A doença de Alzheimer é uma doença neurodegenerativa que causa perdas de memória, danos cognitivos e no comportamento, sendo considerada uma das causas principais de demência entre a população. Esta doença é caracterizada por uma intensa perda neuronal colinérgica, de forma que tanto os inibidores da enzima acetilcolinesterase (AChE) quanto compostos antioxidantes possam ser empregados como neuroprotetores. Nesse sentido, plantas da família Lycopodiaceae vêm sendo estudadas como fonte de novos alcalóides anticolinesterásicos desde a descoberta da huperzina A, isolada a partir da planta chinesa Huperzia serrata. Este trabalho foi realizado com o objetivo de caracterizar e isolar os alcalóides majoritários de Huperzia acerosa, H. heterocarpon, H. quadrifariata, H. reflexa, Lycopodiella cernua, Lycopodium clavatum e L. thyoides, de ocorrência no estado do Rio Grande do Sul, bem como avaliar as atividades anticolinesterásicas e antioxidantes in vitro e in vivo para os extratos. Extratos de alcalóides totais de espécies de L. clavatum e L. thyoides ocorrentes no Brasil e Argentina foram comparados quanto ao seu conteúdo químico, aliado à atividade anticolinesterásica. A atividade inibitória para AChE e butirilcolinesterase (BuChE) dos alcalóides isolados também foi ensaiada, juntamente com a determinação das propriedades citotóxicas exercidas pelos extratos sobre uma linhagem de gliomas C6. Todos os extratos de alcalóides foram analisados através de CG-EM, sendo os perfis de fragmentação dos compostos comparados através de dados da literatura. L. clavatum e L. thyoides possuem perfil químico similar, com licopodina e acetildiidrolicopodina como alcalóides principais, enquanto que L. cernua possui apenas dois alcalóides, cernuína e licocernuína. Os extratos de alcalóides de H. acerosa, H. quadrifariata e H. reflexa também foram analisados, sendo detectados tanto compostos do grupo licopodano quanto do grupo flabelidano, juntamente com outros alcalóides cujas estruturas ainda são desconhecidas. Os alcalóides encontrados em H. heterocarpon não puderam ser elucidados a partir de dados de fragmentação, uma vez que eles não coincidiram com nenhum perfil da literatura. Nesse estudo verificamos que dentre os extratos analisados, H. quadrifariata e H. reflexa promoveram a maior inibição para a enzima AChE obtida de eritrócitos humanos, com IC50 de 2,0 e 0,11 μg/mL, respectivamente, enquanto que H. heterocarpon foi o único extrato com maior seletividade para a BuChE (IC50 = 8,3 μg/mL). Além disso, dentre os alcalóides isolados licopodina, acetildiidrolicopodina, cernuína, licocernuína e clavolonina, apenas acetildiidrolicopodina e cernuína possuem inibição importante, sendo que nenhum deles possui efeito butirilcolinesterásico significativo. Também foi estimada a atividade anticolinesterásica para os extratos de alcalóides totais de L. clavatum e L. thyoides empregando-se homogenatos de córtex, hipocampo e estriato de ratos como fonte enzimática, sendo determinadas suas curvas de inibição com distintos tempos de incubação em uma faixa de concentrações. Também foi verificada para os dois extratos uma inibição do tipo competitiva/não-competitiva, bem como seu perfil antioxidante in vitro pelos métodos de descoloração do radical DPPH, degradação da 2-deoxirribose, TRAP e óxido nítrico. Após um tratamento agudo em camundongos de 14 meses com os extratos, foram verificados os efeitos antioxidantes através do método de TBA-RS, e para as enzimas catalase e superóxido dismutase. Do mesmo modo, verificamos que os mesmos extratos promoveram uma diminuição na atividade da acetilcolinesterase, quando administrados por via intraperitoneal. Nessa metodologia, os extratos mais potentes foram H. quadrifariata e H. reflexa, corroborando o efeito in vitro encontrado para os mesmos. Os extratos purificados de alcalóides de L. clavatum e L. thyoides com habitat no Brasil e Argentina foram comparados quanto ao seu perfil químico e biológico. Nesse estudo, foi verificado que os alcalóides licopodina e acetildiidrolicopodina são os compostos majoritários para todas as espécies, tendo L. clavatum maior atividade anticolinesterásica em relação a L. thyoides, tanto a espécie brasileira quanto a espécie argentina. / Alzheimer’s disease is a neurodegenerative disease which causes memory loss, cognitive and behavioral damages, considered to be the leading cause of dementia among the elderly. This disease is characterized for an intense cholinergic loss, and the use of acetylcholinesterase (AChE) inhibitors together with antioxidant compounds as neurprotectors is a strategy for the treatment. In this sense, Lycopodiaceae plants are well studied as a source of new anticholinesterasic alkaloids since the discovery of huperzine A, isolated from Chinese Huperzia serrata. This work was conducted with the objective of characterize and isolate the main alkaloids from Huperzia acerosa, H. heterocarpon, H. quadrifariata, H. reflexa, Lycopodiella cernua, Lycopodium clavatum and L. thyoides, with occurrence in Rio Grande do Sul state, and also evaluate the anticholinesterasic and antioxidant activities in vitro and in vivo for the extracts. Alkaloidal extracts from L. clavatum and L. thyoides species with habitat in Brazil and Argentina were compared to their chemical content, together with their anticholinesterasic activity. The inhibitory effect for AChE and butyrylcholinesterase (BuChE) for the isolated alkaloids was also evaluated, together with the determination of the cytotoxic properties exherced by the extracts in a gliome C6 cell line. Every alkaloidal extract was analyzed by means of GC-MS, and the fragmentation patterns for the compounds were compared with those from literature. L. clavatum and L. thyoides have similar chemical profile, with lycopodine and