A presença de bactérias resistentes a antimicrobianos vem sendo monitorada de forma cada vez mais frequente em produtos de origem animal, com o intuito de evitar a disseminação dessas cepas para humanos via cadeia alimentar. O gênero Enterococcus encontra-se entre os patógenos mais relevantes nas infecções hospitalares em humanos e tem capacidade de adquirir resistência a diversos antimicrobianos. No presente estudo foi avaliada a frequência de isolamento e a resistência antimicrobiana de Enterococcus sp. de carcaças suínas na etapa de pré-resfriamento, em três matadouros-frigoríficos localizados no estado de Santa Catariana. Dois ciclos de amostragem foram conduzidos em cada estabelecimento resultando em 252 suabes de carcaças. A partir dessas amostras, foram obtidos 240 isolados de Enterococcus sp. identificados por testes fenotípicos e pela detecção do gene tuf e ddlE.faecalis pela técnica de reação em cadeia da polimerase. Todos os isolados de Enterococcus sp. foram testados quanto à resistência a antimicrobianos pela técnica de difusão em ágar. A espécie mais prevalente foi Enterococcus faecalis (E. faecalis), presente em 90,83% das amostras de carcaça. Foi observada resistência à tetraciclina (42,5%), eritromicina (26,7%), estreptomicina (20,4%), ciprofloxacina (13,8%), cloranfenicol (12,1%) e a gentamicina (10,4%). Não foram encontrados isolados resistentes à vancomicina, teicoplanina e ampicilina. Os isolados que apresentaram perfil intermediário e resistente aos antimicrobianos ciprofloxacina e eritromicina, no teste de disco-difusão, foram submetidos à determinação da concentração inibitória mínima (CIM). Em relação à ciprofloxacina, das 25 cepas com resistência intermediária no teste de disco-difusão, todas apresentaram CIM na concentração limítrofe (1,56 μg/mL), entre a sensibilidade e resistência, enquanto nas 74 cepas intermediárias frente à eritromicina, apenas duas apresentaram valor limítrofe máximo (4 μg/mL). Conclui-se que o gênero Enterococcus está presente em carcaças suínas na etapa de pré-resfriamento, sendo a espécie E. faecalis a mais encontrada. Apesar de existirem isolados resistentes a antimicrobianos usados na terapêutica humana, os resultados indicam que isolados resistentes a vancomicina, teicoplanina e ampicilina não estão presentes em carcaças suínas nos abatedouros estudados. / The presence of antimicrobial-resistant bacteria has been increasingly monitored in animal products in order to prevent the spread of these strains to humans through the food chain. The genus Enterococcus is among the most important pathogens in hospital infections in humans and is able to acquire resistance to several antibiotics. In the current study, the frequency of isolation and antimicrobial resistance of Enterococcus sp. from swine carcasses at the pre-chill stage in three slaughterhouses located in the state of Santa Catarina were evaluated. Two sampling cycles were performed at each establishment and 252 carcass swabs were taken. A total of 240 strains of Enterococcus sp. were identified by phenotypic testing and by PCR detection of tuf and ddI genes. All Enterococcus isolates were tested for resistance against antimicrobials by the agar diffusion technique. The most prevalent species was Enterococcus faecalis (E. faecalis), present in 90.83% of the carcass samples. Tetracycline (42.5%), erythromycin (26.7%), streptomycin (20.4%), ciprofloxacin (13.8%), chloramphenicol (12.1%) and gentamicin (10.4%) resistance was observed. No isolates were found resistant to vancomycin, teicoplanin and ampicillin. The isolates with intermediate and resistant profile to antimicrobials ciprofloxacin and erythromycin were further subjected to minimum inhibitory concentration (MIC) determination. Regarding ciprofloxacin, all the 25 strains with intermediary resistance profile in the disk diffusion test presented MIC at the limit concentration (1.56μg/mL) between sensitivity and resistance, while from 74 intermediary resistant strains against erythromycin only two presented MIC at the limit concentration (4 μg/mL). It is concluded that the genus Enterococcus is present in swine carcasses during the pre-chill stage and the species E. faecalis is the most prevalent. Although resistance against antimicrobials used for the human treatment has been found, the results indicate that isolates resistant to vancomycin, teicoplanin and ampicillin are not present on pig carcasses from those abattoirs.

O patógeno Escherichia coli pertence ao grupo de cepas que podem causar infecções extraintestinais, designadas como (ExPEC). Existem cepas de E. coli ExPEC, tais como: a E. coli causadora de meningite neonatal (NMEC), a E. coli uropatogênica (UPEC) e a E. coli patogênica para aves (APEC). Na avicultura, esta bactéria é responsável por vários processos patológicos, atuando tanto como agente primário como secundário, sendo responsável por significativas perdas econômicas que ocorrem na produção avícola. Vários trabalhos têm demonstrado que muitos isolados ExPEC de humanos e animais compartilham genes de virulência em comum, sugerindo que ocorra uma troca genética entre essas cepas, e o risco para a saúde humana de tais bactérias ainda é indefinido. Além disto, existe outra preocupação em relação ao fato de estudos sugerirem que a E. coli pode facilmente adquirir resistência a antimicrobianos utilizados por humanos e animais. As aves domésticas são reconhecidas como importante fonte de disseminação de resistência antimicrobiana às amostras de E. coli. O objetivo do presente estudo foi realizar a caracterização de amostras de Escherichia coli patogênica aviária (APEC) e Escherichia coli uropatogênica (UPEC) através da classificação em grupos filogenéticos e da avaliação da resistência antimicrobiana. Neste trabalho foram utilizados os dados disponíveis referentes a 237 cepas de E. coli isoladas de camas de aviários, lesões de celulite e quadros respiratórios de frangos de corte e 211 amostras de E. coli uropatogênica (UPEC) isoladas de pacientes com infecção urinária. Para verificar se existia diferença significativa entre a resistência antimicrobiana a (ampicilina, gentamicina, norfloxacina, amicacina e cefuroxima) e a origem das amostras, e destes mesmos antimicrobianos em relação aos grupos filogenéticos. As amostras APEC diferiram na resistência antimicrobiana das amostras UPEC para ampicilina, gentamicina, norfloxacina e cefuroxima. O mesmo não foi observado para a amicacina. Nas condições do presente trabalho, estes