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Influencia da evolução do tecido granulomatoso sobre a biodisponibilidade da amoxicilina : estudo ex vivo, em ratos

Groppo, Francisco Carlos, 1966- 16 December 1996 (has links)
Orientador: Thales Rocha de Mattos Filho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-22T01:26:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Groppo_FranciscoCarlos_D.pdf: 3102711 bytes, checksum: 66e83bf568378db0957f3f36586ee6e7 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Apesar da extensa utilização e longo período de tempo decorrido desde a descoberta das penicilinas, alguns aspectos sobre sua farmacocinética ainda não estão bem esclarecidos. O intuito deste trabalho foi avaliar a distribuição da amoxicilina, em uma lesão do tipo crônica, correlacionada à sua concentração sérica. Para tanto, utilizamos 160 ratos, nos quais foram implantadas quatro esponjas de PVC. Após decorridos 7, 14, 21 e 28 dias da implantação, os animais receberam a amoxicilina, por via oral, nas doses de 3,57; 7,14; 40 e 80 mg/kg. Os animais controle receberam solução salina de cloreto de sódio a 0,9%. Decorrido uma hora da administração, os tecidos granulomatosos, bem como amostras de sangue foram colhidas. Os tecidos foram dispostos em placas de Petri, previamente inoculadas com 108 u.f.c. de Staphy/ococcus aureus (ATCC 25923) em ágar Mueller Hinton. As amostras de sangue foram centrifugadas e os soros obtidos (1 O~L), distribuídos em discos de papel. Após um período de incubação de 18 horas, os halos de inibição foram medidos e anotados para posterior análise. Previamente, foi construída uma curva de regressão, com o halo de inibição em função do logaritmo de concentrações conhecidas da droga. Através da análise de variância, observou-se que não havia diferença estatisticamente significante (a=0,01) nos períodos de tempo estudados, para uma mesma dose. Os resultados levam a crer que a penetração da droga, para o interior do tecido granulomatoso, não foi prejudicada pela evolução do mesmo / Abstract: Since the penicillin was discovered many studies have been carried out in order to justify its large use, however in some aspects about pharmacokinetics properties have not yet well understood. The subject of this study was to evaluate the penetration of amoxicillin in chronic lesion, as well as in serum levels. We used 160 rats with four PVC sponges previously implanted in the back. After 7, 14, 21 and 28 days of sponge introduction, the animais received 3.57 mg/kg, 7.14 mg/kg, 40 mg/kg and 80 mg/kg of p.o. amoxicillin. Control animais received NaCI 0.9% solution. One hour often the administration of drug, the tissue and blood samples were collected and were placed on Petri dishes, previously inoculated with 108 c.f.U. of Staphy/ococcus aureus (A TCC 25923) in Mueller Hinton agar. The blood samples were centrifuged and the serum (10 j.JL) was placed on 6.25 mm (diameter) paper disks. After 18 hours of incubation the diameters of inhibition zones were measured and registered for later analysis. A regression curve had been was made with the diameters of inhibition zones and the log of concentration of drug. The variance analysis showed no statistically significant differences (a=0,01) between the time periods and the ~oses of amoxicillin. The results suggest that the penetration of the drug is not changed by the time of development of the tissue / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Ciências
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Avaliação da atividade antimicrobiana de óleos essenciais frente à patógenos orais / Evaluation of antimicrobial activity of essential oils against oral pathogens

Bersan, Salete Meiry Fernandes, 1974- 20 August 2018 (has links)
Orientadores: Marta Cristina Teixeira Duarte, Pedro Luiz Rosalen / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-20T12:06:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bersan_SaleteMeiryFernandes_M.pdf: 6812876 bytes, checksum: a263025bff707f77c87f25c8c1f590e9 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A cavidade oral é habitada por uma microbiota mista que, sob determinadas circunstâncias, pode superar as defesas do hospedeiro e agir como oportunista, produzindo diversas manifestações clínicas. Observa-se na literatura um interesse por produtos de origem natural como fonte de novas moléculas bioativas para o controle de afecções orais, entre estes produtos destacam-se os óleos essenciais e seus produtos secundários devido às suas propriedades antimicrobianas. A necessidade de gerar e agregar novas informações acerca da atividade antimicrobiana in vitro de óleos essenciais, impulsionou a realização deste trabalho, envolvendo vinte espécies do Banco de Germoplasmas da "Coleção de Plantas Medicinais e Aromáticas - CPMA" do CPQBA/UNICAMP. Nesse contexto, essa pesquisa teve por objetivo identificar a atividade antimicrobiana in vitro de óleos essenciais e frações de diferentes espécies de plantas medicinais e aromáticas contra os patógenos orais Candida albicans, Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis, Streptococcus sanguis e Streptococcus mitis, organizados nas formas livre e em biofilme. A atividade antimicrobiana dos óleos e frações foi avaliada através da determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida e Fungicida Mínima (CBM/CFM), pelo método da microdiluição. Foram identificadas as classes de substâncias químicas presentes nos óleos essenciais e frações de melhor atividade por CG-EM. Além disso, os óleos essenciais e frações selecionadas foram submetidos à avaliação quanto à possível alteração morfológica causada no biofilme, através de análise por microscopias eletrônica de varredura (MEV). A maioria dos óleos essenciais apresentou atividade antimicrobiana moderada a forte sobre os microrganismos orais, com valores de CIM entre 0,007 a 1,00 mg/mL. Melhores atividades sobre células planctônicas foram exibidas pelas espécies Aloysia gratissima, Coriandrum sativum, Cyperus articulatus, Lippia sidoides e Mikania glomerata, cujos óleos foram fracionados e submetidos a estudos de ação sobre a formação de biofilme pelos microrganismos. Coriandrum sativum se destacou por apresentar os mais baixos valores de CIM em relação às células planctônicas de 0,007 a 0,125. As inibições de aderência variaram de 