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Ocorrência e fatores de risco associados à infecção por Toxoplasma gondii em coelhos domésticos no Estado de Pernambuco, BrasilLIMA, Débora Costa Viegas de 10 June 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-06-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / This research aimed to detect the occurrence of IgG antibodies against T. gondii in rabbits, identify risk factors associated with T. gondii infection and detect T. gondii DNA in rabbit organs. Blood samples from 150 rabbits and tissue fragments (brain, heart and diaphragm) from 54 rabbits were collected in the state of Pernambuco. Data obtained in questionnaires were submitted to analysis of risk factors. The serum samples were submited to serological test (MAT) and the tissue samples to molecular (PCR) and histopathology tests. Results indicated the presence of antibodies against T. gondii in 6.7% (10/150) of the rabbits and T. gondii DNA in 9.25% (5/54). On histopathology were detected lesions associated with T. gondii mainly characterized by granuloma, mononuclear cell infiltrates, areas of degeneration and necrosis in brain and heart. This is the first study of Toxoplasma gondii detection in naturally infected rabbits in northeastern. The identified risk factors were: feeding based on raw vegetables (Odds ratio: 39.00) and contact between cats and rabbits (Odds ratio: 52.00); being this detection relevant to the implementation of effective preventive measures against toxoplasmosis and its prevalence in these and in other species. The detection of T. gondii in rabbits demonstrates the importance of the infection risk and maintenance of this agent in these animals and in the environment, beeing a public health risk. / Objetivou-se com essa pesquisa detectar a ocorrência de anticorpos IgG contra T. gondii em coelhos, identificar os fatores de risco associados à infecção por T. gondii e detectar o DNA de T. gondii em órgãos de coelhos. Foram coletadas amostras de sangue de 150 coelhos e fragmentos de cérebro, coração e diafragma de 54 coelhos no estado de Pernambuco. Os dados obtidos em questionários foram submetidos à análise dos fatores de risco. As amostras de soro foram submetidas a teste sorológico (MAT) e as amostras de tecido aos exames molecular (PCR) e histopatológico. Foi evidenciada a presença de anticorpos contra T. gondii em 6,7% (10/150) dos coelhos e DNA de T. gondii em 9,25% (5/54). Na histopatologia foram detectadas lesões teciduais associadas a T. gondii caracterizadas principalmente por granuloma, infiltrado inflamatório mononuclear, áreas de degeneração e necrose em cérebro e coração. Este é o primeiro estudo sobre a detecção de Toxoplasma gondii em coelhos naturalmente infectados na região Nordeste do Brasil. Os fatores de risco identificados foram: alimentação a base de vegetais crus (Odds ratio: 39,00) e contato entre gatos e coelhos (Odds ratio: 52,00); sendo esta detecção relevante na implementação de medidas preventivas eficazes contra a Toxoplasmose e sua prevalência nessas e em outras espécies. A detecção de T. gondii em coelhos demonstra a importância do risco da infecção e manutenção deste agente nesses animais e no ambiente, sendo um risco para a Saúde Pública.
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Infecção por Toxoplasma gondii em animais na Ilha de Fernando de Noronha, Brasil : prevalência, distribuição espacial e fatores de riscoMAGALHÃES, Fernando Jorge Rodrigues 26 February 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This study analyzed a total of 1,863 serum samples from cats (domestic and feral), dogs, sheep, cattle, pigs, chickens and horses from Fernando de Noronha, Pernambuco-Brazil, to study the prevalence and spatial distribution of Toxoplasma gondii, and identify risk factors for some species. Indirect immunofluorescence test was performed by using cutoff 1:64 for pigs, sheep, cattle, horses and 1:16 to chickens, dogs and cats. To identify risk factors associated with infection by T. gondii was used univariate analysis and logistic regression for sheep, cattle and chickens. The spatial distribution of infection by this parasite was obtained by intensity Kernel estimator. Of all the animals sampled, 63.5% (1,183/1,863) were positive with titles ranging 16 to 1024 with high prevalence rates for chickens (88.4%), sheep (85.0%), cats domestic (71.26%), feral cats (54.74%) and dogs (48.75%). T. gondii infection is widespread in animals from Archipelago with high prevalence of infection observed in the definitive host (cats), also identified as a risk factor for some species studied. The results indicate to the urgent need for health intervention to strengthen the strategic and integrated measures to prevent and control this disease to prevent infection in animals and humans on this island. / Nesse estudo foram analisadas um total de 1.863 amostras de soro de felinos (domésticos e ferais), caninos, ovinos, bovinos, suínos, galinhas e equinos criados no arquipélago de Fernando de Noronha, Pernambuco para estudar a prevalência e distribuição espacial da infecção por Toxoplasma gondii, além de identificar os fatores de risco para algumas espécies de produção. A pesquisa de anticorpos IgG anti-T. gondii foi realizada pela reação de Imunofluorescência indireta (RIFI), utilizando-se ponto de corte 1:64 para os suínos, ovinos, bovinos, equinos e 1:16 para galinhas, cães e gatos. Para identificar os fatores de risco associados à infecção por T. gondii foi empregada a análise univariada e regressão logística para ovinos, bovino e galinhas. A distribuição espacial da infecção por este protozoário foi obtida por meio do estimador de intensidade de Kernel. Do total dos animais amostrados, 63,5% (1.183/1.863) foram positivos com títulos que variaram de 16 a 1024 com destaque para as elevadas prevalências obtidas para galinhas (88,4%), ovinos (85,0%), bovinos (10,7%), gatos domésticos (71,26%), gatos ferais (60,74%), cães (48,75%), suínos (51,85%) e equinos (22,7%). A infecção por T. gondii está disseminada nos animais do Arquipélago com focos distribuídos por toda a ilha, resultado da alta prevalência da infecção observada no hospedeiro definitivo (felinos), também identificado como fator de risco para algumas espécies estudadas. Os resultados sinalizam para a necessidade urgente de intervenção sanitária para reforçar as medidas estratégicas e integradas na prevenção e controle dessa enfermidade para prevenir a infecção em animais e humanos desta ilha.
