Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-23Bitstream added on 2014-06-13T20:18:02Z : No. of bitstreams: 1 giglioti_r_me_jabo.pdf: 1368226 bytes, checksum: e45d49f6dc56df0b171216857782ba51 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Rhipicephalus (Boophilus) microplus é considerado o mais importante parasito de bovinos no Brasil. Atualmente seu controle é dificultado pela exigüidade de moléculas acaricidas geradas, e pelo rápido desenvolvimento de resistência dos carrapatos. O presente trabalho teve por objetivo estudar o efeito de quatro extratos oleosos de sementes de Nim (Azadirachta indica) contento 2.000, 5.000, 9.000 e 10.000 ppm de azadiractina (AZA) quantificados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) em fêmeas ingurgitadas e larvas de R. (B.) microplus, in vitro. Para os ensaios com fêmeas ingurgitadas foi usado o Teste de Imersão de Adultas e para os ensaios com as larvas o Teste do Pacote com Larvas. Os resultados obtidos nos ensaios com fêmeas ingurgitadas mostraram que o principal efeito tóxico produzido pelos extratos, está relacionado à inibição da reprodução deste parasito. Foram verificadas reduções nas taxas de ovipostura e eclodibilidade das larvas oriundas das fêmeas tratadas com várias diluições dos extratos, em relação aos controles. Nos cálculos de Eficácia do produto (EP) para todas as soluções testadas, observou-se que a solução de 10.000ppm de AZA (N10) apresentou a maior eficácia. Os resultados das análises dos ensaios mostraram significância (p<0,01) dos dois efeitos incluídos no modelo, indicando variações significativas tanto devidas à concentração de AZA, quanto do ensaio realizado. Nas concentrações letais para as fêmeas ingurgitadas verificou-se que as CL50 não apresentaram variações, enquanto que as CL90 apresentaram grandes variações entre os extratos estudados. Nos ensaios com as larvas, não foram observadas mortalidade das larvas, indicando eficácia zero de todos os extratos testados. Os resultados dos ensaios com fêmeas ingurgitadas de R. (B.) microplus mostraram que os extratos oleosos de Nim apresentaram atividade... / Rhipicephalus (Boophilus) microplus is considered the most important cattle parasite in Brazil. Nowadays, his control is complicated by the slowness that acaricides molecules are generated, synthesized through and by the fast development of the resistance of these ticks to the market available products. This work aims to study the effect of four extracts of Neem seed oil (Azadirachta indica) containing 2.000, 5.000, 9.000 and 10.000 ppm of azadirachtin (AZA) quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) on engorged females and larvae of R. (B.) microplus, in vitro. For the tests with engorged females, the Adult Immersion Test was used and for the larvae was used the Larvae Package Test. The test results with the engorged females showed that the main toxic effect produced by the extracts is related to the inhibition of the parasite reproduction. Were observed reductions in oviposition and hatchability rates of the larvae derived from the female treated with several dilutions of extracts, compared to controls. In the Product Effectiveness (PE) for all the test solutions, the 10.000ppm (N10) solution showed the highest efficiency. The analysis results from the tests showed significance (p<0,01) of the two effects included in the model, indicating variations both due to AZA and to the test performed. In the lethal concentration to the engorged females was verified that the CL50 did not show great variation, while the CL90 showed great variation between the studied extracts. In the tests with larvae was not observed mortality of them, indicating zero effectiveness of all tested extracts. The results of the tests with R. (B.) microplus engorged females demonstrated that the extract of Neem seeds oils showed acaricide activity. Thus, it is suggested that further studies can be conducted, such as development of the methods and of excrection, and characterization of other secondary ... (Complete abstract click electronic access below)

The work was conducted in Santa Maria (RS), with the objective of to evaluate the effectiveness of the lemongrass (Cymbopogon citratus) in the control of Boophilus microplus (Canestrini, 1887) tick, compared to a synthetic acaricide. The trials were developed in the Dairy Cattle and in the Parasitic Diseases of the Domestic Animals Laboratories of the Federal University of Santa Maria, from May to December, 2003. In vivo and in vitro trials were conducted. Twelve Holstein cows were distributed in three groups of four animals each. A group was treated with amitraz. The others were treated with basic formulations of lemongrass extracts (technical recommendation for use in field level), corresponding from 1.36 and 2.72% of plant. An experimental design was constituted entirely randomized with three treatments and four repetitions each. For evaluation, they were counted engorged female ticks, up 4.0 mm length, before and after the application of the products (1st, 2nd, 3rd, 4th, 5th, 6th, 7th and 14th day). Amitraz treatment presented, in the 3rd, 7th and 14th day after the application, 100, 99.5 and 94.4% of effectiveness against engorged female ticks, respectively. Only the product contends 2.72% of lemongrass presented a partial control of ticks of 40.4; 46.6 and 41% in the 3rd, 7th and 14th day, after application, respectively. In in vitro experimentation, was studied the effectiveness of different products obtained by maceration of lemongrass plants, in comparison at the amitraz, on the ovipositional and eggs viability of engorged female ticks. For evaluation, method of the adult immersion test was used. The treatments were constituted by products contends 1.36% of macerated plant (technical recommendation), pure extracts (without water dilution) obtained of 150, 300, 600 and 1200g of macerated for liter of ethilc alcohol, forming products contends 13.04; 23.08; 37.50 and 54.55% of plant, respectively, and for amitraz at 0.025%. The engorged female ticks was divided by size and engorge level in light (between 4.5 and 7 mm length) and heavy (larger of 7 mm), being 10 heavy and 10 light submitted to one, two or three immersions in each tested products. The experimental design was it entirely randomized in an outline factorial (tested products X randomized number of immersions X engorged level). Amitraz presented effectiveness of 99.98% in the reduction of the ovipositional and egg viability. The tested products presented mean effectiveness of 28.50%, 54.28% and 71.05% when applied one, two and three times (immersions), respectively. The increase in the number of immersions of one for three increased in 42.55% the effectiveness of the products. The mean effectiveness of the products tested on the engorged female ticks light (53.22%) was better in relation to the heavy ones (49.24%). The tested products with 13.04; 23.08 and 37.5% of lemongrass presented effectiveness of 52.22; 55.31 and 52.60% of effectiveness, respectively, demonstrating similar behavior. Effectiveness up 90% was obtained in three immersions for products contends 