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Albumina modificada por glicação avançada no diabete melito tipo 1 e 2 prejudica o transporte reverso de colesterol e favorece o acúmulo de lípides em macrófagos / Impairment in reverse cholesterol transport and macrophage lipid accumulation induced by advanced glycated albumin drawn from uncontrolled type 1 and type 2 diabetes mellitus patients

Lima, Adriana Machado Saldiba de 24 February 2011 (has links)
Produtos de glicação avançada (AGE) são prevalentes no diabete melito e alteram o metabolismo de lípides e lipoproteínas. Neste estudo, avaliou-se a influência da albumina, isolada do soro de indivíduos controles (C, n =12) e de portadores de diabete melito tipo 1 (DM 1, n=13) e tipo 2 (DM 2, n=11), com controle glicêmico inadequado, sobre a remoção de colesterol de macrófagos, o acúmulo intracelular de lípides, o conteúdo do receptor de HDL, ABCA-1 e a captação seletiva de colesterol esterificado de HDL. Além disso, foi determinada a expressão diferencial de genes em macrófagos tratados com albumina C, DM 1 ou DM 2. A concentração plasmática de albumina glicada foi superior no grupo DM 1 e DM 2 em relação ao C e correlacionou-se positivamente com glicemia, hemoglobina glicada e frutosamina. Albumina sérica foi isolada por cromatografia para separação rápida de proteínas e purificada por extração alcoólica. Albumina DM 1 e DM 2 apresentaram maior conteúdo de carboximetil-lisina e apo A-I quando comparada à albumina C. Macrófagos enriquecidos com LDL acetilada e 14C-colesterol foram tratados com albumina C, DM 1 ou DM 2 e, a seguir, incubados na presença ou ausência de apo A-I, HDL3 ou HDL2 para determinação do efluxo de colesterol. Apesar de removerem maior quantidade de colesterol celular, as albumina DM 1 e DM 2 reduziram o efluxo de colesterol mediado por apo A-I (70% e 45%, respectivamente) e HDL2 (55% e 54%, respectivamente) em comparação à albumina C. Com HDL3, a queda no efluxo de colesterol só foi observada em macrófagos expostos à albumina DM 2 (55%). Macrófagos incubados apenas com albumina C, DM 1 ou DM 2 apresentaram conteúdo lipídico semelhante, evidenciado por coloração com Oil Red O. A adição de apo A-I, HDL3 ou HDL2 reduziu o conteúdo lipídico apenas nas células tratadas com albumina C, mas não com albumina DM 1 ou DM 2. A expressão de ABCA-1 foi diminuída 82% e 25% em macrófagos expostos, respectivamente, à albumina DM 1 e DM 2, em comparação às células tratadas com albumina C. As albuminas DM 1 e DM 2 reduziram a captação de 3H colesteril oleoil éter de HDL por células que superexpressam o receptor SR-BI. Estes resultados também foram obtidos com albumina humana modificada in vitro por glicação avançada. As albuminas isoladas dos pacientes diabéticos aumentaram a expressão de receptores envolvidos na captação de LDL modificadas e de proteínas que modulam vias da homeostase do colesterol. Os resultados deste estudo evidenciaram que a modificação in vivo da albumina por glicação avançada prejudica o transporte reverso de colesterol no diabete melito, por reduzir a expressão de ABCA-1 e a remoção de colesterol de macrófagos, bem como a captação seletiva de colesterol esterificado de HDL pelo SR-BI. Independentemente de variação na concentração e composição de HDL, a glicação da albumina pode contribuir para o acúmulo de lípides em macrófagos e gênese da aterosclerose no diabete melito / Advanced glycation end products are prevalent in diabetes mellitus and alter lipids and lipoprotein metabolism. In this study we analyzed the role of albumin, isolated from control individuals (C, n = 12) and uncontrolled type 1 (DM 1, n = 13) and type 2 (DM 2, n = 11) diabetes mellitus patients on macrophage cholesterol removal, intracellular lipid accumulation, expression of the HDL receptor protein level, ABCA-1and the uptake of esterified cholesterol from HDL. It was also investigated the differential gene expression in macrophages treated with C, DM 1 or DM 2 albumin. Glycated albumin was higher in DM 1 and DM 2 groups as compared to C and was positivetly correlated with glycemia, glycated hemoglobin and fructosamine. Serum albumin was isolated by fast protein liquid chromatography and alchoolic extraction. DM 1 and DM 2 albumin presented a higher amount of carboxymethyllysine and apo A-I as compared to C albumin. In order to determine cholesterol efflux acetylated LDL and 14C-cholesterol enriched J- 774 macrophages were treated with C, DM 1 or DM 2 albumin and then incubated in the absence or presence of apo A-I, HDL3 or HDL2. Although presenting a higher ability to remove cell cholesterol by itself, DM 1 and DM 2 albumin reduced cholesterol efflux mediated by apo A-I (70% e 45%, respectively) and by HDL2 (55% e 54%, respectively) as compared to C albumin. With HDL3 the reduction of the cholesterol efflux was only observed in macrophages treated with DM 2 albumin (55%) in comparison to C albumin. Macrophages incubated with C, DM 1 or DM 2 albumin alone presented similar amount of intracellular lipids as assessed by Oil Red O staining. The addition of apo A-I, HDL3 or HDL2 reduced the lipid content in cells treated with C albumin, but not in those exposed to DM 1 or DM 2 albumin. The expression of ABCA-1 was reduced 82% and 25% in macrophages