1.00 % para óleo de Mikania glomerata sobre S. mitis a 63,96 % para o óleo bruto de C. articulatus sobre S. sanguis. Através da análise das imagens obtidas por MEV não foi possível observar alterações na morfologia celular dos microrganismos orais. Porém, houve redução e alterações na organização da estrutura dos biofilmes. A análise da composição química do C. sativum mostrou a presença de compostos majoritários derivados de álcoois e aldeídos, enquanto C. articulatus e A. gratissima apresentaram compostos mono e sesquiterpenos. Em conclusão, o óleo essencial de C. articulatus mostrou o maior percentual de inibição sobre os microrganismos estudados, enquanto o óleo de A. gratissima inibiu a aderência do biofilme de S. mitis / Abstract: The oral cavity is inhabited by a mixed microbial flora which, under determined circumstances, can overcome the host's defenses producing some of clinical pathological manifestations. Considerable interest has been found in the literature concerning natural products as sources new bioactive molecules for oral diseases control and the essential oils and their secondary products stand out with these products due to their antimicrobial properties. In order to produce and aggregate new information relating to in vitro antimicrobial activity of essential oils, this work was designed involving twenty species from the Germplasm Bank of the "Medicinal and Aromatic Plant Collection - CPMA" of CPQBA/UNICAMP, Brazil. Thus the objective of the present research was to identify the in vitro antimicrobial activity of essential oils and fractions of the different species of medicinal and aromatic plants against the oral pathogens Candida albicans, Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis, Streptococcus sanguis and Streptococcus mitis, organized in the free form and in biofilms. The antimicrobial activity of the oils and fractions was evaluated by determining the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and the Minimum Bactericidal and Fungicidal Concentrations (MBC/MFC) using the micro-dilution method. The classes of bioactive chemical substances present in the essential oils and fractions showing the best activity were identified by GC-MS. In addition the selected essential oils and fractions were submitted to an evaluation to detect any possible morphological alterations caused in the biofilm by way of scanning electronic microscopy (SEM). The majority of the essential oils showed moderate to strong antimicrobial activity against the oral microorganisms, with MIC values between 0.007 and 1.00 mg/mL. Better activities against planktonic cells were shown by the species Aloysia gratissima, Coriandrum sativum, Cyperus articulatus, Lippia sidoides and Mikania glomerata, whose oils were fractionated and submitted to studies of their action against biofilms formation by microorganisms. The essential oil of C. sativum stood out, since it inhibited all investigated species with MIC lowest values, varieting from 0.007 to 0.250 mg/mL, and for MBC from 0.015 to 0.500 mg/mL. The inhibition of biofilm formation varied from 1.00% for Mikania glomerata oil against S. mitis to 63.96% for the crude C. articulatus oil against S. sanguis. No alterations in cell morphology of the oral microorganisms could be observed from an analysis of the SEM images, but there were reductions and alterations in the organization of the biofilm structure. An analysis of the chemical composition of C. sativum showed the presence of alcohol and aldehyde derivatives as major compounds, whereas C. articulatus and A. gratissima showed mono and sesquiterpenes. In conclusion, the essential oil of C. articulatus showed the best results percentage inhibition on the microorganisms under study, whereas the A. gratissima oil inhibited of the S. mitis biofilm formation / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestre em Odontologia
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Estudo da microbiota de canais de dentes tratados endodonticamente associados a lesões periapicais e da suscetibilidade de enterococcus faecalis a diferentes antimicrobianos / Microorganisms from canals of root-filled teeth with periapical lesions and the antimicrobial susceptibility to different antibiotics of enterococcus faecalis isolates

Pinheiro, Ericka Tavares 31 January 2005 (has links)
Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-04T03:02:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinheiro_ErickaTavares_D.pdf: 6781535 bytes, checksum: 922a6f6d42935816319b3755f08328b6 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: O presente estudo teve por objetivos: identificar a microbiota de canais radiculares de dentes com insucesso do tratamento endodôntico, e testar, in vitro, a suscetibilidade de cepas de Enterococcus faecalis a diferentes antibióticos. Sessenta dentes tratados endodonticamente com lesões periapicais persistentes foram selecionados para esse estudo. Durante o retratamento endodôntico, o material obturador foi removido e foi realizada a coleta microbiológica dos canais radiculares. Foram utilizados meios de transporte, cultura e incubação que propiciam o crescimento de bactérias anaeróbias estritas. Vinte e uma cepas de Enterococcus faecalis foram testadas quanto à suscetibilidade aos seguintes antimicrobianos: benzilpenicilina, amoxicilina, amoxicilina + ácido clavulânico, clindamicina, eritromicina, azitromicina, vancomicina, cloranfenicol, tetraciclina, doxiciclina, ciprofloxacino e moxifloxacino. As concentrações inibitórias mínimas (CIMs) dos agentes antimicrobianos foram determinadas pelo método do E-test. As cepas também foram testadas quanto à produção de beta-lactamase utilizando nitrocefin. Microrganismos foram isolados em 51 casos. A maioria dos canais apresentava somente 1 ou 2 espécies bacterianas. Do total de espécies bacterianas isoladas, 57,4% eram bactérias anaeróbias facultativas e 83,3% Gram-positivas. Enterococcus faecalis foi a espécie bacteriana mais freqüentemente isolada. Bactérias anaeróbias estritas representavam 42,6% das espécies e, entre eles, Peptostreptococcus spp. foram os mais isolados. Associações significantes foram encontradas entre dor ou história de dor e infecções anaeróbias e polimicrobianas (p<0,05). Todas as cepas de Enterococcus faecalis foram sensíveis, in vitro, às penicilinas, entretanto