23.08% and 37.50% applied on light (92.05%) and heavy (92.62%) engorged female ticks, respectively. The product contends lemongrass macerated plant at 1.36% presented the smallest effectiveness, with 8.18%. / O trabalho foi conduzido no município de Santa Maria (RS), com o objetivo de avaliar a eficácia do extrato alcoólico de capim-cidreira [Cymbopogon citratus (DC.) Staph] no controle do carrapato dos bovinos [Boophilus microplus (Canestrini, 1887)], comparado a um carrapaticida sintético. As pesquisas foram desenvolvidas nos Laboratórios de Bovinocultura de Leite e de Doenças Parasitárias dos Animais Domésticos pertencentes à Universidade Federal de Santa Maria, no período de maio a dezembro de 2003. Foram conduzidas duas pesquisas sendo uma in vivo e outra in vitro. Na primeira, foram utilizadas 12 vacas em lactação da raça Holandesa, distribuídas em três grupos de quatro animais cada. Um grupo foi tratado com amitraz. Os demais foram tratados com formulações básicas de extratos de capim-cidreira, conforme recomendações oriundas de instituições ligadas à extensão rural para uso em nível de campo, correspondendo a 1,36% (solução de campo) e 2,72 % de planta. Constituiu-se um delineamento experimental inteiramente casualizado com três tratamentos e quatro repetições. Para avaliação foram contadas fêmeas de carrapatos, com comprimento superior a 4 mm, antes e após a aplicação dos produtos (1º, 2º, 3º, 4º, 5º, 6º, 7º e 14º dia). A utilização do amitraz apresentou, no 3º, 7º e 14º dia após a aplicação, 100, 99,5 e 94,4 % de eficácia contra fêmeas ingurgitadas de carrapatos, respectivamente. Somente o produto contendo 2,72 % de plantas de capim-cidreira apresentou um controle parcial de teleóginas, sendo de 40,4; 46,6 e 41% no 3º, 7º e 14º dia, após a aplicação, respectivamente. Na experimentação in vitro estudou-se a eficácia de diferentes produtos obtidos por maceração de capim-cidreira, em comparação ao amitraz, sobre a postura e a eclodibilidade de ovos de teleóginas. Para avaliação usou-se o método do biocarrapaticidograma. Os tratamentos foram constituídos por produtos contendo 1,36% de macerado de planta (solução de campo), extratos puros (sem diluição com água) obtidos de 150, 300, 600 e 1200g de macerado por litro de álcool etílico, formando produtos contendo 13,04; 23,08; 37,50 e 54,55% de planta, respectivamente, e pelo amitraz a 0,025%. As teleóginas foram divididas por tamanho e nível de ingurgitamento em leves (comprimento entre 4,5 e 7 mm) e pesadas (maiores que 7 mm), sendo 10 teleóginas pesadas e 10 leves submetidas a uma, duas ou três imersões em cada um dos produtos testados. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado (arranjo fatorial, produtos testados X número de imersões X nível de ingurgitamento). O amitraz apresentou uma eficácia média de 99,98% na redução da postura e eclodibilidade de ovos. Os produtos testados apresentaram eficácia média de 28,50%, 54,28% e 71,05% quando aplicados uma, duas e três vezes (imersões), respectivamente. O aumento no número de imersões de uma para três, aumentou em 42,55% a eficácia dos produtos. A eficácia dos produtos testados sobre as teleóginas leves (53,22%) foi superior às pesadas (49,24%). Os produtos testados contendo 13,04; 23,08 e 37,50% de capim-cidreira apresentaram eficácias de 52,22; 55,31 e 52,60%, respectivamente, demonstrando comportamento semelhante. Eficácias superiores a 90% foram obtidas usando-se três imersões, nas formulações contendo 23,08 e 37,50% aplicados em teleóginas leves (92,05%) e pesadas (92,62%), respectivamente. O produto contendo macerado de planta de capim-cidreira a 1,36% apresentou a menor eficácia, com 8,18%.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1578292 bytes, checksum: a2a484d1dc6ebd6987a9b540cec6851e (MD5) Previous issue date: 2011-04-01 / The damage due to infestation of Rhipicephalus (Boophilus) microplus has been estimated at billions of dollars in the tropical and subtropical countries. The most commonly used forms of combat for this ectoparasite is mainly based on the use of chemical acaricides. Seeking an alternative way to control the parasite, the vaccine was developed synthetic anti R. (B.) microplus (SBm7462®). The synthetic vaccine SBm7462® contains three immunogenic epitopes (4822, 4824 and 4823) derived from the Bm86 protein. Genetic analysis showed that the fragment corresponding to SBm7462® is conserved across populations R. (B.) microplus from different regions in South America, however, the production of this vaccine on an industrial scale would cost very high. Therefore, alternative methods of production are being developed. The use of plants as bioreactors for production of heterologous proteins is a very attractive approach, since the transgenic plants are one of the most economical systems for protein production on industrial scale. The objective was to study the immune response of mice immunized orally with transgenic Arabidopsis thaliana expressing the recombinant peptide rBm7462. For this, seeds processed in a previous work were grown until the fifth generation. After confirmation of the production of the peptide, 0.5 g of leaves of transformed plants were administered orally to BALB/c, three times (interrupted by 3 weeks), as well as 200&#956;L of total soluble protein extract, inoculated subcutaneously. After 9 weeks, during which blood samples were collected from animals, weekly, they were euthanized for collection of lymph nodes and ileum. The results showed that it was not possible to detect levels of IgG anti-rBm7462 in mice immunized orally with leaves of transgenic plants expressing the peptide rBm7462, as well as in mice immunized with total soluble protein extracts of these plants, while the indirect ELISA method was used. However, the lymph nodes of immunized animals showed microscopic changes related to immune response and markings, by immunohistochemistry, for the peptide rBm7462. These observations led to the conclusion that the antigen dose was given to the animals sub-antigenic which may have stimulated mechanisms of tolerance to the antigen. What makes a necessary adjustment in the doses given to animals. Seeds used strains derived from 2NF allowed for the preparation of the fifth generation of transformed plants, indicating that the gene seq2, responsible for the synthesis of peptide rBm7462 probably is homozygous. What it indicates the genomic stability and viability of producing the antigen in transgenic plants. / Os prejuízos causados pela infestação de Rhipicephalus (Boophilus) microplus tem sido estimada em bilhões de dólares nos países tropicais e subtropicais. As formas de combate mais utilizadas para este ectoparasita são baseadas principalmente no uso de químicos acaricidas. Buscando uma forma alternativa para o controle do parasita, foi desenvolvida a vacina sintética anti R. (B.) microplus (SBm7462®). A vacina sintética SBm7462® contém três epitopos imunogênicos (4822, 4824 e 4823) derivados da proteína Bm86. Análises genéticas demonstraram que o fragmento correspondente a SBm7462® é conservado em populações R. (B.) microplus de diferentes regiões na América do Sul. Contudo, a