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Caracterização do estresse oxidativo das células embrionárias do carrapato Rhipicephalus microplus (BME26) em resposta à infecção por Anaplasma marginale / Characterization of the oxidative stress in embryonic cells from Rhipicephalus microplus (BME26) in response to Anaplasma marginale infection.Perdomo, Sandra Patricia Kalil 23 August 2016 (has links)
As espécies reativas de oxigênio (ERO) e de nitrogênio (ERN) são essenciais na resposta imune dos artrópodes aos microrganismos. Este estudo teve como objetivo a caracterização do estresse oxidativo das células embrionárias BME26 do carrapato R. microplus em resposta à infecção por A. marginale. Mostrou-se que A. marginale invade as células BME26 durante a primeira hora. No perfil de expressão de diversos genes codificadores de proteínas que estão envolvidas na produção e destoxificação de ERO e ERN após desafios com A. marginale e R. rickettsii, foi observado que A. marginale inibiu os transcritos das enzimas oxidantes 72 horas após a infecção. Em contrapartida os genes codificadores das enzimas antioxidantes foram todos induzidos. O perfil de expressão gênica pela infecção por R. rickettsii foi diferente do obtido com A. marginale uma vez que se detectou uma maior indução dos genes oxidantes e repressão dos antioxidantes. O silenciamento de quatro genes antioxidantes por RNAi indicaram o envolvimento da resposta redox no controle da infecção por A. marginale. Com isto se demonstra que o estresse oxidativo é importante no controle da infecção pela bactéria nas células BME26 podendo afetar a capacidade vetorial do carrapato na transmissão desse patógeno. / The production of reactive oxygen species (ROS) and nitrogen (ERN) is essential in the immune response of the arthropods. The aim of this study was the characterization of the oxidative stress of the embryonic cell line BME26 from the cattle tick R. microplus in response to A. marginale infection. It was shown that A. marginale invade BME26 cells during the first 1 hour. The expression profile of sixteen genes encoding proteins involved in either production or detoxification of ROS and RNS in response to A. marginale e R. rickettsii, was shown A. marginale caused a down-regulation of the genes encoding the oxidant enzymes in 72 hours after infection. In contrast the genes encoding the antioxidant were induced. The gene expression pattern in response to R. rickettsii was different from that triggered by A. marginale challenge, with induction of oxidant genes and down-regulation of antioxidant genes. The knockdown of four genes encoding the antioxidant enzymes by RNAi suggests that redox response play a role in the control of infection by A. marginale. Our dataset have shown the importance of the oxidative stress to control A. marginale infection by BME26 cells and might have implications on the vectorial capacity of R. microplus in transmission of this pathogen.
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Preval?ncia de anticorpos para agentes da Tristeza Parasit?ria Bovina, Trypanosoma vivax e Borrelia sp em bovinos do nordeste do estado do Par?, Brasil / Prevalence of Antibodies for Babesia bigemina, Babesia bovis, Anaplasma marginale, Trypanosoma vivax and Borrelia sp in Cattle from Northeastern of Par? State, BrazilGuedes Junior, Daniel da Silva 23 February 2006 (has links)
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Previous issue date: 2006-02-23 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Babesiosis, anaplasmosis, trypanosomosis and borreliosis are relevant diseases, potentially causing morbidity in cattle, leading to economic losses. The objective of this study was to determine, through indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), the prevalence of Babesia bigemina, Babesia bovis, Anaplasma marginale, Trypanosoma vivax and Borrelia sp. antibodies in cattle to estabilish the risk of outbreaks. Sera samples of 246 female adult cattle from Castanhal and S?o Miguel do Guam?, northeastern Par? counties (areas with recorded copper and cobalt deficiency) were used. Crude antigen was used in the serologic technique to detect antibodies against B. bigemina, B. bovis, T. vivax and Borrelia sp. For the detection of A. marginale antibodies, recombinant major surface 1a protein (MSP1a) was used as antigen for indirect ELISA. The serum samples showed a prevalence of 99.2% (B. bigemina), 98.8% (B. bovis), 