as CIMs de amoxicilina e amoxicilina + ácido clavulânico (CIM90= 0,75 µg/ml) foram menores do que as de benzilpenicilina (CIM90= 3.0 µg/ml). Todas as cepas também foram sensíveis a vancomicina e moxifloxacino, enquanto 95,2% foram sensíveis a cloranfenicol. Entre os isolados, 85,7% foram sensíveis a tetraciclina e doxiciclina, e 80,9% a ciprofloxacino. As CIMs de eritromicina variaram de 0,38 a >256 µg/ml, com apenas 28,5% das cepas sensíveis (CIM =0.5 µg/ml). Suscetibilidade limitada também foi verificada com azitromicina, que foi ativa contra somente 14,2% dos isolados. Nenhuma cepa produziu beta-lactamase. Concluímos que a microbiota dos canais de dentes tratados endodonticamente é composta por um número limitado de espécies microbianas, predominantemente Gram-positivas. Anaeróbios facultativos, especialmente Enterococcus faecalis, são os microrganismos mais comumente isolados, entretanto, infecções polimicrobianas e anaeróbios estritos são freqüentemente encontrados em canais de dentes tratados endodonticamente com sintomatologia clínica. As cepas de Enterococcus faecalis foram sensíveis, in vitro, a amoxicilina, amoxicilina associada ao ácido clavulânico, vancomicina e moxifloxacino. A maioria dos isolados foi sensível aos antibióticos: cloranfenicol, tetraciclina, doxiciclina, ou ciprofloxacino. Eritromicina e azitromicina foram menos eficazes / Abstract: The objectives of the present study were to identify the microbial flora within root canals of teeth with failed root canal treatment, and to test, in vitro, the susceptibility of Enterococcus faecalis isolates. Sixty root-filled teeth with persisting periapical lesions were selected for this study. During nonsurgical endodontic re-treatment, the root-filling material was removed and the canals were sampled. Microbial sampling, isolation and species determination were performed using advanced microbiologic techniques for anaerobic species. Additionally, 21 Enterococcus faecalis isolates were tested for their antibiotic susceptibilities to benzylpenicillin, amoxicillin, amoxicillin-clavulanic acid, erythromycin, azithromycin, vancomycin, chloramphenicol, tetracycline, doxycycline, ciprofloxacin and moxifloxacin. Minimal inhibitory concentrations (MICs) for the antimicrobial agents were determined using the E-test System. The strains were also tested for ß-lactamase production with nitrocefin. Microorganisms were recovered from 51 teeth. In most cases, one or two strains per canal were found. Of the microbial species isolated, 57.4% were facultative anaerobic species and 83.3% Gram-positive microorganisms. Enterococcus faecalis was the bacterial species most frequently recovered. Obligate anaerobes accounted for 42.6% of the species and the most frequently isolated genera was Peptostreptococcus. Significant associations were observed between pain or history of pain and polymicrobial infections or anaerobes (p<0.05). All Enterococcus faecalis strains were susceptible to penicillins in vitro, however, the MICs of amoxicillin and amoxicillinclavulanic acid (MIC90= 0.75 µg/ml) were lower than for benzylpenicillin (MIC90= 3.0 µg/ml). All strains studied were also susceptible to vancomycin and moxifloxacin, while 95.2% were susceptible to chloramphenicol. Among the isolates, 85.7% were susceptible to tetracycline and doxycycline, and 80.9% to ciprofloxacin. The MIC of erythromycin ranged from 0.38 to >256 µg/ml; only 28.5% of the strains were susceptible (MIC =0.5 µg/ml). Limited susceptibility was also observed with azithromycin which was active against only 14.2% of isolates. No strains produced ß-lactamase. Therefore, it was concluded that the microbial flora in canals after failure of root canal treatment were limited to a small number of predominantly Gram-positive microbial species. Facultative anaerobes, especially Enterococcus faecalis, were the most commonly isolated microorganisms, however, polymicrobial infections and obligate anaerobes were frequently found in canals of symptomatic root-filled teeth. Enterococcus faecalis isolates were completely susceptible, in vitro, to amoxicillin, amoxicillin-clavulanic acid, vancomycin, and moxifloxacin. Most isolates were susceptible to chloramphenicol, tetracycline, doxycycline, or ciprofloxacin. Erythromycin and azithromycin were least effective / Doutorado / Endodontia / Doutor em Clínica Odontológica
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Biodisponibilidade da amoxicilina. Estudo ex vivo em ratos

Baglie, Sinvaldo 26 June 1998 (has links)
Orientador: Francisco Carlos Groppo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-23T22:37:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Baglie_Sinvaldo_M.pdf: 2050714 bytes, checksum: 2481536fff0bb73dd0e316a6148313f9 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Embora existam vários relatos a respeito da resistência bacteriana à amoxicilina, são várias as situações, na Medicina e na Odontologia, onde seu emprego é tido como de primeira escolha. Este fármaco é um importante componente do arsenal terapêutico antimicrobiano. A recente reedição das normas para profilaxia da endocardite bacteriana é um exemplo claro deste fato. Apesar de existir concordância de que, para que seja efetivo, a amoxicilina ou um outro antibiótico qualquer devam ultrapassar em níveis séricos a concentração inibitória mínima de um dado patógeno, não é no sangue que a maioria das infecções se encontra. Poucos são os dados a respeito da concentração tissular que a amoxicilina atinge, uma maior ênfase sempre é dada aos níveis séricos da droga. Este trabalho teve por objetivo estudar a concentração tecidual da amoxicilina. Para tanto, utilizou-se 60 ratos, nos quais foram implantadas, dorsal e subcutâneamente, quatro esponjas de PVc. Após decorridos 14 dias da implantação, os animais receberam uma suspensão de amoxicilina, por via intragástrica, na dose de 40mg/kg. Decorridos 15 min, 30 min, 1, 11/2, 2, 4, 6, 8, 10 e 12 horas após a administração, as amostras de sangue, bem como os tecidos granulomatosos foram colhidos. As amostras de sangue foram centrifugadas e 10 µLdos soros obtidos foram distribuídos em discos de papel e, assim como os tecidos, foram dispostos em placas de Petri, contendo ágar Mueller Hinton previamente inoculado com 108 u.f.c./mL de Staphy/ococcus aureus (ATCC 25923). Após um período