treated, respectively, with DM 1 or DM 2 albumin, in comparison to C albumin. DM 1 and DM 2 albumin reduced the uptake of 3H colesteril oleoyl ether from HDL by SR-BI overexpressing cells. These findings also were obtained when cells were treated in vitro with human serum albumin submitted to advanced glycation. DM 1 and DM 2 albumin enhanced the expression of receptors involved in the uptake of modified LDL and cholesterol homeostasis. Our findings showed that the advanced glycation of albumin that takes place in diabetes mellitus impairs the reverse cholesterol transport efficiency by reducing the ABCA-1 expression and cholesterol exportation to HDL and also by diminishing the uptake of esterified cholesterol from HDL. Independently of changes in HDL composition and concentration, advanced glycated albumin contributes to cholesterol accumulation in macrophages and atherogenesis in diabetes mellitus
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Associação entre síndrome metabólica, albumina modificada pela isquemia (IMA) e biomarcadores aterotrombóticos

Gottlieb, Maria Gabriela Valle January 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2013-08-07T19:03:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000418046-Texto+Completo-0.pdf: 4060677 bytes, checksum: 5a23c04f46b75d342b7b1205a3877568 (MD5) Previous issue date: 2009 / Introduction: metabolic syndrome (MS) is defined as a set of atherothrombotic and inflammatory abnormalities. These patients are predisposed to increased morbidity and mortality from cardiovascular disease (CVD) and type 2 diabetes mellitus (DM2). Several inflammatory biomarkers of lipid metabolism-related oxidative and ischemic pathophysiology of MS have been investigated. Recent studies suggest that ischemia modified albumin (IMA) is a biomarker of ischemia and that its levels are a possible indication of microvascular dysfunction in patients with MS. Objective: to investigate the association between these lipids, oxidatives and inflammatory processes potentially associated with ischemic in patients with MS. Material and methods: prospective, case-control study that included 32 (30. 2%) healthy subjects (control - C) and 74 (69. 8%) subjects with MS (case group - MS). Individuals with MS were recruited at cardiometabolic risk center of Cardiology Service, Hospital São Lucas da Pontificia Universidade Catolica do Rio Grande do Sul and the healthy were recruited from the Universidade Federal de Santa Maria (UFSM - students, staff and teachers). The diagnostic criteria of MS was used NCEP-ATPIII. Glucose, total cholesterol (TC), HDL and triglycerides (TG) were determined by enzymatic colorimetric method (Ortho-Clinical Diagnostics), LDL was determined by the Friedewald equation; ultra C-sensitive protein (CRP) was measured by nephelometry, autoantibody anti-oxidized LDL (anti -oxLDL) and oxidized LDL (oxLDL) were determined by ELISA; IMA was measured by colorimetric assay with cobalt.Results: The sample included 34 men and 72 women. The average age of group C was 55. 2 ± 8. 8 years and the MS group 57. 6 ± 8. 3 years (p = 0. 142). The MS group had a higher BMI (32. 6 ± 6. 1 kg/m2, p = 0. 0001), systolic blood pressure (147 ± 26. 8 mmHg, p = 0. 001), diastolic blood pressure (85. 9 ± 15. 9 mmHg, p = 0. 01), glucose (133. 7 ± 68. 7 mg/dL, p=0. 001), TC (204 ± 58. 1 mg/dL, p=0. 001), LDL (114. 4 ± 49. 5 mg/dL, p=0. 001), TG (214. 9 ± / 34. 8 mg/dL, p=0001 ) compared with C group. IMA levels, CRP, IL-6, oxLDL and anti-oxLDL were significantly higher (0. 618 ± 0. 1355, p=0. 0001; 1. 72 ± 0964, p=0. 0001; 53. 20 ± 14. 52, p=0. 0001; 0662 ± 0461, p= 0. 001; 27,822 ± 17,010, p=0. 001) respectively in MS group, compared to C group. Multivariate analysis showed an association between elevated levels of IMA and MS and this was independent of sex, age, DM2 and hypercholesterolemia (p=0,0405). Conclusion: This study reports an association between IMA, inflammatory biomarkers of oxidative and lipid metabolism with MS, indicating that those individuals with MS are more likely to trigger the atherothrombotic events. Additional studies involving genetic and environmental interactions in patients with MS can help to elucidate the potential clinical role of the IMA, to become a predictor of atherothrombotic events, aiming to reduce the morbidity and mortality by CVD. / Introdução: síndrome metabólica (SM) é definida como um conjunto de anormalidades aterotrombóticas e inflamatórias. Seus portadores apresentam predisposição aumentada a morbi-mortalidade por doenças cardiovasculares (DCV) e diabetes mellitus tipo 2 (DM2). Diversos biomarcadores inflamatórios, do metabolismo lipídico, oxidativo e isquêmico, ligados a fisiopatologia da SM têm sido investigados. Recentes estudos sugerem que a albumina modificada pela isquemia (IMA) é um biomarcador de isquêmia e que seus níveis elevados representam uma possível indicação de disfunção microvascular em pacientes com SM. Objetivo: investigar a associação de marcadores lipidicos, oxidativos e inflamatórios potencialmente associados a processos isquêmicos em pacientes com síndrome metabólica. Material e métodos: estudo prospectivo, do tipo caso-controle, onde foram incluídos 32 (30,2%) indivíduos saudáveis (grupo controle – C) e 74 (69,8%) indivíduos com SM (grupo caso – SM). Os indivíduos com SM foram recrutados no ambulatório de risco cardiometabólico do Serviço de Cardiologia do Hospital São Lucas da Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul e os saudáveis foram recrutados na Universidade Federal de Santa Maria (UFSM - alunos, funcionários e professores). O critério diagnóstico de SM utilizado foi o NCEP-ATPIII. Glicose, colesterol total (CT), HDL e triglicerídeos (TG) foram determinados por método enzimático colorimétrico (Ortho-clinical Diagnostics); LDL foi determinada pela equação de Friedwald; Proteína C ultra Sensível (PCR-us) foi determinada por nefelometria, autoanticorpo anti-LDL-oxidada (anti-OxLDL) e LDL oxidada (OxLDL) foram determinadas por ensaio imunoenzimatico (ELISA); IMA foi mensurada por ensaio colorimétrico com cobalto.Resultados: a amostra incluiu 34 homens e 72 mulheres. A média de idade do grupo C foi 55,2±8,8 anos e do grupo SM 57,6±8,3 anos (p=0,142). O grupo SM apresentou maior IMC (32,6±6,1 kg/m2, p=0,0001), pressão arterial sistólica (147±26,8 mmHg, p=0,001), pressão arterial diastólica (85,9±15,9 mmHg, p=0,01), glicose (133,7±68,7 mg/dL, p=0,001), CT (204±58,1 mg/dL, p=0,001), LDL (114,4±49,5 mg/dL, p=0,001), TG (214,9±/34,8 mg/dL, p=0,001) em comparação com o grupo C. Níveis de IMA, PCR-us, IL-6, OxLDL e anti-OxLDL foram significativamente mais elevados (0,618±0,1355, p=0,0001; 1,72±0,964, p=0,0001; 53,20±14,52, p=0,0001; 0,662±0,461, p=0,001; 27,822±17,010, p=0,001) respectivamente no grupo SM, em relação ao grupo C. A análise multivariada mostrou associação entre níveis elevados de IMA e SM e esta foi independente de sexo, idade DM2 e hipercolesterolemia (p=0,0405). Conclusão: no presente estudo, observou-se associação entre IMA, biomarcadores inflamatórios, do metabolismo lipídico e oxidativo com SM, indicando que esses indivíduos portadores de SM estão mais propensos a desencadearem processos aterotrombóticos. Estudos adicionais envolvendo interações genéticas e ambientais em pacientes com SM podem contribuir para elucidarmos o potencial papel clínico da IMA, para que se torne um preditor de eventos aterotrombóticos, com vistas à diminuição da morbi-mortalidade cardiovascular.
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AVALIAÇÃO DA ALBUMINA MODIFICADA PELA ISQUEMIA NA ANEMIA ASSOCIADA À DOENÇA RENAL CRÔNICA / EVALUATION OF ISCHEMIA-MODIFIED ALBUMIN IN ANEMIA ASSOCIATED TO CHRONIC KIDNEY DISEASE

Cichota, Luiz Carlos 19 December 2007 (has links)
Chronic kidney disease (CKD) is highly prevalent, with increasing numbers of patients affected by the disease world-wide, and anemia is a common finding in patients with CKD. Anemia impacts negatively on cardiovascular disease, exercise capacity and quality of life, resulting in a significant mortality and morbidity. The aim of this study was to evaluate the levels of ischemia-modified albumin and lactate in patients with established anemia associated to CKD and its correlations with hemoglobin levels. Hematocrit, hemoglobin, iron, ferritin, albumin, creatinine, lactate and IMA were measured in 17 patients with established anemia associated to CKD and 19 controls by standard methods. The results of hematocrit, hemoglobin, iron and albumin were lower in anemia group than control group. Ferritin, creatinine and lactate levels were higher in anemia of CKD group than control group. IMA increases in anemia group (0.8115 ± 0.1304) ABSU compared to control (0.4951 ± 0.0393) ABSU. Significant correlations between IMA and lactate, IMA and hemoglobin, IMA and creatinine, and hemoglobin and lactate were observed. IMA and lactate increase during anemia and this elevation could be associated to hypoxia due to low hemoglobin levels. However, our data suggest that lactate is more sensitive to detect hypoxia in anemia compared to IMA. / A doença renal crônica (DRC) é altamente prevalente, com um aumento do número de pacientes no mundo inteiro, e a anemia é muito comum nestes pacientes. A anemia tem impacto negativo sobre a doença cardiovascular, capacidade de executar exercícios e a qualidade de vida, resultando numa significativa morbidade e mortalidade. O objetivo deste estudo foi avaliar os níveis de albumina modificada pela isquemia (IMA) e lactato em pacientes com anemia associada à DRC e sua correlação com os níveis de hemoglobina. Hematócrito, hemoglobina, ferro, ferritina, albumina, creatinina, lactato e IMA foram avaliados em 17 pacientes com anemia associada à DRC e em 19 pacientes do grupo controle, por métodos padronizados. Os resultados do hematócrito, hemoglobina, ferro e albumina foram menores no grupo de anêmicos do que no grupo controle. Ferritina, creatinina e lactato foram maiores no grupo de anêmicos do que no grupo controle. A IMA aumentou no grupo de anêmicos (0,8115 ± 0,1304) ABSU se comparado ao grupo controle (0,4951 ± 0,0393) ABSU. Foram observadas significativas correlações entre IMA e lactato, IMA e hemoglobina, IMA e creatinina e hemoglobina e lactato. A IMA e lactato aumentaram durante a anemia e esta elevação poderia ser associada com hipóxia devido aos baixos níveis de hemoglobina. Entretanto, nossos dados sugerem que o lactato possui maior sensibilidade na detecção da hipóxia na anemia, quando comparado com a IMA.
