In recent decades, transmission of Trypanosoma cruzi, the causative agent of Chagas disease, by Triatoma infestans and other vector insects has expanded from historically rural areas to urban centers across Latin America. The urbanization of the T. cruzi transmission cycle necessitates new understanding of Chagas disease ecology and epidemiology, as well as new approaches to the surveillance, control, and prevention of vector infestation and parasite transmission. In rural La Joya, Peru, analyses highlight how the complexities of human migration and intermittent intervention influence the prevalence and incidence of Chagas disease. Substantial prevalence of T. cruzi infection was found in the adult population as a result of relatively higher incidence of infection among long-term inhabitants and relatively lower incidence of infection among short-term in-migrants. While an insecticide intervention in 1995 effectively eliminated incidence of infection among children, T. infestans and T. cruzi were rapidly reemerging in the absence of continuing vector control. In Arequipa, Peru, T. infestans had extensively and intensively infested an urban and peri-urban landscape prior to vector control. Environmental and social factors, which may directly or indirectly influence insect biology and behavior, were associated with infestation. Large clusters of infestation and spatial dependence among infested households at short and long distances suggest that T. infestans can disperse by crawling or flying in an urban environment, which may challenge ongoing vector surveillance and control. Reemergence of vector insects, including T. infestans, complicates continuing control of Chagas disease. While relatively rare, reemergence of T. infestans is a present and possibly persistent problem in urban and peri-urban Arequipa. The probability of a reemergence event varied spatially. Events were both clustered and non-clustered, and were spatially dependent at distances up to 1,600 meters. Event-to-event spatial proximity occurred at shorter distances in higher risk areas and longer distances in lower risk areas. Identifiable predictors and patterns of risk offer opportunities for more effective and efficient strategies for vector surveillance and control.

Diss. (sammanfattning) Uppsala : Univ., 2003. / Härtill 4 uppsatser.

Thesis (Ph. D.)--University of Washington, 1997. / Vita. Includes bibliographical references (leaves [105]-120).

Thesis (Ph. D.)--University of Washington, 2006. / Vita. Includes bibliographical references (leaves 132-145).

Orientador: Vanderlan da Silva Bolzani / Coorientador : Marilia Valli / Banca: Nivaldo Boralle / Banca: Amanda Danuello Pivatto / Resumo: Na presente pesquisa foram sintetizados vários derivados piridínicos objetivando a descoberta de constituintes com atividade antiparasitária potencial. Estes compostos foram planejados a partir do alcaloide (-)-espectalina isolado de Senna spectabilis (Fabaceae), empregando alguns processos usuais da química medicinal como a simplificação molecular, isosterismo clássico e funcional. Deste procedimento experimental, foram sintetizados 18 substâncias, sendo todas obtidas por meio de reações simples, a partir de compostos comerciais. Das substâncias sintéticas produzidas, 14 foram submetidas à avaliação para atividade em Trypanosoma cruzi, visando potenciais antichagásicos, e em Leishmania infantum para identificar potenciais leishmanicidas. Os compostos testados mostraram-se inativos na inibição destes protozoários. Contudo, dois análogos (48 e 52) apresentaram atividade inibitória das cepas de Plasmodium falciparum, com CI50 = 5,0 µM e índice de seletividade bastante interessante (IS >50). / Abstract: In the present research, several pyridine derivatives were synthesized aiming at the discovery of new constituents with potential antiparasitic activity. All compounds were planned from the (-)-spectaline alkaloid isolated from Senna spectabilis (Fabaceae), employing some usual medicinal chemistry procedures, such as molecular simplification, classical and functional isosterism. From this experimental procedure, 18 compounds were synthesized, and all of these were obtained by means of simple reactions, from commercial compounds. Of the synthetic substances produced, 14 were evaluated for activity in Trypanosoma cruzi, aimed at the search for potential antichagasics, and against Leishmania infantum to identify potential leishmanicidal derivatives. All compounds tested were inactive to the inhibition of these protozoa. However, two analogues (48 and 52) showed inhibitory activity against Plasmodium falciparum strains, with IC50 = 5.0 μM and an interesting selectivity index (IS> 50). / Mestre