acetyldihydrolycopodine as main alkaloids, while L. cernua has only two alkaloids, cernuine and lycocernuine. The alkaloidal extracts of H. acerosa, H. quadrifariata e H. reflexa were also analyzed, and compounds from lycopodane and flabellidane groups were detected, along with other alkaloids whose structures are still unknown. The alkaloids found in H. heterocarpon could not be elucidated with fragmentation dates so far, since they did not coincide with those found in literature. We also verified that among the extracts, H. quadrifariata and H. reflexa promoted a higher inhibition for AChE obtained from human erythrocytes, with a IC50 value of 2,0 e 0,11 μg/mL, respectively, while H. heterocarpon extract was the only more selective for BuChE (IC50 = 8,3 μg/mL). Moreover, among the isolated alkaloid lycopodine, acetyldihydrolycopodine, cernuine, lycocernuine and clavolonine, only acetyldihydrolycopodine and cernuine possess an important inhibition, and none significantly inhibited butyrylcholinesterase. It was also assessed the anticholinesterase effect for the alkaloidal extracts of L. clavatum and L. thyoides employing cortex, hippocampus and striatum rat brain homogenates as enzymatic sources, being determined the incubation time-inhibition curves over a concentrations range. It was also verified for both extracts an inhibitory effect of the competitive/non competitive mixed type, as well as their in vitro antioxidant profile using the methods of DPPH radical decoloration, 2-deoxyrribose degradation, TRAP and nitric oxide. After an acute treatment in 14 months-aged mice, we verified the antioxidant effects though TBA-RS and also the enzymes catalase and superoxide dismutase. In the same way, we found out that the same extracts reduced the acetylcholinesterase activity when administered by intraperitoneal injection. Using this methodology, the most potent extracts were H. quadrifariata and H. reflexa, corroborating the in vitro effect found for them. The purified alkaloidal extracts of L. clavatum and L. thyoides with habitat in Brazil and Argentine were compared to their chemical and biological profile. In this study, we found out that lycopodine and acetyldihydrolycopodine are the main alkaloids found for all species, and L. clavatum possesses a better inhibition against AChE when compared to L. thyoides for both Brazilian and Argentinean collected species.

CARVALHO, Kaline Rodrigues. Alcalóides bioativos e fenólicos de Hippeastrum solandriflorum (Lindl.) - Amaryllidaceae. 2014. 139 f. Dissertação (Mestrado em química)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2014. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-06-02T18:29:58Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_krcarvalho.pdf: 5041907 bytes, checksum: 07f047c40b792b34c1cb4331f9c7cb28 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-07-13T23:17:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_krcarvalho.pdf: 5041907 bytes, checksum: 07f047c40b792b34c1cb4331f9c7cb28 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T23:17:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_krcarvalho.pdf: 5041907 bytes, checksum: 07f047c40b792b34c1cb4331f9c7cb28 (MD5) Previous issue date: 2014 / This work describes the phytochemical study of Hippeastrum solandriflorum(Amaryllidaceae)aiming the isolation and structural elucidation of new bioactive compounds, as well as its pharmacological investigation. The chemical investigation realized with the EtOH extract from bulbs, through chromatographic methods, including HPLC (reverse phase), resulting inthe isolation of ten compounds: a furan derivative: 5-(hydroxymethyl)furan-2-carbaldehyde(HS-1), two phenolic derivatives: piscidic acid (HS-2), eucomic acid (HS-3), and seven isoquinoline alkaloids: narciclasin ( HS-4), 2α-hydroxypseudolycorin (HS-5), 10α-hydroxy homolycorin (HS-6), galantamin (HS-7), sanguinin (HS-8),N-oxid galantamin (HS-9) andnarcissidin (HS10). The alkaloids (HS-5) and (HS-6) are being reported for the first time inthe literature, while the other ones have been isolated for the first time in the investigated species. The structures of all isolated compounds were determined based on spectrometricmethods (IR, HRMS, NMR 1H and13C–1D and 2D), besides comparison with published data. The cytotoxic potential of all alkaloids were evaluated against several tumor cell lines:colon (HCT-116), leukemia (HL-60), ovary (OVCAR-8) and brain (SF-295) showing IC50ranging from 0.01 to 35.7 μM. / Este trabalho descreve o estudo fitoquímico de Hippeastrum solandriflorum (Amaryllidaceae) visando o isolamento e elucidação estrutural de novos constituintes químicos bioativos, bem como o estudo farmacológico dos compostos obtidos. A investigação química realizada com o extrato etanólico dos bulbos, através de métodos cromatográficos, incluindo CLAE (fase reversa), resultou no isolamento e identificação de dez substâncias, sendo um derivado do furano: 5-(hidroximetil)furan-2-carbaldeido (HS-1), dois derivados fenólicos: acido piscidico(HS-2), acido eucômico (HS-3) e sete alcaloides isoquinolínicos: Narciclasina (HS-4), 2α-hidroxipseudolicorina (HS-5), 10αhidroxi-homolicorina (HS-6), Galantamina (HS-7), Sanguinina (HS-8),N-oxido galantamina (HS-9), Narcissidina (HS-10). Os alcaloides (HS-5)e (HS-6) esta sendo relatado pela primeira vez na literatura e os demais como sendo inéditos na espécie estudada. As substâncias isoladas tiveram suas estruturas elucidadas por métodos espectrométricos (IV, IES-EM e RMN de1H e13C 1D e 2D), além de comparação com dados da literatura. O potencial citotóxicodos alcaloides isolados foi avaliado frente às linhagens decélulas tumorais humanas: cólon (HCT-116), leucemia (HL-60), ovário (OVCAR-8) e cérebro (SF-295) mostrando valores IC50 variando 0,01–35,7 μM.