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Aferição do perfil metabólico em dois grupos genéticos de vacas primíparas holandês x gir em dois períodos da lactação no período da seca nos trópicos

Bolzan, Raphael Pires 30 August 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-23T13:53:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Raphael Pires Bolzan.pdf: 255186 bytes, checksum: b4c5317a3c518a2e50145e1e51dd83ef (MD5) Previous issue date: 2010-08-30 / O Perfil Metabólico (PM) é utilizado de maneira confiável para avaliar o estado nutricional do animal, podendo ser usado para monitorar a adaptação metabólica, diagnosticar desequilíbrios da homeostase de nutrientes e revelar as causas da manifestação das doenças nutricionais, também conhecidas como doenças metabólicas. No Brasil, a utilização de cruzamentos de raças européias especializadas na produção de leite com raças zebuínas adaptadas às condições tropicais, contribui significativamente na produção leiteira do país. Entretanto, os estudos do PM de vacas leiteiras são direcionados principalmente para as raças puras, geralmente presentes em regiões de clima temperado e subtropical. Por meio da revisão bibliográfica, buscou-se descrever aspectos importantes sobre as condições particulares da produção leiteira nos trópicos, a importância dos marcadores bioquímicos utilizados na avaliação do PM, bem como os principais metabólitos utilizados para avaliar o PM protéico, e, com a pesquisa, aferir os valores e avaliar o comportamento dos marcadores bioquímicos protéicos em dois grupos genéticos de vacas primíparas holandês x gir, em dois períodos da lactação, no período da seca, nos trópicos. O experimento foi realizado no município de Passos MG. Utilizou-se dados coletados nos meses de maio e agosto de 2009, referente ao período da seca na região. O rebanho foi composto por 45 vacas ½ Holandesa x ½ Gir (½ HG) com produção leiteira média de 13,8 kg/vaca/dia e 39 vacas ¾ Holandesa x ¼ Gir (¾ HG) com produção leiteira média de 16,3 kg/vaca/dia, todas primíparas, com escore de condição corporal inicial entre 2,5 e 3,0 pontos, não variando mais que 0,5 pontos. Concentrou-se os estudos em dois períodos da lactação, de 28 a 60 dias (P1 da lactação) e de 110 a 130 dias (P2 da lactação). A dieta foi composta por ração total. Foram analisados os indicadores bioquímicos do perfil metabólico protéico por meio da quantificação da uréia, albumina, proteínas totais, hemoglobina e globulinas. Utilizou-se a estatística descritiva para obtenção de médias, desvio padrão e coeficiente de variação, analisados pelo t de Student, com nível de significância de 5%, para se estabelecer possíveis diferenças entre os períodos de lactação e os grupos genéticos. Houve diferença significativa (P<0,05) dos dias em lactação sobre os teores séricos de uréia e albumina para as primíparas ½ e ¾ HG, do P1 para o P2 da lactação. Para efeito do grau genético, não se observou diferença significativa (P>0,05) para a uréia, enquanto para a albumina, foi observado diferença significativa (P<0,05) apenas no P2 da lactação, podendo presumir a existência de possíveis diferenças na capacidade de recuperação dos teores séricos de albumina entre grupos genéticos. Em manejo onde a ingestão protéica não foi limitante, obteve-se intervalos de normalidade para animais cruzados ½ e ¾ HG mais restritos que os intervalos propostos pela literatura científica para a espécie bovina. Os teores séricos de uréia observados denotam ter havido subutilização de proteína da dieta no P1 da lactação
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Uso da própolis nos valores de perfil metabólico em ovelhas sob diferentes dietas, no pré e pós-parto

Rodrigues, Tatiana Fiorotti 25 June 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-23T13:53:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tatiana Fiorotti Rodrigues.pdf: 734442 bytes, checksum: 1e0f917c7e09642b3b468b433c78ea21 (MD5) Previous issue date: 2013-06-25 / The objective of this study was to evaluate the action of propolis in the feeding of ewes in pre and post-partum phases and the animal response by plasma concentrations of some blood metabolites. Four treatments were studied, using 16 animals divided in four groups. The treatmens were: Control treatment (TC), control diet; Flushing treatment (TF) control diet with flushing; Flushing Treatment with propolis level 1 (TFP1), control diet with flushing and 20 ml of alcoholic solution of propolis/animal/day and ; Treatment Flushing with level 2 of propolis (TFP2) diet control and flushing with 30 mL of alcoholic solution of propolis/animal/day. The animals were kept in stalls and fed over a period of 37 days, seven of the control diet adaptation and 30 days of blood sampling. Were fed twice a day at 7 AM y 16PM, samples were taken at three-day and one hour before the delivery of food and one and three hours after feeding. There were significant differences among treatments for albumin, which were within normal range, and for globulins, which values were below those considered normal. Aspartate transaminase enzyme