Orientador: Regina Maria Barretto Cicarelli / Banca: Raquel Regina Duarte Moreirae Thiemann / Banca: Otavio Henrique Thiemann / Banca: Bruna Galdorfini Chiari Andréo / Banca: Ian Castro Gamboa / Resumo: A doença de Chagas ou tripanossomíase americana é endêmica nas Américas, porém outros modos de transmissão dispersaram a enfermidade às regiões onde não ocorre o vetor triatomíneo hematófago. No momento há apenas dois fármacos para o tratamento da doença, benzonidazol e nifurtimox, porém nifurtimox não é mais utilizado no Brasil. Ambos os medicamentos tem ações limitadas, dependem da fase da doença e apresentam efeitos adversos severos, além dos mecanismos de ação não serem totalmente conhecidos. Estudos relacionam a resistência ao benzonidazol com o aumento na produção de triparedoxina peroxidase mitocondrial (mTcTXNPx) que minimiza os efeitos tóxicos de espécies reativas de oxigênio, apresenta atividade peroxidase e peróxinitrito redutase. Derivados benzofuroxânicos, por conter estrutura heterociclo N-óxido relacionada com a oxidação de biomoléculas, tem apresentado atividade anti Leishmania e tumoral, bacteriostática e fungistática. No presente estudo, derivados benzofuroxânicos (N-óxido-benzo[1,2-c]1,2,5-oxadiazol), inéditos isósteros de nitrofural, foram avaliados a partir de ensaios citotóxicos in vitro, na forma epimastigota da cepa Y de T. cruzi. Os derivados benzofuroxânicos foram tóxicos para T. cruzi, IC50 menor em relação ao benzonidazol, mas não foram tóxicos para células de mamíferos HepG2, o que indica serem promissoras moléculas tripanossomicidas. Também foram detectados o monômero de mTcTXNPx de 25,5 kDa e o dímero de aproximadamente 58 kDa em condições redut... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Chagas disease or American trypanosomiasis is endemic in Americas, however distinct mechanisms have dispersed the illness to the regions where the hematophagous triatomine vector does not occurs. At moment there are only two drugs available to treat the disease, benznidazole and nifurtimox, but nifurtimox is not prescribed in Brazil. Both medicines have limited actions, depend on disease phase and have severe adverse effects, moreover the mechanism of action do not well understood. Studies have described the benznidazole resistance would be related to increasing expression of mitochondrial tryparedoxin peroxidase (mTcTXNPx) which decreasing toxic effects of reactive oxygen species, has peroxidase and peroxinitrite reductase activity. Benzofuroxans derivative contain N-oxide heterocycle structure related to the oxidation of biomolecules, have shown anti-Leishmania activity and tumoral, bacteriostatic and fungistatic. In the present study, benzofuroxanic derivatives (Noxide-benzo [1,2-c] 1,2,5-oxadiazole), novel nitrofural isosteres, were evaluated from in vitro cytotoxic assays on the epimastigote form of strain Y of T. cruzi. The benzofuroxanic derivatives were toxic to T. cruzi, IC50 lower than benznidazole, although were not toxic to mammalian HepG2 cells, indicating promising trypanocidal molecules. Also, were detected the 25.5 kDa mTcTXNPx monomer and the dimer of approximately 58 kDa under reducing conditions maintained by 2-mercaptoethanol. Although there was no increased in 25.5 kDa mTcTXNPx expression, the presence of the dimer of approximately 58 kDa was verified from purified T. cruzi total protein... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: João Aristeu da Rosa / Coorientadora: Patrícia Bento da Silva / Banca: Lívia Maria Fusari / Banca: Camila Cristina de Foggi / Banca: Estela Sasso Cerri / Banca: Luis Vitor Silva do Sacramento / Resumo: A doença de Chagas apresenta em sua cadeia epidemiológica hospedeiros invertebrados, que são os triatomíneos, insetos hematófagos que veiculam Trypanosoma cruzi, agente etiológico dessa zoonose. Devido à importância epidemiológica dos triatomíneos faz-se necessário um estudo detalhado sobre caracteres morfológicos e bioquímicos, buscando uma possível relação entre fatores endógenos, exógenos e sua capacidade vetorial. Nesta tese foi desenvolvido o estudo de metabólitos produzidos pelos triatomíneos, dentre esses os constituintes responsáveis pela coloração do conexivo de adultos de Panstrongylus megistus, Triatoma dimidiata, Triatoma lenti e Triatoma rubrovaria. Justifica-se a utilização dessas espécies, pois P. megistus e T. rubrovaria embora de gêneros distintos, apresentam a coloração vermelha no conexivo enquanto T. dimidiata e T. lenti contém em seus conexivos, manchas amarelas. Assim, a identificação das substâncias responsáveis pela coloração do conexivo dessas espécies será útil para determinações de novos marcadores taxonômicos e também para análises filogenéticas. Dessa forma, foram utilizadas várias metodologias experimentais para elucidar e caracterizar a constituição dos componentes pigmentados do conexivo. As análises feitas por microscopia eletrônica de varredura e microscopia eletrônica de transmissão acopladas com EDS permitiram a visualização e identificação de nanopartículas e elementos químicos. A identificação das nanopartículas foi feita por determinação... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Chagas disease presents in its epidemiological chain invertebrate hosts, which are the triatomines, hematophagous insects that carry Trypanosoma cruzi, etiological agent of this zoonosis. Due to the epidemiological importance of triatomines, a detailed study of morphological and biochemical characteristics is necessary, seeking a possible relationship between endogenous and exogenous factors and their vector capacity. In this thesis developed was the study of metabolites produced by triatomines, among them the constituents responsible for the coloring of the adult connexive of Panstrongylus megistus, Triatoma dimidiata, Triatoma lenti and Triatoma rubrovaria. The use of these species is justified because P. megistus and T. rubrovaria, although of different genera, have a red color in the connexive while T. dimidiata and T. lenti contain yellow spots on their connective tissue. The identification of the substances responsible for the coloring of the connective of these species will be useful for determinations of new taxonomic markers and for phylogenetic analyzes. In this way, several experimental methodologies were used to elucidate and characterize the constitution of the pigmented components of the connective tissue. The analyzes made by scanning electron microscopy and transmission electron microscopy coupled with EDS allowed the visualization and identification of nanoparticles and chemical elements. The identification of the nanoparticles was made by determination and measurement of the atomic planes from the images generated by the high resolution MET analysis. These techniques have identified the existence of chemical elements consisting of nanoparticles, human blood and β-chitin. The results obtained allow us to conclude that the color... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Automação e Estatística (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-07-02T21:19:59Z No. of bitstreams: 1 VicenteToscanoDeAraujoNeto_DISSERT.pdf: 1344963 bytes, checksum: 6addc1f91b5c4d2493f13722eb19b47b (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-07-05T13:54:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 VicenteToscanoDeAraujoNeto_DISSERT.pdf: 1344963 bytes, checksum: 6addc1f91b5c4d2493f13722eb19b47b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-05T13:54:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 VicenteToscanoDeAraujoNeto_DISSERT.pdf: 1344963 bytes, checksum: 6addc1f91b5c4d2493f13722eb19b47b (MD5) Previous issue date: 2018-03-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / A infecção pelo Tripanosoma cruzi em Canis familiaris e triatomíneos foi avaliada nos ambientes domiciliar e peridomiciliar de localidades rurais de alguns