Submitted by admin tede (tede@pucgoias.edu.br) on 2016-11-30T16:52:02Z No. of bitstreams: 1 FÁBIO LEMOS CAMPEDELLI.pdf: 8948383 bytes, checksum: 229016125b12d4f344bb1c157148ddad (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-30T16:52:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FÁBIO LEMOS CAMPEDELLI.pdf: 8948383 bytes, checksum: 229016125b12d4f344bb1c157148ddad (MD5) Previous issue date: 2016-08-12 / INTRODUCTION: Atherosclerotic disease (AD) with its cardiovascular complications is responsible for 17.5 million deaths a year, according to the World Health Organization (WHO). There is consensus that atherosclerosis involves multiple pathogenic processes initiated by endothelial dysfunction, with inflammation and vascular proliferation determining alterations in the matrix, with consequent formation of the atheromatous plaque and its clinical implications. Risk factors such as hypertension, diabetes mellitus, dyslipidemia and smoking are widely known. Currently genotyping, which is not directly related to these factors, is not accepted to estimate the risk of cardiovascular diseases, but strong evidence indicates several polymorphic genes as factors of risk and progression leading to complications of the disease. Among the genes involved, eNOS (endothelial nitric oxide synthase gene), which is responsible for the production of endothelial nitric oxide (NO, an important arterial vasodilator), when presented in polymorphic variation can determine production malfunction and predisposition to AD. OBJECTIVES: To analyze the G894T polymorphism of eNOS gene in groups of individuals diagnosed with atherosclerosis and in the control group. MATERIALS AND METHODS: 200 blood samples were collected from patients previously diagnosed with DA and 100 from the control group. The genotyping analysis for polymorphism of eNOS gene was determined by PCR. RESULTS: After analysis of polymorphism between the DA and control groups and association with variables such as gender, relation with smoking, smoking history and alcohol consumption, statistical difference were found in the distribution of the case and control groups (p = 0.0378) and in non-smoking patients (p = 0.0263). In the other associations no statistically significant difference was found. CONCLUSION: In the population studied, the frequency of the heterozygous genotype (GT) was much higher than in the other popualations (GG and TT) in both groups (case and control). The GG genotype showed greater susceptibility to AD. The association of GG genotype in nonsmokers also showed greater susceptibility. Gender, alcohol consumption, smoking and smoking history did not influence AD. / Campedelli FL. Polimorfismo do gene eNOS G894T (Glu298Asp) em pacientes sintomáticos para aterosclerose [dissertação]. Goiânia: Pontifícia Universidade Católica, PUC-GO; 2016. INTRODUÇÃO: A doença aterosclerótica (DA) com suas complicações cardiovasculares é responsável por 17,5 milhões de mortes por ano segundo a Organização Mundial de Saúde (OMS). É consenso que a aterosclerose envolve múltiplos processos patogênicos que se iniciam pela disfunção endotelial, com inflamação e proliferação vascular determinando alterações da matriz com consequente formação da placa ateromatosa e suas repercussões clínicas. Fatores de risco como a hipertensão arterial, diabetes mellitus, dislipidemias e tabagismo são amplamente conhecidos. Atualmente a genotipagem, não relacionada diretamente a estes fatores, não é aceita para estimativa de risco das doenças cardiovasculares, porém fortes evidências relacionam diversos genes polimórficos, como fator de risco e evolução para complicações da doença. Dentre os genes envolvidos o eNOS (gene da síntese de óxido nítrico endotelial), responsável pela produção de Óxido nítrico (NO), endotelial (importante vasodilatador arterial), quando se apresenta em variação polimórfica pode determinar mal funcionamento da produção e predispor a DA. OBJETIVOS: Analisar o polimorfismo G894T do gene eNOS nos grupos de indivíduos com diagnóstico de aterosclerose e no grupo controle. MATERIAIS E MÉTODOS: Foram coletados amostras de sangue periférico de 200 pacientes com DA previamente diagnosticados e 100 amostras de grupo controle. A análise de genotipagem para o polimorfismo do gene eNOS foi determinada por PCR. RESULTADOS: Após análise do polimorfismo entre os grupos com DA e grupo controle, e associação com as variáveis gênero, relação com hábito de fumar, carga tabágica e consumo de bebida alcóolica, foram encontrados diferença estatísticas na distribuição dos grupos caso e controle (p=0,0378) e nos pacientes não tabagistas (p=0,0263). Nas demais associações não houve diferença estatisticamente significativa. CONCLUSÃO: Na população estudada evidenciou a frequência do genótipo heterozigoto (GT) muito superior aos demais (GG e TT) em ambos os grupos (caso e controle). O genótipo GG demonstrou maior suscetibilidade à DA. A associação do genótipo GG em não tabagista também apresentou maior suscetibilidade. O gênero, o etilismo, o hábito de fumar e carga tabágica não influenciaram na DA.