de incubação de 18 horas, os halos de inibição foram medidos e anotados para posterior análise. Previamente, foi construída uma curva de regressão, com o halo de inibição em função dos logaritmos de concentrações conhecidas da droga. Observou-se que o fármaco atingiu níveis acima das concentrações inibitória e bactericida mínimas, no período compreendido entre 30 min e 8 horas após a administração, tanto no sangue quanto no tecido. Os resultados levam a crer que esquemas posológicos de 6/6 horas ou 8/8horas são válidos para manter as concentrações antimicrobianas em níveis suficientes / Abstract: Although there are severa I reports regarding the bacterial resistance to amoxicillin, it is used as a first choice therapy in medicine and dentistry. The recent edition of the guidelines for the prevention of bacterial endocarditis is a clear example of this. In spite of it is widely accept that every antibiotic should achieve higher serum levei than the minimum inhibitory concentration for a given bacteria, the blood is not the place where the majority of the infections occur. There are few data about the tissue concentration that the amoxicillin reaches; a greater importance is given to the serum levels of this drug. This aim of this paper was to study the tissue concentration of the' amoxicillin. Sixty male rats were implanted the back with 4 PVC sponges. After 14 days of the implantation, the animais received orally 40mg/kg of amoxicillin suspension and were sacrificed in groups of 6 at 15 min, 30 min, 1, 1112, 2, 4, 6, 8, 10 and 12 hours after the administration. Blood samples and granulomatous tissues were collected. After the centrifugation of blood samples, 10 I-IL of sera were distributed in paper disks and, as well the granulomatous tissue were disposed in Petri dishes with Mueller Hinton agar inoculated with 108 c.f.u. of 5taphy/ococcus aureus (ATCC 25923). After 18 hours of incubation the inhibition zones were measured and scored for analysis. A regression curve with the inhibition zones versus the logarithm concentrations of amoxicillin was previously done. It was observed that the drug achieved in blood and tissue concentrations above the minimum inhibitory and bactericide concentrations ones within the period of 30min and 8 hours after the administration. It was concluded that with the dose studied the intervals of 6/6 hours or 8/8 hours would be adequate to keep sufficient levels of the antibiotic / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências
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Associação de acido clavulanico a cefalosporinas frente a Staphylococus aureus produtores de beta-lactamase

Del Fiol, Fernando de Sa 03 July 1998 (has links)
Orientador: Thales Rocha Mattos Filho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-23T22:35:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DelFiol_FernandodeSa_D.pdf: 4760278 bytes, checksum: 853766cfdc5b5cbf6645a51ee1d9593d (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Desde a década de 40, com o advento da antibioticoterapia clínica, há relatos de microrganismos resistentes às drogas. Essa resistência é preocupante na medida em que torna-se cada vez mais difícil o tratamento de determinadas infecções associadas a esses microrganismos. Estudos têm sido realizados no sentido de encontrar novas drogas ou associações, ou ainda novas terapias para tentar minimizar o aparecimento e a manifestação de resistência. Assim, o intuito deste trabalho foi avaliar a associação de ácido clavulânico (inibidor de 'beta '-lactamases, normalmente associado à penicilinas), à cefalosporinas, na tentativa de aumentar sua ação bactericida frente à bactérias produtoras ou não de 'beta '-lactamases. Para tanto, foram utilizados 160 ratos, divididos em grupos de 8 animais nos quais foram implantados cirurgicamente, na região dorsal, esponjas de PVC. Decorridos 7 dias do implante, cada grupo recebeu doses previamente estabelecidas de: cefalexina (75 e 150 mg/kg - grupos 1 e 2); cefalexina + ácido clavulânico (75 / 37,5 e 150 / 75 mg/kg - grupos 7 e 8); cefriaxona (40 e 80 mg/kg - grupos 3 e 4); cefriaxona + ácido clavulânico (40 / 20 e 80 / 40 mg/kg - grupos 9 e 10) e ainda ácido clavulânico isoladamente (20 e 60 mg/kg - grupos 5 e 6). Uma hora após a administração das drogas os tecidos granulomatosos, formados pelo implante da esponja de PVC, foram retirados e dispostos em meio de cultura em placas de Petri, previamente inoculadas com '10 POT. 8' u.f.c. de Staphylococcus aureus não produtores de 'beta '-lactamase (ATCC 25923) (grupos 1 a 10) em ágar Müller Hinton. O mesmo procedimento acima descrito foi repetido (grupos 11 a 20), alterando-se porém o microrganismo, utilizando-se agora Staphy/ococcus aureus produtores de 'beta '-Iactamase (cepa de campo). Após 24h de incubação, os halos de inibição formados, quando formados, foram medidos e anotados para posterior análise Esse estudo foi designado como ex vivo. Paralelamente, foi realizado estudo in vitro das mesmas associações testadas ex vivo,para avaliar a reprodutibilidade do teste e dos resultados. Para os testes in vitro, foi realizada uma escala de diluições contendo: o microrganismo, meio de cultura e ainda diluições decrescentes da(s) droga(s) a ser(em) testada(s), ou seja determinação de CIM (Concentração Inibitória Mínima). A análise estatística dos dados obtidos, mostrou que: sem a presença de 'beta '-lactamase, a cefalexina, apresenta melhores resultados que a cefriaxona, o que inverte-se quando o microrganismo em questão é produtor de 'beta '-lactamase (P<0,05). Ainda, a adição de ácido clavulânico não interfere na ação antibiótica das drogas quando não há presença de 'beta '-lactamase e, em presença da enzima, a associação mostrou-se sinérgica, aumentando a ação bactericida das drogas (P<0,05), revelando-se útil quando o microrganismo mostra-se resistente pela presença da 'beta '-lactamase. Os resultados dos testes ex vivo realizados mostraram reprodutibilidade quando comparados com os resultados dos testes in vitro / Abstract: Since the 40's decade, with the coming of the clinical chemotherapy, there are already reports of bacterial resistance to drugs. This resistance is preoccupying, since it becomes more and more difficult the treatment certain infections associated to the those microrganisms. Countless attempts take