Introdução - Atualmente, vários estudos epidemiológicos têm se direcionado à população de adolescentes, devido aos seus hábitos alimentares que, quando inadequados, podem favorecer o aparecimento de diversas doenças crônicas não transmissíveis na vida adulta. A vitamina D é um nutriente de fundamental importância durante os diversos ciclos de vida, porém sua determinação é inadequada através dos questionários/recordatórios alimentares. Níveis séricos reduzidos de vitamina D estão relacionados à patogênese de diversas doenças crônicas não transmissíveis. Objetivo - Objetivou-se investigar a ingestão e os níveis séricos de vitamina D em adolescentes saudáveis, assim como quais fatores influenciam a adequação da vitamina D e a associação entre o estado nutricional da vitamina D com a adiposidade e a pressão arterial. Métodos - Trata-se de estudo transversal, onde foram avaliados 205 adolescentes, sendo 106 meninos e 99 meninas, com média de idade de 18,25 (0,07). Avaliou-se a ingestão alimentar (diário alimentar de 3 dias), o estado nutricional (peso, altura, IMC, gordura corporal e massa magra pela bioimpedância elétrica), o nível de atividade física (questionário de atividade física, desenvolvido e validado para adolescentes), pressão arterial (de acordo com as recomendações das V Diretrizes Brasileiras de Hipertensão Arterial) e marcadores bioquímicos (níveis séricos de calcidiol e calcitriol, cálcio sérico total, paratormônio sérico e adiponectina). Resultados - O nível sérico médio de calcidiol foi 29,2(0,8) ng/ml, e 62,1% dos adolescentes apresentaram insuficiência de vitamina D. A média de ingestão de cálcio e vitamina D foi de 682,2 (14,2) mg/dia e 3,1 (0,1) g/dia, respectivamente. Apenas 3,8% dos adolescentes ingeriram o recomendado para cálcio e nenhum adolescente apresentou ingestão próxima ao recomendado para vitamina D. Houve correlação positiva entre o consumo de produtos lácteos com a ingestão de cálcio e vitamina D (r=0,597 e r=0,561, respectivamente; p=0,000). Adolescentes que apresentavam o hábito de realizar o café da manhã apresentaram ingestão significativamente maior de cálcio, vitamina D e produtos lácteos do que aqueles adolescentes que não realizavam esta refeição. Quanto aos níveis de pressão arterial, 12,19% dos adolescentes apresentaram-na elevada. Não foi encontrada correlação significante entre a pressão arterial sistólica e diastólica com o calcidiol e o calcitriol. Tanto a pressão arterial sistólica quanto a diastólica apresentaram correlação positiva com a circunferência da cintura em ambos os sexos. A gordura corporal não apresentou correlação com os níveis séricos de calcidiol. Conclusões - A prevalência de insuficiência de vitamina D foi elevada nesta amostra de adolescentes. Não houve relação entre os níveis séricos de vitamina D e pressão arterial. A maioria dos adolescentes não ingere o recomendado para cálcio e vitamina D. E o hábito de realizar o café da manhã regularmente assim como a ingestão de produtos lácteos são importantes estratégias para aumentar a ingestão destes nutrientes. / Introduction - Several epidemiologic studies have been developed in adolescent population, due to alimentary habits that when inadequate can contribute to development of non-communicable chronic diseases in the adult life. The vitamin D status is of fundamental importance during life cycles. Reduced serum levels of vitamin D have been related to many non-communicable chronic diseases pathogenesis. Purpose - The purpose of this study was to evaluate the vitamin D intake and the serum 25(OH)D concentration in healthy adolescents, as well to investigate factors that could influence the vitamin D status, and the relationships between the nutritional status of vitamin D, adiposity and blood pressure. Methods - This is a cross-sectional study, including two hundred and five adolescents, 106 boys and 99 girls, mean age 18.25 (0.07) years old. Dietary intake (three-day dietary records), nutritional status (weight, height, BMI, fat mass and lean mass by bioelectrical impedance), physical activity (validated physical activity evaluation questionnaire for adolescents), blood pressure (in accordance with V Diretrizes Brasileiras de Hipertensão Arterial recommendations), and biochemical markers (blood levels of calcidiol, calcitriol, serum total calcium, intact parathormone and adiponectin) was evaluated. Results - The mean serum of calcidiol was 29.2 (0.8) ng/ml, and the vitamin D insufficiency was observed in 62.1% of the adolescents. Mean dietary calcium and vitamin D intake was 682.2 (14.2) mg/day and 3.1 (0.1) g/day, respectively. Only 3.8% of adolescents met the daily adequate intake recommendation for calcium, and none of adolescents met the adequate intake recommendation for vitamin D. There was a positive correlation between dairy products and both calcium and vitamin D intake (r=0.597 e r=0.561, respectively; p=0.000). Adolescents who ate breakfast had a significant higher mean calcium, vitamin D and dairy products intake than adolescents who did not eat. Elevated blood pressure was observed in 12.19% of the adolescents. There were no correlations between systolic and diastolic blood pressure with calcidiol and calcitriol. A positive significant correlation was observed between waist circumference with systolic and diastolic blood pressure in both boys and in girls. There was no correlation between fat mass and blood levels of calcidiol. Conclusions - The prevalence of vitamin D insufficiency was elevated in this group of adolescents. No relationships between serum vitamin D levels and blood pressure were observed. The majority of adolescents were not consuming recommended levels of calcium and vitamin D. The regular breakfast habit and consumption of dairy products are important strategies in improving calcium and vitamin D intake in the diet.