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Situação epidemiológica das infecções por Brucella spp., Leptospira spp. e Toxoplasma gondii em equídeos na microrregião do brejo paraibanoOLIVEIRA FILHO, Ruy Brayner de 27 November 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-11-27 / The objective of this study was to characterize the epidemiological situation of infection by Brucella spp., Leptospira spp. and Toxoplasma gondii in equids in Brejo Paraibano microregion, Northeastern Brazil. Antibodies against these agents were investigated in 257 samples from equids (204 horses, 46 mules and seven donkeys) in 26 properties. For serological diagnosis of infection by Brucella spp., Rose Bengal Test (RBT) was used. For serological diagnosis of Leptospira spp. Infection, it was used the Microscopic Agglutination Test (MAT), using 24 pathogenic serovars of Leptospira spp. as antigens, and a cut-off of 1:100. For serological diagnosis of infection by T. gondii, it was used the Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) and a cut-off of 1:64. Regarding Brucella spp., no sample was positive in RBT. The number of foci of infection by Leptospira spp. found was 76.9%. The prevalence of infection for Leptospira spp. was 15.9% (C.I. 11.7-21.0). The number of foci of infection by T. gondii was found to be 46.1%. In the samples analyzed, the overall prevalence of infection by T. gondii was 7.8% (C.I. 4.8-8.8). Regarding species, it was observed a prevalence of Leptospira spp. infection of 16.2% (horses), 13.0% (mules) and 28.6% (donkeys). The prevalence of infection by T. gondii was 8.3% (C.I. 4.9-13.0) for horses, 2.2% (C.I. 0.1-11.5) for mules and 28.6% (C.I. 3.7-71.0) among donkeys. Regarding infection for Leptospira spp., age was identified as a protective factor, where animals aged between 2.5 and 11 years had a risk of infection 0.4 times lower than those with less than 2.5 years (OR 0.4; C.I. 0.18-0.90). In relation to T. gondii, in logistic regression of variables, it was observed that the water source was a risk factor, because in those properties that supplied running water to the animals the risk of infection was 4.4 times higher than in those properties that provided standing water (OR 4.4; C.I. 1.0-19.0). This is the first epidemiological study in Brejo Paraibano microregion that analyzed infections by Brucella spp., Leptospira spp. and T. gondii in equids. To reduce the risk of infection, good quality water should be given to the animals, as well as access of cats, rodents and other animals to water sources and facilities where animals are kept must be avoided. Based on the results, it is concluded that the animals are exposed to sources of infection of Leptospira spp. and T. gondii, and a high number of outbreaks has been found widely distributed in the microregion. Health care should be reinforced especially in properties with more animals. / Objetivou-se com este estudo caracterizar a situação epidemiológica das infecções por Brucella spp., Leptospira spp. e Toxoplasma gondii em equídeos na microrregião do Brejo Paraibano, região Nordeste do Brasil. Anticorpos contra esses agentes foram pesquisados em 257 amostras de equídeos (204 equinos, 46 muares e sete asininos) em 26 propriedades. Para o diagnóstico sorológico da infecção por Brucella spp., utilizou-se o teste do Antígeno Acidificado Tamponado (AAT). Para o diagnóstico sorológico da infecção por Leptospira spp., utilizou-se a Soroaglutinação Microscópica (SAM), empregando 24 sorovares patogênicos de Leptospira spp. como antígenos, e um ponto de corte de 1:100. Para o diagnóstico sorológico da infecção por T. gondii utilizou-se a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e um ponto de corte de 1:64. Em relação à Brucella spp., nenhuma amostra foi reagente ao AAT. O número de focos da infecção por Leptospira spp. encontrado foi de 76,9%. A prevalência da infecção para Leptospira spp. foi de 15,9% (I.C. 11,7 - 1,0). O número de focos da infecção por T. gondii encontrado foi de 46,1%. Nas amostras analisadas, a prevalência geral da infecção por T. gondii foi de 7,8% (I.C. 4,8 - 8,8). Em relação às espécies observou-se uma prevalência da infecção por Leptospira spp. de 16,2% (equinos), 13,0% (muares) e 28,6% (asininos). A prevalência da infecção por T. gondii foi de 8,3% (I.C. 4,9 - 13,0) para os equinos, 2,2% (I.C. 0,1 - 11,5) para os muares e 28,6% (I.C. 3,7 - 71,0) entre os asininos. Em relação à infecção para Leptospira spp., na análise dos fatores de risco pela regressão logística identificou-se como fator de proteção a variável idade, onde os animais com idade entre 2,5 e 11 anos tiveram risco de infecção 0,4 vezes menor do que aqueles com menos de 2,5 anos (OR 0,4; I.C. 0,18 - 0,90). Em relação à infecção por T. gondii, na regressão logística das variáveis observou-se que a fonte de água foi um fator de risco, pois naquelas propriedades que forneciam água corrente para os animais o risco de infecção foi 4,4 vezes maior do que naquelas propriedades que forneciam água parada (OR 4,4; I.C. 1,0 - 19,0). Este é o primeiro estudo epidemiológico na microrregião do Brejo Paraibano a analisar as infecções por Brucella spp., Leptospira spp. e T. gondii em equídeos. Para diminuir os riscos de infecção, deve-se fornecer aos animais uma água de boa qualidade, bem como evitar acesso de gatos, roedores e outros animais a fontes de água e instalações onde os animais são mantidos. Com base nos resultados obtidos, conclui-se que os animais estão expostos a fontes de infecção de Leptospira spp. e T. gondii, sendo encontrado um elevado número de focos o que indica uma ampla distribuição na microrregião. Os cuidados sanitários devem ser reforçados, principalmente em propriedades com maior quantidade de animais.