Submitted by admin tede (tede@pucgoias.edu.br) on 2017-02-23T18:23:59Z No. of bitstreams: 1 MONIZE PRADO DE MORAIS.pdf: 8293372 bytes, checksum: fab38792d3267479760282fcdf0829b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-23T18:23:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MONIZE PRADO DE MORAIS.pdf: 8293372 bytes, checksum: fab38792d3267479760282fcdf0829b1 (MD5) Previous issue date: 2016-11-04 / The atherosclerosis is a multifactorial chronic inflammatory disease that occurs in response to the endothelial aggression, compromising the intimate layer of media and large caliber arteries. The systemic arterial hypertension is considered the main risk factor for the formation of atherogenic plates, increasing the risk of cardiovascular events between two and three times. Several genes are involved in the process of atherogenesis and hypertension, this research studies some polymorphisms for candidates genes that participates in the process which involves both pathologies, the polymorphisms G894T and T-786C of the genes eNOS, and the polymorphisms of the genes GSTT1 and GSTM1. The objective of this work was to analyze and associate such polymorphisms in hypertensives atherosclerotics individuals and in individuals with absence of hypertension and atherosclerosis. This study deals with the control-case in which 267 samples were analyzed, of which 100 of control group and 167 of the group case. The samples were submitted to DNA extraction, then to PCR and analyzed in 1,5 % agarose gel, stained with ethidium bromide at 5µg/mL. Soon after, the results were compared using the Chi-Square test and the G-test. The results point to a prevalence of genotype GT (76%) and the mutant allele T (56%) of the polymorphism T786C (eNOS), with the p equal to 0.03. For the polymorphism T786C eNOS, the heterozygote genotype (TC) represented 58% of the sample, with the allele C prevailing with 61%, but there was no significant statistics. In the analysis of the gene GSTT1 prevailed the present genotype (84%) as well as the presence of GSTM1 (73%), in both associations the p detected was less than 0.05. Smoking association was found only in the polymorphism GSTM1. Regarding to alcoholism, there was only association between GSTT1 and the habit of drinking. There are many possible interactions of these polymorphisms and the development of atherosclerosis and hypertension, but more studies are necessary for further elucidation of these associations. / A aterosclerose é uma doença inflamatória crônica multifatorial que ocorre em resposta à agressão endotelial, acometendo a camada íntima de artérias de médio e grande calibre. A hipertensão arterial sistêmica é considerada o principal fator de risco para a formação das placas aterogênicas, aumentando o risco de eventos cardiovasculares em duas a três vezes. Vários genes estão envolvidos no processo da aterogênese e da hipertensão, nesta pesquisa foram estudados alguns polimorfismos de genes candidatos partícipes do processo que envolve ambas patologias, os polimorfismos G894T e T786C do gene eNOS, e os polimorfismos dos genes GSTT1 e GSTM1. O objetivo deste trabalho foi analisar e associar tais polimorfismos em indivíduos ateroscleróticos hipertensos e em indivíduos com ausência de hipertensão e aterosclerose. Este estudo trata-se de um caso-controle onde foram analisadas 267 amostras sendo 100 do grupo controle e 167 do grupo caso. As amostras foram submetidas à extração de DNA, em seguida à PCR e analisadas em gel de agarose a 1,5%, corados com brometo de etídio a 5 g/mL. Logo depois os resultados foram comparados utilizando o Teste Qui-Quadrado e o Teste G. Os resultados apontaram para uma prevalência do genótipo GT (76%) e do alelo mutante T (55,5%) do polimorfismo G894T (eNOS), com o p igual a 0,03. Já para o polimorfismo T786C (eNOS), o genótipo heterozigoto (TC) representou 58% da amostragem, com o alelo C prevalecendo com 61%, porém não houve significância estatística. Já na análise do gene GSTT1 houve prevalência do genótipo presente (84%) assim como da presença de GSTM1 (73%), sendo que em ambas associações o p detectado foi menor que 0,05. Foi encontrada associação entre o tabagismo apenas com o polimorfismo GSTM1. Quanto ao alcoolismo houve associação somente entre o GSTT1 e o hábito de beber. São muitas as possíveis interações desses polimorfismos e o desenvolvimento da aterosclerose e hipertensão, mas ainda são necessários mais estudos para uma maior elucidação destas associações.

Submitted by admin tede (tede@pucgoias.edu.br) on 2017-06-01T14:16:03Z No. of bitstreams: 1 ANDREIA MARCELINO BARBOSA.pdf: 784297 bytes, checksum: e401bab7d446314e9ec1076b99966617 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-01T14:16:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ANDREIA MARCELINO BARBOSA.pdf: 784297 bytes, checksum: e401bab7d446314e9ec1076b99966617 (MD5) Previous issue date: 2017-03-03 / Coronary artery disease (CAD) is the most common form of cardiovascular disease. CAD is a multifactorial disease of complex etiology, influenced by genetic and environmental determinants. Atherosclerotic lesion is the most common abnormality found in the arteries resulting from two basic processes: cholesterol accumulation and the proliferation of smooth muscle cells in the tunica intima, thus developing on a substrate formed of these cells, leukocytes derived from blood and a variable amount of connective tissue forming a fibrous plaque that projects into the lumen modifying the middle tunica and leading to a series of circulatory complications. Nitric oxide (NO) produced by nitric oxide endothelial synthase (eNOS) is known to alter blood flow, altering processes involved in atherosclerosis, and is considered an important atheroprotective. One of the polymorphisms most studied is a SNP in the promoter region (T786C), often associated with the development of coronary disease. T786C is an important thymine to cytosine point mutation at codon-786 in the 50-flanking region of the eNOS gene, which could significantly reduce the activity of the gene promoter and serum nitric oxide level. This polymorphism significantly reduces the activity of the eNOS promoter gene. We collected 297 peripheral blood samples, from patients referred to the cardiology service and peripheral vascular surgery, of the Angiogyn Clinic in the city of Goiânia, with previous diagnosis of atherosclerotic disease based on clinical examination and confirmed by imaging methods (197 samples) and control group (100 samples). The collected samples were submitted to PCR to verify presence of polymorphisms. The results were compared using the Chi-Square test and Test G, with the aid of Bioestat software (version 5.3; biocistron.blogspot.com/). In the present study the frequency of the TC genotype was more frequent. In the control group, the higher frequency was observed in the TC genotype. This difference was not statistically significant. Making a relation between the TC/TT and CC genotypes in the case group; TC/TT and CC in the control group, we found that this difference is also not significant. No significant difference was found when genotypes (TT, TC and CC) were analyzed, associated with gender and smoking. The results were not significant because a traditional standard was used, where there is usually twice as many cases for the number of controls, and also because atherosclerosis is a very common disease. Several studies have indicated that when the n worked is double the control in relation to the number of cases, this would lead to a better epidemiological statistic. We can also conclude that there is a strong tendency of the T allele, in single dose or double dose, in association with atherosclerosis. / A doença arteriosclerótica coronariana (DAC) é a forma mais comum de doença cardiovascular. A DAC é uma doença multifatorial de etiologia complexa, influenciada por determinantes genéticos e ambientais. A lesão aterosclerótica é a anormalidade mais comum encontrada nas artérias decorrente inicialmente de dois processos básicos: acúmulo de colesterol e a proliferação de células musculares lisas na túnica íntima, desenvolvendo-se, portanto, sobre um substrato formado dessas células, leucócitos derivados do sangue e de uma quantidade variável de tecido conectivo formando uma placa fibrosa que se projeta para dentro do lúmen modificando a