68.3% (A. marginale), 93.1% (T. vivax) and 54.9% (Borrelia sp). The municipalities were considered stable enzootic areas for B. bigemina, B. bovis and T. vivax, but unstable ones for A. marginale and Borrelia sp. In spite of the stability determined for some studied areas, babesiosis, anaplasmosis and trypanosomosis cases with severe clinical signs were seen on the studied region, possibly due to the mineral deficiency that decreases the immune response and immunoreativity of the animals. / A babesiose e a anaplasmose juntamente com a tripanossomose e borreliose s?o doen?as de import?ncia por causarem, potencialmente, morbidade no rebanho bovino, causando preju?zos ? economia. O presente trabalho teve como objetivo investigar, atrav?s do teste ELISA indireto, a preval?ncia de anticorpos para Babesia bigemina, B. bovis, Anaplasma marginale, Trypanosoma vivax e Borrelia burgdorferi em bovinos, avaliando o risco de surtos de doen?a. Foram utilizadas amostras de soro de 246 bovinos f?meas, adultas, provenientes dos munic?pios de Castanhal e S?o Miguel do Guam?, regi?o nordeste do estado do Par? com registros de defici?ncias de Cobre e Cobalto. Foi feita sorologia atrav?s do ensaio imunoenzim?tico ELISA indireto, utilizando-se ant?genos brutos para os agentes: B. bigemina, B. bovis, T. vivax e B. burgdorferi. Em rela??o a A. marginale, foi utilizada a prote?na recombinante MSP1a como ant?geno. A an?lise dos soros revelou a preval?ncia para B. bigemina de 99,2%, B. bovis 98,8 %, A. marginale 68,3%, T. vivax 93,1% e Borrelia sp 54,9%. Os munic?pios estudados foram caracterizados como enzooticamente est?veis para B. bigemina, B. bovis e T. vivax, e enzooticamente inst?veis para A. marginale e Borrelia sp. Apesar da estabilidade prevista para alguns agentes na ?rea do estudo, casos cl?nicos de babesiose, anaplasmose e tripanossomose ocorrem na regi?o, possivelmente devido ? defici?ncia mineral, que leva a diminui??o da resposta imune e da imunorreatividade org?nica dos animais.
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MARCADORES DE ESTRESSE OXIDATIVO E ATIVIDADE DAS COLINESTERASES EM BOVINOS EXPERIMENTALMENTE INFECTADOS POR Babesia bovis, Babesia bigemina E Anaplasma marginale / OXIDATIVE STRESS MARKERS AND ACTIVITY CHOLINESTERASE IN EXPERIMENTALLY INFECTED CATTLE WITH Babesia bovis, Babesia bigemina AND Anaplasma marginaleDoyle, Rovaina Laureano 20 February 2015 (has links)
Babesiosis and anaplasmosis are part of the complex called Bovine Parasitic Sadness (TPB), a disease that
causes high morbidity and mortality in susceptible cattle. It is caused by infection of Babesia bovis and
Babesia bigemina protozoa and by the bacterium Anaplasma marginale. The objective of this study was
to evaluate oxidative stress parameters in cattle experimentally infected with B. bovis and B. bigemina and
the activities of cholinesterase in asymptomatic B. bigemina well as interference of splenectomy in the
oxidative balance of cattle infected with A. marginale. For this, three experiments were performed, using
24 young cattle divided into three groups, each consisting of eight animals which: in the first experiment,
four control and four infected with attenuated strain of B. bovis, which were observed decrease in
erythrocytes count and activities of catalase (CAT) and superoxide dismutase (SOD) in addition to
increased levels of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS). In Experiment II, we used four cattle
control and four infected with attenuated strain of B. bigemina, observed decrease in the activities of
acetylcholinesterase (AChE), butyrylcholinesterase (BChE) and CAT, and increased levels of TBARS and
SOD in infected cattle. And, in Experiment III, four splenectomized cattle and four intact, both groups
infected with A. marginale, with no difference between groups in the hematological and enzymatic
profile, only observed drop in hematocrit, red blood cell count and hemoglobin concentration, and
increased total leukocyte count due to lymphocytosis in both groups. Positive correlations were found
between TBARS versus bacteremia and negative between NPSH versus bacteremia in both groups, but
the correlations were higher in splenectomized group. From the results it can be inferred that infection
with B. bovis causes oxidative balance, in the same way B. bigemina infection induces an oxidative stress
condition and changes the atividase cholinesterase even in asymptomatic animals and bacteremia by A.