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Aspectos clínicos, epidemiológicos e reprodutivos da infecção natural e experimental em ovinos por Toxoplasma gondiiMORAES, Érica Paes Barreto Xavier de 24 February 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The aim of the present study was to evaluate the clinical, epidemiological, parasitological and reproductive aspects of the T. gondii natural and experimental infection in sheep. Firstly, Toxoplasma gondii venereal transmission via experimental infection was studied 41 seronegative sheep divided in three groups: G1, where 15 females were inseminated with semen containing 6.5 X 104 tachyzoites; G2, where 15 females were inseminated with semen containing 4 X 107 tachyzoites; and G3: 11 females inseminated with tachyzoite-free semen. In order to confirm the T. gondii infection via semen, serological tests were performed as well as the DNA of the parasite was detected in the blood using nested PCR at 0, 7, 14, 21, 28, 49,63 and 123 days post-infection (p.i.). In the G1 only 5/15 (33.3%) of the females seroconverted, while in G2 15/15 (100%)seroconverted. Regarding nested PCR analysis, it was observed that 14/15 (93.3%) of the females in the G1 and 14/15 (93.3%) from G2 were positives for T. gondii. On the other hand, in G3 all samples were negative. In addition, the reproductive disturbances were diagnosed using ultrasound and it was observed that in G1,9/15 (60%) presented embryonic reabsorption and 40% kept gestation, showing normal or dystocic delivery, stillborns and uterine atony. In the G2, embryonic reabsorption was present in 15/15 (100%) of the sheep associated with other pathologies such as 2/24 (8.3%) hydrometra, 2/24 (8.3%) mucometra and 2/24(8.3%) follicular cysts. In the G3, 8/11 of females kept gestation and delivered healthy fetuses. Besides, histopathology showed toxoplasmosis-like lesions in placentas as well as nested PCR was positive for all organs from stillborn and placenta examined. In the next step of the study, 24 non-pregnant sheep (G1 and G2) were submitted to controlled mating season and 15/24 (62.5%) got pregnant while 9/24(37.5%) did not. Those who did not get pregnant presented reproductive pathologies such as anestrous (66.6%), follicular cysts (11.1%), hydrometra and mucometra (22.2%). Next, it was investigated the elimination of Toxoplasma gondii in semen from naturally infected males. In this regard, 65 males were submitted to anti-T. gondii antibody screening using Indirect Immunofluorescence (IFI). Animals serologically positive were submitted to semen collection for parasite DNA detection. In the serological test 6/65 (9.2%) of the animals were positive. In the nested PCR using semen 4/6 (66.6%) of the animals were also positive. In the third series of experiments, 245 organs from stillborns and 28 placentas from sheep with reproductive disturbances were evaluated. Following necropsy, brain, cerebellum, spinal cord, lungs, heart, spleen, liver and placenta were harvest for nested PCR and histopathology. Nested PCR confirmed three fetuses and 2 stillborns (14.3%) positive for T. gondii in fetal organs and placenta, where heart and placenta were the most affected ones. Histopathology evidenced macroscopic damage suggesting T. gondii infection in 2/35 (5.7%) of the placentas, and toxoplasmosis-like damage in placentas with non-supurative infiltration, several necrosis focuses associated to tissue cysts. In conclusion, insemination using fresh semen experimentally contaminated with different doses of tachyzoites from T. gondii is capable of infecting sheep and produce reproductive pathologies, compromising the reproductive life of females. The detection of the proliferative form of the parasite in semen from males naturally infected by nested PCR reinforces the need for intensifying studies about the possibility ofhorizontal transmission of the parasite via semen in sheep. In addition, we reported the involvement of T. gondii in aborted fetuses and placentas of sheep naturally infected in Brazil; these data have not been described earlier in the literature. / Objetivou-se com este trabalho, estudar os aspectos clínicos, epidemiológicos, patológicos e reprodutivos da infecção natural e experimental por Toxoplasma gondii em ovinos. No primeiro, estudou-se a transmissão venérea do T. gondii através da infecção experimental via sêmen em 41 ovelhas soronegativas e divididas em três grupos: G1: 15 fêmeas inseminadas com sêmen contaminado com 6,5 X 104 taquizoítos; G2: 15 com 4 X 107 taquizoítos e G3: 11 fêmeas inseminadas com sêmen sem taquizoítos. Para a confirmação da infecção pelo T. gondii foram realizados exames sorológicos e detecção do DNA parasitário no sangue, através do PCR nested aos 0, 7, 14, 21, 28, 49, 63, 123 dias pós infecção (p.i.). No G1 apenas 5/15 (33,3%) fêmeas soroconverteram, enquanto que no G2 15/15 (100%) soroconverteram. Na PCR nested observou-se que 14/15 (93,3%) das fêmeas do G1 e 14/15 (93,3%) do G2 foram positivas para T. gondii e no G3 todas as amostras foram negativas. Os transtornos reprodutivos foram diagnosticados através de exames ultra-sonográficos e observou-se que no G1, 9/15 (60%) apresentaram reabsorção embrionária e 40% delas mantiveram a gestação, observando-se partos normais e distócicos, natimortos e atonia uterina. No G2 observaram-se reabsorções embrionárias em 15/15 (100%) das ovelhas e outras patologias como 2/24 (8,3%) hidrometra, 2/24 (8,3%) mucometra e 2/24(8,3%) cistos foliculares. No G3, 8/11 fêmeas gestaram e pariram fetos viáveis. No exame histopatológico observaram-se lesões características da toxoplasmose em placentas e PCR nested positiva em todos os órgãos dos natimortos e placentas examinados. Em uma próxima etapa do estudo, as 24 ovelhas não gestantes (G1 e G2) foram submetidas à estação de monta controlada e destas 15/24 (62,5%) emprenharam. Aquelas que não emprenharam apresentaram patologias reprodutivas como:anestro (66,6%), cistos foliculares (11,1%), hidrometra e mucometra (22,2%). No segundo experimento pesquisou-se a eliminação de T. gondii no sêmen de reprodutores ovinos naturalmente infectados. Foram utilizados 65 reprodutores submetidos inicialmente à pesquisa de anticorpos anti-T. gondii por meio da técnica de Imunofluorescência Indireta (IFI). Os animais sorologicamente positivos foram submetidos à colheita de sêmen para detecção do DNA parasitário. Na sorologia observaram-se 6/65 (9,2%) animais positivos. No PCR nested de sêmen 4/6 (66,6%) animais foram positivos. No terceiro experimento foram examinados 245 órgãos de fetos abortados e natimortos, além de 28 placentas procedentes de ovelhas com distúrbios reprodutivos. À necropsia foram coletados fragmentos de cérebro, cerebelo, medula, pulmão, coração, baço, fígado e placenta para realização do PCR nested e exame histopatológico. Na PCR nested foram confirmados três fetos e dois natimortos (14,3%) positivos para T. gondii em órgãos fetais e placentas, destacando-se o coração e a placenta como órgão de predileção. No exame histopatológico foram observadas lesões macroscópicas sugestivas da infecção por T. gondii em 2/35 (5,7%) das placentas, além de lesões características da toxoplasmose nas placentas como infiltração não supurativa, múltiplos focos de necrose e mineralização, além da presença de cistos teciduais. A partir dos resultados obtidos, conclui-se que a inseminação utilizando sêmen fresco experimentalmente contaminado com diferentes doses de taquizoítos de T. gondii é capaz de infectar ovelhas e provocar patologias reprodutivas, comprometendo a vida reprodutiva das fêmeas. A detecçãoda forma proliferativa do parasito no sêmen de reprodutores naturalmente infectados por meio da técnica da PCR nested, reforça a necessidade de intensificar os estudos sobre a possibilidade da transmissão horizontal do parasito via sêmen na espécie ovina. Além disso, constatou-se envolvimento de T. gondii em fetos abortados e em placentas de ovinos naturalmente infectados no Brasil; esses dados não haviam sido descritos anteriormente na literatura.
