoinflamatória por ensaio multiplex. Foram utilizados ainda, 60 ratos divididos em 6 grupos (n=10/grupo): 1-Sham, 2-Sham... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of the study was to evaluate the impact of testosterone depletion and its exogenous administration, as well as androgen receptor blockers (flutamide) and estrogen (fulvestrant), and inhibitors of the conversion of testosterone to estradiol (anastrosol) on the cutaneous tissue repair and inflammatory bone resorption. Eighty rats were divided into eight groups (n=10/group): G1-No treatment, G2-Durateston, G3-Orchiectomy (OQX), G4-OQX+Durateston; G5-Anastrozol, G6-Fulvestrant, G7-Flutamide, G8-Durateston+Anastrozol. The animals were submitted to the different treatments for a period of 15 days and then the induction of cutaneous surgical wound and bone resorption in calvaria was performed for another 7 days. Through the histological sections the wound contraction, stereometric and qualitative analysis of the granulation tissue and measurement of collagen formation were evaluated; and also immunohistochemical reaction was performed for PCNA and KGF antibodies and analysis of the immunoinflammatory response by multiplex assay. The calvaria were submitted to evaluation of the percentage of bone tissue (% BV / TV) through computerized micromotography (μCT) analysis, quantification of the number of osteoclasts and reabsorption points (Howship lacunes) (H&E), labeling of TRAP+ osteoclasts (immunohistochemistry), and evaluation of the immunoinflammatory response by multiplex assay. In addition, 60 rats were divided into 6 groups (n = 10 / group): 1-Sham, 2-Sham+Ligature, 3-Orch... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / A obesidade associada às alterações metabólicas, tais como a resitência à insulina, provoca significativas modificações no decorrer do processo de cicatrização. O objetivo desse estudo foi inicialmente avaliar os efeitos da resistência à insulina induzida por uma dieta com elevado teor de gordura durante o reparo tecidual. E, em seguida, investigar o papel dos macrófagos neste processo. Observamos que os animais submetidos à dieta hiperlipídica (RHL) tornaram-se intolerantes à glicose e resistentes à insulina, além de aumentarem as taxas plasmáticas de colesterol e triglicerídeos em relação aos animais alimentados com ração padrão (RP). O grupo RHL apresentou uma menor taxa de contração da lesão e reepitelização em relação ao grupo RP. Observamos ainda maior quantidade de células inflamatórias (células NOS 2-positivas, macrófagos, e neutrófilos), menor densidade de fibras do sistema colágeno e maior densidade de miofibroblastos e vasos sanguíneos no grupo RHL. O dano oxidativo estava maior no grupo RHL bem como a expressão proteica do fator de crescimento transformante-&#946;1 (TGF-&#946;1) e &#945;-actina de músculo liso (&#945;-SMA). O grupo RHL apresentou altos níveis plasmáticos de TNF-&#945; quando comparado com o grupo RP. Além disso, a proporção das células M1 (macrófagos ativados classicamente) e M2 (macrófagos ativados alternativamente) foi a mesma em ambos os grupos. Em relação a síntese e liberação de citocinas e fatores de crescimento avaliados através dos ensaios in vitro, observamos ainda que os níveis do fator de necrose tumoral-&#945; (TNF-&#945;) e interleucina-1&#946; (IL-1&#946;) estavam maiores no meio condicionado de macrófagos isolados dos animais do grupo RHL (MCRHL) em relacão ao meio condicionado de macrófagos isolados dos animais do grupo RP (MCRP). Além disso, os nossos resultados demonstraram claramente que os fatores solúveis produzidos por macrófagos isolados a partir de animais resistentes à insulina inibem a proliferação e a migração de fibroblastos. Através desses resultados podemos mostrar que a resistência à insulina retarda o processo de cicatrização e sugerir os macrófagos participam deste retardo. / Obesity associated with with metabolic alterations such as insulin resistance causes significant modifications during the healing process. Our aim was initially to analyse the effects of insulin resistance induced by a high- significant changes in skin combined fat diet during cutaneous wound healing. And then investigate the role of macrophages in this process. We observed that animals subjected to a high-fat diet (HFC) became glucose intolerant and insulin resistant and increased plasma cholesterol and triglycerides levels when compared to animals fed with a standard chow (SC). The HFC group had a lower rate of wound contraction and re-epithelialization than the SC group. Besides, HFC group presented a greater number of inflammatory cells (NOS 2- and F4/80-positive cells, and neutrophils), lower density of collagen fibers and higher density of myofibroblasts and blood vessels. Oxidative damage was greater in the HFC group as well as the protein expression of TGF-&#946;1 and &#945;-smooth muscle actin (&#945;- SMA). The HFC group presented higher levels of plasma TNF-&#945; when compared to RP group. Furthermore, the proportion of M1 cells (classically activated macrophages) and M2 (alternatively activated macrophages) was the same in both groups. Regarding to the synthesis and release of cytokines and growth factors evaluated by in vitro assays, we also observed that the levels of TNF-&#945; and IL-1&#946; were higher in conditioned medium of macrophages isolated from animals of HFC (MCHFC) group when compared to the conditioned medium of macrophages isolated from animals in of RP (MCSC) group. Furthermore, our results clearly demonstrate that soluble factors produced by macrophages isolated from insulin resistant animals inhibit the proliferation and migration of fibroblasts. Thus, we can show that insulin resistance delays wound healing process and suggest that the macrophages are involved in this delay.