marginale influences lipid peroxidation in independent splenectomy cattle. This study may suggest that
oxidative stress and low-grade inflammation markers can be used as auxiliary tool in the early diagnosis
of this disease as well as the basis for studies on the use of antioxidants in the diet of cattle to prevent
infection and / or reduce the severity of injuries caused by these parasites. / A Tristeza Parasitária Bovina (TPB) é uma doença que causa alta morbidade e mortalidade
em bovinos suscetíveis, causada pela infecção dos protozoários Babesia bovis e Babesia
bigemina e pela bactéria Anaplasma marginale. O objetivo deste estudo foi avaliar
parâmetros de estresse oxidativo em bovinos experimentalmente infectados com B. bovis e
B. bigemina e as atividades das colinesterases na infecção assintomática por B. bigemina
assim como a interferência da esplenectomia no equilíbrio oxidativo de bovinos infectados
com A. marginale. Para tanto, foram realizados três experimentos, sendo utilizados 24
bovinos jovens divididos em três grupos experimentais, cada um composto por oito animais
sendo: no Experimento I, quatro controles e quatro infectados com cepa atenuada de B.
bovis, onde foram observados decréscimo na contagem de hemácias e nas atividades das
enzimas catalase (CAT) e superóxido dismutase (SOD) concomitantes com aumento nos
níveis das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). No experimento II, foram
usados quatro bovinos controles e quatro infectados com cepa atenuada de B. bigemina,
sendo observados decréscimo nas atividades das enzimas acetilcolinesterase (AChE),
butirilcolinesterase (BChE) e CAT e aumento nos níveis de TBARS e SOD nos bovinos
infectados. E, no Experimento III, quatro bovinos esplenectomizados e quatro intactos,
ambos os grupos infectados com A. marginale, não havendo diferença entre os grupos no
perfil hematológico e enzimático, apenas observada queda no hematócrito, contagem de
hemácias e concentração de hemoglobina e aumento na contagem total de leucócitos devido
a um aumento na contagem de linfócitos em ambos os grupos. Foram evidenciadas
correlações positiva entre TBARS e a bacteremia e negativa entre NPSH e a bacteremia em
ambos os grupos, porém as correlações foram maiores no grupo esplenectomizado. A partir
dos resultados pode-se inferir que a infecção por B. bovis causa desequilíbrio oxidativo, da
mesma forma que a infecção por B. bigemina induz a uma condição de estresse oxidativo e
altera a atividade das colinesterases mesmo em animais assintomáticos e que a bacteremia
por A. marginale influencia na peroxidação lipídica em bovinos independente da
esplenectomia. Com este estudo, pode-se sugerir que marcadores de estresse oxidativo e de
inflamação de baixo grau podem ser utilizados como ferramenta no auxílio do diagnóstico
precoce desta enfermidade assim como servir de base para estudos referentes ao uso de
antioxidantes na alimentação de bovinos para prevenir a infecção e/ou reduzir a gravidade
das lesões causadas por estes parasitas.