produção desta vacina em escala industrial tornaria seu custo muito elevado. Assim sendo, formas alternativas de produção estão sendo desenvolvidas. A utilização de plantas como bioreatores para produção de proteínas heterólogas é uma metodologia muito atrativa, visto que as plantas transgênicas constituem um dos sistemas mais econômicos para produção de proteínas em escala industrial. O objetivo deste trabalho foi estudar a resposta imunológica de camundongos, imunizados oralmente com Arabidopsis thaliana transgênicas, que expressam o peptídeo recombinante rBm7462. Para isso, sementes transformadas em um trabalho anterior foram cultivadas até a quinta geração. Após confirmação da produção do peptídeo, 0,5g de folhas das plantas transformadas foram administradas oralmente a camundongos BALB/c, por três vezes (intercaladas por 3 semanas); assim como também 200&#956;L de extrato de proteínas totais solúveis, inoculado por via subcutânea. Após 9 semanas, durante as quais foram feitas coletas sanguíneas dos animais, semanalmente, estes foram eutanasiados para a coleta dos linfonodos e íleo. Os resultados demonstraram que não foi possível detectar níveis de IgGs anti-rBm7462 em camundongos imunizados oralmente com folhas de plantas transgênicas expressando o peptídeo rBm7462, como também em camundongos imunizados com extratos de proteínas totais solúveis das mesmas plantas, quando a metodologia ELISA indireto foi utilizada. Contudo, os linfonodos dos animais imunizados apresentaram alterações microscópicas relacionadas à resposta imunológica e marcações, através da técnica de imunohistoquímica, para o peptídeo rBm7462. Estas observações levaram a conclusão que a dose de antígeno oferecida aos animais foi sub-antigênica o que pode ter estimulado mecanismos de tolerância ao antígeno. O que torna necessário um ajuste nas doses oferecidas aos animais. Sementes utilizadas derivadas da linhagem 2FN possibilitaram a obtenção da quinta geração de plantas transformadas, indicando que o gene seq2, responsável pela síntese do peptídeo rBm7462, provavelmente encontra-se em homozigose. O que indica a estabilidade genômica dele e a viabilidade em se produzir o antígeno em plantas transgênicas.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2074097 bytes, checksum: 2249324a9888e3dffcea078cf1aa4fed (MD5) Previous issue date: 2011-02-21 / Ticks are important to public health and animal production because of their ability to transmit various infectious agents. Among ticks, Rhipicephalus microplus is responsible for economic losses in tropical and subtropical countries. Among the ways to control this ectoparasite, the immune option is viable, which doesn t generate resistant tick populations and offers safety to the animal products. The synthetic vaccine SBm7462® contains three immunogenic epitopes (4822, 4824 and 4823) derived from the Bm86 protein. Genetic analysis showed that the fragement corresponding to the SBm7462® is conserved in the population of R. microplus from different regions on South America. To evaluate the events of cellular immunity in calves and histology changes in female R. microplus. Previously were designed and constructed two genes expressed in Pichia pastoris Km71 strain. The rBmseq1 gene was designed to express immunogenic epitopes in tandem and rBmseq4 gene designed expressed this without repetitions. The recombinant peptides were recovered from the extracellular medium and were characterized by SDS-PAGE and Western blotting. These peptides were inoculated three times at intervals of thirty days in five Bos taurus taurus calves at doses of 2 mg plus 1.5 mg saponin. Afterwards, the lymph nodes were collected and processed histologically. Histological sections were stained by (H&E) and immunohistochemical staining for peroxidase-anti-peroxidase (PAP). It was shown that they developed a T-dependent response with immunity induction in animals immunized. Hence, showed clear structures whit confers immunity and affinity in animals immunized whit rBmseq4. However, 21 days after the last immunization, the challenge was made with R. microplus 4500 larvae per animal. At 21 days with the beginning of fallen females, these were randomly selected from each group. R. microplus females fed on animal s rBmseq1 group showed integrity of the intestinal epithelium, similar to control group. However, guts of ticks fed on animal s rBmseq4 group showed denudation and erosion of basal membrane cell. It demonstrates the peptide rBmseq4 peptide has a great ability to generate immune responses which induce adverse reactions in R. microplus. / Devido à sua capacidade de transmitir diversos agentes infecciosos, os carrapatos são importantes para a saúde pública e a produção animal. Dentre estes se destaca o carrapato Rhipicephalus microplus, responsável por perdas econômicas nos países das regiões tropicais e subtropicais. Entre as medidas de controle deste ectoparasito, o controle imunológico se tornou uma alternativa viável, que além de não gerar populações de carrapatos resistentes oferece inocuidade aos produtos de origem animal. A vacina sintética SBm7462®, cuja eficácia já foi demonstrada em bovinos, contém três epítopos imunogênicos (4822, 4824 e 4823) derivados da proteína Bm86. Análises genéticas mostraram que o fragmento correspondente ao peptídeo SBm7462® está conservado nas populações do R. microplus de diferentes regiões da América do Sul. Para avaliar os eventos de imunidade celular em bezerros e as alterações histológicas em fêmeas do R. microplus. Previamente foram desenhados e construídos dois genes que se expressaram na levedura Pichia pastoris cepa Km71. O gene rBmseq1 foi desenhado para produzir os epítopos imunogênicos em tandem e o gene rBmseq4 para produzir a sequência sem repetições. Os peptídeos expressos se recuperaram do meio extracelular e se caracterizaram por SDS-PAGE e Western blotting. Esses peptídeos recombinantes foram inoculados três vezes com intervalos de 30 dias em 4 bezerros Bos taurus taurus, na dose de 2 mg mais 1,5 mg de saponina. Em seguida, os linfonodos foram coletados e processados para análise histológica. Os cortes foram submetidos à coloração por Hematoxilina-eosina (H&E) e imunoistoquímica por peroxidase - anti - peroxidase (PAP), demonstrando que foi induzida uma resposta T- dependente, com desenvolvimento da imunidade nos animais imunizados. Além disso, se observaram claras estruturas que conferem afinidade e imunidade nos animais inoculados com o rBmseq4. Aos 21 dias após a última imunização, foi feito o desafio com 4500 larvas de R. microplus por animal. Com o começo da caída das fêmeas aos 21 dias, foram escolhidas, aleatoriamente, teleóginas de cada grupo. As fêmeas do R. microplus, alimentadas em bovinos do grupo rBmseq1 apresentaram conservação da integridade do epitélio intestinal, similar ao grupo controle. No entanto, alças intestinais de teleóginas, alimentadas em bovinos do grupo rBmseq4 mostraram desnudamento da membrana basal e erosão celular. Demonstrou-se que o peptídeo rBmseq4 possui maior capacidade de gerar uma resposta imune com habilidade para induzir reações adversas nos carrapatos R. microplus.