Os objetivos deste estudo foram avaliar o efeito da aplicação subcutânea do cloridrato de papaverina no processo de reparação de feridas cirúrgicas abertas no dorso de ratos e avaliar pelos métodos histomorfológico, histomorfométrico e imunoistoquímico eventos biológicos do processo de reparação. Foram realizadas feridas dérmicas padronizadas com punch, 5mm de diâmetro e 2mm de profundidade, no dorso de ratos. Os animais foram divididos em dois grupos conforme o tratamento realizado: no grupo controle, 25 ratos foram tratados através da injeção de cloreto de sódio 0,9% e no grupo teste, 25 ratos foram tratados através da injeção da solução de cloridrato de papaverina a 50mg/mL de cloreto de sódio a 0,9%. Em ambos os grupos foi aplicado subcutâneo (por quadrante da ferida), 0,25mL da solução correspondente aos frascos do grupo teste ou grupo controle totalizando 1 mL da solução. Os 50 espécimes foram processados para as análises macro e microscópica. Para análise do cálculo do edema, foram utilizados 10 ratos (5 animais do grupo teste e 5 animais do grupo controle). Fragmentos de pele padronizados (3cm2) foram removidos da área da ferida e pesados no período de 6 horas. Para análise morfométrica do fechamento da ferida/formação de cicatriz, 10 ratos foram utilizados (5 animais do grupo teste e 5 do grupo controle). As feridas cirúrgicas padronizadas foram fotografadas nos períodos de 0h, 3,7,14 e 21 dias pós-cirúrgico e as imagens foram analisadas por software de morfometria (ImageLab2000®) quanto a área, perímetro e fator de forma. Pela técnica de coloração da hematoxilina e eosina, a análise histomorfológica (análise qualitativa descritiva) e histomorfométrica (análise quantitativa em relação à reepitelização, formação do tecido de granulação, edema, celularidade e matriz colagênica) foram realizadas nos períodos de 6h, 3,7,14 e 21 dias e analisadas sob microscopia de luz. Reações de imunoistoquímica com o anticorpo anti-actina de músculo liso foi realizada para identificação e contagem do número de miofibroblastos nos períodos de 3, 7, 14 e 21 dias. A partir do modelo experimental avaliado, comprovou-se a ação vasodilatadora da papaverina. Os fragmentos padronizados do grupo teste apresentaram maior peso em relação ao grupo controle (p= 0,047). As feridas do grupo teste mostraram um fechamento maior e menor formação de cicatriz quando comparado ao grupo controle no período de 21 dias. No grupo teste, uma maior quantidade de edema (p = 0,028) e uma menor quantidade de matriz colagênica (colágeno) (p = 0,028) foram encontradas no período de 6 horas. Houve maior reepitelização no grupo teste no período de 7 dias e menor formação de tecido de granulação nos períodos de 14 e 21 dias para o mesmo grupo. No grupo controle, um maior número de miofibroblastos foi encontrado quando comparado ao grupo teste nos períodos de 14 e 21 dias (p=0, 016). Dentro dos limites deste estudo, a aplicação subcutânea do cloridrato de papaverina parece acelerar o processo de reparação de feridas cirúrgicas abertas no dorso de ratos. Sua aplicação promove vasodilatação e um maior exsudato inflamatório no início do processo de reparação. Tal efeito parece estar relacionado com a maior velocidade de reparação observada macro e microscopicamente. / The objectives of this study were to evaluate the effect of subcutaneous administration of papaverine hydrochloride in the process of open surgical repair of wounds in the back of rats and evaluate the methods histomorphological, immunohistochemical and histomorphometric biological events of the repair process. Standardized wounds were inflicted by dermal punch, 5mm in diameter and 2mm deep, in the backs of rats. Animals were divided into two groups according to treatment: control group, 25 rats were treated by injection of sodium chloride 0.9%) and test group (25 rats treated by the injection of papaverine hydrochloride 50 mg / mL sodium chloride 0.9%). In both groups was administered subcutaneously (by quadrant of the wound), 0.25 mL of the solution corresponding to bottles of the test group or control group, totaling 1 mL of the solution. The 50 specimens were processed for macro and microscopic analysis. For analysis of the calculation of