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Ocorrência de anticorpos anti-Leptospira spp., anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum em carnívoros selvagens e domésticos de Unidades de Conservação de PernambucoCUNHA, Ricardo César de Souza Carneiro da 28 February 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-02-28 / The study and the knowledge about zoonosis in geographic area are necessary to implement measures of health education and surveillance. Zoonosis such as leptospirosis and toxoplasmosis the role of wild carnivores as reservoirs is important, because carnivores can spread zoonotic agents in environment. The objective in this research was to determine the occurrence of antibodies anti-Leptospira spp., anti-Toxoplasma gondii, and anti-Neospora caninum in domestic and wild carnivores from Conservation Units of Pernambuco State - Brazil. Between August 2010 to October 2011, traps to capture wild carnivores in five Conservation Units: ―72º Batalhão de Infantaria Motorizado in Petrolina, ―Estação Ecológica do Tapacurá in São Lourenço da Mata, ―Parque Estadual Dois Irmãos in Recife, ―Reserva Ecológica Mata do Curado in Recife, and ―Estação Ecológica de Caetés in Paulista. In addition, the wild carnivores from ―Centro de Triagem de Animais Silvestres from ―Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis and the zoos of Pernambuco were included in study. A total of 210 blood samples were collected from 46 wild carnivores, 18 crab-eating foxes (Cerdocyon thous), three oncillas (Leopardus tigrinus), three ocelots (Leopardus pardalis), three jaguars (Panthera onca), one jaguarundi (Puma yaguaroundi), 12 coatis (Nasua nasua), three raccoons (Procyon cancrivorus), two tayra (Eira barbara), one ferret (Galictis cuja) and 137 dogs and 27 cats from interior and surroundings Conservation Units. Antibodies anti-Leptospira spp., anti-T. gondii and anti-N. caninum were found in 17.4% (8/46), 52.2% (24/46) and 0% (0/46) of wild carnivores and 3.8% (2/53), 32.3% (53/164) and 14% (23/164) of domestic carnivores, respectively. The serovars most prevalents of Leptospira spp. were Butembo, Panama, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae e Castellonis. This study represented the first serological survey in free-living wild carnivores in Pernambuco and reported for the first time the occurrence of antibodies anti-Leptospira spp. and anti-T. gondii in free-living wild carnivores and anti-N. caninum antibodies in cats of Pernambuco. / O estudo e o conhecimento das zoonoses numa área geográfica torna-se de suma importância para implementação de medidas de educação e vigilância em saúde. Zoonoses como a leptospirose e a toxoplasmose, a participação de carnívoros selvagens como reservatórios possui grande importância, pois estes animais podem disseminar agentes zoonóticos no meio ambiente. Objetivou-se nesta pesquisa determinar a ocorrência de anticorpos anti-Leptospira spp., anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum em carnívoros selvagens e domésticos de Unidades de Conservação de Pernambuco. Para tanto, no período de agosto de 2010 a outubro de 2011 foram dispostas armadilhas para captura dos carnívoros em cinco Unidades de Conservação: 72º Batalhão de Infantaria Motorizado em Petrolina, Estação Ecológica do Tapacurá em São Lourenço da Mata, no Parque Estadual Dois Irmãos em Recife, na Reserva Ecológica Mata do Curado em Recife e na Estação Ecológica de Caetés em Paulista. Além disso, os carnívoros selvagens que foram encaminhados ao Centro de Triagem de Animais Silvestres do Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis e do acervo dos zoológicos de Pernambuco foram incluídos na pesquisa. No total, foram colhidas 210 amostras sanguíneas de 46 carnívoros selvagens, sendo: 18 cachorros-do-mato (Cerdocyon thous), três gatos-do-mato-pequeno (Leopardus tigrinus), três jaguatiricas (Leopardus pardalis), três onças-pintadas (Panthera onca), um gato-mourisco (Puma yaguaroundi), 12 quatis (Nasua nasua), três guaxinins (Procyon cancrivorus), dois papa-mel (Eira barbara), um furão-pequeno (Galictis cuja) e 137 cães e 27 gatos domésticos do interior e do entorno das Unidades de Conservação. Anticorpos anti-Leptospira spp., anti-T. gondii e anti-N. caninum foram encontrados respectivamente em 17,4% (8/46), 52,2% (24/46) e 0% (0/46) dos carnívoros selvagens e em 3,8% (2/53), 32,3% (53/164) e 14% (23/164) dos carnívoros domésticos. Os sorovares mais prováveis de Leptospira spp. foram Butembo, Panama, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae e Castellonis. Este trabalho representou o primeiro inquérito sorológico em carnívoros selvagens de vida livre em Pernambuco e relatou pela primeira vez a ocorrência de anticorpos anti-Leptospira spp. e anti-T. gondii em carnívoros selvagens em vida livre e anticorpos anti-N. caninum em gatos de Pernambuco.