presented a significant difference between the phases, before and after birth, but with normal values. Propolis extract did not affect urea and total proteins, however resulted in changes on albumin and globulin levels / Objetivou-se avaliar a ação da própolis na alimentação de ovelhas nas fases de pré e pós-parto e a resposta animal por meio de concentrações plasmáticas de alguns metabólitos sanguíneos. Foram estudados quatro tratamentos, usando-se 16 animais divididos em quatro grupos. Os tratamentos foram: Controle (TC), dieta controle; Tratamento Flushing (TF), dieta controle mais 300 g de fubá de milho; Tratamento Flushing com nível 1 de própolis (TFP1), dieta controle com flushing e 10 mL de solução alcoólica de própolis/animal/dia; Tratamento Flushing com nível 2 de própolis (TFP2), dieta controle com flushing e 15 mL de solução alcoólica de própolis/animal/dia. Os animais foram mantidos estabulados e alimentados em um período de 37 dias, sendo sete de adaptação à dieta controle e 30 dias de coletas de sangue. A alimentação foi feita duas vezes ao dia, às 7 e 16 horas. As coletas de sangue foram realizadas de três em três dias, sendo uma hora antes do fornecimento da alimentação e uma e três horas após a alimentação. Uréia e proteínas totais não apresentaram variações significativas em relação aos tratamentos. Houve diferença significativa entre os tratamentos para a albumina, dentro do intervalo de normalidade, e de globulinas, cujos valores estavam abaixo dos normais. A enzima Aspartato transaminase (AST) apresentou diferença significativa entre as fases de estudo, pré e pós-parto, contudo dentro do intervalo de normalidade. O extrato de própolis não afetou os valores de uréia e proteínas totais, entretanto, resultou em alterações nos níveis de albumina e globulinas
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Análise de produtos derivados da oxidação e glicoxidação mediada por cobre em peptídeos derivados da Albumina Sérica Humana (HSA)

Marques, Caroline Martins Sandanielo January 2016 (has links)
Orientador: Prof. Dr. Hueder Paulo Moisés de Oliveira / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC. Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia/Química, 2016. / As propriedades fotofísicas e fotoquímica de quatro ftalocianinas comerciais (parte A) foram investigadas em DMSO, DMSO80%/THF20%, DMSO60%/THF40%, DMSO40%/THF60%, DMSO20%/THF80% e THF (v/v). Quatro ftalocianinas foram sintetizadas (parte B), sendo elas a metil ftalocianina de zinco (MetZnPc), metil ftalocianina de cloro-alumínio (MetAlClPc), terc-butil ftalocianina de zinco (TbutZnPc) e terc-butil ftalocianina de cloro-alumínio (TbutAlClPc). Suas propriedades fotofísicas e fotoquímica também foram estudadas em diferentes solventes, sendo eles THF, DMF, DMSO, CHCl3 e MeOH. Para o estudo dos tempos de vida, foi utilizada a técnica de tempo correlacionado de contagem de único fóton (TCSPC). Nas ftalocianinas comerciais, o método indireto utilizando DPBF foi utilizado para demonstrar a geração de espécies reativas de oxigênio dos compostos. O método direto, que analisa as curvas de decaimento de fosforescência do oxigênio singlete em 1270 nm, também foi empregado, tanto para as ftalocianinas comercias quanto para as ftalocianinas sintetizadas. A influência do metal central nas propriedades fotofísicas, fotoquímica e o efeito do solvente foram discutidos em todos os compostos estudados, tanto da parte A quanto da parte B. Para os compostos sintetizados, o estudo do efeito da agregação foi investigado em THF. Verificou-se o efeito dos ligantes periféricos e axiais, bem como o efeito dos metais complexados em todas as propriedades estudadas. / Photophysical and photochemical properties of four commercial phthalocyanines (part A) were investigated in DMSO, DMSO80%/THF20%, DMSO60%/THF40%, DMSO40%/THF60%, DMSO20%/THF80% and THF. Four phthalocyanines were synthesized (part B), they are methyl zinc phthalocyanine (MetZnPc), methyl aluminum-chloride phthalocyanine (MetAlClPc), tert-butyl zinc phthalocyanine (TbutZnPc) and tert-butyl aluminum-chloride phthalocyanine (TbutAlClPc). Their photophysical and photochemical properties have also been studied in different solvents, THF, DMF, DMSO, CHCl3 and MeOH. Fluorescence lifetimes were recorded using a time correlated single photon counting setup (TCSPC) technique. In commercial phthalocyanines, the chemical method, using DPBF as a quencher, was employed in order to demonstrate the generation of reactive oxygen species. Direct method, which analyzes phosphorescence decay curves of singlet oxygen at 1270 nm, was also employed, both for commercial phthalocyanines and for the synthesized phthalocyanines. The influence of central metal ions on the photophysical and photochemical properties and the influence of media were discussed in all studied compounds, both in part A and part B. For the synthesized compounds, the aggregation effect study was investigated in THF. The effect of peripheral and axial ligands as well as the effect of the complexed metal ion in all the studied properties were investigated.