A fragmentação do habitat causa a redução na diversidade de espécies, afetando as relações entre os hospedeiros vertebrados e os parasitos. Neste estudo se verificou se o tamanho do fragmento florestal influencia a diversidade das aves silvestres o que poderia afetar a prevalência dos carrapatos nas aves. As aves foram capturadas através de redes de neblina em 12 áreas florestais: quarto fragmentos pequenos (80-140 ha); quatro grandes (480-1850 ha) e quatro controles, no Parque Estadual Morro do Diabo (~36000 ha). Adicionalmente foram coletados também carrapatos de vida livre através de arrasto com a flanela branca ao longo de trilhas. A infecção de carrapatos por riquétsias foi avaliada atrvés de PCR. No total foram capturadas 1745 aves representando 80 espécies de 24 famílias. 223 (13%) das aves foram encontradas parasitadas por formas imaturas de carrapatos: 1800 larvas e 539 ninfas. A espécie mais comum parasitando aves foi Amblyomma nodosum. Outras espécies: Amblyomma coelebs, Amblyomma cajennense, Amblyomma ovale, Amblyomma longirostre, Amblyomma calcaratum, e Amblyomma naponense foram achados nas aves esporadicamente. Entre os carrapatos de vida livre, A. cajennense foi a espécie mais comum, seguindo A. coelebs, A. naponense, Amblyomma brasilense e Haemaphysalis juxtakochi. De dois carrapatos A. nodosum foram isoladas bactérias do gênero Rickettsia em células Vero. Os isolados foram caracterizados por PCR e os fragmentos dos genes gltA, htrA sequenciados, e quando possível ompA e ompB. Um isolado foi identificado como Rickettsia bellii e o segundo, como R. parkeri. Dos 174 A. nodosum testados para a presença de riquétsia, 41 (23.6%) foram infectados por R. parkeri e 10 (5.7%) por R. bellii. A diversidade de aves era maior em áreas do controle, mas varias espécies as aves e também dos carrapatos responderam ao fragmentaço em modo diferente. A. nodosum parasitando as aves era mais abundante em áreas pequenas, enquando A. cajennense encontrado nas aves e em vida livre, era mais abundante em áreas do controle e em áreas grandes. Essas differencias de occorencia dos carraptos podem ser relacionadas com a abundância dos hospedeiros principais e fatores ambientais como temperatura e humidade nas áreas amostradas. Isso é um resultado da fragmentação do habitat que ilustra a falta de equilíbrio entre relações de parasitos, hospedeiros e ambiente. / Habitat fragmentation causes reduction in species diversity, affecting the relationships between vertebrate hosts and parasites. We tested if patch size has influence on forest birds diversity, which could affect the prevalence of ticks on wild birds. During two years we conducted a bird survey, using mist net in 12 areas: four small patches (80-140 ha), four large ones (480-1850 ha) and four control areas within the Morro do Diabo State Park (~36000 ha). Free living ticks were also collected through dragging the vegetation. Identified ticks were tested in the laboratory for the presence of Rickettsia. A total of 1,745 birds were captured representing 80 species from 24 families. A total of 223 (13%) birds were found infested by immature forms of ticks: 1,800 larvae and 539 nymphs. The most common tick parazitizing birds was Amblyomma nodosum. Other species, Amblyomma coelebs, Amblyomma cajennense, Amblyomma ovale, Amblyomma longirostre, Amblyomma calcaratum, and Amblyomma naponense were found sporadically. Among free-living ticks collected in the environment, A. cajennense was the most common followed by A. coelebs, A. naponense, Amblyomma brasilense and Haemaphysalis juxtakochi. From two individuals of A. nodosum ticks, rickettsiae were isolated in Vero cell culture and the isolates were molecularly characterized using the rickettsial genes gltA, htrA, and when possible also ompA and ompB. The first isolate was identified as Rickettsia bellii and the second isolate, was identified as R. parkeri. Among 174 A. nodosum tested, 41 (23.6%) were found to be infected by R. parkeri and 10 (5.7%) were infected with R. bellii strain Pontal. Bird diversity was higher in control and large areas, but various species of birds and also ticks responded in different way for fragmentation. A. nodosum parasitizing birds was more abundant in small patches, while A. cajennense found on birds and in the environment was more abundant in control and large areas. These differences of the occurrence of ticks could be related with the abundance of main vertebrate hosts, or environmental conditions such as temperature and humidity in sampled areas. This is a result of fragmentation of habitat and shows the lack of balance between the environment-host-parasite relationships.