NASCIMENTO, Raimundo Regivaldo Gomes do. Estudo Químico e Biológico de Margaritopsis carrascoana Wright (Rubiaceae). 2014. 275 f. Tese (Doutorado em química)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2014. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-06-02T20:19:14Z No. of bitstreams: 1 2014_tese_rrgnascimento.pdf: 13947616 bytes, checksum: 924a0eb7fa05854c8e13053f4965ef41 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-07-20T20:09:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_tese_rrgnascimento.pdf: 13947616 bytes, checksum: 924a0eb7fa05854c8e13053f4965ef41 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-20T20:09:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_tese_rrgnascimento.pdf: 13947616 bytes, checksum: 924a0eb7fa05854c8e13053f4965ef41 (MD5) Previous issue date: 2014 / Margaritopsis carrascoana is a small shrub belonging to the Rubiaceae family and endemic from northeastern of Brazil flora growing in the sandy soils of the region of Ibiapaba and Araripe plateaus – Ceará state. The absence of reports of phytochemical studies related to this species, combined with occurrence of bioactive alkaloids in the genus, motivated us to perform chemical study. The plant specimen was collected in Araripe plateu, in Moreilândia-PE county. The phytochemical investigation of the ethanolic extract from the stems yielded the alkaloids calycosidine, hodgkinsine, N-8”-formyl-calycosidine and N-8”-methyl-N-1’-desmethylisocalycosidine, besides neolignan dihydrodehydrodiconiferyl alcohol 4-O-β-D-glucopyranoside, the flavonol luteolin 7-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranosyl, the triterpenes lupeol and ursolic acid, and the mixture of β-sitosterol and stigmasterol steroids, as aglycones and glycosylated. From the ethanolic extract of the leaves were isolated the flavonoid luteolin 7-O-[β-D-apiofuranosyl-(1→6)]-β-D-glucopyranoside, chrysoeriol 7-O-[β-D-apiofuranosyl-(1→6)]-β-D-glucopyranoside, luteolin 7-O-{β-D-apiofuranosyl-(1→6)-[β-L-rhamnopyranosyl-(1→2)]-β-D-glucopyranosyl} and luteolin 7-O-{α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-[β-L-rhamnopyranosyl-(1→2)]-β-D-glucopyranosyl}. The alkaloids N-8"-formyl-calycosidine, N-8”-methyl-N-1’-desmethylisocalycosidine, luteolin 7-O-{β-D-apiofuranosyl-(1→6)-[β-L-rhamnopyranosyl-(1→2)]-β-D-glucopyranosyl} and luteolin 7-O-{α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-[β-L-rhamnopyranosyl-(1→2)]-β-D-glucopyra-nosyl}, are being reported for the first time in the literature, and the other secondary metabolites are unprecedented in the genus Margaritopsis. The secondary metabolites were isolated using classical chromatography techniques; including adsorption chromatography on silica gel, exclusion chromatography on Sephadex LH-20, reverse phase chromatography (C-18), and high performance liquid chromatography (HPLC). For structural characterization were used infrared spectroscopy, mass spectrometry and nuclear magnetic resonance techniques including uni (1H NMR and 13C NMR and DEPT 135) and two-dimensional experiments (HMBC, HSQC, COSY and NOESY), and comparison with the literature data. In addition, the flavonoids flavonol luteolin 7-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranosyl, luteolin 7-O-[β-D-apiofuranosyl-(1→6)]-β-D-glucopyranoside, luteolin 7-O-{β-D-apiofuranosyl-(1→6)-[β-L-rhamnopyranosyl-(1→2)]-β-D-glucopyranosyl} and luteolin 7-O-{α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-[β-L-rhamnopyranosyl-(1→2)]-β-D-glucopyranosyl, sho-wed antioxidant activity greater than the BHT and quercetin standards, while ethanol extracts of stems and leaves showed inhibitory activity on the acetylcholinesterase enzyme. On the other hand, hodgkinsine showed potent cytotoxic activity against ovary, glioblastoma and colon cancer cells lines. The ethanol extract of the leaves and its alkaloidal fraction were submitted to nociception test and yielded good results. The ethanolic extract of the leaves was subjected to gastric antiulcer activity test, leading to a significant reduction in gastric lesions induced by ethanol in mice. / Margaritopsis carrascoana é um pequeno arbusto pertencente à família Rubiaceae e endêmico da flora do Nordeste brasileiro, que cresce em solos arenosos do planalto da Ibiapaba e serra do Araripe - Ceará. A ausência de relatos acerca de estudos fitoquímicos relacionados à espécie, aliada a ocorrência de alcalóides bioativos no gênero, nos motivou ao seu estudo químico. Desta forma, o espécimen vegetal foi coletado na chapada do Araripe, município de Moreilândia-PE. A investigação fitoquímica do extrato etanólico dos talos resultou no isolamento dos alcalóides calicosidina, hodgkinsina, N-8”-formilcalicosidina e N-8”-metil-N-1’-desmetilisocalicosidina, da neolignana álcool 4-O-β-D-glicopiranosil-di-hidro-desidrodiconiferílico, do flavonóide 7-O-[α-L-ramnopiranosil-(1→2)-β-D-glicopiranosil luteolina, dos triterpenos lupeol e o àcido ursólico, e da mistura de esteróides β-sitosterol e estigmasterol, como agliconas e nas formas glicosiladas. A partir do estudo do extrato etanólico das folhas foram isolados os flavonóides 7-O-[β-D-glicopiranosil-(1→6)-β-D-apiofuranosil] luteolina, 7-O-[β-D-glicopiranosil-(1→6)-β-D-apiofuranosil] crisoeriol, 7-O-{β-D-apiofuranosil-(1→6)-[α-L-ramnopiranosil-(1→2)-β-D-glicopiranosil} luteolina e 7-O-{α-L-ramnopiranosil - (1→6) - [α-L-ramnopiranosil-(1→2)-β-D-glicopiranosil} luteolina. Os