edema, we used 10 rats (5 animals in the test group and 5 control animals). Standardized skin fragments (3cm2) were removed from the wound area and heavy during the 6 hours. For morphometric analysis of the closure of the wound / scar formation, 10 rats were used (five animals in the test group and 5 in the control group). Surgical wounds were photographed in standardized periods of 0h, 3,7,14 and 21 days after surgery and the images were analyzed by morphometry software (ImageLab2000 ®) as area, perimeter and form factor. By staining with hematoxylin and eosin, the histomorphologic analysis (descriptive qualitative analysis) and histomorphometric (quantitative analysis in relation to reepithelialization, formation of granulation tissue, edema, cellularity and collagen matrix) were recorded at 6h, 3.7 , 14 and 21 days and analyzed under light microscopy. Immunohistochemical reactions with anti-smooth muscle actin was performed to identify and count the number of myofibroblasts at 3, 7, 14 and 21 days. From the experimental model evaluated, proved the vasodilator papaverine. The fragments of the standardized test group had a higher weight in the control group (p = 0.047). The wounds of the test group showed a greater closing and less scarring compared to control group within 21 days. In the test group, a greater amount of edema (p = 0.028) and a smaller amount of collagen matrix (collagen) (p = 0.028) were found within 6 h. A greater reepithelialization in the test group after 7 days and less formation of granulation tissue during periods of 14 and 21 days for the same group. In the control group, a greater number of myofibroblasts was found when compared to the test group during the periods of 14 and 21 days (p = 0, 016). Within the limits of this study, subcutaneous administration of papaverine hydrochloride appears to accelerate the repair of surgical wounds opened in the back of rats. Its application promotes vasodilation and a greater inflammatory exudate in the early repair process. This effect appears to be related to a faster repair observed macroscopically and microscopically.

Os objetivos deste estudo foram avaliar o efeito da aplicação subcutânea do cloridrato de papaverina no processo de reparação de feridas cirúrgicas abertas no dorso de ratos e avaliar pelos métodos histomorfológico, histomorfométrico e imunoistoquímico eventos biológicos do processo de reparação. Foram realizadas feridas dérmicas padronizadas com punch, 5mm de diâmetro e 2mm de profundidade, no dorso de ratos. Os animais foram divididos em dois grupos conforme o tratamento realizado: no grupo controle, 25 ratos foram tratados através da injeção de cloreto de sódio 0,9% e no grupo teste, 25 ratos foram tratados através da injeção da solução de cloridrato de papaverina a 50mg/mL de cloreto de sódio a 0,9%. Em ambos os grupos foi aplicado subcutâneo (por quadrante da ferida), 0,25mL da solução correspondente aos frascos do grupo teste ou grupo controle totalizando 1 mL da solução. Os 50 espécimes foram processados para as análises macro e microscópica. Para análise do cálculo do edema, foram utilizados 10 ratos (5 animais do grupo teste e 5 animais do grupo controle). Fragmentos de pele padronizados (3cm2) foram removidos da área da ferida e pesados no período de 6 horas. Para análise morfométrica do fechamento da ferida/formação de cicatriz, 10 ratos foram utilizados (5 animais do grupo teste e 5 do grupo controle). As feridas cirúrgicas padronizadas foram fotografadas nos períodos de 0h, 3,7,14 e 21 dias pós-cirúrgico e as imagens foram analisadas por software de morfometria (ImageLab2000®) quanto a área, perímetro e fator de forma. Pela técnica de coloração da hematoxilina e eosina, a análise histomorfológica (análise qualitativa descritiva) e histomorfométrica (análise quantitativa em relação à reepitelização, formação do tecido de granulação, edema, celularidade e matriz colagênica) foram realizadas nos períodos de 6h, 3,7,14 e 21 dias e analisadas sob microscopia de luz. Reações de imunoistoquímica com o anticorpo anti-actina de músculo liso foi realizada para identificação e contagem do número de miofibroblastos nos períodos de 3, 7, 14 e 21 dias. A partir do modelo experimental