resultados contrariam, parcialmente, os estudos que sugerem que a resistência antimicrobiana é originária das amostras de origem avícola, já que três dos cinco fármacos testados apresentaram maior resistência nas amostras UPEC que nas APEC. Quando analisada a relação entre os grupos filogenéticos observou-se que o perfil de resistência antimicrobiana foi semelhante em todos os grupos, somente para norfloxacina e ampicilina houve diferença, porém a resistência estava bem distribuída entre os quatro grupos, comprovando que a patogenicidade não se relaciona com a resistência antimicrobiana. Este fato já havia sido caracterizado em trabalho anterior da mesma autora. Estes resultados ressaltam a necessidade de realizar monitorizações rotineiras e constantes visando conhecer as flutuações da patogenicidade e da resistência antimicrobiana, separadamente. / The pathogen Escherichia coli, belongs to the group of strains that can cause extraintestinal infections, designated as (ExPEC). There are strains of extraintestinal E. coli ExPEC as: a E. coli that causes neonatal meningitis (NMEC), a uropathogenic E. coli (UPEC) and a avian pathogenic E. coli (APEC). In poultry, this bacterium is responsible for several pathological processes, acting as primary agent and secondary as well, and it is also responsible for significant economic losses that occur in poultry production. Several articles show that many ExPEC isolates from humans and animals share common virulence genes, suggesting a genetic exchange between these strains, and the risk to human health of more bacteria is still undefined. In addition, there is another concern about studies which suggest that E. coli can readily acquire antimicrobial resistance when used by animals and humans. Poultry is recognized as an important source of dissemination of antimicrobial resistance in E. coli samples. The objective of the present study was to characterize samples of avian pathogenic Escherichia coli (APEC) and uropathogenic Escherichia coli (UPEC) using phylogenetic groups and antimicrobial resistance. In this study, we used data available on 237 strains of E. coli isolated from avian litter, cellulitis lesions and respiratory lesions of broilers and 211 uropathogenic E. coli (UPEC) samples isolated from patients with urinary tract infection. To verify if there was a significant difference between the antimicrobial resistance (ampicillin, gentamicin, norfloxacin, amicacin, cefuroxime) and the origin of the samples, and of these same antimicrobials and phylogenetic groups. The APEC samples differed in antimicrobial resistance of the UPEC for ampicillin, gentamicin, norfloxacin and cefuroxime. The same was not observed for amikacin. Under the conditions of the present study, these results partially contradict the studies which suggest that antimicrobial resistance originates from samples of poultry origin, three of the five drugs tested, presented higher resistance in the UPEC samples than in the APEC. When analyzing the relationship between the phylogenetic groups, it was observed that the antimicrobial resistance profile was similar in all groups, only for norfloxacin and ampicillin there was a difference, but the resistance was well distributed among the four groups, proving that the pathogenicity was not related with antimicrobial resistance. This fact had already been characterized in previous paper by the same author. These results highlight the need to perform routine and constant monitoring in order to know the fluctuations in pathogenicity and antimicrobial resistance, separately.

Tradicionalmente, no tratamento de feridas graves o antimicrobiano tópico deve ser aplicado uma a duas vezes ao dia na área lesada para reduzir as infecções. No entanto, os pacientes geralmente sofrem desconforto com a aplicação de drogas tópicas e com a troca de curativos. Nesse contexto, o desenvolvimento de sistemas curativos biodegradáveis contendo fármaco antimicrobiano são fundamentais para a promoção de ações terapêuticas, reduzindo as infecções causadas por microrganismos e podendo substituir os curativos convencionas que não possuem polímeros biodegradáveis em sua composição. Para ir de encontro com essa necessidade, filmes de PBAT e PBAT/gentamicina foram preparados por meio de duas abordagens. Na primeira abordagem filmes de PBAT obtidos por casting foram funcionalizados por radiação UV durante 90 minutos na presença de O2 atmosférico para posterior inserção de gentamicina na superfície através de soluções tampões contendo EDC e gentamicina. A superfície das amostras foi analisada pelo WCA, FTIR-ATR e XPS. A análise antimicrobiana dos filmes também foi realizada. Os resultados para os filmes de PBAT por casting mostram que o tempo de irradiação produziu superfícies altamente hidrofílicas com grupos oxigenados enxertados na superfície do polímero (C=O e C-OH). A análise antimicrobiana indicou que a gentamicina não ligou covalentemente com o PBAT, porém observou-se a presença de nitrogênio na superfície das amostras pela análise de XPS Na segunda abordagem foram preparadas fibras de PBAT e PBAT/gentamicina a partir da eletrofiação. As soluções utilizadas no processo de eletrofiação foram preparadas com diferentes concentrações de gentamicina e passaram por análises de condutividade e viscosidade. As fibras de PBAT e PBAT/gentamicina foram caracterizadas quanto a suas propriedades físico-químicas, morfológicas, térmicas, antimicrobianas e biológicas. Nos resultados obtidos para as fibras de PBAT e PBAT/gentamicina observou-se que não houve mudança nos espectros após a mistura dos materiais, uma vez que as bandas de absorção foram preservadas e não houve o aparecimento de novos picos. A presença da gentamicina modificou a morfologia das amostras, diminuindo o diâmetro das fibras. O grau de intumescimento foi alterado com o acréscimo de gentamicina e houve modificação da morfologia das fibras após 48 horas de imersão em PBS, porém as fibras mantiveram-se presentes. A gentamicina aumentou o grau de molhabilidade das fibras PBAT. As fibras de PBAT/gentamicina possuem atividade antimicrobiana frente às cepas de E. coli e não apresentaram citotoxicidadede acordo com o padrão ISO 10993-5. Estes resultados reforçam que o PBAT pode ser usado como um sistema curativo com incorporação de fármaco, mostrando ser uma alternativa interessante de curativo/adesivo para uso tópico. / Traditionally in the treatment of serious wounds, topical antimicrobial should be applied 