Existem evidências crescentes indicando a associação entre dietas ricas em frutas e vegetais e a diminuição da incidência de câncer. O suco de laranja (OJ) pode ser incluído entre os alimentos com potencial quimioprotetor e seu estudo é muito relevante pelo amplo consumo desta bebida. O OJ possui vários nutrientes e compostos bioativos com atividades antioxidante, antimutagênica, anticarcinogênica e antiaterogênica, entre outras. A vitamina C (Vit C) é um dos nutrientes mais abundantes no OJ, e o único nutriente que pode ser provido em quantidade superior à recomendação diária por uma única porção de 200 mL de OJ. A Vit C, a exemplo de outros componentes do OJ, pode ser tanto benéfica quanto maléfica para os sistemas biológicos, dependendo do contexto metabólico. Neste sentido, vários nutrientes presentes no OJ têm sido identificados como mutagênicos ou carcinogênicos, especialmente quando administrados de forma isolada. Este estudo utilizou o ensaio Cometa alcalino em sangue de camundongos (in vivo) para avaliar: 1) a genotoxicidade do OJ e da Vit C; 2) a genotoxicidade do FeSO4 e do CuSO4: 3) o efeito modulador do OJ e da Vit C sobre a genotoxicidade do FeSO4 e CuSO4, bem como do metilmetanosulfonato (MMS) e da ciclofosfamida (CP). A versão alcalina do ensaio Cometa foi utilizada para avaliar o dano no DNA em células brancas do sangue periférico de camundongos. Adicionalmente, os níveis de cobre e ferro no sangue e no fígado dos camundongos tratados com metais e OJ foram avaliados pela metodologia de PIXE (Particle-Induced X-ray Emission). Grupos com pelo menos 6 camundongos (metade de cada sexo) foram tratados por gavage com uma ou duas doses de água (controle), CP, MMS, FeSO4 ou CuSO4. OJ (0.1 mL/Kg) foi administrado tanto antes (pré-tratamento) quanto após a administração das substâncias-teste (pós-tratamento). A Vit C (1 e 30 mg/Kg) foi administrada apenas no pós-tratamento. O dano no DNA foi avaliado 24 e 48 h após o início do tratamento. Após 24 h, o OJ induziu um suave aumento no dano no DNA, enquanto a Vit C foi genotóxica (30 mg/Kg > 1 mg/Kg). O tratamento duplo com Vit C (a 0 e a 24 h) induziu uma resposta genotóxica cumulativa a 48 h, que foi mais intensa para a dose maior. O FeSO4 e o CuSO4 foram genotóxicos após 24 h, mas tiveram seu dano efetivamente reparado após 48 h do tratamento. O pré-tratamento com OJ reduziu a genotoxicidade do FeSO4 e do CuSO4 (efeito preventivo). O pós-tratamento com OJ também reduziu a genotoxicidade do CuSO4 (efeito reparador). O OJ mostrou tanto efeito preventivo quanto reparador sobre a genotoxicidade do MMS. O OJ teve apenas efeito reparador sobre a CP. Ambas doses de Vit C aumentaram os danos no DNA causados pelo FeSO4 e pelo CuSO4. Adicionalmente, os níveis de cobre e ferro no sangue e no fígado dos camundongos tratados com metais e OJ foram avaliados pela metodologia de PIXE (Particle-Induced X-ray Emission). Grupos com pelo menos 6 camundongos (metade de cada sexo) foram tratados por gavage com uma ou duas doses de água (controle), CP, MMS, FeSO4 ou CuSO4. OJ (0.1 mL/Kg) foi administrado tanto antes (pré-tratamento) quanto após a administração das substâncias-teste (pós-tratamento). A Vit C (1 e 30 mg/Kg) foi administrada apenas no pós-tratamento. O dano no DNA foi avaliado 24 e 48 h após o início do tratamento. Após 24 h, o OJ induziu um suave aumento no dano no DNA, enquanto a Vit C foi genotóxica (30 mg/Kg > 1 mg/Kg). O tratamento duplo com Vit C (a 0 e a 24 h) induziu uma resposta genotóxica cumulativa a 48 h, que foi mais intensa para a dose maior. O FeSO4 e o CuSO4 foram genotóxicos após 24 h, mas tiveram seu dano efetivamente reparado após 48 h do tratamento. O pré-tratamento com OJ reduziu a genotoxicidade do FeSO4 e do CuSO4 (efeito preventivo). O pós-tratamento com OJ também reduziu a genotoxicidade do CuSO4 (efeito reparador). O OJ mostrou tanto efeito preventivo quanto reparador sobre a genotoxicidade do MMS. O OJ teve apenas efeito reparador sobre a CP. Ambas doses de Vit C aumentaram os danos no DNA causados pelo FeSO4 e pelo CuSO4. processado e armazenado de forma a preservar o seu potencial biológico é um alimento sugerido como uma das porções de uma dieta equilibrada (contendo pelo menos 5 porções de frutas e vegetais), recomendada para uma vida saudável e longeva. / Evidence indicates an association between diets rich in fresh fruit and vegetables and a decreased incidence of cancers. Orange juice (OJ) is a food with chemoprotective potential highly relevant for study due to its widespread consumption. OJ is composed of several nutrients and bioactive compounds with antioxidant, antimutagenic, anticarcinogenic and antiathrerogenic activities. Vitamina C (Vit C) is the most abundant nutrient in OJ, and the only one that can be provided in amounts higher that the daily recommended intake by a single portion of OJ (200 mL). Vit C, like other components of OJ, can be either benefical or noxious for biological system, depending of their metabolic context. Indeed, some components of juices have been identified as mutagenic or carcinogenic when isolated. In this study we tested by comet assay in mice in vivo: 1) the genotoxicity of orange juice (OJ) and vitamin C (Vit C); 2) the genotoxicity of FeSO4 and CuSO4: 3) the modulator effect of orange juice and Vit C over genotoxicity of FeSO4 and CuSO4, as well as over methyl methanesulfonate (MMS) and cyclophosphamide (CP). We used the alkaline version of the comet assay to assess DNA damage in peripheral white blood cells of mice. Moreover, the levels of iron and copper in the whole blood and liver of the mice treated with this metals were evaluated by PIXE (Particle-Induced X-ray Emission). Groups of at least 6 mice (half of each gender) were orally given a single dose of either water (control), CP, MMS, FeSO4 or CuSO4. OJ (0.1 mL/Kg) was given either before (pre-treatment) or after (post-treatment) administration of the test substances. Vit C (1 and 30 mg/Kg) was only administered after treatment (post-treatment). DNA damage was evaluated 24 and 48 h after the beginning of the treatment. After 24 h, OJ induced a slight increase in DNA damage and Vit C was genotoxic (30 mg/Kg > 1 mg/Kg). Double treatment with Vit C (at 0 and 24 h) induced a cumulative genotoxic response at 48 h, more intense for the higher dose. FeSO4 and CuSO4 were genotoxic after 24 h and significant DNA damage repair was observed after 48 h of treatment. OJ pre-treatment reduced the genotoxicity of FeSO4 (preventive effect). OJ had a preventive effect over the genotoxicity of CuSO4. OJ post-treatment also reduced the genotoxicity of CuSO4 (restorative effect). OJ had both protective and reparative effects over MMS. OJ had only a reparative effect over CP. Both doses of Vit C enhanced DNA damage caused by FeSO4 and CuSO4. DNA damage caused by MMS was significantly reduced by the lower dose, but not by the higher dose of Vit C. For CP, the DNA damage was not affected by the post-treatment with any of the doses of Vit C. PIXE analysis indicated a positive correlation between DNA damage and the hepatic levels of iron and a negative correlation between whole blood copper and DNA damage. A negative correlation between hepatic iron and whole blood copper content was also seen in the treatment with both ferrous and cupric sulfates. These results point a dynamic interaction between the genotoxicity and the tecidual fate of iron and copper. Vit C and the other components of OJ have several biological effects, including: 1) action as targets for toxicants; 2) influence in drug metabolization/detoxification; and 3) effect in DNA repair and homeostasis. Moreover, Vit C and transition metals, particularly copper and iron, can induce oxidative stress; however, they can also play roles in antioxidant defense system, being a DNA repair modulators. Further data from other treatment schedules are needed to shed light upon the beneficial/noxious effects of OJ as a complex mixture, as well as of its compounds in genomic stability. Indeed, one glass of fresh or adequate processed and stored OJ can be among the options for the daily 5 portions (or even more) of fruits and vegetables recommended for a health and longevity.