place in the sense of finding new drugs or associations, or still new therapies trying minimize the emergence and the resistance manifestation. In that way, the aim of this study was to evaluate the association of clavulanic acid, a 'beta '-lactamases inhibitor that usually comes associated to penicillins, to cephalosporins, in the attempt of increasing its bactericidal action against bacterias producer or not of 'beta '-lactamases. Therefore, 160 rats were used, which receive surgicaly implants of PVC sponges. After 7 days of the implants, the animais received doses previously established of cephalexin (75 and 150 mg/kg - groups 1 and 2); cephalexin + clavulanic acid (75 / 37,5 and 150/75 mg/kg - groups 7 and 8); ceftriaxone (40 and 80 mg/kg - groups 3 and 4); ceftriaxone + clavulanic acid (40 / 20 and 80 1 40 mg/kg - groups 9 and 10) and still clavulanic acid separately (20 and 60 mg/kg - groups 5 and 6). One hour after the administration, the formed tissue was retired and disposed in Petri dishes, previously inoculated with '10 POT. 8' c.f.u. of Staphylococcus aureus ('beta '-lactamase producers [clinical isolate] or no producers [ATCC 25923]) in Muller Hinton Agar. After 24h of incubation, the formed inhibition halos were measured and scored for posterior analysis. Parallelly to that an in vitro study of the same ex vivo associations tested was accomplished in the attempt of reproducing the results. For the tests in vitro, a scale of dilutions was accomplished contends the microrganism, media and still decreasing dilutions of the drugs to be tested, an MIC. The statistical analysis show: in the 'beta '-lactamase absence, the cephalexin presents better results than the ceftriaxone, what is inverted when the microrganism in subject is producer of 'beta '-lactamase (P<0,05). Still, the addition of clavulanic acid doesn't interfere in the antibiotic action of the drugs when there is 'beta '-lactamase absence. In presence of the enzyme, the association was shown sinergic, increasing the bactericide action of the drugs, being revealed useful when the microrganism show resistance / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Odontologia
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Avaliação da radiopacidade, do pH e da atividade antimicrobiana do MTA, do cimento Portland puro e do cimento Portland adicionado de agentes radiopacificadores

Lima, Marta Judite Nunes 26 February 2016 (has links)
Introduction: The radiopacity is a required property in all dental materials. This characteristic allows this materials be able to be distinguished from the tooth surfaces through the radiography. Portland cement (PC) presents physico-chemical and biological properties similar to mineral trioxide aggregate (MTA), except for radiopacifier. Objective: To evaluate the radiopacity, antimicrobial activity and pH of the MTA, pure PC and PC added different radiopacifiers. Materials and Methods: The radiopacity of MTA, pure PC and PC added the radiopacifying: iodoform, lead oxide, zirconium oxide, bismuth subnitrate, barium sulfate and bismuth oxide in the proportions 15%, 20% and 30% were analyzed. The radiopacity was carried out using a semi-direct digital radiography system (Instrumentarium Kavo EXPRESS®). The PC and cements selected with adequate radiopacity (ANSI/ADA No. 57) were evaluated for their antimicrobial activity and pH. Antimicrobial activity was analyzed by microdilution tests and agar diffusion. The microorganism tested were Enterococcus faecalis, as a standard strain (ATCC 29212) and six clinical strains (LMA 26, LMA 27, LMA 28, LMA 29, LMA 31 and LMA 34). The pH was measured using a digital pH meter (pH Meter Pocket-sized). Statistical analyzes were performed using the Shapiro-Wilk normality test, ANOVA and Tukey with significance level of 5%. Results: Pure PC had the lowest radiopacity. The MTA, PC + iodoform 20% (3.59 mmEq.Al), PC + bismuth oxide 20% (4.79 mmEq.Al), PC + bismuth subnitrate 20% (3.12 mmEq.Al), PC + 20% lead oxide (3.18 mmEq.Al) and PC + 30% zirconium oxide (4.28 mmEq.Al). Regarding the agar diffusion test, the LMA 26 strain was inhibited by PC, PC + Iodoform 20%, PC + 30% Zirconium Oxide, PC + Bismuth subnitrate 20%, and PC + Bismuth Oxide 20%. The LMA 31 strain was inhibited by PC + zirconium oxide 30% and PC + bismuth subnitrate 20% and LMA 27 strain was inhibited by PC + bismuth subnitrate 20%. The other strains were not inhibited. In the microdilution test, most strains was inhibited by tested materials, except the ATCC 29212 strain which was not inhibited by PC + lead oxide 20%. LMA 28 29, 31 and 34 strains were not inhibited by PC + lead oxide 20%and PC + zirconium oxide 30%, in which LMA 28 and 29 strains were not inhibited by PC + bismuth oxide20%. All cements tested showed alkalinity in all experimental periods, in which MTA had the lowest pH. Conclusions: MTA and PC added the radiopacifiers subnitrate bismuth and iodoform in concentrations of 20% by weight, provided satisfactory radiopacity, alkaline medium and promoted bactericidal and bacteriostatic activities against strains of E .faecalis tested. / Introdução: A radiopacidade é uma propriedade obrigatória em todos os materiais odontológicos. Esta característica permite este material seja distinguido das superfícies dentárias através da radiografia. O cimento Portland (CP) apresenta propriedades físicoquímicas e biológicas semelhantes ao Agregado Trióxido Mineral (MTA), exceto pela partícula radiopacificadora. Objetivo: Avaliar a radiopacidade, atividade antimicrobiana e pH do MTA, CP puro e CP adicionado de diferentes radiopacificadores. Materiais e Métodos: Foi analisada a radiopacidade do MTA, CP e CP adicionado dos radiopacificadores: iodofórmio, óxido de chumbo, óxido de zircônio, subnitrato de bismuto, sulfato de bário e óxido de bismuto nas proporções 15%, 20% e 30%. A radiopacidade foi avaliada por meio do sistema de radiografia digital semi-direto (Instrumentarium Kavo EXPRESS®). O CP e os cimentos selecionados com radiopacidade adequada (ANSI/ADA nº 57) foram submetidos à avaliação da atividade antimicrobiana e do pH. A atividade antimicrobiana foi analisada pelos testes de microdiluição e difusão em ágar. O micro-organismo testado foi o Enterococcus faecalis, sendo uma cepa padrão (ATCC 29212) e seis cepas clínicas (LMA 26, LMA 27, LMA 28, LMA 29, LMA 