municípios do Estado do Rio Grande do Norte. Amostras de sangue de 43 cães foram coletadas nos municípios de Acari, Caicó, Caraúbas e Marcelino Vieira e avaliadas quanto a infecção pelo T. cruzi por meio de testes sorológicos e pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Inicialmente, testes sorológicos como o DPP® (Dual Path Platform, BioManguinhos/FIOCRUZ) e ELISA (Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay) foram realizados para verificar a presença de anticorpos anti-Leishmania. Para a detecção de anticorpos anti-T. cruzi foram realizadoso ELISA in house para IgM e IgG e a reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). As capturas de triatomíneos foram realizadas nas mesmas localidades em que foram coletadas as amostras de sangue de cão. A infecção foi avaliada por exame direto e/ou PCR. Na sorologia para T. cruzi, 16,3% dos cães apresentaram reatividade sugestiva de fase aguda e 11,6% de fase crônica. A sorologia para Leishmania foi reativa em 9,3% dos animais dos quatro municípios investigados, sendo mais elevado no município de Acari com 12,5% . A reatividade entre os testes para Leishmania e T. cruzi foi de 23,2% das amostras, relacionada provavelmente com sobreposição /de áreas endêmicas. Na detecção do kDNA pela PCR, 41,9% das amostras apresentam a banda 330pb, as quais 20,9% eram do município de Caraúbas, 9,3% de Marcelino Vieira, 9,3% de Acari e 2,3% de Caicó. Nesses municípios, ninfas e adultos de Triatoma brasiliensis, Triatoma pseudomaculata e Rhodnius nasutus foram capturados em ambientes peridomiciliar e/ou intradomiciliar. As análises do conteúdo intestinal avaliados pela PCR apontaram 59,5% de positividade. Os resultados apontam elevada taxa de infecção de cães e triatomíneos pelo T. cruzi em diferentes municípios do Rio Grande do Norte, o que pode favorecer a infecção em humanos e a manutenção da infecção ativa pelo T. cruzi no Estado. / The infection by Trypanosoma cruzi in Canis familiaris and Triatomines was evaluated in the home and peridomiciliary environment of rural communities in the State of Rio Grande do Norte. Blood samples from 43 dogs from rural areas in the municipalities of Acari, Caicó, Caraúbas and Marcelino Vieira were evaluated for T. cruzi infection by serological techniques and by Polymerase Chain Reaction (PCR) to identify T. cruzi kDNA. Serology was initially performed to identify anti-T.cruzi antibodies by ELISA (Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay) for IgM and IgG in house and the Indirect Immunofluorescence (IFR) reaction. The presence of anti-Leishmania antibodies with DPP® (Dual Path Platform, Bio-Manguinhos / FIOCRUZ) and ELISA were also used. The catches of triatomines were carried out in the same locations and in the same period in which the dog samples were collected and the infection evaluated by direct examination and/or PCR. The criterion for positivity in T. cruzi serology was the agreement between two different techniques, which resulted in 16.3% (7/43) of the samples suggestive of acute phase and 11.6% (5/43) of chronic phase. The reactive serology for Leishmania was 9.3% of the animals in the four municipalities studied, being more reactive in the municipalities of Acari. These results of reactivity for Leishmania and T. cruzi may be related to the overlap of endemic areas. In the identification of kDNA by PCR in blood samples from dogs, 41.9% (18/43) of the samples present the band 330pb, of these 6.8% (4/43) are in the municipality of Acari, 2.3% (1/43) in Caicó, 20.9% (9/43) in Caraúbas and 9.3% (4/43) in Marcelino Vieira. The catches of triatomines identified adults and nymphs of T. brasiliensis, T. pseudomaculata, R. nasutus and adults of P. lutzi in peridomiciliary and/or intradomiciliary environments of all the studied localities. The analysis of the intestinal contents evaluated by PCR found positivity of 78.5% (95/121) of the triatomines that cohabitated these environments with the dogs. The natural T. cruzi infection was identified in dogs and triatomines in all municipalities studied, probably helping to maintain active T. cruzi infection in the domiciliary area and increasing the risk of infection in the human population.