A densidade mineral óssea na vida adulta, um importante componente de resistência óssea, depende do pico de massa óssea adquirido até o final da segunda década de vida. Cerca de 40% da massa óssea é acumulado entre 11 e 14 anos nas meninas e entre 13 e 17 anos nos meninos. O objetivo principal deste trabalho foi avaliar a ingestão média diária de cálcio de adolescentes das escolas públicas (estaduais e municipais) e privadas do município de Chapecó-SC. Outros objetivos foram verificar se a ingestão de cálcio dos adolescentes estava de acordo com as diretrizes de referências de ingestão (DRIs), investigar fatores que pudessem interferir na ingestão diária de cálcio (fatores socioeconômicos, hábitos alimentares diversos, hábitos familiares, prática de atividade física), comparar a ingestão diária de cálcio entre os estudantes das escolas públicas (municipais e estaduais) e das escolas privadas. Foram avaliados 214 alunos, com média de idade de 14,3 ± 1,0 anos, dos quais 58% eram do sexo feminino. A maior parte dos alunos estudava em escola pública municipal ou estadual (95%) e no turno da manhã (76%). Do total de alunos, 49,3% declarou tomar café da manhã diariamente, 20% informou quase nunca fazê-lo e 30,7% não tinham este hábito. A mediana de consumo diário de cálcio por aluno foi de 540mg (IQ: 312 – 829 mg) e somente 25 alunos (11,7%) apresentaram consumo de cálcio dentro das recomendações das DRIs para a idade. A maioria dos pais, mães e irmãos consumiam leite regularmente (77%, 79% e 87% respectivamente). Quanto ao consumo regular de alimentos que pudessem estar associados à absorção do cálcio, excetuando-se leite e derivados, 41% relataram consumir refrigerantes, 79,4% informaram comer carne, 10,6% ingeriam ovos e 39,7% tinham hábito de beber chás ou café. Concluímos que o consumo de cálcio dos adolescentes do município de Chapecó é inferior às necessidades diárias de cálcio para sexo e faixa etária estudada, achado também evidenciado em outros municípios brasileiros. Portanto, medidas devem ser adotadas para mudar este hábito, aumentando a ingestão de alimentos fontes de cálcio, especialmente no escolar. / Bone mineral density in adulthood, an important component of bone strength depends on peak bone mass acquired by the end of the second decade of life. About 40% of bone mass is accumulated between 11 and 14 years in girls and between 13 and 17 years in boys. The main objective of this study was to evaluate the average daily intake of calcium in adolescents from public schools (state and local) and private Chapecó-SC. Other objectives were to determine whether the calcium intake of adolescents was in accordance with the guidelines of reference intakes (DRIs), investigating factors that might interfere with daily calcium intake (socioeconomic factors, different dietary habits, family habits, practice physical activity), compare the daily calcium intake among students in public schools (state and local) and private schools. We evaluated 214 students, with a mean age of 14.3 ± 1.0 years, of which 58% were female. Most students studying in public school or state (95%) and in the morning (76%). Of all students, 49.3% said eating breakfast daily, 20% reported almost never do so and 30.7% did not have this habit. The median daily calcium intake was 540mg per student (IQ: 312 - 829 mg) and only 25 students (11.7%) had calcium intake within the recommendations of the DRIs for age. Most parents and siblings regularly consumed milk (77%, 79% and 87% respectively). As for the regular consumption of foods that could be associated with the absorption of calcium, except for milk and dairy products, 41% reported consuming soft drinks, 79.4% reported eating meat, eggs consumed 10.6% and 39.7% had the habit of drinking tea or coffee. We conclude that calcium intake of adolescent Chapecó is less than the daily requirement of calcium for sex and age groups, a finding also evident in other municipalities. Therefore, measures should be taken to change this habit, increasing intake of foods rich in calcium, especially in school.

A esclerose múltipla (EM) é a principal doença desmielinizante do sistema nervoso central (SNC), sendo considerada a principal causa de incapacidade neurológica em adultos jovens. Além das alterações imunes, neurológicas e vasculares que são encontradas na EM, tem sido postulado que o estresse oxidativo pode estar envolvido na patogênese desta doença. Os nucleotídeos ATP, ADP e o nucleosídeo adenosina são importantes moléculas capazes de modular vários processos biológicos incluindo tromboregulação, inflamação e neurotransmissão. O controle dos níveis extracelulares destas moléculas e a conseqüente sinalização purinérgica por elas induzida é realizada por uma variedade de enzimas como as NTPDases (Nucleotídeo Trifosfato Difosfoidrolase), E-NPPs (Ecto-Nucleotídeo Pirofosfatase/Fosfodiesterases), 5'- nucleotidase e a adenosina deaminase (ADA). Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade destas ectoenzimas em linfócitos e plaquetas de pacientes com a forma surto remissão da EM (SREM) e o papel da NTPDase e 5'-nucleotidase em sinaptossomas e plaquetas bem como a avaliação de parâmetros de estresse oxidativo em ratos submetidos à desmielinização experimental pelo brometo de etídio (BE) e tratados com vitamina E. Os resultados obtidos demonstraram alterações na atividade das ectoenzimas em linfócitos e plaquetas de pacientes com SREM. Em linfócitos foi observado um aumento na atividade e expressão da NTPDase e uma diminuição na atividade da ADA em pacientes com SREM quando comparados com o grupo controle. Uma diminuição na atividade e expressão da NTPDase, bem como uma diminuição na atividade das enzimas E-NPP, 5'-nucleotidase e ADA foi observada em plaquetas de pacientes com SREM quando comparadas com indivíduos saudáveis. Em relação ao modelo experimental os resultados demonstraram que em ratos submetidos à desmielinização por BE ocorreu um aumento na atividade da NTPDase e 5'-nucleotidase tanto em sinaptossomas quanto em plaquetas. Quando ratos desmielinizados foram tratados com vitamina E este composto foi capaz de reverter o aumento da NTPDase, entretanto a atividade da 5'-nucleotidase permaneceu aumentada em sinaptossomas e plaquetas quando comparado com o grupo controle. Além disso, foi observado também que parâmetros de estresse oxidativo como o conteúdo de TBARS e tióis não protéicos foram encontrados aumentados e a atividade da catalase estava diminuída em ratos desmielinizados pelo BE, sendo que o tratamento com vitamina E foi capaz de reverter estas alterações ao nível do grupo controle. Os resultados descritos aqui sugerem que as ectoenzimas estão envolvidas na modulação de respostas imunes, vasculares e neurológicas possuindo assim um papel relevante tanto na EM quanto em modelos experimentais de desmielinização. Além disso, a vitamina E pode interferir com a hidrólise dos nucleotídeos de adenina bem como o estresse oxidativo durante um evento desmielinizante sugerindo assim, que este composto pode ser importante no tratamento de patologias desmielinizantes com a EM. / Multiple sclerosis (MS) is the main demyelinating disease of the central nervous system (CNS). It is the most common cause of neurological disability among young adults. Immune, neurological and vascular alterations are found in MS and it has been postulated that oxidative stress may be involved in the pathogenesis of this disease. The nucleotides ATP, ADP and nucleoside adenosine are important molecules that modulate several biological processes including thromboregulation, inflammation and neurotransmission. The control of extracellular levels of these molecules and consequent purinergic signaling induced by them is controlled by a variety of enzymes such as NTPDases (Nucleotide Triphosphates Diphosphohydrolase), E-NPPs (Ecto-Nucleotide Pyrophosphatase Phosphodiesterases), 5'-nucleotidase and adenosine deaminase (ADA). Therefore, the objective of this study was to evaluate the activity of these ectoenzymes in lymphocytes and platelets of patients with the relapsing - remitting form of MS (RRMS) as well as the role of NTPDase and 5'- nucleotidase in synaptosomes and platelets and oxidative stress parameters in rats subjected to experimental demyelination with ethidium bromide (EB) and treated with vitamin E. The results showed changes in ectoenzyme activities in lymphocytes and platelets of RRMS patients. In lymphocytes, an increase in NTPDase activity and expression along with a decrease in ADA activity was observed in patients with RRMS when compared with the control group. A decrease in NTPDase activity and expression and a decrease in E-NPP, 5'- nucleotidase and ADA activities was observed in platelets of RRMS patients when compared with healthy subjects. As for the experimental model, the results showed that rats subjected to demyelination by EB demonstrated increased NTPDase and 5'-nucleotidase activities in both synaptosomes and platelets. When demyelinated rats were treated with vitamin E this increase in NTPDase was reversed, however 5'-nucleotidase activity remained increased in synaptosomes and platelets when compared with the control group. Furthermore, we observed that oxidative stress parameters such as TBARS content and non-protein thiols were increased and catalase activity was decreased in demyelinated rats and that treatment with vitamin E reversed these changes in the control group. The results reported here suggest that ectoenzymes are involved in the modulation of immune, vascular and neurological responses, thus having an important role both in MS and in experimental models of demyelination. Moreover, vitamin E may interfere with the hydrolysis of adenine nucleotides and oxidative stress during a demyelinating event which suggests that this compound could be important in the treatment of demyelinating diseases such as MS.