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Caracterização do estresse oxidativo das células embrionárias do carrapato Rhipicephalus microplus (BME26) em resposta à infecção por Anaplasma marginale / Characterization of the oxidative stress in embryonic cells from Rhipicephalus microplus (BME26) in response to Anaplasma marginale infection.Sandra Patricia Kalil Perdomo 23 August 2016 (has links)
As espécies reativas de oxigênio (ERO) e de nitrogênio (ERN) são essenciais na resposta imune dos artrópodes aos microrganismos. Este estudo teve como objetivo a caracterização do estresse oxidativo das células embrionárias BME26 do carrapato R. microplus em resposta à infecção por A. marginale. Mostrou-se que A. marginale invade as células BME26 durante a primeira hora. No perfil de expressão de diversos genes codificadores de proteínas que estão envolvidas na produção e destoxificação de ERO e ERN após desafios com A. marginale e R. rickettsii, foi observado que A. marginale inibiu os transcritos das enzimas oxidantes 72 horas após a infecção. Em contrapartida os genes codificadores das enzimas antioxidantes foram todos induzidos. O perfil de expressão gênica pela infecção por R. rickettsii foi diferente do obtido com A. marginale uma vez que se detectou uma maior indução dos genes oxidantes e repressão dos antioxidantes. O silenciamento de quatro genes antioxidantes por RNAi indicaram o envolvimento da resposta redox no controle da infecção por A. marginale. Com isto se demonstra que o estresse oxidativo é importante no controle da infecção pela bactéria nas células BME26 podendo afetar a capacidade vetorial do carrapato na transmissão desse patógeno. / The production of reactive oxygen species (ROS) and nitrogen (ERN) is essential in the immune response of the arthropods. The aim of this study was the characterization of the oxidative stress of the embryonic cell line BME26 from the cattle tick R. microplus in response to A. marginale infection. It was shown that A. marginale invade BME26 cells during the first 1 hour. The expression profile of sixteen genes encoding proteins involved in either production or detoxification of ROS and RNS in response to A. marginale e R. rickettsii, was shown A. marginale caused a down-regulation of the genes encoding the oxidant enzymes in 72 hours after infection. In contrast the genes encoding the antioxidant were induced. The gene expression pattern in response to R. rickettsii was different from that triggered by A. marginale challenge, with induction of oxidant genes and down-regulation of antioxidant genes. The knockdown of four genes encoding the antioxidant enzymes by RNAi suggests that redox response play a role in the control of infection by A. marginale. Our dataset have shown the importance of the oxidative stress to control A. marginale infection by BME26 cells and might have implications on the vectorial capacity of R. microplus in transmission of this pathogen.
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Perfil da pecu?ria leiteira e aspectos epidemiol?gicos do complexo tristeza parasit?ria bovina na mesorregi?o sul Esp?rito-santense, ES. / Profile of dairy farms and epidemiological aspects of the bovine babesiosis and anaplasmosis in the south Esp?rito-santense area.Franque, Marcos Pinheiro 19 March 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-03-19 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico, CNPq, Brasil. / This work describes the dairy farms profile and of its owners, as well as the epidemiological
condition of the herd to Babesia bovis, Babesia bigemina and Anaplasma marginale infection
in the south mesorregi?o Espirito-santense, with base in a serologic study. Owners or manager
of 38 dairy farms were interviewed with a semi-structured questionnaire and the data analyzed
by descriptive statistics. In 97% of the dairy farms, the herd was formed by animals with
different degrees of blood girolando. Of all producers, 61% were exclusively dairy farms
owners and 34% were also coffee producer. The extensive creation system is used in 61% of
dairy farms. The dairy farms management, in 89% and 11% of the cases were accomplished
by the owners and administrators, respectively. The serologic study was accomplished using
indirect ELISA of 756 samples of bovine serum, 380 of dairy cows and 376 of calves in
breast feeding phase. The mesorregi?o studied was classified in situation of stability for B.
bovis (98,4%), B. bigemina (96,7%) and A. marginale (96,6%) to dairy cows. In relation to
the calves was observed prevalence of 75,5% to Babesia bovis, 78,5% to B. bigemina and
69,2% to A. marginale. In general, the results demonstrated that is possible to increase the
production and productivity of these dairy farms, but is necessary the owners adapts to the
current competitive productive milk system, mainly about the managerial aspect. In the south
mesorregi?o Esp?rito-santense the risk of occurrence of outbreaks of babesiosis or
anaplasmosis in adult animals is low. However, preventive measured should be adopted for
the calves, mainly for those with less to three months of age. / Este trabalho descreve o perfil de propriedades leiteiras e dos produtores, bem como a
situa??o epidemiol?gica do rebanho da mesorregi?o sul Esp?rito-santense em rela??o ?