alcalóides N-8”-formilcalicosidina e N-8”-metil-N-1’-desmetilisocalicosidina, e os flavonóides 7-O-{β-D-apiofuranosil-(1→6)-[α-L-ramnopiranosil-(1→2)-β-D-glicopiranosil} luteolina e 7-O-{α-L-ramnopiranosil-(1→6)-[α-L-ramnopiranosil-(1→2)-β-D-glicopiranosil} luteolina, estão sendo relatados pela primeira vez na literatura, enquanto todas as demais substâncias possuem caráter inédito no gênero Margaritopsis. O isolamento dos metabólitos secundários foi conduzido através de técnicas cromatográficas clássicas, incluindo cromatografia de adsorção em gel de sílica, cromatografia por exclusão molecular em Sephadex LH-20, cromatografia de fase reversa (C-18) e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Para a caracterização estrutural foram utilizadas técnicas espectroscópicas utilizando infravermelho, espectrometria de massas e ressonância magnética nuclear, incluindo técnicas uni (RMN 1H e RMN 13C e DEPT 135) e bidimensionais (HMBC, HSQC, COSY e NOESY), além de comparação com dados descritos na literatura. Em adição, os flavonóides 7-O-[α-L-ramnopiranosil-(1→2)-β-D-glicopiranosil luteolina, 7-O-[β-D-glicopiranosil-(1→6)-β-D-apiofuranosil] luteolina, 7-O-{β-D-apiofuranosil-(1→6)-[α-L-ramnopiranosil-(1→2)-β-D-glicopiranosil} luteolina e 7-O-{α-L-ramnopiranosil-(1→6) - [α-L-ramnopiranosil-(1→2)-β-D-glicopiranosil} luteolina apresentaram atividade antioxidante maior que os padrões BHT e quercetina, enquanto os extratos etanólicos dos talos e folhas apresentaram atividade inibidora da enzima acetilcolinesterase. Por outro lado, o alcaloide hodgkinsina apresentou potencial citotóxico frente às células de ovário, glioblastoma e colon. No teste de nocicepção, realizado com o extrato etanólico das folhas e a fração alcalóidica, foram observados resultados positivos para ambas as frações. O extrato etanólico das folhas foi submetido a teste de atividade antiúlcera gástrica, levando a uma redução significativa da área de lesão gástrica induzida pelo etanol em camundongos.

Mulungu (Erythrina verna Vell.- Fabaceae) é uma espécie arbórea nativa do Brasil, conhecida popularmente por amansa-senhor, árvore-de-coral, corticeira, suiná-suinã, dentre outros. Quimicamente é caracterizada principalmente pela presença de flavonóides, pterocarpanos, alcalóides e outros. Dentre os alcalóides isolados, pode-se citar hipaforina, eritravina, erisotrina, eritrartina e seus derivados. Inúmeros artigos científicos descrevem atividades biológicas tais como ansiolítica, anticonvulsivante, antinociceptiva e antibacteriana, além de efeitos tóxicos frente a larvas de camarão Artemia salina. O presente trabalho visa estabelecer parâmetros para o controle de qualidade da droga vegetal, casca de Erythrina verna, bem como comparar o perfil cromatográfico do extrato alcaloídico de suas diferentes partes e confrontar os dados com outras espécies do mesmo gênero. A descrição botânica macro e microscópica das cascas foi realizada, assim como o estabelecimento dos parâmetros de controle de qualidade, tais como cinzas totais (6,47±0,58%) e insolúveis (1,08±0,43%), teor de extrativos (12,03±0,81%) teor de alcalóides totais (0,081±0,0081%) e perda por dessecação, tanto pelo método gravimétrico (10,54±0,009%) quanto por balança de infravermelho (10,39±0.07%). Também foi estabelecido que as condições mais favoráveis para a produção de extrato bruto de E. Verna é a decocção do pó das cascas em solvente hidroalcoólico. Com base no perfil cromatográfico dos alcalóides de E. verna, foi possível identificar a presença de eritravina por meio de co-injeção com o produto isolado/identificado, bem como comparar o perfil das diferentes partes da planta e ainda confrontar os dados de E. verna a outras espécies do gênero. / Mulungu (Erythrina verna vell. - Fabaceae) is an arboreal species native of the Brazil, and popularly known as amansa-senhor, árvore-de-coral, corticeira, suiná-suinã, tiricero, among others. Chemically, it is mainly characterized by the presence of, flavonoids, alkaloids and pterocarpans. Hypaphorine, erythravine, erysothrine, erythrartine and its derivatives, are the main isolated alkaloids. Some scientific articles describe biological activities such as anxiolytic, antibacterial, anticonvulsant and antinociceptive. Toxicity against shrimp Artemia salina is also described. This work aims to establish parameters for the quality control of raw vegetable bark of E. verna, as well as compare the chromatographic profile of the alkaloidic extract obtained from defferent parts of the plant and compare the data to other related species of the same genus. The macro and microscopic description of the barks was performed, as well as the establishment of quality control parameters such as the total ash (6.47 ± 0.58%) and insoluble ash (1.08 ± 0.43%), water-soluble extractives (12.03 ± 0.81%), total alkaloids content (0.081 ± 0.0081%) and loss on drying by gravimetric method (10.54 ± 0.009%) and infrared balance (10,39±0.07%).It was established that the more favourable condition for the production of crude extract of E. verna is the decoction of powered bark in hydroalcoholic solvent. Based on the chromatographic profile of alkaloids of E. verna, it was possible to identify the presence of erythravine through isolated/identified coinjection product, as well as to compare the profile of the different parts of the plant and still confronting data E. verna to other species of the genus.