O gênero Rickettsia compreende bactérias intracelulares obrigatórias e há por enquanto 22 espécies que, comprovadamente, são patogênicas ao homem. A transmissão da maioria das espécies de riquétsias está associada a carrapatos, mas também podem ser veiculadas por pulgas, piolhos e ácaros. O presente estudo teve por objetivos avaliar a infecção de Rickettsia parkeri em carrapatos da espécie Amblyomma triste (Acari: Ixodidae) e também avaliar a infecção de Rickettsia spp. em algumas espécies de Ornithonyssus Sambon (Acari: Macronyssidae). Foram obtidas fêmeas de A. triste de um cervo-do-pantanal (Blastocerus dichotomus) atropelado e as posturas testadas por PCR para o estabelecimento de uma colônia naturalmente infectada com R. parkeri (grupo infectado) e outra livre de infecção (grupo controle). Para avaliar a infecção de Rickettsia spp. em ácaros foram realizadas 15 campanhas de capturas de pequenos mamíferos terrestres nos estados de São Paulo e Paraná. Após anestesisa e escovação, os ácaros foram removidos dos hospedeiros e mantidos em nitrogênio líquido para a tentativa de isolamento através da técnica de shell vial. Foram estudadas quatro gerações de A. triste infectada e não infectada com R. parkeri. Os resultados revelaram que R. parkeri é moderadamente patogênica para A. triste e a fase do ciclo biológico do carrapato mais sucetível ao efeito deletério da bactéria é o estágio ninfal. Foram capturados 165 mamíferos silvestres das seguintes espécies: Akodon cursor, Akodon montensis, Didephis aurita, Euryzoryzomys russatus, Metachirus nudicaudatus, Monodelphis sp., Nectomys squamipes, Oecomys sp., Oligoryzomys sp, Oxymycterus sp., Sciurus aestuans and Thaptomys nigrita. Destes, somente 13 estavam infestados com três espécies de Ornithonyssus spp. Foi obtido um isolado de O. vitzthumi que parasitavam Oxymycterus sp., contudo não foi possível sua caracterização, pela não amplificação pelos marcadores clássicos para o gênero Rickettsia. / The genus Rickettsia comprises obligate intracellular bacteria and there are so far 22 species that are proven to be pathogenic to humans. The transmission of most species of rickettsiae is associated with ticks, but also can be transmitted by fleas, lice and mites. The present study aimed to evaluate the infection of Rickettsia parkeri in Amblyomma triste. (Acari: Ixodidae) and also to evaluate the infection of Rickettsia spp. in some species of Ornithonyssus spp. Sambon (Acari: Macronyssidae). A. triste females were obtained from a marsh deer (Blastocerus dichotomus). Through PCR on their offspring, it was established of a colony naturally infected with R. parkeri (infected group) and another colony uninfected (control group). To assess the infection of the Rickettsia spp. in mites, 15 capture campaigns of small terrestrial mammals were performed in the states of São Paulo and Paraná. After anesthesia and brushing, the mites were removed from hosts and kept in liquid nitrogen for isolation of rickettsiae using the shell vial technique. Four consecutive generations of A. triste were studied in the laboratory. The results showed that R. parkeri is moderately pathogenic to A. triste, especially to the nymphal stage. A total of 165 wild small mammals of the following species were captured: Akodon cursor, Akodon montensis, Didephis aurita, Euryzoryzomys russatus, Metachirus nudicaudatus, Monodelphis sp., Nectomys squamipes, Oecomys sp., Oligoryzomys sp, Oxymycterus sp., Sciurus aestuans and Thaptomys nigrita. Of these, only 13 were infested with three species of Ornithonyssus spp. A bacterial isolate was obtained from mites removed from a Oxymycterus sp. However, it was not possible the molecular characterization by classical markers for the genus Rickettsia.

Estudos recentes demonstraram a existência de Rickettsia felis, riquétsia do Grupo da Febre Maculosa, em sangue de pacientes com quadro clínico compatível com a doença e em pulgas infectadas. Este projeto visa determinar a prevalência de R. felis em vetores (pulgas e carrapatos) e em potenciais reservatórios (gambás, cães, gatos, eqüinos e humanos), procedentes de áreas endêmicas (Mogi das Cruzes, Pedreira, Piracicaba e São Paulo), e não endêmicas (Pirassununga) para FM no Estado de São Paulo. Foram utilizados métodos moleculares (reação em cadeia pela polimerase e sequenciamento de DNA), diagnóstico sorológico e cultivo celular. Em gambás capturados (Didelphis aurita e Didelphis albiventris) foram colhidas 312 pulgas, pertencentes às Famílias Pulicidae (141), Rhopalopsyllidae (170) e Ctenophthalmidae (1) e 709 carrapatos (Amblyomma spp e Ixodes loricatus). Nos cães foram colhidos 212 pulgas (Ctenocephalides felis felis) e 115 carrapatos (Amblyomma cajennense, Amblyomma aureolatum e Rhipicephalus sanguineus). Nos gatos foram colhidos 66 pulgas (59 C. felis felis e 7 Rhopalopsyllus lutzi lutzi) e 10 carrapatos (R. sanguineus e Amblyomma spp). A colheita de sangue foi realizada em 94 gambás, 55 cães, 25 gatos, 85 eqüinos e 238 humanos. Rickettsia felis foi detectada em 42-45,8% das pulgas C. felis felis de gambás, cães e gatos; em 4% das pulgas Polygenis (N) atopus de gambás e em 1,8% e 0,7% de carrapatos I. loricatus e Amblyomma spp, respectivamente, colhidos de gambás. Rickettsia bellii foi detectada em carrapatos I. loricatus (59,1%), A. dubitatum (8,7%) e Amblyomma spp (0,9%) e em uma pulga P. (N.) atopus (1%). Não foi possível a detecção de infecção por Rickettsia spp em sangue dos animais e humanos. Contudo, constatou-se presença anticorpos frente aos antígenos de Rickettsia rickettsii, Rickttesia parkeri, R. felis e R. bellii nas áreas estudadas. A titulação obtida sugere infecção por R. rickettsii em gambás, cães, eqüinos e humanos e por R. parkeri em gambás, cães e eqüinos. R. felis e R. bellii foram isoladas e cultivadas com a utilização de células C6/36 e VERO, respectivamente. / Recent studies have showed the presence of Rickettsia felis, a spotted fever group Rickettsiae, in human blood with clinical signs compatible with spotted fever and in infected fleas. This work aims to determine the prevalence of R. felis in potential vectors (fleas and ticks) and reservoirs (opossums, dogs, cats, equines and humans) from endemic (Mogi das Cruzes, Pedreira, Piracicaba e São Paulo), and non-endemic (Pirassununga) areas for spotted fever in the State of São Paulo. Molecular probes (polimerase chain reaction and DNA sequencing), serologic diagnoses and cell culture were used. From trapped opossums (Didelphis aurita and Didelphis albiventris) a total of 312 fleas, belonging to Family Pulicidae (141), Rhopalopsyllidae (170) and Ctenophthalmidae (1) and 709 ticks (Amblyomma spp and Ixodes loricatus) were collected. On dogs a total of 212 fleas (Ctenocephalides felis felis) and 