31 e LMA 34). O pH foi aferido com pHmetro digital (pH Meter Pocket-sized). Os testes estatísticos utilizados foram os testes Shapiro-Wilk de normalidade, análise de variância ANOVA e Tukey a nível de significância de 5%. Resultados: O CP puro apresentou o menor valor de radiopacidade, O MTA, CP + iodofórmio 20% (3,59 mmEq.Al), CP + óxido de bismuto 20% (4,79 mmEq.Al), CP + subnitrato de bismuto 20% (3,12 mmEq.Al), CP + óxido de chumbo 20% (3,18 mmEq.Al) e CP + óxido de zircônio 30% (4,28 mmEq.Al). No teste de difusão em ágar, a cepa LMA 26 foi inibida pelo CP, CP + Iodofórmio 20%, CP + Óxido de Zircônio 30%, CP + Subnitrato de Bismuto 20% e CP + Óxido de Bismuto 20%. A cepa LMA 31 foi inibida pelas associações CP + óxido de zircônio 30% e CP + subnitrato de bismuto 20% e a cepa LMA 27 foi inibida pelo CP + subnitrato de bismuto 20%. As demais cepas não foram inibidas. No teste de microdiluição, a maioria das cepas foi inibida pelos materiais-testes, exceto a cepa ATCC 29212 que não foi inibida pelo CP + óxido de chumbo 20%, as cepas LMA 28, 29, 31 e 34 não foram inibidas pelas associações CP + óxido de chumbo 20% e CP + óxido de zircônio 30%, sendo que as cepas LMA 28 e 29 também não foram inibidas pelo CP + óxido de bismuto 20%. Todos os cimentos testados apresentaram alcalinidade em todos os períodos experimentais, sendo que o MTA apresentou os menores valores de pH. Conclusões: O MTA e as concentrações de CP adicionado de 20% do agente radiopacificador subnitrato de bismuto e CP adicionado do agente radiopacificador iodofórmio, 20% em peso, proporcionaram radiopacidade satisfatória, alcalinizaram o meio e promoveram atividades bactericida e bacteriostática contra as cepas de E. faecalis testadas.
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Biofilmes e suspensões celulares de Candida spp. isoladas de ambiente hospitalar: efeitos de antifúngicos sintéticos e bioativos vegetais

CARVALHO, Roberta Ribeiro de 22 March 2013 (has links)
Infecções fúngicas invasivas estão associadas a altos índices de morbidade e mortalidade, sendo causadas principalmente por leveduras do gênero Candida. A formação de biofilmes tem sido considerada um dos principais fatores associados à virulência destas leveduras, devido, principalmente, à maior resistência às terapias antimicrobianas apresentada pelas células sésseis em comparação às células planctônicas. Torna-se necessária a seleção de antifúngicos eficazes na terapêutica das infecções associadas a biofilme. O presente estudo tem por objetivo avaliar e comparar o efeito de antifúngicos sintéticos (Fluconazol e Anfotericina B) e bioativos vegetais (Guttiferona A e 7-Epiclusianona) em biofilmes e suspensões celulares de Candida spp. isoladas de ambiente hospitalar. Foram coletadas 180 amostras, havendo uma frequência de distribuição de 17,8% de isolados de Candida spp., provenientes principalmente das mãos de profissionais (28% das amostras), locais de preparo e armazenamento de medicamentos (16%) e leitos de pacientes (16%). As espécies mais isoladas foram do complexo C. parapsilosis (59%), C. tropicalis (19%), consideradas as espécies mais associadas à candidemia na América Latina, e C. guilliermondii (13%), associada a fenômenos de resistência cruzada e multirrestistência, não sendo isolada amostra de C. albicans. Todas as amostras isoladas foram capazes de produzir biofilme, com biofilmes metabolicamente ativos. Biofilmes do complexo C. parapsilosis e C. tropicalis apresentaram menor atividade metabólica em relação aos isolados de C. famata, C. glabrata e C. guilliermondii. Os isolados não apresentaram resistência a Fluconazol e Anfotericina B e os bioativos demonstraram atividade. Os resultados dos testes de sensibilidade em biofilmes demonstram um grande aumento dos valores de IC quando comparados aos valores obtidos para células planctônicas, variando de 256 a >2.048 vezes no caso do Fluconazol e de 16 a 256 vezes para Anfotericina B. Os bioativos vegetais estudados apresentaram boa atividade sobre biofilmes, especialmente a Guttiferona-A. Os resultados demonstram a importância da implementação de técnicas padronizadas de ensaio de sensibilidade antifúngica em biofilmes e a importância da pesquisa de contaminação ambiental, auxiliando no estabelecimento da cadeia epidemiológica de infecções em ambientes hospitalares. / Invasive fungal infections are associated with high morbidity and mortality, mainly caused by Candida. The formation of biofilms has been considered one of the main factors associated with the virulence of these strains, primarily due to increased resistance to antimicrobial therapies presented by sessile cells compared to planktonic cells. It is necessary to select the effective antifungal therapy for infections associated with biofilm. The present study aims to evaluate and compare the effect of synthetic antifungals (Fluconazole and Amphotericin B) and plant bioactives (Guttiferone-A and 7-Epiclusianone) in biofilms and cell suspensions of Candida spp. isolated from the hospital environment. 180 samples were collected, with an incidence of 17.8% of isolates of Candida spp., isolated mainly from the hands of professionals (28% of samples), drug storage and preparation places (16%) and beds of patients (16%). The isolated Candida species were mainly Candida parapsilosis complex (59%) and C. tropicalis (19%), the species considered most associated with candidemia in Latin America, and C. guilliermondii (13%), associated with cross-resistance, not being isolated any sample of C. albicans. All isolates were able to produce biofilm, with metabolically active biofilms. The biofilms of C. parapsilosis complex and C. tropicalis showed lower metabolic activity in relation to isolates of C. famata, C. glabrata and C. guilliermondii. The isolates showed no resistance to Fluconazole and Amphotericin B and bioactives demonstrated activity. Results of Susceptibility Tests in biofilms showed a large increase in IC in biofilms for all tested substances. The plant bioactives studied showed good activity against biofilms, especially Guttiferone-A. The results demonstrate the importance of implementing standardized techniques for antifungal susceptibility testing in biofilms and of environmental contamination research, helping to establish the epidemiological chain of infections in hospital environments.