Submitted by Pós graduação Farmácia (ppgfar@ufba.br) on 2017-05-25T21:30:27Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Francielle_Martins_de_Melo.pdf: 8569126 bytes, checksum: 689445a6dfb52e31c7a720c2f317cd6c (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barroso (pbarroso@ufba.br) on 2017-05-29T17:24:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_Francielle_Martins_de_Melo.pdf: 8569126 bytes, checksum: 689445a6dfb52e31c7a720c2f317cd6c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-29T17:24:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_Francielle_Martins_de_Melo.pdf: 8569126 bytes, checksum: 689445a6dfb52e31c7a720c2f317cd6c (MD5) / CNPq / A doença de Chagas é uma doença negligenciada de grande impacto sobre a população da América Latina. No Brasil estima-se que aproximadamente 50.000 novos casos de doença de Chagas ocorram anualmente e que cerca de 2.500.000 indivíduos estejam infectados. Apesar disso, o arsenal terapêutico disponível para o tratamento da doença (nifurtimox e benzonidazol) apresenta pouca ação sobre a fase crônica e sérios efeitos colaterais. Além disso já foi relatado o aparecimento de cepas resistentes aos medicamentos disponíveis. Diante desses fatos, torna-se importante a identificação de novos protótipos a fármacos ativos contra a fase crônica da doença. Sabe-se que antifúngicos azólicos (posaconazol, ravuconazol, itraconazol e cetoconazol) inibem a enzima lanosterol 14 alfa-desmetilase do Trypanosoma cruzi e por essa razão impedem a síntese do ergosterol, o principal esterol de membrana do parasita. Moléculas com esse perfil de atividade são ativas contra a forma amastigota do parasito, apresentando resultados positivos no tratamento da fase crônica da doença de Chagas. Esses dados sugerem que o desenvolvimento de novos inibidores da via do ergosterol é uma alternativa interessante para o tratamento da doença de Chagas. Visando contribuir para esse objetivo foram desenvolvidos modelos de QSAR 2D e 3D para um conjunto de 155 moléculas ativas contra T. cruzi. Modelos de QSAR 2D, baseado, em descritores bidimensionais (r2= 0,86, q2=0,9, r2pred=0,84, com 4PCs) e Holograma moleculares (r2= 0,85, q2=0,91, r2pred=0,82, com 6PCs) apresentam parâmetros estatísticos satisfatórios e sugerem que propriedades estéreas da amina ligada a anel aromático estão relacionadas com aumento na atividade dos compostos, enquanto que ramificações estruturais tem o efeito contrário. Visando complementar o estudo das exigências estéreas e eletrônicas que determinam a atividade biológica dos derivados azólicos estudados, foram desenvolvidos modelos de QSAR 3D pela técnica de análise comparativa de campos moleculares (CoMFA). O modelo do alinhamento realizado pelo acoplamento molecular propiciou poder preditivo satisfatório (q2 = 0,74, r2 = 0,92, r2pred = 0,70, com 5 PCs). O modelo realizado pelo alinhamento por similaridade morfológica dos 5 ligantes de maior atividade proporcionou maior poder preditivo (q2= 0,75, r2=0,91, r2pred=0,77, com 6PCs). A análise dos mapas de contorno sugere que a amina primária ligada ao anel aromático tem contribuição estérea e eletrônica importante, assim como substituintes na posição meta do anel p-anilina. O anel fenil na posição meta, assim como o anel imidazol podem diminuir a atividade dos compostos. As informações obtidas através dos modelos quimiométricos descritos acima são de suma importância para guiar o planejamento de moléculas mais potentes contra T. cruzi. / Chagas´ disease has a major impact over the population of Latin America. This neglected disease affects 2,500.000 patients and approximately new 50,000 cases are identified annually. Despite that, there are few drugs available to treat this ailment (nifurtimox and benznidazole), which are not effective against the chronic phase and show many side-effects. In addition, drug-resistant strains have been reported. These facts underscore the importance of discovering lead compounds that are active against the chronic phase of Chagas´ disease. Antifungal compounds such as posaconazole, revuconazole and cetoconazole also inhibit the lanosterol 14- demethylase from Trypanosoma cruzi, thus blocking the ergosterol pathway. Moreover, such compounds are active against amastigote T. cruzi and show promising results for chronic Chagas´ disease treatment. Therefore, developing new ergosterol biosynthesis inhibitors has been considered as a good strategy to improve Chagas´ disease treatment. Aiming at this goal, 2D and 3D QSAR models were built for a dataset of 155 compounds that had been assayed against T. cruzi. 2D-QSAR models built with topological descriptors (r2= 0.86, q2=0.9, r2pred=0.84, with 4PCs) or molecular hologram (r2= 0.85, q2=0.91, r2pred=0.82, with 6PCs) show reasonable statistics parameters and suggest that steric properties from the NH2 bound to phenyl ring increase potency, whereas moieties branching has the opposite effect. In order to further investigate the steric and electronic requirements for biological activity, 3D-QSAR models were developed by Comparative Molecular Field Analysis (CoMFA). The model of alignment by docking presented good predictive model (q2 = 0,74, r2 = 0,92, r2pred = 0,70, com 5 PCs). The model of alignment by morphological similarity towards the 5 most activity compounds presented most predictive model (r2= 0.75, q2=0.91, r2pred=0.77, with 6PCs). Contour map analysis not only supports the hypothesis that NH2 bound to phenyl has a positive steric or eletronic contribution to activity but also meta substitute on p-aniline. The ring phenil in the position meta as well as the ring imidazole would reduce the activity. The information gathered from all these models shall be useful to guide the development of second generation molecules with increased potency against T. cruzi.