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Transmissão venérea de Toxoplasma gondii em camundongos experimentalmente infectados com oocistos da cepa ME49SÁ, Sílvio Gomes de 23 February 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-02-23 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The objective of this study was to verify the venereal transmission of Toxoplasma gondii in mice experimentally infected with oocysts of the ME49 strain. The first experiment studied the presence and distribution of T. gondii in the reproduction organs of experimentally infected male mice, in the acute infection phase. Five experimental groups were formed (MG1, MG2, MG3, MG4 and CG-control), inoculated with 50, 100, 500 and 1000 oocysts, respectively. The proof of infection was carried out by an antibodies study and the presence of parasitic DNA in the blood, urine and reproductive tissues. Reproductive tissues were histologically evaluated for the study of suggestive lesions from the infection. Suggestive forms of T. gondii were observed in the urine at the 7th and 15th post-infection days. In the serology only one animal from the MG2 and all from MG3 and MG4 presented antibodies IgM and IgG. In the PCR-Nested, 80% of animals from MG1 and MG2 were positive in the DNA blood study and no animals from MG3 and MG4 were positive. None of the animals from the control group were positive in serology and molecular techniques. Of the males from the infected groups, 30% presented parasitic DNA in the prostate, 40% in the testicle and epididymis and 60% in the seminal vesicle. In the histopathology, testicular degeneration, focal mononuclear infiltration and more accentuated olygospermia were observed in the animals from MG3 and MG4, but not in the CG. The second experiment was carried out with the objective of studying the venereal transmission of T. gondii and the reproductive disturbances in female mice divided in four groups and mated with experimentally infected males between the 2nd and 14th post-infection days. The infection was proven by using the serology and molecular techniques. Histopathology was carried out in reproductive tissues of males (prostate, seminal vesicle, testicles and epididymis) and females (uterus and ovaries). One hundred percent of males presented parasitic DNA in tissues of the reproductive organ or in the blood. However, only one male inoculated with 100 oocysts and 10 inoculated with 500 and 1000 oocysts soroconverted, respectively. Reproductive problems were also observed in mated females, however, they did not present antibodies anti-T. gondii and 75% of them (23/40) were positive in the PCR-Nested. The results obtained in this study conclude that the venereal transmission of the parasite occurs in mice experimentally infected with the ME49 strain in the doses used. / Objetivou-se com este trabalho estudar a transmissão venérea de Toxoplasma gondii em camundongos experimentalmente infectados com oocistos da cepa ME49. No primeiro experimento estudou-se a presença e distribuição de T. gondii no aparelho reprodutor de camundongos machos experimentalmente infectados na fase aguda da infecção. Foram formados cinco grupos experimentais (GM1, GM2, GM3, GM4 e GC - controle), inoculados com 50, 100, 500 e 1000 oocistos, respectivamente. A comprovação da infecção foi feita por meio da pesquisa de anticorpos e presença de DNA parasitário em sangue, urina e tecidos reprodutivos. Tecidos reprodutivos foram histologicamente avaliados para a pesquisa de lesões sugestivas da infecção. Formas sugestivas de T. gondii foram observadas na urina aos 7° e 15° dias pós-infecção. Na sorologia apenas um animal do GM2 e todos do GM3 e GM4 apresentaram anticorpos IgM e IgG. Na PCR-Nested, 80% dos animais do GM1 e GM2 foram positivos para pesquisa de DNA no sangue e nenhum animal do GM3 e GM4 foi positivo. Nenhum animal do grupo controle foi positivo na sorologia e técnicas moleculares. Dos machos dos grupos infectados, 30% apresentaram DNA parasitário na próstata, 40% no testículo e epidídimo e 60% na vesícula seminal. Na histopatologia observou-se degeneração testicular, infiltrado mononuclear focal e oligospermia mais acentuada nos animais do GM3 e GM4 e não observadas no GC. O segundo experimento foi realizado com o objetivo principal de estudar a transmissão venérea de T. gondii e os distúrbios reprodutivos em camundongas divididas em quatro grupos e acasaladas com machos experimentalmente infectados entre o 2° e 14° dias pósinfecção. A infecção foi comprovada por meio da sorologia e técnicas moleculares. Histopatologia foi realizada em tecidos reprodutivos de machos (próstata, vesícula seminal, testículos e epidídimos) e fêmeas (útero e ovários). Cem por cento dos machos apresentaram DNA parasitário em tecidos do aparelho reprodutor ou no sangue, mas apenas um macho inoculado com 100 oocistos e dez inoculados com 500 e 1000 oocistos soro converteram, respectivamente. Transtornos reprodutivos também foram observados nas fêmeas acasaladas, contudo essas não apresentaram anticorpos anti-T. gondii e 75% delas (23/40) foram positivas na PCR-Nested. Os resultados obtidos nesse estudo permitem concluir que a transmissão venérea do parasita ocorre em camundongos experimentalmente infectados com a cepa ME49 nas doses utilizadas.
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Isolamento e caracterização biológica e genotípica de Toxoplasma gondii de aves e mamíferos silvestres de Pernambuco, BrasilSILVA, Marcio André da 29 February 2016 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-03-01T13:35:46Z
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Previous issue date: 2016-02-29 / Toxoplasma gondii is a wide world distribution parasite and has a clonal population structure.