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Emprego do extrato de Moringa (Moringa oleífera Lamarck) na clarificação do caldo de cana para produção de açúcar e etanol / Extract of Moringa (Moringa oleifera Lamarck) in sugarcane juice clarification for sugar and ethanol production

Costa, Gustavo Henrique Gravatim [UNESP] 18 December 2015 (has links)
Submitted by GUSTAVO HENRIQUE GRAVATIM COSTA null (ghg_costa@hotmail.com) on 2016-01-13T19:55:02Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado - Corrigido.pdf: 5386530 bytes, checksum: 1106058657587336c65f66d43bc3cb4a (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-01-14T11:57:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 costa_ghg_dr_jabo_int.pdf: 5386530 bytes, checksum: 1106058657587336c65f66d43bc3cb4a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-14T11:57:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 costa_ghg_dr_jabo_int.pdf: 5386530 bytes, checksum: 1106058657587336c65f66d43bc3cb4a (MD5) Previous issue date: 2015-12-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Atualmente há crescente demanda do mercado consumidor de alimentos por produtos cada vez mais seguros à saúde humana. Entre estes, destaca-se o açúcar, que é amplamente consumido pela população mundial. Durante o processo de produção, são adicionados polieletrólitos sintéticos a base de acrilamida, objetivando a rápida sedimentação de impurezas presentes no caldo de cana durante a etapa de clarificação. Considerando-se que a molécula constituinte deste insumo pode ficar retido no cristal de açúcar, sua utilização deve ser controlada, uma vez que apresenta ações cancerígenas e neurotóxicas ao ser humano. Neste contexto, destacam-se o biomoléculas naturais que apresentam ação coagulante, como a proteína presente nas folhas e sementes da moringa. Neste sentido, o objetivo do trabalho foi avaliar o os reflexos do emprego de extratos de folhas e sementes de moringa, como auxiliares de sedimentação na clarificação do caldo de cana, na produção de açúcar e etanol. O experimento foi realizado no Laboratório de Tecnologia do Açúcar e do Álcool da FCAV/UNESP. O experimento foi realizado em 6 etapas. A primeira foi constituída pelo estudo de técnicas de extração da proteína presente na semente. Na segunda, realizou-se caracterização da proteína extraída. A terceira etapa derivou do teste de diferentes dosagens dos extratos na clarificação do caldo. A seguir realizou-se experimento comparativo entre os extratos de sementes e folhas de moringa, com floculante sintético comercial, floculante orgânico comercial, e tratamento testemunha, caracterizando-se o processe de clarificação do caldo e qualidade do açúcar produzido. A última etapa foi constituída pelo uso do melaço residual da produção de açúcar e de caldo clarificado com os 5 floculantes, como substrato para a produção de etanol. Observou-se que a utilização de solução a base de CaCl2 0,1mol/L resultou em maiores extrações de proteínas em comparação ao uso de soluções a base de KCl, MgCl2 e somente água destilada. Caracterizando-se a proteína da semente, verificou-se peso molecular inferior a 14KDa e duas diferentes biomoléculas presentes no extrato. Avaliando-se diferentes doses, determinou-se os valores de 100, 250, 500, 1300mg/L para os extratos a base de MgCl2, água, KCl e CaCl2, respectivamente; sendo que no teste de comparação entre estes, o extrato a base de CaCl2, apresentou os melhores resultados. De modo geral, os floculantes não apresentam influência direta sobre as caraterísticas do açúcar produzido, e sobre o processo fermentativo. Conclui-se que o extrato de sementes de moringa pode ser utilizado como floculante do caldo de cana para produção de açúcar e etanol. / There are currently increasing demands of the consumer market for food products ever safer to human health. Among these, it stands out sugar, which is widely consumed by the world population. During the production process, synthetic polyelectrolytes are added to the acrylamide-based, aimed at rapid sedimentation of impurities present in the juice of sugar cane during the clarification step. Considering that the constituent molecule of this input may be trapped in the crystal sugar, its use should be controlled, as it features carcinogenic and neurotoxic actions to humans. In this context, we highlight the natural biomolecules that have coagulant action, as this protein in the leaves and seeds of Moringa. In this sense, the objective of this study was to evaluate the reflections of leaf extracts of employment and moringa seeds, such as sedimentation aids in clarifying sugarcane juice, the sugar and ethanol. The experiment was carried out in Sugar Technology Laboratory and Alcohol FCAV/UNESP. The experiment was carried out in 6 steps. The first study was set up by extraction techniques of protein present in the seed. The second was held characterization of the extracted protein. The third step of the test derived from different dosages of the extracts in clarifying the broth. The following comparative experiment was carried out between extracts of seeds and moringa leaves with commercial synthetic flocculant, commercial organic flocculant, and control treatment, characterizing the process of clarifying the broth and quality of the sugar produced. The last step was formed by the use of the residual molasses from sugar production and clarified broth with 5 flocculants, as a substrate for ethanol production. It was observed that using the base solution of CaCl2 0.1 mol/L resulted in higher protein extraction compared to the use of solutions based KCl, MgCl2 and only distilled water. Characterised seed protein, it was found molecular weight less than 14KDa and two different biomolecules present in the extract. Evaluating different doses, values were determined in 100, 250, 500, 1300mg/L for extracts the base MgCl2, water, KCl and CaCl2, respectively; wherein the comparison test among these, the extract CaCl2 base, showed the best results. In general, the flocculants have no direct influence on the characteristics of the produced sugar, and the fermentation process. We conclude that the moringa seed extract can be used as flocculant of sugarcane juice to produce sugar and ethanol.