Introdução: a ação antiestrogênica do tamoxifeno (TAM) é dependente da bioativação à endoxifeno (EDF) e 4-hidroxitamoxifeno (HTF). É bastante provável que sua eficácia terapêutica esteja relacionada ao alcance de um limiar nos níveis de EDF (>5,9 ng mL-1). Entretanto, as concentrações plasmáticas de EDF são altamente variáveis, em parte devido a polimorfismos no gene da CYP2D6 e ao uso de inibidores da enzima. A CYP3A4 também contribui para a formação do EDF e pode ser influenciada por interações medicamentosas e exposição solar. Recentemente, o polimorfismo CYP3A4*22 foi associado à redução da atividade da enzima. Entretanto, pouco se sabe sobre seu impacto na formação do EDF. Objetivo: Em virtude da alta variabilidade na resposta terapêutica e os múltiplos fatores associados ao metabolismo do TAM, o presente estudo objetivou avaliar o efeito dos polimorfismos da CYP2D6 e CYP3A4, interações medicamentosas e exposição à vitamina D na bioativação do TAM. Adicionalmente, dois métodos analíticos para a otimização do tratamento através da medida das razões metabólicas da CYP2D6 e quantificação do TAM e metabólitos em manchas de sangue seco (DBS) foram desenvolvidos. Patientes & métodos: Cento e dezesseis pacientes em tratamento adjuvante com o TAM forneceram amostras de plasma para dosagens do TAM, metabótilos e 25OHD3 no inverno e verão. As concentrações de TAM e metabólitos em plasma e DBS foram medidas por LCMS/ MS. Foram avaliados os genótipos da CYP2D6 e CYP3A4, bem como fenótipos obtidos pelas razões metabólicas determinadas após administração dos fármacos sonda dextrometorfano e omeprazol. As concentrações de vitamina D3 em plasma foram quantificadas por HPLC-UV. Foram obtidas informações sobre uso de inibidores ou indutores das enzimas e suplementação de vitamina D. Resultados: Cerca de 20% das pacientes apresentaram atividade metabólica reduzida para a CYP2D6 e 7% para a CYP3A4. Aproximadamente 30% das metabolizadoras lentas (ML), 56% das metabolizadoras intermediárias (MI) e 11.3% das metabolizadoras rápidas (MR) usavam fármaco inibidor da CYP2D6. As concentrações de EDF diminuiram proporcionalmente à redução da atividade metabólica da CYP2D6 (ML 2,79 ng mL-1, MI 5.36 ng mL-1 e MR 10,65 ng mL-1, P<0.01). A mediana das concentrações plasmáticas de TAM e HTF em pacientes CYP2D6 MI com metabolismo reduzido da CYP3A4 (161,50 ng mL-1 e 1,32 ng mL-1, respectivamente) foram superiores as encontradas nos pacientes CYP2D6 MI com metabolismo funcional da CYP3A4 (122,07 ng mL-1 e 0.61 ng mL-1, respectivamente, P<0.05). Adicionalmente, as concentrações de HTF e TAM foram aproximadamente 50% superiores em pacientes com genótipo CYP3A4*22 em comparação aos pacientes *1/*1. A sazonalidade também contribuiu para a variabilidade das concentrações dos metabólitos ativos, os níveis de EDF foram 24% e HTF 42% superiores no verão. Nas análises de DBS, foi possível identificar 96% dos pacientes com concentrações de EDF abaixo do limiar clínico, indicando seu potencial uso no monitoramento terapêutico do TAM. Conclusão: a CYP3A4 contribui para a bioativação do TAM através da formação de HTF, tornando-se mais importante em condições de atividade diminuída ou ausente da CYP2D6. Os níveis plasmáticos de EDF e HTF demonstraram ser influenciados pela sazonalidade, com aumento significativo no verão. Entretanto o mecanismo relacionado a associação da vitamina D, exposição solar e bioativação do TAM permanecem por ser elucidados. / Background: The therapeutic antiestrogenic effect of tamoxifen (TAM) requires metabolic activation to endoxifen (EDF) and 4-hydroxytamoxifen (HTF). Adequate therapeutic outcome seems to be dependent on the achievement of a threshold of EDF concentration (>5.9 ng mL-1). EDF plasma levels are highly variable among patients, which could be partly explained by polymorphisms in the CYP2D6 gene and the use of enzymes inhibitor drugs. In a lesser extent, CYP3A4 also contributes to EDF formation and can be influenced by drug interactions and sun exposure. From a genetic point of view, a recently described CYP3A4*22 polymorphism has been associated with reduced enzyme activity. However, there is little knowledge about the impact of CYP3A4 polymorphisms on EDF formation. Objective: In view of the large variability on therapeutic response and the multiple factors associated to TAM metabolic activation, the present study aimed to evaluate the effect of CYP2D6 and CYP3A4 polymorphisms, drug interactions and vitamin D exposure on TAM metabolic activation. Additionally, two analytical methods for optimization of TAM treatment by measurement of CYP2D6 metabolic ratios and quantification of TAM and metabolites in dried blood sopts (DBS) were developed. Patients & methods: One hundred and sixteen patients under TAM therapy provided blood samples for measurement of TAM, NDT, EDF, HTF and 25OHD3 at Winter and Summer. TAM and metabolites were measured in plasma and DBS by LC-MS/MS. CYP2D6 and CYP3A4 genotypes and phenotypes, given according to [DMT]/[DTP] and [OME]/[OMS] metabolic ratios after administration of probe drugs, were also evaluated. Vitamine D3 was measured in plasma by HPLC-UV. Data on use of CYP2D6 and CYP3A4 inhibitor or inducer drugs and vitamin D supplementation were recorded. Results: About 20% of patients had reduced CYP2D6 metabolic activity and 7% CYP3A4 impaired metabolism. Approximately 30% of CYP2D6 poor metabolizers (PM), 56% of intermediate metabolizers (IM) and 11.3% of extensive metabolizers (EM) were using CYP2D6 inhibitor drugs. EDF levels diminished proportionally to the reduction of CYP2D6 metabolic activity (PM 2.79 ng mL-1, IM 5.36 ng mL-1 and EM 10.65 ng mL-1, P<0.01). Median plasma levels of TAM (161.50 ng mL-1) and HTF (1.32 ng mL-1) in CYP2D6 IM patients with reduced CYP3A4 metabolism were higher (P<0.05) than those from CYP2D6 IM patients with functional CYP3A4 metabolism (122.07 ng mL-1 and 0.61 ng mL-1, respectively). Indeed, HTF and TAM plasma levels were approximately 50% higher in patients with CYP3A4*22 genotype compared to patients with alleles *1/*1. Seasonality also contributed to EDF and HTF variability, summer concentrations were 24% and 42% higher compared to winter. The DBS method was able to identify 96% of patients with plasma EDF concentrations below the clinical threshold and can be used in therapeutic monitoring of TAM. Conclusion: Our findings suggest that CYP3A4 contributes to the bioactivation of TAM through formation of HTF and becomes increasingly important in conditions of diminished or absent CYP2D6 activity. A significant variability on EDF and HTF exposure related to seasonality was identified, with considerable higher plasma concentrations during summer. The mechanism relating vitamin D status, seasonality and biotransformation of TAM still remains to be elucidated.