túnica média e levando a uma série de complicações circulatórias. O óxido nítrico (NO) produzido pelo óxido nítrico endotelial sintase (eNOS) é conhecido por alterar o fluxo sanguíneo, alterando processos envolvidos na aterosclerose, sendo considerado um importante ateroprotetor. Um dos polimorfismos mais estudados é um SNP na região promotora (T786C), frequentemente associado ao desenvolvimento de doença coronariana. O T786C é uma mutação de ponto importante, de timina para citosina, no códon-786 na região 50-flanqueadora do gene eNOS, o que poderia reduzir significativamente a atividade do promotor do gene e nível sérico de óxido nítrico. Esse polimorfismo reduz significativamente a atividade do gene promotor da eNOS. Foram coletadas 297 amostras de sangue periférico, de pacientes referenciados ao serviço de cardiologia e cirurgia vascular periférica, da Clínica Angiogyn no município de Goiânia, com diagnóstico prévio de doença aterosclerótica baseados em exame clínico e confirmados através de métodos de imagem (197 amostras) e grupo controle (100 amostras). As amostras coletadas foram submetidas a PCR para verificar presença dos polimorfismos. Os resultados foram comparados utilizando o Teste Qui-Quadrado e Teste G, com o auxílio do software Bioestat (version 5.3; biocistron.blogspot.com/). No presente estudo a frequência do genótipo TC apresentou-se mais frequente. Já no grupo controle a maior frequência foi observada no genótipo TC. Sendo essa diferença não estatisticamente significativa. Fazendo uma relação entre os genótipos TC/TT e CC no grupo caso; TC/TT e CC no grupo controle, obteve-se que essa diferença também não é significativa. Não foi encontrada nenhuma diferença significativa quando analisados os genótipos (TT, TC e CC) associados a variável gênero sexual e tabagismo. Os resultados não foram significativos porque foi utilizado um padrão tradicional, onde normalmente existe o dobro de casos para o número de controles, e também devido à aterosclerose ser uma doença muito comum. Vários trabalhos indicaram que quando o n trabalhado é o dobro de controle em relação ao número de casos, isso levaria a uma melhor estatística epidemiológica. Podemos concluir também que há forte tendência do alelo T, em dose única ou dose dupla, em associação com aterosclerose.

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2018-09-28T14:20:50Z No. of bitstreams: 1 Etiára de Mattos Moraes.pdf: 1135022 bytes, checksum: df104ba47f712207709c121a7e6d2295 (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2018-09-28T14:21:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Etiára de Mattos Moraes.pdf: 1135022 bytes, checksum: df104ba47f712207709c121a7e6d2295 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-28T14:21:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Etiára de Mattos Moraes.pdf: 1135022 bytes, checksum: df104ba47f712207709c121a7e6d2295 (MD5) Previous issue date: 2018 / O colesterol é um componente lipídico importante de todas as membranas celulares e da bainha de mielina, desempenhando um importante papel na integridade sináptica e atividade neural. O colesterol também atua como substrato para a síntese de ácidos biliares no fígado e precursor de hormônios esteroidais. No entanto, tem sido apontada uma ligação entre os níveis plasmáticos elevados de colesterol e o desenvolvimento de lesões ateroscleróticas. A aterosclerose é uma doença inflamatória crônica de origem multifatorial, que acomete a camada íntima de artérias de médio e grande calibres. A formação da placa aterosclerótica inicia-se com a agressão ao endotélio vascular devido a diversos fatores de risco como dislipidemia, hipertensão arterial ou tabagismo. A uva, o vinho e produtos derivados da uva contém grande quantidade de compostos fenólicos que agem como antioxidantes. O consumo desses flavonoides está associado ao risco reduzido de eventos coronários, e a ingestão moderada de vinho tinto inibe a agregação plaquetária. O dano ao receptor de lipoproteína de baixa intensidade aumenta os níveis plasmáticos de LDL-C, resultando em deficiência na depuração do sangue desta lipoproteína. Em vista disso, o objetivo do presente estudo foi investigar os efeitos protetores do vinho tinto Ruby Cabernet (RCR) produzido na cidade de Itaqui-RS contra a dislipidemia, estresse oxidativo e inflamação sistêmica em camundongos hipercolesterolêmicos. Foram utilizados camundongos C57BJ6 do tipo selvagem (90 dias de idade) e com deleção gênica 2 LDLr-/- que foram tratados com o vinho RCR (dose diária de 400 μL por gavagem) durante 90 dias. Após o tratamento com o vinho RCR, os animais foram eutanasiados e o sangue foi coletado para ensaios bioquímicos. Os resultados do presente estudo demonstraram que o vinho RCR tem uma capacidade antioxidante significativa, como revelado por ensaios in vitro. Além disso, o vinho RCR atenuou os seguintes parâmetros bioquímicos alterados nos animais LDLR-/- níveis aumentados de colesterol total, triglicerídeos, lipoproteína de baixa densidade, lipoproteína de baixa densidade oxidada e níveis diminuídos de HDL no sangue. O vinho RCR também aliviou o estresse oxidativo no sangue dos animais LDLr-/-, como revelado pela redução dos níveis de malondialdeído, proteína carbonilada, espécies reativas de oxigênio e aumento dos níveis de glutationa. Os animais LDLr-/- exibiram um aumento acentuado nos níveis do fator nuclear Kappa-B e das citocinas inflamatórias IL-6, IL-1β e TNF-α, e uma redução da citocina anti-inflamatória IL-10. O vinho RCR atenuou essas alterações no plasma sanguíneo. Concluímos que o vinho RCR possui um importante potencial antioxidante in vitro. Além disso, o vinho RCR tem efeitos hipolipemiantes, antioxidantes e anti-inflamatórios em animais LDLr-/-. / Cholesterol is an important lipid component of all cell membranes and the myelin sheath, playing an important role in synaptic integrity and neural activity. Cholesterol also acts as a substrate for the synthesis of bile acids in the liver and precursor of steroidal hormones. However, a link has been identified between elevated plasma cholesterol levels and the development of atherosclerotic lesions. Atherosclerosis is a chronic inflammatory disease of multifactorial origin, which affects the intimate layer of arteries of medium and large calibers. The formation of atherosclerotic plaques begins with aggression to the vascular endothelium due to several risk factors such as dyslipidemia, arterial hypertension or smoking. Grapes, wine and grape products contain large amounts of phenolic compounds that act as antioxidants. Consumption of these flavonoids is associated with reduced risk of coronary events, and moderate red wine intake inhibits platelet aggregation. Low-intensity lipoprotein receptor damage increases plasma LDL-C levels, resulting in deficiency in blood clearance of this lipoprotein. In view of this, the objective of the present study was to investigate the protective effects of Ruby Cabernet red wine (RCR) produced in the city of Itaqui-RS against dyslipidemia, oxidative stress and systemic inflammation in hypercholesterolemic mice. Wild type C57BJ6 mice (90 days old) with a deletion LDLr-/- mice that were treated with RCR wine (daily dose of 400 μL per gavage) for 90 days. After treatment with the RCR wine, the animals were euthanized and blood was collected for biochemical assays. The results of the 4 present study demonstrated that RCR wine has a significant antioxidant capacity as revealed by in vitro assays. In addition, RCR wine attenuated the following altered biochemical parameters in LDLR animals-/- increased levels of total cholesterol, triglycerides, low density lipoprotein, oxidized low density lipoprotein and decreased levels of HDL in the blood. RCR wine also alleviated the oxidative stress in the blood of LDLr-/- animals, as revealed by the reduction of levels of malondialdehyde, carbonylated protein, reactive oxygen species and increased levels of glutathione. The LDLr-/- animals exhibited a marked increase in nuclear Kappa-B factor and inflammatory cytokines IL-6, IL-1β and TNF-α, and a reduction of the anti-inflammatory cytokine IL-10. RCR wine attenuated these changes in blood plasma. We conclude that RCR wine has an important antioxidant potential in vitro. In addition, RCR wine has lipid-lowering, antioxidant and anti-inflammatory effects in LDLr-/- animals.