Uncaria tomentosa (Willd.) DC. (Rubiaceae), popularmente conhecida como cat’s claw ou “unha-de-gato”, é uma liana encontrada principalmente na região Amazônica assim como Uncaria guianensis (Aubl.) Gmel. (Rubiaceae), que é utilizada como substituinte ou adulterante em relação a U. tomentosa devido à sua maior abundância e menor valor comercial. A diferenciação de ambas pode ser realizada com base em aspectos morfoanatômicos, mas limita-se à composição química em derivados, como extratos fluidos e secos. As cascas do caule de U. tomentosa são compostas majoritariamente por derivados triterpênicos, polifenóis e alcaloides oxindólicos, aos quais são atribuídas as principais atividades biológicas da espécie. Contudo, o perfil de alcaloides oxindólicos é variável devido à ocorrência de quimiotipos e a elevada susceptibilidade dos mesmos à isomerização. Assim, a presente tese teve como objetivo avaliar a relevância dos alcaloides oxindólicos em U. tomentosa no que tange ao reconhecimento de adulteração na espécie, ocorrência de quimiotipos e isomerização desses compostos. Para isso, foram construídos modelos de classificação e regressão multivariada a partir das análises de CLAE-PDA, IV e UV destinados a diferenciação entre U. tomentosa e U. guianensis e ao reconhecimento de adulteração e determinação do percentual de adulterante em amostras de U. tomentosa. Os resultados obtidos demonstraram que os critérios farmacopéicos atualmente utilizados no controle de qualidade da matéria-prima vegetal e derivados de U. tomentosa baseados nos alcaloides oxindólicos são inefetivos em relação ao reconhecimento de adulteração. (Continuação A avaliação da atividade citotóxica dos diferentes quimiotipos baseados no perfil de alcaloides oxindólicos em U. tomentosa frente a leucócitos humanos e as células tumorias de bexiga (T24) e glioblastoma (U-251-MG) humanos, demonstrou que a seletividade frente às células tumorais é depentente do quimiotipo. Adicionalmente, a complexação dos alcaloides oxindólicos com sulfobutil-éter-β-ciclodextrina (SBE-βCD) minimizou a velocidade de isomerização sob condições de incubação (pH = 7,4; 37 ºC), sem contudo inibir o processo de isomerização. / Uncaria tomentosa (Willd.) DC. (Rubiaceae), popularly known as cat’s claw, is a liana found mainly in the Amazon rainforest as well as Uncaria guianensis (Aubl.) Gmel. (Rubiaceae) used as substituent or adulterant due to their higher wild population and lower market value. The differentiation among the raw material of both species can be performed from morphological and microscopic characteristics, but is limited in derivatives such as fluid and freeze-dried extracts. The stem bark from U. tomentosa is composed mainly by quinovic acid glycosides, polyphenols and oxindole alkaloids, to which have been assigned the major biological activities of the specie. However, the oxindole alkaloids profile in the U. tomentosa is variable due to chemotype occurrence and their susceptibility to isomerization. Thus, this study aimed to evaluate the relevance of oxindole alkaloids at U. tomentosa in relation to adulteration recognition, chemotype occurrence and oxindole alkaloids isomerization. Classification and multivariate regression models were built from HPLC-PDA, FT-IR and UV data to differentation between U. tomentosa e U. guianensis, as well as for adulteration recognition and determination of the adulterant level in the U. tomentosa. The current U.S. pharmacopeia monographs specifications for quality control of stem bark raw material from U. tomentosa, as well as for their derivatives, such as powdered dried extract, based on the oxindole alkaloids were ineffective for adulteration recognition. The cytotoxic activity evaluation of the different chemotypes, based on the oxindole alkaloid profile, against the human leukocytes and against human bladder cancer cell line (T24) and human glioblastoma cell line (U-251-MG) demonstrated that selectivity against the tumoral cells is dependent of the chemotype. In addition, the complexation of the oxindole alkaloids with Sulfobutyl ether β-cyclodextrin (SBE-βCD) minimize the isomerization rate under incubation conditions (pH = 7.4; 37 ºC) but without, however, inhibit the isomerization process.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-05-31Bitstream added on 2014-06-13T18:41:52Z : No. of bitstreams: 1 duarte_ra_dr_arafcf.pdf: 4649782 bytes, checksum: 99bc00374a88b89ba36ff755fc732fa3 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O câncer de mama é a maior causa de morbidade e mortalidade entre as mulheres no mundo. Pesquisas revelam vários fatores prognósticos e preditivos para a identificação de pacientes com alto risco de agressividade, metastases e doença recorrente na condição de combater estas estatísticas. Por esta razão, é evidente a necessidade do desenvolvimento de estratégias de tratamento mais eficazes. Estudos prévios com Pterogyne nitens Tul. (Fabaceae-Caesalpinioideae), uma planta nativa do Brasil resultou o isolamento de dois alcalóides guanidínicos. Exibiram atividade seletiva direcionada a DNA deficiente de reparo, sugerindo potencial atividade anticâncer. Objetivo: O objetivo do presente estudo foi avaliar a citotoxicidade e apoptose induzidas pelos alcalóides pteroginina (PGN) and pteroginidina (PGD) em linhagem de adenocarcinoma (MCF-7) e carcinoma ductal invasivo (ZR-7531). Materiais e Métodos: As duas linhagens celulares foram tratadas pelos alcalóides em várias concentrações (0.25 – 10 mM) em dois tempos, t0 (24h) e t24 (24h seguido por 24h pós-tratamento). O ensaio de citotoxicidade foi determinado pelo teste de MTT; a morte celular (apoptose e