Babesia bovis, Babesia bigemina e Anaplasma marginale, com base em um estudo
sorol?gico. Propriet?rios ou administradores de 38 estabelecimentos produtores foram
entrevistados com uso de um question?rio semi-estruturado e os dados analisados atrav?s de
estat?stica descritiva. Em 97% das propriedades visitadas, o rebanho leiteiro era formado por
animais com diferentes graus de sangue girolando. Dentre os produtores, 61% se dedicavam
exclusivamente a produ??o leiteira e 34% tamb?m se dedicavam ? cafeicultura. O sistema de
cria??o extensiva foi utilizado em 61% das propriedades. Foi observado que o gerenciamento,
em 89% e 11% dos casos era realizado pelos propriet?rios e administradores,
respectivamente. O estudo sorol?gico foi realizado utilizando o m?todo de ELISA indireto a
partir de 756 amostras de soro bovino, dos quais 380 de vacas em lacta??o e 376 de bovinos
jovens em fase de aleitamento. Para vacas em lacta??o, a mesorregi?o foi classificada em
situa??o de estabilidade para B. bovis (98,4%), B. bigemina (96,7%) e A. marginale (96,6%).
Em rela??o aos bovinos jovens foi observada preval?ncia de 75,5% para Babesia bovis,
78,5% para B. bigemina e 69,2% para A. marginale. Os resultados demonstraram que, em
geral, as propriedades possuem potencial para aumentar sua produ??o e produtividade, mas os
produtores precisam se adequar ao competitivo sistema de produ??o de leite, principalmente
no aspecto gerencial. Na mesorregi?o sul Esp?rito-santense o risco de ocorr?ncia de surtos das
doen?as do Complexo Tristeza Parasit?ria Bovina ? baixo para os animais adultos. Contudo,
medidas preventivas devem ser adotadas para os bezerros, principalmente para aqueles com
menos de tr?s meses de idade.
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Resposta celular em linfonodos de bovinos inoculados com Anaplasma marginale / Cellular response in bovine limph nodes inoculated with Anaplasma marginaleResende, Daniela de Melo 28 February 2003 (has links)
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Previous issue date: 2003-02-28 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / The immune response against the pathogen Anaplasma marginale was evaluated after the inoculation, in calves, with the strain AUFV1 2nd passage. For this, routine coloration techniques and immunohistochemistry techniques were performed in slides of superficial limph nodes. In the first week post inoculation, a proliferative response was observed in the paracortical areas and, in the third week, a great number of germinal centers. With the TUNEL technique, many cells in apoptosis were observed, in a number statistically significant six and 13 days post inoculation. Antigens of A. marginale presented by dendritic cells were detected with the Indirect Immunoperoxidase technique six days post inoculation, and these were not observed in the limph node of the negative control animal. The same technique was also performed with the purpose of identifying the surface antigens CD4, CD8 and WC1, and a little augment was observed only on the population of lymphocytes CD4+. Another experiment evolved the isolation of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), wich were isolated in the same days the limph nodes were coleted, for studies of proliferation and production of cytokines after reestimulation ex vivo. The mitogen Con A and initial bodies of A. marginale were utilized as positive controls. The PBMCs were estimulated wiht two synthetic peptides based on the structure of the surface protein of A. marginale MSP-2, named 13590 and 13591. A negative control was also utilized, were was added incomplete medium only. On the proliferative tests, only six days post inoculation the peptides were better than the negative control, with numbers statistically significants (p<0,05). On this way, we could conclude that the inoculated animals developed an adaptative immune response against A. marginale, probably evolving T helper cells. In relation to the synthetic peptides tested, we can only afirm that they are good candidates for the development of a vaccine against bovine anaplasmosis, but more studies have to be performed in this area. / Foi avaliada a resposta imune contra o patógeno Anaplasma marginale através da inoculação, em bezerros, da amostra AUFV1 2a passagem. Para tanto, foram realizadas técnicas de coloração de rotina e técnicas imunohistoquímicas em cortes de linfonodos superficiais. Inicialmente, foi observada uma resposta proliferativa na área paracortical e, a partir da terceira semana pós-inoculação, grande reatividade de centros germinais. Através da técnica de TUNEL, foram observadas inúmeras células em apoptose, em número