Orientador: Antonio Wilson Sallum / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-09-11T21:13:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SilvaFilho_WagnerLealSerrae_D.pdf: 6683872 bytes, checksum: e38b27f8f3a3e6219d124e6f14a3afa0 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a interrelação entre a Doença Periodontal e a Doença Aterosclerótica Coronariana Obstrutiva (DACO), em pacientes com indicação de Angioplastia Transluminal Coronária Percutânea (ATCP). Para esse fim, foram selecionados 18 pacientes com DACO e diagnóstico de doença periodontal crônica. Após exame periodontal, foram coletadas amostras de biofilme subgengival nos sítios periodontalmente comprometidos, bem como nos balões utilizados durante o procedimento de Angioplastia para esmagamento da placa aterosclerótica. Em seguida, as amostras foram utilizadas para verificação dos microorganismos presentes, por meio da técnica de amplificação do DNA pela reação em cadeia de polimerase (PCR). As amostras de biofilme subgengival e dos balões foram comparadas entre si e com DNA puro dos patógenos periodontais (Aggregatibacter actinomycetencomitans - Aa, Porphyromonas ginginvalis - Pg, Prevotella intermédia - Pi, Tannerella forsythensis - Tf). Ao final das análises microbiológicas, os resultados detectaram Pg em 11,1% e Tf em 38,9% dos balões de angioplastia. Nenhuma amostra de balão foi positiva para Prevotella intermédia (Pi) e para Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa). Após análise estatística pelo teste McNemar, com nível de significância de 5%, e dentro dos limites deste estudo, pode-se concluir que apesar de terem sido encontradas amostras de dois patógenos periodontais (Porphyromonas gingivalis e Tannerella forsythensis) nos balões de angioplastia e no biofilme subgengival, esta correlação não foi estatisticamente significante; não permitindo a afirmação de que exista associação causal entre a doença periodontal e a doença aterosclerótica coronariana obstrutiva. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the relationship between periodontal disease and obstructive atherosclerotic coronary disease (OACD) in patients with indication for percutaneous transluminal coronary angioplasty (PTCA). Eighteen patients with diagnose of periodontal disease and OACD were selected for this study. After thorough periodontal examination subgengival biofilm samples were collected in periodontal pockets with probing depth _ 5mm. The balloons used to crush the atherosclerotic plaques during the angioplasty procedure were collected. Bacteria found in biofilm and balloons were identified using polymerase chain reaction (PCR) assays. Bacteria from periodontal pockets were compared with the microorganisms detected in the atherosclerotic plaques obtained from the same patient and with the pure DNA of periodontal pathogens (Aggregatibacter actinomycetencomitans - Aa, Porphyromonas ginginvalis - Pg, Prevotella intermédia - Pi, Tannerella forsythensis - Tf). After the microbiological analysis it was observed the presence of Pg in 11.1% of the samples, Tf in 38.9% of the balloons. None of the balloons were positive for the presence of Pi and Aa. After statistic analysis for McNemar test, with significance level of 5%, and within the limits of this study, it can be concluded that even though two periodontal pathogens (Porphyromonas gingivalis e Tannerella forsythensis) were found both in the balloons and subgingival biofilms, the correlation between the samples was not significant, thus not allowing the assertive that there is a causal relationship between periodontal disease and obstructive atherosclerotic coronary disease. / Doutorado / Periodontia / Doutor em Clínica Odontológica

A ativação de Receptores de Hidrocarbonetos de Arila (AhR) é associada ao desenvolvimento de doenças cardiovasculares (DCV), dentre elas a aterogênese. Entretanto, não foi elucidado se a ativação do AhR por compostos/moléculas endógenas influenciaria o desenvolvimento de placas vulneráveis. Diante do exposto, o presente estudo testou a hipótese que a ativação do AhR mediada por compostos/moléculas endógenas contribui para o processo aterogênico e vulnerabilidade da placa aterosclerótica de camundongos nocautes para apoliproteína E (ApoE-/-). Nosso estudo mostrou que um dispositivo cilíndrico (cast), que promove estresse de cisalhamento baixo (ECB) e estresse de cisalhamento oscilatório (ECO), causa o desenvolvimento de placas ateroscleróticas com fenótipos vulnerável e estável de forma tempo dependente, em carótidas de camundongos ApoE-/- submetidos a dieta western. Regiões com ECB, apresentaram aumento na expressão de IL-1?, TNF-?, MMP-12 e do AhR, sugerindo que este receptor contribui com o processo inflamatório em placas vulneráveis, posto que ele regula a expressão gênica de mediadores pró-inflamatórios. O tratamento com CH223191 (antagonista AhR) diminuiu a vulnerabilidade da placa aterosclerótica, pois reduziu a quantidade de macrófagos, lipídeos, a geração de espécies reativas de oxigênio (EROs) e aumentou a quantidade de células de musculo liso (CML) em regiões com ECB. Além disso, o CH223191 reduziu a expressão de IL-1? em placas ateroscleróticas presentes no arco aórtico e a hipercolesterolemia dos camundongos ApoE-/-. Outrossim, nossos achados apontam que o CH223191 evita o prejuízo induzido por oxLDL na vasodilatação da artéria aorta de camundongos C57BL/6J. Em células endoteliais, a ativação do AhR mediada por oxLDL é responsável pela produção de IL-1?, evento bloqueado pelo CH223191. Nossos achados destacam o AhR como alvo promissor na compreensão de DCV e possível alvo terapêutico na aterosclerose. / Aryl hydrocarbon receptor (AhR) activation is associated with the development of cardiovascular diseases, including atherosclerosis. However, it is unknown whether AhR activation by endogenous compounds/molecules plays a role in the development and vulnerability of the atherosclerotic plaque. We hypothesized