Recent studies have shown greater genetic variability of this protozoan in Brazil in domestic
and wild animals, needing more research with this last group. The aim of this study was to
isolate and make genotypic characterization of Toxoplasma gondii in tissues of naturally
infected wild mammals and birds, from free ranging and captivity at Pernambuco, and verify
antibodies occurrence against this parasite in samples were sera was obtained. From 2014
March to 2015 September, 233 biological samples were collected from 113 birds and 120
mammals. Considering origin, 77 animals were from free ranging and 156 were from
captivity, from a zoo and a wildlife rehabilitation center. Serological exam was performed in
165 animals (59 birds and 106) mammals) by Modified Agglutination Test (MAT). In 105
animals there was gathering of heart, brain, skeletal muscle and diaphragm fragments. From
those 105 samples, 32 were submitted to mouse bioassay and 73 were submitted to direct
molecular diagnosis by PCR from a fragment of B1 gene 155-pb. For virulence analysis, mice used in bioassays were evaluated for four weeks in search of toxoplasmosis clinical signs. Positive samples of wild animals and mice were submitted to genotyping by PCR-RFLP technique, using markers SAG1, 5’3’SAG2, SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2,
L358, PK1, Apico and CS3. Anti-T. gondii antibodies were found in 52,7% (87/165) of the
samples, with higher percentages in captivity animals (61,6%, 78/125), than in free ranging
ones (22,5%, 9/40). In bioassays, one non virulent sample was isolated, of genotype #13 from a free ranging striated heron (Butorides striata) from Recife. From the 73 primary samples submitted to PCR, seven were positive, with identification of genotype Type BrIII in a captive tropical otter (Lontra longicaudis). Both genotypes identified corroborate with the existence of genetic variability of T. gondii in Pernambuco. Two blonde capuchin monkeys (Sapajus flavius) positive by PCR had necropsy findings compatible with death by acute
toxoplasmosis. The enhancement of preventive veterinary medicine and biosecurity programs for toxoplasmosis must be performed in institutions that keep captive wildlife. / Toxoplasma gondii é um parasito de ampla distribuição mundial e apresenta uma estrutura populacional clonal. Estudos recentes evidenciaram maior variabilidade genética deste protozoário no Brasil em animais domésticos e silvestres, necessitando-se de maiores pesquisas neste último grupo. Objetivou-se isolar e caracterizar genotipicamente Toxoplasma gondii em tecidos de mamíferos e aves silvestres naturalmente infectados, provenientes de vida livre e de cativeiro, no estado de Pernambuco e verificar a ocorrência de anticorpos contra o parasito nas amostras em que foi possível obter o soro. De março de 2014 a setembro
de 2015, foram colhidas amostras biológicas de 233 animais, sendo 113 aves e 120 mamíferos. Considerando a origem, 77 foram de vida livre e 156 de cativeiro, oriundos de um zoológico e de um Centro de Triagem de Animais Silvestres (CETAS). O exame sorológico foi realizado em 165 animais (59 aves e 106 mamíferos) por meio do Teste de Aglutinação Modificado (MAT). Em 105 animais (71 aves e 34 mamíferos) houve colheita de fragmentos de coração, cérebro, músculo esquelético e diafragma. Destas 105 amostras, 32 foram submetidas ao bioensaio em camundongos e 73 foram submetidas a diagnóstico molecular direto por PCR a partir de um fragmento de 155-pb do gene B1. Para a análise de virulência das cepas, os camundongos utilizados nos bioensaios foram avaliados por quatro semanas quanto à manifestação de sinais clínicos de toxoplasmose. As amostras positivas de animais silvestres e camundongos foram submetidas à genotipagem pela técnica de PCR-RFLP, utilizando os marcadores SAG1, 5’3’SAG2, SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, Apico e CS3. Anticorpos anti-T. gondii foram encontrados em 52,7% (87/165) das amostras, com maiores percentuais em animais de cativeiro (61,6%, 78/125) do que em animais de vida livre (22,5%, 9/40). No bioensaio, isolou-se uma amostra não virulenta, do genótipo #13 em um socozinho (Butorides striata) de vida livre proveniente de Recife. Das 73 amostras primárias submetidas à PCR, sete foram positivas, com identificação o genótipo Type BrIII em uma lontra (Lontra longicaudis) de cativeiro. Os dois genótipos identificados corroboram com a existência da variabilidade genética de T. gondii em Pernambuco. Dois
macacos-pregos-galegos (Sapajus flavius) positivos pela PCR tiveram achados de necropsia compatíveis com óbito por toxoplasmose aguda. O aprimoramento de programas de medicina veterinária preventiva e biossegurança para o controle da toxoplasmose deve ser realizado em instituições que mantém fauna silvestre ex situ.