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Avaliação da atividade antimicrobiana de extratos vegetais de plantas encontradas no cerrados do sul de minas gerais

CHAVASCO, Juliana Moscardini 15 February 2013 (has links)
O uso indiscriminado de antimicrobianos pode estar associado ao fenômeno da resistência microbiana, levando ao insucesso no tratamento das infecções e impulsionando a busca por novas alternativas terapêuticas, dentre elas, os bioativos obtidos a partir de fontes vegetais. Foi avaliada a atividade antimicrobiana de extratos hidroetanólicos de plantas sobre bactérias Gram positiva, Gram negativa, leveduras, Mycobacterium tuberculosis H37 e Mycobacterium bovis pela técnica de difusão em agar e microdiluição em caldo. Dentre os extratos avaliados pelo método de difusão em agar, o extrato de Bidens pilosa folha apresentou a mais expressiva média de halos de inibição de crescimento frente aos microrganismos utilizados, seguido por Bidens pilosa flor, E. pyriformis folha, M. cauliflora folha e E. pyriformis semente que apresentaram estatisticamente a mesma média de formação de halos inibitórios sobre bactérias Gram positivas, Gram negativas e leveduras. Os extratos de Heliconia rostrata não apresentaram atividade. Mycobacterium tuberculosis H37 e Mycobacterium bovis mostraram-se resistentes a todos os extratos. Dos microrganismos avaliados, as bactérias Gram positivas M. luteus e S. aureus apresentaram o mesmo perfil de sensibilidade (p>0.05). As bactérias Gram negativas E. coli, E. cloacae, S. marcescens e P. aeruginosa também apresentaram o mesmo perfil de sensibilidade frente aos extratos (p>0.05). O perfil de senbilidade dos fungos C. albicans e S. cerevisiae foram comparáveis entre si e entre as bactérias Gram positivas B. subtilis, E. faecalis e Gram negativa S. typhimurium (p>0.05). Os extratos que apresentaram ação inibitória através do ensaio de microdiluição em caldo foram os mesmos extratos ativos no teste de difusão em agar. A avaliação da citotoxicidade foi realizada sobre células C6-36 de larvas de mosquito Aedes albopictus. Os extratos de caule e flor de Heliconia rostrata, folha e caule de Plinia cauliflora, semente de Anonna crassiflora e caule, flor e raiz de Bidens pilosa não apresentaram toxicidade nas concentrações avaliadas. Os maiores índices de seletividade foram apresentados pelos extratos de A. crassiflora caule e B. pilosa flor para S. aureus, apresentando potencial para estudos como futuros candidatos a fármacos. Dos microrganismos avaliados, as bactérias Gram positivas M. luteus e S. aureus apresentaram o mesmo perfil de sensibilidade (p>0.05). Dos microrganismos que apresentaram alguma sensibilidade a qualquer um dos extratos, M. bovis, P. aeruginosa, S. marcescens, E. cloacae e E. coli foram estatisticamente, igualmente os menos sensíveis. Apenas os extratos de B. pilosa folha apresentou igualdade, estatisticamente significativa, da média de efetividade inibitória quando comparado ao controle positivo, a clorexidina / The indiscriminate use of antibiotics may be associated with the phenomenon of microbial resistance, leading to infections treatment failure and boosting the search for new therapeutic alternatives, among them, the bioactive obtained from plant sources. We evaluated the antimicrobial activity of hydroethanolic extracts of plants on Gram positive, Gram negative bacteria, yeasts, Mycobacterium tuberculosis and Mycobacterium bovis H37 through agar diffusion and broth microdilution techniques. Among the extracts evaluated through agar diffusion method, the leaf extract of Bidens pilosa showed the most significant average halos of growth inhibition against microorganisms used, followed by flower of Bidens pilosa leaf E. pyriformis, sheet M. cauliflora seed and E. pyriformis showed that statistically the same average formation of inhibitory halos on Gram positive bacteria, Gram negative bacteria and yeast. Extracts of Heliconia rostrata showed no activity. Mycobacterium bovis and Mycobacterium tuberculosis H37 were resistant to all extracts. Of the tested microorganisms, Gram positive bacteria M. luteus and S. aureus showed the same sensitivity profile (p> 0.05). Gram negative bacteria E. coli, E. cloacae, S. marcescens and P. aeruginosa also showed the same sensitivity profile compared to extracts (p> 0.05). The sensitivity profile of the fungi C. albicans and S. cerevisiae and were comparable between the Gram-positive B. subtilis, E. faecalis and Gram negative bacteria S. typhimurium (p> 0.05). The extracts which showed inhibitory action by microdilution sample test were the same active extracts as in agar diffusion test. The Cytotoxicity assessment was performed on cell C6-36 larvae of Aedes albopictus. The extracts of Heliconia rostrata’s stem and flower, Plinia cauliflora’s leaf and stem, crassiflora Annona’s seed and stem, Bidens pilosa's root and flower showed no toxicity at the evaluated concentrations. The highest selectivity were presented by stem extracts of A. crassiflora and Bloom B. pilosa as for S. aureus there is potential for studies on future drug candidates. Of the tested microorganisms, Gram positive bacteria M. luteus and S. aureus showed the same sensitivity profile (p> 0.05). The sensitivity profile of the fungi C. albicans and S. cerevisiae and were compared one another and to B. subtilis, E. faecalis Gram positive and S. typhimurium Gram negative bacteria (p> 0.05). Among the microorganisms which showed some sensitivity to any of the extracts, M. bovis, P. aeruginosa, S. marcescens, E. and E. cloacae coli were statistically also less sensitive. Only the leaf extracts of B. pilosa showed statistically significant equality of the average inhibitory effectiveness when compared to the positive control and chlorhexidine
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Triagem antimicrobiana de extratos vegetais frente a isolados ambientais de Staphylococcus aureus Oxacilina resistentes (ORSA)

SILVA, Jeferson Júnior da 08 March 2013 (has links)