necrose) foi analisada usando os métodos Hoechst 33342/iodeto propídio, Kit de Anexina V-FITC e atividade de Caspases 3/7. Resultados: Os tratamentos com os alcalóides demonstraram citotoxicidade concentração-resposta nas linhagens de câncer de mama. Para avaliação da apoptose foi observado um intense efeito concentraçãoresposta em apoptose tardia/necrose e discreto sinal para apoptose precoce em todas concentrações (p<0,01). No ensaio Hoechst/iodeto, observou diferença significante entre os estágios de apoptose precoce e tardia de ambas linhagens. A pteroginina no período t0 e t24, e pteroginidina no período t0 demonstraram possuir intenso efeito concentração... / Breast cancer is a major cause of morbidity and mortality among women worldwide. Research has elucidated several specific prognostic and predictive factors to identify patients at high risk of the aggressive disease, metastasis and recurrence of the disease in order to combat these statistics. For this reason, there is an obvious need to develop more efficacious treatment strategies. Previous studies on Pterogyne nitens Tul. (Fabaceae-Caesalpinioideae), a native plant of Brazil, resulted in the isolation of two guanidine alkaloids, exhibited selective activity towards a DNA repair-deficient, suggesting potential anti-cancer activity. Objective: The aim of the present study was to evaluate the citotoxicity and apoptosis induced by alkaloids pterogynine (PGN) and pterogynidine (PGD) in human adenocarcinoma cell line (MCF-7) and human invasive ductal carcinoma cell line(ZR-7531). Material and Methods: The two cell lines were treated by both alkaloids at several concentrations (0.25 – 10 mM) and two time points, 24h (t0) and 24h followed by 24h pos-treatment (t24). The cytotoxicity assay was determined by MTT assay; the cell death (apoptosis and necrosis) were analyzed using the dye Hoechst 33342/propidium iodide, Annexin V-FITC and Caspase 3/7 activity. Results: The treatments with the alkaloids demonstrated citotoxicity effect concentrationresponse in breast cell lines. Apoptosis evaluation, pterogynine and pterogynidine has an intense effect concentration-response of late apoptosis/necrosis and a discrete signal of early apoptosis in all of the concentrations (p<0.01). Hoechst/iodide assay, it was observe significant difference among the stages of early and late apoptosis in the both cells lines. Pterogynine for the period of t0 and t24, and pterogynidine for the period of t0 demonstrated to possess an intense concentrationresponse... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2528.pdf: 3813512 bytes, checksum: fa4478664a26cf6d9e862070fa69b204 (MD5) Previous issue date: 2009-07-17 / Financiadora de Estudos e Projetos / This work reports the identification of quinolizidíne alkaloids (QA) and other non-alkaloidal secondary metabolites found in plants, and a discussion on the likely biosynthetic pathway of quinolizidine alkaloids. Phytochemical study of A. dasycarpum resulted in the isolation of 26 substances, 9 of them quinolizidine alkaloids: homo-6-epipodopetaline, acosmine, acosminine, dasycarpumine, bowdechine, panascomine, a mixture of lupanine and lupanocosmine and 24-methyl-homo-6-epipodopetaline, the later reported for the first time in the literature; two styryl &#945;-pyrones: 12-O-desmethylyangonine and 12-O-&#946;Dglucopyranosyldesmethylyangonine; two triterpenes: lupenone and lupeol, the later in large amounts; a mixture of steroids: sistosterol, campesterol and stigmasterol, and a chlorogenic acid: 5-O-cafeoilquinic acid. It was also isolated 2,3-dihidrobenzofuran derivatives: bowdenol and a mixture containing eight fatty acid esters of bowdenol, bowdenyl myristate, pentadecanoate, palmitoleate, palmitate, margarate, linoleate, oleate and stearate esters . The investigation of the methanol extract from the of roots of Acosmium dasycarpum using GC-MS, led to detect 30 quinolizidine alkaloids: &#945;-isosparteine, &#946;-sparteine, 5,6 dehydrosparteine, sparteine, ammodendrine, 4-hydroxysparteine, N- methyl angustifoline, lupanine, aphylline, multiflorine, homo-6-epipodopetaline, 18-epipiptanthine, piptanthine, podopetaline, ormosanine, homosweetinine, homoormosanine, homo-18-epiamazonine, homopiptanthine, homo-18-epipiptanthine, homopodopetaline, lupanocosmine, dasycarpumine, dasycosmine, acosmine, panascosmine and acosminine, santanine, isodasinine, dasinine and dasycosmine, the last four are compounds are reported here for the first time. It has been suggested a possible biogenesis for the quinolizidine alkaloids with lupine, acosmine and diazo-adamantane skeleta. / O presente trabalho relata a identificação de alcalóides quinolizidínicos (AQ) além de outros metabólitos secundários não alcaloídicos encontrados nessa planta, e tece comentários sobre o provável caminho biossintético de alcalóides quinilozidínicos. O estudo fitoquímico resultou no isolamento de 26 substâncias sendo 9 alcalóides quinolizidínicos: homo-6- epipodopetalina, acosmina, acosminina, dasicarpumina, bowdequina, panascomina; mistura de lupanina e lupanocosmina e 24-metil-homo-6-epipodopetalina, esta ultima é nova na literatura, duas estiril pironas: 12-O-desmetiliangonina, 12-O-&#946;Dglicopiranosil demetiliangonina; dois triterpenos: lupenona e lupeol, este em grande quantidade e a mistura dos esteróides: sistosterol, campesterol e estigmasterol, além do ácido clorogênico: ácido 5-O-cafeoilquínico. Foram isolados também o derivado 2,3-diidrobenzofurano: bowdenol e uma mistura contendo oito ésteres de ácidos graxos de bowdenol: miristato de bowdenila, pentadecanoato de bowdenila, palmitoleato de bowdenila, palmitato de