115 ticks (Amblyomma cajennense, Amblyomma aureolatum and Rhipicephalus sanguineus) were collected. On cats, 66 fleas (59 C. felis felis and 7 Rhopalopsyllus lutzi lutzi) and 10 ticks (R. sanguineus and Amblyomma spp) were collected. Blood samples were collected from 94 opossums, 55 dogs, 25 cats, 85 equines and 238 humans. Rickettsia felis was detected in 42-45,8% of the C. felis felis collected on opossums, dogs and cats. This same Rickettsia species was detected in 4% of Polygenis (N.) atopus fleas, and 1,8% and 0,7% of I. loricatus and Amblyomma spp ticks, respectively, collected from opossums. Rickettsia bellii was found in ticks I. loricatus (59,1%), A. dubitatum (8,7%) and Amblyomma spp (0,9%) and in a flea P. (N.) atopus (1%). No Rickettsia DNA was detected in animal or human blood samples. However antibodies against Rickettsia rickettsii, Rickettsia parkeri, R. felis and R. bellii were detected in all locations. The titers suggest infection by R. rickettsii in opossums, dogs, equines and humans and by R. parkeri in opossums, dogs and equines. R. felis and R. bellii were isolated and cultivated with the C6/36 and VERO cells, respectively.

Em trabalho recente, foi encontrada a infecção de 9,7% da população de Amblyomma triste por Rickettsia parkeri, agente etiológico de riquetsiose humana, na várzea do Rio Paraná, no município de Paulicéia. Desta forma o presente trabalho busco a soroprevelência de anticorpos anti-R. parkeri em humanos, cavalos, cães e gambás; e a prevalência de infecção por R. parkeri em ectoparasitas e diferentes áreas do local. Os carrapatos adultos e ninfas coletados foram identificados com chaves específicas e as larvas por técnicas moleculares (PCR para gene 16S rRNA mitocondrial, seguido de sequenciamento). Também foi feito o teste de presença de DNA de Rickettsia. Amostras de soro sanguineo de cães, cavalos e humanos foram analisadas pela técnica de reação de imunoflurescência indireta, para a pesquisa de anticorpos anti-R. rickettsii, R. parkeri, R. bellii, R. amblyommii, R. riphicephalii e R. felis. De 1699 carrapatos coletados, a maioria (1511) foi Amblyomma. Cajennense. Os demais pertenciam às espécies A. coelebs (6), A. triste (2), A. dubitatum (114), Rhipicephalus (Boophilus) microplus (55), Dermacentor nitens (10) e Amblyomma rotundatum (1). Somente 2 ninfas da espécie A. coelebs estavam infectadas com Rickettsia, com sequências 99% de identidade para o gene ompA R. amblyommii. Dos soros de humanos coletados 25 foram negativos e somente um apresentou títulos &le;64 para R. parkeri e R. rickettsii. De 140 soros dos equinos, 24% apresentou anticorpos anti-Rickettsia, com títulos variando de 64 a 1024, sendo que nove amostras tinham títulos anti-R. parkeri pelo menos quatro vezes maior que os para demais espécies de Rickettsia, indicando a R. parkeri como provável antígeno homólogo. Em 55 amostras de cães 7,7% apresentaram anticorpos anti-Rickettsia, com títulos variando de 64 a 256. Para duas amostras a R. parkeri foi o provável antígeno homólogo. Analisando os questionários epidemiológicos dos eqüinos, juntamente com os resultados sorológicos, a regressão logística indicou associação estatisticamente significante entre a presença de anticorpos anti-Rickettsia com as varáveis independentes (i) acesso à várzea (ii) e tempo de residência na região, os quais podem ser considerados fatores de risco para rickettsiose na região estudada. Foram capturados quatro gambás (Didelphis albiventris) e todos tinham anticorpos para R. parkeri, R. rickettsii, R. amblyommii e R. rhipicephalii, porém sem variação de pelo menos quatro vezes entre os títulos. Os gambás estavam infestados com ninfas A. cajennense e A. coelebs, todas negativas para o PCR para Rickettsia. Em vista destes resultados pode-se dizer que os animais domésticos e os gambás estiveram em contato com bactérias do gênero Rickettsia na região estudada, onde a várzea parece ser a principal foco de carrapatos infectados. / In recent work, 9.7% of the Amblyomma triste of the marsh by the Paraná River in Paulicéia, State of São Paulo, was found infected with Rickettsia parkeri, the etiological agent of spotted fever rickettsiosis in humans. Based on this report, the present study aimed to determine soroprevelence of anti-R. parkeri antibodies in humans, horses, dogs and opossuns, and the prevalence of rickettsial infection in ectoparasites, in different areas of Paulicéia. While ticks were identified by using current morphological Keys for adults and nymphs, larva were identified to species by molecular methods (PCR targeting the mitochondrial 16S rRNA gene followed by DNA sequencing). Ticks were tested by PCR for the presence of Rickettsia DNA. Animal and human sera samples were tested by immunofluorescence assay (IFA) for the presence of antibodies reactive to R. rickettsii, R. parkeri, R. belli, R. amblyommii, R. riphicephalii and R. felis. From 1699 collected ticks, a vast marjority (1511) was Amblyomma. cajennense. The remaining were the especies A. coelebs (6), A. triste (2), A. dubitatum (114), Rhipicephalus (Boophilus) microplus (55), Dermacentor nitens (10) and Amblyomma rotundatum (1). Only two nymphs of A. coelebs were found infected by Rickettsia, yielding DNA sequences 99% identical to the gene ompA of R. amblyommii. 25 of human sera collected were negative, except for one for one that showed endpoint titer &le;64 to both R. parkeriand R. rickettsii. Among horses, 24% sera contained anti Rickettsia antibodies, with titles ranging from 64 to 1024, nine samples showed anti-R. parkeri titles at least four times higher than the remaining Rickettsia species, indicating that these animals had been infected by R. parkeri. For 55 dogs, 7.7% anti Rickettsia antibodies, with endpoint titles ranging from 64 to 256. For two canine serum R. parkeri was considered the possible agent responsible for the infection. Through statistical analyses of the serological results with independent variables, the presence of seropositive horses was significantly associated with (i) grazing in the marsh (ii) and being for more than 8.5 years in the region; these two independent variables were considered to be risk factors for rickettsiosis in the study region. A total of four opossums (Didelphis albiventris) were captured. All four had antibodies reactive to R. parkeri, R. rickettsia, R. amblyommii and R. rhipicephalii, however, with less than 4-fold differences between endpont titers to different Rickettsia species. Opossums were found infested by nymphs of A. cajennense and A. coelebs, all negative to Rickettsia by PCR. Based in these results, it is concluded that domestic animals and opossums had been in contact with Rickettsia of the spotted fever group in the study region, where the marsh area seems to be the main focus of Rickettsia-infected ticks