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Before putting the testis plastic bags to SI, it was measured scrotal circumference of all animals. Animals of both groups were induced to SI during 18 days, period of which they were submitted to six semen harvests, one before SI (0d), one at the finish of SI (18d) and four on the post-insulation period (PSI). At the end of SI, it was chosen randomly three animals of each group to be submitted to bilateral orchiectomy. The G2 animals have diet supplementation with Selenium and Vitamin E during this period. The maintenance diet was offered to both groups during 42 days, corresponding to post-scrotal insulation (PSI). At the end of this period, the animals of G1 and G2 groups also were orchietomized to have biometric and volumetric testis parameters, where left and right testis as well as left and right epididymis were weighted and prepared to biometric and histometric analyses. The semen harvests were done by eletroejaculation method. The Seleniun and Vitamin E group animals have significantly high scrotal circumference at the end of SI, whereas the Selenium and Vitamin E group had values significantly higher of scrotal circumference at the end of SI, whereas the Control animals were more sensitive to degenerative effects of the SI on the same period. The SI time had significant effect on the quanti-qualitative characteristics of the semen on the animals of both groups (G1 and G2), with reduction of the evaluated parameters (PM, vigor, sperm concentration, acrosoma and DNA integrity), except to semen volume. At the same way it was observed damages like testis degeneration on orchiectomized animals of both groups. However, there was significant difference on the biometric and volumetric parameters of testis parenchyma only to blood vessel volume at this period. In contrast, the serum testosterone concentration increased highly at the end of SI and differed between groups (P<0.05). During the PSI period (36d PSI) there was no treatment effect on the seminal parameters, but it was observed day effect. However, at the end of PSI period the seminal parameters have values close to basal day (0d). The biometric and volumetric parameters of testis parenchyma, at the end of PSI period, have significant difference on the seminiferous tubules and seminiferous epithelium, as well as on the tubular diameter and ephitelium height of goats induced to scrotal insulation. It was observed also significant variation between groups to serum testosterone concentration. It can be concluded that the supplementation with Selenium and Vitamin E did not prevent drastic alterations caused by scrotal insulation technique. However, the continuous supplementation, 36 days after the end of SI, accelerated the spermatogenic recuperation process on goats. / Objetivando verificar o efeito da suplementação alimentar com Selênio e Vitamina E (Selevit E®) nos parâmetros testiculares e seminais de caprinos submetidos a estresse térmico induzido por insulação escrotal (IE), utilizou-se 12 animais com idade variando entre 7 e 8 meses, os quais foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos (G1= Controle; G2= Selênio e Vitamina E - Selevit E), passando por um período de adaptação de 60 dias, período no qual os animais foram submetidos a duas colheitas de sêmen e pesados a cada sete dias para correção alimentar de dieta de mantença e correção da suplementação para o G2. Antes de serem colocadas as bolsas para IE, realizou-se a mensuração da circunferência escrotal dos animais de ambos os grupos. Animais de ambos os grupos foram induzidos a IE durante 18 dias, período no qual foram submetidos a duas colheitas de sêmen, uma anterior à IE (0d), uma ao término da IE (18d) e quatro no período PIE (7, 21, 35 e 42d). Ao término da IE, sortearam-se aleatoriamente três animais de cada grupo para orquiectomia bilateral, mantendo-se a suplementação alimentar com Selênio e Vitamina E nos animais restantes do G2. A dieta de mantença foi fornecida para ambos os grupos por mais 42 dias, correspondendo à fase de pós IE (PIE), no final do qual os animais restantes de G1 e G2 também foram orquiectomizados para registro de parâmetros biométricos e volumétricos do parênquima testicular, onde os testículos direito e esquerdo, assim como o epidídimo direito e esquerdo, foram pesados e preparados para posterior análise biométrica e histométrica. As colheitas de sêmen foram realizadas pelo método de eletroejaculação. O grupo de animais que recebeu Selênio e Vitamina E teve média significativamente maior de circunferência escrotal ao término da IE, enquanto que o grupo controle apresentou-se mais suscetíveis aos efeitos degenerativos da IE. O tempo de IE teve efeito significativo sobre as características quanti-qualitativas do sêmen nos animais de ambos os grupos (G1 e G2), com redução dos parâmetros avaliados (MIP, vigor, concentração espermática, integridade de DNA e de acrosoma), exceto o volume seminal. Da mesma forma, observou-se lesões compatíveis com degeneração testicular nos animais orquiectomizados de ambos os grupos. No entanto, constatou-se diferença significativa para os parâmetros biométricos e volumétricos do parênquima testicular apenas para o parâmetro vaso sanguíneo nesse mesmo período. Em contrapartida, a concentração sérica de testosterona aumentou significativamente ao término da IE e diferiu estatisticamente (P<0,05) entre os grupos. Durante o período PIE (42d PIE) não foi observado efeito de tratamento nos parâmetros seminais, mas constatou-se efeito de dias. No entanto, ao término do período PIE os parâmetros seminais apresentaram-se, em média, com valores próximos aos valores antes da IE. Os parâmetros biométricos e volumétricos do parênquima testicular, ao término do período PIE, evidenciaram diferença significativa para os parâmetros de túbulo seminífero, epitélio seminífero, diâmetro tubular e altura de epitélio. Pode-se observar também variação significativa entre os grupos para a concentração sérica de testosterona. Conclui-se que o suplemento com Selênio e Vitamina E não previniu ou reverteu os efeitos provocados pela técnica de insulação escrotal. Entretanto, a continuação desta suplementação, 42 dias após término da IE, acelerou a recuperação do processo espermatogênico em caprinos.