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Status de vitamina D e fatores associados em indiv?duos submetidos a transplante renal: um estudo longitudinal

Lima, Mabelle Alves Ferreira de 04 December 2017 (has links)
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O objetivo do estudo ? avaliar o status da vitamina D em indiv?duos submetidos ao transplante renal e sua rela??o com os par?metros da fun??o renal no tempo zero, 3 meses e 6 meses p?s-transplante. Trata-se de um estudo longitudinal desenvolvido com 49 transplantados renais no per?odo de agosto de 2015 a janeiro de 2017. No tempo zero foram exclu?dos 3 indiv?duos devido a suplementa??o de vitamina D (n=46), nos 3 meses houve 1 ?bito, 1 desist?ncia e 2 rejei??es ajudas do enxerto (n=43) e aos 6 meses 1 paciente apresentou rejei??o aguda do enxerto (n=42). Os indiv?duos foram submetidos ? avalia??o antropom?trica, avalia??o da exposi??o solar, an?lises bioqu?micas, incluindo 25-hidroxivitamina D [25(OH)D], e coleta de urina para avaliar a rela??o albumina: creatinina (RAC) em todos os tempos estudados. A taxa de filtra??o glomerular (TFG) foi estimada pela equa??o da Chronic Kidney Disease Epidemiology Collaboration (CKD-EPI). A idade mediana dos indiv?duos foi de 44 anos, a maioria do sexo masculino (60,9%; n=28) e a etnia parda (73,9%; n=34). Houve uma predomin?ncia de indiv?duos com hipovitaminose D nos tr?s tempos estudados. Os indiv?duos com status de vitamina D adequado nos 6 meses p?s-transplante apresentaram exposi??o solar significativamente maior em compara??o aos indiv?duos com hipovitaminose D (p = 0,008). Nos 6 meses p?s-transplante, 45,2% dos indiv?duos (n = 19) apresentaram hipovitaminose D em todos os momentos e 19,1% (n = 8) desenvolveram hipovitaminose D aos 3 meses, totalizando 27 indiv?duos com esse perfil. Desses, 37,0% (n = 10) n?o apresentaram melhora na TFG. A RAC de indiv?duos com hipovitaminose D foi maior aos 6 meses p?s-transplante em rela??o ao grupo com status adequado (p = 0,037) e correlacionada negativamente com o 25(OH)D (r = - 0,358; p = 0,02). O paratorm?nio (PTH) apresentou uma influ?ncia negativa na TFG no tempo zero e correlacionou-se positivamente com a RAC aos 6 meses ap?s o transplante (r = 0,420; p = 0,007). Em conclusao, existe uma alta frequ?ncia de hipovitaminose D nos indiv?duos at? 6 meses ap?s o transplante renal, sendo este status poss?velmente relacionado as altera??es observadas na fun??o renal do enxerto.S?o necess?rios mais estudos que apoiem interven??es, tais como suplementa??o de vitamina D, a fim de suportar os resultados obtidos para os pacientes neste est?gio p?s-transplante renal. / Hypovitaminosis D has been a frequent finding in renal patients. In kidney transplant recipients, this may cause progression of albuminuria, increasing the decline in renal function and the risk of graft loss. The objective of this study was to evaluate the vitamin D status in kidney transplant recipients and its relation with renal function parameters at time zero, 3 months and 6 months post-transplantation. This is a longitudinal study with 46 kidney transplant recipients from August 2015 to January 2017. At zero time, 3 subjects were excluded due to vitamin D supplementation (n = 46), in 3 months there was 1 death, 1 (n = 43) and at 6 months 1 patient presented acute rejection of the graft (n = 42). The subjects were evaluated using anthropometric evaluation, a sun exposure questionnaire, biochemical evaluation, including 25-hydroxyvitamin D [25(OH)D], and urine collection to evaluate the albumin: creatinine ratio (ACR) at all times studied. The glomerular filtration rate (GFR) was computed by the Chronic Kidney Disease Epidemiology Collaboration (CKD-EPI) equation. The median age of the subjects was 44 years, predominantly males (60.9%; n=28), and with brown ethnicity (73.9%; n=34). Most of the subjects had hypovitaminosis D during the three studied periods. In subjects with adequate Vitamin D status at 6 months post-transplant, the sun exposure was significantly lower. At 6 months post-transplant, 45.2% (n=19) presented with hypovitaminosis D at all times, and 19.1% (n=8) developed hypovitaminosis D at 3 months, totalizing 27 individuals with this profile. Of these, 37.0% (n=37) had no improvement in the GFR. The ACR of subjects with hypovitaminosis D were higher at six months post-transplant (p=0.037). This was negatively correlated with the 25(OH)D (r=- 0.358; p=0.02). The parathyroid hormone (PTH) had a negative influence on GFR at time zero but was positively correlated with ACR at six months post-transplantation (r=0.420; p=0.007). Therefore, there is a high frequency of hypovitaminosis D up to 6 months after renal transplantation, which may be related to greater changes in graft renal function. More studies are needed to support interventions, such as supplementation, in order to obtain better results after renal transplantation.