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Perfil soroepidemiológico e detecção molecular de Toxoplasma gondii em Gallus gallus e Columba livia da região metropolitana de Goiânia, Goiás / Seoepidemiological profile and molecular detection of Toxoplasma gondii in Gallus gallus and Columba livia the metropolitan region Goiânia, GoiásSilveira Neto, Osvaldo José da 06 December 2013 (has links)
Submitted by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-12-12T19:43:22Z
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Previous issue date: 2013-12-06 / The objective of this work was to evaluate the epidemiological situation of T. gondii in domestic and synanthropic birds in the metropolitan region of Goiânia, Goiás, by means of serological and molecular tests. By using modified agglutination and indirect hemagglutination techniques, samples from 450 domestic poultry (Gallus gallus) were evaluated, of which 150 birds were free-range (subsistence conditions), 150 were laying hens and 150 were broiler fowl. Research was also carried out, using direct agglutination (MAT) and PCR, on the occurrence of T. gondii in 80 free-range hens sold in open markets and on 150 common pigeons (Columba livia) in the Goiânia region. Antibodies for the parasite were found in all types of birds investigated, and there was a statistical difference in relation to positivity (p<0.05), which ranged in ascending order, thus: broilers (4.7%), layers (11.3%) and free-range fowl (38%). As regards birds sold at fairs, positivity was high, increasing proportionally with the number of fragments tested, without differences (p>0.05) in heart or brain samples (38.75% positive in MAT and 70 % positive in PCR). There was an association between chickens found positive in the modified agglutination and PCR tests, and it was noted that the higher the titer in the serology, the greater was the chance of positivity in the PCR. The pigeons presented positivity of 22.6% in the serology and low positivity in PCR (2%), with cysts only detected in brain samples. Occurrence of T. gondii was detected in all types of birds and rearing systems analyzed. Research into T. gondii in domestic chickens and in pigeons in this work proves the importance of these birds as indicators of environmental contamination, as well as providing evidence of the potential risks that they bring to public health in the region of Goiânia, Goiás. / O objetivo da realização deste trabalho foi avaliar a situação epidemiológica do T. gondii em aves domésticas e sinantrópicas da região metropolitana de Goiânia, Goiás, através de testes sorológicos e moleculares. Pelo uso das técnicas de aglutinação modificada e hemaglutinação indireta foram avaliadas amostras de 450 aves domésticas (Gallus gallus), sendo 150 aves criadas na forma de subsistência, 150 galinhas de postura e 150 frangos de corte. Também foi pesquisada através do uso da aglutinação direta (MAD) e da PCR a ocorrência de T. gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres e em 150 pombos domésticos (Columba livia) da região de Goiânia. Anticorpos para o parasito foi encontrado em todos os tipos de aves pesquisadas, sendo que houve diferença estatística em relação a positividade (p<0,05), sendo a mesma crescente quando se analisou frangos de corte (4,7%), galinhas de postura (11,3%) e galinhas de criações de subsistência (38%). Em relação às aves vendidas em feiras, a positividade foi elevada, aumentando proporcionalmente ao número de fragmentos testados, não tendo diferenças (p>0,05) em amostras de coração ou cérebro (38,75% positivas na MAD e 70 % positivos na PCR). Houve associação de galinhas positivas no teste de aglutinação modificada e na PCR, constatou-se que quanto mais elevado o título da ave na sorologia maior a chance de positividade na PCR. Os pombos apresentaram positividade de 22,6% na sorologia e baixa positividade na PCR (2%) sendo detectados parasitos apenas em amostras de cérebro. A ocorrência de T. gondii foi detectada em todos os tipos de aves e criações analisadas. A pesquisa de T. gondii em galinhas domésticas e em pombos neste trabalho comprova a importância destas aves como indicadoras da contaminação ambiental, assim como evidencia o risco potencial que as mesmas impõem a saúde pública na região de Goiânia, Goiás.
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Triagem pelo teste do pezinho para diagnóstico precoce da infecção congênita para toxoplasmose em três unidades de saúde pública da região metropolitana de Goiânia, Goiás / Newborn screening for early diagnostic for toxoplasmosis congenital infection in three units public health of metropolitan region Goiania, GoiásStorchilo, Heloisa Ribeiro 16 June 2016 (has links)
Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-08-01T17:22:48Z
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Previous issue date: 2016-06-16 / Toxoplasma gondii is a protozoan which presents a high worldwide prevalence. This parasite is able to pass the placental barrier which results in fetal infection with severe sequelae. The diagnostics of the congenital infection is complex and should be performed precociously. The newborn screening detects several diseases in the newborns (NB) and the implantation of the toxoplasmosis detection in this set of exams enables the precocious detection of this disease. Therefore the aim of this study was to perform the toxoplasmosis serologic triage (IgM and IgG) in blood collected in filter paper; to evaluate and compare the sensitivity of serologic analysis from peripheric blood collected in filter paper; to perform confirmatory serologic tests (IgM and IgG) and complementary (PCR) to confirm the NB with serologic indication of congenital toxoplasmosis and to speed the precocious diagnostics of congenital toxoplasmosis in NB blood. At the moment of the newborn screening blood collection a second sample of blood was collected in filter paper from NB attended in Clinics Hospital from the Federal University of Goias, Maternity Hospital Dona Iris both located in Goiania, Goias, and Cais Nova Era located in Aparecida de Goiania, Goias. These samples were processed and ELISA test was performed. The NB which presented results with absorbance titers equal or higher than 3.0 were submitted to a new peripheric blood collection alongside with the blood collection from their mothers and the PCR technique was performed as to confirm the congenital infection. A total of 949 blood samples were collected in filter paper and 432 (45.52%) were IgG positive while 1 (0.10%) was IgM positive. In the IgG positive NB (432/949) which presented ELISA titers ≥ 3.0; 104 pairs of peripheric blood were analyzed. From these 104 samples of peripheric blood, 5 pairs (4.80%) presented IgG and IgM negative results, four (3.84%) presented discrepant results, i.e., NB sample negative and mother sample IgG positive, in 95 pairs (91.34%) there were accordant results with both IgG positives. The PCR technique was performed in the 95 samples of IgG positive children and was possible to detect the parasite’s DNA in one sample of NB peripheric blood. Therefore these results show that the inclusion of the toxoplasmosis serologic test in the newborn screening, which is already performed in SUS to detect other diseases, demonstrated to be effective in the precocious detection of T. gondii infected NB. We highlight that succeed in the infected NB triage several criteria should be taken into account and that a greater sampling should be performed as to ratify these results. / Toxoplasma gondii é um protozoário de elevada prevalência na