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-09T12:30:04Z No. of bitstreams: 1 Zoraide Fernandes Coleto.pdf: 876143 bytes, checksum: b13d1564a69ff252704812c9a3bbebcd (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-09T12:30:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zoraide Fernandes Coleto.pdf: 876143 bytes, checksum: b13d1564a69ff252704812c9a3bbebcd (MD5) Previous issue date: 2006-03-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Antioxidants act as protective agents of spermatozoa preventing the reactive oxygen species formation and consequent lipidic peroxidation rising the motility and the vigor and avoiding the damage provoked to the DNA. The aiming of this work was to study the effect of different concentrations of vitamin C and Trolox (water soluble analogue of vitamin E) on the viability of dog sperm cells submitted to the cryopreservation process. The Pool with the second semen fraction of four dogs, harvested through digital manipulation was supplemented with vitamin C and Trolox on the concentration of 200 X 106 sperm cells/dose, according to each group: Exp 1: G1= Tris- egg yolk (Control); G2 = Tris-egg yolk + 1200M of vitamin C; G3= Tris-egg yolk + 2400M of vitamin C; G4= Tris-egg yolk + 100M of Trolox e G5= Tris-egg yolk + 200M of Trolox; Exp 2: G1 = Tris-egg yolk (Control); G2 = Tris-egg yolk + vitamin C (1200M); G3 = Tris-egg yolk + Trolox (200M) and G4 = Tris-egg yolk + vitamin C (1200M) + Trolox (200M); Exp 3: G1 = Tris-egg yolk or Kenney (Control); G2 = Tris-egg yolk or Kenney + vitamin C (1200 M); G3= Tris-egg yolk or Kenney + Trolox (200 M); G4= Tris-egg yolk or Kenney + vitamin C (1200 M) + Trolox (200 M). The samples were frozen using two freezing curves (Curve 1 = -0,25oC/min until 5 oC, -15 oC/min until -5 oC, -10 oC/min until –120 oC; Curve 2 = -0,25 oC/min until 5 oC, -20 oC/min until -5 oC, -20 oC/min until –120 oC), being C1 on the 1, 2, and 3 Experiments and C2 on the 3 Experiment. The samples were stored in liquid nitrogen. After thawed, it was obshigher (P<0.05) among Control, vitamin C (1200M) and Trolox (200M) groups. The vigor, motility, acrosomal and DNA integrity, as well as the percentage of sperm cells stained with nitroblue tetrazolium were not different among experimental groups. On the Exp. 2, the spermatic motility after thawing did not differ among the groups or between the two freezing curves. On the C1, the group diluted with vitamin C + Trolox showed more acrosomal integrity, but on the C2 there was no difference among groups. The percentage of intact acrosome from curve 1, did not differ between the control group (G1) and with vitamin C (G2), but were inferior (P < 0,05) than the vitamin C + Trolox (G4), meanwhile in the Curve 2, there was no difference among the groups. Comparing the freezing curves, it was found a difference (P < 0,05) on the percentage of acrosome prevailed from G2 (vitamin C). Big percentages of sperm cells showed no oxidative stress or, when it occurred, it was concentrated in the middle section of the cells. On the Exp. 3, the sperm motility of the group diluted with Tris- egg yolk supplemented with vitamin C + Trolox were higher than the others. Higher percentage of the cells with intact acrosome were observed on the group supplemented with vitamin C + Trolox. Samples diluted with Kenney (no antioxidant) showed higher percentage of intact acrosome than the diluted on the Tris-egg yolk (no antioxidant). It was observed higher percentage of cells (P<0.05) with head and tail showing the formation of formazana ++ on the samples added with Trolox (G3) and diluted with Tris – egg yolk than those diluted in Kenney. It is concluded that vitamin C (1200M) and Trolox (200M) cab be used to freeze dog semen; The addition of vitamin C and Trolox in Tris – egg yolk diluted samples rise the viability of the spermatic cellserved on the Exp.1 that the frozen at -150 oC/min and -10 oC/min on the negative curves; the addition of vitamin C associated with Trolox minimize the deleterious effects of the cryopreservation of semen on the sperm acrosomal integrity on the diluted samples in Tris – egg yolk. / Anti-oxidantes funcionam como agentes protetores dos espermatozóides impedindo a formação de espécies de oxigênio reativo (ROS) e conseqüente peroxidação lipidica, aumentando a motilidade e o vigor espermático, e evitando os danos provocados ao DNA. Objetivou-se com este trabalho estudar o efeito da adição de vitamina C e Trolox na congelação de sêmen de cão da raça Cocker Americano. O Pool da segunda fração do sêmen de quatro cães, colhida através de manipulação peniana, foi diluído e suplementado com vitamina C e Trolox na concentração de 200 x 106 espermatozóides/dose, de acordo com cada grupo. Exp. 1: G1= Tris-gema (Controle); G2= Tris-gema + 1200M de vitamina C ; G3= Tris-gema + 2400M de vitamina C; G4= Tris-gema + 100M de Trolox e G5= Tris-gema + 200M de Trolox; Exp. 2: G1= Tris-gema (Controle); G2= Tris-gema + vitamina C (1200M); G3= Tris-gema + vitamina E (200M); G4= Tris-gema + vitamina C (1200M) + E (200M); Exp. 3: G1= Tris-gema ou Kenney (Controle); G2 = Tris-gema ou Kenney + vitamina C (1200 M); G3= Tris-gema ou Kenney + Trolox (200 M); G4= Tris-gema ou Kenney + vitamina C (1200 M) + Trolox (200 M). As amostras foram congeladas utilizando duas curvas (C1 = -0,25 oC/min até 5 oC, -15 oC/min até -5 oC, -10 oC/min até –120 oC; C2 = -0,25 oC/min até 5 oC, -20 oC/min até -5 oC, -20 oC/min até –120 oC), sendo C1 nos Exp. 1, 2 e 3, e C2 no Exp. 2, e armazenadas em nitrogênio líquido. Após descongelação a 37 oC durante 30 segundos, observou-se no Exp.1, motilidade espermática significativamente superior (P<0,05) nos grupos controle e tratados com vitamina C (1200M) ou Trolox (200M). O vigor, a integridade do acrossoma e do DNA, bem como o percentual de células espermáticas coradas com Nitroblue tetrazolium não diferiram entre os grupos experimentais. No Exp. 2, a motilidade não diferiu entre grupos ou entre curvas de congelação. Na curva C1, o grupo adicionado de vitamina C + Trolox apresentou mais células com acrossomas intactos, enquanto na C2 não houve diferença entre os grupos. O porcentual de acrossomas íntegros da curva 1, não diferiu entre os grupos controle (G1) e com vitamina C (G2), mas foram inferiores (P < 0,05) ao de vitamina C + Trolox (G4), enquanto na curva 2, não houve diferença entre os grupos. Ao se comparar curvas de congelação encontrou-se diferença (P<0,05) no porcentual de acrossomas reagidos do G2 (vitamina C). Grandes porcentuais de espermatozóides apresentaram-se sem estresse oxidativo ou, quando ocorria, concentrava-se na peça intermediária das células. No Exp. 3, a motilidade espermática dos grupos diluídos com Tris-gema e Tris-gema + vitamina C + Trolox foram superiores aos demais grupos. Maior porcentual de células com acrossomas íntegros foi observado no grupo suplementado com vitamina C + Trolox. Amostras diluídas em Kenney (sem anti-oxidante) apresentaram maior porcentual de acrossomas íntegros do que as diluídas em Tris-gema (sem anti-oxidante). Observou-se maior formação de formazana na cabeça e cauda de células diluídas em Tris-gema + Trolox, do que nas diluídas em Kenney. Conclui-se que a vitamina C (1200M) e Trolox (200M de Trolox) podem ser utilizadas para congelação de sêmen de cão; A adição de vitamina C e Trolox em amostras diluídas em Tris-gema aumenta a viabilidade das células espermáticas congeladas a -15 oC/min e -10 oC/min nas curvas negativas; A suplementação de vitamina C + Trolox minimiza os efeitos deletérios da criopreservação do sêmen sobre a integridade do acrossoma espermático de amostras diluídas em Tris-gema.

Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2016-10-05T18:50:29Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE_Mariana Barbosa_VERSÃO_BIBLIOTECA_CENTRAL.pdf: 1489451 bytes, checksum: 4e3839e49acb76090a6b6fbb42273bdd (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-05T18:50:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE_Mariana Barbosa_VERSÃO_BIBLIOTECA_CENTRAL.pdf: 1489451 bytes, checksum: 4e3839e49acb76090a6b6fbb42273bdd (MD5) Previous issue date: 2016-01-01 / Capes / Este trabalho avaliou a presença de compostos bioativos em sementes de alguns representantes de Malvaceae (Basiloxylon brasiliensis (Allemão) K. Schum., Christiania africana DC., Pachira aquatica Aubl., Sterculia foetida L.), Meliaceae (Guarea guidonea (L.) Sleumer) e Sapindaceae (Allophylus puberulus (Cambess.) Radlk. e Paullinia elegans Cambess.) presentes do Brasil, a fim de indicar sua aplicação tecnológica. Observou-se que a maioria das sementes apresentou elevado teor de óleo (> 30%) com predomínio dos ácidos graxos insaturados. Os óleos de G. guidonea, S. foetida e P. aquatica apresentaram maiores níveis de compostos fenólicos, os de C. africana e B. brasiliensis foram mais abundantes em tocóis e β-caroteno e o de B. brasiliensis apresentou maior poder antioxidante. O método de microextração propiciou uma extração mais eficiente dos tocóis e β – caroteno em relação ao método em soxhlet em alguns dos óleos estudadas. Os carboidratos e lipídios foram os principais componentes das sementes e foi observada a presença de açúcares totais e redutores, alcaloides, compostos fenólicos e terpenoides nos extratos orgânicos polares das sementes (metanol 80% e acetona 80%). Os extratos em acetona 80% foram mais abundantes em compostos fenólicos, flavonoides e taninos totais em algumas sementes. As sementes de P. aquatica demonstraram maior teor de compostos fenólicos e, o maior conteúdo de flavonoides, taninos totais e a maior atividade antioxidante foram observados em S. foetida. Os resultados demonstram que as sementes em estudo são ricas em substâncias com propriedades bioativas, especialmente B. brasiliensis, C. africana, S. foetida e P. aquatica, sugerindo-as como fontes alternativas de substâncias com aplicação industrial. / In this work was evaluated the presence of bioactive compounds in the seeds of some representatives from Malvaceae (Basiloxylon brasiliensis (Allemão) K. Schum., DC Christiania africana, Pachira aquatica Aubl., Sterculia foetida L.), Meliaceae (Guarea guidonea (L.) Sleumer) and Sapindaceae (Allophylus puberulus (Cambess.) Radlk. and Paullinia elegans Cambess.) presented in Brazil in order to indicate their possible technological application. It was observed that most of the seeds showed high level of oil (> 30%) with a predominance of unsaturated fatty acids. Oils of G. guidonea, S. foetida and P. aquatica showed higher levels of phenolic compounds, C. africana and B. brasiliensis were more abundant in tocols and β-carotene and B. brasiliensis presented higher antioxidant power. The microextraction method provided a more efficient extraction of tocols and β-carotene in relation to the method in Soxhlet in the some oils studied. Carbohydrates and lipids were the main components of the seeds and it was observed the presence of total and reducing sugars alkaloids, phenolic compounds and terpenoids, in the polar organic extracts of the seeds (80% methanol and 80% acetone). The extracts in 80% acetone were more abundant in phenolic compounds, flavonoids and total tannins in some seeds. P. aquatic seeds demonstrated higher content of phenolic compounds. The highest content of flavonoids and total tannins and higher antioxidant activity were observed in S. foetida. The results show that the seeds in study are rich in substances with bioactive properties, especially B. brasiliensis, C. africana, S. foetida and P. aquatica, suggesting them as alternative sources of substances with industrial application.

Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2016-10-18T17:32:34Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Silvia Alves versão final biblioteca.pdf: 4384743 bytes, checksum: 6869052e5eb02362b089b2cba4aaff8b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-18T17:32:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Silvia Alves versão final biblioteca.pdf: 4384743 bytes, checksum: 6869052e5eb02362b089b2cba4aaff8b (MD5) Previous issue date: 2016-08-30 / CNPQ / A alergia às proteínas do leite de vaca (APLV) é definida como uma reação adversa imunologicamente mediada. A complexidade da APLV é observada tanto no espectro de apresentações clínicas como na sua história natural, e na sua etiologia, sobrepondo-se fatores genéticos e ambientais. O objetivo deste estudo foi analisar a frequência de polimorfismos nos genes das citocinas regulatórias (TGF-β1 e IL-10), inflamatória (IL-4) e no gene do receptor de vitamina D (VDR) em crianças com e sem APLV. A amostra foi selecionada por conveniência, com coleta de dados nos ambulatórios de Gastroenterologia Pediátrica, Alergia e Imunologia Pediátrica e Puericultura do Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Pernambuco, entre abril de 2013 a junho de 2015. Foram avaliadas 154 crianças. Destas, 70 foram diagnosticadas com APLV (casos) e 84 eram saudáveis (grupo comparativo). O grupo com APLV apresentou maior proporção de crianças menores de um ano de idade (68,6% vs 35,7%; p=0,000), nascidos através de cesariana (85,7% vs 67,9%; p=0,010), com pais e mães com nível de escolaridade elevada e maior frequência de mães com atopia (55,7% vs 33,3%; p=0,005), em relação ao grupo comparativo. Dentre os casos, 31 (44,3%) foram classificados como portadores de sintomas predominantemente gastrintestinais e 39 (55,7%) com manifestação de sintomas cutâneos/respiratórios/anafilaxia. A idade (mediana) ao início dos sintomas foi menor no grupo gastrintestinal (30 dias vs 90 dias, p= 0,000), quando comparado ao grupo cutâneo/respiratório/anafilaxia. Ao término do estudo, a ausência de sintomas foi identificada em 29 (41,4%) das 70 crianças com APLV. A idade (mediana) nesse período foi menor no grupo gastrintestinal, em comparação ao grupo cutâneo/respiratório/anafilaxia (16 meses vs 20 meses; p= 0,036). A análise dos polimorfismos genéticos não apresentou diferença significante nas frequências genotípicas e alélicas para os genes das citocinas TGF-β1 (-509), IL-10 (-1082, -819 e -592), IL-4 (-590), receptor de IL-4 (IL-4R) e VDR (Fok I e Taq I) entre os casos e o grupo comparativo e entre os dois grupos de fenótipos clínicos e o grupo comparativo. Após controle para possíveis fatores de confusão, a cesariana (OR= 2,68; IC95%: 1,16 – 6,20) e a atopia materna (OR= 2,45; IC95%: 1,00 – 3,85) foram as variáveis associadas a maior chance para desenvolver APLV no grupo estudado. Quando estratificadas por fenótipo clínico, a menor duração do aleitamento materno exclusivo (OR= 4,85; IC95%: 1,81 – 13,03) e a atopia materna (OR= 3,59; IC95%: 1,44 – 8,92) foram associadas ao fenótipo clínico gastrintestinal, enquanto a cesariana (OR= 3,50; IC95%: 1,20 – 10,23) e o nascer prematuro (OR= 3,19; IC95%: 1,07 – 9,49) foram associados ao aumento da chance para o fenótipo clínico de reações cutâneas/respiratórias/anafilaxia. Concluiu-se que os polimorfismos nos genes das citocinas tolerogênicas (TGF-β1 e IL-10), inflamatória (IL-4) e do gene VDR (Fok I e Taq I) não apresentaram associação estatística com a APLV e os respectivos fenótipos clínicos. Contudo, a atopia materna, a menor duração do aleitamento materno exclusivo, a cesariana e a prematuridade apresentaram associação, podendo indicar que o ambiente pode exercer um efeito potencialmente maior sobre a patogênese dessa enfermidade. / Cow’s milk protein allergy (CMPA) is defined