1–2 times daily to the injured area to reduce infections. However, patients often suffer from discomfort with the application of topical drugs and with the exchange of dressings. In this context, the development of biodegradable curative systems containing antimicrobial drug are fundamental for the promotion of therapeutic actions, reducing the infections caused by microorganisms and being able to substitute conventional dressings that there aren’t biodegradable polymers in their composition. To meet this need, PBAT and PBAT/gentamicin films were prepared using two approaches. In the first approach PBAT films obtained by casting were functionalized by UV radiation for 90 minutes in the presence of atmospheric O2 for subsequent insertion of gentamicin on the surface through buffer solutions containing EDC and gentamicin. The surface of the samples was analyzed by the WCA, FTIR-ATR and XPS. Antimicrobial analysis of the films was also performed. The results for the PBAT films by casting show that the irradiation time produced highly hydrophilic surfaces with oxygenated groups grafted onto the polymer surface (C=O and C-OH). Antimicrobial analysis indicated that gentamycin did not bind covalently with PBAT, but nitrogen was observed on the surface of the samples by XPS analysis In the second approach, PBAT and PBAT/gentamicin fibers were prepared from the electrospun. The solutions used in the electrospun process were prepared with different concentrations of gentamicin and underwent conductivity and viscosity analyzes. The PBAT and PBAT/gentamicin fibers were characterized as their physical-chemical, morphological, thermal, antimicrobial and biological properties. In the results obtained for the PBAT and PBAT/gentamicin fibers, it was observed that there was no change in the spectra after the materials were mixed, since the absorption bands were preserved and there were no new peaks. The presence of gentamicin modified the morphology of the samples, reducing the diameter of the fibers. The degree of swelling was altered with the addition of gentamicin and there was a change in the morphology of the fibers after 48 hours of immersion in PBS, but the fibers remained present. Gentamicin increased the degree of wettability of PBAT fibers. PBAT/gentamicin fibers have antimicrobial activity against E. coli strains and did not present cytotoxicity according to ISO 10993-5 standard. These results reinforce that PBAT can be used as a curative system with drug incorporation, proving to be an interesting dressing/adhesive alternative for topical use.

Bactérias resistentes aos antimicrobianos representam um risco, não apenas para a saúde animal, como também para a saúde pública. As bactérias comensais, como Escherichia coli, são consideradas um bom indicador do padrão de resistência de uma população microbiana, uma vez que, por residirem no intestino, estão submetidas à constante pressão de seleção resultante da administração de antimicrobianos, podendo sobreviver ao processo de abate de suínos e chegar aos consumidores. Neste sentido, os objetivos deste estudo foram: i. avaliar a frequência de resistência antimicrobiana fenotípica e a presença de grupos clonais em E. coli isoladas de fezes e carcaças suínas; ii. determinar o perfil fenotípico e genotípico de resistência aos antimicrobianos em isolados multirresistentes de E. coli provenientes de carcaças de suínos e identificar grupos clonais presentes em carcaças suínas; iii. comparar o perfil fenotípico de resistência antimicrobiana em isolados de E. coli de fezes de suínos submetidos a diferentes protocolos de administração de antimicrobianos via ração; iv. descrever o perfil da microbiota intestinal de suínos submetidos a diferentes protocolos de uso de antimicrobianos via ração. Para isto, três etapas distintas foram realizadas. Na etapa 1, dois ciclos de amostragem foram conduzidos em três matadouros-frigoríficos (A, B, C) de suínos, sendo coletado fezes depositadas no piso da pocilga de espera e suabes de superfície de carcaças na etapa de pré-resfriamento. Escherichia coli foi isolada dessas duas origens e avaliada quanto à resistência aos antimicrobianos. Além disso, 92 isolados de ambas as origens apresentando perfil de multirresistência foram submetidos à análise por Pulsed-field gel eletrophoresis (PFGE). Para a etapa 2, os isolados multirresistentes provenientes de carcaças foram submetidos a novos testes de sensibilidade antimicrobiana e de acordo com o perfil fenotípico foram pesquisados quanto aos genes de resistências e submetidos à técnica de PFGE. Em relação a etapa 3, quatro grupos de suínos que utilizavam protocolos distintos de uso de antimicrobianos via ração foram acompanhados em todas as fases zootécnicas e avaliados quanto a frequência de resistência antimicrobiana de E. coli e perfil bacteriano da microbiota intestinal através do sequenciamento de duas regiões do gene 16S rRNA. Entre os 674 isolados de E. coli da etapa 1 apenas 7,4% foram susceptíveis a todos os antimicrobianos testados. As maiores frequências de resistência foram identificadas frente à tetraciclina (85,9%), ampicilina (73,0%), sulfonamida (70,0%), florfenicol (65,0%) e ácido nalidíxico (58,9%). Do total de isolados de E. coli, 79,5% (536/674) foram classificados como multirresistentes. A análise de macro restrição (PFGE), conduzida em isolados apresentando perfis de multirresistência mais prevalentes, demonstrou que isolados de fezes e carcaças eram na maioria dos casos relacionados (similaridade ≥70%) nos três matadouros-frigoríficos. Dos isolados multirresistentes provenientes das carcaças, dez novos antimicrobianos foram testados; em relação a esses, as maiores frequências de resistências foram à cloranfenicol (86,4%), estreptomicina (65,8%) e trimetoprima (57%). Cada matadouro-frigorífico apresentou um perfil distinto de multirresistência predominante. Nos isolados submetidos à pesquisa de genes de resistência, foram detectados por ordem de frequência: strA (83,3%); aac(3)IVa (70%); tetB (70%); sul2 (60%); floR (56,6%); tetA (50%); aph(3)Ia (43,3%); sul3 (26,6%) e blaTEM (10%); três grupos de isolados relacionados (similaridade ≥ 70%) foram encontrados na análise por PFGE. Em relação à etapa 3, os grupos com diferentes protocolos de uso antimicrobianos via ração não apresentaram alteração significativa no perfil de microbiota intestinal e contagem de E. coli; entretanto, os perfis fenotípicos de resistência antimicrobiana foram distintos entre os grupos. O