that AhR activation by endogenous compounds/molecules promotes atherogenesis and contributes to the formation of vulnerable plaques in apolipoprotein E knockout mice (ApoE-/-). A shear stress modifier (cylindrical device referred to as cast) was placed in the carotid arteries of ApoE-/- mice, creating areas of lower shear stress (LSS) and oscillatory shear stress (OSS), and inducing the development of atherosclerotic vulnerable and stable plaques, respectively, in a time-dependent manner. LSS regions exhibited increased expression of IL-1?, TNF-?, MMP-12 and AhR. Considering that AhR activation leads to transcription of proinflammatory markers transcription, it is possible that AhR expression in LSS regions is associated with the inflammatory process. Treatment with an AhR antagonist (CH223191) reduced lipid and macrophage accumulation and increased the smooth muscle cell content in LSS regions. Additionally, CH223191 reduced IL-1? expression in atherosclerotic plaques in the aortic arch from hypercholesterolemic ApoE-/- mice. Furthermore, CH223191 prevented oxLDL-induced vascular dysfunction (reduced ACh vasodilation) in C57BL/6J. In endothelial cells, oxLDL induced IL-1? release by mechanisms dependent on AhR activation, an effect prevented by CH223191. Our findings point to AhR as a possible new therapeutic target in cardiovascular diseases, including atherosclerosis.

A aterosclerose é um processo sistêmico crônico, caracterizado pela presença de lesões, espessamento da parede arterial com acúmulo de lipídeos, e resposta inflamatória e fibroproliferativa. Muitos processos associados à oxidação da LDL, ao aumento de expressão de fatores prótrombóticos, moléculas de adesão próinflamatórias, citocinas e fatores quimiotáticos estão envolvidos na fisiopatologia da doença aterosclerótica. Trabalhos anteriores mostraram a presença de Mycoplasma pneumoniae (Mic) em placas lipídicas vulneráveis, associada à liberação de micropartículas (MPs) capazes de interagir com o ambiente e influenciar o processo aterogênico. Assim, a H&S Ciência e Biotecnologia, desenvolveu o complexo PTCTS que tem em sua composição nanopartículas naturais provenientes de plantas medicinais (PTC) associadas à enzima transialidase (TS) para combater as MPs e o Mic, além de ter efeito antilipemiante e antiaterosclerótico. O presente estudo teve como objetivo verificar os efeitos dos diferentes componentes do PTCTS administrados por via oral em relação à eficácia, toxicidade e mecanismo de ação na terapia antiaterosclerótica em coelhos hipercolesterolêmicos. Foram estudados coelhos da raça Nova Zelândia separados randomicamente em 6 grupos de tratamento: Controle Negativo (CNeg n=6), Controle Positivo (CPos n=6), Partículas orgânicas (PTC n=6), Transialidase (TS n=5), Partículas orgânicas associadas à transialidase (PTCTS n=6), e PTCTS com adição de PDTC (n=6). Os animais foram alimentados com dieta enriquecida com colesterol por doze semanas, exceto o CNeg, e receberam seus respectivos tratamentos durante as últimas seis semanas, concomitantemente à dieta hipercolesterolêmica. Tiveram sangue coletado durante as fases basal, pré e pós tratamento, para avaliação bioquímica do perfil lipídico, transaminases hepáticas e quantificação de MPs associadas a antígenos de Mic e LDLox no soro. Ao fim do experimento, foram sacrificados, e tiveram a aorta colhida em conjunto com o monobloco de órgãos para análises morfométrica, histológica, e imunohistoquímica, de forma a verificarmos os efeitos do PTCTS e seus compostos. O composto PTCTS via oral se mostrou eficaz quanto a eliminação de MPs associadas tanto a antígenos de Mic como de LDLox, e apesar de não ter tido os efeitos antiateroscleróticos e antilipemiantes esperados, reduziu não significativamente a área de placa na porção abdominal da aorta, induziu a aorta ao remodelamento positivo, permitindo um fluxo livre mesmo com uma grande área de placa, e evitando assim a obstrução do vaso. Seus componentes, quando administrados isoladamente tiveram efeitos parciais, as PTC sobre o remodelamento do vaso e redução de placa na aorta abdominal, e a TS sobre a redução do colesterol total, comprovando que a associação de ambos possui atividade mais completa e balanceada. A adição do PDTC ao complexo levou ao efeito oposto, ao inibir a atividade de eliminação de MPs apresentada pelo PTCTS, bem como ao induzir remodelamento negativo dos vasos. Nenhum dos componentes apresentou toxicidade nos órgãos estudados. Os dados encontrados neste trabalho experimental reforçam a teoria infecciosa na patogenia da aterosclerose, bem como a de que MPs originadas de tais microorganismos possam estar induzindo a produção de radicais livres e influenciando a oxidação de lípides, de forma que a remoção de tais patógenos do sangue circulante pode ser um novo caminho terapêutico no tratamento da aterosclerose / Atherosclerosis is a chronic systemic process, characterized by lesions, thickening of the arterial wall with accumulation of lipids, inflammatory and fibroproliferative response. Many processes associated with the oxidation of LDL, increase expression of prothrombotic factors, adhesion molecules, proinflammatory cytokines and chemotactic factors are involved in the pathophysiology of atherosclerosis. Previous works have shown the presence of Mycoplasma pneumoniae (Mic) in vulnerable lipid plaques, associated with the release of microparticles (MPs) able to interact with the environment and influence the atherogenic process. Thus, H&S Science and Biotechnology developed the PTCTS complex, which has in its composition natural nanoparticles from medicinal plants (PTC) associated with transialidase enzyme (TS), to combat MPs and Mic, that together have antilipemiante and antiaterosclerotic effects. This study aimed to determine the effects of different components of PTCTS administered orally regarding the efficacy, toxicity and mechanism of action in antiatherosclerotic therapy in hypercholesterolemic