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-12-13T17:07:51Z No. of bitstreams: 1 ricardonunescardoso.pdf: 3871280 bytes, checksum: 8c2c523333135cba552e3b476ccddcc8 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-12-15T14:13:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ricardonunescardoso.pdf: 3871280 bytes, checksum: 8c2c523333135cba552e3b476ccddcc8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-15T14:13:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ricardonunescardoso.pdf: 3871280 bytes, checksum: 8c2c523333135cba552e3b476ccddcc8 (MD5) Previous issue date: 2007-02-28 / Amblyomma cajennense (Fabrícius, 1787) (Acari: Ixodidade) é um ectoparasito típico de eqüídeos, amplamente distribuído nas Américas do Sul e Central. O uso indiscriminado dos carrapaticidas tem levado as populações destes artrópodes a um grave quadro de resistência aos produtos fitossanitários. Além disso, o uso exclusivo de carrapaticida é pouco viável a longo prazo e em termos econômicos tornando-se necessário o emprego de métodos alternativos de controle. Os nematóides entomopatogênicos tem sido apontados como agentes promissores no controle de carrapatos, entretanto como é pequeno o número de estudos a esse respeito objetivou-se avaliar o potencial de Steinernema glaseri (Steiner, 1929) isolado Santa Rosa como agente de controle biológico do carrapato Amblyomma cajennense. O experimento foi realizado no Laboratório de Parasitologia, Embrapa Gado de Leite, Juiz de Fora – MG, no período de outubro de 2005 e janeiro de 2006. Avaliou-se o potencial de S. glaseri nas concentrações de 0, 156, 325, 675, 1250, 2500, 5000 e 10000 juvenis infectantes (JI) por unidade experimental (UE). Cada um desses tratamentos foi composto por 10 unidades experimentais que foram montadas com placas de Petri contendo areia autoclavada, 4ml de água destilada e 10 ninfas, num total de 100 espécimes por tratamento. As placas de Petri foram fechadas com parafilme e mantidas em estufa climatizada do tipo B.O.D (27±1ºC e U.R>80%) por 72 horas. Após este período as ninfas ingurgitadas de A. cajennense foram lavadas com água destilada e transferidas para placas de Petri limpas observadas a cada 24±1 hora durante 20 dias, a fim de se observar as alterações nos parâmetros biológicos, tais como: Período de ecdise (PE), Período de pré-ecdise (PPE), Percentual de ecdise (%Ec) e Período de muda (PM). Cada parâmetro foi analisado em relação aos adultos, englobando machos e fêmeas e também para cada um dos sexos isoladamente por unidade experimental. Para x iii análise dos dados foi utilizado o Software Graphpad Instat Versão 2.05 com Análise de Variância, Teste de Tukey-Kramer, Kruskal-Wallis e Dunn’s (p 0.05). No tratamento com 5000 JI/UE ocorreu redução significativa no PPE total, assim como PM, em relação ao controle e considerando-se apenas os machos, o PM também sofreu redução significativa. No tratamento com 10000 JI/UE houve um aumento significativo do PPE total e o PE total foi reduzido significativamente neste tratamento, em relação ao controle. O período de ecdise dos machos apresentou um aumento significativo em quatro dos oito tratamentos (tratamentos com 156, 612, 2500 e 5000 JI). A mortalidade, assim como a redução do percentual de ecdise só foi significativa no tratamento com 10000 JI /UE. Mesmo sem abertura genital nas ninfas de A. cajennense, S. glaseri foi capaz de exercer ação deletéria em concentrações superiores a 5000 JI /UE. As doses de 5000 e 10000 JI /UE foram deletérias a determinados processos da fase não parasitária de A. cajennense. Entretanto novos estudos são necessários, ainda in vitro, com doses superiores a 10000 JI /EU, a fim de se confirmar o potencial entomopatogênico de A. cajennense sobre populações de S. glaseri. / Amblyomma cajennense (Fabrícius, 1787) (Acari: Ixodidade) is an ectoparasitic kind of horse, widely distributed in south and central America. The indiscriminate use of acaricidal has taken this animals population to a critical resistence situation to drugs and the exclusive use of acaricidal is just viable in pratical and economical terms became necessary the job of alternative control method. The nematodes entomopathogenic has bem indicated as sucessiful agents to control ticks, however is short the number of the studies about that, the target is analyse the potential os Steinernema glaseri strain Santa Rosa as biological agent control of A. cajennense. The experiment was made in the EMBRAPA GADO DE LEITE, Parasitology Laboratory – Juiz de Fora (MG), between october of 2005 and january of 2006. Has ben tested differents concentrations of S. glaseri (0, 156, 325, 650, 1250, 2500, 5000 e 10000 infectives juveniles (IJ) per tested unity (UT). Each one of this treatment was composed per 10 tested unitys crated with Petri dish sterilized, 4 ml of destil water and 10 nynphs in na total of 100 types for treatament. The Petri dish was closed with parafil and keeped in a humid chamber kind of BOD (27±1ºC and RH>80%) per 72 hours. After that period the engorged nynphs of A. cajennense was washed with destil water and removed to a Petri dish without sand or IJ and observed by each 24±1 hour during 20 days, with the objetive to observe wich alterations in a parametres biological such as: ecdysis period (EP), pre-ecdysis period (PEP), ecdysis percentual (%Ec), and mouthing period (MP). Each parametres was analysed about adults connections, comprising male and female ande for each one of the sex separating by tested unitys as will. The statistic data treatment was maked with Variance Analyse, Tukey- Kramer Test, Kruskal-Wallis and Dunn’s (p 0.05) On the treatment with 5000 IJ/UT happens the significant reduction of PEP totally, such as MP, in connections with control and xv considerating only the males. The MP had soffer the significant reduction too. On the treatment with 10000 IJ/UT had a significant increase of PEP totally and the EP totally was reduced highly expressive in this treatment by connection with control. The male ecdysis period had present a significant increase in four of the seven treatments (treatmments with 156, 612, 2500 and 5000 IJ). The mortality such as the percentual reduction of ecdysis just was significant on the treatment with 10000 IJ/UT. Until without genital hole of A. cajennense nynphs, S. glaseri was able to make the deleterious action in concentration up 5000 IJ/UT. The treatment of 5000 and 10000IJ/UT was deleterious by determined process of no parasitary phase of A. cajennense. However new studyies are necessary, in vitro yet, with superior doses than 10000 IJ/UT, due to confirm the entomopathogenic potential of A. cajennense under de S. glaseri population.