grupo que recebia protocolo com uso alternado de antimicrobianos de seis classes distintas apresentou maior frequência de resistência e multirresistência. De acordo com os resultados encontrados protocolos de uso continuado de antimicrobianos na criação de suínos gera uma pressão seletiva, resultando em cepas multirresistentes que podem sofrer propagação no ambiente e na cadeia de produção de alimentos. Considerando os perfis de resistência encontrados em E. coli originada de carcaças suínas e fezes, em todas as etapas deste trabalho, observou-se que essas cepas são selecionadas na granja pelo uso de antimicrobianos, chegaram ao pré-abate, disseminaram-se na linha de abate e contaminar a carcaça. O uso prudente de antimicrobianos é amplamente citado em toda a literatura científica veterinária e, conforme nossos resultados demonstraram, deve ser incluído entre as metas da suinocultura brasileira. / Bacteria resistant to antimicrobials present a hazard not only for animal health but public health too. Commensal bacteria, such as Escherichia coli, are considered a good indicator of microbial population resistance, because they live in gut and are subjected to constant pressure resulting selection of the administration of antibiotics, may survive in slaughtering process and get consumers. In this sense, the aims of this study were: i. to evaluate the frequency of antimicrobial phenotype resistance and presence of clonal groups for E. coli isolated from feces and pig carcasses; ii. to determine phenotypic profile and antimicrobial genotypic resistance in multiresistant E. coli isolated from pig carcasses and identify clonal groups present in pig carcasses; iii. to compare phenotypic profile of antimicrobial resistance in E. coli from swine feces submitted to different antimicrobial in-feed protocols; iv. to describe gut microbiota profile in pigs submitted to different antimicrobial in-feed protocols. For this, three steps were performed. In step 1, two sampling cycles were conducted in three slaughterhouses (A, B, C) of pigs being collected feces deposited in pen floor and pre-chill carcasses. Escherichia coli was isolated from these two sources and evaluated for antimicrobial resistance. In addition, 92 isolates with multidrug resistance profile were analyzed by pulsed-field gel eletrophoresis (PFGE). In step 2, isolated from carcasses and multiresistant underwent new antimicrobial susceptibility testing and in accordance with the phenotypic profile were screened for the resistance gene and PFGE. In step 3, four groups of pigs used different antimicrobial in-feed protocols were followed in all phases and evaluated frequency of antimicrobial resistance and gut bacterial profile by sequencing two regions of 16S rRNA. Among the 674 E. coli isolates from step 1 just 7.4% were susceptible to all antibiotics. The highest frequencies of resistance were: tetracycline (85.9%), ampicillin (73.0%), sulfonamide (70.0%), florfenicol (65.0%) and nalidixic acid (58.9%). Of total E. coli isolates, 79.5% (536/674) were multidrug. Macrorestriction analysis (PFGE), conducted in isolates with profiles more prevalent multidrug resistance showed that isolated from feces and carcasses were in most cases related (≥70% similarity) in the three slaughterhouses. The multiresistant isolates from carcasses, ten new antibiotics were tested, with greatest frequency in add antimicrobial resistance were: chloramphenicol (86.4%), streptomycin (65.8%) and trimethoprim (57%). Each slaughterhouse showed a distinct profile of resistance and number of resistance markers. Isolates submitted to research genes were detected in order of frequency: strA (83.3%); aac(3)IV (70%); tetB (70%); sul2 (60%); floR (56.6%); tetA (50%); aph(3)Ia (43.3%); sul3 (26.6%) and blaTEM (10%); and three related groups (similarity ≥ 70%) were formed in PFGE. For step 3, groups with different antimicrobial in-feed had no significant change in gut microbiota profile and E. coli counts; however the phenotypic profiles of antimicrobial resistance were different between the groups. The group receiving protocol with alternate use of antimicrobials six different classes showed higher frequency of resistance and multidrug resistance. According to the results, different protocols of antimicrobial in pig farming creates a selective pressure, resulting in multi-drug resistant strains that may contribute to spread environment and in food production chain. Considering the resistance profiles found in E. coli originated from swine carcasses and feces, in all stages of this work, it was observed that these strains were selected for in farm by use of antimicrobials, reached the pre-slaughter, spread in the slaughterhouse and carcasses. The concept of prudent use of antimicrobials is widely quoted in all the veterinary scientific literature and, as our results showed, it should be included among the goals of the Brazilian pig farming.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2017-03-07T13:20:54Z No. of bitstreams: 1 PDF - Cleildo Pereira de Santana.pdf: 3599647 bytes, checksum: 882024d2a7a14dc13bb2424707348d22 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2017-03-07T16:07:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Cleildo Pereira de Santana.pdf: 3599647 bytes, checksum: 882024d2a7a14dc13bb2424707348d22 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-07T16:07:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Cleildo Pereira de Santana.pdf: 3599647 bytes, checksum: 882024d2a7a14dc13bb2424707348d22 (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The use of plants for medicinal purposes is a tradition in many cultures around the world, from ancient times. Although knowledge of traditional medicine is not as intensely widespread, the tradition of using medicinal plants persist in the population, which often makes use of herbal medicines, traditional or manufactured drugs. With the increase in the consumption of this type of product, the pharmaceutical industry has shown strong interest in the improvement of herbal production methods in various pharmaceutical forms. Thus, this study aimed to obtain a tablet formulation of Ximenia americana L. nebulized extract, and to evaluate this formulation as its quality parameters. The extract, obtained by drying of a water-alcohol extraction solution was characterized as to its phytochemical composition and compatibility with various pharmaceutical excipients, allowing the selection of excipients that