rabbits. It was studied White New Zealand rabbits separated randomly into six treatment groups: Negative Control (CNeg n=6), Positive Control (CPos n=6), organic particles (PTC n=6), transialidase (TS n=5) organic particles attached to transialidase (PTCTS n=6) and PTCTS with addition of PDTC (n=6). The animals were fed with a diet enriched with cholesterol for twelve weeks, except the CNeg, and received their treatments during the last six weeks, concurrently with hypercholesterolemic diet. Blood samples were taken during the baseline, pre and post treatment phases for biochemical evaluation of the lipid profile, liver transaminases and quantification of MPs associated with Mic antigens and oxLDL in the serum. At the end of the experiment they were sacrificed and the aorta was harvested together with the monoblock of organs for morphometric analysis, histology and immunohistochemistry, so we could check the effects of PTCTS and their compounds. The compound PTCTS orally is effective at removing MPs associated with both Mic and oxLDL antigens, and despite not having had the expected antiatherosclerotic and antilipemiantes effects, reduced not significantly plaque area in the abdominal portion of aorta, and induced its ascendant portion to positive remodeling, allowing a free flow even with large plate area, avoiding obstruction of the vessel. Its components when administered alone had partial effects, PTC on the remodeling of the vessel and plaque reduction in the abdominal aorta, and TS on the reduction of total cholesterol, proving that the combination of both has more complete and balanced activity. The addition of PDTC to the complex led to the opposite effect to inhibit MPs scavenging activity displayed by PTCTS as well as to induce negative remodeling of vessels. None of the components presented toxicity in the organs studied. The data found in experimental work reinforce the infectious theory on the pathogenesis of atherosclerosis as well as that originating MPs such microorganisms may be inducing the production of free radicals and oxidation of lipids, so that the removal of such pathogens from circulating blood may be a new therapeutic approach in the treatment of atherosclerosis

Objetivo: A aterosclerose prematura e acelerada tem sido recentemente reconhecida como um fator adicional de dano vascular nos pacientes com Síndrome Antifosfolípide Primária (SAFP). Esses pacientes podem ser beneficiados com o emprego de métodos para detecção precoce de aterosclerose como a Velocidade de Onda de Pulso (VOP) e o Echo-tracking (ET). Esses métodos têm sido reconhecidos pela capacidade de avaliar de forma não-invasiva a progressão da aterosclerose na parede vascular. Portanto, nosso principal objetivo foi avaliar a aterosclerose prematura nesses pacientes com SAFP. Pacientes e Métodos: 27 pacientes do sexo feminino com SAFP definida pelos critérios de Sapporo e 27 pacientes controles pareadas por sexo, idade e índice de massa corpórea foram selecionadas de forma consecutiva. Todas as pacientes sofreram trombose e foram subdivididas de acordo com o sítio vascular: arterial (n=12) e venoso (n=11). Os critérios de exclusão foram: idade > 55 anos, raça negra, hipertensão descontrolada, uso de corticosteróides e estatinas, diabetes, dislipidemia prévia, gravidez, menopausa, outras trombofilias, colagenoses, doenças vasculares de outras etiologias, obesidade definido por Índice de massa corpórea (IMC) >30 m/kg2 e tabagismo. Todas as pacientes foram submetidas à VOP no leito fêmoro-carotídeo (Complior) e echo-tracking pelo Wall Track System no leito carotídeo para avaliação das propriedades funcionais dos vasos. Resultados: Ambos os grupos SAFP e controles não mostraram diferença em relação à idade (41.5 ± 9.3 vs. 41.2 ± 10.2 anos; p=0.92) e IMC (22.7 ± 3.4 vs. 22.6 ± 3.7 kg/m2; p=0.91). Todas as pacientes apresentaram VOP semelhante às controles (p=0.34), o espessamento íntima-média (EIM) foi semelhante nos dois grupos (p=0.29) assim como os demais parâmetros do echo-tracking como o diâmetro carotídeo (p=0.26), a distensibilidade (p=0.92), os coeficientes de complacência (p=0.36) e o módulo elástico (p=0.78). A pressão sistólica (PS) das pacientes estava aumentada em relação às controles (p=0.02). De acordo com o sítio de trombose, as pacientes com eventos arteriais demonstraram um aumento na VOP em relação àquelas com eventos venosos (p=0.01) mesmo com mesmo EIM (p=0.52). Ambos resultados não foram influenciados pela idade ou duração de doença. Os níveis de colesterol total (p=0.002), LDL (p=0.02) e apolipoproteína B (p=0.03) foram mais altos nas pacientes com SAFP com eventos arteriais exclusivos. Na análise multivariada, observamos correlação da VOP com a idade (r=0.584; p=0.001) e com o diâmetro do vaso (DV) (r=0.407; p=0.04). Foi observada uma correlação positiva da VOP com o colesterol total (r=0.507, p=0.01), LDL (r=0.402, p=0.05), e triglicérides (r=0.583, p=0.003). O EIM apresentou correlação direta com o DV (r=0.393; p=0.04) e com a distensibilidade (r=0.373, p=0.05). Conclusão: A aterosclerose na SAFP apresenta curso peculiar e de forma precoce. A VOP foi um método mais adequado para detectar a disfunção vascular secundária à rigidez arterial, visto que, não foram detectadas alterações vasculares funcionais pelo ET. / Objective: Premature and accelerated atherosclerosis has been recently recognized as an additional vascular damage in Primary Antiphospholipid Syndrome (PAPS). These patients could benefit from non-invasive diagnostic methods to detect atherosclerosis as the Pulse Wave Velocity (PWV) and the Echo-Tracking (ET) device. By precise measurement of arterial stiffness, these methods output an indirect way to evaluate the vascular wall lesion progression. Our main objective was to evaluate premature atherosclerosis in PAPS.PATIENTS AND METHODS: 27 female patients with PAPS (Sapporo criteria) and 27 age-, body mass index- and sex-matched controls were consecutively