estatisticamente significativo aos seis e 13 dias pós-inoculação. Antígenos de A. marginale apresentados por células dendríticas foram detectados pela técnica da Imunoperoxidase Indireta já aos seis dias pós-inoculação, não sendo observados no linfonodo do animal controle negativo. A técnica da Imunoperoxidase Indireta também foi utilizada para a detecção de antígenos CD4, CD8 e WC1, sendo observado um pequeno aumento apenas de linfócitos CD4+. Paralelamente a estes estudos, foram isoladas células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), nos mesmos dias em que eram feitas as coletas de linfonodos, para estudos de proliferação e de produção de citocinas após reestimulação ex vivo. Como controle positivo, foi utilizado o mitógeno celular Concanavalina A, além de corpúsculos iniciais de A. marginale. As PBMCs foram estimuladas com dois peptídeos sintéticos baseados na estrutura da proteína de superfície de A. marginale MSP-2, os peptídeos 13590 e 13591. Também foi feito um controle negativo, onde era adicionado apenas meio de cultivo incompleto. Nos testes proliferativos, apenas aos seis dias pós-inoculação os peptídeos tiveram desempenho melhor, estatisticamente significativo (p<0,05), com relação ao controle negativo. Dessa forma, pode-se concluir que os animais inoculados desenvolveram uma resposta imune adaptativa contra o A. marginale, provavelmente envolvendo células T auxiliares. Quanto aos peptídeos sintéticos testados, serão necessários mais estudos, podendo-se afirmar apenas que eles são candidatos ao desenvolvimento de uma vacina eficaz contra o A. marginale.
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Desenvolvimento e caracterização de filmes de poli(ácidos hidroxifenilacéticos) para aplicação na biodetecção de Neisseria meningitidis e Anaplasma marginaleRodrigues, Luciano Pereira 08 August 2014 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / In this study we investigated the electropolymerization isomers hydroxyphenylacetic acid, for their application in the construction of polymeric systems, by immobilizing synthetics molecules for development of biological sensors. The graphite electrodes electrochemically modified were characterized for morphology and electrochemical behavior showing that the poly(2-hydroxyphenylacetic acid), poly(3-hydroxyphenylacetic acid) and poly(4-hydroxyphenylacetic) are electroactive, and the latter showed a lower yield in electrosynthesis in agreement with the images of atomic force microscopy showed that the surface of graphite electrodes were changed less with this material compared to its isomers. The electrochemical impedance spectra of poly (4-hydroxyphenylacetic acid) showed that this material is more resistive with respect to its other isomers which are more conductive in accordance with the values of current and voltage shown by tests ion exchange the probes positive and negative. The ratio between the masses electrodeposited and the loads required to carry out the redox process these materials remained constant demonstrating that the same number of electrons are involved in reduction and oxidation of these materials according to the diagnostic reversibility applied by cyclic voltammetry are unanimously reversible systems, however poly(3-hydroxyphenylacetic acid) was more stable during repeated cycling electrochemically in perchloric acid. The optimized tridimensional structures justify the electrochemical and morphologic behavior of these three platforms, wherein the poly(2-hydroxyphenylacetic acid) and poly(3-hydroxyphenylacetic acid) have structures with a more ordered arrangement, unlike poly(4-hydroxyphenylacetic acid), which has a rather more disordered structure and therefore more resistive, while isomers are more conductors. The mechanistic proposal begins with the anodic oxidation of monomers whose square wave voltammetry experiments showed the loss of an electron. The couplings between cation radicals promote a formation of ether leaving the acetate groups exposed on the structure. The pairing occurs between the phenolic oxygen and carbon of the aromatic ring whose potential were studied by spin density and consistent with the resonance structures of the cation-radical that are in the suggested mechanisms. In tests incorporation of nitrogenous bases found that poly(3-hydroxyphenylacetic acid) also proved more effective in the retention of the same and for this reason associated with their better electrochemical behavior described above, it was selected among others for applying isomers polimeric systems by immobilizing synthetics molecules by physical adsorption. In the first system froze synthetic oligonucleotides that mimic fragments