integrated tablet formulations. The formulation that was considered most appropriate was used to obtain a batch of tablets, which was characterized with respect to its quality parameters. The formulations obtained demonstrated excellent flow and was used in the production of tablets with a mean weight of 302.20 mg, average hardness of 45.15 N, friability of 0.34% and average disintegration time of 6 minutes and 8 seconds. Furthermore, the tablets have been shown to be capable of releasing about 70% of its plant extract content by 30 minutes in medium around neutrality. Thus, it was possible to develop a pharmaceutical form to facilitate the medicinal use of this plant by the population, and to evaluate the quality characteristics of the formulation developed in order to establish ways to ensure its quality characteristics, safety and efficacy. / O uso de plantas para fins medicinais é uma tradição em diversas culturas, em todo o mundo, desde épocas remotas. Embora o conhecimento da medicina tradicional não seja mais tão intensamente difundido, a tradição do uso de plantas medicinais persiste na população, que frequentemente faz uso de medicamentos fitoterápicos, tradicionais ou industrializados. Diante do aumento do consumo deste tipo de produto, a indústria farmacêutica passou a demonstrar forte interesse no aperfeiçoamento dos métodos de produção de fitoterápicos em diversas formas farmacêuticas. Desta forma, este estudo se propôs a obter uma formulação do extrato nebulizado de Ximenia americana L., na forma de comprimido, e avaliar esta formulação quanto aos seus parâmetros de qualidade. O extrato, obtido pela secagem de uma solução extrativa hidroalcoólica, foi caracterizado quanto à sua composição fitoquímica e compatibilidade com diversos excipientes farmacêuticos, permitindo a seleção de excipientes que integraram formulações de comprimido. A formulação considerada mais adequada foi utilizada na obtenção de um lote de comprimidos, que foi caracterizado em relação aos seus parâmetros de qualidade. As formulações obtidas demonstraram fluxo excelente, sendo utilizadas na produção de comprimidos com peso médio de 302,20 mg, dureza média de 45,15 N, friabilidade de 0,34% e tempo de desintegração médio de 6 minutos e 8 segundos. Além disso, os comprimidos mostraram serem capazes de liberar cerca de 70% de seu conteúdo de extrato vegetal em 30 minutos, em meio próximo da neutralidade. Com isso, foi possível desenvolver uma forma farmacêutica para facilitar o uso medicinal desta planta pela população, além de avaliar as características de qualidade da formulação desenvolvida, no intuito de estabelecer maneiras de garantir a estas suas características de qualidade, segurança e eficácia.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2018-05-17T13:13:43Z No. of bitstreams: 1 PDF - Diego Romário da Silva.pdf: 21577849 bytes, checksum: 97066b0c249c1221456f5c7b625b5a17 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2018-05-23T16:59:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Diego Romário da Silva.pdf: 21577849 bytes, checksum: 97066b0c249c1221456f5c7b625b5a17 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-23T16:59:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Diego Romário da Silva.pdf: 21577849 bytes, checksum: 97066b0c249c1221456f5c7b625b5a17 (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This study evaluated the antifungal and antibiofilm potential of the hydroalcoholic extract of the bark of Anadenanthera colubrina vell. Brenan, known as Angico and White Angico. The antifungal activity was initially evaluated by the microdilution technique in broth with minimum inhibitory concentration (MIC) and Minimum Fungicide Concentration (CFM). The potential antibiofilm was tested in mature biofilms formed by Candida species and analyzed by counts of CFU / mL and scanning electron micrograph (SEM). In vitro toxicity was analyzed in Raw 264.7 macrophages and systemic toxicity was evaluated in vivo in the Galleria mellonella model. A strong antifungal potential of the extract against strains of the genus Candida was observed, with the following MIC values: Candida albicans ATCC 5314 and ATCC 90028 (19.5 μg / mL), Candida tropicalis ATCC 750 (5000 μg / mL), Candida Glabrata ATCC 90030 (1250 μg / ml), Candida parapsilosis ATCC 22019 and Candida krusei ATCC 6258 (39 μg / ml). The treatment with the extract reduced the number of CFU / mL and was able to cause structural alteration in the biofilm and cellular destruction, observed in SEM, presenting a promossora antibiofilm activity against Candida. A. colubrina presented moderate toxicity in vitro in RAW 264.7 macrophages culture. In the in vivo assay the extract did not affect the viability of the larvae at doses below 100 mg / kg, presenting low toxicity. Considering its high antifungal potential and its low in vivo toxicity, A. colubrina extract is a strong candidate for the development of a new drug for the treatment of oral candidiasis. / Este estudo avaliou o potencial antifúngico e antibiofilme do extrato hidroalcoolico da casca da Anadenanthera colubrina vell. Brenan, conhecida como angico e angico branco. A atividade antifúngica foi inicialmente avaliada pela técnica da microdiluição em caldo com obtenção da concentração inibitória mínima (CIM) e Concentração Fungicida Mínima (CFM). O potencial antibiofilme foi testado em biofilmes maduros formados por espécies de Candida e analisados por contagem de UFC/mL e microcopia eletrônica de varredura (MEV). A toxicidade in vitro foi analisada em macrófagos Raw 264.7 e a toxicidade sistêmica foi avaliada in vivo em modelo de Galleria mellonella. Observou-se um forte potencial antifúngico do extrato contra cepas do gênero Candida, obtendo-se os seguintes valores da CIM: Candida albicans ATCC 5314 e ATCC 90028 (19.5 μg/mL), Candida tropicalis ATCC 750 (5000 μg/mL), Candida glabrata ATCC 90030 (1250 μg/mL), Candida parapsilosis ATCC 22019 e Candida krusei ATCC 6258 (39 μg/mL). O tratamento com o extrato reduziu o número de UFC/mL e foi capaz de causar alteração estrutural no biofilme e destruição celular, observadas em MEV, apresentando uma promossora atividade antibiofilme contra Candida. A. colubrina apresentou moderada toxicidade in vitro em cultura de macrófagos RAW 264.7. No ensaio in vivo o extrato não afetou a viabilidade das larvas em doses abaixo de 100 mg/kg, apresentando baixa toxicidade. Considerando seu alto potencial antifúngico e sua baixa toxicidade in vivo, o extrato de A. colubrina é um forte candidato para o desenvolvimento de uma nova droga para o tratamento da candidíase oral.