Submitted by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2016-09-12T19:59:58Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Andreisa Prieb - 2015.pdf: 1433488 bytes, checksum: 0b16c552ef408a220fc72781528cf757 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2016-09-12T20:00:10Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Andreisa Prieb - 2015.pdf: 1433488 bytes, checksum: 0b16c552ef408a220fc72781528cf757 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-12T20:00:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Andreisa Prieb - 2015.pdf: 1433488 bytes, checksum: 0b16c552ef408a220fc72781528cf757 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-07-10 / Rhipicephalus microplus is one of the main parasites found in Brazilian cattle herds; it is vector of pathogens causing severe economic losses. Currently, the control of R. microplus is conducted almost exclusively by the use of chemical products applied to parasitized hosts; however, the continued use of these products may lead ticks to resistance, and human health to damage. New methods for tick control that causes low damage to humans and to the environment are required; therefore, the use of entomopathogenic fungi has been investigated for biological control purposes, and the fungus Metarhizium has shown efficacy against R. microplus. The current study investigated the the efficacy of M. anisopliae and M. robertsii to control the non-parasitic phase of R. microplus. Bioassays were conducted in Petri dishes containing 5 g of sterile soil and 0.003 g of granules of formulated fungi spread evenly over the soil surface. One engorged female was placed in each plate for evaluation of their biology. The mean number of hatched larvae obtained from groups of females treated with granules of the isolate CG 632 was 604, while 385 larvae were obtained from the groups treated with granules of CG 168, and 87 from groups treated with CG 47; in the control groups, 2,896 larvae hatched. The mean oviposition period of females treated with granules of CG 168 or CG 632 was, respectively, 2.8 and 0.9 days, while in the control groups the mean oviposition period was 14.2 days. The statistical analysis revealed that both the oviposition period of engorged females and the number of hatched larvae showed significance at 1% of probability (P<0.01). The current study revelaed that the fungal isolates tested, M. anisopliae and M. robertsii, formulated in granules were able to reduce progeny of R. microplus under controlled conditions, suggesting their potential to control the non-parasitic phase of the R. microplus tick. / Rhipicephalus microplus é um dos principais parasitos presentes no rebanho bovino brasileiro; é transmissor de agentes patogênicos causadores de doenças como anaplasmose e babesiose, e causador de sérios prejuízos financeiros. Atualmente, o controle de R. microplus é realizado quase que exclusivamente por produtos químicos empregados na fase parasitária; no entanto, a sua utilização contínua pode causar resistência desses parasitos e danos à saúde humana. Desse modo, é necessário descobrir novos meios capazes de realizar o controle dos carrapatos sem causar danos ao ser humano e ao ambiente. A utilização de fungos entomopatogênicos vem sendo estudada para fins de controle biológico e os fungos do gênero Metarhizium vêm mostrando eficácia contra R. microplus. O presente estudo teve o objetivo de investigar o controle da fase não parasitária de R. microplus com os fungos entomopatogênicos: M. anisopliae (CG 47 e CG 168 ) e M. robertsii (CG632). Ensaios foram conduzidos utilizando-se placas de Petri com 5 g de latossolo vermelho estéril e 0,003 g de grânulos fúngicos dos respectivos isolados espalhados de forma homogênea sobre a superfície do solo. Uma fêmea ingurgitada foi colocada em cada placa (10 Placas para cada isolado e 10 placas para o controle de cada isolado) para avaliação de seus parâmetros biológicos. O período de postura das fêmeas tratadas com os isolados CG 168 e CG 47 foi 2,8 e 0,9 dias, enquanto no grupo controle o período de postura foi 14,2 dias. O número médio de larvas recuperadas foi 604 nos grupos tratados com grânulos formulados com o isolado CG 632, enquanto 385 larvas foram recuperadas nos grupos tratados com CG 168, e 87 nos grupos tratados com CG 47; no grupo controle foi observada eclosão média de 2.896 larvas. Houve diferença significativa entre o número médio de larvas eclodidas e o período médio de postura das fêmeas submetidas aos diferentes tratamentos. A análise estatística revelou que tanto o período médio de postura das fêmeas quanto o número de larvas eclodidas, apresentou significância ao nível 1% de probabilidade (P<0,01). O presente estudo permitiu concluir que os isolados testados de M. anisopliae e M. robertsii, formulados em grânulos, foram capazes de reduzir a progênie de R. microplus em condições controladas, sugerindo assim seu potencial para controle da fase não parasitária desse carrapato.