população mundial. O parasito pode atravessar a barreira transplacentária, resultando em infecção fetal com graves sequelas. O diagnóstico da infecção congênita é complexo e deve ser realizado precocemente. O teste do pezinho detecta patologias em recém-nascidos, dessa forma a implementação do diagnóstico de toxoplasmose nesse conjunto de exames possibilita a detecção precoce dessa doença. Este estudo teve como objetivo: Realizar triagem sorológica para toxoplasmose (IgM e IgG) em sangue coletado em papel filtro; avaliar e comparar a sensibilidade da sorologia em papel filtro com a sorologia realizada com sangue periférico; comparar a concentração de anticorpos detectada pela sorologia do sangue periférico dos recém-nascidos com os resultados de suas respectivas mães; realizar testes sorológicos confirmatórios (IgM e IgG) e complementares como PCR na confirmação dos recém-nascidos com indicação de infecção congênita e dinamizar o diagnóstico precoce da toxoplasmose congênita no sangue de recém-nasidos. Foi coletada uma segunda amostra de sangue em papel filtro de crianças atendidas no Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Goiás, Hospital Maternidade Dona Íris, Goiânia, Goiás e Cais Nova Era, Aparecida de Goiânia, Goiás, quando as mesmas foram realizar o teste do pezinho, e realizado o teste de Elisa. Os recém-nascidos que apresentaram resultados com índices de absorbância maiores ou iguais a 3.0 foram submetidos à coleta de sangue periférico, tanto das mães quanto de seus respectivos filhos. Em todas as amostras de sangue periférico dos recém-nascidos foi realizada a técnica de PCR para confirmação de infecção congênita. Do total de 949 amostras de sangue coletadas em papel filtro, detectou-se em 432 (45,52%) amostras a presença de IgG e uma (0,10%) foi detectada a presença IgM. Nos recém-nascidos reagentes para IgG (432/949) que apresentaram índice ≥3,0 pela técnica de Elisa foram realizados 104 pares de coletas de sangue periférico, incluindo mãe e filho. Das 104 amostras de sangue periférico dos recém-nascidos, nove (8,65%) não apresentaram IgG anti-T.gondii e 95 (91,34%) apresentaram resultado positivo para IgG, concordando com os resultados encontrados anteriormente em papel filtro. Dos 104 pares de amostras de sangue periférico, cinco pares (4,80%) tiveram resultados negativos para IgG e IgM, em quatro pares (3,84%), os resultados foram discrepantes, sendo a amostra da criança negativa e a da mãe IgG positivo, em 95 pares (91,34%) das amostras analisadas, foram concordantes na detecção de IgG. Foi realizada a técnica de PCR nas 95 amostras de sangue periférico das crianças com sorologia confirmada e foi possível detectar o DNA do parasito em uma amostra de sangue periférico dos recém-nascidos. Diante dos resultados obtidos nesse trabalho, a adição da sorológica para toxoplasmose ao teste do pezinho que já é disponibilizado pelo SUS para outras infecções, se mostrou eficaz na detecção precocemente de recém-nascidos infectados pelo T. gondii. Salientamos que para se obter êxito na triagem dos recém-nascidos infectados, vários critérios deverão ser considerados, e que uma amostragem maior devera ser analisada para ratificar os resultados obtidos.
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Determinação da virulência de isolados brasileiros de Toxoplasma gondii em camundongos / Determination of the virulence of Brazilian isolates of Toxoplasma gondii in miceMarina Neves Ferreira 24 January 2018 (has links)
Os isolados de Toxoplasma gondii encontrados no Brasil apresentam grande variedade genética. No país, foram verificadas quatro linhagens clonais, denominadas tipo BrI, BrII, BrIII e BrIV. Dentre elas, a virulência para camundongos varia, sendo BrI virulenta, BrIII não virulenta e, as linhagens BrII e BrIV são consideradas de virulência intermediária. A definição da virulência desses isolados é feita, na maioria dos estudos, a partir do isolamento por bioensaio, com a determinação da mortalidade de camundongos infectados. No entanto, a dose de T. gondii inoculada nesses animais é desconhecida e, assim, trata-se de um método impreciso para caracterização da virulência. Dessa maneira, este estudo tem por objetivo avaliar a virulência, em camundongos, de 22 isolados brasileiros de T.gondii, utilizando inóculos padronizados. Para o teste de virulência, utilizou-se taquizoítas de cada um dos isolados, em três concentrações (10¹, 10² e 10³). Cada dose foi inoculada via intraperitoneal em grupos formados por quatro camundongos heterogênicos fêmeas, de oito semanas de idade, da linhagem Swiss Webster. A mortalidade dos animais foi observada por 30 dias e, baseando-se nesses dados, além do tempo decorrido pós-inoculação até a morte dos animais, determinou-se a virulência dos isolados. Dos 22 isolados brasileiros incluídos nesse estudo, sete (32%) foram definidos como de virulência intermediária, pois houve sobrevivência de animais infectados e a mortalidade foi dose-dependente. Além disso, 15 (68%) foram considerados virulentos, uma vez que causaram a morte de todos os camundongos independente da dose analisada. Comparando as classificações definidas pelo bioensaio e pelo teste de virulência, 83% dos isolados virulentos analisados se mantiveram como virulentos, em contrapartida os isolados não virulentos e de virulência intermediária pelo bioensaio mostraram um fenótipo de maior virulência no teste. Devido à predominância de isolados virulentos no Brasil, o uso de uma metodologia padronizada para determinação da virulência em camundongos é de pouca utilidade epidemiológica. / The isolates of Toxoplasma gondii found in Brazil present a great genetic variety. In the country, four clonal lineages, denominated type BrI, BrII, BrIII and BrIV were verified. Among them, virulence for mice varies, with virulent BrI and non-virulent BrIII, and the BrII and BrIV strains are considered as intermediate virulence. The determination of the virulence of these isolates is made, in the majority of the studies, from the isolation by bioassay, with the determination of the mortality of infected mice. However, the dose of T. gondii inoculated in these animals is unknown and thus is an imprecise method for characterization of virulence. Thus, this study aims to evaluate the virulence of 22 Brazilian isolates of T. gondii in mice using standardized inocula. For the virulence test, tachyzoites from each of the isolates were used in three concentrations (10¹, 10² and 10³). Each dose was inoculated intraperitoneally into groups consisting of four 8-week-old female heterogenic mice of the Swiss Webster strain. The mortality of the animals was observed for 30 days and, based on these data, in addition to the time elapsed post-inoculation until the death of the animals, the virulence of the isolates was determined. Of the 22 Brazilian isolates included in this study, seven (32%) were defined as intermediate virulence, since there was survival of infected animals and mortality was dose-dependent. In addition, 15 (68%) were considered virulent, since they caused the death of all mice regardless of the dose analyzed. Comparing the classifications defined by the bioassay and the virulence test, 83% of the virulent isolates analyzed remained virulent. In contrast, the non virulent isolates and intermediate virulence by the bioassay showed a phenotype of greater virulence in the test. Due to the predominance of virulent isolates in Brazil, the use of a standardized methodology for the determination of virulence in mice is of little epidemiological utility.
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