Atualmente, S. aureus meticilina resistente (MRSA) é o mais importante patógeno nosocomial, devido à sua multirresistência aos antimicrobianos disponíveis, o que direciona esforços na busca de novas alternativas terapêuticas. Neste estudo foi avaliada a ação antimicrobiana de extratos vegetais contra isolados MRSA do ambiente aéreo, identificados previamente. Os extratos de Annona crassiflora, Bidens pilosa, Eugenia pyriformis, Heliconia rostrata e Plinia cauliflora foram obtidos por maceração em álcool etílico a 70%, submetidos à rota evaporador e liofilizados. Estes foram testados quanto à ação antimicrobiana pela técnica de difusão em ágar. Posteriormente, realizou-se a concentração inibitória mínima (CIM) pela técnica de microdiluição em caldo. Testes de toxicidade em cultura celular e análise fitoquímica dos extratos complementaram a análise, onde a maioria dos extratos apresentou baixa toxicidade, presença de alcalóides, flavonóides, taninos e saponinas. Os extratos da folha, casca do fruto e caule de Plinia cauliflora, caule e folha de Eugenia pyriformis, caule, polpa, casca do fruto e folha de Annona crassiflora e flor, caule e folha de Bidens pilosa foram efetivos contra as amostras multirresistentes analisadas, sendo que o extrato de Bidens pilosa folha apresentou a melhor atividade antibacteriana in vitro por ambos os métodos avaliados. / Currently S. aureus methicillin resistant (MRSA) is the most important nosocomial pathogen due to multidrug resistance to available antimicrobials, which directs efforts in the search for new therapies. In this study we evaluated the in vitro antimicrobial activity of plant extracts against ambient aerial isolates of MRSA previously identified. The hydroethanolic extracts of Annona crassiflora, Bidens pilosa, Eugenia pyriformis, Heliconia rostrata and Plinia cauliflora were obtained by steeping in ethyl alcohol, 70%, evaporated and lyophilized. The antimicrobial activity was evaluated by agar diffusion and determination of minimum inhibitory concentration (MIC) by microdilution broth. Toxicity testing in cell culture and phytochemical analysis complemented the analysis where most of the extracts showed low toxicity, presence of alkaloids, flavonoids, tannins and saponins. The extracts of leaf, stem and fruit rind of Plinia cauliflora, stem and leaf of Eugenia pyriformis, stem, pulp, fruit rind and leaf of Annona crassiflora and flower, stem and leaf of Bidens pilosa were effective against multidrug-resistant samples analyzed being that the leaf extract of Bidens pilosa showed the best in vitro anti-MRSA activity by both methods evaluated. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG
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Semissíntese e estudo da relação estrutura-atividade antimicrobiana de novos derivados da Guttiferona-A

DIAS, Kris Simone Tranches 08 August 2011 (has links)
As infecções causadas por bactérias e fungos são muito comuns e a resistência adquirida aos antibióticos disponíveis tem se tornado frequente, mostrando a necessidade de constantes pesquisas e investimentos em novos fármacos antimicrobianos eficazes. Dentre as alternativas de prospecção de novos fármacos, os produtos naturais se destacam como fontes de substâncias ativas, novos modelos moleculares e matérias-primas com padrões moleculares singulares e inovadores. Como parte de um projeto de bioprospecção e planejamento de novas substâncias bioativas, o gênero Rheedia foi eleito como fonte de benzofenonas polipreniladas a serem utilizadas como substratos para obtenção de novos derivados com perfil antibacteriano otimizado e estudos de relação estrutura-atividade (REA). O objetivo deste trabalho foi sintetizar novos derivados da guttiferona-A (LFQM-78), uma benzofenona natural, realizando modificações das características de hidro/lipofilicidade através da inserção de grupos substituintes nas hidroxilas fenólicas visando à otimização do perfil de atividade antimicrobiana desta substância. Os derivados sintetizados foram avaliados quanto a sua ação contra um amplo espectro de bactérias Gram-positivas, Gram-negativas e fungos. As espécies microbianas mais sensíveis a os compostos testados foram as bactérias Gram-positivas Staphylococcus aureus (ATCC 6538) e Bacillus cereus (ATCC 11778), sendo que alguns dos compostos foram mais ativos do que o cloranfenicol, antibiótico utilizado como referência. Os resultados obtidos evidenciaram que a variação da lipofilicidade da molécula é um ponto importante para a modulação da atividade, e que as modificações estruturais realizadas na guttiferona-A, levaram a derivados mais potentes, seletivos e pouco tóxicos contra diferentes tipos de microrganismos patogênicos. / Infections caused by bacteria and fungi are very common and acquired resistance to available antibiotics has become common, showing the need for constant research and investments in new effective antimicrobial drugs. Among the alternatives to the prospection for new drugs, natural products stand out as sources of active ingredients, new molecular models and raw materials with innovative molecular patterns. As part of a project aiming the bioprospection and the design of new bioactive substances, the gender Rheedia was elected as a source of poliprenylated benzophenones to be used as starting materials for new semi-synthetic derivatives with optimized antibacterial profile and structure-activity relationship studies (SAR). The central objective was to synthesize new derivatives of guttiferone-A (LFQM-78), a natural benzophenone, carrying out modifications of their hydro/lipophilic properties by the insertion of substituents on the phenolic hydroxyl groups to optimize the profile of antimicrobial activity of this compound. Semi-synthetic derivatives were evaluated for their effects s against a broad spectrum of Gram-positive and Gram-negative bacteria and fungi. The most sensitive microbial species to the target compounds were Gram-positive (ATCC 6538) and Bacillus cereus (ATCC 11778), and some of the derivatives were more active than chloramphenicol, used as standard. Our results were indicative that a variation in lipophilicity of the molecules was an important requisite for antimicrobial activity modulation, and that the structural modifications made on guttiferone-A led to more potent and selective derivatives, with lower toxicity for different types of pathogens.

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