selected. All PAPS patients had previous thrombosis and were subdivided according to the type of vascular exclusive event: arterial (n=12) and venous (n=11). Exclusion criteria were: age >55 years, black race, uncontrolled hypertension, smoking, diabetes, previous dyslipidemia, other thrombophilias, vascular and collagen diseases, corticosteroids and statins use, pregnancy, menopause, and obesity defined as body mass index (BMI)>30 m/kg2. All subjects underwent the PWV in femoral-carotidal bed (Complior) and echo-tracking by a Wall Track System in carotidal bed to analyze vascular wall functional properties. RESULTS: Both groups PAPS and controls did not show any difference regarding age (41.5 ± 9.3 vs. 41.2 ± 10.2 years; p=0.92) and BMI (22.7 ± 3.4 vs. 22.6 ± 3.7 kg/m2; p=0.91). All PAPS patients had PWV values similar to controls (p=0.34). Intima-media thickness (IMT) was also similar between groups (p=0.29) as well as all the other echo tracking parameters such as carotideal diameter (p=0.26), distensibility (p=0.92), compliance coefficients (p=0.36), and elastic modulus (p=0.78) were similar among groups. A higher systolic blood pressure was observed was observed in PAPS patients than controls (p=0.02). According to the site of thrombosis, PAPS patients with exclusive arterial events showed a higher PWV compared to those with venous (p=0.01) but had similar IMT (p=0.52). Both results were not influenced by age or disease duration. Total cholesterol (p=0.002), LDL (p=0.02), and apolipoprotein B (p=0.03) levels were higher in PAPS with exclusive arterial events compared to those with exclusive venous events. Multivariate analysis in PAPS showed that PWV was related to age (r=0.584; p=0.001) and blood vessel diameter (VD) (r=0.407; p=0.04). Moreover, PWV did also positively correlated with total cholesterol (r=0.507, p=0.01), LDL (r=0.402, p=0.05), and triglycerides (r=0.583, p=0.003). IMT also had a positive correlation with VD (r=0.393; p=0.04) and distensibility (r=0.373; p= 0.05). CONCLUSION: Atherosclerosis in PAPS has a peculiar course with an early onset, remarkably in those patients with arterial events. PWV was a sensible method to detect impaired functional vessel related to stiffness since no significant changes were observed in functional vascular properties by Echo- Tracking (ET) device.

O papel do exercício físico na prevenção da doença macrovascular aterosclerótica é atribuído em parte à melhoria no metabolismo de lípides, com evidências para regressão e prevenção no desenvolvimento de aterosclerose. Neste estudo, avaliamos o efeito de 6 semanas de treinamento físico aeróbio (protocolo diário em esteira 15 m/min, 30 min, 5 vezes na semana) sobre o transporte reverso de colesterol (TRC) em camundongos C57BL/6 selvagens e transgênicos para CETP humana (CETP-tg). Estes últimos constituem modelo experimental de TRC que se assemelha aos humanos, pela presença da CETP. O TRC é um sistema antiaterogênico, por meio do qual o colesterol é removido de células periféricas e transportado ao fígado para eliminação na bile e excreção fecal. A metodologia utilizada consistiu na injeção intraperitoneal de macrófagos J774 enriquecidos em LDL-acetilada e 3H-colesterol em animais selvagens e CETP-tg sedentários e treinados, após as 6 semanas de estudo. O perfil lipídico não foi modificado após o treinamento físico, no entanto, apenas no grupo CETP-tg treinado houve aumento na concentração de HDL colesterol ao final do estudo. O treinamento físico aeróbio acelerou o TRC em camundongos selvagens, refletido pela maior recuperação de 3H-colesterol no plasma (após 24 h e 48 h da injeção intraperitoneal) e no fígado (após 48 h), em comparação aos animais selvagens sedentários. Este evento associou-se ao aumento de 60% na expressão dos receptores hepáticos SR-BI, em relação ao grupo sedentário. Nos animais CETP-tg, o treinamento físico aumentou o TRC, com maior recuperação de 3H-colesterol - advindo dos macrófagos - no plasma, fígado e também nas fezes (após 24 h e 48 h), em comparação aos animais transgênicos sedentários. Embora a expressão de SR-BI não tenha sido alterada pelo treinamento físico nos animais CETPtg, observou-se nestes animais aumento na expressão hepática do receptor B-E, contribuindo para a maior remoção de colesterol pelo fígado. Os achados apontam para importante papel do exercício físico aeróbio regular sobre o transporte reverso de colesterol de macrófagos, contribuindo para a prevenção contra a gênese e progressão da aterosclerose. / Regular exercise prevents the development of atherosclerosis. We analyzed the role of a six-week aerobic exercise training program in the macrophage reverse cholesterol transport in wild-type (WT) and in human CETP transgenic (CETP-tg) mice. Animals were randomly assigned to sedentary and trained groups (treadmill 15 m/min, 30-min sessions, 5 sessions per week). Plasma lipids were not modified after training, although HDL-cholesterol concentrations levels increased in trained CETP-tg mice only. Plasma CETP activity was not modified after training. A greater recovery of 3H-cholesterol from J774 macrophages injected into peritoneal cavities of mice was found in plasma and in the liver from exercised WT and CETP animals in comparison to sedentary groups. Exercise training induced a greater excretion of 3H-cholesterol in feces only in the CETP-tg mice. The SR-BI expression in the liver was increased and unchanged in trained WT and CETP-tg mice, respectively. The liver expression of LDL receptor was higher in both groups after training. Alternatively, liver X receptor (LXR) increased only in trained WT mice. Aerobic exercise training improves the macrophage RCT in mice, thereby contributing to the prevention and regression of atherosclerosis. The benefit of exercise on the cholesterol excretion in feces in mice was attained only in the presence of CETP, which elucidates the importance of exercise in the prevention of atherosclerosis in humans.