as an immunologically mediated adverse reaction. The complexity of CMPA is demonstrated both in the range of clinical presentations and its natural history as well as the etiology, with the overlapping of genetic and environmental aspects. The aim of the present study was to analyze the frequency of polymorphisms in the genes of regulatory (TGF-β1 and IL-10) and inflammatory (IL-4) cytokines as well as the gene of the vitamin D receptor (VDR) in children with and without CMPA. A convenience sample was used. Data were collected at the pediatric gastroenterology and pediatric allergy and immunology clinics of the hospital pertaining to the Federal University of Pernambuco (Brazil) between April 2013 and June 2015. A total of 154 children were evaluated, 70 of whom were diagnosed with CMPA (cases) and 84 were considered healthy (comparative group). The group with CMPA had higher proportions of children less than one year of age (68.6% vs. 35.7%; p=0.000), those born by cesarean section (85.7% vs. 67.9%; p=0.010), those whose parents had a high level of schooling and those whose mothers had atopy (55.7% vs. 33.3%; p=0.005) in comparison to the comparative group. Among the cases, 31 (44.3%) were classified as having predominantly gastrointestinal symptoms and 39 (55.7%) were diagnosed with skin/respiratory/anaphylaxis symptoms. Median age at the onset of symptoms was lower in the gastrointestinal group in comparison to the skin/respiratory/anaphylaxis group (30 days vs. 90 days, p=0.000). At the end of the study, an absence of symptoms was found in 29 of the 70 children with CMPA (41.4%). Median age in this period was lower in the gastrointestinal group than the skin/respiratory/anaphylaxis group (16 months vs. 20 months; p=0.036). The analysis of genetic polymorphisms revealed no significant differences in genotypic or allelic frequencies for the genes of the cytokines TGF-β1 (-509), IL-10 (-1082, -819 and -592), IL-4 (-590), IL-4 receptor (IL-4R) or vitamin D receptor-VDR (Fok I and Taq I) between the case and comparative groups or between the two clinical phenotype groups and comparative group. After controlling for possible confounding factors, cesarean delivery (OR=2.68; 95%CI: 1.16-6.20) and maternal atopy (OR=2.45; 95%CI: 1.00-3.85) were associated with a greater chance of developing CMPA. When stratified based on clinical phenotype, a shorter duration of exclusion breastfeeding (OR=4.85; 95%CI: 1.81-13.03) and maternal atopy (OR=3.59; 95%CI: 1.44-8.92) were associated with the gastrointestinal phenotype, whereas cesarean birth (OR=3.50; 95%CI: 1.20-10.23) and premature birth (OR=3.19; CI95%: 1.07-9.49) were associated with an increased chance of the clinical phenotype of skin/respiratory/anaphylaxis reactions. In conclusion, polymorphisms in the genes of tolerogenic (TGF-β1 and IL-10) and inflammatory (IL-4) cytokines and the VDR gene (Fok I and Taq I) were not significantly associated with CMPA or its clinical phenotypes. However, maternal atopy, a shorter duration of exclusion breastfeeding, cesarean delivery and premature birth were associated, which indicates that the environment can have a potentially greater effect on the pathogenesis of this disease.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-04-26T12:32:52Z No. of bitstreams: 1 Thiago Arcoverde Maciel.pdf: 2765936 bytes, checksum: b2a040b8c8b92a2259f8f141af305868 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-26T12:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Thiago Arcoverde Maciel.pdf: 2765936 bytes, checksum: b2a040b8c8b92a2259f8f141af305868 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Urolithiasis is a metabolic disease of complex and multifactorial etiology, characterized by uroliths formation in the urinary system. It becomes clinically important when obstruction occurs, with little chance of reversal, and prevention is the best option for maintaining the integrity of the reproductive capacity. For this, one must know the biochemical profile of animals and fix the possible factors that may be related to the formation of uroliths. Morphometric study in turn, enables the comparative observation and description of changes and can therefore be used as a method of diagnostic. Urinary acidification is cited as an efficient alternative for the prevention, so vitamin C was used. In this study, 20 healthy sheep, male (not neutered), Santa Ines breed, aged approximately 90 days, were divided into three groups (G1 n=7 - calculogenic diet without vitamin C, G2 n=7 - calculogenic diet with vitamin C and G3 n=6 - control). To analyze the biochemical profiles groups 1 and 2 were compared and the morphometric analysis the three groups were compared. Animals were examined weekly, allowing direct observation of clinical signs, such as prostration/restlessness, penile exposure, abdomen kicking, urethral process congestion, among others. Analysis of biochemical profiles of urine and serum revealed hyperproteinemia (8.99g/dL) and proteinuria (43.82g/dL) in 57.14% aciduria (G1) and 71.43% (G2) and the presence of erythrocytes, leukocytes, bacteria and sperm to the urinary sediment. There was an important increase of phosphorus and magnesium e there was a substantial decrease of calcium which was present in 50% of uroliths samples analyzed. At the end of the experimental time animals were slaughtered and necropsy of them was followed by morphometry of the organs of the urinary system. Necrosis of urethral process and bladder with extensive bleeding area were observed during the necropsy procedure. The width of the kidneys and ureters were higher in G2, which may have contributed to lower retention of uroliths on this site. / Urolitíase é uma doença metabólica de etiologia complexa e multifatorial, caracterizada pela formação de urólitos no sistema urinário. Torna-se clinicamente importante quando ocorre obstrução, havendo poucas chances de reversão do quadro, sendo a prevenção a melhor opção para manutenção da capacidade reprodutiva. Para isso, deve-se conhecer o perfil bioquímico dos animais e corrigir os possíveis fatores que estão relacionados à formação dos urólitos. O estudo morfométrico por sua vez, possibilita a observação comparativa e descrição de alterações podendo ser empregado como método de auxílio diagnóstico. A acidificação urinária é citada como alternativa eficiente para a prevenção, por isso a vitamina C foi utilizada. Nesse estudo foram utilizados 20 ovinos hígidos, da raça Santa Inês, machos (não castrados), com idade aproximada de 90 dias, distribuídos em três grupos (G1 n=7 – dieta calculogênica sem vitamina C, G2 n=7 – dieta calculogênica com vitamina C e G3 n=6 – controle). Para análise dos perfis bioquímicos foram confrontados os grupos 1 e 2, e para a morfometria foram comparados os três grupos. Os animais foram examinados semanalmente, permitindo a imediata observação dos sinais clínicos, como prostração/inquietação, exposição peniana, escoiceamento do abdômen, congestão de processo uretral. A bioquímica sérica e urinária revelou hiperproteinemia (8,99g/dL) e proteinúria (4,38g/dL), acidúria em 57,14% (G1) e 71,43% (G2) e presença de hemácias, leucócitos, bactérias e espermatozóides ao exame do sedimento urinário. Houve elevação expressiva do fósforo e do magnésio e diminuição substancial do cálcio que esteve presente em 50% das amostras de urólitos analisadas. Ao término do experimento foi realizado o abate e necropsia dos animais seguindo-se a morfometria dos órgãos do sistema urinário. Necrose de processo uretral e bexiga repleta com extensa área de hemorragia foram observados durante necropsia. Os rins e ureteres apresentaram valores morfométricos distintos entre os grupos, sendo maiores no G2, o que pode ter contribuído para uma menor retenção de cálculos neste local.