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2018-05-21T15:09:22Z No. of bitstreams: 1 PDF - Iana Luísa Melo de Assunção.pdf: 25322449 bytes, checksum: 291474ff35f85d58865c6f6a8e6ea732 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2018-05-23T17:00:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Iana Luísa Melo de Assunção.pdf: 25322449 bytes, checksum: 291474ff35f85d58865c6f6a8e6ea732 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-23T17:00:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Iana Luísa Melo de Assunção.pdf: 25322449 bytes, checksum: 291474ff35f85d58865c6f6a8e6ea732 (MD5) Previous issue date: 2017-03-03 / Every year, an average of 2 million people are victims of burns in Brazil. The treatment of the lesions is complex and requires care in order to avoid mainly local and generalized infections. Plants with antimicrobial activity may help in the microbiological treatment of these lesions. Schinopsis brasiliensis Engler is a plant used in folk medicine for the treatment of fungal and bacterial infections. In this context, the aim of this work was to develop a topical, semi-solid formulation with antimicrobial activity from the dry extract of Schinopsis brasiliensis Engler. The hydroalcoholic extract was produced from a 70% (v / v) hydroalcoholic solution with the leaves of S. brasilienses, then nebulized by spray using Aerosil 200® as a pharmacotechnical adjuvant. The extract was analyzed against the strains ATCC of Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli and Candida albicans, by the microdilution technique. After this, a compatibility study was carried out, using the binary mixtures system, between the extract and excipients used in the cream formulation. The mixtures were submitted to studies by differential thermal analysis (DTA), thermogravimetry (TG) and Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR). Phytochemical prospecting for secondary metabolites was also carried out by ultraviolet spectroscopy. The results showed that the extract was sensitive to all strains tested, being the most sensitive to Pseudomonas aeruginosa with MIC of 0.031 mg.mL^-1 and that the polyphenols were the secondary metabolites in the most analyzed extract. The compatibility study showed that there were no interactions of chemical origin in the binary mixtures studied, with cold cream being chosen. The cream produced had an average pH within that considered acceptable, between 5.5 and 6.5. Among the preliminary stability tests, only the centrifugation test showed a change in its appearance. In the analysis of the efficacy of the formulation, the cream was classified as active and moderately active for the analyzed strains. Thus, it was possible to obtain a formulation from the dried extract of Schinopsis brasiliensis with proven antimicrobial activity in vitro. / Todos os anos, em média, 2 milhões de pessoas são vítimas de queimaduras no Brasil. O tratamento das lesões é complexo e exige cuidados, a fim de se evitar principalmente as infecções locais e generalizadas. Plantas com atividade antimicrobiana podem ajudar no tratamento microbiológico dessas lesões. A Schinopsis brasiliensis Engler é uma planta utilizada na medicina popular no tratamento de infecções fúngicas e bacterianas. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi desenvolver uma formulação tópica, semissólida e com atividade antimicrobiana a partir do extrato seco de Schinopsis brasiliensis Engler. O extrato hidroalcoólico foi produzido, a partir de uma solução hidroalcoólica 70% (v/v) com as folhas de S. brasilienses, em seguida foi nebulizado por aspersão, utilizando Aerosil 200® , como adjuvante farmacotécnico. O extrato produzido foi analisado frente às cepas ATCC de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli e Candida albicans, pela técnica da microdiluição. Após isto foi realizado um estudo de compatibilidade, utilizando o sistema de misturas binárias, entre o extrato e excipientes usados na formulação de creme. As misturas foram submetidas a estudos por análise térmica diferencial (DTA), termogravimetria (TG) e espectroscopia por infravermelho com transformada de Fourier (FTIR). Foi realizada também a prospecção fitoquímica para metabólitos secundários por espectroscopia de ultravioleta. Os resultados obtidos mostraram que o extrato foi sensível a todas as cepas testadas, sendo a mais sensível a Pseudomonas aeruginosa com CIM de 0,031 mg.mL^-1 e que os polifenóis foram os metabólitos secundários em maior quantidade no extrato analisado. O estudo de compatibilidade demonstrou que não houve interações de origem química nas misturas binárias estudadas, sendo escolhido o cold cream. O creme produzido apresentou pH médio dentro do considerado aceitável, entre 5,5 e 6,5. Dentre os testes de estabilidade preliminar, apenas o teste de centrifugação apresentou alteração em sua aparência. Na análise da eficácia da formulação, o creme foi classificado entre ativo e moderadamente ativo para as cepas analisadas. Assim, foi possível obter uma formulação a partir do extrato seco de Schinopsis brasiliensis com atividade antimicrobiana comprovada in vitro.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2018-06-19T14:04:27Z No. of bitstreams: 1 PDF - Ibrahim Vieira Rocha.pdf: 50898078 bytes, checksum: c4f8b8a31f362dd3548a8bb36cbc1ecf (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2018-07-03T17:47:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Ibrahim Vieira Rocha.pdf: 50898078 bytes, checksum: c4f8b8a31f362dd3548a8bb36cbc1ecf (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-03T17:47:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Ibrahim Vieira Rocha.pdf: 50898078 bytes, checksum: c4f8b8a31f362dd3548a8bb36cbc1ecf (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / The plants have been a rich source of medicinal agents, serving as a foundation for the synthesis of drugs, and making the Caatinga, like the other biomes, a valuable barn for the discovery of new antimicrobial agents, valuing the ethnobotanical knowledge and its phytogeography. Guapira graciliflora Lundell belonging to the family Nyctaginaceae is popularly known as João-Mole and has been shown to be a strong candidate with antimicrobial action. This work aimed to develop a new mouthwash formulation from the G. graciliflora Lundell nebulized extract, in order