Submitted by Alessandra Portugal (alessandradf@ioc.fiocruz.br) on 2013-09-24T15:16:03Z No. of bitstreams: 1 Irlane Faria de Pinho.pdf: 1040715 bytes, checksum: 87d7812b6d730954fda7c527c1132c57 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-09-24T15:16:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Irlane Faria de Pinho.pdf: 1040715 bytes, checksum: 87d7812b6d730954fda7c527c1132c57 (MD5) Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A taxa de infecção por Trypanosoma cruzi em triatomíneos é um importante parâmetro para a avaliação do risco de transmissão vetorial da doença de Chagas em localidades onde há infestação doméstica e peridoméstica por estes insetos. A infecção por T. cruzi em insetos vetores costuma ser avaliada pelo exame, através de microscopia óptica, de suspensões do conteúdo intestinal fresco dos insetos, buscando-se nelas a presença de tripanossomatídeos flagelados. Esta metodologia apresenta como desvantagens a necessidade de se transportar os insetos vivos até o laboratório, além de não permitir a identificação da espécie de tripanossomatídeo presente nas fezes dos triatomíneos. Técnicas de biologia molecular baseadas na reação em cadeia da polimerase (PCR) têm, portanto, sido desenvolvidas para a identificação de T. cruzi em amostras biológicas, como o conteúdo intestinal dos triatomíneos. O objetivo desta dissertação foi avaliar a aplicabilidade e a sensibilidade de uma técnica de diagnóstico molecular da infecção natural por T. cruzi, baseada na utilização de papel de filtro, em triatomíneos capturados no estado do Ceará. Adicionalmente, procurou-se avaliar esta técnica diagnóstica em amostras do conteúdo intestinal de triatomíneos criopreservadas em papel de filtro durante 11 anos. Foram estudados os conteúdos intestinais de 68 espécimes de triatomíneos capturados no ano de 2000 (Rhodnius nasutus, n=40; Triatoma pseudomaculata, n=25 e T. brasiliensis, n=3), além de fezes de 51 espécimes coletados no ano de 2010 (T. pseudomaculata, n=15; T. brasiliensis, n=36). Os conteúdos intestinais obtidos por compressão abdominal dos 119 triatomíneos foram analisados pelo exame direto por microscopia óptica. As fezes foram diluídas sobre as lâminas de microscopia, em solução salina tamponada, cobertas com lamínulas e examinadas no microscópico óptico com aumento de 400 vezes, para observação direta da presença de tripanossomatídeos. Alíquotas das suspensões fecais foram separadas e aplicadas em tiras de papel de filtro (FTA Card, GE Healthcare, Buckinghamshire, UK), que foram armazenadas individualmente em tubos de 2 mL e acondicionadas em freezer a -20 ºC, para utilização na técnica de PCR, visando a detecção de kDNA de T. cruzi. Empregaram-se os iniciadores S35 5´- AAATAATGTACGGG(T/G)GAGATGCATGA-3`, e S36 5´- GGTTGCATTGGGTTGGTGTAATATA-3`, que amplificam o fragmento de 330 pares de bases contendo as regiões variáveis dos minicírculos do DNA do cinetoplasto (kDNA). O cálculo comparativo das sensibilidades das técnicas diagnósticas (microscopia óptica e PCR) foi realizado da seguinte forma: sensibilidade da técnica = número de exames positivos por esta técnica / número de exames positivos em quaisquer das duas técnicas. Com relação à análise dos 68 conteúdos intestinais criopreservados em papel FTA Card, 58 foram positivos pela microscopia óptica. Destes, 56 foram positivos pela PCR. Obteve-se, desta forma, uma sensibilidade comparativa de 96,5% para a PCR e 100% para a microscopia óptica. Analisando-se as 51 amostras fecais recém-obtidas de triatomíneos, obteve-se uma positividade, pela microscopia óptica, de quatro amostras e, pela PCR, de 14 amostras, obtendo-se uma sensibilidade de 100% para a PCR e de 28.6% para a microscopia óptica. A concordância entre as técnicas foi de 66/68 (97%) para as amostras criopreservadas e de 41/51 (80,4%) para as amostras recém-obtidas de insetos. Analisando-se as amostras em conjunto, obtivemos uma concordância de 107/119 (89,9%) entre as técnicas. O estudo conclui que a técnica de diagnóstico por PCR em amostras de conteúdo intestinal de triatomíneos aplicadas ao papel FTA Card é aplicável