of DNA from the bacterium Neisseria meningitidis able to recognize their genomic DNA in samples of pure cultures by differential pulse voltammetry and electrochemical impedance spectroscopy, and this latter showed a better response sensitivity signal in relation to the increasing concentration of the target. In the second system, there immobilization of synthetic peptides compatible to the cell membrane of Anaplasma marginale able to selectively recognize antibodies in their sera samples from cattle. The images made by atomic force microscopy of the two procedures backing the effective recognition of both polimeric systems developed for the detection of Neisseria meningitidis and Anaplasma marginale bacteria causing bacterial meningitis and bovine anaplasmosis, respectively. / Neste trabalho foi investigada a eletropolimerização dos isômeros do ácido hidroxifenilacético, visando sua aplicação na construção de sistemas poliméricos, através da imobilização de moléculas sintéticas para o desenvolvimento de sensores biológicos. Os eletrodos de grafite eletroquimicamente modificados foram caracterizados quanto à morfologia e o comportamento eletroquímico, evidenciando que o poli(ácido 2-hidroxifenilacético), poli(ácido 3-hidroxifenilacético) e poli(ácido 4-hidroxifenilacético) são eletroativos, sendo que este último apresentou um menor rendimento em massa na eletrossíntese, em concordância com as imagens de microscopia de força atômica, que mostraram que a superfície dos eletrodos de grafite foram menos alteradas com este material em relação aos seus isômeros. Os espectros de impedância eletroquímica do poli(ácido 4-hidroxifenilacético), mostraram que esse material é mais resistivo em relação aos seus outros isômeros que são mais condutores em concordância com os valores de corrente e potencial evidenciados nos ensaios de troca iônica nas sondas positiva e negativa. A relação entre as massas eletrodepositadas e as cargas necessárias para realizar o processo redox nestes materiais foi constante, indicando que o mesmo número de elétrons está envolvido na oxidação e redução destes materiais, que se comportaram como sistemas reversíveis segundo os diagnósticos de reversibilidade aplicados por voltametria cíclica, todavia o poli(ácido 3-hidroxifenilacético) mostrou-se mais estável eletroquimicamente durante sucessivas ciclagens em ácido perclórico. As estruturas tridimensionais otimizadas justificam o comportamento eletroquímico e morfológico destas três plataformas, em que os poli(ácido 2-hidroxifenilacético) e poli(ácido 3-hidroxifenilacético) apresentam estruturas com um arranjo mais ordenado e por isso são mais condutores ao contrário do poli(ácido 4-hidroxifenilacético) que tem uma estrutura mais desordenada, e por isso mais resistiva. A proposta mecanística inicia-se com a eletrooxidação dos monômeros, cujas investigações experimentais por voltametria de onda quadrada, mostraram a perda de um elétron. Os acoplamentos entre os cátions radicais promovem uma formação de éter deixando os grupos acetato expostos na estrutura. O emparelhamento ocorre entre o oxigênio fenólico e carbonos do anel aromático, cujas possibilidades foram estudadas pela densidade de spin e concordantes com as estruturas de ressonância dos cátions-radicais que estão nos mecanismos sugeridos. Nos testes de incorporação de bases nitrogenadas, verificou-se que o poli(ácido 3-hidroxifenilacético) mostrou-se mais eficiente na retenção das mesmas e por este motivo associado ao seu melhor comportamento eletroquímico, foi selecionado dentre os outros isômeros como o sistema polimérico mais adequado para aplicação nas detecções, através da imobilização por adsorção física de moléculas sintéticas de reconhecimento. No primeiro sistema, imobilizou-se oligonucleotídeos sintéticos compatíveis a fragmentos de DNA da bactéria Neisseria meningitidis, capazes de reconhecer seu DNA genômico em amostras por voltametria de pulso diferencial e espectroscopia de impedância eletroquímica, sendo que esta última mostrou uma melhor sensibilidade de resposta de sinal em relação ao aumento de concentração do alvo. No segundo sistema, ocorreu a imobilização de peptídeos sintéticos compatíveis à membrana celular da Anaplasma marginale, capazes de reconhecer seletivamente seus anticorpos em amostras de soros sanguíneos bovinos. As imagens feitas por microscopia de força atômica, respaldam o reconhecimento eficaz de ambos os sistemas poliméricos desenvolvidos para detecção das bactérias Neisseria meningitidis e Anaplasma marginale, causadores de meningite bacteriana e anaplasmose bovina, respectivamente. / Doutor em Química
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