to decrease and control the dental biofilm. The extract obtained by spraying was submitted to a toxicity test in Artemia salina. Phytochemical and microbiological screenings of the nebulized extract of joão-mole, for determination of its secondary metabolites and its major compound, and evaluation by microdilution, against the microorganisms involved with the formation of the dental biofilm: Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, Streptococcus parasanguis and Streptococcus oralis. Quantitative phytochemical screening indicated the presence of flavonoids in the concentration of 13.89mg mL-1, and tannins 5.96mg mL-1. Identification of the major component was performed using Mass Spectrometry with electrospray ionization (ESI-MS), suggesting the presence of pinitol, rutin and kaemptoferol. G. graciliflora Lundell, and the final formulation showed antimicrobial activity against three of the four strains tested. The physicochemical analyzes showed that the nebulized extract is highly hygroscopic, has low density, poorly acidic pH and loss by desiccation within the parameters recommended by the Brazilian Pharmacopoeia. A preformulation study was performed with pharmaceutical excipients and the nebulized extract through Thermal Analysis, Fourier Transform Spectroscopy (FT- IR). The compatibility study demonstrated that sodium lauryl sulfate, propylparaben and sorbitol were the excipients chosen to make up the formulation. As for the lots produced, the pH, viscosity and organoleptic characteristics observed after 24 hours of manipulation and at the end of thermal stress and centrifugation tests presented stability, thus representing an excellent herbal alternative for the prevention and control of dental biofilm. / As plantas têm sido uma rica fonte de agentes medicinais, servindo de alicerce para a síntese de fármacos, e tornando a Caatinga, como os demais biomas, um valioso celeiro para a descoberta de novos agentes antimicrobianos, valorizando o conhecimento etnobotânico e a sua fitogeografia. Guapira graciliflora Lundell pertencente à família Nyctaginaceae é conhecida popularmente como joão-mole e tem se mostrado um forte candidato com ação antimicrobiana. Este trabalho teve como objetivo desenvolver uma nova formulação de enxaguatório bucal a partir do extrato nebulizado de G. graciliflora Lundell, com o intuito de diminuir e controlar o biofilme dentário. O extrato obtido por aspersão foi submetido a teste de toxicidade em Artemia salina. Realizou-se screenings fitoquímico e microbiológico do extrato nebulizado de joão-mole, para determinação de seus metabolitos secundários e seu composto majoritário, e avaliação, por micodiluição, frente aos microrganismos envolvidos com a formação do biofilme dentário: Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, Streptococcus parasanguis e Streptococcus oralis. O screening fitoquímico quantitativo indicou a presença de flavonoides na concentração de 13,89mg mL-1,e taninos 5,96mg mL-1. A identificação do componente majoritário foi realizada através da Espectrometria de Massas com ionização por eletrospray (ESI-MS), sugerindo a presença de pinitol, rutina e kaemptoferol. G. graciliflora Lundell, e a formulação final apresentaram atividade antimicrobiana frente a três das quatro cepas testadas. As análises físico-químicas mostraram que o extrato nebulizado é altamente higroscópico, tem baixa densidade, pH fracamente ácido e perda por dessecação dentro dos parâmetros recomendados pela Farmacopéia Brasileira. Um estudo de préformulação foi realizado com excipientes farmacêuticos e o extrato nebulizado através de Análise Térmica, Espectrotroscopia com Transformada de Fourier (FT-IR). O estudo de compatibilidade demonstrou que o lauril sulfato de sódio, propilparabeno e sorbitol foram os excipientes eleitos para compor a formulação. Quanto aos lotes produzidos, o pH, viscosidade e as características organolépticas observadas após 24 horas de manipulação e ao término dos testes de estresse térmico e de centrifugação apresentaram estabilidade, representando assim, uma excelente alternativa fitoterápica para o prevenção e controle do biofilme dental.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / An alternative for the recovery of industrial fish waste is the production of films, which can be applied in food packaging. However, a major challenge is to obtain films with antimicrobial properties aiding in increased food shelf life as well as films with good mechanical properties and barriers. Therefore, in order to improve these limitations, silver nanoparticles were used due to its potential antimicrobial in food, and tannic acid (TA) as crosslinker in order to improve the mechanical and barrier properties. This study focuses in the extraction of gelatin from the Nile tilapia skin (Oreochromisniloticus) in order to produce gelatin films with embedded nanosilver (AgNPs) generated by green process and evaluate the addition of tannic acid (TA) in synthesis of AgNPs and mechanical properties of the films and barrier. A pre-treatment was conducted to obtain gelatin followed by a collagen denaturing. The characterization was done by gel strength, isoelectric point, electrophoretic analysis, fourier transform infrared (FTIR) and thermogravimetric analysis (TGA). The incorporation was performed by in situ method, the films were obtained with and without the presence of TA and AgNO3 concentrations were 0, 45, 90 and 180 mmol.L-1.The films were characterized by UV-Vis, FTIR, TGA, Mechanical properties (tensile strength and elongation at break), water vapor permeability (WVP), scanning electron microscopy (SEM) and antimicrobial analysis. It was possible to use gelatin as a reducing agent and stabilizer in the reduction of silver nanoparticles. Films produced with the addition of AT showed more suitable properties for the usage as packaging material for food, showing better WVP, water solubility and were more resistant to applied loads. In addition, they presented better antimicrobial activity. Therefore, it was possible to obtain the green AgNPs method through the incorporationof thegelatin matrix and to obtain films with excellent properties after the TA addition. / Uma alternativa de valorizaÃÃo de resÃduo de pescado produzidos por indÃstrias à a produÃÃo de filmes, que pode ser aplicados em embalagens para alimentos. PorÃm, um dos grandes desafios à obter filmes com propriedades antimicrobianas, auxiliando no aumento da vida de prateleira dos