bowdenila, margarato de bowdenila, linoleato de bowdenila, oleato de bowdenila e estearato de bowdenila. O estudo do extrato metanólico da raiz da Acosmium dasycarpum utilizando CG-EM, permitiu identificar 30 alcalóides quinolizidínicos: &#945;-isoesparteina, &#946;-isoesparteina, esparteina, 5,6 diidroesparteina, amodendrina, 4-hidroxiesparteina, Nmetiangustifolina, lupanina, afilina, multiflorina, homo-6-epipodopetalina, 18- epipiptantina, piptantina, podopetalina, homo-6-epipodopetalina, homoormosanina, ormosanina, homo-18-epiamazonina, homo-18-epipiptantina, homopodoetalina, homopiptantina, lupanocosmina, dasicarpumina, acosmina, panascosmina, acosminina, santanina, isodasinina, dasinina e dasicosmina, as quatro últimas são substância inéditas. Foi sugerida uma provável biogênese para os alcalóides quinolizidínicos com esqueleto lupínico, diaza-adamantano e acosmínico.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3353.pdf: 9748915 bytes, checksum: a7360f11a05ffa6f61ca6a629af312cd (MD5) Previous issue date: 2010-09-03 / Financiadora de Estudos e Projetos / This PhD thesis covered was devoted to the preparation of nitrogenated intermediates by multicomponent reactions (3-MCR) with potential application in the bioactive compound synthesis. The developed methodology consisted on the coupling reaction of an organometallic compound, formed by an alkyne and a metal salt or complex, and a nitrogenated electrophile like as imines or iminium salts. In the first part of this work we reported the A3 coupling reaction of aldehydes, 4-piperidone hydrochloride monohydrate and alkynols giving the corresponding hydroxy alkynyl piperidin-4-ones, which are important synthetic building blocks. In the second part of the work was developed a coupling reaction using benzylamine as primary amine source in order to prepare amino alkynols with the benzil group. These compounds were employed, as synthetic intermediates, in the synthesis of bioactive five, six and seven membered alkaloids. / Neste trabalho está descrita a preparação de intermediários sintéticos nitrogenados, através de reações multicomponentes (3-RMC), com potencial aplicação na síntese de compostos bioativos. A reação estudada promove o acoplamento de um composto organometálico, gerado a partir de um alquino e um sal metálico ou sal complexo, e um composto nitrogenado eletrofílico como iminas e sais de imínio, gerados in situ. A primeira parte do trabalho apresenta a reação de acoplamento A3 entre aldeídos, o sal hidroclorídrico da 4-piperidona e alquinóis levando a formação de hidroxi alquinil piperidin-4-onas, que são importantes blocos sintéticos. Na segunda parte do trabalho foi desenvolvida uma reação de acoplamento utilizando benzilamina como fonte de amina, visando à obtenção de benzilamino alquinóis. Estes compostos foram empregados como intermediários na síntese de alcaloides bioativos de cinco, seis e sete membros.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5614.pdf: 2554069 bytes, checksum: 3a7c896176869a2cab51dd48cfa6f9cf (MD5) Previous issue date: 2013-09-14 / Universidade Federal de Minas Gerais / 4-Quinolinone derivatives and hydantoins are important classes of cyclic nitrogen compounds which have very interesting biological activity against a variety of biological targets. Phytochemical studies of plants of the genus Dictyoloma, guided by in vitro bioassays, led to the isolation of three new 4-quinolinone alkaloids, the dictyolomides A and B and 6- methoxydictyolomide, which showed good activity against Leishmania. The absolute configuration of the natural dictyolomides is still unkown. This work aimed the asymmetric synthesis of these alkaloids. In order to introduce the enantiomeric enriched side chains in the 4-quinolinone core, some synthetic routes have been tested employing organometallic chemistry, among other techniques. A series of 4-quinolinone derivatives was also synthesized, using methods described in the literature, especially the one described by Ding et al., in which it uses microwave irradiation. The study of the synthesis of hydantoin derivatives was also performed using microwave irradiation as a source of energy. New organocatalysts were tested in order to obtain new amino acid derivatives which would be employed as starting materials in the synthesis of hydantoins. The synthesized compounds were submitted to bioassays focus on antiparasitic activity and enzyme inhibition. The result obtained with 4- quinolinone derivatives against proliferation of Leishmania amazonensis promastigotes and epimastigotes of Trypanosoma cruzi showed that the compounds possess in general better leishmanicidal than trypanocidal activity. Nevertheless, two of the synthesized compounds showed an excellent trypanocidal activity, even better than the standard, benznidazole. The 4- quinolinones have also shown good inhibitory activity against cathepsin L and V enzymes. / Derivados de 4-quinolinonas e hidantoínas são importantes classes de compostos cíclicos nitrogenados que apresentam atividade biológica bastante interessante frente a uma série de alvos biológicos. Estudos fitoquímicos de plantas do gênero Dictioloma, guiados por bioensaios in vitro, levaram ao isolamento de três novos alcaloides do tipo 4- quinolinonas, as dictiolomidas A e B, e a 6-metoxidictiolomida A, que apresentaram uma boa atividade antileishmania. As substâncias isoladas possuem um centro estereogênico, cuja elucidação seria efetuada via síntese destes compostos sendo, portanto um grande desafio sintético a obtenção destas moléculas. Visando esta síntese foram testadas algumas rotas, nas quais se fez uso de uma série de ferramentas