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Análise das dosagens do fator de crescimento endotelial vascular no plasma e fluidos peritoneais de pacientes com câncer epitelial de ovário / Analysis of measurements of vascular endothelial growth factor in plasma and peritoneal fluids of patients with epithelial ovarian cancer

Solange Maria Diniz Bizzo 29 January 2010 (has links)
A carcinogênese epitelial ovariana tem sido foco de estudos científicos em todo o mundo desenvolvido. A angiogênese tumoral ovariana é um processo multifatorial que resulta em vários produtos pró-angiogênicos. Entre eles, o fator de crescimento vascular endotelial (VEGF) é predominante. Os objetivos deste estudo foram relacionar as dosagens do VEGF dos fluidos peritoneais, do plasma periférico e do infundíbulo pélvico aos níveis de citorredução em pacientes operadas de adenocarcinoma epitelial de ovário (CEO); formular um modelo probabilístico de citorredução e utilizar estas dosagens para estimar a probabilidade do desfecho de citorredução. Além disto, foi criada uma nova variável chamada carga de VEGF. Pelo procedimento step-wise a citorredução foi melhor descrita pela carga de VEGF, mas faltou Normalidade aos resíduos, não sendo possível a adequação de um modelo matemático. Porém, a curva ROC, forneceu uma área sob a curva de 0,84, com sensibilidade de 71,4 % e especificidade variando de 69,5 a 73,9%. O ponto de corte ótimo foi 15,52 log de picograma de carga de VEGF. A odds-ratio (OR) calculada para citorredução ótima descrita pela carga de VEGF foi de 11 (IC= 2,59 ; 46,78). No grupo com estágio avançado (III e IV), a OR foi de 6 (IC= 1,15; 31,22). Apesar do pequeno número de casos, esta nova variável pode vir a ser um auxiliar na determinação de situações onde cirurgia citorredutora deixa de ser a pedra fundamental do tratamento primário do CEO e a indução quimioterápica passe a ter o principal papel na citorredução química antes da cirugia nestes casos. / Epithelial ovarian carcinogenesis has been the focus of scientific studies in developed world. The ovarian tumor angiogenesis is a multifactorial process that results in pro-angiogenic products. Among them, vascular endothelial growth factor (VEGF) is predominant. This study aimed to relate VEGF levels in peritoneal fluids, peripheric plasma and pelvic infundibular plasma to debulking levels in patients operated on for epithelial ovarian carcinoma (EOC), formulate a probabilistic model for debulking and use these measurements to estimate the probability of the outcome of debulking. Moreover, it was created a new variable called burden of VEGF. For step-wise procedure, cytoreduction was better described by of burden VEGF, but missed Normality of residuals, so the adequacy of a mathematical model was not possible. Nevertheless, the ROC curve provided an area under the curve of 0.84, with sensitivity of 71.4 % and especificity varying from 69.5 to 73,9%. The optimal cutoff point was 15.52 log of picograms of VEGF burden. An odds-ratio for optimal cytoreduction described by the VEGF burden was 11 (CI= 2.59; 46.78). In the group with advanced stages (III & IV), the OR was 6 (CI= 1.15; 31.22). Apart from the small number of cases, this new variable might help to determine situations where cytoreductive surgery leaves behind the cornerstone of primary treatment of CEO and the chemotherapic induction comes to have main role in chemical cytoreduction prior to surgery in these cases.
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Interação da albumina de soro bovino (ASB) com fotossensibilizadores usados em fotoquimioterapia / Interaction of bovine serum albumin (BSA) with photosensitizers applied in Photochemotherapy.

Débora Cristina Kawasaki Codognato 14 August 2017 (has links)
A Fotoquimioterapia (FQT) vem sendo usada no tratamento de várias doenças, inclusive câncer, com a vantagem de ser menos agressiva, possuindo efeitos colaterais negativos desprezíveis. Esta técnica envolve a combinação de uma fonte de luz visível e de um fotossensibilizador (FS), que é reativo apenas sob a irradiação com luz adequada, e que se acumula preferencialmente no tecido doente. Uma ideia para deixar essa técnica mais eficiente é potencializar esta última característica do FS com uso de um carreador que tenha afinidade com tecidos doentes. Pensamos na hipótese de usar a albumina do soro como carreador uma vez que ela é uma proteína intrínseca do organismo, tem alta afinidade com os tecidos tumorais e possui sítios para ligar vários compostos extrínsecos. Como modelo usamos a albumina de soro bovino (ASB). Como FS utilizamos acridina laranja, nitrofurantoína, corantes ciânicos com dois cromóforos e protoporfirina IX (PpIX) sintética e extraída de glândulas Harderianas de ratos da linhagem Wistar (PpIX endógena). Foram analisadas as características de ligação entre os FS e a ASB e seus efeitos nas características fotofísicas dos FS em função da sua estrutura, utilizando espectroscopias de absorção ótica, fluorescência estática e resolvida no tempo e a técnica de microscopia de imagens por tempo de vida da fluorescência (FLIM). Foi mostrado que a ligação com ASB induz ao deslocamento batocrômico dos espectros de absorção e da fluorescência, aumentando a intensidade e o tempo de vida de fluorescência dos FS. Características como carga positiva, estrutura linear e tamanho pequeno da molécula do FS favorecem sua ligação com a ASB. Uma comparação entre PpIX sintética e endógena mostrou que a formação de um complexo da PpIX com estruturas anfifílicas também aumenta a probabilidade da sua ligação com a ASB. Os resultados obtidos mostraram que a ASB se liga efetivamente aos FS de diferentes estruturas e pode ser usada como carreador dos mesmos para tecidos tumorais. / Photochemotherapy (PCT) is used for the treatment of various diseases, including cancer, with the advantage of being less aggressive with reduced adverse effects. This technique includes the use of a visible light source and a photosensitizer (PS), which is reactive only under light exposure and localizes preferably in abnormal tissues. To make this technique more efficient it is necessary to increase the PS content in these tissues using a carrier which possesses affinity with these tissues and is able to bind PS. A good opportunity is to use serum albumin as a carrier since it is an intrinsic protein, has high affinity to tumor tissues and possesses sites for binding of various extrinsic compounds. In this work the bovine serum albumin (BSA) was used as a carrier model. Acridine orange, nitrofurantoin, cyanine dyes with two chromophores and protoporphyrin IX synthetic and extracted from Harderian glands of Wistar line rats (endogenous) were used as PS. The characteristics of the PS binding with BSA and the effect of this interaction on PS photophysical properties were studied using optical absorption, steady-state and time resolved fluorescence spectroscopies, and fluorescence lifetime image microscopy (FLIM). It was demonstrated that PS binding with BSA produces a bathochromic shift in the PS absorption and fluorescence spectra and increases its fluorescence intensity and lifetime. The positive charge, linear structure and small size of the PS molecule favors its binding with BSA. A comparison between synthetic and endogenous PpIX demonstrates that complexation of PpIX molecule with an amphiphilic structure increases the probability of its binding with BSA. The obtained results demonstrate that BSA binds effectively PS with different molecular structures and it is promising for their transport to tumor tissue.

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