alimentos, bem como obter filmes com boas propriedades mecÃnicas e de barreiras. Para isso, a fim de melhorar essas limitaÃÃes, nanopartÃculas de prata foram utilizadas devido a sua potencial aÃÃo antimicrobiana em alimentos, e Ãcido tÃnico (AT) como agente reticulante a fim de melhorar as propriedades mecÃnicas e de barreiras. Nesse estudo objetivou-se fazer a extraÃÃo da gelatina a partir de pele de tilÃpia do Nilo (Oreochromis niloticus), visando a produÃÃo de filmes de gelatina incorporados com nanopartÃculas de prata (NPAg) geradas por processo verde e avaliar a adiÃÃo de Ãcido tÃnico (AT) na sÃntese das NPAg e nas propriedades mecÃnicas e de barreira dos filmes. Para a obtenÃÃo da gelatina foram feitos prÃ-tratamentos e em seguida a desnaturaÃÃo do colÃgeno. A caracterizaÃÃo foi feita por ForÃa de Gel, Ponto IsoelÃtrico, DistribuiÃÃo de Massa Molar, Espectroscopia no Infravermelho pro Transformada de Fourrier (FTIR) e AnÃlise TermogravimÃtrica (TGA). A incorporaÃÃo foi feita pelo mÃtodo in situ, Os filmes foram obtidos sem e com a presenÃa de AT e as concentraÃÃes de AgNO3 foram 0, 45, 90 e 180 mmol.L-1. Os filmes foram caracterizados por: UV-Vis, FTIR, TGA, Ensaios MecÃnicos, Permeabilidade ao Vapor de Ãgua (PVA), Microscopia EletrÃnica de Varredura (MEV) e AnÃlise Antimicrobiana. Foi possÃvel utilizar a gelatina como agente redutor e estabilizante na reduÃÃo de nanopartÃculas de prata. Os filmes produzidos com a adiÃÃo de AT apresentaram propriedades mais adequadas para uso como embalagem para alimentos, apresentando melhores PVA, solubilidade em Ãgua e mostraram-se mais resistentes a esforÃos aplicados. AlÃm de apresentarem melhor atividade antimicrobiana. Logo, foi possÃvel, obter pelo mÃtodo verde a incorporaÃÃo de NPAg na matriz de gelatina, alÃm, de se obter filmes com excelentes propriedades apÃs a adiÃÃo de AT.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / As plantas sintetizam proteÃnas que possuem propriedades antimicrobianas, podendo ser utilizadas em substituiÃÃo aos defensivos quÃmicos no campo e como fonte de novas drogas para o controle de infecÃÃes bacterianas em humanos. Dentre as diversas estruturas vegetais, ÃrgÃos reprodutivos como as flores parecem ser uma fonte promissora de tais molÃculas ativas contra patÃgenos, particularmente se considerado o seu relevante papel fisiolÃgico, o qual deve ser preservado. Nesse contexto, a presente pesquisa experimental teve como objetivos a prospecÃÃo de proteÃnas com aÃÃo antimicrobiana em flores silvestres e posterior purificaÃÃo, caracterizaÃÃo bioquÃmica e avaliaÃÃo da atividade antimicrobiana de um inibidor de tripsina presente em flores de Cassia fistula Linn. (Chuva-de-ouro). O extrato total das flores de C. fistula foi preparado em tampÃo fosfato de sÃdio 50 mM, pH 7,5. Esse extrato apresentou atividade inibitÃria de tripsina (42,41 Â 0,35 UI/mgP) e de papaÃna (27,10 Â 0,23 UI/mgP), alÃm de mostrar a presenÃa de peroxidase (20,0 Â 0,18 UAP/mgP) e quitinase (1,70 Â 0,21 ηkatal/mgP), estando ausentes as atividades hemaglutinante, β-1,3-glucanÃsica, ureÃsica e proteÃsica. O inibidor de tripsina de C. fistula, denominado CfTI, foi purificado do extrato total por fracionamento com Ãcido tricloroacÃtico (2,5%), seguido de cromatografias de afinidade (anidrotripsina-Sepharose-4B) e fase reversa (Vydac C-18TP 522). CfTI Ã uma glicoproteÃna com massa molecular aparente de 22,2 kDa, pI 5,0 e sequÃncia NH2-terminal exibindo alta similaridade com o inibidor de tripsina da soja do tipo Kunitz (SBTI). O inibidor mostrou-se pouco estÃvel ao calor, reduzindo sua atividade inibitÃria para 23,4% quando incubado a 60 ÂC, durante 15 minutos. No entanto, ele se mostrou bastante estÃvel a variaÃÃes no pH. CfTI (100 Âg/mL) retardou o crescimento dos fungos fitopatogÃnicos de importÃncia agrÃcola, Colletotrichum lindemuthianum e Fusarium solani, alÃm de apresentar atividade antibacteriana frente Ãs bactÃrias patogÃnicas ao homem, Staphylococcus aureus e Enterobacter aerogenes. Os resultados obtidos demonstram o potencial das flores como fonte diversificada de proteÃnas bioativas, evidenciando o inibidor de tripsina presente em flores de C. fistula, fomentando sua aplicaÃÃo biotecnolÃgica frente a fungos e bactÃrias de relevÃncia para a Agricultura e SaÃde. / Plants synthesize proteins that have antimicrobial properties, which can be used to substitute chemical pesticides in agriculture and as new drugs for the control of bacterial infections in humans. Among the various plant structures, the flowers seem to be a promising source of active molecules against pathogens, particularly if considered its important physiological role, which should be preserved. Therefore, this experimental research aimed at the prospection of novel proteins with antimicrobial activity in wild flowers and to subsequent purification, biochemical characterization and evaluation of antimicrobial activity of a trypsin inhibitor present in flowers of Cassia fistula Linn (the golden shower tree). The total extract of C. fistula flowers was prepared in 50 mM sodium phosphate buffer, pH 7.5. This extract presented trypsin inhibitory activity (42.41 Â 0.35 IU/mgP) and papain (27.10 Â 0.23 IU/mgP), besides to the presence of peroxidase (20.0 Â 0.18 UAP/mgP) and chitinase (1.70 Â 0.21 ηkatal/mgP). On the other hand, the hemagglutinating, β-1,3-glucanase, protease and urease activities were not detected. The trypsin inhibitor of C. fistula, named CfTI, was purified by fractionating the crude extract with trichloroacetic acid (2.5%) followed by affinity (anidrotripsina-Sepharose-4B) and reverse phase (Vydac C-18TP 522) chromatographies. CfTI is a glycoprotein with an apparent molecular mass of 22.2 kDa, pI 5.0 and NH2-terminal sequence showing high similarity with Kunitz soybean trypsin inhibitor (SBTI). The inhibitor was not stable to heat, and loss 23.4% when incubated at 60 ÂC for 15 minutes. However, it proved to be stable to changes of pH. CfTI (100 Âg/mL) slowed the growth of pathogenic fungi of agricultural importance, Colletotrichum lindemuthianum and Fusarium solani, and also presented antibacterial activity against the human pathogenic bacteria, Staphylococcus aureus and Enterobacter aerogenes. The results demonstrate the potential of the flowers as a source of diverse bioactive proteins, as the trypsin inhibitor present in C. fistula flowers, promoting its biotechnological potential application against fungi and bacteria of relevance to Agriculture and human health.