químicas, como a química de organometálicos. Neste trabalho sintetizou-se ainda uma série de derivados de 4- quinolinonas, empregando metodologias descritas na literatura, em especial a metodologia descrita por DING et al.1, na qual se utiliza a irradiação de microondas na obtenção de derivados de 4-quinolinonas. O estudo da síntese dos derivados de hidantoínas também foi realizado utilizando a irradiação de microondas como fonte de energia. Foram testados novos organocatalisadores para a obtenção de derivados de aminoácidos a serem utilizados na síntese dos derivados de hidantoínas. Os compostos sintetizados tiveram suas atividades biológicas avaliadas frente a alguns alvos biológicos. O resultado de atividade obtido dos derivados de 4-quinolinonas frente a proliferação de formas promastigotas de Leishmania amazonensis e formas epimastigotas de Trypanosoma cruzi demonstrou que os compostos apresentaram em geral uma melhor atividade leishmanicida do que tripanocida, porém dois dos compostos sintetizados apresentaram uma excelente atividade tripanocida, inclusive melhor que o padrão utilizado, o benzonidazol. Foi avaliada também a atividade inibitória das enzimas Catepsinas V e L dos derivados de 4-quinolinonas, apresentando uma boa atividade inibitória destas enzimas.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:35:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseMRA.pdf: 5275801 bytes, checksum: 8e03e586571c9a0adab0d1525691c66a (MD5) Previous issue date: 2003-11-18 / Universidade Federal de Sao Carlos / This work describes the phytochemical study of two plant species Galipea bracteata and Ravenia infelix belonging to the family Rutaceae, aiming the isolation and structure determination of componds from leaves and branches of these plants. This work is also directed to the search of trypanocidal and leishmanicidal compounds from these plants. The following models were used to check the biological activities of the isolated compounds: antiparasitc activity - trypomastigote form of Trypanosoma cruzi in vitro , enzymatic inhibitory activity on gGAPDH (Glyceraldeyde 3- phosphate dehidrogenase) of T. cruzi and enzymatic inhibitory activity on APRT (Adheninephosphoribosyl- transferase) of Leishmania tarentolae. The leaves extract of G. bracteata afforded tirtheen quinoline alkaloids. Among these compounds seven have been described for the first time: 2-(3 ,4 -methylenedioxyphenylethyl)quinoline, 4- methoxy-2-(propan-1 -ona)quinoline (inedit), 4-methoxy-2-(1 ,2 -transepoxypentyl) quinoline (inedit), 4-methoxy-2-n-heptylquinoline, 2-(1 ,2 -transepoxypentyl) quinoline (inedit), 4-methoxy-2-(3 ,4 - methylenedioxyphenylethyl)quinoline, 4-methoxy-2-(1 ,2 -trans-epoxypropyl)quinoline (inedit), 4-methoxy-2-n-propylquinoline, 2-n-pentylquinoline, 2-(propan-1 - one)quinoline (inedit), 4-methoxy-2-(pentan-1 -one)quinoline (inedit), 2-(pentan-1 - one)quinoline (inedit), a mixture of steroids campesterol, stigmasterol and sitosterol, one furoquinoline alkaloid evolitrine, a mixture of seco-furoquinoline alkaloids Edimethylrhoifolinate and Z-dimethylrhoifolinate, a pentacylclic triterpene arborinol and norsesquiterpene 3,5-dihydromegastigma-6,7-diene-9-one. From the branches of R. Infelix were isolated the carbazole alkaloids: 3-methylcarbazole and girinimbin, the steroids: 7-oxo-stigmasterol and 7-oxo-sitosterol, the indol 3-carboxaldeheide and mixtures of amides: N-trans and N-cis-feruloyltyramine, and N-trans and-cis-pcumaroyltyramine. The pure compounds had their trypanocidal and leishmanicidal activities determined. / O presente trabalho descreve o estudo fitoquímico de duas espécies de plantas pertencentes à família Rutaceae, no intuito de elucidar estruturas de micromoléculas presentes nas folhas e galhos. O estudo de Galipea bracteata e Ravenia infelix (Rutaceae) está também associado à busca de metabólitos com atividades tripanocida e leishmanicida, através dos seguintes modelos experimentais selecionados para verificação da atividade biológica: atividade antiparasitária forma tripomastigota de Trypanosoma cruzi in vitro , inibição enzimática in vitro (gGAPDH - Gliceraldeído- 3-fosfato-desidrogenase de T. cruzi) e inibição enzimática in vitro (APRT Adenina-fosforribosil-transferase de Leishmania tarantolae). Dos extratos das folhas de Galipea bracteata foram isolados treze alcalóides quinolínicos, dentre estas substâncias sete estão sendo descritas pela primeira vez: 2-(3 ,4 - metilenodioxifeniletil)quinolina, 4-metoxi-2-(propan-1 -ona)quinolina (inédita), 4- metoxi-2-(1 ,2 -trans-epoxipentil)quinolina (inédita), 4-metoxi-2-n-pentilquinolina, 4-metoxi-2-n-heptilquinolina, 2-(1 ,2 -trans-epoxipentil)quinolina (inédita), 4-metoxi-2- (3 ,4 -metilenodioxifeniletil)quinolina, 4-metoxi-2-(1 ,2 -trans-epoxipropil)quinolina (inédita), 4-metoxi-2-n-propilquinolina, 2-n-pentilquinolina, 2-(propan-1 - ona)quinolina (inédita), 4-metoxi-2-(pentan-1 -ona)quinolina (inédita), 2-(pentan-1 - ona)quinolina (inédita), mistura dos esteróides campesterol, estigmasterol e &#946;- sitosterol, um alcalóide furoquinolínico evolitrina, uma mistura de alcalóides seco furoquinolínicos E e Z-rhoifolinato de dimetila, o triterpeno pentacíclico arborinol e o norsesquiterpeno 3,5-diidromegastigma-6,7-dieno-9-ona. Dos galhos de R. infelix foram isolados os alcalóides carbazóis: 3-metilcarbazol e girinimbina, os esteróides: 7-oxo-estigmasterol e 7-oxo-&#946;-sitosterol, o indol: indol-3-carboxaldeído e misturas das amidas N-trans e N-cis-feruloiltiramina e N-trans-p e N-cis-p-cumaroiltiramina. Estas substâncias puras foram submetidas a testes para verificação das atividades tripanocida e leishmanicida.