para a estimativa das taxas de infecção natural destes insetos pelo T. cruzi, sendo capaz de auxiliar a caracterização de perfis eco-epidemiológicos e a detecção da circulação do parasita em ambientes silvestres, peridomésticos e domésticos, contribuindo também para a avaliação do risco de transmissão da doença de Chagas em localidades onde há infestação pelos vetores. / The rate of infection by Trypanosoma cruzi in triatomines is an important parameter for assessing the risk of vectorial transmission of Chagas disease in localities where domestic and peridomestic infestation by these insects are found. Infection with T. cruzi in triatomines is usually evaluated by examining, by light microscopy, suspensions of intestinal contents of fresh insects, seeking in them the presence of flagellate trypanosomatids. This approach has disadvantages as the need to transport the live insects to the laboratory, and not allow the identification of the trypanosomatid species present in the triatomine feces. Molecular biology techniques based on polymerase chain reaction (PCR) have therefore been developed to identify T. cruzi in biological samples, such as the intestinal contents of triatomines. The aim of this study was to evaluate the applicability and sensitivity of the technique of molecular diagnosis of natural infection by T. cruzi, based on the use of filter paper in triatomines captured in the Ceará state. Additionally, we sought to evaluate this diagnostic technique in samples of intestinal content of triatomines cryopreserved on filter paper for 11 years. We studied the intestinal contents of 68 specimens of insects captured in the year 2000 (Rhodnius nasutus, n = 40; T. pseudomaculata, n = 25 and T. brasiliensis, n = 3), and feces from 51 specimens collected in 2010 (T. pseudomaculata, n = 25; T. brasiliensis, n = 36). The intestinal content obtained by abdominal compression of 119 insects were analyzed by direct examination through optical microscopy. The feces were diluted on microscope slides in buffered saline (pH = 7.0), covered with coverslips and examined under optical microscope with 400 times magnification for direct observation of the trypanosomes presence. Aliquots of fecal suspensions were separated and applied to strips of filter paper (FTA Card, GE Healthcare, Buckinghamshire, UK), which were stored individually in 2 mL tubes and stored at -20 ° C for use in PCR , aimed at detection of kDNA of T. cruzi. The primers used were 5'-AAATAATGTACGGG S35 (T / G) GAGATGCATGA-3 'and 5'-GGTTGCATTGGGTTGGTGTAATATA S36-3', which amplify a fragment of 330 base pairs containing the hypervariable regions of the k-DNA minicircles. The comparative calculation of the sensitivity of diagnostic techniques (optical microscopy and PCR) was performed as follows: sensitivity = number of technical tests positive by this technique / number of positive tests in any of the two techniques. Regarding the analysis of 68 cryopreserved paper intestinal contents FTA Card, 58 were positive by light microscopy. Of these, 56 were positive by PCR. Was obtained in this way, a comparative sensitivity of 96.5% for PCR and 100% for light microscopy. Analyzing the newly obtained 51 fecal samples of insects, we obtained a positivity by light microscopy, four samples and PCR of 14 samples, yielding a sensitivity of 100% for PCR and 28.6% for optical microscopy. The agreement between the techniques was 66/68 (97%) for the cryopreserved samples and 41/51 (80.4%) for the newly obtained samples of insects. Analyzing the samples together, we achieved an agreement of 107/119 (89.9%) between the techniques. The study concludes that the technique of PCR for diagnosis in samples of intestinal content of triatomines applied to FTA paper Card is applicable for estimating natural infection rates of these insects by T. cruzi, is able to assist the characterization of eco-epidemiological profiles and the detection of the parasite in the wild environment, peridomestic and domestic, also contributing to the assessment of risk of transmission of Chagas disease in localities where there is infestation by vectors.