Tiazolidinadionas (TZDs) são agentes sensibilizadores de insulina que agem por ligação ao receptor gama ativado por proliferador de peroxissomos (PPARγ). Elas têm apresentado efeitos cardioprotetores em humanos e propriedades anti-aterogênicas em modelos animais. Estudos in vitro têm sugerido que esses efeitos anti-aterogênicos da ativação de PPARγ ocorrem por inibição da expressão de genes pro-inflamatórios e por aumentar o efluxo de colesterol via ativação dos receptores LXR-ABCA1. Entretanto, vários efeitos colaterais são associados ao tratamento com as TZDs, tornando necessária a pesquisa por novos compostos desta classe. Neste estudo, 14 novas tiazolidina-2,4- dionas, que são TZDs modificadas por bioisosterismo, foram avaliadas quanto à expressão de fatores aterogênicos e inflamatórios em linhagens de macrófagos J774 e RAW 264.7 e em camundongos com deleção genética para o receptor de LDL (LDLr-/-). Após a avaliação da citotoxicidade em macrófagos, foram eleitas cinco TZDs, denominadas de GQ-11, GQ-97, GQ-177, GQ-145 e LYSO-7. Três destas TZDs (GQ- 145, GQ-177 e LYSO-7) aumentaram significativamente a expressão de RNAm dos fatores de transcrição PPARγ1, PPARγ2 e do receptor CD36, assim como também aumentaram a expressão gênica de ABCA1 em 2.9, 3.5 e 6.7 vezes, respectivamente. Em adição, estas TZDs diminuíram a expressão gênica de iNOS, COX2, VCAM e IL-6 associado a redução na produção de nitritos, mas apenas a LYSO-7 reduziu significativamente a expressão desses genes quando comparada à rosiglitazona (RSG), além de diminuir a expressão da proteína-1 quimiotática para monócitos (MCP-1). No estudo experimental, os camundongos LDLr-/- machos foram alimentados com dieta hipercolesterolêmica por 16 semanas e quatro semanas antes da eutanásia receberam os derivados tiazolidínicos (20 mg/kg/dia) por gavagem. GQ-177 inibiu a progressão da placa aterosclerótica associada à aumento nas concentrações plasmáticas de HDL-C, com elevação na expressão de ABCA1, e redução da via inflamatória CD40-CD40L. LYSO-7 também mostrou inibição da aterogênese associada à redução das concentrações plasmáticas de colesterol total e triacilgliceróis, com diminuição na interação entre CD40-CD40L e expressão de citocinas inflamatórias. A GQ-145 não alterou os níveis plasmáticos dos lipídeos, mas aumentou a expressão de todos os genes pró-aterogênicos e pró-inflamatórios. Adicionalmente, as vias de ativação destas novas TZDs também foram estudadas por ensaio de luciferase, como gene repórter. A GQ-177 induziu ativação de PPARγ e ligação ao seu domínio, enquanto a LYSO-7 estimulou ativação de PPARα e PPARδ. Portanto, conclui-se que as novas TZDs, especialmente a GQ-177 e a LYSO-7, podem apresentar propriedades ateroprotetoras associadas ao transporte reverso de colesterol e aos efeitos antiinflamatórios, e poderiam ser uma alternativa promissora para o tratamento da aterosclerose. Porém, estudos complementares são requeridos para caracterizar as vias de sinalização intracelular, visto que as duas demonstraram ativar diferentes isotipos do fator de transcrição PPAR. / Thiazolidinediones (TZDs) are insulin-sensitizing agents that act by binding to peroxisome proliferator-activated receptor-γ (PPARγ). They have been demonstrated to possess cardioprotective effects in humans and antiatherogenic properties in animal models. In vitro studies have also suggested that these antiatherogenic effects of PPARγ activation occur by inhibiting the inflammatory gene expression and by increasing cholesterol efflux via LXR-ABCA1 activation. However, several side effects are associated with TZDs treatment making necessary the search for new compounds. In this study, 14 new thiazolidine-2,4-diones, modified TZDs by bioisosterism, were tested for aterogenic and inflammtary factors in RAW 264.7 macrophages and in low-density lipoprotein receptor-deficient mice. After the citotoxicity evaluation in RAW 264.7 macrophages the TZDs named GQ-11, GQ-97, GQ-177, GQ-145 e LYSO-7 were selected for this study. Three of these TZDs (GQ-177, GQ-145 and LYSO-7) significantly increased the expression of PPARγ1, PPARγ2 and CD36 mRNA, and enhanced the expression of ABCA1 mRNA in 2.9, 3.5 and 6.7 fold, respectively. Moreover, they also significantly decreased the expression of iNOS, COX2, VCAM and IL-6 mRNA in relation to control, and these results are associated to reduction on nitrits concentration. In addition, LYSO-7 significantly reduced the expression of these genes when compared to rosiglitazone, and decreased expression of MCP1 mRNA. In the experimental study, male LDLr-/- mice were fed an atherogenic diet containing 0.5% cholesterol for 16 weeks, and 4 weeks before euthanasia they received TZDs (20mg/kg/ per day) by gavage. GQ-177 treatment inhibited progression of atherosclerotic plaque associated to increased plasma concentrations of HDL-C, with enhance of ABCA1 expression and reduction on CD40-CD40L interaction. LYSO-7 treatment also showed inhibition of the atherogenesis associated to decreased plasma concentrations of total cholesterol and TAG, with reduction on CD40-CD40L pathway and inflammatory cytokines expression.GQ-145 did not alter the lipid plasma levels and increased the expression of all pro-atherogenic and pro-inflammatory genes. Furthermore, the activation of PPARs has also been studied, by luciferase assay as reporter gene. GQ-177 induced activation of PPARγ, whereas LYSO-7 stimulated activation of PPARα and PPARβ/δ. Altogether, our data suggest that the new TZDs derivatives, specially GQ- 177 and LYSO-7, may have atheroprotective properties associated with the reverse cholesterol transport and anti-inflammatory effects, and could be a promising alternative for the treatment of atherosclerosis. However, further studies are warranted in order to characterize the pathways of intracellular signaling since both have demonstrated to activate different isotypes of PPAR.