avaliado, comprovou-se a ação vasodilatadora da papaverina. Os fragmentos padronizados do grupo teste apresentaram maior peso em relação ao grupo controle (p= 0,047). As feridas do grupo teste mostraram um fechamento maior e menor formação de cicatriz quando comparado ao grupo controle no período de 21 dias. No grupo teste, uma maior quantidade de edema (p = 0,028) e uma menor quantidade de matriz colagênica (colágeno) (p = 0,028) foram encontradas no período de 6 horas. Houve maior reepitelização no grupo teste no período de 7 dias e menor formação de tecido de granulação nos períodos de 14 e 21 dias para o mesmo grupo. No grupo controle, um maior número de miofibroblastos foi encontrado quando comparado ao grupo teste nos períodos de 14 e 21 dias (p=0, 016). Dentro dos limites deste estudo, a aplicação subcutânea do cloridrato de papaverina parece acelerar o processo de reparação de feridas cirúrgicas abertas no dorso de ratos. Sua aplicação promove vasodilatação e um maior exsudato inflamatório no início do processo de reparação. Tal efeito parece estar relacionado com a maior velocidade de reparação observada macro e microscopicamente. / The objectives of this study were to evaluate the effect of subcutaneous administration of papaverine hydrochloride in the process of open surgical repair of wounds in the back of rats and evaluate the methods histomorphological, immunohistochemical and histomorphometric biological events of the repair process. Standardized wounds were inflicted by dermal punch, 5mm in diameter and 2mm deep, in the backs of rats. Animals were divided into two groups according to treatment: control group, 25 rats were treated by injection of sodium chloride 0.9%) and test group (25 rats treated by the injection of papaverine hydrochloride 50 mg / mL sodium chloride 0.9%). In both groups was administered subcutaneously (by quadrant of the wound), 0.25 mL of the solution corresponding to bottles of the test group or control group, totaling 1 mL of the solution. The 50 specimens were processed for macro and microscopic analysis. For analysis of the calculation of edema, we used 10 rats (5 animals in the test group and 5 control animals). Standardized skin fragments (3cm2) were removed from the wound area and heavy during the 6 hours. For morphometric analysis of the closure of the wound / scar formation, 10 rats were used (five animals in the test group and 5 in the control group). Surgical wounds were photographed in standardized periods of 0h, 3,7,14 and 21 days after surgery and the images were analyzed by morphometry software (ImageLab2000 ®) as area, perimeter and form factor. By staining with hematoxylin and eosin, the histomorphologic analysis (descriptive qualitative analysis) and histomorphometric (quantitative analysis in relation to reepithelialization, formation of granulation tissue, edema, cellularity and collagen matrix) were recorded at 6h, 3.7 , 14 and 21 days and analyzed under light microscopy. Immunohistochemical reactions with anti-smooth muscle actin was performed to identify and count the number of myofibroblasts at 3, 7, 14 and 21 days. From the experimental model evaluated, proved the vasodilator papaverine. The fragments of the standardized test group had a higher weight in the control group (p = 0.047). The wounds of the test group showed a greater closing and less scarring compared to control group within 21 days. In the test group, a greater amount of edema (p = 0.028) and a smaller amount of collagen matrix (collagen) (p = 0.028) were found within 6 h. A greater reepithelialization in the test group after 7 days and less formation of granulation tissue during periods of 14 and 21 days for the same group. In the control group, a greater number of myofibroblasts was found when compared to the test group during the periods of 14 and 21 days (p = 0, 016). Within the limits of this study, subcutaneous administration of papaverine hydrochloride appears to accelerate the repair of surgical wounds opened in the back of rats. Its application promotes vasodilation and a greater inflammatory exudate in the early repair process. This effect appears to be related to a faster repair observed macroscopically and microscopically.